本發(fā)明涉及一種注射用達(dá)托霉素凍干粉針及其制備工藝，屬于藥物制劑領(lǐng)域。背景領(lǐng)域達(dá)托霉素(daptomycin)由禮來(lái)公司最初研究，cubist制藥公司開(kāi)發(fā)的環(huán)脂肽類(lèi)抗生素，2003年底美國(guó)fda經(jīng)過(guò)快速審批程序批準(zhǔn)注射用達(dá)托霉素上市，商品名cubicin(克必信)，用于治療由一些革蘭氏陽(yáng)性敏感菌株引起的并發(fā)性皮膚及皮膚結(jié)構(gòu)感染，如膿腫、手術(shù)切口感染和皮膚潰瘍。達(dá)托霉素作用機(jī)制為通過(guò)擾亂細(xì)胞膜對(duì)氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)，從而阻礙細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖的生物合成；另外，它還能破壞細(xì)菌細(xì)胞膜，使其內(nèi)容物外泄而殺死細(xì)菌，因此細(xì)菌對(duì)達(dá)托霉素較少產(chǎn)生耐藥性。中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)說(shuō)明書(shū)cn1616083a公開(kāi)了一種注射用達(dá)托霉素凍干劑及其制備方法。該技術(shù)方案中將達(dá)托霉素加入一定量的氫氧化鈉、ph調(diào)節(jié)劑，用注射用水配成一定濃度的溶液后灌裝于管制抗生素西林瓶?jī)?nèi)進(jìn)行冷凍干燥30-60小時(shí)制得成品。由于達(dá)托霉素穩(wěn)定性較差，其在水溶液狀態(tài)易降解而導(dǎo)致含量下降，且長(zhǎng)期放置過(guò)程中含量也有較大程度的下降，影響藥物的質(zhì)量和療效。達(dá)托霉素配制成藥液后室溫放置10小時(shí)含量變化情況及成品長(zhǎng)期放置過(guò)程中含量變化情況見(jiàn)下表。按注射液常規(guī)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，成品中達(dá)托霉素含量范圍是90％-110％，上表中藥液放置10小時(shí)含量明顯下降，成品放置24月含量接近下限，安全性風(fēng)險(xiǎn)極大。關(guān)于如何避免達(dá)托霉素含量下降，目前未見(jiàn)專(zhuān)利報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：：經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)，本發(fā)明提供一種注射用達(dá)托霉素凍干粉針及其制備工藝，本發(fā)明處方 工藝可以避免藥液及成品放置過(guò)程中達(dá)托霉素含量下降。本發(fā)明所提供注射用達(dá)托霉素凍干粉針具體如下：一種注射用達(dá)托霉素凍干粉針，其含有活性成分達(dá)托霉素和穩(wěn)定劑、緩沖鹽。所用的穩(wěn)定劑為谷胱甘肽、精氨酸中的至少一種，活性成分與穩(wěn)定劑的重量比為10～20:1，優(yōu)選為14～18:1。所用緩沖鹽為枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖鹽，活性成分與緩沖鹽的重量比為50～100:1，優(yōu)選為65～75:1。所述的枸櫞酸-枸櫞酸鈉的重量比為0.5～2:1；優(yōu)選為0.6～1.4:1。本發(fā)明還提供一種上述注射用達(dá)托霉素凍干粉針的制備工藝，具體如下：(1)取配制總量40％～90％的注射用水，加入處方量穩(wěn)定劑、緩沖鹽，攪拌溶解，按照質(zhì)量體積比加入0.1％～0.3％的針用活性炭，加熱至50℃～60℃攪拌均勻，脫炭過(guò)濾至澄清；藥液降溫至10℃-15℃，配制罐中通氮?dú)馐顾幰罕坏獨(dú)怙柡汀?2)稱(chēng)取處方量達(dá)托霉素加入其中，攪拌至澄清；(3)將注射用水降溫至10℃～15℃，加至藥液(2)中至配制總量，除菌過(guò)濾，灌裝，放入凍干機(jī)凍干，凍干曲線(xiàn)為：將擱板降溫至-10～-15℃并維持1～2小時(shí)，0.5～1小時(shí)內(nèi)降溫至-35～-40℃維持1～3小時(shí)；開(kāi)啟真空泵使凍干箱體內(nèi)真空不超過(guò)100pa；1～3小時(shí)擱板升溫至-10～-15℃并維持10～15小時(shí)；擱板繼續(xù)緩慢升溫至25～35℃并維持3～5小時(shí)；設(shè)定真空度為0～50pa，擱板溫度25～35℃維持1～3小時(shí)。(4)凍干結(jié)束后，向凍干箱內(nèi)回填氮?dú)庵脸海瑝壕o膠塞，取出樣品，軋蓋貼簽即得。其中，步驟2)中，加入達(dá)托霉素后，攪拌轉(zhuǎn)速設(shè)為60～80r/min，攪拌至澄清。經(jīng)過(guò)對(duì)達(dá)托霉素結(jié)構(gòu)的分析及相關(guān)降解特性的考察，發(fā)現(xiàn)其主要的降解途徑為水解和氧化，這些降解導(dǎo)致含量下降和有關(guān)物質(zhì)增加。根據(jù)這些特性，我們測(cè)試了數(shù)十種穩(wěn)定劑，其中包括抗氧劑、螯合劑、增溶劑及成鹽、絡(luò)合等方法改變其特性，發(fā)現(xiàn)普通的無(wú)機(jī)抗氧劑如亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉等對(duì)產(chǎn)品的穩(wěn)定性并無(wú)改善，而要改善其穩(wěn)定性需要從以下兩個(gè)方面著手：一、氨基酸、多肽類(lèi)抗氧劑能降低產(chǎn)品的氧化反應(yīng)，但并非每個(gè)氨基酸類(lèi)、多肽類(lèi)抗氧劑都能起到這種作用，我們篩選了人體內(nèi)源性的十?dāng)?shù)種氨基酸及多肽，最終選擇了谷胱甘肽和精氨酸作為穩(wěn)定劑，這兩種穩(wěn)定劑均為人體內(nèi)源性物質(zhì)，自然界中大量存在，可以為人體吸收利用，在本品用量范圍內(nèi)無(wú)明顯毒副作用；另外為防止氧氣對(duì)產(chǎn)品的氧化作用，我們對(duì)空白藥液進(jìn)行了氮?dú)怙柡?，排除其中的氧氣，凍干結(jié)束后，凍干箱內(nèi)填充氮?dú)鈮喝?，將氧氣?duì)本品的穩(wěn)定性影響降至最小。二、ph的波動(dòng)也是導(dǎo)致產(chǎn)品降解的一大因素。酸性和堿性環(huán)境對(duì)產(chǎn)品的水解反應(yīng)都有 一定的促進(jìn)作用，同時(shí)水解反應(yīng)也會(huì)使藥液ph發(fā)生變化，進(jìn)一步促進(jìn)水解反應(yīng)的進(jìn)行，形成惡性循環(huán)。本發(fā)明利用枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖鹽維持產(chǎn)品ph的恒定，同時(shí)還利用枸櫞酸抗氧增效劑的作用增強(qiáng)谷胱甘肽、精氨酸的抗氧化能力，進(jìn)一步防止產(chǎn)品的降解。三、結(jié)合穩(wěn)定劑、ph控制和轉(zhuǎn)速控制，本發(fā)明技術(shù)方案還克服了容易產(chǎn)生泡沫的影響，對(duì)生產(chǎn)過(guò)程中的過(guò)濾速度和灌裝準(zhǔn)確性有有益影響按照本發(fā)明處方工藝制備的達(dá)托霉素凍干粉針，含量穩(wěn)定性明顯提高，藥液及成品放置過(guò)程中含量幾乎不變，提高了藥品質(zhì)量和療效。具體實(shí)施方式：以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但這些實(shí)施例不以任何方式限制本發(fā)明。實(shí)施例1處方如下：達(dá)托霉素500g谷胱甘肽50g枸櫞酸5g枸櫞酸鈉5g注射用水加至5l制備工藝：(1)取3l注射用水，加入50g谷胱甘肽、5g枸櫞酸和5g枸櫞酸鈉，攪拌溶解，加入9g針用活性炭，加熱至50℃攪拌均勻，脫炭過(guò)濾至澄清；藥液降溫至15℃，配制罐中通氮?dú)?0分鐘使藥液被氮?dú)怙柡汀?2)稱(chēng)取處方量達(dá)托霉素加入其中，攪拌轉(zhuǎn)速設(shè)為60r/min，攪拌至澄清；(3)將注射用水降溫至15℃，加至藥液(2)中至5l，除菌過(guò)濾，灌裝，放入凍干機(jī)凍干，凍干曲線(xiàn)為：將擱板降溫至-10℃并維持2小時(shí)，迅速降溫至-40℃維持2小時(shí)；開(kāi)啟真空泵使凍干箱體內(nèi)真空不超過(guò)100pa；3小時(shí)擱板升溫至-10℃并維持10小時(shí)；擱板繼續(xù)緩慢升溫至35℃并維持3小時(shí)；設(shè)定真空度為50pa，擱板溫度35℃維持1小時(shí)。(4)凍干結(jié)束后，向凍干箱內(nèi)回填氮?dú)庵脸?，壓緊膠塞，取出樣品，軋蓋貼簽即得。實(shí)施例2處方如下：制備工藝：(1)取2l注射用水，加入25g精氨酸、2g枸櫞酸和3g枸櫞酸鈉，攪拌溶解，加入2g針用活性炭，加熱至60℃攪拌均勻，脫炭過(guò)濾至澄清；藥液降溫至10℃，配制罐中通氮?dú)?5分鐘使藥液被氮?dú)怙柡汀?2)稱(chēng)取處方量達(dá)托霉素加入其中，攪拌轉(zhuǎn)速設(shè)為80r/min，攪拌至澄清；(3)將注射用水降溫至10℃，加至藥液(2)中至5l，除菌過(guò)濾，灌裝，放入凍干機(jī)凍干，凍干曲線(xiàn)為：將擱板降溫至-10℃并維持2小時(shí)，迅速降溫至-35℃維持3小時(shí)；開(kāi)啟真空泵使凍干箱體內(nèi)真空不超過(guò)100pa；1小時(shí)擱板升溫至-15℃并維持15小時(shí)；擱板繼續(xù)緩慢升溫至25℃并維持5小時(shí)；設(shè)定真空度為0pa，擱板溫度25℃維持3小時(shí)。(4)凍干結(jié)束后，向凍干箱內(nèi)回填氮?dú)庵脸海瑝壕o膠塞，取出樣品，軋蓋貼簽即得。實(shí)施例3處方如下：達(dá)托霉素500g谷胱甘肽40g枸櫞酸4g枸櫞酸鈉3g注射用水加至5l制備工藝：(1)取4l注射用水，加入40g谷胱甘肽、4g枸櫞酸和3g枸櫞酸鈉，攪拌溶解，加入8g針用活性炭，加熱至50℃攪拌均勻，脫炭過(guò)濾至澄清；藥液降溫至15℃，配制罐中通氮?dú)?0分鐘使藥液被氮?dú)怙柡汀?2)稱(chēng)取處方量達(dá)托霉素加入其中，攪拌轉(zhuǎn)速設(shè)為60r/min，攪拌至澄清；(3)將注射用水降溫至15℃，加至藥液(2)中至5l，除菌過(guò)濾，灌裝，放入凍干機(jī)凍干，凍干曲線(xiàn)為：將擱板降溫至-10℃并維持2小時(shí)，迅速降溫至-40℃維持1小時(shí)；開(kāi)啟真空泵使凍干箱體內(nèi)真空不超過(guò)100pa；2小時(shí)擱板升溫至-12℃并維持13小時(shí)；擱板繼續(xù)緩慢升溫至35℃并維持2小時(shí)；設(shè)定真空度為30pa，擱板溫度35℃維持2小時(shí)。(4)凍干結(jié)束后，向凍干箱內(nèi)回填氮?dú)庵脸?，壓緊膠塞，取出樣品，軋蓋貼簽即得。對(duì)比例1處方如下：達(dá)托霉素500g右旋糖苷4075g枸櫞酸0.75g碳酸氫鈉適量注射用水加至5l制備工藝：稱(chēng)取處方量達(dá)托霉素、右旋糖苷40、枸櫞酸、加入注射用水約4l，在80℃水浴中加熱并攪拌至全部溶解，用5％碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)ph4.0，加入4g活性炭，并加注射用水至5l，攪拌15分鐘，脫炭過(guò)濾，除菌過(guò)濾，灌裝，凍干即得。對(duì)比例2處方如下：達(dá)托霉素500g1mol/l鹽酸溶液適量注射用水加至5l制備工藝：稱(chēng)取處方量達(dá)托霉素，加入注射用水約4l，攪拌至全部溶解，用1mol/l鹽酸溶液調(diào)節(jié)ph4.0，加入4g活性炭，并加注射用水至5l，攪拌15分鐘，脫炭過(guò)濾，除菌過(guò)濾，灌裝，凍干即得。實(shí)驗(yàn)例1藥液放置穩(wěn)定性將藥液室溫放置10小時(shí)測(cè)定其中達(dá)托霉素含量，結(jié)果見(jiàn)下表(單位％)0h2h4h6h8h10h實(shí)施例199.699.599.699.499.299.3實(shí)施例299.899.899.599.499.599.3實(shí)施例3100.2100.099.699.799.699.5對(duì)比例199.699.499.098.597.897.3對(duì)比例2100.299.998.296.694.593.1實(shí)驗(yàn)例2成品長(zhǎng)期放置穩(wěn)定性將成品放置24個(gè)月，與第0天、3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月，12個(gè)月，24個(gè)月取樣檢測(cè)含量，結(jié)果見(jiàn)下表(單位％)0天3個(gè)月6個(gè)月9個(gè)月12個(gè)月24個(gè)月實(shí)施例199.999.799.699.699.599.1實(shí)施例299.799.799.699.499.499.2實(shí)施例3100.1100.099.699.899.699.3對(duì)比例199.999.799.098.297.896.5對(duì)比例299.999.698.494.591.290.4由上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，相比如對(duì)比例1和2，按本發(fā)明技術(shù)方案實(shí)施的實(shí)施例1、2、3所得產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，藥液放置10h，成品放置24個(gè)月含量下降不明顯。有效解決了達(dá)托霉素藥液和成品放置過(guò)程中含量下降的問(wèn)題。當(dāng)前第1頁(yè)12