本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種黃芪提取物的用途。

背景技術(shù)：

慢性腎臟病(Chronickidneydisease，CKD)在美國(guó)腎臟病基金會(huì)(NKF)制定的臨床實(shí)踐指南(K/DOQI)的基礎(chǔ)上，國(guó)際腎臟病學(xué)會(huì)提高腎臟病整體預(yù)后工作組(KDIGO)明確提出了CKD的定義:(1)腎臟損傷(腎臟結(jié)構(gòu)或功能異常)≥3個(gè)月，伴或不伴有腎小球?yàn)V過(guò)率(GFR)下降，腎臟病理學(xué)檢查異常或腎臟損傷(血、尿成分或影像學(xué)檢查異常)；(2)eGFR<60ml·min-1·(1.73m²)^-1≥3個(gè)月，有或無(wú)腎臟損傷證據(jù)。

慢性腎臟病是絕大多數(shù)的腎臟疾病(諸如腎小球腎炎、隱匿性腎炎、腎盂腎炎、過(guò)敏性紫癜腎炎、紅斑狼瘡腎炎、痛風(fēng)腎、IgA腎病、腎病綜合征、膜性腎病、糖尿病腎病、高血壓腎病、多囊腎腎病)的臨床統(tǒng)稱；除了急性腎炎和急性尿路感染(腎臟急性炎癥性疾病)外，都可以歸屬慢性腎臟病的范圍；本病是一個(gè)緩慢發(fā)展相對(duì)良性的疾病(或共同的臨床病理過(guò)程)；但若未能及時(shí)有效診治，均可導(dǎo)致病情惡化進(jìn)展或隨病程遷延，發(fā)展成為慢性腎功能不全、腎衰竭，最終形成尿毒癥。

由于慢性腎臟病發(fā)病特點(diǎn)有“三高”(發(fā)病率高、伴發(fā)的心血管病患病率高、病死率高)“三低”(全社會(huì)對(duì)慢性腎臟病的知曉率低、防治率低、伴發(fā)心血管病的知曉率低)，已經(jīng)成為全球性公共健康問(wèn)題。

美國(guó)從2000年開(kāi)始啟動(dòng)了腎臟早期評(píng)價(jià)計(jì)劃目的在于通過(guò)對(duì)高危人群的早期篩查來(lái)提高CKD患病的知曉率并改善其臨床預(yù)后。該研究是通過(guò)對(duì)高血壓、糖尿病患者或高血壓、糖尿病及原發(fā)腎臟病患者的一級(jí)親屬應(yīng)用媒體召集符合條件的人群到指定地點(diǎn)接受篩查，CKD的篩查項(xiàng)目有尿常規(guī)、尿微量白蛋白及血肌酐，并應(yīng)用腎疾病飲食修正公式計(jì)算有效的GFR，2003年發(fā)表結(jié)果顯示6071例被調(diào)查者中有效的GFR下降、蛋白尿及血尿的檢出率分別是15.6％、29.3％、18.1％。

目前，中國(guó)衛(wèi)生系統(tǒng)目前缺乏CKD的流行病學(xué)數(shù)據(jù)，有關(guān)醫(yī)生缺少腎臟病學(xué)知識(shí)，致使CKD患者在出現(xiàn)明顯的臨床癥狀之前，往往已經(jīng)歷了較長(zhǎng)的無(wú)癥狀階段，如果不是體檢或及時(shí)的篩查，很難做到發(fā)現(xiàn)相對(duì)早期的CKD患者并及時(shí)給予治療，這無(wú)疑給家庭和社會(huì)額外增加了巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。我國(guó)CKD的流行病學(xué)調(diào)查概況2004年初我國(guó)首個(gè)較完備的中老年人群CKD流行病學(xué)研究是對(duì)北京市石景山地區(qū)2353例>40歲常住居民進(jìn)行問(wèn)卷凋查、腎臟損傷指標(biāo)(尿常規(guī)、血肌醉，尿沉渣)及相關(guān)危險(xiǎn)因素(血壓、血糖和血脂)的檢測(cè)，根據(jù)國(guó)際公認(rèn)的CKD的診斷標(biāo)準(zhǔn)，分析發(fā)現(xiàn)人群CKD患病率為9.4％，知曉率為8.3％。近年來(lái)我國(guó)各地陸續(xù)開(kāi)展了針對(duì)城鎮(zhèn)居民和部分農(nóng)村人群的CKD流行病學(xué)研究，部分調(diào)查結(jié)果顯示我國(guó)大部分區(qū)成年人CKD的患病率在9％～14％，其中白蛋白尿患病率5％～10％，腎功能下降[eGFR<60ml·min-1·(1.73m²)^-1]患病率1％～5％，血尿各地報(bào)道差異較大，從1.4％～8.94％，CKD知曉率8.2％～12.5％。多項(xiàng)研究提示我國(guó)CKD的主要危險(xiǎn)因素:年齡增加、高血壓、血糖或血脂異常及代謝綜合征等。

在美國(guó)，雖然CKD患者只占醫(yī)療人群的7％，但其醫(yī)療費(fèi)用卻占了醫(yī)療預(yù)算費(fèi)用總額的24％，而中國(guó)CKD患病形勢(shì)嚴(yán)峻，北京大學(xué)腎疾病研究所對(duì)北京市石景山地區(qū)的流行病學(xué)調(diào)查示>40歲人群CKD患病率達(dá)9.4％。據(jù)此推算，中國(guó)>40歲人群CKD患者達(dá)4400萬(wàn)，如果其中1％發(fā)展為終末期腎病而需要血液凈化治療，則每年需要醫(yī)療費(fèi)用達(dá)500億元人民幣為2004年中國(guó)政府健康預(yù)算的25倍，可見(jiàn)CKD已成為影響中國(guó)國(guó)民健康的主要疾病，有效防治CKD關(guān)系到中國(guó)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)的發(fā)展以及和諧社會(huì)的構(gòu)建。

從慢性腎臟病發(fā)展到終末期腎臟病，延緩其發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的治療過(guò)程，早預(yù)防、早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，延緩腎功能損害的進(jìn)展，并積極預(yù)防并發(fā)癥的治療，必要時(shí)及時(shí)開(kāi)始行腎臟替代治療。

病因治療：我國(guó)終末期腎病的首位病因是原發(fā)性腎小球疾病及一些繼發(fā)性腎小球疾，疾病的治療多以傳統(tǒng)的免疫抑制藥物如激素、環(huán)磷酰胺等治療為主，并考慮疾病的免疫反應(yīng)類型及分階段采取針對(duì)性治療。

延緩腎衰竭進(jìn)展的治療：除病因治療外，積極延緩腎衰進(jìn)展的措施也是重要的一方面，延緩慢性腎衰竭進(jìn)展的治療措施主要有控制血壓、阻斷RAS系統(tǒng)、降脂治療、飲食治療等。(1)積極降高血壓：眾所周知，高血壓是加 速CKD進(jìn)展的最重要危險(xiǎn)因素。阻斷RAS可以延緩CKD進(jìn)展，常用的藥物有ACEI或ARB類。(2)積極降脂：慢性腎臟病中，脂質(zhì)代謝異常也相當(dāng)常見(jiàn)。他汀類藥物尚有改善內(nèi)皮細(xì)胞功能、抗炎、T、B淋巴細(xì)胞功能等作用。(3)控制蛋白質(zhì)攝入：攝入過(guò)多蛋白質(zhì)會(huì)加重腎臟負(fù)擔(dān)，導(dǎo)致腎功能損害。尤其當(dāng)腎功能不全時(shí)可加劇殘存腎單位的損害，應(yīng)該以優(yōu)質(zhì)低蛋白飲食為主。(4)戒煙、限酒、控制體質(zhì)量等糾正不良生活方式，糾正貧血、調(diào)節(jié)鈣磷代謝；另外，加強(qiáng)衛(wèi)生宣傳教育和健康普查工作，也是延緩CKD不可缺少的重要內(nèi)容。

替代治療：進(jìn)入終末期后，及時(shí)行腎臟替代治療是唯一有效的方法，主要包括腹膜透析、血液透析、腎臟移植。透析治療目前透析作為一種常規(guī)治療手段已非常普及和成熟，但是有其局限性，只能清除體內(nèi)水分和部分毒素，糾正酸堿代謝紊亂，但是腎臟的大分子排泄、重吸收、內(nèi)分泌功能均不能被替代。

腎臟移植：腎臟移植是目前最理想的替代療法，手術(shù)方式的改進(jìn)和免疫抑制劑的發(fā)展已使腎臟移植的成功率大大提高。

中醫(yī)文獻(xiàn)中無(wú)慢性腎臟病的名詞，在慢性腎臟病的臨床表現(xiàn)屬中醫(yī)水腫、尿血、腰痛、虛勞、癃閉、溺毒、關(guān)格的范疇。目前中醫(yī)醫(yī)者認(rèn)為CKD屬本虛標(biāo)實(shí)、虛實(shí)夾雜之證。本虛以脾、腎氣血陰陽(yáng)的虧虛為主，標(biāo)實(shí)則以濕、熱、瘀、濁、毒為甚。治療上，從扶正、祛邪、攻補(bǔ)兼施等不同角度入手，可謂百家爭(zhēng)鳴。

目前中醫(yī)治療CKD主要分為以下幾類：1、扶正為主，如楊霓芝將CKD3，4期分為本虛證與標(biāo)實(shí)證，本虛證分別應(yīng)用香砂六君子湯、參芪地黃丸、六味地黃丸合二至丸、濟(jì)生腎氣丸、金匱腎氣丸加減，標(biāo)實(shí)證均在本虛證的基礎(chǔ)上加減用藥。2、祛邪為主，如張琳以解毒六法治療CKD:①疏風(fēng)解毒法，治療風(fēng)毒致病，常用疏風(fēng)清熱解毒藥物。②利濕化毒法，治療濕(水)毒致病，輕者芳香化濕，用平胃散、藿樸夏苓湯、半夏瀉心湯；水凌心肺，以真武湯、己椒藶黃丸、獨(dú)參湯加減；水停胸脅，以葶藶大棗瀉肺湯為主；水停腹中，方選實(shí)脾飲加減；水毒泛濫周身，宜疏鑿飲子化裁。③清熱解毒法，用于熱/火毒致病，常用黃連解毒湯、白虎湯、五味消毒飲等。④活血散毒法，治療瘀毒致病，如桃紅四物湯、川牛膝、澤蘭、益母草、三棱、莪術(shù)、水蛭等。⑤化痰 蠲毒法，適于痰毒致病，尿毒癥期痰毒蒙蔽神竅則宜芳香化濁、豁痰醒神，如菖蒲郁金湯、滌痰湯之屬。⑥降濁排毒法，利尿排濁常用五苓散、濟(jì)生腎氣丸加減；降逆泄?jié)嵊锰K葉黃連湯、吳茱萸湯、溫脾湯加減；和胃泄?jié)釀t以黃連溫膽湯加減。3、攻補(bǔ)兼施，如葉傳蕙將CKD的治療總結(jié)為5種大法:①消法，包括解表散邪法，用于風(fēng)水證；清熱解毒法，用于外邪客于肺系導(dǎo)致的病情加重；清熱祛濕法，用于濕熱阻滯證候者。②通法，包括通利水道法，用于水腫病證；化瘀通絡(luò)法，用于腎絡(luò)瘀阻的證候，此法為貫穿腎臟病始終的治療大法；通腑降濁法，用于急、慢性腎衰之溺毒潴溜的證候。③補(bǔ)法，包括健脾益氣法、氣陰雙補(bǔ)法、滋陰益腎法、益腎補(bǔ)精法、溫陽(yáng)補(bǔ)腎法，用于治療腎臟病陰虧損的證侯。④固法，包括益氣固表法、固腎攝精法。⑤和法，用于腎臟病出現(xiàn)虛實(shí)夾雜、寒熱錯(cuò)雜的證候，運(yùn)用較廣。4、分期施治，如戴希文認(rèn)為氣虛、濕瘀是CKD1～5期共見(jiàn)的證候，治療以益氣活血利濕法為主。對(duì)CKD早期的患者，用藥體現(xiàn)出對(duì)驅(qū)除外感風(fēng)熱毒邪的重視；對(duì)于CKD后期的患者，用藥著重于對(duì)內(nèi)停水濕濁毒的滲利以及氣血的調(diào)補(bǔ)。

中醫(yī)藥治療慢性腎臟病主要以復(fù)方應(yīng)用為主，單方應(yīng)用如雷公藤等有文獻(xiàn)報(bào)道。而傳統(tǒng)中藥黃芪在治療CKD過(guò)程中起到重要作用，多個(gè)文獻(xiàn)報(bào)道組方中均含有黃芪藥材，謝紅萍發(fā)表了“黃芪注射液治療慢性腎臟病的臨床觀察”，結(jié)果顯示黃芪注射液有一定的延緩CKD發(fā)展的作用，未見(jiàn)黃芪單藥材或提取物臨床口服治療CKD的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明提供一種黃芪提取物的用途。實(shí)驗(yàn)證明該黃芪提取物可以抑制慢性腎炎NF-κB表達(dá)，進(jìn)一步影響IL-6，TNF-α,TGF-β1,MCP-1水平，減少蛋白尿。因此，黃芪提取物可以作為抑制慢性腎臟病NF-κB的活性組分，可制備治療慢性腎臟病的藥物。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種黃芪提取物在制備NF-κB表達(dá)抑制劑中的應(yīng)用；所述黃芪提取物的制備方法為取黃芪經(jīng)溶劑提取、濃縮、大孔樹(shù)脂吸附、洗脫、收集洗脫液，干燥。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物在制備NF-κB表達(dá)抑制劑中的應(yīng)用中所述溶劑提取為30％～90％醇回流或超聲提取。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物在制備NF-κB表達(dá)抑制劑中的應(yīng)用中所述濃縮為常壓或減壓濃縮至20℃～25℃時(shí)的相對(duì)密度為0.85～1.25。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物在制備NF-κB表達(dá)抑制劑中的應(yīng)用中所述大孔樹(shù)脂吸附選用的樹(shù)脂為AB-8、D101或ZTC-1。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物在制備NF-κB表達(dá)抑制劑中的應(yīng)用中所述洗脫采用水或10％～90％醇洗脫。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物在制備NF-κB表達(dá)抑制劑中的應(yīng)用中所述干燥為常壓干燥或減壓干燥。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物在制備NF-κB表達(dá)抑制劑中的應(yīng)用中所述黃芪提取物包括毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷，所述黃芪提取物中毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷的含量為0.1mg/g-50mg/g。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物在制備NF-κB表達(dá)抑制劑中的應(yīng)用中所述黃芪為蒙古黃芪或膜莢黃芪。

在本發(fā)明一些具體實(shí)施方案中，所述藥物以毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷計(jì)，施藥劑量為1～20mg/kg。

在本發(fā)明一些具體實(shí)施方案中，所述藥物包括毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷及藥學(xué)上可接受的輔料。

在本發(fā)明一些具體實(shí)施方案中，所述藥物的劑型包括顆粒劑、膠囊劑、片劑、注射劑、口服液、丸劑、散劑。

本發(fā)明還提供了一種黃芪提取物用于制備IL-6、TNF-α、TGF-β1或MCP-1表達(dá)抑制劑的應(yīng)用；所述黃芪提取物的制備方法為取黃芪經(jīng)溶劑提取、濃縮、大孔樹(shù)脂吸附、洗脫、收集洗脫液，干燥。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備IL-6、TNF-α、TGF-β1或MCP-1表達(dá)抑制劑的應(yīng)用中所述溶劑提取為30％～90％醇回流或超聲提取。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備IL-6、TNF-α、TGF-β1或MCP-1表達(dá)抑制劑的應(yīng)用中所述濃縮為常壓或減壓濃縮至20℃～25℃時(shí)的相對(duì)密度為0.85～1.25。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備IL-6、TNF-α、TGF-β1或MCP-1表達(dá)抑制劑的應(yīng)用中所述大孔樹(shù)脂吸附選用的樹(shù)脂為AB-8、D101或ZTC-1。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備IL-6、TNF-α、TGF-β1或MCP-1表達(dá)抑制劑的應(yīng)用中所述洗脫采用水或10％～90％醇洗脫。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備IL-6、TNF-α、TGF-β1或MCP-1表達(dá)抑制劑的應(yīng)用中所述干燥為常壓干燥或減壓干燥。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備IL-6、TNF-α、TGF-β1或MCP-1表達(dá)抑制劑的應(yīng)用中所述黃芪提取物包括毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷，所述黃芪提取物中毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷的含量為0.1mg/g-50mg/g。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備IL-6、TNF-α、TGF-β1或MCP-1表達(dá)抑制劑的應(yīng)用中所述黃芪為蒙古黃芪或膜莢黃芪。

在本發(fā)明一些具體實(shí)施方案中，所述藥物以毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷計(jì)，施藥劑量為1～20mg/kg。

在本發(fā)明一些具體實(shí)施方案中，所述藥物包括毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷及藥學(xué)上可接受的輔料。

在本發(fā)明一些具體實(shí)施方案中，所述藥物的劑型包括顆粒劑、膠囊劑、片劑、注射劑、口服液、丸劑、散劑。

一種黃芪提取物用于制備預(yù)防和/或治療慢性腎臟病藥物中的應(yīng)用；所述黃芪提取物的制備方法為取黃芪經(jīng)溶劑提取、濃縮、大孔樹(shù)脂吸附、洗脫、收集洗脫液，干燥。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備預(yù)防和/或治療慢性腎臟病藥物中的應(yīng)用中所述溶劑提取為30％～90％醇回流或超聲提取。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備預(yù)防和/或治療慢性腎臟病藥物中的應(yīng)用中所述濃縮為常壓或減壓濃縮至20℃～25℃時(shí)的相對(duì)密度為0.85～1.25。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備預(yù)防和/或治療慢性腎臟病藥物中的應(yīng)用中所述大孔樹(shù)脂吸附選用的樹(shù)脂為AB-8、D101或ZTC-1。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備預(yù)防和/或治療慢性腎臟病藥物中的應(yīng)用中所述洗脫采用水或10％～90％醇洗脫。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備預(yù)防和/或治療慢性腎臟病藥物中的應(yīng)用中所述干燥為常壓干燥或減壓干燥。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備預(yù)防和/或治療慢性腎臟病藥物中的應(yīng)用中所述黃芪提取物包括毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷，所述黃芪提取物中毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷的含量為0.1mg/g-50mg/g。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，黃芪提取物用于制備預(yù)防和/或治療慢性腎臟病藥物中的應(yīng)用中所述黃芪為蒙古黃芪或膜莢黃芪。

在本發(fā)明一些具體實(shí)施方案中，所述藥物以毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷計(jì)，施藥劑量為1～20mg/kg。

在本發(fā)明一些具體實(shí)施方案中，所述藥物包括毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷及藥學(xué)上可接受的輔料。

在本發(fā)明一些具體實(shí)施方案中，所述藥物的劑型包括顆粒劑、膠囊劑、片劑、注射劑、口服液、丸劑、散劑。

本發(fā)明提供了一種黃芪提取物在制備NF-κB抑制劑中的應(yīng)用。黃芪提取物為黃芪藥材經(jīng)過(guò)提取獲得的含有黃酮與皂苷組分的混合物，具有治療慢性腎臟病的功效。經(jīng)本發(fā)明實(shí)驗(yàn)證明黃芪提取物可以抑制慢性腎炎NF-κB表達(dá)，進(jìn)一步影響IL-6，TNF-α,TGF-β1,MCP-1水平，減少蛋白尿。因此，黃芪提取物可以作為抑制慢性腎臟病NF-κB的活性組分，可制備治療慢性腎臟病的藥物。

附圖說(shuō)明

為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹。

圖1示黃芪提取物與黃芪注射液指紋圖譜比較；其中，圖1(A)示黃芪提取物；圖1(B)示黃芪注射液；

圖2示黃芪提取物對(duì)慢性腎臟病大鼠NF-κB表達(dá)的影響；其中，圖2(A)示電泳圖，1示正常組；2示模型組；3示陽(yáng)性藥物組；4示黃芪提取物高劑量組；5示黃芪提取物中劑量組；6示黃芪提取物低劑量組；圖2(B)示柱形圖；

圖3示黃芪提取物對(duì)慢性腎臟病模型大鼠IL-6的影響；

圖4示黃芪提取物對(duì)慢性腎臟病模型大鼠TNF-α的影響；

圖5示黃芪提取物對(duì)慢性腎臟病模型大鼠TGF-β1的影響；

圖6示黃芪提取物對(duì)慢性腎臟病模型大鼠MCP-1的影響；

圖7示黃芪提取物對(duì)慢性腎臟病模型大鼠病理組織圖；其中，A示空白對(duì)照組、B示模型組、C示鹽酸貝那普利組、D示黃芪提取物低劑量組、E示黃芪提取物低劑量組、F示黃芪提取物低劑量組。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明公開(kāi)了一種黃芪提取物的用途，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動(dòng)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過(guò)較佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對(duì)本文所述的方法和應(yīng)用進(jìn)行改動(dòng)或適當(dāng)變更與組合，來(lái)實(shí)現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。

本發(fā)明提供的一種黃芪提取物的用途中所用原料及試劑均可由市場(chǎng)購(gòu)得。本專利獲得國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81273723,81473633)、江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目支持。

下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明：

實(shí)施例1黃芪提取物的制備

(1)提取

黃芪飲片50kg，用50％的含水乙醇250L按照常規(guī)方法回流得提取液，提取液減壓濃縮后過(guò)濾，取濾液備用；

(2)純化

將上述濾液進(jìn)行D101大孔吸附樹(shù)脂吸附，用水洗脫除去雜質(zhì)后，用60％的含水乙醇洗脫，收集60％乙醇洗脫液；

(3)濃縮干燥

洗脫液按常規(guī)減壓濃縮，干燥，即得黃芪提取物8.5kg；

(4)含量測(cè)定

黃芪甲苷 色譜條件C₁₈(4.6*250mm 5μm)；乙腈水(32:68)為流動(dòng)相，流速1ml/min，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)，流速1.60L/min；蒸發(fā)管溫度90℃；霧化器溫度50℃；柱溫35℃。

取本實(shí)施例中黃芪提取物約1g，精密稱定，加甲醇40m1使溶解，溶液回收溶劑并濃縮至干，殘?jiān)铀?0ml，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次40ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)铀?m1使溶解，放冷，通過(guò)D101型大孔吸附樹(shù)脂柱(內(nèi)徑為1.5cm，柱高為12cm)，以水50m1洗脫，棄去水液，再用40％乙醇30rnl洗脫，棄去洗脫液，繼用70％乙醇80ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

以黃芪甲苷為對(duì)照，精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl，供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，本品按干燥品計(jì)算，含黃芪甲苷(C₂₂H₂₂0₁₀)1.35％。

毛蕊異黃酮葡萄糖苷 照高效液相色譜法(附錄ⅥB)測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)性A，以O(shè).1％甲酸溶液為流動(dòng)相B(30:70)洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm。理論板數(shù)按毛蕊異黃酮葡萄糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

對(duì)照品溶液的制備 取毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備 取本品粉末(過(guò)四號(hào)篩)約1g，精密稱定.置圓底燒瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流4小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至jml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注人液相色譜儀，測(cè)定，即得。

本品按干燥品計(jì)算，含毛蕊異黃酮葡萄糖苷(C₂₂H₂₂O₁₀)不得少于0.85％。

實(shí)施例2黃芪提取物的制備

(1)提取

黃芪飲片50kg，300L70％乙醇按照常規(guī)回流法得提取液，提取液減壓回收乙醇，濃縮后過(guò)濾，取濾液備用；

(2)純化

將上述濾液進(jìn)行AB8大孔吸附樹(shù)脂吸附，用水洗脫除去雜質(zhì)后，用50％的含水乙醇洗脫，收集50％乙醇洗脫液；

(3)濃縮干燥

洗脫液按常規(guī)減壓濃縮，干燥，即得黃芪提取物7.2kg；

(4)含量測(cè)定

參照實(shí)施例1項(xiàng)下含量測(cè)定方法，測(cè)得黃芪提取物中黃芪甲苷含量0.92％，毛蕊異黃酮葡萄糖苷0.76％。

實(shí)施例3黃芪提取物的制備

(1)提取

黃芪飲片50kg，用30％的含水乙醇250L按照常規(guī)方法回流得提取液，提取液減壓濃縮至25℃時(shí)的相對(duì)密度為0.85，過(guò)濾，取濾液備用；

(2)純化

將上述濾液進(jìn)行D101大孔吸附樹(shù)脂吸附，用水洗脫除去雜質(zhì)后，用10％的含水乙醇洗脫，收集10％乙醇洗脫液；

(3)濃縮干燥

洗脫液按常規(guī)減壓濃縮，干燥，即得黃芪提取物8.5kg；

(4)含量測(cè)定

黃芪甲苷 色譜條件C₁₈(4.6*250mm 5μm)；乙腈水(32:68)為流動(dòng)相，流速1ml/min，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)，流速1.60L/min；蒸發(fā)管溫度90℃；霧化器溫度50℃；柱溫35℃。

取本實(shí)施例中黃芪提取物約1g，精密稱定，加甲醇40m1使溶解，溶液回收溶劑并濃縮至干，殘?jiān)铀?0ml，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖 提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次40ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)铀?m1使溶解，放冷，通過(guò)D101型大孔吸附樹(shù)脂柱(內(nèi)徑為1.5cm，柱高為12cm)，以水50m1洗脫，棄去水液，再用40％乙醇30rnl洗脫，棄去洗脫液，繼用70％乙醇80ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

以黃芪甲苷為對(duì)照，精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl，供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，本品按干燥品計(jì)算，含黃芪甲苷(C₂₂H₂₂0₁₀)1.35％。

毛蕊異黃酮葡萄糖苷 照高效液相色譜法(附錄ⅥB)測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)性A，以0.1％甲酸溶液為流動(dòng)相B(30:70)洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm。理論板數(shù)按毛蕊異黃酮葡萄糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

對(duì)照品溶液的制備 取毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備 取本品粉末(過(guò)四號(hào)篩)約1g，精密稱定.置圓底燒瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流4小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至jml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注人液相色譜儀，測(cè)定，即得。

本品按干燥品計(jì)算，含毛蕊異黃酮葡萄糖苷(C₂₂H₂₂O₁₀)不得少于0.85％。

黃芪提取物中毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷的含量為0.1mg/g。

實(shí)施例4黃芪提取物的制備

(1)提取

黃芪飲片50kg，用90％的含水乙醇250L按照常規(guī)方法回流得提取液，提取液減壓濃縮至20℃時(shí)的相對(duì)密度為1.25過(guò)濾，取濾液備用；

(2)純化

將上述濾液進(jìn)行ZTC-1大孔吸附樹(shù)脂吸附，用水洗脫除去雜質(zhì)后，用90％的含水乙醇洗脫，收集90％乙醇洗脫液；

(3)濃縮干燥

洗脫液按常規(guī)減壓濃縮，干燥，即得黃芪提取物8.5kg；

(4)含量測(cè)定

黃芪甲苷 色譜條件C₁₈(4.6*250mm 5μm)；乙腈水(32:68)為流動(dòng)相，流速1ml/min，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)，流速1.60L/min；蒸發(fā)管溫度90℃；霧化器溫度50℃；柱溫35℃。

取本實(shí)施例中黃芪提取物約1g，精密稱定，加甲醇40m1使溶解，溶液回收溶劑并濃縮至干，殘?jiān)铀?0ml，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次40ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)铀?m1使溶解，放冷，通過(guò)D101型大孔吸附樹(shù)脂柱(內(nèi)徑為1.5cm，柱高為12cm)，以水50m1洗脫，棄去水液，再用40％乙醇30rnl洗脫，棄去洗脫液，繼用70％乙醇80ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

以黃芪甲苷為對(duì)照，精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl，供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，本品按干燥品計(jì)算，含黃芪甲苷(C₂₂H₂₂0₁₀)1.35％。

毛蕊異黃酮葡萄糖苷 照高效液相色譜法(附錄ⅥB)測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)性A，以O(shè).1％甲酸溶液為流動(dòng)相B(30:70)洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm。理論板數(shù)按毛蕊異黃酮葡萄糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

對(duì)照品溶液的制備 取毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備 取本品粉末(過(guò)四號(hào)篩)約1g，精密稱定.置圓底燒瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流4小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至jml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注人液相色譜儀，測(cè)定，即得。

本品按干燥品計(jì)算，含毛蕊異黃酮葡萄糖苷(C₂₂H₂₂O₁₀)不得少于0.85％。

黃芪提取物中毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷和/或黃芪甲苷的含量為50mg/g。

實(shí)施例5黃芪提取物與黃芪注射液指紋圖譜比較

1、試驗(yàn)材料

1.1儀器

Waters SNAPT G2UPLC-Q-Tof-MS液相色譜聯(lián)用儀，采用電噴霧電離(ESI)；Masslynx 4.1工作站(美國(guó)Waters公司)；ACQUITYUPLC BEH C18柱(2.1mm×100mm，1.7μm)；梅特勒-托利多AL204電子分析天平(瑞士)；Milli-Q超純水裝置；KQ 3200B型超聲發(fā)生器(昆山市超聲儀器有限公司)；DFT－200粉碎機(jī)(浙江溫嶺市林大機(jī)械有限公司)。

1.2試藥

黃芪注射液購(gòu)于正大青春寶藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20121220，水為超純水；其他試劑為分析純。

2.1方法與結(jié)果

2.1供試品溶液的制備

取黃芪注射液，0.22μm微孔濾膜后作為供試品溶液。

2.2色譜條件

流動(dòng)相A為乙腈溶液；流動(dòng)相B為0.1％甲酸水溶液，梯度洗脫：0～2.0min，2％A→15％A，2.0～8.0min，15％A→30％A，8.0～13.0min 30％A→50％A，13.0～19.0min，50％A→100％A，19.0～19.5min，100％A→2％A，19.5～20.0min，2％A，流速：0.3mL·min^-1；柱溫：30℃；進(jìn)樣體積:2μL。

2.3質(zhì)譜條件

使用ESI離子源，在正離子模式模式下采集數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)采集范圍m/z100～1500。離子源參數(shù)ESI：毛細(xì)管電壓：2500V，樣品錐電壓40V，脫溶劑室溫度450℃，離子源溫度120℃，錐孔氣體流量50L·h^-1，脫溶劑氣(N₂)體積流量800L·h^-1。

3結(jié)果

結(jié)果見(jiàn)圖1，從圖中可以看出本實(shí)施例所得到的提取物指紋圖譜明顯區(qū)別于黃芪注射液以及類似的黃芪水提取物。

對(duì)圖1進(jìn)行分析，結(jié)果見(jiàn)表1，由表1可以看出，黃芪提取物中化學(xué)成分與常見(jiàn)黃芪水提物化學(xué)成分具有顯著不同，黃芪提取物中鑒別出16個(gè)化學(xué)成分，黃芪水提物中鑒別出7個(gè)化學(xué)成分。

表1黃芪提取物與黃芪水提物成分對(duì)比表

實(shí)施例6黃芪提取物在降低慢性腎臟病炎癥中的作用

阿霉素模型是研究人類早期慢性腎臟病的經(jīng)典模型(參見(jiàn)文獻(xiàn)：魏明剛,孫偉,陳繼紅，等雷至膠囊對(duì)阿霉素腎病模型基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制物的作用，時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(2):399-401.)病理主要表現(xiàn)為腎小球微小病變?yōu)橹?隨著病情的進(jìn)展表現(xiàn)為腎小球局灶階段性硬化為主,最終導(dǎo)致腎臟纖維化和腎功能衰竭。病變發(fā)生與足細(xì)胞損傷、大量蛋白尿和腎臟實(shí)質(zhì)的纖維化息息相關(guān)。因此選擇阿霉素慢性腎炎模型研究黃芪提取物對(duì)腎臟病的防治作用。

1、試驗(yàn)材料

1.1實(shí)驗(yàn)儀器

IL-6、TNF-α、TGF-β1、MCP-1檢測(cè)試劑盒(森貝伽，南京)，SpectraMax190酶標(biāo)儀(Molecular devices，美國(guó))NF-κB抗體(碧云天)。

1.2供試樣品

取實(shí)施例1制備黃芪提取物，將提取物用0.5％CMCNa溶液配制成相應(yīng)濃度。

2試驗(yàn)動(dòng)物

成年雄性SD大鼠，體質(zhì)量(220±20)g(上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)。

3試驗(yàn)方法

成年雄性SD大鼠32只，體質(zhì)量(220±20)g，購(gòu)入后適應(yīng)飼養(yǎng)1周，普通飲食，自由飲水，1周后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、鹽酸貝那普利組、黃芪提取物組。各組一次性尾靜脈注射0.2％阿霉素溶液，每只按照6mg/kg劑量，進(jìn)行造模，對(duì)照組注射等量生理鹽水。第2周確定造模成功后，灌胃黃芪提取物，按照5g/kg、2.5g/kg、1.25g/kg計(jì)算藥物濃度和使用量。8周后摘取病變腎臟進(jìn)行組織提取，Western blot測(cè)定其中NF-κB表達(dá)水平。取血液進(jìn)行IL-6、TNF-α、TGF-β1、MCP-1含量測(cè)定。

4試驗(yàn)結(jié)果

4.1 NF-κB表達(dá)水平的影響結(jié)果見(jiàn)圖2。其中，圖2(A)示電泳圖；圖2(B)示柱形圖。

研究結(jié)果表明，阿霉素造模后大鼠腎組織中NF-κB表達(dá)水平提高至正常組189.66％，接受黃芪提取物高、中、低劑量治療后，NF-κB表達(dá)水平下降為正常組的98.56％，147.00％和178.60％，其中中劑量組具有顯著性差異(P＜0.05)，高劑量組具有極顯著性差異(P＜0.01)。

4.2 IL-6、TNF-α、TGF-β1、MCP-1含量測(cè)定見(jiàn)表2，具體見(jiàn)圖3、圖4、圖5、圖6所示。

表2黃芪提取物對(duì)炎癥因子的影響

研究結(jié)果表明，阿霉素造模后大鼠腎組織中炎癥因子IL-6表達(dá)水平由正常組72(ng·L^-1)提升至118(ng·L^-1)，接受黃芪提取物高、中、低劑量治療后，IL-6表達(dá)水平下降至85(ng·L^-1)、98(ng·L^-1)、106(ng·L^-1)，其中中劑量組 具有顯著性差異(P＜0.05)，高劑量組具有極顯著性差異(P＜0.01)。炎癥因子TGF-β1表達(dá)水平由正常組1107(ng·L^-1)提升至1590(ng·L^-1)，接受黃芪提取物高、中、低劑量治療后，TGF-β1表達(dá)水平下降至1261(ng·L^-1)、1384(ng·L^-1)、1493(ng·L^-1)，其中中劑量組具有顯著性差異(P＜0.05)，高劑量組具有極顯著性差異(P＜0.01)。炎癥因子TNF-α表達(dá)水平由正常組110(ng·L^-1)提升至169(ng·L^-1)，接受黃芪提取物高、中、低劑量治療后，IL-6表達(dá)水平下降至119(ng·L^-1)、130(ng·L^-1)、146(ng·L^-1)，其中中劑量組具有顯著性差異(P＜0.05)，高劑量組具有極顯著性差異(P＜0.01)。炎癥因子MCP-1表達(dá)水平由正常組1327(ng·L^-1)提升至1998(ng·L^-1)，接受黃芪提取物高、中、低劑量治療后，MCP-1表達(dá)水平下降至1465(ng·L^-1)、1682(ng·L^-1)、1795(ng·L^-1)，其中中劑量組具有顯著性差異(P＜0.05)，高劑量組具有極顯著性差異(P＜0.01)。

取實(shí)施例2至實(shí)施例4制備的黃芪提取物進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與實(shí)施例1制備的黃芪提取物的實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。

實(shí)施例7黃芪提取物在降低慢性腎臟蛋白尿中的作用

1、試驗(yàn)材料

1.1實(shí)驗(yàn)儀器

奧林巴斯AU-2700全自動(dòng)生化分析儀

1.2供試樣品

按實(shí)施例1制備黃芪提取物，將提取物用0.5％CMCNa溶液配制成相應(yīng)濃度。

2試驗(yàn)動(dòng)物

成年雄性SD大鼠，體質(zhì)量(220±20)g(上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)。

3試驗(yàn)方法成年雄性SD大鼠32只，體質(zhì)量(220±20)g，購(gòu)入后適應(yīng)飼養(yǎng)1周，普通飲食，自由飲水，1周后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、鹽酸貝那普利組、黃芪提取物組。各組一次性尾靜脈注射0.2％阿霉素溶液，每只按照6mg/kg劑量，進(jìn)行造模，對(duì)照組注射等量生理鹽水。第2周確定造模成功后，灌胃黃芪提取物，按照5g/kg、2.5g/kg、1.25g/kg計(jì)算藥物濃度和使用量。分別在第7天、28天、42天和56天應(yīng)用金屬代謝籠留取大鼠 24h尿液，8周后大鼠眼眶靜脈取血后留取血清應(yīng)用奧林巴斯AU-2700全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清白蛋白、肌酐。

4試驗(yàn)結(jié)果

表3大鼠尿蛋白含量的變化(mg/24h)

與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01

試驗(yàn)結(jié)果表明，阿霉素造模8周后，大鼠尿蛋白含量由正常組8.14增加至45.93mg/24h，黃芪中劑量組降低尿蛋白含量至42.95mg/24h，與模型組對(duì)比，具有顯著差異(P＜0.05)，黃芪高劑量組降低尿蛋白含量至37.91mg/24h，與模型組對(duì)比，具有極顯著差異(P＜0.01)。

表4大鼠血肌酐和血尿素氮變化

與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01

試驗(yàn)結(jié)果表明，阿霉素造模8周后，大鼠血肌酐含量由正常組34.42增加至52.52，黃芪中劑量組降低血肌酐含量至40.60(μmol/L)，與模型組對(duì)比，具有極顯著差異(P＜0.01)，黃芪高劑量組降低尿蛋白含量至39.91(μmol/L)， 與模型組對(duì)比，具有極顯著差異(P＜0.01)。大鼠尿素氮含量由正常組4.81增加至8.79，黃芪中劑量組降低血肌酐含量至8.57(μmol/L)，與模型組對(duì)比，具有極顯著差異(P＜0.01)，黃芪高劑量組降低尿蛋白含量至6.15(μmol/L)，與模型組對(duì)比，具有極顯著差異(P＜0.01)。

取實(shí)施例2至實(shí)施例4制備的黃芪提取物進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與實(shí)施例1制備的黃芪提取物的實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。

實(shí)施例8黃芪提取物對(duì)慢性腎臟病模型大鼠的作用

1、試驗(yàn)材料

1.1實(shí)驗(yàn)儀器

組織切片機(jī)、組織包埋機(jī)、光學(xué)顯微鏡

1.2供試樣品

按實(shí)施例1制備黃芪提取物，將提取物用0.5％CMCNa溶液配制成相應(yīng)濃度。

2試驗(yàn)動(dòng)物

成年雄性SD大鼠，體質(zhì)量(220±20)g(上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)。

3試驗(yàn)方法成年雄性SD大鼠32只，體質(zhì)量(220±20)g，購(gòu)入后適應(yīng)飼養(yǎng)1周，普通飲食，自由飲水，1周后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、鹽酸貝那普利組、黃芪提取物組。各組一次性尾靜脈注射0.2％阿霉素溶液，每只按照6mg/kg劑量，進(jìn)行造模，對(duì)照組注射等量生理鹽水。第2周確定造模成功后，灌胃黃芪提取物，按照5g/kg、2.5g/kg、1.25g/kg計(jì)算藥物濃度和使用量。56天取血后處死大鼠，取出左側(cè)腎臟，選取腎臟縱切的外側(cè)1/2的腎組織于多聚甲醛溶液固定48h，石蠟包埋后，切成4μm的切片，HE染色，在光鏡下觀察腎組織的病理學(xué)變化。

4試驗(yàn)結(jié)果如圖7所示：

對(duì)照組大鼠腎小球的結(jié)構(gòu)未見(jiàn)破壞，未見(jiàn)系膜細(xì)胞及基質(zhì)增生。模型組大鼠腎臟腎小球的基本結(jié)構(gòu)遭到破壞，腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和系膜細(xì)胞增生明顯，系膜基質(zhì)增厚增多，腎間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn)明顯。各給組腎臟組織變化介于模型組和對(duì)照組之間，黃芪提取物高劑量組腎小球的結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常，系膜細(xì)胞及基質(zhì)增生明顯減輕，腎間質(zhì)的炎細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減少。

取實(shí)施例2至實(shí)施例4制備的黃芪提取物進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與實(shí)施例1制備的黃芪提取物的實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。