一種用于大鼠血糖無創(chuàng)快速測定的方法
【專利摘要】一種用于大鼠血糖無創(chuàng)快速測定的方法。該方法克服現(xiàn)有大鼠血糖測定方法中對大鼠造成一定的損傷甚至導(dǎo)致大鼠死亡和操作繁瑣等缺點(diǎn)和不足,它是在大鼠后腿中上部使用近紅外光譜儀的光纖探頭采集近紅外光譜,由于大鼠體表被毛,故采集近紅外光譜前需采用適當(dāng)方法(如剃毛刀或脫毛膏)除去測定區(qū)域體表被毛;血糖測定過程中無需采集血液樣品,大鼠無創(chuàng)傷,測定過程快速簡便。
【專利說明】一種用于大鼠血糖無創(chuàng)快速測定的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及血糖無創(chuàng)快速檢測領(lǐng)域,特別是涉及活體大鼠的血糖無創(chuàng)快速測定方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前,公知的大鼠血糖測定方法為在大鼠尾靜脈、股靜脈、心臟或斷頭取血,血樣 經(jīng)處理后采用酶法或化學(xué)法(如有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法、葡萄糖氧電極法等)進(jìn)行 測定,這些方法對大鼠造成了一定的損傷甚至導(dǎo)致大鼠死亡,另外整個(gè)過程操作繁瑣,血糖 檢測的成本較高,不利于血糖的頻繁檢測。本方法測定大鼠血糖時(shí)大鼠無創(chuàng)傷,血糖測定快 速簡單。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003] 為克服現(xiàn)有大鼠血糖測定時(shí)對大鼠造成一定的損傷甚至導(dǎo)致大鼠死亡和操作繁 瑣等缺點(diǎn)和不足,本發(fā)明提供了一種無創(chuàng)傷和快速簡單的大鼠血糖測定方法。
[0004] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是:采用近紅外光譜儀的光纖探頭采集 大鼠后腿中上部的近紅外光譜,由于大鼠體表被毛,故采集近紅外光譜前需采用適當(dāng)方法 (如剃毛刀或脫毛膏)除去測定區(qū)域體表被毛。近紅外光譜儀經(jīng)過自動(dòng)基線校正后進(jìn)行光 譜掃描,光譜測定范圍為12000?^OOcnr1,掃描次數(shù)為32次,分辨率為8CHT1。將采集得 的近紅外光譜帶入"大鼠血糖近紅外無損快速測定數(shù)學(xué)模型"(以下簡稱數(shù)學(xué)模型),經(jīng)數(shù) 學(xué)模型對近紅外光譜進(jìn)行處理和計(jì)算后得出大鼠血糖值。
[0005] 本專利的有益效果是,可以在測定大鼠血糖的同時(shí),無需采集大鼠血液樣品,實(shí)現(xiàn) 了大鼠血糖無創(chuàng)傷測定,血糖測定簡便快速。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0006] 下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對本發(fā)明專利作進(jìn)一步說明。
[0007] 圖1是大鼠后腿中上部剃毛后實(shí)物圖
[0008] 圖2是近紅外光纖探頭在大鼠后腿處測定近紅外光譜圖
【具體實(shí)施方式】
[0009] 圖1中,由于大鼠體表被毛,故采集近紅外光譜前需采用適當(dāng)方法(如剃毛刀或脫 毛膏)除去測定區(qū)域體表被毛(去毛區(qū)域直徑約20_);圖2中。采用近紅外光譜儀光纖 探頭采集大鼠后腿中上部的近紅外光譜,光譜采集參數(shù)如下:
[0010] 以空氣為背景經(jīng)過自動(dòng)基線校正,光譜測定范圍為12000?4000CHT1,光譜掃描次 數(shù)為32次,分辨率為8CHT1。
[0011] 光譜測定完成后,血糖值的得出有如下幾種實(shí)施方式:
[0012] 實(shí)施例1 :獨(dú)立建立大鼠血糖近紅外無損快速測定數(shù)學(xué)模型
[0013] 測定不少100個(gè)樣本的大鼠血糖值和相對應(yīng)的近紅外光譜,針對測定的樣本獨(dú)立 建立數(shù)學(xué)模型,數(shù)學(xué)模型建模方法可采用偏最小二乘法或人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)方法,近紅外光譜 經(jīng)光譜預(yù)處理和平滑后代入數(shù)學(xué)模型,篩選建模光譜范圍和建模維數(shù)等數(shù)學(xué)模型參數(shù),獲 得最佳數(shù)學(xué)模型參數(shù)后,模型建模完成;具體建模方法可參考下面的"實(shí)驗(yàn)例A"和"實(shí)驗(yàn)例 B"中操作過程建立數(shù)學(xué)模型。
[0014] 用上面建立的數(shù)學(xué)模型可對大鼠血糖進(jìn)行無創(chuàng)快速測定。
[0015] 實(shí)施例2 :直接代入"大鼠血糖近紅外無損快速測定數(shù)學(xué)模型"
[0016] 本專利提供數(shù)學(xué)模型的血糖計(jì)算方法,實(shí)驗(yàn)時(shí)使用的建議的近紅外光譜采集儀器 和軟件,將近紅外光譜和方法代入軟件后,即得出血糖值。
[0017] 建議使用的儀器和軟件:Bruker MatriX-F型傅立葉變換近紅外光譜儀(德國布 魯克公司),PbS檢測器,隨機(jī)配套光纖傳輸檢測探頭,隨機(jī)附帶OPUS 6. 5光譜采集和處理 軟件
[0018] 數(shù)學(xué)模型的血糖計(jì)算方法的相關(guān)參數(shù):模型建模方法為偏最小二乘法;光譜預(yù)處 理方法為消除常數(shù)偏移量;建模光譜區(qū)間為7502?5446. 2CIIT1 ;建模維數(shù)為10。
[0019] 實(shí)施例3 :校正"大鼠血糖近紅外無損快速測定數(shù)學(xué)模型"
[0020] 依據(jù)上面"實(shí)施例2"中的得出的血糖值,由于環(huán)境因素、儀器和樣品背景等的差 異,有時(shí)測定結(jié)果不佳,故可參考該實(shí)施方法:采用另外一種可靠方法測定一組樣品的血糖 值作為參考值,用這組參考值對模型測定值進(jìn)行校正,建議采用3?7個(gè)樣品點(diǎn),建立校正 曲線,對模型測定值進(jìn)行校正。
[0021] 如表1中參考值為采用已糖激酶法測定樣品的血糖值,模型測定值為將測定的樣 品近紅外光譜代入數(shù)學(xué)模型后測定的血糖值,模型偏差為模型測定值和參考值之差與參考 值的百分比值,校正值為模型測定值除以校正系數(shù)所得值,校正偏差為校正值和參考值之 差與參考值的百分比值;模型校正方法:以參考值為X值,模型測定值為y值,作回歸直線, 線性方程為y = I. 〇655x (R2 = 0. 9983),線性方程的斜率1. 0655即為校正系數(shù)。比較校正 偏差和模型偏差可知,經(jīng)校正后的模型測定結(jié)果準(zhǔn)確度得到提高。
[0022] 表1校正模型測定結(jié)果
[0023]
【權(quán)利要求】
1. 一種測定大鼠血糖的方法,其特征是在大鼠后腿中上部采集近紅外光譜,無需采集 血液樣品,血糖測定過程中大鼠無創(chuàng)傷,測定過程快速簡便。
【文檔編號】A61B5/1455GK104382605SQ201410801811
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年12月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月19日
【發(fā)明者】薛金濤, 葉利明, 陳玉, 李春燕 申請人:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院, 四川大學(xué), 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院三全學(xué)院