本發(fā)明涉及一種家畜繁殖方法，尤其是一種誘導(dǎo)高產(chǎn)奶牛定時(shí)排卵和提高受胎率的方法。

背景技術(shù)：

目前，我國(guó)奶牛繁殖主要采用人工授精技術(shù)，與自然交配相比，采用人工授精技術(shù)可減少性疾病傳播、降低繁殖成本，冷凍精液可以長(zhǎng)期保存和運(yùn)輸，母畜配種不受地域限制，并可開展國(guó)際間的交流和貿(mào)易，代替種公畜的引進(jìn)。在進(jìn)行人工授精時(shí)，必需做好準(zhǔn)確的發(fā)情鑒定。目前，發(fā)情鑒定主要是通過(guò)觀察或監(jiān)測(cè)母牛的發(fā)情表現(xiàn)來(lái)判定。但是，隨著奶牛產(chǎn)奶量的不斷提高，其發(fā)情癥狀卻不顯著，即安靜發(fā)情。據(jù)調(diào)查，安靜發(fā)情約占發(fā)情奶牛的10％-20％(張桂蘭等，2012，黑龍江動(dòng)物繁殖)，由于不能及時(shí)準(zhǔn)確判斷發(fā)情，從而錯(cuò)過(guò)發(fā)情期，不能輸精配種，極大影響了奶牛的受配率，增加了飼養(yǎng)成本和世代間隔，降低了奶牛養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。因此，研究一種誘導(dǎo)高產(chǎn)奶牛定時(shí)排卵和提高受胎率的方法，是目前需要解決的技術(shù)問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種誘導(dǎo)高產(chǎn)奶牛定時(shí)排卵和提高受胎率的方法。

本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案是：

一種誘導(dǎo)高產(chǎn)奶牛定時(shí)排卵和提高受胎率的方法，①在高產(chǎn)奶牛產(chǎn)犢后35-40天，在奶牛陰道內(nèi)首次埋植孕激素裝置，②埋植14-16天后取出孕激素裝置，③注射前列腺素，④注射前列腺素后2天，注射促進(jìn)排卵激素，⑤注射促 進(jìn)排卵激素后12-16小時(shí)，進(jìn)行人工授精；⑥在人工授精后的第6-8天，再次埋植孕激素裝置，再次埋植時(shí)間為14-16天。

作為本發(fā)明的一種有選方案，所述的孕激素裝置為孕激素海綿栓或CIDR。

作為本發(fā)明的一種有選方案，所述的孕激素為18-甲基炔諾酮、孕酮、甲基乙酸孕酮、乙酸氯地孕酮、甲地孕酮或炔諾酮。

作為本發(fā)明的一種有選方案，首次埋植的孕激素海綿栓中含18-甲基炔諾酮50-100mg或含生物活性相當(dāng)?shù)脑型?、甲基乙酸孕?簡(jiǎn)稱甲孕酮)、乙酸氯地孕酮(簡(jiǎn)稱氯地孕酮)、甲地孕酮或炔諾酮；首次埋植的CIDR為含孕酮1.38g或含生物活性相當(dāng)?shù)?8-甲基炔諾酮、甲基乙酸孕酮、乙酸氯地孕酮、甲地孕酮或炔諾酮。

作為本發(fā)明的一種有選方案，再次埋植的孕激素海綿栓中含18-甲基炔諾酮25-50mg或含生物活性相當(dāng)?shù)脑型?、甲基乙酸孕?簡(jiǎn)稱甲孕酮)、乙酸氯地孕酮(簡(jiǎn)稱氯地孕酮)、甲地孕酮或炔諾酮；再次埋植的CIDR為含孕酮0.69g或含生物活性相當(dāng)?shù)?8-甲基炔諾酮、甲基乙酸孕酮、乙酸氯地孕酮、甲地孕酮或炔諾酮。

作為本發(fā)明的一種有選方案，所述的注射前列腺素為肌肉注射或子宮內(nèi)灌注。

作為本發(fā)明的一種有選方案，所述的前列腺素為氯前列烯醇、氟前列烯醇、PGF2α、甲基PGF2α或PGF1α甲酯。

作為本發(fā)明的一種有選方案，肌肉注射氯前列烯醇0.4mg或生物活性相當(dāng)?shù)腜GF2α、氟前列烯醇、甲基PGF2α或PGF1α甲酯；子宮內(nèi)灌注氯前列烯醇0.2mg或PGF2α、氟前列烯醇、甲基PGF2α或PGF1α甲酯。

作為本發(fā)明的一種有選方案，所述的促進(jìn)排卵激素為促排3號(hào)、促排2號(hào)、 促黃體素、人絨毛膜促性腺激素、促性腺激素釋放激素。

作為本發(fā)明的一種有選方案，注射促排3號(hào)或促排2號(hào)25-50μg、促黃體素50-100IU、人絨毛膜促性腺激素1000-2000IU或促性腺激素釋放激素100μg。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明方法在高產(chǎn)奶牛產(chǎn)犢后35-40天，通過(guò)埋植孕激素海綿栓或CIDR，埋植14-16天后取出海綿栓或CIDR，注射前列腺素和促性腺激素釋放激素、或促性腺激素釋放激素高效類似物，使奶牛在預(yù)定的時(shí)間內(nèi)發(fā)情，并且對(duì)奶牛的某些繁殖疾病還有一定的治療作用，促進(jìn)奶牛的發(fā)情，不需要進(jìn)行發(fā)情觀察和監(jiān)測(cè)，節(jié)省了人力和物力。本發(fā)明克服了目前高產(chǎn)奶牛發(fā)情表現(xiàn)不明顯，排卵時(shí)間個(gè)體差異大，以及奶牛妊娠早期胚胎丟失嚴(yán)重等問(wèn)題，是一種新的誘導(dǎo)奶牛定時(shí)發(fā)情和排卵，然后進(jìn)行人工授精，同時(shí)采用保胎措施，減少胚胎丟失的綜合方法。

本發(fā)明的原理：

孕激素海綿栓或CIDR被置入母畜陰道后，所含的孕激素緩慢釋放出，經(jīng)陰道黏膜進(jìn)入體內(nèi)，使血漿中孕激素保持有效濃度，與內(nèi)源性孕激素發(fā)揮一樣的作用，通過(guò)負(fù)反饋抑制垂體促性腺激素和下丘腦促性腺激素釋放激素的分泌，從而抑制母牛發(fā)情和排卵。一旦取出孕激素海綿栓或CIDR，孕激素的作用消失，動(dòng)物下丘腦促性腺激素釋放激素分泌增加，垂體促性腺激素分泌同時(shí)增加，促進(jìn)卵泡的生長(zhǎng)和動(dòng)物發(fā)情(李玉華和王志強(qiáng)，2009，畜牧與獸醫(yī))。本發(fā)明利用該作用機(jī)理，使母牛在預(yù)定的時(shí)間內(nèi)發(fā)情。

促性腺激素釋放激素的主要作用是促進(jìn)垂體前葉促性腺激素的合成和釋放，其中以促進(jìn)促黃體素釋放為主，也有促進(jìn)促卵泡素釋放的作用，促黃體素可以選擇性誘導(dǎo)排卵前的卵泡生長(zhǎng)發(fā)育，并觸發(fā)排卵。人絨毛膜促性腺激素生 物學(xué)作用與促黃體素相似，可促進(jìn)卵泡成熟和排卵。促排3號(hào)、促排2號(hào)是促性腺激素釋放激素的高效類似物，其生理功能和促性腺激素釋放激素基本相同。由于奶牛個(gè)體的差異，從出現(xiàn)發(fā)情表現(xiàn)到排卵之間的時(shí)間間隔，不同奶牛是不同的，通過(guò)注射促性腺激素釋放激素或其高效類似物、或促黃體素、或人絨毛膜促性腺激素，可以加強(qiáng)卵巢的排卵功能，使排卵在預(yù)定的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行，然后在預(yù)定的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行人工授精，增加了精卵結(jié)合的幾率，進(jìn)而提高了受胎率。本發(fā)明方法在取出海綿栓或CIDR后第2天，注射促性腺激素釋放激素或其高效類似物、或促黃體素、或人絨毛膜促性腺激素，促進(jìn)奶牛卵泡成熟和排卵。并于12-16小時(shí)后，進(jìn)行人工授精。

據(jù)統(tǒng)計(jì)，牛的平均受胎率為90％，然而產(chǎn)犢率只有55％，胚胎或胎兒死亡占到35％，其中70-80％的胚胎丟失發(fā)生在配種后的第8-16天(Spencer，2013，Animal Frontiers)。由于胚胎丟失高峰期恰好是母體妊娠識(shí)別和胚胎附植的關(guān)鍵期，因此胚胎受到母體的免疫排斥，是導(dǎo)致胚胎死亡的主要原因。干擾素-tau是反芻動(dòng)物胚胎向母體發(fā)出的最初妊娠信號(hào)，牛干擾素-tau以旁分泌形式作用于子宮內(nèi)膜，使雌激素受體的合成受阻，引發(fā)催產(chǎn)素受體的合成減少，繼而使前列腺素F2α的釋放被抑制，起到抗黃體溶解的作用，使黃體可以持續(xù)分泌孕酮。據(jù)報(bào)道，陰道栓補(bǔ)充孕酮，可提高人卵母細(xì)胞單精子顯微注射的妊娠率(Manno等，2005，F(xiàn)ertility Sterility)。本發(fā)明，在配種后的第6-8天，埋植孕激素海綿栓或CIDR，補(bǔ)充外源性孕激素，達(dá)到提高奶牛妊娠率的目的。

具體實(shí)施方式

一種誘導(dǎo)高產(chǎn)奶牛定時(shí)排卵和提高受胎率的方法，具體步驟如下：

1.在高產(chǎn)奶牛產(chǎn)犢后35-40天，埋植孕激素海綿栓(18-甲基炔諾酮50-100mg，或生物活性相當(dāng)?shù)脑型?、甲基乙酸孕?簡(jiǎn)稱甲孕酮)、乙酸氯地孕 酮(簡(jiǎn)稱氯地孕酮)、甲地孕酮或炔諾酮)或CIDR(孕酮1.38g，或含生物活性相當(dāng)?shù)?8-甲基炔諾酮、甲基乙酸孕酮、乙酸氯地孕酮、甲地孕酮或炔諾酮)。

2.埋植14-16天后取出海綿栓或CIDR，然后注射前列腺素(肌肉注射國(guó)產(chǎn)氯前列烯醇0.4mg或生物活性相當(dāng)?shù)腜GF2α、氟前列烯醇、甲基PGF2α或PGF1α甲酯；或子宮內(nèi)灌注國(guó)產(chǎn)氯前列烯醇0.2mg，或生物活性相當(dāng)?shù)腜GF2α、氟前列烯醇、甲基PGF2α或PGF1α甲酯)；注射前列腺素2天后，注射促排3號(hào)或促排2號(hào)25-50μg、或促黃體素50-100IU、或人絨毛膜促性腺激素1000-2000IU、或促性腺激素釋放激素100μg左右；12-16小時(shí)后，進(jìn)行人工授精。

3.在配種后的第6-8天，埋植孕激素海綿栓(18-甲基炔諾酮25-50mg，或生物活性相當(dāng)?shù)脑型?、甲基乙酸孕?簡(jiǎn)稱甲孕酮)、乙酸氯地孕酮(簡(jiǎn)稱氯地孕酮)、甲地孕酮或炔諾酮)或CIDR(孕酮0.69g，或或含生物活性相當(dāng)?shù)?8-甲基炔諾酮、甲基乙酸孕酮、乙酸氯地孕酮、甲地孕酮或炔諾酮)，埋植時(shí)間為14-16天。