專利名稱：洗陰凈洗劑及該洗劑的制造方法
技術領域：
本發(fā)明涉及的是用于治療由各種病菌引起的婦女陰道炎，如陰癢、陰瘡等，抑制陰道微生物群中潛在性致病微生物的中藥制劑。
陰癢、陰瘡是婦科常見病，就已婚婦女的普查中，其患病率達60-80％而診治率只占20％，因此急需一種能夠有效預防、治療陰道疾病的藥物，在《金匱要略》、《醫(yī)宗金鑒》等古籍醫(yī)典中就提出了中草藥治療細菌性、霉菌性、滴蟲性陰道炎的外洗方、散劑、栓劑，如參柏蛇洗劑、滅滴洗劑、二妙虎參煎劑等，但這些方劑的普治效果并非理想。近年來，成都恩威世亨制藥有限公司研制出潔爾陰洗液成為治療此類陰道炎癥的主導藥物，該藥物尤其對需氧菌引起的陰道炎癥有一定的治療效果，據(jù)現(xiàn)代微生物學研究，陰道腔、口腔、鼻腔的感染細菌主要為厭氧菌，其感染率達72％左右，與需氧菌之比為5∶1，因此研制治療病菌性陰道炎癥的藥物，應著重針對厭氧菌的抑制能力，但經(jīng)實驗和臨床證明，潔爾陰洗液不僅對厭氧菌的抑制能力遠低于對需氧菌的抑制能力，而且對真菌性陰道炎無抗菌活性，因此對潔爾陰洗液的治療效果有很大局限，使療程延長，治愈率不高；另外潔爾陰由黃柏、苦參、蛇床子、花椒、艾葉、蒼術、百部、地膚子、菌陳、桅子、獨活等多達十幾味草藥組成配方，藥味多，難免有某味藥的刺激性使患者出現(xiàn)過敏性或毒性反應，而且制藥工序相應復雜，成本高。
本發(fā)明的發(fā)明目的在于提供一種能夠有效抑制各種病菌感 染引起的陰道炎，具有高抗菌活性的陰道外洗方劑。
本發(fā)明的另一發(fā)明目的在于提供一種藥味少、療效高、毒性低的治療陰道炎癥的洗陰凈洗劑。
技術人員在研制過程中是以中醫(yī)治療細菌性、霉菌性、滴蟲性陰癢、陰瘡等陰道疾病的清熱解毒為治則，以女性生殖系統(tǒng)菌群變化為依據(jù)，用最低抑菌濃度為客觀指標對中醫(yī)古籍如《金匱要略》、《婦人良方大全》、《醫(yī)宗金鑒》、《諸病源候論》等中記載有超過一百多個方劑進行篩選，選出44個方劑，統(tǒng)計出單味藥出現(xiàn)頻率最多者18味，對此18味草藥分別用陰道炎致病菌厭氧菌、需氧菌、真菌共18種進行抑菌實驗，從實驗結果中選取抗菌活性強、抗菌譜廣的黃柏、苦參、百部三味藥，上述44個成方中含有這三種草藥的有9個成方，再經(jīng)抗菌實驗、化載組方，得到新的抗菌譜廣、抗菌作用強的中藥方劑。
針對下面含有黃柏、苦參、百部三味藥的四個典型組方進行抗菌活性實驗，其抗菌活性數(shù)據(jù)(MIC mg/ml)比較表如下
實驗表明第四方劑組與其它各組比較有顯著性差異P＜0.001，其抗菌活性最高。因此，本發(fā)明提供的洗陰凈洗劑其配方為黃柏41～43％、苦參33～36％、百部23～25％。
在本方案中，依據(jù)中醫(yī)中藥的“清熱解毒、殺蟲、止癢、化腐生肌”理論，在上述具有抗菌作用配方中增加具有“養(yǎng)五臟、除熱、生陰中肌”作用的中草藥五味子，不僅增強藥劑的抗菌作用，還可改善陰道局部為酸性環(huán)境，使細菌不得于生長，其中藥配方為黃柏23～25％、苦參20～23％、百部14～16％、五味子36～38％。
本發(fā)明提供的洗陰凈洗劑其制藥方法為將上述各味藥切碎前加工后，加溶劑回流1～3次，共回流2～4小時，濾出藥液，減壓濃縮，靜置12--24小時后過濾得到藥劑。
在上述藥劑中加入適量防腐劑，即得到本洗陰凈洗劑。
本發(fā)明方案的洗陰凈洗劑藥味少，藥源豐富，制造方法簡單，且毒性低，療效高，對照潔爾陰洗液對各種標準菌株的抗菌活性及抗菌譜說明其效果
注洗陰凈洗劑濃度為含藥量1g/ml，潔爾陰的批號為9206064，購于沈陽天益堂藥房。
以上實驗數(shù)據(jù)表明洗陰凈洗劑對需氧菌及厭氧菌和真菌的標準菌株均有不同程度的抗菌活性，其MIC值在20～320mg/ml之間，陽性對照藥潔爾陰的MIC值在40～＞320mg/ml之間，兩藥相比本洗陰凈優(yōu)于潔爾陰，尤其是對厭氧菌及真菌的作用更為突出。
上述結論可由下面的測試表進一步證明，本洗陰凈洗劑和潔爾陰洗液對與陰道感染有關的臨床各菌株的MIC90敏感率測試見下表
下面將通過各種動物實驗與潔爾陰洗液對照說明本發(fā)明洗劑的效果1、首先，對豚鼠陰道粘膜用需氧菌和厭氧菌致使混合感染的治療作用試驗實驗用重為500-550g的健康老齡雌性白毛豚鼠，用生理鹽水稀釋的氫化可的松溶液，使其濃度為2mg/ml，用無菌棉球蘸取，置于豚鼠陰道內，每日更換一次，更換一周經(jīng)降低局部免疫力后，用棉球蘸取5％碳酸氫鈉溶液涂擦豚鼠陰道粘膜，直至陰道PH值為7.0左右。
在受試豚鼠陰道粘膜淺層注射混合菌懸液0.1ml(該菌液為5％胃膜素制成的含有1×108個/ml大腸桿菌，1×109個/ml消化球菌懸液)，并用脫脂棉球蘸供試菌液置陰道中，感染三日后，選取陰道粘膜出現(xiàn)紅腫、糜爛的豚鼠，隨機等分三組，分別用洗陰凈洗劑、潔爾陰洗液和生理鹽水(空白對照)沖洗陰道腔，每日一回，連續(xù)沖洗7日，實驗中進行陰道分泌物中的厭氧菌及需氧菌培養(yǎng)分離測試，其結果為組別動物數(shù) 恢復正常 好轉 未好或加劇 治愈率 P(只)(只) (只) (只) (％) (％2)洗陰凈組 20 171285＜0.01*＜0.05**潔爾陰組 20 103750＜0.01*生理鹽水 20 2 117 10組*與生理鹽水組比 **與潔爾陰組比洗陰凈的治愈率高于潔爾陰組，且粘膜糜爛創(chuàng)面愈合時間先于潔爾陰組2-3日，即洗陰凈的化腐生肌作用優(yōu)于潔爾陰。
2、選取體重為500-550g的健康老齡的白色雌性豚鼠進行真菌感染實驗按上述方法，同樣使豚鼠陰道內接受真菌感染至陰道粘膜有黃灰色膜斑塊及乳酪狀物后，隨機等分三組，分別用洗陰凈、潔爾陰和生理鹽水沖洗陰道腔，用藥7日后記錄情況如下組別 動物數(shù) 恢復正常 好轉 未好或加劇 治愈率 P(只) (只)(只)(只) (％) (％2)洗陰凈組20 13 1 6 65 ＜0.01**潔爾陰組20 4 3 13 20 ＞0.05*生理鹽水20 2 1 17 10組洗陰凈組與其他兩組相比，差異非常顯著(P＜0.01)，且治愈時間上先于潔爾陰2-3日。
3、對豚鼠皮膚用需氧菌、厭氧菌致混合感染的治療作用試驗實驗所用體重為250-300g的白色健康豚鼠，雌雄各半，所用菌液為含菌種金黃色葡萄球菌(Saphylococcus anres)含1×108個/ml和脆弱類桿菌(Bacteroide fragilis)1×109個/ml。
在豚鼠背部用脫毛劑脫毛面積為16cm2，24小時后，用無菌砂紙使皮膚至創(chuàng)面出血制成1×1cm2的創(chuàng)面一處，然后用混合菌液0.2ml接種于創(chuàng)面上，覆蓋無菌紗布，3天每天更換一次，選取創(chuàng)面處出現(xiàn)紅腫、糜爛、有炎性滲出物后，隨機等分三組，分別推注創(chuàng)面洗陰凈、潔爾陰和生理鹽水，隔5分鐘再按上法沖洗，連續(xù)三次，再覆蓋無菌紗布，7天中更換一次/每天，在停藥時采血檢查白細胞總數(shù)，其結果為；組別 動物數(shù) 癥狀 白細胞總數(shù)(千/mm3)(x±sd)(只)療效變化(只) 給藥前 停藥時洗陰凈組20 恢復正常 1523.81±1.58 7.39±1.14好轉 3 24.40±1.57 13.74±1.33無效 3 25.75±0.45 24.15±2.50潔爾陰組20 恢復正常 8 24.70±0.61 8.92±1.08好轉 3 24.03±1.43 13.67±0.70無效 9 25.60±1.39 23.61±1.91生理鹽水組 20 好轉 1 21.109.04無效 1924.19±1.45 25.10±2.04實驗結果表明洗陰凈組的治愈率為75％，而潔爾陰組僅為40％，生理鹽水組為0％，在起效時間上洗陰凈組亦優(yōu)于潔爾陰2-3天，創(chuàng)面愈合時間先于潔爾陰組3天，即洗陰凈有明顯的解毒消炎和化腐生肌效果。
4、經(jīng)實驗還證明了，本洗陰凈洗劑與潔爾陰洗劑均有不同程度的滅殺陰道滴蟲的作用，其最低殺蟲濃度分別為5，10mg/ml和10，20mg/ml，表明本洗陰凈洗劑優(yōu)于潔爾陰洗劑一倍。
5、洗陰凈系治療婦女細菌性、霉菌性、滴蟲性陰道炎及外陰、皮膚搔癢的外用中藥洗劑，為探討其止癢作用，進行組胺導致豚鼠皮膚搔癢試驗褐色洗陰凈溶液PH4.5-5.0大劑量原濃度(0.96-1.20(60-70℃))，小劑量組用原濃度稀釋三倍的濃度；鹽酸組織胺批號8605146；鹽酸苯海拉明注射液(天津市和平制藥廠生產(chǎn)批號900722)；潔爾陰批號9207040。
選取體重為320-560g雄性豚鼠，將其后足背脫毛并隨機等分五組，即為生理鹽水、苯海拉明陽性、洗陰凈大劑量、洗陰凈小劑量和潔爾陰五個對照組。豚鼠脫毛后次日開始，早晚各用棉簽在左右后足背部涂藥一次，第三日將脫毛區(qū)擦傷，傷口涂藥一次，十分鐘后，用注射器依次由低濃度到高濃度向豚鼠后足背涂抹組織胺溶液，每次涂藥間隔3分鐘，直至出現(xiàn)舔后足出現(xiàn)搔癢反應為止。計算積累涂組織胺量，作為豚鼠對組胺耐受量，以此為指標，評價藥物止癢作用藥物 動物數(shù)(只)耐受組胺量(X±SD)μgNS9 22.5±17.49苯海拉明 7 43.07±5.79潔爾陰7 17.57±11.18洗陰凈大劑量 9 38.86±10.11洗陰凈小劑量 9 34±11.42實驗表明原濃度洗陰凈外用涂抹豚鼠足背部，能顯著提高豚鼠對組胺的耐受量，抑制組胺所致的皮膚搔癢反應，與苯海拉明15μg的作用相近，而稀釋三倍的洗陰凈及潔爾陰對組織胺所致搔癢反應無抑制作用。
6、用動物對全身搔癢反應實驗本實驗選取右旋糖酐(批號920324)作為致豚鼠全身搔癢劑，其它藥物對照組分別為洗陰凈褐色溶液PH4.5-5.0；鹽酸苯海拉明注射液批號900722；潔爾陰批號9207040；所用動物13-27g雌雄兩性昆明種小鼠，隨機對應上述各組分為五組，灌胃生理鹽水0.2ml/mg，苯海拉明5mg/kg；潔爾陰0.2ml/mg，洗陰凈0.2ml/mg，及稀釋三倍的洗陰凈0.2ml/mg給藥后20分鐘，各鼠分別經(jīng)尾靜脈注射右旋糖酐0.05ml/10g，30分鐘后觀察小鼠搔癢反應，以搔癢發(fā)作次數(shù)及每次反復癢時間累加為評價指標藥物 劑量動物數(shù) 搔癢次數(shù) 搔癢時間(只)(X±SD)次 (X±SD)秒NS ——21 22.76±5.53359.48±129.35苯海拉明 5mg/ml13 8.54±3.10 93.46±42.40潔爾陰 20ml/mg 9 6.84±2.04 70.68±12.77原濃度洗陰凈 20ml/mg 14 15.71±7.64208±129.091/3洗陰凈20ml/mg 13 17.62±6.81263±84.9實驗表明洗陰凈口服能抑制右旋糖酐所致小鼠全身搔癢反應，而且隨劑量增加，抑制作用增強。
綜上各實驗說明，本發(fā)明提供的洗陰凈洗劑不僅抗菌譜廣，而且抗菌活性高，還具有較強的解毒消炎、化腐生肌的作用，彌補了現(xiàn)有治療細菌性、霉菌性和滴蟲性陰道炎的主導藥物--潔爾陰抗厭氧菌能力低和無抑制真菌能力的缺陷，能夠顯著縮短療程，普治效果優(yōu)。
下面通過以下實施例詳細敘述本發(fā)明
本方案的洗陰凈洗劑的配方為黃柏52g 苦參44.4g 百部30g在上述配方中，還可以加入具有“養(yǎng)五臟、清熱、生陰中肌”作用的另一味中草藥五味子，形成最佳配方為黃柏52g苦參44.4g百部30g五味子74g其制藥方法為將黃柏切絲、苦參和百部切片與五味子共同混合，加溶劑回流提取后過濾，將濾液濃縮回收至一定濃度，靜置后得本制劑。在該制造方法中，藥效學研究證明了乙醇提取優(yōu)于水提，因此溶劑選用乙醇溶液。
上述制造方法的各工藝參數(shù)可各設定為乙醇濃度(A)①--40％ ②--60％ ③--60％總乙醇量(為藥材量倍數(shù)B)①--8倍 ②--10倍 ③--12倍總回流時間(C)①--2小時 ②--3小時 ③--4小時總回流次數(shù)(D)①--1次 ②--2次 ③--3次注上述①、②、③所編序號按上述方法將各味藥前處理好后，將以上四種工藝參數(shù)按以下方式組合，并分別測試每組組合的藥液的小蘗堿含量和固體物含量二項指標，采取加權評分的計算方法，得到A B C D 小蘗堿含量固體物含量綜合評分mg/ml g/ml① ① ① ①0.137 0.0447 81.77① ② ② ②0.26 30.0553 92.97① ③ ③ ③0.327 0.0626 100.00② ① ② ③0.200 0.0502 87.51② ② ③ ①0.168 0.0522 87.95② ③ ① ②0.218 0.0528 89.67③ ① ③ ②0.180 0.0468 84.53③ ② ① ③0.283 0.0511 90.63③ ③ ② ①0.129 0.0557 91.93從實驗結果得出最佳工藝條件為A① B③ C③ D③即用40％的藥材量12倍乙醇量，總回流次數(shù)為3次，回流時間共為4小時，但工藝條件過于繁瑣，不適于大批量生產(chǎn)，難以縮短生產(chǎn)周期降低成本，在不影響產(chǎn)量質量的條件下，采用第二實驗組A① B② C② D②的工藝條件，即黃柏、苦參、百部、五味子按量配好混合后，加入藥材量5倍濃度為40％乙醇，回流提取1.5小時后過濾，藥渣中再加入5倍藥材量40％的乙醇，再次回流提取1.5小時，然后過濾，將兩次藥液混合減壓濃縮回收乙醇至相對密度為0,95～1.02(60～70℃)，藥液靜置24小時后過濾，加入適量防腐劑，加水至1000ml，制成濃度為0.2g生藥/ml的洗陰凈洗劑。其防腐劑為苯酚0.1g，苯甲酸0.1g。
權利要求
1.一種洗陰凈洗劑，其特征在于配方為黃柏41～43％ 苦參33～36％ 百部23～25％
2.根據(jù)權利要求1所述的洗陰凈洗劑，其特征在于其配方為黃柏23～25％ 苦參20～23％ 百部14～16％ 五味子36～38％
3.根據(jù)權利要求1或2所述的洗陰凈洗劑，其特征在于其配方為黃柏52g 苦參44.4g 百部30g 五味子74g。
4.權利要求1所述的洗陰凈洗劑的制造方法，其步驟為將黃柏、苦參、百部、五味子前處理混合后，加溶劑回流提取1～3次，共回流2～4小時，濾出的藥液混合，靜置12～24小時后過濾得到藥液。
5.根據(jù)權利要求4所述的制造方法，其特征在于溶劑為濃度40～80％的乙醇。
6.根據(jù)權利要求4或5所述的制造方法，其特征在于用40％的乙醇加入藥材中，回流提取3次，每次加入藥材量的4倍乙醇，共回流4小時，再將過濾后的藥液混合減壓濃縮回收乙醇，靜置24小時后過濾得到藥液。
7.根據(jù)權利要求4或5所述的制造方法，其特征在于用40％的乙醇加入藥材中，回流兩次，每次加入藥材量的5倍，每次回流1.5小時，再將過濾后的藥液混合，減壓濃縮回收乙醇，靜置24小時后得到藥液。
8.根據(jù)權利要求4所述的制造方法，其特征在于靜置藥液過濾后加入防腐劑，其防腐劑為苯酚，苯甲酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及的是治療各種致病微生物引起的陰道炎的治療中藥洗劑，該洗劑是由黃柏、苦參、百部以及具有“養(yǎng)五臟、除熱、生陰中肌”作用的五味子中藥組成，經(jīng)回流、減壓回縮、靜置后得藥液。該洗劑不僅對需氧菌、而且對厭氧菌和真菌都具有很高的抗菌活性，可以治療各種病菌性、滴蟲陰道炎，無副作用。
文檔編號A61P15/00GK1120442SQ94110149
公開日1996年4月17日 申請日期1994年3月22日 優(yōu)先權日1994年3月22日
發(fā)明者趙漢儒 申請人:丹東市中藥飲片廠