本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥的，尤其涉及一種提高脂質納米顆粒遞送效率的方法，以及利用該提高脂質納米顆粒遞送效率的方法制備的納米載體，該納米載體的應用。

背景技術：

1、脂質納米顆粒(lipid?nanoparticle,lnp)是由一個或多個磷脂雙層組成的球形囊泡，通常包括陽離子脂質、輔助脂質、膽固醇，聚乙二醇化脂質等成分。作為一種納米載體，它們能夠有效封裝和遞送多種藥物，例如mrna、sirna和小分子藥物等，以提高藥物的穩(wěn)定性和生物利用度。目前，lnp已在疫苗遞送、基因治療等生物醫(yī)藥領域展示出潛在的應用前景。

2、lnp進入細胞的途徑包括網格蛋白依賴的內吞機制和巨胞飲。它們隨后被轉運至早期內體，然后成熟為晚期內體和溶酶體。為了有效遞送藥物，lnp必須在內體成熟為溶酶體之前逃逸到細胞質，這一過程稱為內體逃逸，是提高遞送效率的關鍵步驟。然而，當前內體逃逸效率較低，因此研究者常需使用高劑量的lnp來達到預期效果，但這可能導致嚴重的細胞毒性反應。

技術實現(xiàn)思路

1、為克服現(xiàn)有技術的缺陷，本發(fā)明要解決的技術問題是提供了一種提高脂質納米顆粒遞送效率的方法，其能夠在提高遞送效率的同時減少藥物用量并減輕毒性反應。

2、本發(fā)明的技術方案是：一種提高脂質納米顆粒遞送效率的方法，其包括以下步驟：

3、(1)將兩性霉素b稀釋為低濃度兩性霉素b，低濃度為0.1～0.3μg/ml；

4、(2)在室溫下將低濃度兩性霉素b與egfp?lnp?mrna共孵育；

5、(3)將步驟(2)獲得的混合物靜脈注射進入生物體。

6、本發(fā)明的方法避免了使用高劑量的lnp來達到提高內體逃逸效率的目的，在使用正常劑量的lnp的情況下，顯著增強了lnp的遞送效率，促進了內體逃逸過程，并增加了目標基因的表達水平。

7、還提供了根據(jù)這種提高脂質納米顆粒遞送效率的方法制備的納米載體。

8、還提供了根據(jù)這種提高脂質納米顆粒遞送效率的方法制備的納米載體的應用，其應用在促進內體逃逸過程，增加目標基因的表達水平。

技術特征：

1.提高脂質納米顆粒遞送效率的方法，其特征在于：其包括以下步驟：

2.根據(jù)權利要求1所述的提高脂質納米顆粒遞送效率的方法，其特征在于：所述步驟(1)中，低濃度為0.1μg/ml。

3.根據(jù)權利要求2所述的提高脂質納米顆粒遞送效率的方法，其特征在于：所述步驟(1)中，將兩性霉素b在pbs中稀釋至所需的低濃度。

4.根據(jù)權利要求3所述的提高脂質納米顆粒遞送效率的方法，其特征在于：所述步驟(2)中，egfp?lnp?mrna的劑量按生物體體重每克為0.4μg。

5.根據(jù)權利要求4所述的提高脂質納米顆粒遞送效率的方法，其特征在于：所述步驟(2)中，共孵育30分鐘。

6.根據(jù)權利要求5所述的提高脂質納米顆粒遞送效率的方法，其特征在于：該方法還包括步驟(4)，注射24小時后，在對生物體進行心臟灌流后，收集生物體的肝臟樣本，并使用全光譜動物活體成像系統(tǒng)進行成像分析，以便評估egfp?lnp?mrna在生物體的肝臟中的表達及分布情況。

7.根據(jù)權利要求1-6任一項所述的提高脂質納米顆粒遞送效率的方法制備的納米載體。

8.根據(jù)權利要求7所述的制備的納米載體，其特征在于：其應用在促進內體逃逸過程，增加目標基因的表達水平。

技術總結
本發(fā)明公開一種提高脂質納米顆粒遞送效率的方法、制備納米載體及應用，能夠在提高遞送效率的同時減少藥物用量并減輕毒性反應。方法包括：(1)將兩性霉素B稀釋為低濃度兩性霉素B，低濃度為0.1～0.3μg/ml；(2)在室溫下將低濃度兩性霉素B與EGFP?LNP?mRNA共孵育；(3)將步驟(2)獲得的混合物靜脈注射進入生物體。

技術研發(fā)人員：曹彬,何迪,王在,左文婷,袁英瑛
受保護的技術使用者：中日友好醫(yī)院（中日友好臨床醫(yī)學研究所）
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/12/26