本發(fā)明涉及用于脂肪分解的套件及瘦身方法。

背景技術(shù)：

肥胖癥源于脂肪細(xì)胞中作為甘油三酯的過量能量的積累。由于肥胖可引起包括動脈硬化的各種疾病并且在美學(xué)上不利，因此強烈需要預(yù)防和改善肥胖。

近來，由于暴飲暴食、缺乏運動、壓力等原因，每年全世界內(nèi)，特別是在發(fā)達(dá)國家，肥胖人群都在增加。他們經(jīng)常因為需要強烈的意志和長時間而放棄減肥或鍛煉。

因此，人們在致力于研發(fā)用于脂肪分解的方法或促進(jìn)脂肪分解的試劑，以預(yù)防和改善肥胖。例如，盡管從天然提取物獲得的成分被用于促進(jìn)脂解，但是效果未必充足，且其中一些有不期望的副作用。尚且，幾乎沒有在脂肪細(xì)胞水平上促進(jìn)脂解作用的研究。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

技術(shù)問題

本發(fā)明涉及提供用于脂肪分解的套件，其通過將光照射到皮膚或皮下脂肪層中的脂肪細(xì)胞來分解脂肪細(xì)胞中的脂肪。

技術(shù)方案

在一個方面，本發(fā)明提供一種用于脂解的套件，其包括：用于照射光的光照射裝置；和用于描述通過照射光來分解脂肪的方法的說明書。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述光可具有大于600nm且等于或小于1500nm的波長。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述光可以為可見光或紅外光。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述光可以具有增強皮膚穿透的圖案。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述說明書可以包括光照射強度、光照射時間、照射裝置與皮膚之間的距離、照射方法和被照射的部分。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述光照射強度可以是1-600J/cm²。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述照射可以進(jìn)行0.5分鐘至6小時。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述照射可以在與皮膚相距0-200cm的距離處進(jìn)行。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述照射可以直接照射進(jìn)行。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述照射可通過使用可接觸皮膚的輔助工具來進(jìn)行。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述照射可在皮膚的皮下脂肪層上進(jìn)行。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述皮膚的皮下脂肪層可包括未分化、正在分化或已分化的脂肪細(xì)胞。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述照射可將脂肪細(xì)胞的甘油三酯分解成甘油。

有益效果

根據(jù)本發(fā)明，脂肪可以安全有效地分解，因為脂肪細(xì)胞中的甘油三酯可以通過照射對身體無害的波長范圍內(nèi)的光而分解。本發(fā)明可以用于瘦身，因為它比現(xiàn)有的脂解方法更經(jīng)濟(jì)且方便。

附圖說明

圖1展示了根據(jù)本發(fā)明的一個示例性的將特定波長的光照射到處于不同分化階段中的脂肪細(xì)胞并測量總甘油三酯(TG)和血清甘油水平的結(jié)果。

圖2展示了根據(jù)本發(fā)明的一個示例性實施例的將特定波長的光照射到已分化的脂肪細(xì)胞并測量總甘油三酯和血清甘油水平的結(jié)果。

圖3展示了根據(jù)本發(fā)明的一個示例性實施例的將特定波長的光照射到已分化的脂肪細(xì)胞并測量脂肪細(xì)胞中的甘油三酯(TG)含量的結(jié)果。

圖4示例性地展示了光的波長和λ_max。

具體實施方式

將2014年4月30日提交的韓國專利申請?zhí)?0-2014-0052315的全部內(nèi)容通過引用并入本發(fā)明。此外，本申請主張韓國專利申請?zhí)?0-2014-0052315的優(yōu)先權(quán)，其全部內(nèi)容通過引用并入本文。

在下文中，詳細(xì)地描述本發(fā)明的具體實施例，以本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地實施本發(fā)明。

本發(fā)明提供一種用于脂肪分解的套件，其包括：用于照射光的光照射裝置；和用于描述通過照射光來分解脂肪的方法的說明書。

在本發(fā)明中，所述光可以為可見光或紅外光。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述光照射裝置可以包括：電源；輸入部；光源；傳感器；控制器；和顯示器，但不限于此。

在本發(fā)明的一個方面，所述輸入部可以為用于輸入照射光所需的光強度、照射時間、光波長和光圖案的部件。所述光源可以產(chǎn)生并照射光線。所述傳感器可以是各種類型，并且可用于測量照射裝置與皮膚之間的距離。所述控制器可控制在輸入部中所輸入的光源的光照射。所述顯示器可以顯示所輸入的數(shù)據(jù)和與皮膚之間的距離。

在本發(fā)明的一方面，所述光源可包括可透射陽光的材料。在本發(fā)明的一方面，所述可透射陽光的材料可以為能讓光穿透的任一種材料。例如，可以使用石英板、使一定范圍內(nèi)的光通過的帶通濾波器等，但不限于此。

在本發(fā)明的一個方面，所述光源可以是發(fā)光二極管(LED)、有機發(fā)光二極管(OLED)、激光二極管(LD)、激光器、無電極燈、碳納米管(CNT)、冷陰極熒光燈(CCFL)、平面熒光燈(FFL)、外部電極熒光燈(EEFL)、白熾燈、鹵素?zé)?、熒光燈、鎢燈、低壓/高壓鈉燈、低壓/高壓汞燈、氙燈、金屬鹵化物燈、HID燈、遠(yuǎn)程光源(例如，光纖或棱鏡光)、氙弧燈等，但不限于此。

在本發(fā)明中，所述光照射裝置是指任何可發(fā)光的裝置。所述光照射裝置還包括本來不旨在用于照射光但可以由本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員容易地修改以照射光的裝置。所述光照射裝置還可以是在醫(yī)院或中醫(yī)診所內(nèi)使用的光治療裝置、或者個人或手持式光照射裝置。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述說明書可以包括光照射強度、光照射時間、照射裝置與皮膚之間的距離、照射方法和被照射部分。在本發(fā)明的一方面，所述說明書可以包括根據(jù)用戶的狀況用于控制光照射強度、照射時間和與皮膚的間距中的一個或多個的信息。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，光照射強度可以是1-600J/cm²。在本發(fā)明的一個示例性實施方式中，所述光照射時間可以為0.5分鐘至6小時。當(dāng)所述照射強度低于1J/cm²或當(dāng)所述照射時間短于0.5分鐘時，從所述照射中所獲的效果可能微不足道。此外，當(dāng)照射強度高于600J/cm²或當(dāng)照射時間長于6小時時，所述照射可能引起皮膚損傷。在本發(fā)明中，所述光照射強度可以為1J/cm²或以上、10J/cm²或以上、50J/cm²或以上、100J/cm²或以上、150J/cm²或以上、200J/cm²或以上、或者250J/cm²或以上，但不限于此。在本發(fā)明中，所述光照射強度可以為600J/cm²或以下、550J/cm²或以下、500J/cm²或以下、450J/cm²或以下、400J/cm²或以下、350J/cm²或以下、或者300J/cm²或以下，但不限于此。在本發(fā)明中，所述光照射時間可以為10分鐘或以上、30分鐘或以上、1小時或以上、1小時30分鐘或以上、2小時或以上、或2小時30分鐘或以上，限于此。在本發(fā)明中，所述光照射時間可以為5小時30分鐘或以下、5小時或以下、4小時30分鐘或以下、4小時或以下、3小時30分鐘或以下、或者3小時或以下，但不限于此。

所述照射裝置與皮膚之間的距離是指由所述照射裝置的傳感器測量的照射裝置的光源與皮膚之間的距離。在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述照射裝置與皮膚之間的距離可以是0-200cm。當(dāng)與皮膚的間距小于0cm時，意味著所述裝置不與皮膚接觸，而是穿透皮膚。此外，當(dāng)所述距離超過200cm時，從所述照射獲得的效果可能微不足道。在本發(fā)明中，所述照射裝置與皮膚之間的距離可以為5cm或以上、10cm或以上、15cm或以上、20cm或以上、25cm或以上、30cm或以上、35cm或以上、40cm或以上、或45cm或以上，但不限于此。在本發(fā)明中，所述照射裝置與皮膚之間的距離可以為170cm或以下、140cm或以下、110cm或以下、80cm或以下、75cm或以下、70cm或以下、65cm或以下、60cm或以下、或55cm或以下，但不限于此。

所述照射可以通過使用選自過濾器、薄片、膜、化妝品、凝膠和霜劑中的一種或多種輔助工具來進(jìn)行。此外，所述照射可以通過使用選自針管、套管和微針中的一種或多種來進(jìn)行。

所述被照射部分可以是任何可累積脂肪的皮膚組織，但眼睛、嘴、性器官和肛門除外。

本發(fā)明還提供一種瘦身方法，其包括：將光照射到皮膚或其皮下脂肪層上。

在本發(fā)明中，所述“瘦身”可指減小身體或其中的部分相對于高度或長度的周長或厚度。此外，所述“瘦身”可指使身體或其中的部分變得纖細(xì)或失去體重。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述脂肪細(xì)胞是指常見的脂肪細(xì)胞，只要它們是儲存脂肪的細(xì)胞就不受限制。它們包含所有的未分化、正在分化和已分化的細(xì)胞。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述皮膚包括表皮、真皮和皮下脂肪層。存在于每個層中的脂肪細(xì)胞可以是本發(fā)明中光照射的靶。

在本發(fā)明的一個示例性實施例中，所述光可以是任何波長的光。此外，所述光可以不發(fā)熱。脂肪分解可僅用光來促進(jìn)。

在本發(fā)明中，所照射的光可以具有大于600nm且等于或小于1500nm的波長。在本發(fā)明中，所照射的光可以具有比大于600nm、605nm或以上、610nm或以上、615nm或以上、620nm或以上、625nm或以上、630nm或以上、640nm或以上、641nm或以上、643nm或以上、645nm或以上、647nm或以上、649nm或以上、650nm或以上、660nm或以上、670nm或以上、680nm或以上、690nm或以上、700nm或以上、710nm或以上、730nm或以上、750nm或以上、770nm或以上、790nm或以上、800nm或以上、850nm或以上、900nm或以上、950以上、1000nm或以上、1000nm或以上、1050nm或以上、1100nm或以上、1150nm或以上、1200nm或以上、1250nm或以上、1300nm或以上、1350nm或以上、1400nm或以上、1450nm或以上、或1500nm或以上的波長。在本發(fā)明中，所照射的光可以具有2000nm或以下、1600nm或以下、1500nm或以下、1450nm或以下、1400nm或以下、1350nm或以下、1300nm或以下、1250nm或以下、1200nm或以下、1150nm或以下、1100nm或以下、1050nm或以下、1000nm或以下、950nm或以下、900nm或以下、850nm或以下、800nm或以下、790或以下、770nm或以下、770nm或以下、750nm或以下、730nm或以下、710nm或以下、700nm或以下、690nm或以下、680nm或以下、670nm或以下、660nm或以下、650或以下、648nm或以下、646nm或以下、644nm或以下、642nm或以下、640nm或以下、635nm或以下、630nm或以下、625nm或以下、620nm或以下、615nm或以下、610nm或以下、605nm或以下、或601nm或以下的波長。更具體地，在本發(fā)明中，所述光可以具有大于600nm且等于或小于700nm的波長。

此外，在本發(fā)明的一方面中，所述光可以是具有上述波長作為最大能量波長(λmax)的光。具體地，在本發(fā)明的一方面，所述光可以具有在λmax±100nm的范圍內(nèi)的波長。更具體地，在本發(fā)明的一方面，所述光可以具有在λmax±90nm或以下、λmax±80nm或以下、λmax±70nm或以下、λmax±60nm或以下、λmax±50nm或以下、λmax±40nm或以下、λmax±30nm或以下、λmax±20nm或以下、λmax±10nm或以下、或λmax±5nm或以下的范圍內(nèi)的波長。例如，在本發(fā)明的一方面，當(dāng)λmax為660nm時，所述光可以具有大于600nm且等于或小于700nm的波長；當(dāng)λmax為740nm時，波長為700-800nm；當(dāng)λmax為850nm時，波長為800-900nm；當(dāng)λmax為940nm時，波長為900-1,000nm；當(dāng)λmax為1050nm時，波長為1,000-1100nm；當(dāng)λmax為1150nm時，波長為1100-1200nm；當(dāng)λmax為1,250nm時，波長為1200-1300nm；當(dāng)λmax為1350nm時，波長為1300-1400nm。

在本發(fā)明中，所述最大能量波長或λmax是指在指定的波長范圍內(nèi)光的能量最高的波長。具體地，對于波長為x軸和光能量為y軸的鐘形正態(tài)分布，λmax表示能量最高(波峰)的波長。例如，在圖4中，由虛線標(biāo)記的波長是對于指定波長范圍內(nèi)的λmax。

在本發(fā)明的一方面，所述照射可以抑制脂肪形成或分解未分化或正在分化的脂肪細(xì)胞中的脂肪，并且還可以分解已分化的脂肪細(xì)胞中的脂肪。對未分化，正在分化或已分化的脂肪細(xì)胞進(jìn)行光照射能提供抑制脂肪形成或分解脂肪的效果。此外，對皮膚或其皮下脂肪層進(jìn)行光照射為處于不同分化階段的皮膚中存在的各種脂肪細(xì)胞提供脂肪分解的效果。

當(dāng)脂肪細(xì)胞是未分化細(xì)胞時，可以在脂肪細(xì)胞分化之前或期間對皮膚或其皮下脂肪層進(jìn)行照射。當(dāng)在分化期間進(jìn)行照射時，可以在任何階段進(jìn)行。照射可以僅進(jìn)行一次、2次或以上。

具體地，可包括如下步驟：在磷酸鹽緩沖液(PBS)培養(yǎng)基中對未分化的脂肪細(xì)胞照射光；在用于分化的組合培養(yǎng)基(cocktail medium)中培養(yǎng)脂肪細(xì)胞1-3天，然后在磷酸鹽緩沖液(PBS)培養(yǎng)基中再次照射光；在胰島素培養(yǎng)基中培養(yǎng)脂肪細(xì)胞2-4天，然后在磷酸鹽緩沖液(PBS)培養(yǎng)基中再次照射光；及包括在胎牛血清(FBS)培養(yǎng)基中培養(yǎng)1-3天的脂肪細(xì)胞，但不限于此。

此外，可包括如下步驟：將未分化的脂肪細(xì)胞培養(yǎng)1-3天，然后在磷酸鹽緩沖液(PBS)培養(yǎng)基中照射光；及在用于分化的組合培養(yǎng)基中培養(yǎng)脂肪細(xì)胞1-3天，在胰島素培養(yǎng)基中培養(yǎng)2-4天，然后在胎牛血清(FBS)培養(yǎng)基中培養(yǎng)1-3天，但不限于此。

此外，可包括如下步驟：將未分化的脂肪細(xì)胞培養(yǎng)1-3天，在組合培養(yǎng)基中培養(yǎng)1-3天，然后在磷酸鹽緩沖液(PBS)培養(yǎng)基中照射光；及在胰島素培養(yǎng)基中培養(yǎng)脂肪細(xì)胞2-4天，然后在胎牛血清(FBS)培養(yǎng)基中培養(yǎng)1-3天，但不限于此。

此外，可包括如下步驟：將未分化的脂肪細(xì)胞培養(yǎng)1-3天，其次在組合培養(yǎng)基中培養(yǎng)1-3天，再次在胰島素培養(yǎng)基中培養(yǎng)2-4天，最后在磷酸鹽緩沖液(PBS)培養(yǎng)基照射光；及在胎牛血清(FBS)培養(yǎng)基中培養(yǎng)1-3天的脂肪細(xì)胞，但不限于此。

通過這些，不僅可以分解未分化脂肪細(xì)胞中的脂肪，還可以抑制未分化細(xì)胞在分化期間內(nèi)的脂肪形成，在以下測試實施例中加以證明。

此外，所述照射可以在脂肪細(xì)胞的分化完成之后進(jìn)行。

具體地，可包括如下步驟：將未分化的脂肪細(xì)胞培養(yǎng)1-3天，將其在組合培養(yǎng)基中培養(yǎng)1-3天，然后在胰島素培養(yǎng)基中培養(yǎng)2-4天，最后在胎牛血清(FBS)培養(yǎng)基中培養(yǎng)1-3天；及在磷酸鹽緩沖液(PBS)培養(yǎng)基中對脂肪細(xì)胞照射光，但不限于此。

也就是說，未分化的脂肪細(xì)胞在混合培養(yǎng)基、胰島素培養(yǎng)基和FBS培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)時會得到分化，然后將光照射到已分化的細(xì)胞上。

當(dāng)光照射已分化的脂肪細(xì)胞時，可以促進(jìn)脂肪細(xì)胞中產(chǎn)生的脂肪的分解，在以下測試實施例中加以證明。

在本發(fā)明中，用于分化的組合培養(yǎng)基不受特別限制，只要其誘導(dǎo)從細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)化為分化即可。例如，它可以是包含選自胎牛血清(FBS)、胰島素、3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX)和地塞米松(DEX)中的一種或多種的培養(yǎng)基。各成分的濃度可以根據(jù)脂肪細(xì)胞的分化條件而不同。具體地，可以使用4.5g/L含葡萄糖的DMEM，其中補充有10％胎牛血清(FBS)、10mg/mL胰島素、0.5mM 3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX)和1mM地塞米松(DEX)。

在本發(fā)明中，胰島素培養(yǎng)基用于在脂肪細(xì)胞中形成脂滴(包膜)，而FBS培養(yǎng)基用于通過將脂肪填充在脂滴中來提供能量。

在本發(fā)明中，可以在脂肪細(xì)胞存在于磷酸鹽緩沖液(PBS)培養(yǎng)基中時進(jìn)行照射，但不會特別受限于此。這是因為，為了促進(jìn)脂肪分解而不受特別限制地對脂肪細(xì)胞照射光是重要的。當(dāng)使用常用的培養(yǎng)基時，由于包含在培養(yǎng)基中的各種成分對光產(chǎn)生干擾、散射等，使得特定波長的光可能無法完全傳遞到脂肪細(xì)胞。相比之下，磷酸鹽緩沖液(PBS)培養(yǎng)基在透射特定波長的光方面是具有優(yōu)勢的，因為阻止了干擾、散射等。

在本發(fā)明中，光照射可以以非侵入性或侵入性方式進(jìn)行。非侵入性照射是將光直接照射到皮膚上的方法，使得照射的光根據(jù)光的波長到達(dá)存在于皮膚深淺處的脂肪細(xì)胞，例如表皮、真皮等。侵入性照射沒有特別限制，只要其是已知的方法即可。例如，針管、套管、微針等可以插入皮膚中，然后可以照射光，使得光到達(dá)存在于例如距離表皮5mm或以上的深度的脂肪細(xì)胞。

此外，當(dāng)照射根據(jù)本發(fā)明的光時，可以向皮膚施加能夠增加光到脂肪細(xì)胞的透射的輔助工具。輔助工具可以是能夠與皮膚接觸的裝置，并且根據(jù)本發(fā)明的光照射可以使用輔助工具來執(zhí)行。此外，當(dāng)根據(jù)本發(fā)明的照射光時，具有增強皮膚滲透的圖案的光可以用于增加光到脂肪細(xì)胞的透射。

在本發(fā)明中，具有特定波長的光的照射能將脂肪細(xì)胞的甘油三酯分解為甘油。當(dāng)甘油三酯分解時實現(xiàn)脂肪分解作用。

根據(jù)本發(fā)明，脂肪可以被安全有效地分解，因為脂肪細(xì)胞中的甘油三酯可以通過照射對身體無害的波長范圍內(nèi)的光而被分解。本發(fā)明可以用于瘦身，因為它比現(xiàn)有的脂肪分解的方法更經(jīng)濟(jì)且方便。

在下文中，將通過實施例詳細(xì)地描述本發(fā)明。然而，以下實施例僅用于說明為目的，本發(fā)明的范圍不受實施例的限制。

【實施例1】整個階段的光照射

1-1.未分化的脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)

從ATCC(CL-173)獲得未分化的小鼠3T3-L1成纖維細(xì)胞。通過使用補充有10％小牛血清(Gibco BRL，NY)的含4.5g/L葡萄糖的DMEM(Dulbecco's modified Eagle's培養(yǎng)基)(PAA，奧地利)，在包含10％CO₂的潮濕孵化器中培養(yǎng)未分化的細(xì)胞(前脂肪細(xì)胞)，美國)。

1-2.向脂肪細(xì)胞的分化

為了分化1-1中獲得的未分化的脂肪細(xì)胞，將培養(yǎng)基更換為補充有10％胎牛血清(FBS；PAA，奧地利)、10mg/mL胰島素(Sigma-Aldrich，St.Louis，USA)，0.5mM 3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX；Sigma-Aldrich，St.Louis，USA)和1mM地塞米松(DEX；Sigma-Aldrich，St.Louis,USA)作為用于分化的組合培養(yǎng)基。待培養(yǎng)2天后，用補充有10％FBS和10mg/mL胰島素的含4.5g/L葡萄糖的DMEM替換所述培養(yǎng)基，然后將細(xì)胞培養(yǎng)3天。然后，將所述細(xì)胞在補充有10％FBS的不含胰島素的含4.5g/L葡萄糖的DMEM中再培養(yǎng)2天。

1-3.光照射

1)在用組合培養(yǎng)基更換所述培養(yǎng)基之前，通過用磷酸鹽緩沖液(PBS；無CaCl₂和MgCl₂，Welgene，韓國)洗滌從1-1中獲得的經(jīng)培養(yǎng)的未分化細(xì)胞(前脂肪細(xì)胞)2次。然后，將細(xì)胞浸入新鮮的PBS中并在包含10％CO₂的潮濕培養(yǎng)箱中用λ_max為660nm、740nm、850nm、940nm、1050nm、1150nm、1250nm或1350nm的光來分別照射1小時。在光照射期間，照射距離為5cm，照射強度為10J/cm²。除了光照射之外，在相同條件下處理對照組(CTL)。

2)待光照射后，將培養(yǎng)基更換為1-2中使用的組合培養(yǎng)基，且將所述細(xì)胞培養(yǎng)2天。

3)將在所述組合培養(yǎng)基中培養(yǎng)48小時的細(xì)胞用PBS洗滌2次，然后浸入在PBS中后，用與1)相同波長的光分別照射1小時。在用胰島素培養(yǎng)基替換蘇所述培養(yǎng)基后，所述細(xì)胞再培養(yǎng)3天。

4)將在所述胰島素培養(yǎng)基中培養(yǎng)3天的細(xì)胞用PBS洗滌2次，然后浸入在PBS中后，用與1)相同波長的光分別照射1小時。在用FBS培養(yǎng)基替換所述培養(yǎng)基后，將所述細(xì)胞培養(yǎng)3天。將所述細(xì)胞用PBS洗滌2次，然后浸入在PBS中后，用與1)中相同波長的光分別照射1小時。

1-4.用于測量甘油三酯和甘油的培養(yǎng)基的回收

待在1-3的光照射后，將所培養(yǎng)的細(xì)胞用PBS洗滌2次。為了測量被洗脫到培養(yǎng)基中的總甘油三酯和甘油，將所述細(xì)胞在補充有2％牛血清白蛋白(BSA；Sigma-Aldrich,St.Louis,USA)的含1,000mg/L葡萄糖并營養(yǎng)受限的DMEM(PAA，奧地利)。然后，從所述對照組(CTL)和用λ_max為660nm、740nm、850nm、940nm、1,050nm、1150nm、1250nm和1350nm的光處理過的測試組中回收培養(yǎng)基。

【實施例2】分化后的光照射

2-1.未分化的脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)

根據(jù)與實施例1-1相同的方式獲得未分化的細(xì)胞。

2-2.向脂肪細(xì)胞的分化

根據(jù)與實施例1-2相同的方式，將未分化的細(xì)胞分化成脂肪細(xì)胞。

2-3.光照射

將2-2中所獲得的分化脂肪細(xì)胞浸入PBS中，并在與1-4相同的營養(yǎng)受限的培養(yǎng)基中用λ_max為660nm、740nm、850nm、940nm、1050nm、1150nm、1250nm或1350nm的光來照射6小時。在光照射期間，照射距離為5cm，照射強度為10J/cm²。

2-4.用于測量甘油三酯和甘油的培養(yǎng)基的回收

根據(jù)與實施例1-4相同的方式，從所述對照組(CTL)和用λ_max為660nm、740nm、850nm、940nm、1,050nm、1150nm、1250nm和1350nm的光處理過的測試組中回收培養(yǎng)基。

【測試實施例1】從細(xì)胞洗脫到培養(yǎng)基中的總甘油三酯和甘油的測量

通過使用甘油三酯試劑(Sigma-Aldrich，USA)和游離甘油試劑(Sigma-Aldrich，USA)，測量在實施例1和2中經(jīng)光照射后所回收的營養(yǎng)受限的培養(yǎng)基中洗脫出來的甘油三酯和甘油的量。甘油的量是通過混合游離甘油試劑和培養(yǎng)基并在孵化15分鐘后測量在540nm波長的吸光度來確定的。使用脂肪酶間接地測量被洗脫的甘油三酯的量。首先，通過使用脂肪酶，將被洗脫的甘油三酯分解為甘油和脂肪酸，然后測量甘油的量。通過從該測量值中減去脂肪酶處理前已被洗脫的甘油的量，來計算被洗脫的甘油三酯的量。

圖1和表1中展示了實施例1的結(jié)果，且在圖2和表2中展示了實施例2的結(jié)果。在表1和表2中，每個照射波長的結(jié)果為相對于作為100％的對照組(CTL)的相對百分比(％)。在圖、圖2、表1和表2中，所述波長值為λmax's。

【表1】

【表2】

從圖1和表1中可見，當(dāng)在整個分化階段用光照射所述細(xì)胞時，在所有波長下或脂肪分解的作用。特別地，當(dāng)用λmax為660nm的光照射所述細(xì)胞時，獲得最高的脂肪分解效果(與所述對照組相比，被洗脫的甘油三酯的量增加至150.4％，且被洗脫的甘油的量增加至160.6％)。即使當(dāng)照射λmax為1350nm的光時，獲得最低的脂解效果，而與所述對照組相比，被洗脫的甘油三酯的量為115.2％，且被洗脫的甘油的量為121.2％。所有這些結(jié)果均具有統(tǒng)計學(xué)意義。此外，如圖2和表2所示，在分化完成后用光照射所述細(xì)胞時，在所有波長下獲得脂肪分解作用。特別地，當(dāng)用λmax為660nm的光照射所述細(xì)胞時，獲得最高的脂肪分解效果(與所述對照組相比，被洗脫的甘油三酯的量增加至約219.8％，且被洗脫的甘油的量增加至333.3％)。即使當(dāng)用λmax為1350nm的光照射時，獲得最低的脂肪分解效果，而與對照組相比，被洗脫的甘油三酯的量為139.6％且被洗脫的甘油的量為181.5％，這些均具有統(tǒng)計學(xué)意義。由此確定，對完成分化的脂肪細(xì)胞照射本發(fā)明的光也提供了非常顯著的脂肪分解作用。所有這些結(jié)果均具有統(tǒng)計學(xué)意義。

【測試實施例2】細(xì)胞中殘留的甘油三酯的測量

將在測試實施例1中回收營養(yǎng)受限的培養(yǎng)基后所剩余的細(xì)胞，在室溫下用3.7％甲醛溶液(Sigma-Aldrich，St.Louis，USA)處理24小時來進(jìn)行固定。然后，通過加入1mL的在100mL丙二醇(Sigma-Aldrich,St.Louis,USA)中溶解有0.5g油紅O(ORO；Sigma-Aldrich，St.Louis，USA)的溶液，來對所述細(xì)胞染色1小時。在從ORO染色的細(xì)胞中除去殘余染料并用蒸餾水洗滌3次，然后加入500mL異丙醇(IPA；Sigma-Aldrich，St.Louis，USA)，從染色的細(xì)胞中提取染料1小時。在490nm處測量ORO被提取的IPA的吸光度。其結(jié)果在圖3和表3中展示。在表3中，所述結(jié)果為相對于作為100％的對照組(CTL)的相對百分比(％)。在表3和圖3中，波長值為λmax's。

【表3】

如圖3和表3所示，由于殘留在分化脂肪細(xì)胞中的甘油三酯在所有波長下都有減少，因此可確認(rèn)具有脂肪分解效果。當(dāng)照射λmax為660nm的光時，獲得最高的脂肪分解效果，而與對照組相比，殘留在脂肪細(xì)胞中的甘油三酯的量降低至50.3％，這具有統(tǒng)計學(xué)意義。即使當(dāng)照射λmax為1350nm的光時，獲得最低的脂肪分解效果，與對照組相比，殘留在脂肪細(xì)胞中的甘油三酯的量降低至79.8％，這具有統(tǒng)計學(xué)意義。所有這些結(jié)果均具有統(tǒng)計學(xué)意義。

從測試實施例1和2的結(jié)果中可確認(rèn)，通過向正在分化或已分化的脂肪細(xì)胞照射特定波長的光，可以顯著地將脂肪細(xì)胞中的甘油三酯分解成甘油的效果，并顯著地將脂肪細(xì)胞中甘油三酯從所述細(xì)胞中洗脫出來的效果。由此可見，本發(fā)明的光照射能夠提供脂肪分解效果。