本發(fā)明屬于保健食品領(lǐng)域，具體涉及一種包含葛根和玉竹的降血糖保健組合物及其制劑和用途。
背景技術(shù)：
：糖尿病(diabetesmellitus，DM)是一組由遺傳和環(huán)境因素相互作用而引起的臨床綜合征，由于胰島素分泌絕對或相對不足以及靶組織細(xì)胞對胰島素敏感性降低，引起糖、脂肪、蛋白質(zhì)等代謝紊亂，以高血糖為主要標(biāo)志，導(dǎo)致一系列臨床表現(xiàn)。糖尿病是一種常見的多病因的有遺傳傾向的內(nèi)分泌代謝紊亂性疾病，隨著生活水平的提高，其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，成為繼癌癥、心腦血管疾病之后危害人體健康的第三殺手。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的最新資料顯示，在未來15年中，中國的糖尿病患者人數(shù)將達(dá)到目前的4倍，全世界糖尿病患者人數(shù)將是現(xiàn)在的2倍。我國1997年完成的有關(guān)糖尿病流行病學(xué)調(diào)查課題顯示，全國糖尿病發(fā)病率從1980年的1％上升到3.2％，北京市的發(fā)病率為4％以上，更為嚴(yán)重的是60歲以上的老年人中糖尿病的發(fā)病率超過11％。2012年的最新研究報告顯示，我國糖尿病人位居全球第一。在西方發(fā)達(dá)國家糖尿病的情況也較為嚴(yán)重，美國估計約有1600萬以上的糖尿病患者，約占人口總數(shù)的6％。糖尿病屬中醫(yī)的“消渴”或“消癉”范疇?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)將糖尿病主要分為兩種類型：一類是I型的胰島素依賴型(TDDM)，以遺傳因素為主，多發(fā)生于青少年。另一類為II型的非胰島素依賴型(NIDDM)，因胰島素抵抗及胰島素分泌相對不足或延遲，導(dǎo)致血糖升高，病程長者可出現(xiàn)糖尿病的并發(fā)癥，多發(fā)于成年或中老年人。在所有糖尿病患者中，90％以上是患II型糖尿病。目前，糖尿病的治療除用胰島素外還配用一些口服降糖藥物，如：磺酰脲類、二甲雙胍類、α-葡萄糖苷酶抑制劑、噻唑烷酮等。西藥治療效果雖然比較明顯，但副作用大，如易造成低血糖、乳酸中毒、腸道不適等。盡管胰島素療法和口服降糖藥能極大地降低糖尿病患者的死亡率，但病人會產(chǎn)生多種并發(fā)癥，有些并發(fā)癥在一定程度上比糖尿病本身更能致人于死地。因此，對于糖 尿病，目前尚無很好的根治療法。該病如得不到控制，將會導(dǎo)致嚴(yán)重慢性并發(fā)癥進(jìn)而致殘致死。因此，加強(qiáng)糖尿病的防治措施已受到世界各國的重視，研究防治糖尿病的新型藥物和保健食品是國內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域的前沿課題。非藥物性治療糖尿病已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、食品科學(xué)研究的熱點之一。盡管國內(nèi)外很多大的企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)，爭相研究和開發(fā)降糖藥物或者替代產(chǎn)品，但大多都因價格昂貴、載體不理想、效果不穩(wěn)定或者服用麻煩而不被人們認(rèn)可和接受。此外，高血壓、高血脂也是近年來困擾人們的“現(xiàn)代文明病”，對人體健康的危害極大，對其防治的困難與糖尿病類似。高血壓是一種以動脈壓異常升高為主要特征的心血管疾病。病因分為原發(fā)性高血壓和繼發(fā)性高血壓。前者占高血壓的90％，稱為高血壓病(hypertension)?！?999年WHO/ISH指南》將高血壓定義為：未服抗高血壓藥物情況下，收縮壓＞18.7kpa和舒張壓＞12.0kpa，并根據(jù)血壓升高的程度、危險因素的數(shù)量、靶器官損害的程度以及并存的臨床情況把高血壓分為三期：(1)輕度高血壓：無器官損害客觀條件；(2)中度高血壓：至少有一項器官損害表現(xiàn)(左心室肥厚，視網(wǎng)膜動脈變窄，蛋白尿和血肌酐升高，超聲檢查有動脈硬化斑塊)；(3)重度高血壓：出現(xiàn)器官損害的臨床表現(xiàn)(心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、短暫腦缺血發(fā)作、腦卒中、高血壓腦病、視網(wǎng)膜出血、血肌酐＞l0mmol/L及腎功能衰竭、動脈閉塞性疾病)。本病屬于中醫(yī)的“眩暈”、“頭痛”等范疇。高脂血癥(hyperlipemia)又稱高脂蛋白血癥，可表現(xiàn)為膽固醇血癥、高三酰甘油血癥或兩者兼有，它與動脈粥樣性硬化、糖尿病、脂肪肝、腎病等關(guān)系十分密切。尤其在心腦血管病的發(fā)病中有重要的地位而日益引起人們的重視。中醫(yī)認(rèn)為高脂血癥屬“濁阻”、“痰濕”、“肥胖”、“濕熱”等范疇。高血糖、高血壓、高血脂(“三高”)病因復(fù)雜，目前病因尚不完全明確，西醫(yī)一般認(rèn)為其主要是由遺傳因素、環(huán)境因素、高胰島素血癥和胰島素抵抗、肥胖、脂代謝異常等相互影響所致。目前雖然西醫(yī)治療的療效比較肯定，但對合并癥及其并發(fā)癥的治療困難較大，同時會導(dǎo)致程度不同的副作用，患者往往難以忍受，不能堅持治療。中醫(yī)對上述疾病的認(rèn)識和防治，則是從整體調(diào)理、辨證論治入手，雖然沒有西藥快速，但通過整體調(diào)理，癥狀和指標(biāo)都會得到有效控制，同時能夠有效保護(hù)靶器官等。從臨床上看，往往是高血脂、高血糖、高血壓合并出現(xiàn)，互為因果?？茖W(xué)研究證明，輕度的長期的慢性高血糖就可以導(dǎo)致所有慢性并發(fā)癥的發(fā)生，而長期血壓增高，同樣導(dǎo)致各 種心腦血管系統(tǒng)疾病的發(fā)生。最近，更多的研究結(jié)果證實，為了達(dá)到防止和延緩并發(fā)癥發(fā)生和發(fā)展的目的，應(yīng)該十分強(qiáng)調(diào)多種因素的控制，例如在II型糖尿病中，除了嚴(yán)格控制血糖、血壓水平之外，還應(yīng)該采取嚴(yán)格控制血脂水平，嚴(yán)格控制體重，常規(guī)抗凝治療等措施，以進(jìn)一步降低大血管病變的風(fēng)險。但截至目前能夠同時預(yù)防或治療“三高”的中藥組合物了了無幾，能夠取得滿意的療效且患者依從性高的藥物組合物更是鮮有報道，因此，研究開發(fā)能夠同時預(yù)防和治療“三高”的安全有效的藥物，是當(dāng)務(wù)之急，迫在眉睫。近些年來，從天然產(chǎn)物中尋找新的有生理活性的成分或先導(dǎo)化合物以開發(fā)新藥或保健食品基科已成為全球關(guān)注和研究的熱點。尋求降糖、降壓和降脂食物資源并對其功能因子進(jìn)行剖析，進(jìn)而開發(fā)生產(chǎn)出降血糖、降血壓、降血脂食品的保健食品基料可望成為治療這些疾病的好途徑。葛根(PuerariaeRadix)為豆科植物野葛的干燥根，習(xí)稱野葛。秋、冬二季采挖，味甘、辛，性涼。具有解肌退熱、透疹、生津止渴、升陽止瀉之功，常用于表證發(fā)熱、項背強(qiáng)痛、麻疹不透、熱病口渴、陰虛消渴、熱瀉熱痢以及脾虛泄瀉?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，葛根具有擴(kuò)張冠脈血管和改善心肌缺血缺氧狀態(tài)、降血壓、降血糖、抑制血小板聚集β-受體阻斷、改善腦血循環(huán)等作用。玉竹(Polygonatumodoratum(Mill.)Druce)，為百合科多年生草本植物。原產(chǎn)中國西南地區(qū)，但野生分布很廣。耐寒，亦耐陰，喜潮濕環(huán)境，適宜生長于含腐殖質(zhì)豐富的疏松土壤?！侗静萁?jīng)集注》云“莖干強(qiáng)直，似竹箭桿，有節(jié)”，故有玉竹之名。植物的根莖可供藥用。玉竹具養(yǎng)陰、潤燥、清熱、生津、止咳等功效，可用作滋補(bǔ)藥品，主治熱病傷陰、虛熱燥咳、心臟病、糖尿病、結(jié)核病等癥，并可作高級滋補(bǔ)食品、佳肴和飲料，具有保健作用。雖然目前生產(chǎn)具有降糖功能的藥物及替代產(chǎn)品種類繁多，但兼具降血糖、降血壓和降血脂功能的主要包含葛根和玉竹的保健品至今未見報道。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明人經(jīng)廣泛搜集探索民間降糖驗方、在浩瀚的藥食原材料中，經(jīng)過長期的研究和實踐，意外的獲得了一種兼具降血糖、降血壓和降血脂功能、包含葛根和玉竹的保健組合物，從而克服了現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺陷。根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了一種包含葛根和玉竹的保健組合物，其中二者的重量百分比為1-99％的葛根和1-99％的玉竹。在本發(fā)明的一個實施方案中，葛根和玉竹的重量百分比為20-80％的葛根和20-80％的玉竹。優(yōu)選的，葛根和玉竹的重量百分比可以為30-70％的葛根和30-70％的玉竹。進(jìn)一步優(yōu)選的，葛根和玉竹的重量百分比可以為40-60％的葛根和40-60％的玉竹。在本發(fā)明的另一個實施方案中，所述保健組合物中還可以包含陳皮、山藥、青錢柳葉、茯苓、石斛中的一種或其任意組合，所述葛根、玉竹與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為1-98％∶1-98％∶1-98％。優(yōu)選的，葛根、玉竹與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為10-80％∶10-80％∶10-80％。進(jìn)一步優(yōu)選的，葛根、玉竹與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為20-60％∶20-60％∶20-60％。更優(yōu)選的，葛根、玉竹與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為35％∶35％∶30％。在本發(fā)明的又一個實施方案中，上述保健組合物中還可包含選自由枸杞子、黃精、昆布、烏梅、桑白皮、人參、三七、女貞子、山茱萸、川芎、蒼術(shù)、玄參、生地黃、白芍、當(dāng)歸、紅景天、西洋參、蘆薈、五味子、麥門冬、制大黃、知母、蒺藜、銀杏葉、黃芪、絞股藍(lán)、苦瓜、苦蕎麥、南瓜、魔芋、芹菜、玉米須、銀耳、猴頭菇和大蒜所組成的組中的一種或更多種。在本發(fā)明中，所述保健組合物可以通過本領(lǐng)域任何常規(guī)的制備方法進(jìn)行制備。根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，提供了所述保健組合物在制備輔助治療高血糖、高血壓或高血脂保健組合物方面的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的再一個方面，提供了一種含有所述保健組合物的藥物制劑。本發(fā)明的保健組合物可以根據(jù)需要和藥學(xué)上可接受的輔料制備成任何合適的口服制劑用于降血糖、降血壓或降血脂的治療。在本發(fā)明一個優(yōu)選的實施方案中，所述口服制劑可以為片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、泡騰劑、袋泡劑等劑型。在本發(fā)明一個優(yōu)選的實施方案中，所述藥學(xué)上可接受的輔料例如可以選自預(yù)膠化淀粉、β-環(huán)糊精、卡波姆、微晶纖維素、羥丙基甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素、聚乙二醇(PEG)、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、乙基纖維素、甘露醇、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、乳糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、硬脂酸鎂、滑石粉、微粉硅膠、阿斯巴甜、碳酸氫鈉、碳酸鈉中的一種或更多種。本發(fā)明中各主要原料藥的功效活性葛根：味甘、辛，性涼。歸肺、胃經(jīng)。具有解肌退熱、透疹、生津止渴、升陽止瀉之功效，用于表證發(fā)熱、項背強(qiáng)痛、麻疹不透、熱病口渴、陰虛消渴、熱瀉熱痢、脾虛泄瀉等癥。玉竹：養(yǎng)陰、潤燥、清熱、生津、止咳，可用作滋補(bǔ)藥品，主治熱病傷陰、虛熱燥咳、心臟病、糖尿病、結(jié)核病等癥。陳皮：味苦、辛，性溫；歸肺、脾經(jīng)；具有理氣健脾，燥濕化痰之功效，用于脘腹脹滿、食少吐瀉、咳嗽痰多等癥。山藥：味甘、性平，歸脾、肺、腎經(jīng)；具有補(bǔ)脾養(yǎng)胃，生津益肺，補(bǔ)腎澀精之功效，用于治療脾虛、久瀉、肺虛、腎虛、帶下、尿頻等癥。石斛：性味甘淡微咸，寒，歸胃、腎，肺經(jīng)；具有益胃生津，滋陰清熱之功效，用于陰傷津虧、口干煩渴、食少干嘔、病后虛熱、目暗不明。青錢柳葉：味微苦、辛，性平。具有健脾化濕、清熱通腑、疏肝理氣、滋陰補(bǔ)腎的作用，對因脾運不健、痰濁、嗜食肥甘厚味、懶動、腹?jié)M積食、肝淤氣滯而致的肥胖，有良好的改善。本發(fā)明的技術(shù)方案具有如下優(yōu)勢：本發(fā)明的保健組合物以天然藥物為基礎(chǔ)，無毒副作用，使患者在正常飲食的情況下，自覺地維護(hù)血糖穩(wěn)定，獲得糖尿病的非藥物治療效果，具有療效明確、協(xié)同作用明顯和易于大眾服用等優(yōu)點；本發(fā)明在制備保健組合物時還考慮到糖尿病患者的營養(yǎng)平衡和代謝問題，同時也適用于高血壓和高血脂患者的預(yù)防和治療。具體實施方式下面將進(jìn)一步的詳細(xì)說明本發(fā)明。需要指出的是，以下說明僅僅是對本發(fā)明要求保護(hù)的技術(shù)方案的舉例說明，并非對這些技術(shù)方案的任何限制。本發(fā)明的保護(hù)范圍以所附權(quán)利要求書記載的內(nèi)容為準(zhǔn)。實施例1配方組成：葛根1.0kg、玉竹9.0kg。制備方法：2.1按照上述配方準(zhǔn)確稱取各味中藥，用清水清洗干凈，煮沸提取2次；第一次加12倍量水，提取2小時，第二次加10倍量水，提取1小時，100目過濾；2.2合并提取液，過濾，濾液濃縮至60℃熱測相對密度1.05-1.08，備用；2.3將濾液加入噴霧干燥機(jī)中，首先預(yù)熱塔溫，待進(jìn)風(fēng)溫度達(dá)210℃±10℃后開始進(jìn)料；進(jìn)料后要進(jìn)行流量、風(fēng)速的調(diào)節(jié)，將出風(fēng)溫度控制在95℃±5℃，得提取物粉末，用雙層潔凈塑料袋包裝密封粉末；2.4將提取物粉末與甘露糖醇，混合3-5分鐘；2.5將混合物料以70％食用酒精潤濕制軟材，過20目，得濕顆粒，濕顆粒烘干得干顆粒；2.6以20目和60目篩網(wǎng)整粒，取小于20目和大于60目的干顆粒按3g/袋進(jìn)行分裝，即得。實施例21、配方組成：葛根2.0kg、玉竹5.0kg、山藥3.0kg。2、制備方法：同實施例1。實施例31、配方組成：葛根3.5kg、玉竹3.5kg、青錢柳葉3.0kg。2、制備方法：同實施例1。實施例41、配方組成：葛根6.0kg、玉竹2.0kg、陳皮2.0kg。2、制備方法：同實施例1。實施例51、配方組成：葛根8.0kg、玉竹1.0kg、茯苓1.0kg。2、制備方法：同實施例1。實施例61、配方組成：葛根1.0kg、玉竹1.0kg、山藥1.0kg、枸杞子1.0kg、青錢柳葉1.0kg、麥門冬1.0kg、制大黃1.0kg、五味子1.0kg、魔芋1.0kg、猴頭菇1.0kg。2、制備方法：同實施例1。對比例1選取葛根10kg按實施例1中的制備方法制得的樣品作為對比例1。對比例2選取玉竹10kg按實施例1中的制備方法制得的樣品作為對比例2。對比例3選取茯苓10kg按實施例1中的制備方法制得的樣品作為對比例3。本發(fā)明的范圍并不局限于以上實施例，上述實施例中的各組分均可選自市售商品，通過本領(lǐng)域常規(guī)的制劑工藝，可以制成藥劑學(xué)上所說的多種劑型，例如膠囊劑、顆粒劑、粉劑、片劑、口服液、袋泡荼等。實驗例1：降血糖實驗1、材料和方法1.1樣品及試劑：實施例1-6以及對比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；鏈脲佐菌素，SIGMA公司產(chǎn)品，規(guī)格：1g/支，批號：SLBJ7785V；胰島素檢測試劑盒，進(jìn)口分裝，南京建成生物工程公司，20141022；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號：C13102005-1；高脂飼料配方(79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油)，苦味酸等。1.2儀器W-80A漩渦混合器，上海醫(yī)大儀器廠產(chǎn)品；電子天平，mettlerToledo，madebymettler-toledogroup，型號：p1303；LDZ5-2離心機(jī)，北 京醫(yī)用離心機(jī)廠；強(qiáng)生穩(wěn)豪血糖儀(強(qiáng)生(中國)醫(yī)療器材有限公司)；BECKMANSynchronCX5全自動血液生化分析儀(美國)；酶標(biāo)儀，bio-rad(美國)，型號：iMark；DCA2000型糖化血紅蛋白分析儀，為德國拜耳公司產(chǎn)品；其他：臺秤、固定籠等。1.3實驗動物SPF級SD大鼠，體重160～180g，雄性，由南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號：SCXK(粵)2011-0015。動物于SPF級屏障級動物房飼養(yǎng)，動物使用許可證號為：SYXK(粵)2012-0081。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠的劑量，劑量是以生藥量計。1.5統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗，p＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)差異。2.方法與結(jié)果2.1方法2.1.1大鼠飼料普通飼料：玉米粉80％，面粉15％，黃豆粉5％；高脂飼料：79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油。2.1.2造模：取160-180gSPF級SD大鼠110只，雄性，體重160～180g，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后取10只作為正常對照組，以正常飼料喂養(yǎng)，其它各組先用高脂飼料喂養(yǎng)1個月，抽查血脂指標(biāo)明顯升高后，腹腔注射STZ35mg/kg誘發(fā)糖尿病模型(STZ臨用前用0.1mmol/LpH＝4.5的檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖液配成6mg/mL的溶液，且在60min內(nèi)用完)。于注射后第7d，斷尾采集空腹靜脈血，以血糖儀測定血糖，將血糖值大于等于16.7mmol/L視為建模成功。模型穩(wěn)定后，根據(jù)血脂血糖高低分組，口服給予受試藥物以及對照藥物，觀察各項指標(biāo)。2.1.3分組與給藥：選取狀態(tài)較好的100只造模成功動物按照血糖值和體重均勻分成10組：每組10只，即II型糖尿病模型對照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。正常不造模的SD大鼠10只為正常對照組(給予蒸餾水)。各組按相應(yīng)劑量口服給藥，每天給藥1次，給藥周期：4周(4W)。2.2測定指標(biāo)2.2.1使用血糖儀分別測定給藥前以及給藥后2W和4W血糖值。2.2.2檢測血清胰島素、糖化血紅蛋白含量。2.2.4糖耐量試驗：于實驗結(jié)束前兩天進(jìn)行檢測；糖耐量檢測：動物禁食約6小時，各組給予不同濃度受試樣品，15-20分鐘后經(jīng)口給予葡萄糖2.0g/kg，測定給葡萄糖后0、0.5、2小時的血糖值，觀察模型對照組與受試樣品組給葡萄糖后各時間點血糖曲線下面積的變化。血糖曲線下面積＝1/2×(0小時血糖值+0.5小時血糖值)×0.5+1/2×(2小時血糖值+0.5小時血糖值)×1.5＝0.25×(0小時血糖值+4×0.5小時血糖值+3×2小時血糖值)。2.3結(jié)果2.3.1對II型糖尿病大鼠血糖的影響由表1可見，與正常對照組比較，給藥前糖尿病造模各組大鼠血糖顯著升高，表明糖尿病模型造模成功。給藥2w后，與模型對照組比較，S1-S6組和D1組血糖均有下降。給藥4w后，S1-S6組和D1組血糖均有下降。表1.樣品對II型糖尿病大鼠血糖的影響注：與正常對照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型組比較：＊p＜0.05，＊＊p＜0.012.3.2對II型糖尿病大鼠血清胰島素和糖化血紅蛋白的影響由表2可見，與正常對照組比較，模型對照組喂高脂飼料和糖尿病造模后，大鼠血清胰島素明顯降低(p＜0.01)，糖化血紅蛋白明顯升高(p＜0.01)，表明高脂血癥大鼠模型造模成功。與模型對照組比較，S1-S6組和D1組血清胰島素均有增加。與模型對照組比較，S1-S6組和D1組糖化血紅蛋白均有下降(與模型組比較P＜0.05)。表2.樣品對II型糖尿病大鼠血清胰島素和糖化血紅蛋白的影響組別n胰島素(mmol/L)糖化血紅蛋白(mmol/L)正常對照組1018.65±3.193.73±0.84模型對照組108.35±2.70##9.69±1.58##S1組1012.45±2.16*6.35±1.53*S2組1012.63±2.34*6.47±1.32*S3組1013.52±1.90**6.10±1.29**S4組1012.52±2.69*6.51±1.26*S5組1012.68±2.07*6.67±1.35*S6組1012.75±2.64*6.72±1.31*D1組1012.08±2.07*6.85±1.25*D2組1010.07±2.838.48±2.42D3組109.90±2.928.67±2.35注：與正常對照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型組比較：＊p＜0.05，＊＊p＜0.012.3.3對II型糖尿病大鼠糖耐量試驗結(jié)果由表3可見，與模型對照組比較，S1-S6組和D1組的血糖曲線下面積均有下降。表3.樣品對II型糖尿病大鼠糖耐量試驗結(jié)果組別n血糖曲線下面積正常對照組1014.53±1.25模型對照組1036.64±6.73##S1組1030.13±6.87*S2組1030.55±6.70*S3組1026.95±5.45**S4組1028.95±6.82*S5組1030.35±6.73*S6組1030.32±6.71*D1組1031.44±5.83*D2組1034.42±5.78D3組1035.02±6.13注：與正常對照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型對照組比較：p均大于0.05.3.結(jié)論：S1-S6和D1對糖尿病模型大鼠具有明顯的降血糖作用，且S1-S6的組合物在降血糖方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。實驗例2：降血脂實驗1、材料和方法1.1藥品及試劑：實施例1-6以及對比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號：C13102005-1；高脂飼料配方(79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油)，蒸餾水、苦味酸，等。1.2儀器W-80A漩渦混合器，上海醫(yī)大儀器廠產(chǎn)品；電子天平，mettlerToledo，madebymettler-toledogroup，型號：pl303；LDZ5-2離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠；BECKMANSynchronCX5全自動血液生化分析儀(美國)；其他：臺秤、固定籠等。1.3實驗動物SPF級SD大鼠，體重160～180g，雄性，由南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號：SCXK(粵)2011-0015。動物于SPF級屏障級動物房飼養(yǎng)，動物使用許可證號為：SYXK(粵)2012-0081。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠的劑量，劑量是以生藥量計。1.5統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗，p＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)差異。2.方法與結(jié)果2.1分組與方法取SPF級SD大鼠110只，雄性，體重160～180g，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后取10只作為正常對照組，以正常飼料喂養(yǎng)；剩余給予高脂飼料喂養(yǎng)。連續(xù)喂養(yǎng)4周(通過定時抽血檢測血脂四項來確定造模是否成功)后，選取狀態(tài)較好的100只造模成功動物按照血脂數(shù)值和體重均勻分成10組：每組10只，即高脂血癥模型對照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。高脂飼料喂養(yǎng)4周后按以上分組情況開始給藥并繼續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料(正常對照組喂養(yǎng)普通飼料)，每天1次，連續(xù)給藥4w。末次給藥后，隔夜禁食，次日稱量體重后，水合氯醛麻醉，下腔靜脈采血后處死。離心后取上清液測血清中的生化指標(biāo)。2.2檢測指標(biāo)：(1)一般狀況觀察，并記錄每周體重。(2)各組大鼠血清脂質(zhì)指標(biāo)：每兩周眼眶靜脈叢取血，分離血清檢測：總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。2.3結(jié)果2.3.1對血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的影響表4.造模成功均勻分組后大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)組別nTCTGHDL-CLDL-C(mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)正常對照組101.28±0.191.67±0.720.60±0.060.31±0.03模型對照組101.98±0.32##2.22±0.41##0.61±0.080.46±0.09##S1組102.01±0.342.20±0.370.59±0.070.46±0.07S2組102.10±0.352.23±0.530.60±0.100.45±0.09S3組101.96±0.392.21±0.600.58±0.090.45±0.08S4組101.98±0.332.19±0.590.60±0.110.46±0.08S5組102.11±0.232.24±0.600.59±0.080.46±0.10S6組102.06±0.342.19±0.480.58±0.070.45±0.07D1組102.05±0.382.23±0.560.61±0.100.44±0.08D2組101.94±0.472.21±0.530.60±0.090.47±0.10D3組101.93±0.382.20±0.570.59±0.080.45±0.05注：與正常對照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型對照組比較：p均大于0.05.表5.給藥4W后各組大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)注：與正常對照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型組比較：＊p＜0.05，＊＊p＜0.01由表4可見，與正常對照組比較，模型對照組喂高脂飼料4W后，大鼠血清TC、LDL-C顯著升高(p＜0.01)，TG明顯升高(p＜0.05)，表明高脂血癥大鼠模型造模成功。根據(jù)血脂水平均勻分成4組。由表5可見，給藥4W后，與模型對照組比較，S1-S6組和D1組能降低血清中TC、TG、LDL-C水平(p＜0.05或p＜0.01)。3.結(jié)論：S1-S6和D1對高脂血癥模型大鼠有明顯的降血脂作用，且S1-S6的組合物在降血脂方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。實驗例3：降血壓實驗1、材料和方法1.1藥品及試劑：實施例1-6以及對比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號：C13102005-1；蒸餾水，苦味酸，等。1.2儀器DKB-501A型超級恒溫水槽，為上海森信實驗儀器有限公司產(chǎn)品；電熱恒溫干燥箱，為長沙醫(yī)療器械廠產(chǎn)品；Powlab/4spML125型無創(chuàng)測壓系統(tǒng)(ML125/RNIBP，MLT1199BPTrans-ducer/CableKit)，澳大利亞埃德儀器有限公司產(chǎn)品；MP120-1電子天平，為上海第二天平儀器廠產(chǎn)品。1.3實驗動物SPF級SHR大鼠，體重190～230g，雄性，由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，合格證號：SCXK(京)2012-0001。動物于SPF級屏障級動物房飼養(yǎng)，動物使用許可證號為：SYXK(粵)2012-0081，SPF級WISTAR雄性大鼠，北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號為：SCXK(京)2012-0001。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠的劑量，劑量是以生藥量計。1.5統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗，p＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)差異。2.方法與結(jié)果將9-10周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)隨機(jī)分10組，每組10只，即高血壓模型對照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。另取正常WISTAR大鼠10只為正常對照組(給予蒸餾水)。各組動物分別灌胃給予各種劑量藥物，每天1次，共給藥4周。分別于給藥前以及給藥后4周以無創(chuàng)尾動脈測壓系統(tǒng)檢測大鼠尾動脈血壓值(收縮壓，SAP，mmHg)。無創(chuàng)尾套法(NIBP)：將大鼠放入大鼠固定器內(nèi)，露出鼠尾。用紅外取暖器，溫度設(shè)置為38℃，照射加熱鼠尾大約10min后，鼠尾變軟，鼠尾動 脈充分?jǐn)U張。將其穿過加壓尾套并固定在鼠尾的根部，使大鼠尾動脈與PowerlabML125/R無創(chuàng)尾動脈血壓測定分析系統(tǒng)的脈搏傳感器緊密接觸，同時觀測系統(tǒng)的脈搏波形，出現(xiàn)穩(wěn)定的脈搏波時即可開始測定血壓。待動物安靜后，選擇90～420BPM(大鼠加壓檔)給尾套充氣加壓，可見脈搏波逐漸減小至消失，然后尾套開始放氣，鼠套壓力降低，當(dāng)壓力等于收縮壓時，開始出現(xiàn)脈搏波，此點的血壓值即為鼠尾收縮壓。重復(fù)測量3次，取平均值。計算壓降值(血壓下降值)，給藥后SAP減去給藥前SAP得。結(jié)果見表6：表6樣品對SHR大鼠血壓(SAP，mmHg)的影響注：與正常對照組比較：#為P＜0.01；與模型對照組比較：＊為P＜0.05.結(jié)果表明，與正常對照組比較，模型對照組大鼠血壓顯著升高，可見自發(fā)性高血壓大鼠模型成功。與模型對照組，S1-S6組和D1組在給藥4W能顯著降低SHR大鼠的血壓(P＜0.05)。3.結(jié)論：S1-S6和D1樣品有顯著的降血壓作用，且S1-S6的組合物在降血壓方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。本
發(fā)明內(nèi)容僅僅舉例說明了要求保護(hù)的一些具體實施方案，其中一個或更多個技術(shù)方案中所記載的技術(shù)特征可以與任意的一個或多個技術(shù)方案相組合，這些經(jīng)組合而得到的技術(shù)方案也在本申請保護(hù)范圍內(nèi)，就像這些經(jīng)組合而得到的技術(shù)方案已經(jīng)在本發(fā)明公開內(nèi)容中具體記載一樣。當(dāng)前第1頁1 2 3