本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種防治失眠的藥物組合物及其制備方法。

背景技術(shù)：

睡眠是生理行為,也是保障身心健康的重要條件。長時間失眠會給患者帶來巨大的身心損害,嚴重影響人們的生活和工作。由于各種因素的影響,睡眠障礙和睡眠不足的現(xiàn)象越來越普遍。目前治療睡眠障礙最常用的方法是用化學(xué)合成類鎮(zhèn)靜催眠藥,久服會產(chǎn)生依賴性或成癮。臨床經(jīng)驗證明,中藥及其復(fù)方在改善睡眠方面具有獨特療效,且不良反應(yīng)較少。近年國內(nèi)研究人員對中草藥的鎮(zhèn)靜催眠作用開展研究,發(fā)現(xiàn)其中許多活性成分具有催眠作用。

近年對中藥提取物的研究發(fā)現(xiàn),中藥提取物也具有與西藥相類似作用于谷氨酸、DA、5-HT、NE 及 GABA 等神經(jīng)遞質(zhì)而促進睡眠的作用,如靈芝提取物對褪黑素分泌的影響,柏子仁提取物對 5-HT 水平的提高,酸棗仁提取物同時作用于 GABA 及谷氨酸的表達,均與現(xiàn)代治療失眠的西藥機制相似,且中藥治療效果更有效、不良反應(yīng)更小,對中藥提取物的研究給臨床治療失眠帶來了新的指導(dǎo)思路。但從整體來看,目前對中藥提取物的實驗研究方法未能統(tǒng)一,實驗條件無統(tǒng)一標準,這使實驗結(jié)果差異較大；另外,大多數(shù)中藥提取物治療失眠的實驗研究都是動物實驗,對人體研究較少；而因為對失眠原因的不明確性,目前的失眠動物模型的可信度仍有待考察；動物實驗雖一方面表明中藥提取物的有效性,但仍需相關(guān)臨床的研究才可明確其安全性；由于失眠的因素與環(huán)境、精神、情緒等均有較為密切的聯(lián)系,而在臨床觀察研究中,少有對此方面的控制,缺乏確切的標準和完善的方案,因而使研究結(jié)果缺乏說服力。筆者認為,未來的研究不僅需要對動物模型、研究標準等進行更詳盡的完善,更多細致的臨床觀察和對失眠機制的探索也會帶來更加新穎的思路與方向。

錦香草：本品為野牡丹科錦香草屬植物錦香草Phyllagathis caualeriei(Levl.et van.)Guill.[Allomorphia caualerieiLevl. Et van.]的全草或根。春、夏季采收全草，根全年均可采，均洗凈，切碎曬干?！拘晕丁课犊?；辛；性寒?！竟δ苤髦巍壳鍩釠鲅?；利濕。主熱毒血??；濕熱帶下；月經(jīng)不調(diào)；血熱崩漏；腸熱痔血；小兒陰囊腫大?！驹参镄螒B(tài)】草本，高10-15cm。莖直立或匍匐，逐節(jié)生很，近肉質(zhì)，密被長粗毛，四棱形，通常不分枝。葉對生；葉柄長1.5-9cm，密被長粗毛；葉片紙質(zhì)，廣卵形、廣橢圓形或圓形，先端廣急尖至近圓形，基部心形，長6-16cm，寬4.5-14cm，兩面綠色或有時背面紫紅色，表面被疏糙伏毛狀長粗毛，背面僅基出脈及側(cè)脈被平展的長粗毛；基出脈7-9，表面脈平整，背面脈隆起。傘形花序，頂生，總花梗長4-17cm，被長粗毛，稀幾無毛；苞片倒卵形或近側(cè)披針形，被粗毛，通常僅有4枚，長約1cm，或更長；花梗與花萼均被糠秕；花萼漏斗狀四棱形，裂片廣卵形；花瓣粉紅色至紫色，上部略偏斜，先端急尖；雄蕊4，近等長，花藥基部具小瘤或不明顯，藥隔下延呈短距；子房杯形，先端具冠。蒴果，先端冠4裂，伸出宿存萼，宿存萼具8縱肋，果梗伸長，被糠秕。花期6-8月，果期7-9月。收載于中藥大辭典。

紫麻：本品為蕁麻科紫麻屬植物紫麻Oreocnide frutescens(Thunb.)Miq.［Ur-tica frutescens Thunb.］的全株。夏、秋季采收，洗凈，曬干?！拘晕丁扛?；性涼?！竟δ苤髦巍壳鍩峤舛?；行氣活血；透疹。主感冒發(fā)熱；跌打損傷；牙痛；麻疹不透；腫瘍?！拘誀睢咳暧忻?，長達lm。莖上有棱槽。葉皺縮，展平后卵狀長圓形或卵狀披針形，長4-12cm，寬1.7-5cm，先端漸尖，基部楔形，邊緣有鋸齒；葉柄長1-4cm。果實卵形。氣微，味微甜。收載于中藥大辭典。

紫金沙：本品為傘形科囊瓣芹屬植物五匹青Pternopetalum vulgare （Dunn）Hand.-Mazz.[Cryptotaceniopsis vulgaris Dunn]，的根或全草。秋季采挖，洗凈切片曬干?！拘晕丁啃?，溫?！竟δ苤髦巍可⒑須?，止痛。用于胃痛，腹痛，胸脅痛。【原植物形態(tài)】多年生草本，高20~50cm。根莖粗糙，有節(jié)，根肉質(zhì)，粗線形。莖單生或2~3個，中空，多數(shù)只有1個分枝，中部以上1個葉片，少數(shù)2~3.基生葉通常2~5，有長柄，長10~20厘米，基部有寬膜質(zhì)葉鞘;葉片通常是1回三出分裂，或近于2回三出分裂，裂片紙質(zhì)，卵形，長卵形或菱形，常2~3裂，基部楔形或截形，全緣，中部以上有鋸齒，頂端短尖，沿葉脈和葉緣有粗伏毛;莖生葉和基生葉同形，無柄或有短柄。復(fù)傘形花序無總苞;傘輻15~30，一般長3~4cm，果實成熟后長可達6cm;小總苞片1~4，線狀披針形，大小不等;小傘形花序有花2~5，萼齒大小不等，與花柱基近等長或長于花柱基;花瓣白色至淺紫色，倒卵形至長圓形。果實長卵形，基部寬而鈍圓，成熟后長4~5mm，寬2~3mm，果棱微粗糙或有絲狀細齒，每棱槽內(nèi)油管1~3.花果期4~7月。收載于中藥大辭典。

葫蘆素C（Cucurbitacin C）：CAS號5988-76-1，分子式C₃₂H₄₈O₈，分子量560.73?！境煞謥碓础奎S瓜 Cucumis sativus,苦黃瓜 Cucumis sativus var.hanzil。

葫蘆素L（ Cucurbitacin L）：CAS號1110-02-7，分子式C₃₀H₄₄O₇，分子量516.67?！旧锘钚浴靠鼓[瘤 (動物Ehrlich 腹水癌 in vivo，生命延長率38％～42％），細胞毒（KB in vitro，ED50=0.01～0.1ug/ml，HeLa in vitro,ED50=0.1ug/ml）?！境煞謥碓础堪诪a根 Bryonia alba，噴瓜 Ecballium elaterium，無卷須西瓜 Citrullus ecirrhosus，藥西瓜 Citrullus colocynthis。

環(huán)木菠蘿烷醇（Cycloartanol）：CAS號4657-58-3，分子式C₃₀H₅₂O，分子量428.75?！舅幚碜饔谩烤哂锌寡鬃饔??！境煞謥碓础慷褂?，枸杞子，火秧簕，水龍骨。

3個原料藥的化學(xué)結(jié)構(gòu)：

葫蘆素C（Cucurbitacin C）

葫蘆素L（ Cucurbitacin L） 環(huán)木菠蘿烷醇（Cycloartanol）。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是克服背景技術(shù)的不足，提供一種有效防治失眠的藥物組合物及其制備方法。

本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

制成該防治失眠的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：

錦香草530-540重量份 紫麻525-530重量份 紫金沙510-520重量份 葫蘆素C15-20重量份 葫蘆素L10-13重量份 環(huán)木菠蘿烷醇6-9重量份。

優(yōu)選的用于防治失眠的藥物組合物，是由如下重量份的原料藥組成：

錦香草535重量份 紫麻528重量份 紫金沙515重量份 葫蘆素C18重量份 葫蘆素L12重量份 環(huán)木菠蘿烷醇8重量份。

一種防治失眠的藥物組合物，其特征在于藥物組合物可以采用制劑學(xué)的常規(guī)方法制備成片劑或膠囊劑或滴丸。

一種防治失眠的藥物組合物，其特征在于藥物組合物與化學(xué)藥或中藥組成的防治失眠藥物。

一種防治失眠的藥物組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟制備：

原料藥的組成和重量份為：錦香草530-540重量份 紫麻525-530重量份 紫金沙510-520重量份 葫蘆素C15-20重量份 葫蘆素L10-13重量份 環(huán)木菠蘿烷醇6-9重量份；

制備方法：

（1）按原料藥配比取紫麻、紫金沙、錦香草、葫蘆素C、葫蘆素L、環(huán)木菠蘿烷醇，混勻，用重量百分比濃度27%乙醇作為溶劑，在45℃溫浸提取，提取次數(shù)為12次，每次提取時間為1.3小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的13.5倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.07，濾過，藥液通過DM133 大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度41%乙醇溶液洗脫DM133 大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度41%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；

（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度53%乙醇作為溶劑，加熱回流提取10次，每次提取時間為0.4小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的23.5倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.15，濾過，藥液通過HP2MGL大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度72%乙醇溶液洗脫HP2MGL大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度72%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；

（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。

優(yōu)選的一種防治失眠的藥物組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟制備：

原料藥的組成和重量份為：錦香草535重量份 紫麻528重量份 紫金沙515重量份 葫蘆素C18重量份 葫蘆素L12重量份 環(huán)木菠蘿烷醇8重量份；

制備方法：

（1）按原料藥配比取紫麻、紫金沙、錦香草、葫蘆素C、葫蘆素L、環(huán)木菠蘿烷醇，混勻，用重量百分比濃度27%乙醇作為溶劑，在45℃溫浸提取，提取次數(shù)為12次，每次提取時間為1.3小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的13.5倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.07，濾過，藥液通過DM133 大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度41%乙醇溶液洗脫DM133 大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度41%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；

（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度53%乙醇作為溶劑，加熱回流提取10次，每次提取時間為0.4小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的23.5倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.15，濾過，藥液通過HP2MGL大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度72%乙醇溶液洗脫HP2MGL大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度72%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；

（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。

一種防治失眠的藥物組合物的制備方法，其特征在于藥物組合物可以采用制劑學(xué)的常規(guī)方法制備成片劑或膠囊劑或滴丸。

一種防治失眠的藥物組合物的制備方法，其特征在于藥物組合物與化學(xué)藥或中藥組成防治失眠藥物。

藥物組合物防治失眠作用顯著。

具體實施方式

實施例1：防治失眠的藥物組合物及其制備方法

防治失眠的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：錦香草535g 紫麻528g 紫金沙515g 葫蘆素C18g 葫蘆素L12g 環(huán)木菠蘿烷醇8g；

制備方法：

（1）按原料藥配比取紫麻、紫金沙、錦香草、葫蘆素C、葫蘆素L、環(huán)木菠蘿烷醇，混勻，用重量百分比濃度27%乙醇作為溶劑，在45℃溫浸提取，提取次數(shù)為12次，每次提取時間為1.3小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的13.5倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.07，濾過，藥液通過DM133 大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度41%乙醇溶液洗脫DM133 大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度41%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；

（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度53%乙醇作為溶劑，加熱回流提取10次，每次提取時間為0.4小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的23.5倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.15，濾過，藥液通過HP2MGL大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度72%乙醇溶液洗脫HP2MGL大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度72%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；

（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。

實施例2：防治失眠的藥物組合物及其制備方法

防治失眠的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：錦香草530g 紫麻530g 紫金沙510g 葫蘆素C20g 葫蘆素L10g 環(huán)木菠蘿烷醇9g；

制備方法：

（1）按原料藥配比取紫麻、紫金沙、錦香草、葫蘆素C、葫蘆素L、環(huán)木菠蘿烷醇，混勻，用重量百分比濃度27%乙醇作為溶劑，在45℃溫浸提取，提取次數(shù)為12次，每次提取時間為1.3小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的13.5倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.07，濾過，藥液通過DM133 大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度41%乙醇溶液洗脫DM133 大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度41%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；

（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度53%乙醇作為溶劑，加熱回流提取10次，每次提取時間為0.4小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的23.5倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.15，濾過，藥液通過HP2MGL大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度72%乙醇溶液洗脫HP2MGL大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度72%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；

（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。

實施例3：防治失眠的藥物組合物及其制備方法

防治失眠的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：錦香草540g 紫麻525g 紫金沙520g 葫蘆素C15g 葫蘆素L13g 環(huán)木菠蘿烷醇6g；

制備方法：

（1）按原料藥配比取紫麻、紫金沙、錦香草、葫蘆素C、葫蘆素L、環(huán)木菠蘿烷醇，混勻，用重量百分比濃度27%乙醇作為溶劑，在45℃溫浸提取，提取次數(shù)為12次，每次提取時間為1.3小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的13.5倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.07，濾過，藥液通過DM133 大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度41%乙醇溶液洗脫DM133 大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度41%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；

（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度53%乙醇作為溶劑，加熱回流提取10次，每次提取時間為0.4小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的23.5倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.15，濾過，藥液通過HP2MGL大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度72%乙醇溶液洗脫HP2MGL大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度72%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；

（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。

實施例4：片劑的制備

取實施例1藥物組合物420g，加入淀粉500g，混勻，制粒，干燥，加微晶纖維素200g，硬脂酸鎂25g，混勻，壓制成5000片， 即得藥物組合物片劑。

實施例5：膠囊的制備

取實施例2藥物組合物350g，加入淀粉450g，混勻，制粒，干燥，整粒，加入適量硬脂酸鎂，混勻，裝膠囊2000粒，即得藥物組合物膠囊。

實施例6：滴丸的制備

稱取聚乙二醇 6000 230g水浴(80℃)加熱煮熔，加入實施例3藥物組合物12g，充分攪拌均勻，以液體石蠟為冷卻劑，置玻璃管（4*80cm）中，冷卻溫度為3℃，滴口內(nèi)外徑為7.0/2.0(mm/mm)，滴口距液面為2.0cm，滴速以每分42滴為最佳條件，用棉布吸干滴丸表面的冷凝劑，即得藥物組合物滴丸。

實驗例1：防治失眠的試驗研究

1 材料與方法

1.1 受試物

藥物組合物（實施例1藥物組合物 批號20110721）, 人日推薦量為3.0 g,相當于0.05 g/kg BW (成人體重以60 kg計)。稱取適量藥物組合物,配置成每1 ml相當藥物組合物0.075g)作為高劑量組藥物組合物。

1.2 動物

清潔級ICR健康雄性小鼠,體重18-22 g。將動物分為4組(1組進行直接睡眠實驗、2組延長戊巴比妥鈉睡眠時間實驗、3組戊巴比妥鈉閾下劑量催眠實驗、4組巴比妥鈉睡眠潛伏期實驗),每個實驗組48只小鼠,按體重隨機分成對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組,每組12只。

1.3 劑量選擇

按推薦量的5、10、30倍設(shè)3個劑量組:每公斤體重0.25、0.50和1.50g,蒸餾水對照組。動物每日稱重,并按2.0 ml/100 g BW經(jīng)口灌胃,連續(xù)30 d。

1.4 統(tǒng)計方法 數(shù)據(jù)以x±s表示,用SPSS 10.0軟件包統(tǒng)計分析。

1.5 實驗方法

1.5.1 直接睡眠實驗

各劑量組動物每天分別給予相應(yīng)的受試物,對照組給予等體積蒸餾水,連續(xù)30d后,觀察是否出現(xiàn)睡眠現(xiàn)象:當小鼠置于背臥位時,能立即翻正身位,如超過30-60 s不能翻正者,即認為翻正反射消失,進入睡眠；翻正反射恢復(fù)即為動物覺醒,翻正反射消失至恢復(fù)的時間段為動物睡眠時間,記錄各組入睡動物數(shù)及睡眠時間。

1.5.2 延長戊巴比妥鈉睡眠時間實驗

于末次灌胃15 min后,給各組動物腹腔注射50 mg/kg BW戊巴比妥鈉,注射量0.1 ml/10g BW,以翻正反射消失為入睡判斷標準,觀察受試物是否延長戊巴比妥鈉睡眠時間。

1.5.3 戊巴比妥鈉閾下劑量催眠實驗

于末次灌胃15 min后,給各組動物腹腔注射35 mg/kg BW戊巴比妥鈉(最大閾下催眠劑量),注射量0.1 ml/10g BW,以翻正反射消失達1min以上為入睡判斷標準,記錄30 min內(nèi)入睡動物數(shù)。

1.5.4 巴比妥鈉睡眠潛伏期實驗

于末次灌胃15 min后,給各組動物腹腔注射280 mg/kg BW巴比妥鈉,注射量0.1ml/10 g BW,以翻正反射消失達1 min以上為入睡判斷標準,觀察受試物對巴比妥鈉睡眠潛伏期的影響。

2 結(jié)果

2.1 對小鼠體重的影響

組間小鼠的初始體重類似(P>0.05)；實驗結(jié)束時組間末體重也類似(P>0.05),即該藥物組合物對小鼠體重增長無不良影響。

2.2 對小鼠直接睡眠作用觀察結(jié)果

各劑量組入睡動物數(shù)及睡眠時間均為0,與對照組類似(P>0.05)。表明該藥物組合物對小鼠無明顯的直接睡眠作用。

2.3 對戊巴比妥鈉誘導(dǎo)小鼠睡眠時間的影響

中、高劑量組睡眠時間長于對照組(P<0.05)。表明該藥物組合物能延長戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠睡眠時間。

2.4 對戊巴比妥鈉閾下劑量催眠作用的影響

各劑量組動物入睡率與對照組類似(P>0.05)。表明該藥物組合物未能增加閾下劑量戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠睡眠發(fā)生率。

2.5 對巴比妥鈉誘導(dǎo)小鼠睡眠潛伏期的影響

隨劑量增高,動物入睡潛伏期有縮短之勢,其中高劑量組短于對照組(P<0.05),表明該藥物組合物能縮短巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠睡眠潛伏期。