本發(fā)明涉及中藥提取
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種增液顆粒及其制備方法。
背景技術(shù)：
：增液顆粒養(yǎng)陰生津，清熱潤燥。用于熱邪傷陰、津液不足所引起的陰虛內(nèi)熱，口干咽燥，大便燥結(jié)；亦可用于感染性疾患高熱所致體液耗損的輔助用藥?，F(xiàn)有技術(shù)中的制備方法，工藝粗糙、落后，雜質(zhì)多，有效成分含量低，導致患者用量過大，不方便服用，嚴重影響了本品在臨床上應(yīng)用。技術(shù)實現(xiàn)要素：發(fā)明目的：為了解決上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種增液顆粒及其制備方法。技術(shù)方案：本發(fā)明的目的是通過如下的方案實現(xiàn)的：一種增液顆粒，制備方法為：取玄參270g、地黃216g、麥冬216g，加藥材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小時，過濾，藥渣再加入藥材8倍重量的水，煎煮1小時，藥液濾出，合并兩次煎煮液，減壓濃縮至60℃相對密度為1.05，加乙醇使含醇量的體積百分比達75％，攪拌，靜置，過濾，濾液減壓濃縮至65℃時相對密度為1.25，并回收乙醇，得濃縮液，使用硅膠精制，預(yù)先將選定的硅膠裝入樹脂柱中，同時將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后，通過反相硅膠柱，去掉液體中的雜質(zhì)，收集全部流出液，繼續(xù)減壓濃縮，將濃縮液進行噴霧干燥,制粒，顆粒干燥，得增液顆粒。所述一種增液顆粒，制備方法中所述硅膠比表面為300～500m2/g，孔容為0.70～0.90ml/g，所述稀釋后濃縮液通過反相硅膠柱分離、洗脫，至出水無色止。所述增液顆粒，上述制備方法中顆粒干燥使用裝置，包括：機殼、滾筒以及進料斗，其特征在于：所述機殼為圓筒狀，固定安裝在支架上，機殼底部設(shè)置出料口，其內(nèi)安裝滾筒，所述滾筒上設(shè)固定若干個畚斗，畚斗由兩塊對稱的弧形板拼接而成，畚斗的頂端靠近機殼的內(nèi)壁，滾筒為中空圓柱形筒體，其內(nèi)表面安裝一層電加熱板，所述電加熱板連接電源電路，滾筒的一端固定帶輪，所述帶輪通過皮帶連接電機；機殼的左上方設(shè)置進料口，所述進料口與進料斗連接；機殼的頂部設(shè)置開口，所述開口連接管道，所述管道的一端安裝抽氣扇。所述增液顆粒的制備方法，上述提取方法中所述滾筒的表面沿滾筒的軸向均勻設(shè)置若干條形凹槽。所述增液顆粒的制備方法，上述提取方法中所述機殼上設(shè)置控制面板，所述控制面板包括一個調(diào)速按鈕，所述調(diào)速按鈕與電機的控制電路連接。所述增液顆粒在制備抑制中國倉鼠卵巢CHO細胞增殖藥物中的應(yīng)用?，F(xiàn)有技術(shù)中，增液顆粒采用水提的方法，工藝粗糙、落后，雜質(zhì)多，導致患者用量過大，不方便服用，本發(fā)明制備的增液顆粒哈巴俄苷得率增加，含量高。本發(fā)明中的顆粒干燥設(shè)備結(jié)構(gòu)簡單、操作簡單快捷，能有效實現(xiàn)藥物顆粒的除濕干燥，且造價較低，適合廣泛推廣，并且發(fā)現(xiàn)增液顆粒在制備抑制中國倉鼠卵巢CHO細胞增殖藥物中的應(yīng)用。附圖說明為了使本發(fā)明的內(nèi)容更容易被清楚的理解，下面根據(jù)具體實施例并結(jié)合附圖，對本發(fā)明作進一步詳細的說明，其中：圖1為本發(fā)明顆粒干燥裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。圖2為本發(fā)明顆粒干燥裝置中滾筒的結(jié)構(gòu)示意圖。具體實施方式以下通過實施例形式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。實施例1取玄參270g、地黃216g、麥冬216g，加藥材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小時，過濾，藥渣再加入藥材8倍重量的水，煎煮1小時，藥液濾出，合并兩次煎煮液，減壓濃縮至60℃相對密度為1.05，加乙醇使含醇量的體積百分比達75％，攪拌，靜置，過濾，濾液減壓濃縮至65℃時相對密度為1.25，并回收乙醇，得濃縮液，使用硅膠精制，預(yù)先將選定的硅膠裝入樹脂柱中，同時將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后，通過反相硅膠柱，去掉液體中的雜質(zhì)，收集全部流出液，繼續(xù)減壓濃縮，將濃縮液進行噴霧干燥，制粒，顆粒干燥，得增液顆粒，每袋10g。所述增液顆粒的制備方法，所述硅膠精制方法為：預(yù)先將選定的硅膠裝入樹脂柱中，同時將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后，通過反相硅膠柱，去掉液體中的雜質(zhì)，收集全部流出液。所述增液顆粒的制備方法，所述硅膠比表面為300m2/g，孔容為0.90ml/g，所述稀釋后濃縮液通過反相硅膠柱分離、洗脫，至出水無色止。所述增液顆粒的制備方法，上述顆粒干燥使用裝置，見圖1-2，包括：機殼3、滾筒5以及進料斗7，所述機殼3為圓筒狀，固定安裝在支架2上，機殼3底部設(shè)置出料口1，其內(nèi)安裝滾筒5，所述滾筒5上設(shè)固定若干個畚斗4，畚斗4由兩塊對稱的弧形板拼接而成，畚斗4的頂端靠近機殼3的內(nèi)壁，滾筒5為中空圓柱形筒體，其內(nèi)表面安裝一層電加熱板12，所述電加熱板12連接電源電路，用于將滾筒5的表面加熱，滾筒5的一端固定帶輪11，所述帶輪11通過皮帶連接電機；機殼3的左上方設(shè)置進料口6，所述進料口6與進料斗7連接，顆粒從進料口6進入機殼3內(nèi)，并由畚斗4運轉(zhuǎn)，隨著滾筒5轉(zhuǎn)動，在轉(zhuǎn)動過程中，顆粒與畚斗4和滾筒5外表面接觸，利用畚斗4與滾筒5表面的熱量將顆粒中的水蒸氣蒸發(fā)出來，達到除濕的目的，最終由出料口1被收集起來；機殼3的頂部設(shè)置開口，所述開口連接管道9，所述管道9的一端安裝抽氣扇8，用于將干燥過程中蒸發(fā)出來的水蒸氣抽出機殼3外。所述滾筒5的表面沿滾筒5的軸向均勻設(shè)置若干條形凹槽13，條形凹槽13增大了顆粒與滾筒5表面的摩擦，使顆粒不易輕易滑動，其加熱的時間也就更長，且條形凹槽13增加了滾筒5表面有效加熱面積，使干燥更充分徹底。所述機殼3上設(shè)置控制面板，所述控制面板包括一個調(diào)速按鈕10，所述調(diào)速按鈕10與電機的控制電路連接，可實現(xiàn)控制電機轉(zhuǎn)速，即控制滾筒5轉(zhuǎn)速，不同批次的顆粒的含水量可能是不一樣的，針對需要不同干燥程度的顆粒調(diào)節(jié)不同的滾筒5轉(zhuǎn)速，改變顆粒在滾筒5上停留的時間，從而實現(xiàn)不同的干燥效果。實施例2取玄參270g、地黃216g、麥冬216g，加藥材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小時，過濾，藥渣再加入藥材8倍重量的水，煎煮1小時，藥液濾出，合并兩次煎煮液，減壓濃縮至60℃相對密度為1.05，加乙醇使含醇量的體積百分比達75％，攪拌，靜置，過濾，濾液減壓濃縮至65℃時相對密度為1.25，并回收乙醇，得濃縮液，使用硅膠精制，預(yù)先將選定的硅膠裝入樹脂柱中，同時將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后，通過反相硅膠柱，去掉液體中的雜質(zhì)，收集全部流出液，繼續(xù)減壓濃縮，將濃縮液進行噴霧干燥，制粒，顆粒干燥，得增液顆粒，每袋10g。所述增液顆粒的制備方法，所述硅膠精制方法為：預(yù)先將選定的硅膠裝入樹脂柱中，同時將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后，通過反相硅膠柱，去掉液體中的雜質(zhì)，收集全部流出液。所述一種增液顆粒的制備方法，所述硅膠比表面為500m2/g，孔容為0.70ml/g，所述稀釋后濃縮液通過反相硅膠柱分離、洗脫，至出水無色止。顆粒干燥設(shè)備同上。實施例3取玄參270g、地黃216g、麥冬216g，加藥材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小時，過濾，藥渣再加入藥材8倍重量的水，煎煮1小時，藥液濾出，合并兩次煎煮液，減壓濃縮至60℃相對密度為1.05，加乙醇使含醇量的體積百分比達75％，攪拌，靜置，過濾，濾液減壓濃縮至65℃時相對密度為1.25，并回收乙醇，得濃縮液，使用硅膠精制，預(yù)先將選定的硅膠裝入樹脂柱中，同時將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后，通過反相硅膠柱，去掉液體中的雜質(zhì)，收集全部流出液，繼續(xù)減壓濃縮，將濃縮液進行噴霧干燥,制粒，顆粒干燥，得增液顆粒，每袋10g。所述增液顆粒的制備方法，所述硅膠精制方法為：預(yù)先將選定的硅膠裝入樹脂柱中，同時將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后，通過反相硅膠柱，去掉液體中的雜質(zhì)，收集全部流出液。所述一種增液顆粒的制備方法，所述硅膠比表面為400m2/g，孔容為0.80ml/g，所述稀釋后濃縮液通過反相硅膠柱分離、洗脫，至出水無色止。顆粒干燥設(shè)備同上。上述實施例中藥材符合藥典標準。實施例4：本發(fā)明增液顆粒中哈巴俄苷含量測定實驗研究資料1.1實驗藥物：本發(fā)明增液顆粒：按實施例1-3方法制備。對照組采用普通顆粒干燥方法制備增液顆粒。1.2儀器：高效液相色譜儀系統(tǒng)包括高效液相色譜儀(Waters515)；P200高壓泵；Waters2487紫外檢測器及GJ605型高壓六通進樣閥；色譜柱為BDSHYPERSIL-C18(4.6mm×250mm，5μm)；數(shù)據(jù)采集及處理采用HS色譜數(shù)據(jù)工作站V4.0+(杭州英譜科技)1.3測定條件：照高效液相色譜法(通則0512)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-1％冰醋酸溶液(27∶73),為流動相；檢測波長為278nm；理論板數(shù)按哈巴俄苷峰計算應(yīng)不低于2000。取哈巴俄苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含5ug的溶液，即得。供試品溶液的制備取裝量差異項下的本品，研細，取約0.5g，精密稱定，置25ml量瓶中，加甲醇20ml，超聲處理(功率250W，頻率40kHz)30分鐘，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20ul注入液相色譜儀，測定，即得。1.4實驗結(jié)果各實施例制備的增液顆粒中哈巴俄苷含量測定結(jié)果樣品來源哈巴俄苷含量(mg/袋)實施例11.2實施例21.5實施例32.1對照組0.4根據(jù)上表的試驗結(jié)果可知，本發(fā)明實施例1-3制備的增液顆粒中哈巴俄苷含量明顯高于對照組。實施例5：本發(fā)明增液顆粒抑制中國倉鼠卵巢CHO細胞增殖的實驗研究資料1實驗材料1.1實驗用細胞株中國倉鼠卵巢CHO細胞，南京醫(yī)科大學實驗室細胞庫，DMEM+10％FBS常規(guī)培養(yǎng)。1.2實驗藥物研究藥物：本發(fā)明增液顆粒：按實施例1方法制備。藥液儲液：稱取100mg增液顆粒，溶于5ml無水乙醇中，0.2μm濾器過濾，500μldoff管分裝，-20℃存儲，同時0.2μm濾器過濾無水乙醇以備對照組之用。1.3實驗試劑DMEM(GIBCO公司Cat.No.12100-061Lot.No.758137)；胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司Lot.No.100419)；NaHCO3(上海久億化學試劑有限公司Cat.No.11810-033Lot.No.1088387)；Trypsin(AMRESCO公司批號：2010/04)；EDTA(AMRESCO公司批號：2009/10)；PenicillinGSodiumSalt(AMRESCO公司批號：2010242)；StreptomycinSulfate(AMRESCO公司批號：2010382)；無水乙醇(南京化學試劑有限公司批號：080310182)；MTT(Biosharp批號：0793)；PBS(實驗室自配)；1.4實驗器材萊卡倒置顯微鏡(德國Leica型號：DM1L)；可見-紫外光微孔板檢測儀(美國MD公司型號：SPECTRAMAX190)；CO2培養(yǎng)箱(FORMA型號：3111)；超凈臺(蘇凈集團安泰公司制造型號：SW-CJ-ZFD)；純水儀(美國Spring公司型號：S/N020579)；精密移液器(法國吉爾森公司型號：P2)；電子天平(德國賽多利斯有限公司型號：BT323S)；全自動高壓滅菌鍋(日本SANYO公司型號：MLS-3020)；臺式電熱鼓風干燥箱(上海精密實驗設(shè)備公司型號：DHG9123A)；冰箱(西門子公司型號：KG18V21TI)；液氮罐(CBS型號：2001)；低速離心機(上海安亭科學儀器廠型號：KA-1000)；0.2μm濾器(MILLIPORE型號：SLGP033RB)；10cm培養(yǎng)皿(NEST公司)、96孔培養(yǎng)板(NEST公司)；細胞計數(shù)板；離心管、移液管、Tips若干。2實驗方法1)中國倉鼠卵巢CHO細胞用DMEM+10％FBS于37℃、5％CO2進行常規(guī)培養(yǎng)(10cm培養(yǎng)皿)，當細胞生長至對數(shù)期時，收集細胞，棄去培養(yǎng)液，PBS輕洗3遍，加入3ml0.25％胰蛋白酶-0.04％EDTA，37℃消化2min后，向其中加入5ml完全培養(yǎng)基中和反應(yīng)，吹打細胞后將其轉(zhuǎn)入離心管中，1000rpm離心5min，調(diào)整細胞懸液濃度3×104個/ml。2)將細胞種入96孔培養(yǎng)板中，每孔加入細胞懸液180μl，培養(yǎng)板放入細胞培養(yǎng)箱中(37℃，5％CO2)常規(guī)培養(yǎng)。3)根據(jù)細胞生長情況，一般長至50％-70％，加入增液顆粒溶液，繼續(xù)培養(yǎng)24h。4)24h后加入20μlMTT溶液(5mg/ml，即0.5％MTT)，繼續(xù)培養(yǎng)4h。5)4h后扣板法倒去上清，用吸水紙輕輕拍干，每孔加入200μl二甲基亞砜，置搖床上低速振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀490nm處測量各孔的吸光值。6)同時設(shè)置本底(不加細胞，只加培養(yǎng)液)，對照孔(細胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、二甲基亞砜)，每組設(shè)定6個復孔。7)結(jié)果以藥物對細胞的抑制率表示：細胞增值抑制率(％)＝(對照孔OD值-給藥孔OD值)/對照孔OD值×100％。實驗重復3次。3統(tǒng)計處理采用MicrosoftExcel2003軟件中的相關(guān)分析和Studentt檢驗，數(shù)據(jù)以mean±S.D.表示。4實驗結(jié)果MTT法實驗后統(tǒng)計結(jié)果顯示，與對照組比較，當劑量達到5mg/ml時，對中國倉鼠卵巢CHO細胞增殖抑制有差異(P<0.05)，劑量在10mg/ml時該差異具有顯著性(P<0.01)，當劑量達到15-20mg/ml時有極顯著性差異(P<0.001)。增液顆粒對中國倉鼠卵巢CHO細胞增殖抑制影響研究注：與對照組比較，*P<0.01；**P<0.0015實驗結(jié)論增液顆粒可以抑制中國倉鼠卵巢CHO細胞增殖，減少中國倉鼠卵巢CHO細胞的細胞生長數(shù)目，該作用呈劑量依賴性。當前第1頁1 2 3