專利名稱：新的二環(huán)化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的抑制血小板聚集的二環(huán)化合物，包含所述化合物的藥用組合物以及使用所述化合物的方法。
據(jù)認(rèn)為，血小板聚集主要是以纖維白原受體或GPⅡb-Ⅲa血小板受體復(fù)合體(后者是被稱作integrins的粘連受體中的一員)。為媒介的。已頻繁發(fā)現(xiàn)integrin受體的天然配體是包含Arg-Gly-Asp序列(RGD單一信息氨基酸密碼)。VonWilletrand因子和纖維蛋白原被認(rèn)為是GPⅡb-Ⅲa受體的天然配體，其主要結(jié)構(gòu)為RGD序列。就其功能而言，這些蛋白質(zhì)能夠結(jié)合并交聯(lián)相鄰血小板上的GPⅡb-Ⅲa受體并因此起到聚集血小板的作用。
Fibronection、Vitronection和Thrombospondin是已被證實(shí)與GPⅡb-Ⅲa相結(jié)合的含RGD的蛋白質(zhì)。已在血漿中發(fā)現(xiàn)Fibronection，是細(xì)胞內(nèi)基體中的結(jié)構(gòu)蛋白。結(jié)構(gòu)蛋白與GPⅡb-Ⅲa之間的結(jié)合可能會引起血小板粘附于于受損的血管壁。
與Vitroneetin結(jié)合并含RGD序列的線型或環(huán)狀肽公開于WO89/05150(PCTUS88/04403)。EP0275748公開了與GPⅡb-Ⅲa受體結(jié)合并抑制血小板聚集的線型四肽或六肽和環(huán)狀六肽或八肽。其它的線型或環(huán)狀肽在這里引用作為參考的見EP-A0341915。然而，這類抑制劑的肽狀結(jié)構(gòu)常常在藥物傳遞、代射穩(wěn)定性和選擇性方面產(chǎn)生問題。不是由天然氨基酸序列構(gòu)成的fibrinogen受體抑制劑公開于EP-A0372486、EP-A0381033和EP-A0478363。WO92107568(PCT/US91/08166)公開了fibrinogen受體拮抗劑，它通過形成單環(huán)七元環(huán)結(jié)構(gòu)模似RGD序列列中的結(jié)構(gòu)γ-轉(zhuǎn)角。但仍需要一種新的fibringen受體拮抗劑(例如GPⅡb-Ⅲa蛋白質(zhì)抑制劑)，它們能在體內(nèi)或體外起作用，而且不具有氨基酸序列的肽骨架結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明公開了新的二環(huán)化合物，包括苯并咪唑。這些化合物抑制與GPⅡb-Ⅲa受體的結(jié)合并抑制血小板聚集。
本發(fā)明的一方面是如下式(Ⅰ)所述的包括取代的六元環(huán)與取代的五元環(huán)稠合的二環(huán)化合物。
本發(fā)明也是一種藥物組合物，它用于抑制血小板聚集和血塊形成，它包括式(Ⅰ)的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明還是一種方法，用于抑制需用該方法治療的哺乳動物血小板聚集，該方法包括用有效量的式(Ⅰ)化合物體內(nèi)給藥。
另一方面，本發(fā)明提供一種溶解纖維蛋白治療后抑制哺乳動物動脈或靜脈的再閉合的方法，該方法包括將有效量的纖維蛋白溶解劑和式(Ⅰ)化合物體內(nèi)給藥。本發(fā)明也是治療中風(fēng)、瞬時局部缺血發(fā)作、心肌梗塞或動脈粥樣硬化的方法。
本發(fā)明公開了抑制血小板聚集的二環(huán)化合物，新的二環(huán)化合物包括五元環(huán)稠合芳族六元環(huán)，在六元環(huán)上具有含氮取代基，在五元環(huán)上具有脂族取代基，優(yōu)選含酸性部分的基團(tuán)。五六環(huán)可包含雜原子，例如氮、氧和硫，六元環(huán)可以是碳環(huán)或含至多兩個氮原子。稠合的6-5環(huán)體系據(jù)以為易于與GPⅢb-Ⅲa受體很好地相互作用，并使在六和五元環(huán)上的取代基側(cè)鏈定向，使得它們也可以與受體很好地相互作用。
雖然本發(fā)明者不想發(fā)受到任何特定作用機(jī)制的限制，但據(jù)以為這些化合物能而抑制纖維蛋白原對與血小板結(jié)合的纖維蛋白原受體GPⅢb-Ⅲa的束縛，并可通過假定的RGD結(jié)合點(diǎn)的拮抗作用而與其它粘合蛋白質(zhì)相互作用。
本發(fā)明的化合物是式(Ⅰ)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
其中A1至A3形成任何可接近的取代的五元環(huán)，它可以是飽和的或不飽和的，任選地包含至多兩個選自O(shè)、S和N的雜原子，其中S和N可任選地被氧化;
D1至D4形成任何可接近的取代的六元環(huán)，任選地包含至多兩個氮原子;
R至少是一個選自R7或Q-C1-4烷基、Q-C2-4鏈烯基、Q-C2-4炔基、Q-C3-4氧化鏈烯基或Q-C3-4氧代炔基、Q-C1-4氨基烷基、Q-C3-4氨基鏈烯基或Q-C3-4氨基炔基，任選地被任何可接近的一個或多個R11或R7的結(jié)合所取代;
R＊不存在或?yàn)镠，Q-C1-6烷基、Q-C1-6氧代烷基、Q-C2-6鏈烯基、Q-C3-4氧代鏈烯基、Q-C3-4氧代炔基、Q-C2-4炔基、Q-C3-6環(huán)烷基、Ar或Het，任選地被1個或多個R11取代;
每個Q獨(dú)立地為H、C3-6環(huán)烷基、Het或Ar;
R6為W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)1-U-(CR′2)s-V-;
每個R7獨(dú)立地為-COR8，-COCR′2R9，-C(S)R8，-S(O)mOR′，-S(O)mNR′R″，-PO(OR′)，-PO(OR′)2，-B(OR′)2，-NO2，或四唑基;
每個R8獨(dú)立地為-OR′，-NR′R″，-NR′SO2R′，-NR′OR′，-OCR′2CO(O)R′，或AA;
R9是-OR′，-CN-，-S(O)rR′，-S(O)mNR′2，-C(O)R′，C(O)NR′2，或-CO2R′;
R10為氫、C1-4烷基或-NR′R″;
每個R″獨(dú)立地為H、鹵素、-OR12，-CN，-NR′R12，-NO2，-CF3，CF3S(O)1-，-CO2R′，-CONR′2，Q-C0-6烷基、Q-C1-6氧代烷基、Q-C2-6鏈烯基、Q-C2-6炔基、Q-C2-6烷氧基、Q-C0-6烷氨基或Q-C0-6烷基-S(O)r-;
每個R12獨(dú)立地為R′，-C(O)R′，-C(O)NR′2，-C(O)OR′，-S(O)mR′，或-S(O)mNR′2;
每個R′獨(dú)立地為H、C1-4烷基、C3-7環(huán)烷基-C0-4烷基或Ar-C0-4烷基;
每個R″獨(dú)立地為R′或-C(O)R′;
AA是羧基任選地被保護(hù)的氨基酸U和V不存在或?yàn)镃O，CR′2，C(＝CR′2)，S(O)n，O，NR′，CR′OR′，CR′(OR″)CR′2，CR′2，CR′2CR′(OR″)，C(O)CR′2，CR′2C(O)，CONR′，NR′CO，OC(O)，C(O)O，C(S)O，OC(S)，C(S)NR′，NR′C(S)，S(O)nNR′，NR′S(O)n，N＝N，NR′NR′，NR′CR′2，NR′CR′2，CR′2O，OCR′2，C≡C，或CR′＝CR′，前提條件是U和V不同時不存在;

X不存在，或?yàn)镹＝CR′、C(O)或O;
Y不存在，或?yàn)镾或O;
Z為(CH2)t、Het、Ar或C3-7環(huán)烷基;
每個m獨(dú)立地為1或2;
每個n是獨(dú)立地為0或3;
q是0或3;
每個r獨(dú)立地為0至2;
每個s獨(dú)立地為0至2;
每個t獨(dú)立地為0至2。
本發(fā)明化合物的配位體或藥物前體也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。藥物前體被認(rèn)為是在活體內(nèi)釋放式(Ⅰ)的活性母藥的任何共價鍵送的載體。
本發(fā)明化合物可以有一處或多個手性中心，除非明確指明，本發(fā)明包括每個單獨(dú)的非外消旋化合物，所述化合物可通過常規(guī)技術(shù)合成和溶解。對于具有碳碳雙建的化合物的情況，順(Z)反(E)異構(gòu)體均在本發(fā)明范圍內(nèi)。對于化合物可存在互變異構(gòu)的形式的情況，例如酮-烯醇互變異構(gòu)體，例如 和胍型互變異構(gòu)體，例如 各種互變異構(gòu)形式不管是平衡地存在或是以適當(dāng)取代基R′被鎖定在一種形式，均被以為是包括在本發(fā)明范圍的。在一種情況下取代基的意義與在另一種情況下它的意義或其它取代基的意義無關(guān)，除非特別指明。
對于式(Ⅰ)，優(yōu)選A1是CR1R1′，CR1，NR1，N，O，或S(O)x;
A2是CR2R2′，CR2，或NR2;
A3是CR3R3′，CR3，NR3，N，O，或S(O)x;
D1-D4是CR11，CR6或N;
R是(CR14R15)u-(T)v-(CR14R15)w-R7其中T是CR14R15-CR14R15，CR′＝CR′C≡C或NR′，R14和R15是R′、OR′或NR′R″，只要R14和R15與同一個碳相連時不同時為OR′或NR′R′;
R1-R3和R1′-R3′是R＊或R;
R是W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)s;
X是0至2U、V和W獨(dú)立地為0、1或2。
更優(yōu)選A1是CR1R1′，CR1，NR1，N，O或S;
A2是CR2R2′，NR2或CR2;
A3是CR3R3′，NR3，N，O或S;
D1和D4是CH;
D2或D3是CR6;
R2是R;
R3或R3′是R＊和R6是W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)1-U.
優(yōu)選(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V是CONR′，NR′CO，CH(NR′R″)CONH，CH2CONH，CONR′CH2，CONHCH2，CH2CHOH，CHOHCH2，CONHCHR′CH2，CH2NHCO2CH2，CH2CH2NHCO2，CONHCH2CO，CONHCH2CHOH，CH＝CHCONH，NHCO2CH＝CH，SO2NR′CHR′CH2，或CH＝CH，或CH2CH2.
本發(fā)明的代表性化合物分別由式(Ⅱ)-(Ⅶ)表示 優(yōu)選 A1是CH2，CH，NR″，N，O，或S;A2是CR2或CR2R2′;和A3是CR3R3，CR3，NR3′，N，O，或S.
優(yōu)選 R1和/或R1′不存在或?yàn)?H.
優(yōu)選 R2是R7，-CH2R7，-CH2CH2R7，-CH2CH2CH2R7，-NHCH2R7，或-NHCH2CH2R7. 最優(yōu)選 R7是CO2H.
優(yōu)選 R3不存在或?yàn)?H或-C1-6烷基。 最優(yōu)選 Q是Ar.
優(yōu)選 (CR′R10)1-U-(CR′2)s是CONH或NHCO.
優(yōu)選Z是苯基優(yōu)選 W是R′R″N-，R′R″NC(＝NR′)，或R′R″NC(＝NR′)NR′-，R′R″NCO-，或 其中R′和R″ 優(yōu)選 H.
最優(yōu)選R6是

在一組優(yōu)選化合物中R′不存在;R2是CH2CH2CO2H、CH2CH2CH2CO2H、NHCH2CO2H或NHCH2CO2H;R3是H、CH2-Ar或CH2CH2-Ar;Z是苯基;W是H2N-、H2NC(＝NH)-、H2NCO-、或H2NC(＝NH)NH-;而(CR′R10)1-U-(CR′2)s-V是CH2NHCO、CH(NR′R″)CONH、CONH、N(CH3)CO或NHCO.
本發(fā)明包括下列具體化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，但不限于比[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲?；被鵠苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸;苯并咪唑-2-氨基-N-丙酸;苯并咪唑-2-丙酸;苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸;苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸;
1-N-芐基-[6-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲?；被鵠苯并咪唑-2-丙酸;
1-N-芐基-[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰基氨基]苯并咪唑-2-丙酸;
1-N-苯乙基-[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲?；被鵠苯并咪唑-2-丙酸。
本發(fā)明最優(yōu)選的化合物是[5-(4-氨基亞氨基甲基)-苯甲?；被鵠苯并咪唑-2-丙酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在上面式(Ⅰ)的說明中，優(yōu)選A1至A3中僅一個被R取代，而且D1-D4僅一個被R6取代。W代表能形成氫鏈的含氮基團(tuán)。W優(yōu)選是堿性氮基團(tuán)。R7代表帶有能形成氫鍵或與金屬聚合物非鍵電子對的基團(tuán)。R7優(yōu)選是酸性的。優(yōu)選通過最短分子內(nèi)路徑的10-15個插入共價鍵存在于用以隔開這些基團(tuán)，而基團(tuán)T.U.V和Z和烷基間隔基由q.r.s.u.v.和w表示，均相應(yīng)地選擇。
這里使用在肽和化學(xué)領(lǐng)域常用的縮寫和符號來描述本發(fā)明化合物。通常，氨基酸按IUPAC-IUBJointCommissiononBiochemicalNomenclatuoe見Eur.J.Biochem.，158，9(1984)所述進(jìn)行縮寫。
Arg指精氨酸、Me Arg指Nα-甲基-精氨酸、HArg指高精氨酸、NArg指降精氨酸、(Me)Arg指N′，N″-二甲基精氨酸、(Et2)Arg指N′，N″-二乙基精氨酸，Orn指鳥氨酸。這些自由基是取代基R的適合成分。Nα-取代的這些氨基酸的衍生物也用于本發(fā)明。制備α-取代的衍生物的代表性方法見美國專利申請第4687758號，Cheung等人，Can.J.Chem.，55，906(1977);Freidinger et al.，J.Org.Chem.，48，77，(1982);and Shuman et al.，PEPTIDESPROCEEDINGS OF THE 7TH AMERICAN PEPTIDE SYMPOSIUM，Rich，D.，Gross，E.，Eds，Pierce Chemical Co.，Rockford，Ill.，617(1981)，這里作為參考。
這里所用的C1-4烷基指支鏈或非支鏈的碳鏈，包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和叔丁基。C1-6烷基還包括戊基、正戊基、異戊基、新戊基和己基以及其簡單的脂族異構(gòu)體。C0-4烷基和C0-6烷基還可代表無需烷基出現(xiàn)的情況(即存在一共價鏈)。
這里所用的C2-6鏈烯基指2-6個碳原子的烷基，其中C-C單鍵被C-C雙鏈代替。C2-6鏈烯基包括乙烯、1-丙烯、2-丙烯、1-丁烯、2-丁烯、異丁烯和幾個異構(gòu)的戊烯和己烯。順反異構(gòu)體均包括在內(nèi)。
C2-6炔基指2-6個碳原子的烷基，其中一個C-C單鍵被C-C三鍵代替。C2-6炔基包括乙炔、1-丙炔、2-丙炔、1-丁炔、2-丁炔、3-丁炔和戊炔和己炔的簡單異構(gòu)體。
C1-4氧代烷基指至多4個碳原子的烷基，其中一個CH2被C(O)即羰基代替。取代的甲酰、乙酰、1-丙醛、2-丙酮、3-丙醛、2-丁酮、3-丁酮、1-和4-丁醛是有代表性的。C1-6氧代烷基還包括被羰基取代的五個和六個碳的高級類似物和異構(gòu)體。C3-6氧化鏈烯基和C3-6氧代炔基指C3-6鏈烯基或C3-6炔基中一個CH2基團(tuán)被C(O)基團(tuán)所代替。C3-4氧代鏈烯基包括1-氧代-2-丙烯基、3-氧代-1-丙烯基、2-氧代-3-丁烯基等。
這里使用的C1-4氨基烷基指與氨基相連的1-4個碳原子的烷基。C1-4氨基烷基包括氨基甲基、氨基乙基、氨基丙基和氨基丁基。C3-4鏈烯基和C3-4氨基炔基指與氨基相連的C3-4炔基或C3-4鏈烯基。Q-C1-4氨基烷基等指任何C-H鍵位置均被C-Q鏈取代的C1-4氨基烷基。
C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、C1-4氨基烷或C1-6氧代烷基上的取代基例如R或R可以是任何能形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的原子，可通過常常規(guī)合成技術(shù)得到。
Q-C1-6烷基指任何位置的C-H鏈均被C-Q鏈取代的C1-6烷基。Q-C2-6鏈烯基和Q-C2-6炔基與C2-6鏈烯基和C2-6炔基有著相似的意義。
這里所用的Ar或芳基指苯基或萘基，或被1至3個R12基團(tuán)取代的苯基或萘基。具體講R11可以是C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、三氟代烷基、OH、Cl、Br或I。
Het，即雜芳基，指可選地被取代的五元或六元芳環(huán)，或含有1至3個選自氮、氧和硫的雜原子的九元或十元雜環(huán)，它們是穩(wěn)定的并可通過常規(guī)化學(xué)合成方法得到的。雜環(huán)的例子是咪唑、苯并咪唑、吡咯、吲哚、吡啶基、喹啉、苯并呋喃基、呋喃基、苯并吡喃基、苯并噻吩或噻吩。可通過化學(xué)合成得到并且穩(wěn)定的Het環(huán)上的至多3個選自R11的取代基的可接近的結(jié)合均在本發(fā)明范圍內(nèi)。
C3-7環(huán)烷基指可任選地被取代的3至7個碳原子的碳環(huán)體系，它可含有至多兩個不飽和C-C鍵。C3-7環(huán)烷基的典型實(shí)例是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基和環(huán)庚基?？赏ㄟ^常規(guī)化學(xué)成方法得到的穩(wěn)定的環(huán)烷基的上至多3個取代基(例如選自R11)的任何結(jié)合均本發(fā)明范圍內(nèi)。
任何可接近的取代的五元環(huán)這里指具有如下特點(diǎn)的任何飽和不飽和的五元環(huán)(ⅰ)有至多3個取代基，例如R或R＊，其中取代若可存在于任何原子或雜原子上，只要能得到穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，(ⅱ)包含至多兩個選自N，O和S的基團(tuán)的雜原子，其中S和N可任選地被氧化，(ⅲ)穩(wěn)定的并可由化學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員合成的，以兩個相鄰環(huán)上碳原子與苯基、吡啶基、吡嗪基、噠嗪基或嘧啶基相稠合的形式存在。典型的可接近的五元環(huán)是常用的飽和或不飽和環(huán)，例如環(huán)戊烷、環(huán)戊烯、呋喃、噻吩咪唑、吡咯、噻唑和噁唑。
任何可接近的取代的六元環(huán)這里指不飽和的(例如芳族的)六元環(huán)，它具有如下特點(diǎn)(ⅰ)具有1至3個取代基，例如選自R6，(ⅱ)可選地包含至多丙個氮原子，(ⅲ)通過兩個相鄰的碳原子與任何可接近的取代的五元環(huán)相稠合，(ⅳ)穩(wěn)定的并可由化學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員制備的?？山咏牧h(huán)的典型例子是苯基、吡啶基、吡嗪基、噠嗪基或嘧啶基環(huán)。通過可接近的六元環(huán)和五元環(huán)結(jié)合而形成的代表性二環(huán)是茚、異茚、苯并呋喃、異苯并呋喃、苯并噻吩、異苯并噻吩、吲哚、假吲哚、異吲哚、1，5-吡啶、異吲唑、吲哚并惡嗪、苯并惡唑、氨茴內(nèi)酐、苯并噻唑和嘌呤。苯基是優(yōu)選的可接近的六元環(huán)，咪唑和吡咯是優(yōu)選的可接近五元環(huán)。這樣由可接近的六元環(huán)和五元環(huán)結(jié)合成的優(yōu)選的二環(huán)是苯并咪唑和吲哚。
應(yīng)該理解，就A1-A3、CR1R1-CR3R3′和NR′NR3分別是飽合SP3碳和氮原子的而言，它們可與相鄰環(huán)原子單鏈相連;CR1R1′-CR3R3′也可以代表SP2碳原子，還應(yīng)進(jìn)一步理解，就A1-A3、CR1-CR3和N′而言，它們可代表不飽和SP2碳或氮原子，它們可與環(huán)中相鄰原子以橋環(huán)雙鍵相連，只要這種排列生成穩(wěn)定的化合物。
這里使用的 指氮雜環(huán)，它們可以是飽和的或不飽和穩(wěn)定的五元、六元或七元單元，包含至多3個氮原子或含有一個氮原子和一個選自氧和硫的雜原子，它們可在任何原子上被取代，只要能得到穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，其中氮雜原子可以是任選地季銨化的。 的代表性實(shí)例是吡咯啉、吡咯烷、咪唑、哌嗪、嗎啉、吡啶、四氫吡啶、四氫和六氫氮雜卓。具體地講， 可以是吡咯烷基、哌啶基、四氫吡啶基或哌啶基。
AA這里指羧基可選地被保護(hù)的氨基酸，其中氨基酸可以是任一種天然氨基酸或青霉胺。未保護(hù)的羧基是游離羧基。羧基的保護(hù)基團(tuán)是酯或酰胺，它們例如由羧基的OH被R8取代而形成。
C(O)指碳氧雙鍵(例如羧基)，C(S)指碳硫雙鍵(例如硫羰基)。
t-Bu指叔丁基。Boe指叔丁氧羰基，F(xiàn)moe指芴基甲氧羰基，Ph指苯基、Cbz指芐氧碳基、BrZ指鄰溴芐氧碳基、ClZ指鄰氯芐氧羰基、Bzl指芐基，4-MBzl指4-甲基芐基，Me指甲基，Et指乙基，Ac指乙酰基，Alk指C烷基，Nph指1-或2-萘基，CHex指環(huán)己基。MeArg指N-甲基精氨酸。
DCC指二環(huán)己基碳化二亞胺，DMAP指二甲氨基吡啶，DIFA指二異丙基乙胺，EDC指N-乙基-N′(二甲基氨基丙基)碳化二亞胺。HOBT指1-羧基苯并噻唑。THF指四氫呋喃，DIEA指二異丙基乙胺，DMF指二甲基甲酰胺，NBS指N-溴代琥珀酰亞胺，Pd/C指鈀/碳催化劑，PPA指1-丙膦酸環(huán)酐，DPPA指二苯基磷?；B氮化物，BOP指苯并三唑-1基氧-三(二甲氨基)鏻六氟磷酸鹽，HF指氫氟酸，TEA指三乙胺，TFA指三氟乙酸，PCC指氯鉻酸吡啶鎓。
式(Ⅰ)的化合物通過是由式(Ⅸ)的化合物與式(Ⅹ)的化合物反應(yīng)并隨后除去保護(hù)基團(tuán)并任選地生成藥物上可接受的鹽。
其中D1-D4和A1-A3、R和R＊如式(Ⅰ)中定義，其反應(yīng)活性官能團(tuán)被保護(hù);
L1和L2是能反應(yīng)生成鍵合的-(CR1R10)r-U-(CR′2)s-V-的官能團(tuán);
R6″是W-(CR′2)q-Z和與L2相連的(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V-的任何部分，其反應(yīng)活性基團(tuán)被保護(hù)。
很顯然，L1和L2的完全相同依賴于成鍵位置。制備-(CR1R10)r-U-(CR′2)s-V鏈的通用方法例如見EP-A376486和EP-A0381033和EP-A0478363，這里引用作為參考。
例如，如果V是CONH，L1可以是-NH2，L2可以是OH(作為酸)或Cl(作為酰氯)，R6″可以是W-(CR′2)q-Z-(CR1R10)r-U-(CR′2)s-C(O)，官能團(tuán)可任選地被保護(hù)。例如，R6″可以是(芐氧碳基-脒基)苯甲酸基-或(Nα-Boc，Nguan-Tos)精氨酰基。當(dāng)L2是OH時，使用偶合劑。
類似地，如果V是NHCO，則L1可以是-CO2H或CO-Cl，L2可以是-NH2，R6″可以是W-(CR′2)q-Z(CR′R10)r-U-(CR′2)s。例如R6″可以是(芐氧碳基-脒基)苯基、(芐氧碳基氨基)。甲芐基或6-(芐氧羰基氨基)己基。
V是NHSO2，L1可以是SO2Cl，L2可以是-NH2，R6″可以如上所述。V是SO2NH，L1可以是-NH2，L2可以是SO2Cl。制備這類磺酰氯的方法例如見J.Org.Chem，23，1257(1958)所述。
如果V是CH＝CH，L1可以是-CHO，L2可以是CH＝P-Ph3，R6可以是W-(CR′2)q-Z(CR1R10)r-U-(CR′2)s。
V是CH2CH2的化合物可由適當(dāng)保護(hù)的V是CH＝CH的化合物還原得到。
V是CH2O、CH2N或L1可以分別是-OH、-NH或-;L2可以是-Br;R6″可以是W-(CR′2)q-Z(CR1R10)r-U-(CR′2)s。例如R6″可以是(芐氧碳基氨基)-甲芐基-或2-(N-芐基-4-哌啶基)-乙基。類似地U或V是OCH2、NR7CH2或L1可以是-CH2Br，L2分別是-OH、-NH或一。
V是CHCHCH2的化合物可由適當(dāng)保護(hù)的V是CH＝CH的化合物按J.Org.Chem.，54，1354(1989)中描述的方法制備。
V是CH2CHOH的化合物可由適當(dāng)保護(hù)的V是CH＝CH的化合物按Tet.Lett.，31，231(1990)所描述方法通過硼氫化和堿性氧化制備。
A1和A3是氮，并且五元環(huán)不飽和的式(Ⅸ)的化合物是苯并咪唑類，可由反應(yīng)路線Ⅰ-Ⅲ所述通用方法制備。A1是碳，A3是氮，并且五元環(huán)是不飽和的式(Ⅸ)的化合物是吲哚類。這些化合物物中由路線Ⅳ所述方法制備。A1是氮，A3是氧或硫，并且五元環(huán)不飽和的式(Ⅸ)的化合物分別是苯并噁唑和苯并噻唑類，可由Nestor等在J.Med.Chem.，27∶320-325(1984)中詳述的方法制備。將苯并惡唑或苯并噻唑轉(zhuǎn)化為式(Ⅰ)化合物是使用下面制備式(Ⅰ)苯并咪唑和吲哚的方法進(jìn)行的。在反應(yīng)路線中，R1″-R7″指R1-R7或其適當(dāng)前體，其中按先有技術(shù)對官能團(tuán)進(jìn)行保護(hù)。
反應(yīng)路線Ⅰ
反應(yīng)路線Ⅰ提供了制備A1和A3是氮，A2是CR2的化合物的方法。通常，該合成是以取代的1，2-二氨基苯化合物并始的。對于(CR1R10)r-U-(CR2)s-V-是CONR′-的化合物，二氨基苯起始物一步被硝基取代。該化合物與適當(dāng)取代的異氰酸酯(例如異氰酸根合丙酸甲酸或異氰酸根合乙酸甲酯)或適當(dāng)取代的羧酸化合物(合如琥珀酸單甲酯)反應(yīng)得到引入R2取代基的稠合的6-5苯并咪唑環(huán)體系。在例如鈀/碳催化劑存在下，在乙酸介質(zhì)中(例如乙酸/甲酸(1∶1)使硝基化合物例如與氫反應(yīng)，生成相應(yīng)的氨基化合物。氨基與式W-(CR′2)q-Z-CO2H的羧酸(例如4-(Cbz-氨基亞氨基甲基)苯甲酸或4-(Boc-氨基甲基)苯甲酸的縮合反應(yīng)在酰胺化劑存在下(例如在N-乙基-N′(二甲基氨基丙基)碳化二亞胺和1-羥基并噻唑)和堿(例如二異丙基乙基胺)在適當(dāng)溶劑(例如二甲基甲酰胺中)進(jìn)行。保持性基團(tuán)(例如氨基或羧基的保護(hù)基)可通過本領(lǐng)域已知的方法選擇性地除去。例如氮原子上的Cbz基團(tuán)可通過在催化劑(例如鈀/碳)存在下，在酸性介質(zhì)(例如乙酸/甲醇)中的氫化除去，氮原子上的Boc基團(tuán)和/或羧酸上的酯基用酸例如回流乙酸水溶液除去。
反應(yīng)路線Ⅱ提供了制備A1和A3是氮，A2是CR2，(CR1R10)r-U-(CR′2)s-V-是NR′CO-的化合物方法。按照該反應(yīng)路線，被羧酸取代的1，2-二氨基苯化合物與適當(dāng)取代的異氰酸酯反應(yīng)得到R2-取代的苯并咪唑化合物。然后使用到例如回流的亞硫酰氯將羧酸基團(tuán)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酰氯，然后在堿(例如三乙胺)存在下，在適當(dāng)溶劑(例如二氯甲烷和二甲基甲酰胺)中將酰氯與式W-(CR′2)q-Z-NH2(例如4-(Cbz-氨基亞氨基甲基)苯胺)反應(yīng)。用本領(lǐng)域已知方法和前已敘述方法除去氨基和羧基保護(hù)基。
反應(yīng)路線Ⅲ提供了制備A1是N，A2是CR2，A3是NR3，(CR1R10)-U-(R2)s-V-是CONR′-化合物。按照核反應(yīng)路線，反應(yīng)路線Ⅰ中式2苯并咪唑化合物R3取代的鹵化物(例如芐基溴)，在堿(例如氫化鈉)存在下，在適當(dāng)溶劑(例如二甲基甲酰胺)存在下反應(yīng)。然后按反應(yīng)路線Ⅰ式2至4所述，將三取代的咪唑轉(zhuǎn)化為式(Ⅰ)的化合物。
式(Ⅳ)提供了A1是碳，A2是CR2，A3是氮，(CR1R10)r-U-(CR′2)s-V-是NR′CO化合物的制備方法。按照該方法，使用(例如一水合肼)，在還原劑(例如濕銠碳)存在下，在適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃)中將硝基苯甲酸酸(例如4-硝基苯甲酸芐酯)的硝基轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的羥氨基團(tuán)。羧氨基與R2取代的?；鵐eldrum酸(Meldrum酸是2，2-二甲基-1，3-二氧六環(huán)-4，6-二酮)在適當(dāng)溶劑(例如己腈)中反應(yīng)得到N-乙酰乙?；腘-苯基羥胺中間產(chǎn)物。由該中間產(chǎn)物，使用例如2，2′)偶氮二異丁腈(AIBN)，在適當(dāng)去氧化劑(例如二甲苯)中，制備R2取代的羧基吲哚。吲哚羧酸基上的酯基保護(hù)基通過常規(guī)方法除去，例如當(dāng)存在芐基酯時，通過在適當(dāng)催化劑(例如鈀/碳)存在下氫化。式(Ⅰ)化合物制方法詳見反應(yīng)路線Ⅱ，式6至8。
這里使用的偶合劑指可用于形成鈦鏈。典型的偶合方法使用碳化二亞胺、活化氫化物和酯和酰鹵化物。EDC、DCC、DPPA、PPA、BOP試劑。N-羥基琥珀酰亞胺和草酰氧是常用試劑。
形成鈦鏈的偶合方法是本領(lǐng)域已知的。肽合成一般方法由Bode-shky等人提出THEPRACTICEOFPEPTIDESYNTHESIS，Springer-Verlag，Berlin，1984，Alietal.inJ.Med.Chem.，29，984(1986)andJ.Med.Chem.，30，2291(1987)是一般性技術(shù)說明，在這里引用作參考。
使用形成酰胺鍵的常用方法來進(jìn)行形成酰胺或鈦鍵的溶液合成。一般來講，胺或苯胺通過其游離氨基團(tuán)適當(dāng)?shù)奶蓟啺放己蟿?，例如N，N′-二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)，任選地在催化劑例如1-羥基苯并噻唑(HOBT)和二甲氨基吡啶(DMAP)存在偶合到適當(dāng)?shù)聂人岬孜锷?。其它方法，例如活化脂、酸酐或酰鹵的形成，適當(dāng)保護(hù)的酸底物的游離羧基的形成，然后與適當(dāng)保護(hù)的胺的游離胺反應(yīng)，任選地在堿存在下進(jìn)行也是合適的。例如將保護(hù)的Boc-氨基酸或Cbz-脒基苯甲酸在無水溶劑(例如二氯甲烷或四氫呋喃(THF)中)，在堿(例如N-甲基嗎啉、DMAP或三乙胺)存在下，用氯甲酸異丁酯反應(yīng)形成“活化酸酐”，隨后與第二種保護(hù)的氨基酸或苯胺的游離胺反應(yīng)。
式(Ⅹ)的化合物通過本領(lǐng)域已知的常規(guī)的方法由市售的材料制得。W是可選地通過烷基與Z相連的堿性官能團(tuán)，在合成R6時被保護(hù)，或在-(CR1R10)r-U-(CR′2)s-V-鍵形成后引入到分子中。例如，W是適當(dāng)取代的R′R″N-，R″R′NC(＝NR′)，R′2N(R13)C＝N-，R″N＝(R13)C＝NR′-，R′2N(R′2N)C＝N-或R″R′N(R′N＝)C-NR′，的式(Ⅹ)或式(Ⅰ)的化合物通過EP-A 0372486、EP-A 0381033或EP-A 0478363所公開的常規(guī)方法制得，這里將這幾篇專利引作參考。
W是 的式(Ⅹ)的化合物可通過特別是EP-A0478363中所公開的方法制備的。
W是R′2N(R′2N)C＝N-X-或R″R′N(R′N＝)C-NR′-X-，X是0的化合物通過特別是J.Org.Chem.，51，5047(1986)方法制備。
W是R′2N(R′2N)C＝N-X-或R″R′N(R′N＝)C-NR′-X-，X是N＝CR′的化合物可通過特別是美國專利3714253和Eur.J.Med.Chem.-Chim.Ther.，20，25(1985)所公開的方法制備。
W是R′2N(R′2N)C＝N-X-或R″R′N(R′N＝)C-NR′-X-，X是C(O)的化合物可通過特別是美國專利申請3714253和Can.J.Chem.，43，3103(1965)所公開的方法制備。
W是R′ONR′C(＝NR′)-的化合物可通過特別是J.Het.Chem.，16，1063(1979)或J.Het.Chem.，26，125(1989)所公開的方法制備。
W是R2NR′NC(＝NR′)-的化合物通過包括Syn.，583(1974)所公開了的方法在內(nèi)的常規(guī)方法制備。
W是R′R″NR′M-的化合物可通過特別是J.Prakt.Chem.，36，29(1967)所公開的方法制備。
W是R′R″NR′NCO-的化合物可通過Bull.Chem.Soc.Jpn，43，2257(1970)所公開的方法制備。
W是R″R′NC(＝NR′)Y，且Y是S的化合物通過特別是Chem.Lett.，1379(1986)所公開的方法制備。
W是R′R″NC(＝NR′)Y，且Y是O的式(Ⅹ)或式(Ⅰ)的可通過包括日本專利2022151所公開的方法在內(nèi)的常規(guī)方法制備。
每個合成生成物的側(cè)鏈的反應(yīng)活性官能團(tuán)按本領(lǐng)域已知的方法合適地予以保護(hù)。合適的保護(hù)基團(tuán)見Green，PROTECTIVEGROUPSINORGA-NICCHEMISTRY，JohnWileyandSons，NewYork，1981所述。例如可使用Boc、Cbz、鄰苯二甲?；騀moc保護(hù)氨基或脒基。優(yōu)選用Boc基保護(hù)α-氨基?？墒褂肁t-Bu、CHex或芐基酯制備羧基側(cè)鏈。使用芐基或適當(dāng)取代的芐基(例如4-甲氧基-芐基或2，4-二甲氧基-芐基)來保護(hù)巰基或羧基?？墒褂眉妆交酋；Ｗo(hù)咪唑基，使用甲基苯磺酰基或硝基保護(hù)胍基。可使用芐氧羰基或芐基保護(hù)羥基或氨基。合適取代的芐氧羰基或芐基保護(hù)基是鄰位和/或?qū)ξ挥寐?、溴、硝基或甲基取代的基團(tuán)、并將合適取代的芐氧羰基或芐基用于改進(jìn)保護(hù)基團(tuán)的反應(yīng)活性。除了Boc基團(tuán)以外，最適宜的氨基保護(hù)是不會被溫和的酸處理所除去的保護(hù)基。這此保護(hù)基通過本領(lǐng)域已知的催化氫化，液氨中的鈉處理或HF處理而被除去。
氨基，特別是二環(huán)體系的六元環(huán)上的氨基的改性可通過本領(lǐng)域公知的烷基化、磺酰化、氰化或酰基化而寬成。
按常規(guī)方法，在母體化合物的適當(dāng)溶液中在過量的酸，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、馬來酸、琥珀酸或甲磺酸存在下列制備式(Ⅰ)的酸加成鹽。特別有用的是乙酸鹽形式。某些形成內(nèi)鹽或兩性離子的化合物也是可以接受的。通過用過量含適當(dāng)陽離子的堿性試劑(例如氫氧化物、碳酸鹽或醇鹽或用合適的有機(jī)胺處理母體化合物，可制備陽離子鹽。在藥學(xué)上可接受的鹽中諸如Li+、La+、K+、Ca++、Mg++和NH+4陽離子是特別優(yōu)選的陽離子。
本發(fā)明提供包含式(Ⅰ)化合物及藥學(xué)上可接受載體的藥用組合物。因此，式(Ⅰ)化合物可用于制藥。如上文所述制備的式(Ⅰ)化合物的藥用組合物可制成溶液和凍干粉供腸道外給藥用。粉末可以在使用前加入適當(dāng)?shù)南♂寗┗蚱渌帉W(xué)上可接受的載體臨時配制。液體制劑可以是緩沖液，等滲液、水溶液。適當(dāng)?shù)南♂寗┑睦邮浅Ｓ玫牡葷B鹽水溶液，標(biāo)準(zhǔn)5%葡萄糖水溶液或乙酸鈉或乙酸銨緩沖液。這樣的制劑特別適用于腸道外給藥，但也可用于口服給藥或裝進(jìn)計(jì)量劑量吸入器或噴霧器供吸入用。加入賦形劑如聚乙烯吡咯烷酮、明膠、羥基纖維素、阿拉伯膠、聚乙二醇、甘露醇、氯化鈉或檸檬酸鈉是合乎需要的。
或者，可將這引起化合物包囊、制片或制成乳液或糖漿的形式供口服給藥?？杉尤胨帉W(xué)上可接受的固體或液體載體增強(qiáng)或穩(wěn)定組合物，或者方便組合物的制備。固體載體包括淀粉、乳糖、二水合硫酸鈣、石膏粉、硬脂酸鎂或硬脂酸、滑石粉、果膠、阿拉伯膠、瓊脂或明膠。液體載體包括糖漿、花生油、橄欖油、鹽水和水。載體還可以包括緩釋材料如甘油-硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯，它們可單獨(dú)或與蠟混合使用。固體載體的量是可變的，但優(yōu)選每劑量單元約20mg至約1g之間。藥物制劑是按照常規(guī)制藥技術(shù)制造的。所述技術(shù)包括研磨、混合、制粒和必要時壓制成片;或研磨、混合并填充成硬明膠膠囊。當(dāng)使用液體載體時，制劑將是糖漿、酏劑、乳劑或水性或非水性混懸劑的形式。這樣的液體制劑可直接口服給藥或裝入軟明膠膠囊。
就直腸給藥而言，本發(fā)明化合物也可與椰子油、甘油、明膠或聚乙二醇之類的賦形劑結(jié)合模制成成栓劑。
本發(fā)明還提供抑制哺乳物尤其是人的血小板聚集和凝塊的方法，它包括體內(nèi)給予式(Ⅰ)肽和藥學(xué)上可接受的載體。所沿療的適當(dāng)癥包括急性心肌梗塞(AMI)、深靜脈血栓形成、肺栓塞、分割性無尿、短暫局部缺血發(fā)作(TIA)、中風(fēng)和其它與梗塞有關(guān)的疾病，和不穩(wěn)定心絞痛。高聚集力的慢性或急性狀態(tài)對該治療易于產(chǎn)生反應(yīng)。所述狀態(tài)的例子有散布的血管內(nèi)凝固(DIC)、敗血癥、外科或感染性休克、手術(shù)后和產(chǎn)后創(chuàng)傷、心肺通道外科、不相容輸血、胎盤早期脫離、血栓形血小板減少性紫癜(TTP)、蛇毒和免疫疾病。此外，本發(fā)明化合物可用于防止疾病轉(zhuǎn)移的方法中。防治真菌或細(xì)菌感染的方法中，誘發(fā)免疫興奮，以及防治骨吸收是因素之一的疾病的方法中。
本發(fā)明化合物可口服或腸道外給予患者，其方式應(yīng)使得血漿中藥物濃度足以抑制血小板聚集或其它適應(yīng)癥。包含本發(fā)明化合物的藥用組合物的給藥劑量在約0.2-50mg/kg之間，給藥方式應(yīng)與患者的病情相適應(yīng)。就緊急治療而言，優(yōu)選腸道外給藥。就持續(xù)性高聚集力狀態(tài)而言，盡管肌內(nèi)藥團(tuán)注射可能就足夠了，但最有效的方法是靜脈輸注化合物的5%葡萄糖水或標(biāo)準(zhǔn)鹽水溶液。
對于慢性但不嚴(yán)重的血小板高聚集力狀態(tài)，口服膠囊或片劑、或藥團(tuán)肌內(nèi)注射是適宜的。本發(fā)明化合物每天給藥1-4次，劑量約為0.4-50mg/kg以達(dá)到每天約0.4-200mg/kg的總?cè)談┝俊?br> 本發(fā)明還提供抑制纖維蛋白溶解治療后動脈或靜脈再閉鎖的方法，它包括體內(nèi)給予式(Ⅰ)化合物和纖維蛋白溶解劑。我們發(fā)現(xiàn)，在纖維蛋白溶解治療中給予某些化合物可完全防止再閉鎖或者可推遲再閉鎖的時間。
在本發(fā)明上下文中，術(shù)語“纖維蛋白溶解劑”是指任何直接或間接引起纖維蛋白血塊溶解的天然或合成的化合物。纖維蛋白溶酶原是一類公知的纖維蛋白溶解劑?？捎玫睦w維蛋白溶酶原激活劑包括例如anistreplase、尿激酶(UK)、前尿激酶(pUK)、鏈激酶(SK)、組織纖維蛋白溶酶原激活劑(tPA)和保持纖維蛋血溶酶原激活劑活性的其突變體或變體，例如被化學(xué)改性后的變體，或者加進(jìn)、去除或取代了一種或多種氨基酸后的變體，或者加進(jìn)、去除或改變一個或多個功能區(qū)(例如將纖維蛋白溶酶原激活劑與另一纖維蛋白溶酶原激活劑的纖維蛋白結(jié)合區(qū)或纖維蛋白的結(jié)合分子相結(jié)合)后的變體。其它說明性變體包括一處或多處糖基化部位被改變的tPA分子。纖維蛋白溶酶原激活劑中，優(yōu)選的是這樣的tPA變體其中生長因子區(qū)中主氨基酸序列被改變以增加纖維所白溶酶原激活劑的血清半衰期。tPA生成因子變體被公開于例如Robinson等人的EP-A0297589和Bronne等人的EP-A0240334。其它變體包括雜化蛋白質(zhì)，例如EP0028489，EP0155387和EP0297882中公開的那些，上述文獻(xiàn)均被本文引為參考文獻(xiàn)。Anistreplase是本發(fā)明優(yōu)先選用的雜化蛋白質(zhì)。纖維蛋白溶解劑可從天然來源分離得到但通常按基因工程的傳統(tǒng)方法制造。
tPA，SK，UK，和pUK的可用制劑被公開于例如EP-A0211592，EP-A0092182和美國專利4，568，543中。上述文獻(xiàn)均被本文引作參考文獻(xiàn)。通常，纖維蛋白的溶解劑可以在水溶液、緩沖液、等滲液(例如pH3.5-5.5的乙酸鈉或乙酸銨或己二酸鈉或己二酸銨緩沖液)中制劑。也可再加入賦形劑，如聚乙烯吡咯酮、明膠、羥基纖維素、阿拉伯膠、聚乙二醇、甘露醇和氯化鈉。該組合物可冷凍干燥。
藥用組合物可用式(Ⅰ)化合物和纖維蛋白溶解劑在同一容器內(nèi)制劑，但優(yōu)選在不同的容器內(nèi)制劑。當(dāng)該兩種試劑是以溶液形式提供時，可將它們裝在輸注/注射系統(tǒng)中同時給藥或先后給藥。
該治療的適應(yīng)癥包括心肌梗塞，深靜脈血栓形成、肺栓塞、中風(fēng)和其它與梗塞有關(guān)的疾病。本發(fā)明化合物在給予tPA或其它纖維蛋白溶解劑之前、同時或之后給藥。在再輸注建立之后相當(dāng)一段時間用要求保護(hù)的化合物連續(xù)治療可能是合手需要的，它能夠最大限度地抑制治療后再閉鎖。tPA，SK，UK或pUK的有效劑量可以為0.5-5mg/kg，而肽的劑量可以為大約0.1-25mg/kg。
為了能在同一時間或不同時間方便地給予抑制劑或纖維蛋白溶解劑，準(zhǔn)備了一個用具包，它裝有一個單獨(dú)容器(例如盒子、卡紙盒或其它容器)、多個獨(dú)立的瓶子、袋子、小瓶或其它容器、它們各自都裝有有效量的抑制劑供腸道外給藥用(如上所述)，和有效量的tPA或其它纖維蛋白溶解劑供腸道外給藥用(如上所述)。這樣的用具包可包含例如裝在同一容器或不同容器中的兩種藥用制劑(可以是冷凍干燥的填料)和臨時配制溶液的容器。其變化之一是將臨時配制用溶液和冷凍干燥的填料裝在一個容器的兩個室中。它們可在使用前混合)。有了這樣的安排，纖維蛋白溶解劑和本發(fā)明化合物可分別裝在兩個容器中，或者一起以凍干粉的形式裝在一個容器內(nèi)。
當(dāng)兩種藥劑以溶液形式提供時，可將它們裝入輸注/注射系統(tǒng)供同時給藥或先后給藥。例如血小板聚集抑制劑可以是可靜脈注射形式的，式者是輸注袋經(jīng)過管子與裝有纖維蛋白溶解劑的第二個輸注袋串聯(lián)的形式。使用該系統(tǒng)，患者可受到體內(nèi)藥團(tuán)注射或輸注抑制劑，隨后輸注纖維蛋白溶解劑。
在本發(fā)明化合物的藥理學(xué)活性用其抑制3H-SK & F 107260(一種已知的RGD纖維蛋白溶液原拮抗劑)與GPⅡb-Ⅲa受到結(jié)合的能力、其抑制體內(nèi)血小板聚集的能力及其抑制體外血栓形成的能圖來評估。
RGD間價的GPⅡb-Ⅲa結(jié)合的抑制GPⅡb-Ⅲa的純化取10個單位陳舊的經(jīng)洗滌的人血小板(得自紅十字會)，將其投入4℃下的由3%辛基葡糖苷、20mM Tris-HCl(pH7.4)、140mN NaCl、2mM CaCl2組成的溶液中溫和攪拌使其溶解。將溶解產(chǎn)物于1000，000g離心1小時。上清液施用到兵豆凝血素環(huán)脂糖4B柱(E.Y.Labs)上，該柱經(jīng)200mMTris-HCl(pH7.4)、100mM NaCl，2mM CaCl2、1%辛基葡糖苷(緩沖液A)預(yù)先平衡。培養(yǎng)2小時后，用50mL冷凍的緩沖液A洗滌柱子。保留有凝血素的GPⅡb-Ⅲa用含10%葡萄糖的緩沖液A洗脫。全部過程在4℃下進(jìn)行。SDS聚丙烯酰胺凝膠電脈表明，所得GPⅡbⅢa的純度＞95%。
GPⅡb-Ⅲa向微脂粒中的摻合在氮?dú)饬飨?，將磷脂酰絲氨酸(70%)和磷脂酰膽堿(30%)(Avanti Polar Lipids)的混合物干燥于玻璃管壁上。將純化的GPⅡb-Ⅲa稀釋到0.5mg/mL的最終濃度，以蛋白質(zhì)∶磷脂1∶3(W∶W)的比例與磷脂混合。將混合物再懸浮并在超聲波浴中超聲處理5分鐘。隨后用12，000-14，000分子量逆止?jié)B析管將該混合物對1000倍過量的50mM Tris-HCl(pH7.4)，100mM NaCl，2mM CaCl2(兩種改變)滲析。含GPⅡb-Ⅲa的微脂粒于12，000g離心15分鐘，以最終蛋白質(zhì)約為1mg/mL的濃度再懸浮于滲析緩沖液中。將微脂粒于-70℃貯存待用。
與GPⅡbⅢa的競爭性結(jié)合與纖維蛋白的溶酶原受體(GPⅡb-Ⅲa)的結(jié)合用間接競爭性結(jié)合法以[3H]-SK & F-10726作為RGD-型配體進(jìn)行評定。結(jié)合評定是在96-井滴定板組件(Millipore Corporation，Bedford，MA)上用0.22μm的親水durapor膜進(jìn)行的。用0.2mL10μg/mL多賴氨酸(Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO)于室溫預(yù)先覆蓋井1小時，以阻滯非特異性結(jié)合。將各種濃度的未標(biāo)記苯并氮雜 加到井中，做四份。向各井中加入[3H]-SK & F-107260使最終濃度為4.5nM，隨后加入1μg純化的含血小板GPⅡb-Ⅲa的微脂粒。將混合物于室溫下培養(yǎng)1小時。用Millipore多用途過濾器將GPⅡb-Ⅲa結(jié)合的[3H]-SK & F-107260從未結(jié)合的中分離出來，該著用冰冷卻的緩沖液洗滌(兩次，每次0.2mL)。殘留到過濾器上的結(jié)合放射性用Beckman液體閃爍計(jì)數(shù)器在1.5mL Ready Solve(Bechman Instruments，F(xiàn)ullerton，CA)中計(jì)數(shù)，效率為40%。非特異性結(jié)合在2μm未標(biāo)記SK & F-107260的存在下并不斷給試樣增加小于0.14%總放射性的條件下測定。所有數(shù)據(jù)點(diǎn)均為四份實(shí)驗(yàn)測定的平均點(diǎn)。本發(fā)明化合物在約40nM到約50μM的范圍內(nèi)抑制[3H]-SK&F-107260與Ki的結(jié)合。優(yōu)選化合物的Ki小于100nM。
血小板聚集的抑制收集未做過試驗(yàn)的成年雜種狗血樣(檸檬酸鹽化以免聚集)。于室溫在150×g離心10分鐘制備富含血小板血漿(PRP)。將PRP在80×g離心10分鐘制得洗滌的血小板。這樣得到的細(xì)胞丸在不含Ca++的Tyrode氏緩沖液(pH6.5)中洗滌兩次，再懸浮于含1.8mM Ca++的Tyrode氏緩沖液(pH7.4)至濃度為3×105細(xì)胞/毫升。在所有血小板聚集的評定中，先加化合物，3分鐘后再加興奮劑。最終興奮劑濃度為0.1單位/毫升纖維蛋白酶和2mM ADP(Sigma)。聚集用對數(shù)時間光聚集器(Chron-Log Lumi-Aggregometer)監(jiān)控，用加入興奮劑5分鐘后的光通量按下式計(jì)算聚集百分?jǐn)?shù)%聚集＝[(90-CR) (90-10)]×100其中CR是圖表讀數(shù)，90是基線，10是PRP空白讀數(shù)。用[%聚集抑制]對[化合物濃度]作圖測得IC50值?；衔镉?00mM評定，隨后稀釋兩倍以建立適當(dāng)?shù)膭┝宽憫?yīng)曲線。
本發(fā)明化合物抑制用ADP激發(fā)的人血小板聚集，IC50為約0.45-50μm，優(yōu)選化合物的IC50小于1μm。
為了評定化合物對血漿蛋白酶的穩(wěn)定性。在加入興奮之前，將化合物在PRP中培養(yǎng)3小時(而不是3分鐘)活體內(nèi)血小板聚集的抑制活體內(nèi)血栓形成的抑制通過按照Aiken等人在Prostaglandins，19，629(1980)中所述的方法，記錄肽輸注進(jìn)入被麻醉的狗的全身性和血液動力學(xué)效果來證實(shí)。
不列實(shí)施例決不想對本發(fā)明的范圍加以限定，而是用來說明如何使用本發(fā)明化合物。評定多其它的實(shí)施方案對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯然的并是可獲得的。
實(shí)施例1[5-(4-氨基亞氨基四基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸(ⅰ)2-氨基-N-乙酸甲酯5-硝基苯并咪唑在氬氣氛中，將4-硝基-1，2-苯二胺(7.15g，46.7mmol)和2-異硫氰酸根合乙酸甲酯(6.12g，46.7mmol)在二甲基甲酰胺(20mL)和甲苯(100mL)中混合。反應(yīng)于65℃攪拌45分鐘，然后冷卻至室溫，一次加入氧化汞(10.13g，46.7mmol)。反應(yīng)于65℃攪拌過夜得深棕色溶液。將反應(yīng)混合物過濾，用熱甲醇沖洗，真空濃縮得棕紅色油狀物。經(jīng)閃色譜(甲醇/二氯甲烷，1∶9)得所需產(chǎn)物(11.25g，96%)。
(ⅱ)2-氨基-N-乙酸甲酯-5-氨基苯并咪唑，乙酸鹽將實(shí)施例1(ⅰ)(4.04g，16.14)溶于甲醇/乙醇(50∶50mL)中，然后加入10%鈀/碳(1.5g)。反應(yīng)于45磅/英寸2氫化2.5小時，用Celite 過濾，用甲醇沖洗，真空濃縮得所需產(chǎn)物(3.65g，81%)，不必進(jìn)一步純化，直接使用。
(ⅲ)[5-(4-Cbz氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸甲酯將實(shí)施例1(ⅱ)化合物(0.52g，1.86mmol)與4-(Cbz氨基亞氨基甲基)苯甲酸(0.55g，1.86mmol)，1-羥基苯并三唑(0.3g，2.22mmol)和N-乙基-N′-(二甲基氨基丙基)碳化二亞胺(0.43g，2.21mmol)在二甲基甲酰胺(12mL)中混合。將反應(yīng)混合物冷卻到0℃后緩慢加入二異丙基乙胺(0.74g，5.74mmol)，然后在氬氣氛中室溫?cái)嚢柽^夜。將深棕色反應(yīng)混合物倒入裝有50mL冰和5%碳酸氫鈉(6.8mL)的燒瓶中，得到白色沉淀物，過濾并用冷水洗滌，干燥后得所需產(chǎn)物(0.68g，73%)，不必進(jìn)一步純化，直接使用。
(ⅳ)[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸甲酯，乙酸鹽從實(shí)施例1(ⅲ)的化合物出發(fā)，按照制備實(shí)施例1(ⅱ)的化合物的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅴ)[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸甲酯，三氟乙酸鹽將實(shí)施例1(ⅳ)的化合物(0.25g，0.12mmol)與10%乙酸(12mL)混合，并于110℃攪拌過夜。真空除去溶劑得粗產(chǎn)物(0.11g，94%)。經(jīng)反相制備HPLC(CH3CN∶H2O，0.1%TFA)純化得分析純所需產(chǎn)物。
ESMSm/e 353.2(M+H)+，351.0(M-H)-.元素分析理論值C17H16N6O3·2C2HF3O2·1/2H2OC，42.79;H，3.25;N，14.26.實(shí)測值C，42.84;H，3.04;N，14.00.
實(shí)施例2[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-丙酸(ⅰ)3-異硫氰酸根合丙酸甲酯向β-苯胺甲酯鹽酸鹽在二氯甲烷(60mL)中的混懸液中加入三乙胺(10.87g，107.4mmol)。將反應(yīng)混合物冷卻至-15℃后滴加溶于氯代甲烷(30mL)的二硫化碳(4.1g，53.8mmol)，25分鐘加完。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?0℃，攪拌10分鐘后將溫度降至0℃并滴加溶于氯代甲烷(5mL)中的氯代甲酸乙酯(5.83g，53.7mmol)，15分鐘加完。將溫度升至室溫，攪拌20分鐘后冷卻至0℃。然后加入三乙胺(5.43g，53.7mmol)。將溫度升到室溫，然后攪拌30分鐘。用水(50mL)、1N鹽酸(50mL)、5%碳酸氫鈉和水(50mL)洗滌反應(yīng)混合物。用硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮得7.3g粗產(chǎn)物。閃色譜(乙酸乙酯/己烷1∶4)得所需產(chǎn)物(4.03g，52%)。
(ⅱ)2-氨基-N-丙酸甲酯-5-硝基苯并咪唑從實(shí)施例2(ⅰ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅰ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅲ)2-氨基-N-丙酸甲酯-5-硝基苯并咪唑，乙酸鹽從實(shí)施例2(ⅱ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅱ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅳ)[5-(4-Cbz氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-丙酸甲酯從實(shí)施例2(ⅲ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅲ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅴ)[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-丙酸甲酯，乙酸鹽從實(shí)施例2(ⅳ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅲ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅵ)[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-丙酸，三氟乙酸鹽從實(shí)施例2(ⅴ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅴ)的方法制得標(biāo)題化合物。
ESMSm/e 367.2(M+H)+.
元素分析理論值C18H18N6O3·2C2HF3O2·1/2H2OC，43.79;H，3.51;N，13.93.
實(shí)測值C，43.61;H，3.67;N，14.01.
實(shí)施例3[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯基氨基羰基]
苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸(ⅰ)2-氨基-N-乙酸甲酯-5-羧基苯并咪唑按照實(shí)施例1(ⅰ)的方法，以3，4-二氨基苯甲酸代替4-硝基-1，2-苯二胺作為起始物，制得標(biāo)題化合物。
(ⅱ)4-(Cbz-氨基亞氨基甲基)苯胺將4-(氨基亞氨基甲基)苯胺二鹽酸鹽(4.0g，19.2mmol)懸浮于四氫呋喃(100mL)和水(20mL)中，于0℃緩慢滴加5N氫氧化鈉(11.6mL)。兩分鐘后滴加Cbz-Cl(3.28g，19.2mmol)。反應(yīng)于0℃攪拌1小時后真空除去大部分溶劑。將殘留物溶于二氯甲烷(700mL)，用100mL水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮得所需產(chǎn)物(4.5g，87%)，粗產(chǎn)物不必進(jìn)一步純化，直接使用。
(ⅲ)[5-(4-Cbz-氨基亞氨基甲基)苯基氨基羰基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸甲酯將實(shí)施例3(ⅰ)的化合物(0.87g，3.49mmol)與亞硫酰氯(7mL)回流過夜，使其轉(zhuǎn)化為酰氯。除去過量亞硫酰氯，殘留物與實(shí)施例3(ⅱ)的化合物(1.0g，3.7mmol)在二氯甲烷(12mL)和二甲基甲酰胺(5mL)中混合。在0℃下加入三乙胺(1.13g，11.2mmol)，然后在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物倒入裝有50mL冰的燒瓶中，得棕色沉淀物(1.76g，94%)。閃色譜(甲醇/二氯乙烷7∶93)得所需產(chǎn)物。
(ⅳ)[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯基氨基羰基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸甲酯乙酸鹽從實(shí)施例3(ⅲ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅱ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅴ)[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯基氨基羰基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸，三氟乙酸鹽從實(shí)施例3(ⅳ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅴ)的方法制得標(biāo)題化合物。
ESMSm/e 353.2(M+H)+，351.2(M-H)-.元素分析理論值C17H16N6O3·2C2HF3O2C，43.46;H，3.13;N，14.48.實(shí)測值C，43.76;H，3.56;N，14.07.
實(shí)施例4[5-4(氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-丙酸(ⅰ)2-丙酸甲酯-5-硝基苯并咪唑?qū)?-硝基-1，2-苯二胺(1.52g，100mmol)和琥珀酸一甲酯(2.0g，15.1mmol)在4N鹽酸(30mL)中混合，得綠棕色溶液。在110℃下將其攪拌24小時，真空除去溶劑得紫色固體，閃色譜(甲醇/二氯甲烷，5∶95)得所需產(chǎn)物(0.5g，20%)。
(ⅱ)2-丙酸甲酯-5-氨基苯并咪唑，乙酸鹽從實(shí)施例4(ⅰ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅱ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅲ)[5-(4-Cbz-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-丙酸甲酯從實(shí)施例4(ⅱ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅲ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅳ)[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-丙酸甲酯，乙酸鹽從實(shí)施例4(ⅲ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅱ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅴ)[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯基氨基羰基]苯并咪唑-2-丙酸，三氟乙酸鹽從實(shí)施例4(ⅳ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅴ)的方法制得標(biāo)題化合物。
ESMSm/e 353.2(M+H)+，350.0(M-H)-.元素分析理論值C18H17N5O3·2.33C2HF3O2C，44.11;H，3.16;N，11.35.實(shí)測值C，44.51;H，3.28;N，10.99.
實(shí)施例5[5-(4-氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸(ⅰ)[5-(4-Boc-氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸甲酯從實(shí)施例1(ⅱ)的化合物(0.7g，2.5mmol)出發(fā)，用4-(Boc-氨基甲基)苯甲酸(2.5g，0.63mmol)，按照實(shí)施例1(ⅲ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅱ)[5-(4-氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸，三氟乙酸鹽從實(shí)施例5(ⅰ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅴ)的方法制得標(biāo)題化合物。
ESMSm/e 340.2(M+H)+，338.2(M-H)-.元素分析理論值C17H17N5O3·2.5C2HF3O2C，42.31;H，3.15;N，11.22.實(shí)測值C，42.09;H，3.24;N，11.31.
實(shí)施例61-N-芐基-[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基氨基]苯并咪唑-2-丙酸(ⅰ)1-N-芐基-5-硝基苯并咪唑-2-丙酸甲酯室溫下，將實(shí)施例4(ⅰ)的化合物(1.0g，4.4mmol)和氫化鈉(0.11g，4.4mmol)與四氫呋喃(30mL)和二甲基甲酰胺(5mL)混合得透明棕色溶液。一次性加入芐基溴(0.76g，4.4mmol)，然后將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物分配于二氯甲烷∶水(250∶50mL)中。將二氯甲烷提取液干燥(硫酸鈉)、過濾并真空濃縮得棕色油，閃色譜(乙酸乙酯/己烷1∶1)分離兩種配向異構(gòu)件。較高的Rf點(diǎn)為標(biāo)題化合物(6(ⅰ)(a)，0.68，50%);而較低的Rf點(diǎn)為另一異構(gòu)體，1-N-苯甲基-6-硝基苯并咪唑-2-丙酸甲酯(6(ⅰ)(b)，0.30g，22%)。
(ⅱ)1-N-芐基-5-氨基苯并咪唑-2-丙酸甲酯，乙酸鹽從實(shí)施例6(ⅰ)(a)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅱ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅲ)1-N-芐基-[5-(4-Cbz-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-丙酸甲酯從實(shí)施例6(ⅱ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅲ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅳ)1-N-芐基-[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基苯并咪唑-2-丙酸甲酯，乙酸鹽從實(shí)施例6(ⅲ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅱ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅴ)1-N-芐基-[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-丙酸，三氟乙酸鹽從實(shí)施例6(ⅳ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅴ)的方法制得標(biāo)題化合物。
ESMSm/e 442.2(M+H)+.元素分析理論值C25H23N5O3·2.5C2HF3O2·2H2OC，47.25;H，3.90;N，9.18.實(shí)測值C，47.59;H，4.18;N，8.84.
實(shí)施例71-N-芐基-[6-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基氨基]苯并咪唑-2-丙酸(ⅰ)1-N-芐基-6-氨基苯并味唑-2-丙酸甲酯，乙酸鹽從實(shí)施例7(ⅰ)(b)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅱ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅱ)1-N-芐基-[6-(4-Cbz-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-丙酸甲酯從實(shí)施例7(ⅰ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅲ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅲ)1-N-芐基-[6-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-丙酸甲酯，乙酸鹽從實(shí)施例7(ⅱ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅱ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅳ)1-N-芐基-[6-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-丙酸，三氟乙酸鹽從實(shí)施例7(ⅲ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅴ)的方法制得標(biāo)題化合物。
ESMSm/e 442.2(M+H)+，440.0(M-H)-.元素分析理論值C25H23N5O3·2.5C2HF3O2·1.5H2OC，47.82;H，3.81;N，9.29.實(shí)測值C，48.14;H，3.84;N，9.20.
實(shí)施例81-N-苯乙基-[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基苯并咪唑-2-丙酸(ⅰ)1-N-苯乙基-5-硝基苯并咪唑-2-丙酸甲酯按照制備實(shí)施例6(ⅰ)(a)和(b)的方法，用苯乙基溴代替芐基溴制備兩種配向異構(gòu)件。較高的Rf點(diǎn)為標(biāo)題化合物，而較低的點(diǎn)是另一異構(gòu)體，1-N-苯乙基-6-硝苯并咪唑-2-丙酸甲酯。
(ⅱ)1-N-苯乙基-5-氨基苯并咪唑-2-丙酸甲酯，乙酸鹽從實(shí)施例8(ⅰ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅱ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅲ)1-N-苯乙基-[5-(4-Cbz-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-丙酸甲酯從實(shí)施例8(ⅱ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅲ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅳ)1-N-苯乙基-[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-丙酸甲酯，乙酸鹽從實(shí)施例8(ⅲ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅱ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅴ)1-N-苯乙基-[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰氨基]苯并咪唑-2-丙酸，三氟乙酸鹽從實(shí)施例8(ⅳ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅴ)的方法制得標(biāo)題化合物。
ESMSm/e 456.2(M+H)+，454.2(M-H)-.元素分析理論值C26H25N5O3·2.5C2HF3O2·2H2OC，47.94;H，4.08;N，9.01.實(shí)測值C，47.58;H，4.15;N，8.87.
實(shí)施例95-[4-氨基亞氨基甲基)苯基氨基羰基]吲哚-2-丙酸(ⅰ)4-(羥基氨基)苯甲酸芐酯在0℃和氬氣氛下，將水合肼(含55%肼，1.5mL，26.25mmol，1.05當(dāng)量)滴加到含有4-硝基苯甲酸芐酯(Brewster，J.H;Ciotti，C.J.，Jr.J.Am.Chem.Soc.1955，77，6214;6.43g，25mol，1當(dāng)量)，5%銠/碳(濕，625mg)和四氫呋喃(50mL)的混合物中，1分鐘加完。加入完成后，將混合物溫?zé)嶂潦覝?，攪?小時，然后用Celite 過濾。將濾液濃縮得黃色油狀4-(羥基氨基)苯甲酸芐酯粗品，不必純化直接使用。用硅膠色譜(30%乙酸乙酯/甲苯)分離制備，獲得的純4-(羥基氨基)苯甲酸芐酯用于表征目的。
TLC(30% 乙酸乙酯/甲苯)Rf0.52;1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.99(d，J＝8.6Hz，2H)，7.26-7.55(m，5H)，6.97(d，J＝8.6Hz，2H)，5.33(s，2H);IR(CHCl3)3550，3315，1703，1606，1273，1169，1101，693cm-1;MS(DC/NH3)261.2(M+NH4)+，245.2(M+MH4-16)+，228.1(M+H-16)+.
(ⅱ)N-[4-(芐氧羰基)苯基]-N-羥基-5-(甲氧羰基)-3-氧代戊酰胺將4-(羥基氨基)苯甲酸芐酯(25mmol，1當(dāng)量)和3-甲氧羧基丙?；鵐eldrum氏酸(Oikawa，Y.;Sugano，K;Yonemitsu，O.J.Org.Chem，1987，43，2087;7.75g，30mmol，1.2當(dāng)量)在無水乙腈(125mL)中在氬氣氛中加熱回流。45分鐘后，真空除去溶劑。殘留物迅速在硅膠色譜(30%乙酸乙酯/甲苯)上分離。得到黃色固體狀態(tài)標(biāo)題化合物(7.99g，80%，不純)。將純材料用于表征
Rf0.39;1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.03(app.d，2H)，7.68(app.d，2H)，7.28-7.54(m，5H)，5.63(s，1H)，5.34(s，2H)，3.73(s，3H)，3.06(d，J＝16.7Hz，1H)，2.89(d，J＝16.7Hz，4H)，2.52-2.82(m，2H)，2.25-2.60(m，2H);IR(CHCl3)3100-3500(br)，1710，1357，1272，1174，1108cm-1;MS(DCI/NH3)417.2(M+NH4)+，401.2(M+NH4-16)+，400(M+H)+，384.1(M+H-16)+，287.1，245，228.1，148.1.
(ⅲ)5-芐氧羰基吲哚-2-丙酸甲酯經(jīng)過一個抽氣/氬氣沖洗周期使用實(shí)施例1(ⅱ)的化合物(7.99g，20mmol，1當(dāng)量)和AIBN(65.7mg，0.4mmol，0.02當(dāng)量)在對二甲苯(AldrichHPLC級，120mL)中的混合物脫氧，將所得混合物于氬氣氛中加熱回流。得到黃色溶液，它隨著熱的繼續(xù)而逐漸變深色。0.5小時后，將反應(yīng)混合物濃縮，殘留物經(jīng)硅膠色譜(兩次，第1見40%乙酸乙酯/己烷;第2次2∶1己烷/乙酸乙酯。兩次均在柱中有部分結(jié)晶)純化得到黃色固體標(biāo)題化合物(1.67g，25%;20%來自4-硝基苯甲酸芐酯)。
TLC(40% 乙酸乙酯/乙烷)Rf0.51;1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.82(brs，1H)，8.32(s，1H)，7.88(dd，J＝8.6，1.3Hz，1H)，7.28-7.50(m，6H)，6.31(s，1H)，5.38(s，2H)，3.73(s，3H)，3.07(t，J＝6.5Hz，2H)，2.75(t，J＝6.5Hz，2H);IR(CHCl3)3200-3500(br)，1720(shoulder)，1700，1303，1255，1232cm-1;MS(ESMS)338.0(M+H)+.
(ⅳ)甲基5-羧基吲哚-2-丙酸將10%鈀/碳(212.9mg，0.mmol，0.2當(dāng)量)加到實(shí)施例9(ⅲ)的化合物(338.4mg，1mmol，1當(dāng)量)在1∶1乙酸乙酯/甲醇(30mL)中的溶液里，所得混合物在氫氣氛(40磅/英寸2)中攪拌。1小時后，用Celite 過濾反應(yīng)混合物以除去催化劑用乙酸乙酯和甲醇洗滌濾墊。將濾液濃縮得標(biāo)題化合物(240.8mg，97%)，為灰白固體。
TLC(10% MeOH/CHCl3)Rf0.56;1H NMR(400MHz，CDCl3plus DMSO-d6)δ8.23(s，1H)，7.77(dd，J＝8.5，1.4Hz，1H)，7.31(d，J＝8.5Hz，1H)，6.27(s，1H)，3.70(s，3H)，3.09(t，J＝7.5Hz，2H)，2.78(t，J＝7.5Hz，2H);MS(ESMS)248.0(M+H)+.
(ⅴ)[5-(4-氨基亞氨基甲基)芐基氨基羰基]吲哚-2-丙酸按照實(shí)施例3(ⅲ)-(ⅴ)的方法，用甲基5-羧基吲哚-2-丙酸代替2-氨基-N-乙酸甲酯-5-羧基苯并咪唑得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例105-[(4-哌啶基乙酰基)氨基]-1H-苯并咪唑-2-丁酸(ⅰ)2-丁酸甲酸5-硝基苯并咪唑從4-硝基-1，2-苯二胺(10.0g，65.3mmol)和戊二酸一甲酯(15.5g，106mmol)出發(fā)，按照實(shí)施例4(ⅰ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅱ)2-丁酸甲酯5-氨基苯并咪唑從實(shí)施例10(ⅰ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例1(ⅱ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅲ)5-[(4-N-Boc-哌啶基乙?；?氨基]-1H-苯并咪唑-2-丁酸甲酯從實(shí)施例10(ⅱ)的化合物(0.35g，1.5mmol)出發(fā)，用4-N-Boc-哌啶基乙酸(0.40g，1.65mmol)，按照實(shí)施例1(ⅲ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅳ)5-[(4-哌啶基乙?；?氨基]-1H-苯并咪唑-2-丁酸，鹽酸鹽將實(shí)施例10(ⅲ)化合物(0.35g，0.76mmol)溶于10%乙酸(25mL)中，于115℃攪拌16小時，然后將1.0N鹽酸(5mL)直接加到反應(yīng)混合物中，再攪拌1小時。真空除去溶劑得粗產(chǎn)物(0.33g，94%)，用反相制備高壓液相色譜純化(乙腈∶水，0.1%三氟乙酸)得三氟乙酸鹽。將分析純產(chǎn)物溶于1.0N鹽酸使其轉(zhuǎn)變?yōu)辂}酸鹽，冷卻干燥除去溶劑。
ESMSm/e 345.2(M+H)+，343.2(M-H)-.元素分析理論值C18H24N4O3·3HCl·2H2OC，44.14;H，6.38;N，11.44.實(shí)測值C，44.51;H，6.34;N，11.69.
實(shí)施例115-[(4-哌啶基乙酰基)氨基]-1H-苯并咪唑-2-丙酸(ⅰ)5-[(4-N-Boc-哌啶基乙?；?氨基]-1H-苯并咪唑-2-丙酸甲酯從實(shí)施例4(ⅱ)的化合物(0.136g，0.62mmol)出發(fā)，用4-N-Boc-哌啶基乙基(0.166g，0.68mmol)，按照實(shí)施例1(ⅲ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅳ)5-[(4-哌啶基乙酰基)氨基]-1H-苯并咪唑-2-丙酸、鹽酸鹽從實(shí)施例11(ⅰ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例10(ⅳ)的方法制得標(biāo)題化合物。
ESMSm/e 331(M+H)+.元素分析理論值C17H22N4O3·2HCl·TFA·2.75H2OC，40.04;H，6.03;N，10.99.實(shí)測值C，40.13;H，6.29;N，10.95.
實(shí)施例125-[(4-哌啶基羰基)氨基]-1H-苯并咪唑-2-丁酸
(ⅰ)5-[(4-N-Boc-哌啶基羰基)氨基]-1H-苯并咪唑-2-丁酸甲酯從實(shí)施例10(ⅱ)的化合物(0.35g，1.5mmol)出發(fā)，用4-N-Boc-六氫煙酸(0.38g，1.65mmol)，按照實(shí)施例1(ⅲ)的方法制得標(biāo)題化合物。
(ⅱ)5-[(4-哌啶基羰基)氨基]-1H-苯并咪唑-2-丁酸，鹽酸鹽從實(shí)施例12(ⅰ)的化合物出發(fā)，按照實(shí)施例10(ⅳ)的方法制得標(biāo)題化合物。
ESMSm/e331.2(M+H)+.元素分析理論值C17H22N4O3·2HCl·2H2OC，46.48;H，6.42;N，12.75.實(shí)測值C，46.31;H，6.11;N，12.59.
實(shí)施例135-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠氨基]-1H-苯并咪唑-2-乙酸(ⅰ)5-硝基苯并咪唑-2-乙酸乙酯在0℃下，將濃硝酸(5mL)加到濃硫酸(5mL)中，將溶液再充分冷卻10-15分鐘。在數(shù)分鐘內(nèi)分批加入苯并咪唑-2-乙酸乙酯(Buchi，J，;Zwicky，H.;Aebi，A.，ARCHIV.DerPharmazie1960，293，758;1.09g，5.34mmol，1當(dāng)量)。將所得黃色溶液于0℃攪拌20分鐘，然后仔細(xì)倒在碎冰(100g)上，用冷的20%碳酸鈉(50-75mL)將pH值調(diào)節(jié)至5，混合物用乙酸乙酯(3×50mL提取。干燥(硫酸鈉)，濃縮，經(jīng)硅膠色譜(3∶2乙酸乙酸/甲苯)得5-硝基苯并咪唑-2-乙酸乙酯(1.23g，92%)，為黃色固體。
TLC(3∶2乙酸乙酯/甲苯)Rf0.44;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.54(brs，1H)，8.21(dd，J＝8.9，2.1Hz，1H)，7.58-7.70(m，1H)，4.31(q，J＝7.1Hz，2H)，4.14(s，2H)，1.35(t，J＝7.1Hz，3H);IR(氯仿)3390，1727，1523，1345，1309cm-1;MS(ESMS)250.0(M+H)+.
(ⅱ)5-[[4-(N-Cbz-氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠氨基]-1H-苯并咪唑-2-乙酸乙酯(a)5-氨基苯并咪唑-2-乙酸乙酯將5-硝基苯并咪唑-2-乙酸乙酯(206mg，0.83mmol，1當(dāng)量)、10%鈀/碳(88mg，0.08mmol，0.1當(dāng)量)和無水乙醇(8mL)的混合物于室溫和氫氣氛(氣包)下攪拌。45分鐘后，用Celite 將反應(yīng)混合物過濾，濃縮濾液得5-氨基苯并咪唑-2-乙酸乙酯粗產(chǎn)物。不必進(jìn)一步純化，直接使用。
(b)5-[[4-(N-Cbz-氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠氨基]-1H-苯并咪唑-2-乙酸乙酯。
在0℃和氬氣氛下，將N-乙基-N′-(二甲基氨基丙基)碳化二亞胺(191mg，1.0mmol，0.2當(dāng)量)突然加到5-氨基苯并咪唑-2-乙酸乙酯(0.83mmol，1當(dāng)量)，N-Cbz-(氨基亞氨基甲基)苯甲酸(272mg，0.91mmol，1.1當(dāng)量)、1-羥基苯并三唑水合物(135mg，1.0mmol，1.2當(dāng)量)和二異丙基乙胺(0.22mL，1.25mmol，1.5當(dāng)量)的無水二甲基甲酰胺(4mL)溶液中。將所得溶液溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^夜。然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮，將殘留物分配在水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)中，分出各層。水層用乙酸乙酯提取(2×20mL)，合并所有乙酸乙酯層。向合并的有機(jī)提取液中加入甲醇以溶解懸浮的固體。將所得溶液干燥(硫酸鎂)，濃縮至黃色固體。經(jīng)硅膠柱色譜(3∶2丙酮/氯仿)純化得5-[[4-(N-Cbz-氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠氨基]-1H-苯并咪唑-2-乙酸乙酯(316.9mg，76%分兩步)，為黃色固體。
TLC(3∶2丙酮/氯仿)Rf0.50;1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ8.08(s，1H)，8.04(d，J＝8.5Hz，2H)，7.98(d，J＝8.5Hz，2H)，7.52(d，J＝8.7Hz，1H)，7.25-7.50(m，6H)，5.21(s，2H)，4.22(q，J＝7.2Hz，2H)，1.27(t，J＝7.2Hz，3H);
(ⅲ)5-[[4-(氨在亞氨基甲基)苯甲酰基]氨基]-1H-苯并咪唑-2-乙酸將10%鈀/碳(68mg，0.063mmol，0.01當(dāng)量)加到5-[[4-(N-Cbz-氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠氨基]-1H-苯并咪唑-2-乙酸乙酯(316.9mg，0.63mmol，1當(dāng)量)，三氟乙酸(0.049mL，0.63mmol，1當(dāng)量)的無水乙醇(12mL)溶液中，混合物于室溫和氫氣氛(氣袋)中攪拌，1小時后，用Celite 過濾混合物，將濾液濃縮成黃色固體。
將該固體溶于無水乙醇(10mL)和1.0N氫氧化鈉(1.9mL，1.9mmol，3當(dāng)量)中，將所得黃色溶液于室溫?cái)嚢琛Ａ⒓闯霈F(xiàn)沉淀物。將混合物攪拌3小時，然后再加0.1N氫氧化鈉(1.3mL，1.26mmol，2當(dāng)量)。繼續(xù)在室溫下攪拌3小時，然后加入水(6mL)，得透明溶液，于室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物濃縮至干，殘留物用1∶1乙腈/水(6mL)稀釋。將混合物冷卻至0℃，并加入三氟乙酸(0.49mL，6.3mmol，10當(dāng)量)，所得黃色溶液濃縮至干，殘留物用反相C-18硅膠閃色譜(5%乙腈/水/0.1%三氟乙酸(300mL)，然后用7.5%乙腈/水/0.1%三氟乙酸)純化。合并含產(chǎn)物級分，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至20mL，冷卻干燥得5-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯甲酰基)氨基]-1H-苯并咪唑-2-乙酸-2-三氟乙酸鹽·1.75水(218.3mg，58%)，為無色粉末。
HPLC(PRP-1柱;10% CH3CN/水/0.1%三氟乙酸)k1＝1.10;1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.47(s，1H)，8.19(d，J＝8.4Hz，2H)，7.96(d，J＝8.4Hz，2H)，7.67-7.77(m，2H);
乙酯基上中子α與CD3OD的D交換;MS(ESMS)338.0(M+H)+，294.0(M+H-CO2)+，169.4(M+2H)+，146.4;元素分析理論值C17H15N5O3-2CF3CO2H-1.75 水C，42.26;H，3.46;N，11.73.實(shí)測值C，42.21;H，3.14;N，11.56.
實(shí)施例14腸道外劑量單元組合物含20mg實(shí)施例4的滅菌干粉形式的制劑制備如下將20mg化合物溶于15ml蒸餾水中。在滅菌條件下將溶液過濾到25ml多劑安瓿中并冷卻干燥。向粉末中加入20ml5%葡萄糖水溶液(D5W)配制成供靜脈內(nèi)或肌內(nèi)注射的藥劑。劑量因而由注射體積決定。可將計(jì)量體積的該劑量單元隨后加到另一體積的注射用DSW中進(jìn)行稀釋，或者將計(jì)量的劑量加到另一懸浮藥物用機(jī)構(gòu)中，如瓶或袋中供Ⅳ滴注或其它注射-輸液系統(tǒng)。
實(shí)施例5口服劑量單元組合物將50mg實(shí)施例4化合物與75mg乳糖和5mg硬脂酸鎂混合，研磨制得口服膠囊。所得粉末過篩后裝入硬明膠膠囊。
實(shí)施例16口服劑量單元組合物將20mg蔗糖，150mg硫酸鈣二水合物和50mg實(shí)施例4化合物與10%明膠溶液混合。制粒制得口服片劑。將濕顆粒過篩、干燥、與10mg淀粉，5mg滑石5mg硬脂酸混合;然后壓制成片。
上面是實(shí)施和使用本發(fā)明的說明。然而，本發(fā)明并不限于其中描述的具體實(shí)施方案，而包括所有在隨后的權(quán)利要求的范圍內(nèi)的改變。
權(quán)利要求
1.式(Ⅰ)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中A1至A3形成任何可接近的取代的五元環(huán)，它可以是飽和的或不飽和的，任選地包含至多兩個選自O(shè)、S和N的雜原子，其中S和N可任選地被氧化；D1至D4形成任何可接近的取代的六元環(huán)，任選地包含至多兩個氮原子；R至少是一個選自R7或Q-C1-4烷基、Q-C2-4鏈烯基、Q-C2-4炔基、Q-C3-4氧化鏈烯基或Q-C3-4氧代炔基、Q-C1-4氨基烷基、Q-C3-4氨基鏈烯基或Q-C3-4氨基炔基，任選地被任何可接近的一個或多個R11或R7的結(jié)合所取代；R＊不存在或?yàn)镠，Q-C1-6烷基、Q-C1-6氧代烷基、Q-C2-6鏈烯基、Q-C3-4氧代鏈烯基、Q-C3-4氧代炔基、Q-C2-4炔基、Q-C3-6環(huán)烷基、Ar或Het，任選地被1個或多個R″取代；每個Q獨(dú)立地為H、C3-6環(huán)烷基、Het或Ar；R6為W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V-；每個R7獨(dú)立地為-COR8，-COCR′2R9，-C(S)R8，-S(O)mOR′，-S(O)mNR′R″，-PO(OR′)，-PO(OR′)2，-B(OR′)2，-NO2，或四唑基；每個R8獨(dú)立地為-OR′，-NR′R″，-NR′SO2R′，-NR′OR′，-OCR′2CO(O)R′，或AA；R9是-OR′，-CN，-S(O)rR′，-S(O)mNR′2，-C(O)R′，C(O)NR′2，或-CO2R′；R10為氫、C1-4烷基或-NR′R″；每個R11獨(dú)立地為H、鹵素，-OR12，-CN，-NR′R12，-NO2，-CF3，CF3S(O)r-，-CO2R′，-CONR′2，Q-C0-6烷基、Q-C1-6氧代烷基、Q-C2-6鏈烯基、Q-C2-6炔基、Q-C2-6烷氧基、Q-C0-6烷氨基或Q-C0-6烷基-S(O)r-；每個R12獨(dú)立地為R′，-C(O)R′，-C(O)NR′2，-C(O)OR′，-S(O)mR′，或-S(O)mNR′2；每個R′獨(dú)立地為H、C1-4烷基、C3-7環(huán)烷基-C0-4烷基或Ar-C0-4烷基；每個R″獨(dú)立地為R′或-C(O)R′；AA是羧基任選地被保護(hù)的氨基酸，U和V不存在或?yàn)镃O，CR′2，C(=CR′2)，S(O)n，O，NR′，CR′OR′，CR′(OR″)CR′2，CR′2CR′(OR″)，C(O)CR′2，CR′2C(O)，CONR′，NR′CO，OC(O)，C(O)O，C(S)O，OC(S)，C(S)NR′，NR′C(S)，S(O)nNR′，NR′S(O)n，N=N，NR′NR′，NR′CR′2，NR′CR′2，CR′2O，OCR′2，C≡C，或CR′=CR′，前提條件是U和V不同時不存在；W是R′R″N-，R′R″NR′N-，R′R″NR′NCO-，R′2NR′NC(=NR′)-，R′ONR′C(=NR′)-，R′R″NCO-，R′R″NC(=NR′)-， X不存在，或?yàn)镹=CR′、C(O)或0；Y不存在，或?yàn)镾或O；Z為(CH2)t、Het、Ar或C3-7環(huán)烷基；每個m獨(dú)立地為1或2；每個n是獨(dú)立地為0或3；q是0或3；每個r獨(dú)立地為0至2；每個s獨(dú)立地為0至2；每個t獨(dú)立地為0至2。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中A1是CR1R1′，CR1，NR1，N，O，或S(O)x;A2是CR2R2′，CR2，或-NR2;A3是CR3R3′，CR3，NR3，N，O，或S(O)x;D1-D4是CR11，CR6或N;R是(CR14R15)u-(T)v-(CR14R15)w-R7其中T是CR14R15-CR14R15，CR′＝CR′C≡C或NR′，R14和R15是R′、OR′或NR′R″，只要R14和R15與同一個碳相連時不同時為OR′或NR′R′;R′-R3和R1′-R3′是R＊或R;R是W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)1-U-(CR′2)s;X是0至2U、V和W獨(dú)立地為0、1或2。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中A1是CR1R1′，CR1，NR1，N，O或S;A2是CR2R2′，NR2或CR2;A3是CR3R3′，NR3，N，O或S;D1和D4是CH;D2或D3是CR6;R2是R;R3或R3′是R＊和R6是W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)1-U。
4.權(quán)利要求3的化合物，具體是
5.權(quán)利要求2的化合物，其中A1是CH2、CH、NR″、N、O或S;A2是CR2或CR2R2′;A3是CR3R3′、CR3、NR3、N、O或S。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R1不存在或?yàn)镠;R2is-CH2CO2H，-CH2CH2CO2H，-CH2CH2CH2CO2H，-NHCH2CO2H，or-NHCH2CH2CO2H;R3不存在或?yàn)镠或Q-C1-6烷基，其中Q是ArZ是苯基;W是H2N，H2NC(＝NH)，H2NC(＝NH)NH，或H2NCO-;和d(CR′R10)1-U-(CR′2)s-V是CH2NHCO，CH2CONH，CH(NR′R″)CONH，CONH，N(CH3)CO或NHCO.
7.權(quán)利要求2的化合物，其中(CR′R10)1-U-(CR′2)s-Vis CONR′，NR′CO，CH(NR′R″)CONH，CH2CONH，CONR′CH2，CONHCH2，CH2CHOH，CHOHCH2，CONHCHR′CH2，CH2NHCO2CH2，CH2CH2NHCO2，CONHCH2CO，CONHCH2CHOH，CH＝CHCONH，NHCO2CH＝CH，SO2NR′CHR′CH2，CH＝CH，或CH2CH2.
8.權(quán)利要求2的化合物，其中R2是R7，-CH2R7，-CH2CH2R7，-CH2CH2CH2R7，-NHCH2R7，或-NHCH2CH2R7.
9.權(quán)利要求8的化合物，其中R3不存在或?yàn)镠或Q-C1-6烷基，其中Q是Ar。
10.權(quán)利要求8的化合物，其中Z是苯基。
11.權(quán)利要求8的化合物，其中W是
12.權(quán)利要求8的化合物，其中(CR′R10)1-U-(CR′2)是CH2NHCO、CH(NR′R″)CONH、CONH或NHCO。
13.權(quán)利要求8的化合物，其中R6是
14.權(quán)利要求1的化合物是[5-(4-氨基亞氨基甲基)-苯甲?；被鵠苯并咪唑-2-丙酸或及藥學(xué)上可接受的鹽。
15.權(quán)利要求1的化合物是[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰基氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸;[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲?；被鵠苯并咪唑-2-氨基-N-丙酸;[5-(4-氨基甲基)苯甲酰基氨基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸;[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯氨基羰基]苯并咪唑-2-氨基-N-乙酸;1-N-芐基-[6-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲?；被鵠苯并咪唑-2-丙酸;1-N-芐基-[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲?；被鵠苯并咪唑-2-丙酸;1-N-苯乙基-[5-(4-氨基亞氨基甲基)苯甲酰基氨基]苯甲?；被鵠苯并咪唑-2-丙酸;或其藥學(xué)上可接受的鹽。
16.權(quán)利要求1至15之任一項(xiàng)的化合物作為藥物的應(yīng)用。
17.一種藥用組合物，它包括權(quán)利要求1至15之任一項(xiàng)的化合物和藥物上可接受的載體。
18.權(quán)利要求1所定義的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，包括使式(Ⅸ)化合物與式(Ⅹ)化合物反應(yīng) 其中D1-D4和A1-A3、R和R＊如式(Ⅰ)中定義，其反應(yīng)活性官能團(tuán)被保護(hù);L1和L2是能反應(yīng)生成鍵合的-(CR1R10)r-U-(CR′2)s-V-的官能團(tuán);R6″是W-(CR′2)q-Z和與L2相連的(CR1R10)r-U-(CR′2)s-V-的任何部分，其反應(yīng)活性基團(tuán)被保護(hù)。然后除去任何保護(hù)基，并任選地形成藥學(xué)上可接受的鹽。
19.權(quán)利要求1所定義的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備抑制血小板聚集的藥物中的應(yīng)用。
20.權(quán)利要求1所定義的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療中風(fēng)或短暫局部缺血發(fā)作或心肌梗塞的藥物上的應(yīng)用。
21.權(quán)利要求1所定義的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和纖維蛋白溶解劑在制備促進(jìn)動脈或靜脈的再輸注并抑制再閉鎖的藥物中的應(yīng)用。
22.抑制血小板聚集的方法，包括給需要如此治療的患者施與權(quán)利要求1的化合物。
23.權(quán)利要求22的方法，用于治療中風(fēng)或短暫性局部缺血發(fā)作或心肌梗塞。
24.促進(jìn)動脈或靜脈的再輸注并抑制再閉鎖的方法，包括給需要如此治療的患者施與纖維蛋白溶解劑和權(quán)利要求1的化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及下式的化合物，它可有效抑制血小板聚集，本發(fā)明還涉及具有如此功效的藥用組合物及抑制血小板聚集的方法。
文檔編號A61K31/404GK1113915SQ94105498
公開日1995年12月27日 申請日期1994年6月1日 優(yōu)先權(quán)日1992年12月1日
發(fā)明者R·M·基南, W·H·米勒 申請人:史密絲克萊恩比徹姆公司