抗il-6抗體及其用途【專利摘要】提供了結(jié)合人IL-6的抗體和其抗原結(jié)合部分。還提供的是編碼此類抗體和抗原結(jié)合部分的核酸、制備此類抗體和抗原結(jié)合部分的方法、包含此類抗體或抗原結(jié)合部分的組合物以及此類抗體或抗原結(jié)合部分的用途。PTA-801320061121PTA-801920061121PTA-801820061121PTA-801720061121PTA-801620061121PTA-801520061121PTA-801420061121【專利說明】抗IL-6抗體及其用途[0001]本申請是申請日為2009年6月10日、發(fā)明名稱為"抗IL-6抗體及其用途"的中國發(fā)明專利申請No.200980119821.4的分案申請。[0002]交叉引用相關(guān)專利和專利申請[0003]本申請要求2008年6月18日提交的美國臨時專利申請系列案61/073430的權(quán)益，其以其全文通過引用合并入本文。[0004]聯(lián)合研究協(xié)議[0005]本文中的公開內(nèi)容和權(quán)利要求由在PfizerInc.與Medarex，Inc.之間的聯(lián)合研究協(xié)議的范圍內(nèi)進行的活動產(chǎn)生，所述協(xié)議在產(chǎn)生所請求保護的發(fā)明的日期當(dāng)天或之前有效。[0006]背景[0007]本發(fā)明涉及結(jié)合人IL-6的抗體和其抗原結(jié)合部分。本發(fā)明還涉及編碼此類抗體和其抗原結(jié)合部分的核酸；制備此類抗體和其抗原結(jié)合部分的方法；包含此類抗體或其抗原結(jié)合部分的組合物；以及此類抗體或其抗原結(jié)合部分的用途。[0008]也稱為干擾素B2(IFNB2)的白細胞介素-6(IL-6)是屬于gpl30配體家族并且由許多細胞類型包括T淋巴細胞、成纖維細胞和單核細胞產(chǎn)生的多效性細胞因子(pleiotropiccytokine)。IL-6以低水平組成型產(chǎn)生并且易于由感染性刺激物或炎性細胞因子誘導(dǎo)。IL-6結(jié)合特定受體IL-6R(gp80)，所述受體與細胞結(jié)合的或可溶性gpl30異二聚化以形成功能性受體復(fù)合物。IL-6與其受體的結(jié)合啟動了細胞事件，包括JAK-STAT3途徑和ras-介導(dǎo)的MAP激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的激活。IL-6可引發(fā)不同效應(yīng)例如B細胞和單核細胞的增殖和分化、T細胞活化、造血作用、破骨細胞活化、角質(zhì)形成細胞生長、神經(jīng)元生長、肝細胞活化和來自肝細胞的急性期蛋白誘導(dǎo)。[0009]IL-6在B細胞異常中起著重要作用，如在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性骨髓瘤和淋巴組織增殖性疾病中所證實的。類似地，IL-6還牽涉自身免疫和炎性疾病例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機制。最近，間接證據(jù)表明IL-6與慢性阻塞性肺疾病和2型糖尿病的胰島素抗性之間的關(guān)聯(lián)。IL-6在免疫系統(tǒng)中具有促炎和抗炎作用，這表明該細胞因子可能在調(diào)控對疾病的生理應(yīng)答中起著中心作用。因此，靶向IL-6可潛在地在多種疾病領(lǐng)域提供治療益處。[0010]已在許多疾病中觀察到IL-6的產(chǎn)生增加，所述疾病包括：阿爾茨海默病、自身免疫疾病例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎癥、心肌梗塞、佩吉特病（Paget'sdisease)、骨質(zhì)疏松癥、肝纖維化、實體瘤（腎細胞癌）、前列腺和膀胱癌、神經(jīng)癌（neurologicalcancer)和B細胞惡性腫瘤（例如，卡斯?fàn)柭。–astleman'sdisease),某些淋巴瘤、慢性淋巴細胞性白血病和多發(fā)性骨髓瘤）。研究已顯示，IL-6與許多此類疾病，特別地癌癥和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機制相關(guān)，從而阻斷IL-6應(yīng)當(dāng)轉(zhuǎn)化為臨床益處。[0011]概述[0012]產(chǎn)生了特異性結(jié)合IL-6并且可用作IL-6受體拮抗劑的分離的抗體或其抗原結(jié)合部分，以及包含所述抗體或部分的組合物。[0013]提供了組合物，所述組合物包含（i)抗IL-6抗體的重鏈和/或輕鏈、其可變結(jié)構(gòu)域或其抗原結(jié)合部分，或編碼它們的核酸分子；和（ii)藥學(xué)可接受的載體。組合物還可包含另一種成分例如治療劑或診斷劑。[0014]還提供了診斷和治療方法。類似地，提供抗IL-6抗體和其抗原結(jié)合部分以制造治療炎性和非炎性病癥的藥劑。[0015]提供了包含所述核酸分子的載體和宿主細胞以及重組產(chǎn)生由所述核酸分子編碼的多肽的方法。[0016]附圖概述[0017]圖1顯示重鏈和輕鏈可變區(qū)的種系氨基酸序列分別與抗IL-6抗體9C8、9C8N68TT83S和22B5的重鏈和輕鏈可變區(qū)相比較的比對（對于9C8、9C8N68TT83S和22B5抗體只顯示錯配）。⑶R以下劃線標(biāo)示并且錯配缺口以井號（poundsign)(#)標(biāo)示。[0018]圖2顯示對于媒介物和9C8N68TT83SIgG2抗體的總血清C反應(yīng)蛋白（CRP)，如通過電化學(xué)發(fā)光免疫測定法測定的。各點代表來自用0.5mg/kg和5.Omg/kg媒介物或抗IL-6抗體9C8N68TT83SIgG2給藥的3只食蟹猴（cynomolgusmonkey)的血清CRP的平均值（土SE)。利用MesoScaleDiscovery(MSD)測量血清CRP。在第0小時的時間點上施用LPS。[0019]詳述[0020]定義和一般摶術(shù)[0021]術(shù)語"抗體"與免疫球蛋白同義并且被理解為本領(lǐng)域內(nèi)通常理解的意義。特別地，術(shù)語抗體不受產(chǎn)生抗體的任何特定方法限制。例如，術(shù)語抗體包括，特別地，重組抗體，單克隆抗體和多克隆抗體。[0022]基本抗體結(jié)構(gòu)單位是四聚體。各四聚體由2個相同的多肽鏈對組成，各對具有一個"輕"鏈（大約25kDa)和一個"重"鏈（大約50-70kDa)。各鏈的氨基末端部分包含大約100至120或更多個氨基酸的可變區(qū)，其主要負(fù)責(zé)抗原識別。各鏈的羧基末端部分界定了主要負(fù)責(zé)效應(yīng)子功能的恒定區(qū)。人輕鏈分類為k和：V輕鏈。重鏈分類為yS、y、a或e，并且將抗體的同種型分別定義為IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。在輕鏈和重鏈內(nèi)，可變區(qū)與恒定區(qū)通過大約12個或更多個氨基酸的"J"區(qū)連接，重鏈還包含大約3個或更多個氨基酸的"D"區(qū)。[0023]各重鏈/輕鏈對的可變區(qū)（VH和')分別形成抗原結(jié)合部位。因此，完整的IgG抗體，例如，具有2個結(jié)合部位。除了在雙功能或雙特異性抗體中外，兩個結(jié)合部位是相同的。[0024]重鏈和輕鏈的可變區(qū)展示通過3個高變區(qū)（也稱為互補決定區(qū)或⑶R)連接相對保守的構(gòu)架區(qū)（FR)的相同的一般結(jié)構(gòu)。術(shù)語"可變的"是指，可變結(jié)構(gòu)域的某些部分在抗體之間在序列上差異很大并且用于各特定抗體對其特定抗原的結(jié)合和特異性。然而可變性在抗體的整個可變結(jié)構(gòu)域中不是均勻分布的，其集中在CDR中，所述CDR被更高度保守的FR分隔。來自各對的兩條鏈的CDR通過FR對齊，使得能夠結(jié)合特定的表位。從N端至C端，輕鏈和重鏈都包含結(jié)構(gòu)域FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。氨基酸至各結(jié)構(gòu)域的分配依照KabatSequencesofProteinsofImmunologicalInterest(NationalInstitutesofHealth,Bethesda,Md.(1987and1991)),或Chothia&LeskJ.Mol.Biol.196:901-917(1987);Chothia等人Nature342:878-883(1989)(其公開內(nèi)容通過引用合并入本文）中的定義。[0025]如本文中所使用的，以編號提及的抗體與從相同編號的雜交瘤獲得的單克隆抗體相同。例如，抗IL-6單克隆抗體9C8是與從雜交瘤9C8或其亞克隆獲得的抗體相同的抗體。[0026]術(shù)語"類似物"或"多肽類似物"表示包含與一些參照氨基酸序列具有大體上的同一性的區(qū)段并且具有與參照氨基酸序列大體上相同的功能或活性的多肽。通常，多肽類似物相對于參照序列包含一個或多個保守氨基酸置換（或插入或缺失）。類似物可以是至少20或25個氨基酸長或可以是至少50、60、70、80、90、100、150或200個氨基酸長或更長，并且通?？膳c全長多肽一樣長。一些實施方案包括與參照氨基酸序列相比具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17個置換的多肽類似物。在一些情況下，參照氨基酸序列是種系序列?？贵w或免疫球蛋白分子的類似物可由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地制備。[0027]如本文中所論述的，對IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分的氨基酸置換是這樣的氨基酸置換，其通常：（1)減少對蛋白酶解的易感性，（2)減少對氧化的易感性，（3)改變形成蛋白質(zhì)復(fù)合物的結(jié)合親和力，（4)缺失或產(chǎn)生用于糖基化的位點，或（4)提供或改進此類類似物的其他物理化學(xué)或功能性質(zhì)但仍然保持對IL-6的特異性結(jié)合。[0028]類似物可包括對正常發(fā)生的肽序列的不同置換。例如，可在正常發(fā)生的序列中產(chǎn)生單個或多個氨基酸置換，優(yōu)選保守氨基酸置換。保守氨基酸置換通常基本上不改變親本序列的結(jié)構(gòu)特征。[0029]術(shù)語抗體的"抗原結(jié)合部分"是指保持特異性結(jié)合抗原（例如，IL-6)的能力的抗體片段。已顯示，可通過全長抗體的片段進行抗體的抗原結(jié)合功能。術(shù)語抗體的"抗原結(jié)合部分"中包括的結(jié)合片段的實例包括：（i)Fab片段，由\、VH、(^和CH1結(jié)構(gòu)域組成的單價片段；（ii)F(ab'）2片段，包含通過鉸鏈區(qū)上的二硫橋連接的兩個Fab片段的二價片段；（iii)由VH和CH1結(jié)構(gòu)域組成的Fd片段；（iv)由抗體的單臂的'和VH結(jié)構(gòu)域組成的Fv片段；（v)結(jié)構(gòu)域抗體，（dAb)(Ward等人，（1989)Nature341:544-546)，其由VH結(jié)構(gòu)域組成；(vi)分離的互補決定區(qū)（CDR)。此外，雖然Fv片段的兩個結(jié)構(gòu)域\和￥11由分開的基因編碼，但可使用重組方法，通過合成的連接體連接它們，所述合成的連接體使得它們能夠產(chǎn)生為其中\(zhòng)和VH區(qū)配對形成單價分子的單個蛋白質(zhì)鏈（稱為單鏈Fv(SCFv))。此類單鏈抗體也意欲包括在術(shù)語抗體的"抗原結(jié)合部分"中。還包括其他形式的單鏈抗體，例如雙抗體(diabody)。雙抗體是二價的雙特異性抗體，其中VH和'結(jié)構(gòu)域在單個多肽鏈上表達，但在相同鏈的兩個結(jié)構(gòu)域之間使用太短以致不允許配對的連接體，從而迫使結(jié)構(gòu)域與另一條的互補結(jié)構(gòu)域配對并且產(chǎn)生兩個抗原結(jié)合部位。此外，來自抗體的一個或多個CDR可被整合入更大的多肽鏈，該更大的多肽鏈可被共價或非共價地連接至另一個多肽鏈。在具有一個或多個結(jié)合部位的實施方案中，結(jié)合部位可彼此相同或可以不同。[0030]此外，抗體或其抗原結(jié)合部分可以是通過抗體或抗體部分與一個或多個其他蛋白質(zhì)或肽的共價或非共價結(jié)合而形成的更大的免疫粘附素分子的部分。此類免疫粘附素分子的實例包括使用鏈霉抗生物素蛋白核心區(qū)域制備四聚體scFv分子和使用半胱氨酸殘基、標(biāo)志物肽和C末端多組氨酸標(biāo)簽制備二價和生物素化的scFv分子。其他實例包括其中將來自抗體的一個或多個CDR共價或非共價地整合入分子以使其成為特異性結(jié)合目的抗原例如IL-6的免疫粘附素。在此類實施方案中，可將CDR整合為更大的多肽鏈的部分，可將其共價連接至另一條多肽鏈，或可將其非共價地整合。可使用任何合適的技術(shù)（例如分別地完整抗體的木瓜蛋白酶或胃蛋白酶降解）來從完整抗體制備抗體部分（例如Fab和F(ab'）2片段）。此外，可使用各種重組DNA技術(shù)獲得抗體、抗體部分和免疫粘附素分子。[0031]術(shù)語"嵌合抗體"意指包含來自兩個或更多個不同的抗體（包括來自不同物種的抗體）的區(qū)域的抗體。例如，嵌合抗體的一個或多個CDR可來源于人IL-6抗體。在一個實例中，可將來自人抗體的CDR與來自非人抗體例如小鼠或大鼠的CDR組合。在另一個實例中，所有CDR可來源于人IL-6抗體。在另一個實例中，可在嵌合抗體中組合來自多于一個人IL-6抗體的⑶R。例如，嵌合抗體可包含來自第一人IL-6抗體的輕鏈的⑶R1、來自第二人IL-6抗體的輕鏈的⑶R2和來自第三人IL-6抗體的輕鏈的⑶R3,并且來自重鏈的⑶R可來源于一個或多個其他IL-6抗體。此外，構(gòu)架區(qū)可來源于從其獲得一個或多個CDR的IL-6抗體之一或來源于一個或多個不同人抗體。此外，術(shù)語"嵌合抗體"意欲包括任何上述組合，其中所述組合包括人和非人抗體。[0032]術(shù)語"競爭"意指第一抗體或其抗原結(jié)合部分與第二抗體或其抗原結(jié)合部分競爭結(jié)合，其中與在第二抗體不存在的情況下第一抗體的結(jié)合相比較，在第二抗體存在的情況下，第一抗體與其相應(yīng)表位（cognateepitope)的結(jié)合可檢測地減少。其中第二抗體與其表位的結(jié)合在第一抗體存在的情況下也可檢測地減少的另一情況可以存在，但不是必須存在。即，第一抗體可抑制第二抗體對其表位的結(jié)合而無需第二抗體抑制第一抗體對其各自表位的結(jié)合。然而，在各抗體可檢測地抑制另一個抗體與其相應(yīng)表位或配體的結(jié)合的情況下，無論程度相同、更大還是更小，抗體被認(rèn)為彼此"交叉競爭"對它們各自表位的結(jié)合。無論這樣的競爭或交叉競爭發(fā)生的機制是什么（例如，空間位阻、構(gòu)象變化或?qū)餐砦换蚱洳糠值慕Y(jié)合），基于本文中提供的教導(dǎo)，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，此類競爭性和/或交叉競爭性抗體可用于本文中公開的方法。[0033]術(shù)語"保守氨基酸置換"意指氨基酸殘基被具有擁有相似化學(xué)性質(zhì)（例如，電荷或疏水性）的側(cè)鏈R基團的另一個氨基酸殘基置換。一般地，保守氨基酸置換將基本上不改變蛋白質(zhì)的功能性質(zhì)。在其中兩個或更多個氨基酸序列彼此相異在于保守置換的情況下，可上調(diào)百分比序列同一性以就置換的保守性質(zhì)進行修正。用于進行該調(diào)整的方法對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是熟知的。具有擁有相似化學(xué)性質(zhì)的側(cè)鏈的氨基酸組的實例包括1)脂肪族側(cè)鏈：甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸；2)脂肪族-羥基側(cè)鏈：絲氨酸和蘇氨酸；3)含酰胺側(cè)鏈：天冬酰胺和谷氨酰胺；4)芳香族側(cè)鏈：苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；5)堿性側(cè)鏈：賴氨酸、精氨酸和組氨酸；6)酸性側(cè)鏈：天冬氨酸和谷氨酸；和7)含硫側(cè)鏈：半胱氨酸和甲硫氨酸。保守氨基酸置換組可以例如是纈氨酸-亮氨酸-異亮氨酸、苯丙氨酸-酪氨酸、賴氨酸-精氨酸、丙氨酸-纈氨酸、谷氨酸-天冬氨酸和天冬酰胺-谷氨酰胺。[0034]保守置換也可以是在Gonnet等人，Science256:1443-45(1992)(通過引用合并入本文）中公開的PAM250對數(shù)似然矩陣（PAM2501og-likelihoodmatrix)中具有正值的任何變化。"中度保守的"置換是在PAM250對數(shù)似然矩陣中具有非負(fù)值的任何變化。[0035]"接觸"是指以使抗體可影響IL-6的生物學(xué)活性的方式，使抗體或其抗原結(jié)合部分與靶IL-6或其表位在一起。這樣的"接觸"可在體外例如在試管、培養(yǎng)皿等中完成。在試管中，接觸可只包括抗體或其抗原結(jié)合部分與IL-6或其表位或其可包括完整細胞。還可將細胞維持或培養(yǎng)在細胞培養(yǎng)皿中并且在該環(huán)境中與抗體或其抗原結(jié)合部分接觸。在本說明書中，可在對更復(fù)雜的活生物體體內(nèi)使用抗體之前測定特定抗體或其抗原結(jié)合部分影響IL-6相關(guān)病癥的能力，即抗體的IC5(I。對于生物體外部的細胞，存在將IL-6與抗體或其抗原結(jié)合部分接觸的多種方法，并且所述方法對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是熟知的。[0036]術(shù)語"ELISA"是指酶聯(lián)免疫吸附測定。該類型的測定對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是熟知的。[0037]術(shù)語"表位"包括能夠特異性結(jié)合免疫球蛋白或T細胞受體或與分子相互作用的任何蛋白質(zhì)決定簇（determinant)。表位決定簇通常由分子的化學(xué)活性表面基團例如氨基酸或碳水化合物或糖側(cè)鏈組成并且通常具有特定的三維結(jié)構(gòu)特征以及特定的電荷特征。表位可以是"線性的"或"構(gòu)象的"。在線性表位中，蛋白質(zhì)與相互作用分子（例如抗體）之間的相互作用的所有點沿著蛋白質(zhì)的一級氨基酸序列線性存在。在構(gòu)象表位中，相互作用的點跨越彼此分開的蛋白質(zhì)氨基酸殘基而存在。一旦確定抗原上的期望的表位，就可產(chǎn)生抗該表位的抗體。實現(xiàn)這一點的方法是進行交叉競爭研究以發(fā)現(xiàn)彼此競爭結(jié)合的抗體，即抗體競爭對抗原的結(jié)合。基于它們的交叉競爭"劃分（binning)"抗體的高通量方法描述于國際專利公開案W003/48731中。[0038]術(shù)語"表達控制序列"，如本文中所使用的，意指進行與它們連接的編碼序列的表達和加工所必需的多核苷酸序列。表達控制序列包括適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)錄起始、終止、啟動子和增強子序列；有效的RNA加工信號例如剪接和多腺苷酸化信號；穩(wěn)定細胞質(zhì)mRNA的序列；提高翻譯效率的序列（即，Kozak共有序列）；增強蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的序列；和當(dāng)需要時，增強蛋白質(zhì)分泌的序列。此類控制序列的性質(zhì)視宿主生物體而不同；在原核生物中，此類控制序列通常包括啟動子、核糖體結(jié)合位點和轉(zhuǎn)錄終止序列；在真核生物中，一般而言，此類控制序列包括啟動子和轉(zhuǎn)錄終止序列。術(shù)語"控制序列"意欲包括，在最低程度上，其存在是表達和加工所必需的所有元件，并且還可包括其存在是有利的額外組件，例如前導(dǎo)序列和融合伴侶序列。[0039]術(shù)語"種系"是指當(dāng)抗體基因和基因區(qū)段通過生殖細胞從親本傳遞給后代時抗體基因和基因區(qū)段的核苷酸序列。該種系序列不同于成熟B細胞中編碼抗體的核苷酸序列(其已在B細胞成熟過程中通過重組和高突變事件而被改變）。[0040]術(shù)語"人抗體"是指其中可變和恒定結(jié)構(gòu)域序列是人序列的任何抗體。該術(shù)語包括具有來源于人基因的序列（包括已被改變以例如減少可能的免疫原性、增加親和力、消除可能引起不期望的折疊的半胱氨酸殘基等的序列）的抗體。該術(shù)語還包括在非人細胞中重組產(chǎn)生的此類抗體，所述非人細胞可能賦予與人細胞賦予的典型糖基化形式不同的糖基化。可以以許多方法制備此類抗體。[0041]術(shù)語"人源化抗體"是指非人來源的抗體，其中作為非人物種的抗體序列的特征的氨基酸殘基被人抗體的相應(yīng)位置中發(fā)現(xiàn)的殘基替代。該"人源化"過程可減少所得抗體在人中的免疫原性?？墒褂帽绢I(lǐng)域內(nèi)熟知的任何合適的技術(shù)來人源化非人來源的抗體?？衫弥亟MDNA技術(shù)用相應(yīng)的人序列置換011、012、013、鉸鏈結(jié)構(gòu)域和/或構(gòu)架結(jié)構(gòu)域，從而對目的抗體進行工程改造。術(shù)語"人源化抗體"在其意義內(nèi)還包括嵌合人抗體和CDR移植抗體。嵌合人抗體包括非人物種的抗體的VH和'以及人抗體的CH和Q結(jié)構(gòu)域。CDR-移植抗體通過用除了人以外的動物的抗體的VH和'的CDR分別置換人抗體的VH和'的CDR來產(chǎn)生。[0042]術(shù)語"分離的多核苷酸"，如本文中所使用的，意指基因組、cDNA或合成來源的多核苷酸或其組合，根據(jù)其來源，"分離的多核苷酸"（1)不與和"分離的多核苷酸"一起被天然發(fā)現(xiàn)的多核苷酸的全部或部分結(jié)合，（2)有效地連接至與其非天然連接的多核苷酸，或（3)不作為更大的序列的一部分天然發(fā)生。[0043]術(shù)語"分離的蛋白質(zhì)"、"分離的多肽"或"分離的抗體"是指根據(jù)其來源或衍生的來源：（1)不與在天然狀態(tài)下與其相伴的天然結(jié)合的組分結(jié)合；(2)不含來自相同物種的其他蛋白質(zhì)；（3)由來自不同物種的細胞表達；或（4)非天然發(fā)生的蛋白質(zhì)、多肽或抗體。因此，例如通過化學(xué)方法合成或在與其所天然源自的細胞不同的細胞系統(tǒng)中合成的多肽將是與其天然結(jié)合的組分相"分離的"。還可使用任何合適的蛋白質(zhì)純化技術(shù)通過分離使得蛋白質(zhì)大體上不含天然結(jié)合的組分。[0044]分離的抗體的實例包括已使用IL-6親和純化的IL-6抗體和通過細胞系體外合成的IL-6抗體。[0045]術(shù)語"KD"是指特定抗體-抗原相互作用的結(jié)合親和力平衡常數(shù)。當(dāng)KD<ImM，優(yōu)選<100nM和最優(yōu)選<10nM時，抗體被認(rèn)為特異性結(jié)合抗原?？衫帽砻娴入x子體共振技術(shù)，例如使用實施例7中描述的BIAC0RE?系統(tǒng)來測量KD結(jié)合親和力常數(shù)。[0046]術(shù)語"k#"是指特定抗體-抗原相互作用的解離速率常數(shù)。可利用表面等離子體共振技術(shù)，例如使用實施例7中描述的BIAC0RE?系統(tǒng)來測量k#解離速率常數(shù)。[0047]術(shù)語"天然發(fā)生的核苷酸"，如本文中所使用的，包括脫氧核糖核苷酸和核糖核苷酸。術(shù)語"修飾的核苷酸"，如本文中所使用的，包括例如具有修飾的或取代的糖基的核苷酸。本文中提及的術(shù)語"寡核苷酸連接"包括寡核苷酸連接例如硫代磷酸酯、二硫代憐酸酯、硒代憐酸酯（phosphoroselenoate)、二硒代憐酸酯（phosphorodiselenoate)、phosphoroanilothioate、phoshoraniladate、氨基憐酸酉旨（phosphoroamidate)〇需要時，寡核苷酸可以包含用于檢測的標(biāo)記物。[0048]"有效連接的"序列包括與目的基因鄰近的表達控制序列和以反式或在遠距離起作用以控制目的基因的表達控制序列。[0049]術(shù)語"百分比序列同一性"，在核酸序列的背景中，是指當(dāng)就最大相應(yīng)性對齊時，兩個序列中相同的殘基。序列同一性比較的長度可以是至少大約9個核苷酸，通常至少大約18個核苷酸，更通常至少大約24個核苷酸，通常至少大約28個核苷酸，更通常地至少大約32個核苷酸和至少大約36、48或更多個核苷酸。存在許多本領(lǐng)域內(nèi)已知的可用于測量核苷酸序列同一性的不同算法。例如，可使用FASTA、Gap或Bestfit(其為ffisconsinPackageVersion10.0,GeneticsComputerGroup(GCG),Madison,Wisconsin中的程序）比較多核苷酸序列。FASTA，其包括例如程序FASTA2和FASTA3，提供質(zhì)詢序列與搜索序列之間最佳重疊的區(qū)域的比對和百分比序列同一性（Pearson,MethodsEnzymol.183:63-98(1990)；Pearson,MethodsMol.Biol.132:185-219(2000)；Pearson,MethodsEnzymol.266:227-258(1996);Pearson，J.Mol.Biol.276:71-84(1998);通過引用合并入本文）。通常使用特定程序或算法的缺省參數(shù)。例如，可使用FASTA和其缺省參數(shù)(6的字長和用于評分矩陣的N0PAM因子）或使用GCGVersion6.1(通過引用合并入本文）中提供的Gap和其缺省參數(shù)來測定核酸序列之間的百分比序列同一性。[0050]除非另外指出，否則核酸序列包括其互補序列。因此，具有特定序列的核酸應(yīng)當(dāng)理解為包括具有其互補序列的其互補鏈。[0051]術(shù)語"百分比序列同一性"在氨基酸序列的背景中是指，當(dāng)就最大相應(yīng)性對齊時兩個序列中相同的殘基。序列同一性比較的長度可以是至少大約5個氨基酸，通常至少大約20個氨基酸，更常見地至少大約30個氨基酸、通常至少大約50個氨基酸，更常見地至少大約100個氨基酸和甚至更常見地大約150、200或更多個氨基酸。存在許多本領(lǐng)域內(nèi)已知的可用于測量氨基酸序列同一性的不同算法。例如，可使用FASTA、Gap或Bestfit(其為ffisconsinPackageVersion10.0,GeneticsComputerGroup(GCG),Madison,Wisconsin中的程序）比較氨基酸序列。[0052]通常使用序列分析軟件測量多肽的序列同一性。蛋白質(zhì)分析軟件使用分配給不同置換、缺失和其他修飾（包括保守氨基酸置換）的相似性的量度來匹配序列。例如，GCG包括程序例如"Gap"和"Bestfit"，所述程序（使用由程序指定的缺省參數(shù)）可用于測定密切相關(guān)的多肽（例如來自不同生物物種的同源多肽）之間或野生型蛋白質(zhì)與其類似物之間的序列同源性或序列同一性。參見，例如，GCGVersion6.1(UniversityofWisconsin,WI)。還可使用缺省或推薦的參數(shù)利用FASTA比較多肽序列，參見GCGVersion6.1。FASTA(例如，F(xiàn)ASTA2和FASTA3)提供質(zhì)詢序列與搜索序列之間最佳重疊的區(qū)域的比對和百分比序列同一性（Pearson，MethodsEnzymol.183:63-98(1990);Pearson，MethodsMol.Biol.132:185-219(2000))。當(dāng)將序列與含有大量來自不同生物的序列的數(shù)據(jù)庫相比較時，另一個算法是計算機程序BLAST，特別地blastp或tblastn(使用程序提供的缺省參數(shù)）。參見，例如，A1tschul等人，J.Mol.Biol.215:403-410(1990);A1tschul等人，NucleicAcidsRes.25:3389-402(1997)。[0053]術(shù)語"重組宿主細胞"（或簡稱"術(shù)語細胞"），如本文中所使用的，是指已向其中引入了重組表達載體的細胞。應(yīng)當(dāng)理解，"重組宿主細胞"和"宿主細胞"不僅指特定受試細胞而且還指這樣的細胞的后代。因為某些修飾可由于突變或環(huán)境影響而在連續(xù)世代中發(fā)生，因此，這樣的后代可能實際上與親本細胞并不完全一致，但其仍然包括在本文中使用的術(shù)語"宿主細胞"的范圍內(nèi)。[0054]當(dāng)至少大約60至75%的樣品展示單一類別的多肽時，蛋白質(zhì)或多肽是"大體上純的"、"大體上均一的"或"大體上純化的"。多肽或蛋白質(zhì)可以是單體或多聚體。大體上純的多肽或蛋白質(zhì)通?？砂鞍踪|(zhì)樣品的大約50%、60%、70%、80%或90%w/w，更通常地大約95%，和優(yōu)選純度可以高于99%。蛋白質(zhì)的純度或同質(zhì)性可通過任何合適的方法來顯示，例如進行蛋白質(zhì)樣品的聚丙烯酰胺凝膠電泳，然后在用染料對凝膠染色后顯現(xiàn)單個多肽條帶。如本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到的，可使用HPLC或用于純化的其他方法提供更高的分辨率。[0055]術(shù)語"大體上的相似性"或"大體上的序列相似性"，當(dāng)指核酸或其片段時，是指當(dāng)通過適當(dāng)?shù)暮塑账岵迦牖蛉笔c另一個核酸（或其互補鏈）最佳對齊時，在至少大約85%、至少大約90%和至少大約95%、96%、97%、98%或99%的核苷酸堿基中存在核苷酸序列同一性，如通過任何熟知的序列同一性算法例如FASTA、BLAST或Gap(如上論述的）測量的。[0056]當(dāng)用于多肽時，術(shù)語"大體上的同一性"或"大體上的相似性"，是指兩個氨基酸序列，當(dāng)例如使用程序GAP或BESTFIT，利用程序提供的缺省缺口權(quán)重，進行最佳對齊時，共有至少70%、75%或80%的序列同一性，優(yōu)選至少90%或95%的序列同一性，和更優(yōu)選至少97%、98%或99%的序列同一'丨生。在某些實施方案中，不相同的殘基位點相異于保守氨基酸置換。[0057]術(shù)語"表面等離子體共振"是指允許通過檢測生物傳感器基質(zhì)內(nèi)蛋白質(zhì)濃度的改變（例如使用BIAC0RE?系統(tǒng)（PharmaciaBiosensorAB，Uppsala，SwedenandPiscataway，N.J.))來分析實時生物特異性相互作用的光學(xué)現(xiàn)象。關(guān)于進一步描述，參見JonssonU.等人，Ann.Biol.Clin.51:19-26(1993);JonssonU.等人，Biotechniques11:620-627(1991)JonssonB.等人，J.Mol.Recognit.8:125-131(1995);和JohnssonB.等人，Anal.Biochem.198:268-277(1991)。[0058]"治療有效量"是指可將待治療的病癥的一個或多個癥狀緩解至一定程度的施用的治療劑的量。關(guān)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療，治療有效量是指具有至少一個下列作用的量：減輕關(guān)節(jié)的結(jié)構(gòu)損傷；抑制（即，減緩至一定程度，優(yōu)選停止）液體在關(guān)節(jié)面（jointarea)中的積累；和將與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎相關(guān)的一個或多個癥狀緩解至一定程度（或，優(yōu)選，消除）。[0059]"治療"、"醫(yī)治"和"療法"是指減輕或消除生物學(xué)病癥和/或其伴隨癥狀的方法。[0060]術(shù)語"利用"，就特定基因而言，是指在B細胞成熟過程中，抗體中特定區(qū)域的氨基酸序列最終來源于該基因。例如，短語"利用人％-3家族基因的重鏈可變區(qū)氨基酸序列"是指其中抗體的VH區(qū)在B細胞成熟過程中來源于基因區(qū)段的VH-3家族的情況。在人B細胞中，存在超過30個不同的用以產(chǎn)生抗體的功能性重鏈可變區(qū)基因。因此，特定重鏈可變區(qū)基因的使用在結(jié)合抗原和功能活性的組合性質(zhì)方面表示抗原-抗體相互作用的結(jié)合基序。如將認(rèn)識到的，基因利用分析只提供了抗體結(jié)構(gòu)的有限概觀。由于人B細胞隨機產(chǎn)生V-D-J重鏈或V-Jk輕鏈轉(zhuǎn)錄物，因此存在許多發(fā)生的次級過程，包括但不限于體細胞高度突變、添加和CDR3延伸。參見，例如，Mendez等人NatureGeneticsl5:146-156(1997)。[0061]術(shù)語"載體"，如本文中所使用的，是指能夠轉(zhuǎn)運已與其連接的另一個核酸的核酸分子。在一些情況下，載體是質(zhì)粒，即，可將另外的DNA區(qū)段連接至其中的環(huán)狀雙鏈DNA片段。例如，載體是病毒載體，其中可將另外的DNA區(qū)段連接入病毒基因組。在另一種情況下，載體能夠在已向其中引入了它們的宿主細胞中自主復(fù)制（例如，具有細菌復(fù)制起點的細菌載體和附加型哺乳動物載體）。在另一個實例中，載體（例如，非附加型哺乳動物載體）可在引入宿主細胞后被整合入宿主細胞的基因組，從而可隨宿主基因組一起復(fù)制。此外，某些載體能夠指導(dǎo)與它們有效連接的基因的表達。此類載體在本文中稱為"重組表達載體"（或簡稱，"表達載體"）。[0062]術(shù)語"標(biāo)記"或"標(biāo)記的"是指將另一個分子整合在抗體中。例如，標(biāo)記是可檢測的標(biāo)志物，例如，整合放射性標(biāo)記的氨基酸或連接至具有生物素基部分（其可通過標(biāo)記的抗生物素蛋白（例如，含有可通過光學(xué)或比色法來檢測的熒光標(biāo)志物或酶促活性的鏈霉抗生物素蛋白）來檢測）的多肽。在另一個實施方案中，標(biāo)記物或標(biāo)志物可以是治療劑，例如，藥物綴合物或毒素。標(biāo)記多肽和糖蛋白的各種方法在本領(lǐng)域內(nèi)是熟知的并且可被使用。用于多肽的標(biāo)記物的實例包括但不限于下列：放射性同位素或放射性核素（例如，3h、14(：、15隊355、9°￥、991'(3、111111、1251、1311)、熒光標(biāo)記物（例如^11'(：，羅丹明、鑭系元素磷光體）、酶標(biāo)記物（例如，辣根過氧化物酶、半乳糖苷酶、螢光素酶、堿性磷酸酶）、化學(xué)發(fā)光標(biāo)志物、生物素基團、被第二報道分子識別的預(yù)先確定的多肽表位（例如，亮氨酸拉鏈對序列、第二抗體的結(jié)合部位、金屬結(jié)合結(jié)構(gòu)域、表位標(biāo)簽）、磁性試劑例如釓螯合劑、毒素例如百日咳毒素、泰素、細胞松弛素B、短桿菌肽D、溴化乙錠、依米丁、絲裂霉素、依托泊苷、替尼泊苷（tenoposide)、長春新堿、長春堿、秋水仙堿、多柔比星、柔紅霉素、二輕基炭疽菌素二酮(dihydroxyanthracindione)、米托蒽醌、光輝霉素、放線菌素D、l_去氫睪酮、糖皮質(zhì)激素、普魯卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛爾和嘌呤霉素以及其類似物或同源物。在一些情況下，通過不同長度的間隔臂連接標(biāo)記物以減少潛在的空間位阻。[0063]俥用的治療方法[0064]還提供了通過給有此需要的患者施用IL-6抗體來抑制IL-6活性的方法。可治療性使用本文中描述的任何抗體或其抗原結(jié)合部分。在優(yōu)選實施方案中，IL-6抗體是人抗體、嵌合抗體或人源化抗體。在另一個優(yōu)選實施方案中，IL-6是人的并且患者是人患者?？蛇x擇地，患者可以是表達IL-6(IL-6抗體與其交叉反應(yīng)）的哺乳動物?？山o表達IL-6的、用作人疾病的動物模型的非人哺乳動物施用抗體。此類動物模型可用于證明抗體的治療功效。[0065]可給表達異常高水平的IL-6的患者施用IL-6抗體或其抗體部分?？墒┯每贵w一次，或可施用抗體多次。可以以每天3次至每6個月或更長時間1次施用抗體。施用可以按計劃進行，例如每天3次，每天2次，每天1次，每2天1次，每3天1次，每周1次，每2周1次，每個月1次，每2個月1次，每3個月1次和每6個月1次。還可通過微型泵（minipump)連續(xù)施用抗體?？赏ㄟ^粘膜、口腔、鼻內(nèi)、吸入、靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、胃腸外或瘤內(nèi)途徑施用抗體。可施用抗體1次，至少2次或進行至少一段時間直至狀況得到治療、緩解或治愈。通常只要狀況存在，就施用抗體。通常將抗體作為本文中描述的藥物組合物的部分來施用?？贵w的劑量通常在〇?1至l〇〇mg/kg、0.5至50mg/kg、1至20mg/kg和1至10mg/kg的范圍內(nèi)。抗體的血清濃度可通過任何合適的方法來測量。[0066]還提供了用于治療哺乳動物包括人的異常細胞浸潤的方法，其包括給哺乳動物施用治療有效量的在治療異常細胞浸潤中有效的IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分，如本文中描述的。[0067]IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分可用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。它們還可用于治療其中牽涉IL-6的其他疾病?？墒褂肐L-6抗體或其抗原結(jié)合部分治療的其他疾病的實例包括骨關(guān)節(jié)炎，特別地與骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)的疼痛、卡斯?fàn)柭?、青少年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎、成人斯蒂爾病(adult-onsetStill'sdisease)、骨質(zhì)疏松癥、膿毒癥、多發(fā)性骨髓瘤、腎細胞癌和克羅恩病。[0068]下面論述可使用抗體或其抗原結(jié)合部分治療的一些疾病。[0069]類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA)被認(rèn)為是產(chǎn)生發(fā)炎的關(guān)節(jié)（其最終腫脹、變得疼痛和經(jīng)歷關(guān)節(jié)的軟骨、骨和韌帶的降解）的慢性自身免疫和炎性疾病。RA的結(jié)果是關(guān)節(jié)的變形、不穩(wěn)定和僵硬以及關(guān)節(jié)內(nèi)的結(jié)瘢。關(guān)節(jié)以高度可變的速率惡化。許多因素包括遺傳易感性(geneticpredisposition)可影響疾病的模式?；碱愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的人可具有溫和的病程，在無病的情況下長時間才消退的偶爾潮紅，或穩(wěn)定地進行的疾?。ㄆ淇梢允锹幕蚩斓模ｎ愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎可突然發(fā)作，并且許多關(guān)節(jié)同時發(fā)炎。更常見地，其令人不易察覺地開始，逐漸影響不同的關(guān)節(jié)。炎癥對于受累身體兩側(cè)上的關(guān)節(jié)通常是對稱的。通常手指、足趾、手、足、腕、肘和踝中的小關(guān)節(jié)首先開始發(fā)炎，然后是膝蓋和髖部的關(guān)節(jié)發(fā)炎。[0070]類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疼痛通常是軀體性傷害性關(guān)節(jié)疼痛。腫脹的腕關(guān)節(jié)可擠壓神經(jīng)并且導(dǎo)致因腕管綜合征（carpaltunnelsyndrome)而引起的麻木或麻刺感。囊腫可在受累膝蓋的后邊發(fā)生，其可破裂，從而引起小腿的疼痛和腫脹。[0071]骨關(guān)節(jié)炎的特征在于關(guān)節(jié)軟骨的喪失和骨的肥大。骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)作通常是漸進的，疼痛是共同的早期癥狀。隨著骨關(guān)節(jié)炎的進展，關(guān)節(jié)活動減少，并且可發(fā)生壓痛和骨擦感（gratingsensation)。骨關(guān)節(jié)炎通常影響手、足、脊柱和大的承重關(guān)節(jié)例如髖部和膝蓋。通?；诎Y狀或利用X射線（其可顯示關(guān)節(jié)間隙的變窄、增加的軟骨下骨的密度、關(guān)節(jié)外圍骨贅的形成和軟骨下骨髓中假性囊腫的形成）診斷骨關(guān)節(jié)炎。進行血液檢測以排除可模擬骨關(guān)節(jié)炎的其他狀況。此外，在診斷骨關(guān)節(jié)炎時，可進行關(guān)節(jié)穿刺術(shù)，其中使用消毒的針取出關(guān)節(jié)液。關(guān)節(jié)液分析用于排除痛風(fēng)、感染和其他關(guān)節(jié)炎病因。骨關(guān)節(jié)炎也稱為退行性關(guān)節(jié)病、退行性關(guān)節(jié)炎或骨關(guān)節(jié)炎。[0072]萊特爾綜合征（Reiter'ssyndrome)(反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎）是關(guān)節(jié)和附著在關(guān)節(jié)上的腱的炎癥，通常伴隨眼結(jié)膜和粘膜（例如口和泌尿生殖道的粘膜）的炎癥以及伴隨特征性皮疹（rash)。萊特爾綜合征也稱為反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎，因為關(guān)節(jié)炎癥似乎是對源于腸或生殖道中的感染的反應(yīng)。該綜合征在20至40歲男性中最常見。存在2種形式的萊特爾綜合征：一種通過性傳播疾病例如衣原體感染而發(fā)生，另一種通常在腸道感染例如志賀氏菌病或沙門氏菌病后發(fā)生。（患有此類感染的大多數(shù)人不發(fā)生萊特爾綜合征）。在暴露于這些感染后發(fā)生萊特爾綜合征的人似乎對該類型的反應(yīng)具有遺傳易感性（其與在患有強直性脊柱炎的人中發(fā)現(xiàn)的相同基因部分相關(guān)）。[0073]感染性關(guān)節(jié)炎是由滑液或關(guān)節(jié)周組織的細菌、真菌或病毒感染引起的關(guān)節(jié)炎癥。感染性關(guān)節(jié)炎的危險因素包括老年（即，60歲以上）；酒精中毒；貧血；關(guān)節(jié)穿刺術(shù)或手術(shù)；慢性醫(yī)學(xué)疾?。ɡ纾尾』蚋尾。?；糖尿??；血友?。幻庖呷毕?，包括HIV;免疫抑制治療，包括皮質(zhì)類固醇；IV藥物使用；惡性腫瘤；假體關(guān)節(jié)植入；腎衰竭；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；鐮刀形細胞病；皮膚感染和系統(tǒng)性紅斑狼瘡。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者處于細菌性關(guān)節(jié)炎的顯著增加的危險中。關(guān)節(jié)感染可以是急性的，其中關(guān)節(jié)疼痛和腫脹突然發(fā)作（例如，在數(shù)小時至數(shù)天內(nèi)），或慢性的，其中輕微的癥狀隱伏發(fā)展。急性細菌性關(guān)節(jié)炎通常伴隨中度至嚴(yán)重的關(guān)節(jié)疼痛、溫?zé)幔╳armth)、壓痛和受限制的運動。慢性細菌性關(guān)節(jié)炎通常伴隨逐漸的腫脹、輕度溫?zé)?、關(guān)節(jié)面的極輕微發(fā)紅或不發(fā)紅以及酸痛（其可以是輕微的）。[0074]銀屑病關(guān)節(jié)炎是在少數(shù)銀屑病患者中發(fā)生以及在一些獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)患者中日益增加地發(fā)生的影響關(guān)節(jié)的炎性關(guān)節(jié)炎。銀屑病關(guān)節(jié)炎可以是輕微的或可產(chǎn)生與在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中觀察到的關(guān)節(jié)變化相似的嚴(yán)重的關(guān)節(jié)變形?？墒茔y屑病關(guān)節(jié)炎影響的關(guān)節(jié)包括手指和足趾的遠端指節(jié)間0HP)關(guān)節(jié)，和通常大關(guān)節(jié)和小關(guān)節(jié)例如骶髂和脊柱的不對稱受累。皮膚或指甲（趾甲）的銀屑病可在關(guān)節(jié)受累之前或之后。銀屑病關(guān)節(jié)炎的時程特征在于可以與或可以不與皮膚惡化和好轉(zhuǎn)同步的關(guān)節(jié)炎惡化和好轉(zhuǎn)，并且可發(fā)生至慢性關(guān)節(jié)炎的進展。診斷包括銀屑病、銀屑病的家族史、顯示DIP關(guān)節(jié)受累的X線表現(xiàn)、不對稱大關(guān)節(jié)受累、用于排除類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的類風(fēng)濕性因子的陰性血液檢測和在一些患者中HLA-B27抗原的存在（尤其是當(dāng)脊柱受累時）的診斷。[0075]多關(guān)節(jié)炎是牽涉5個或更多個關(guān)節(jié)的任何類型的關(guān)節(jié)炎。2、3或4個關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)炎稱為寡關(guān)節(jié)炎或少關(guān)節(jié)炎。多關(guān)節(jié)炎最常見地由自身免疫病癥例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎或紅斑狼瘡引起，但也可由感染引起。多關(guān)節(jié)炎在任何年齡都可發(fā)生并且無性別特異性。[0076]青少年關(guān)節(jié)炎（Juvenilearthritis)是在16歲之前開始的關(guān)節(jié)炎。存在幾種不同類型的青少年關(guān)節(jié)炎。最常見的類型是青少年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（JRA)，也稱為青少年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎。JRA包括全身發(fā)病型JRA、少關(guān)節(jié)型JRA(其影響5個以下的關(guān)節(jié)），和多關(guān)節(jié)型JRA(其影響5個或更多個關(guān)節(jié)）。JRA的診斷包括考慮癥狀，拍攝x射線照片和進行血液分析。醫(yī)生可用于診斷JRA的特定試驗包括完全血細胞計數(shù)、針對感染的血液培養(yǎng)、骨髓檢查、紅細胞沉降率的檢查、類風(fēng)濕性因子抗體測定、抗核抗體測定和骨掃描。[0077]青少年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎相似的關(guān)節(jié)的持久性或復(fù)發(fā)性炎癥，其始于16歲以前并且特征在于關(guān)節(jié)或結(jié)締組織的炎癥。存在幾種類型的青少年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，其通過在疾病的第一個月期間發(fā)生的癥狀和受影響的關(guān)節(jié)數(shù)目來確定。這些類型包括少關(guān)節(jié)青少年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多關(guān)節(jié)炎和全身性疾?。ㄋ沟贍柌。Ｔ谏訇P(guān)節(jié)青少年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中，4個或更少的關(guān)節(jié)（通常腿的關(guān)節(jié)）受到影響。在多關(guān)節(jié)炎中，5個或更多個（有時多至20至40個）關(guān)節(jié)受影響。在全身性疾?。ㄋ沟贍柌。┲?，可牽涉任何數(shù)目的關(guān)節(jié)。[0078]青少年反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎是與反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎相似的關(guān)節(jié)的持久性或復(fù)發(fā)性炎癥，但其始于16歲以前。[0079]青少年銀屑病關(guān)節(jié)炎是患者中始于16歲以前的銀屑病關(guān)節(jié)炎，并且特征在于慢性關(guān)節(jié)炎和銀屑病的存在；或慢性關(guān)節(jié)炎和至少兩個下列狀況的存在：指炎、甲異常（nailabnormality)(例如，蝕損斑或甲剝離）和至少一個直系親屬的銀屑病的家族史。如在患有銀屑病關(guān)節(jié)炎的成人中，關(guān)節(jié)炎可在皮膚狀況之前發(fā)生。青少年銀屑病關(guān)節(jié)炎發(fā)作時的主要模式是小關(guān)節(jié)和大關(guān)節(jié)的不對稱寡關(guān)節(jié)炎（通常具有指炎）。[0080]在一個方面，IL-6介導(dǎo)的病癥的特征在于纖維化。術(shù)語"纖維化"，如本文中所使用的，是指特征在于響應(yīng)組織損傷的纖維變性材料（例如，細胞外基質(zhì)）的過度沉積和代謝的病理狀況。在許多情況下，纖維化代表正常修復(fù)過程（即，傷口愈合），其由于慢性或過度組織損傷而出錯，從而導(dǎo)致成纖維細胞或星形細胞活化和增殖以及膠原積累。纖維化狀況包括，與血管疾病例如心臟病、腦病和外周血管病以及所有主要組織和器官系統(tǒng)例如眼、皮膚、腎、肺、腸和肝相關(guān)的纖維增生性病癥（Wynn,NatureReviews4:583-594(2004);Bataller，R和&'enner，D.，J.Clin.Invest.115:209-218(2005))。其他來源是化學(xué)治療藥物、輻射誘發(fā)的纖維化以及損傷和燒傷。雖然纖維化狀況包括一大類病理狀況，但據(jù)信對于大多數(shù)此類狀況，導(dǎo)致纖維變性組織積累的一般機制具有許多共同的元素。通常狀況響應(yīng)炎性細胞的流入而被起始，然后被浸潤細胞（例如，巨噬細胞、T細胞）與組織內(nèi)的駐留細胞(residentcel1)(例如，星形細胞、成肌纖維細胞、枯否細胞）之間的細胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑保持。此外，周細胞是參與硬皮病發(fā)生的至關(guān)重要的纖維發(fā)生細胞類型，并且已顯示TOGF受體酪氨酸激酶抑制劑（RTKI)減緩周細胞的增殖以及抑制患有該進行性疾病的患者的皮膚損傷。在腎中，白細胞浸潤在介導(dǎo)慢性腎病中的腎小管間質(zhì)性炎癥和纖維化中起主要作用。[0081]如本文中所使用的，也將"纖維化"與"成纖維細胞積累和膠原沉積"同義地使用。成纖維細胞是結(jié)締組織細胞，其分散在整個軀體的結(jié)締組織中。成纖維細胞分泌含有I型和/或III型膠原的非剛性細胞外基質(zhì)，附近的成纖維細胞或星形細胞遷移入傷口、增殖并且產(chǎn)生大量的膠原細胞外基質(zhì)。膠原是富含甘氨酸和脯氨酸的纖維狀蛋白，其為細胞外基質(zhì)和結(jié)締組織、軟骨和骨的主要成分。膠原分子是稱為a鏈的三鏈螺旋結(jié)構(gòu)，其在繩狀螺旋中彼此相互繚繞。膠原以幾種形式或類型存在；其中，I型（最常見的），發(fā)現(xiàn)于皮膚、腱和骨中；III型發(fā)現(xiàn)于皮膚、血管和內(nèi)部器官中。示例性纖維化狀況包括但不限于：[0082](I)與纖維化相關(guān)的肺病，例如，特發(fā)性肺纖維化、輻射誘發(fā)的纖維化、慢性阻塞性肺疾?。–0PD)、硬皮病、博來霉素誘發(fā)的肺纖維化、慢性哮喘，硅肺，石棉誘發(fā)的肺纖維化、急性肺損傷和急性呼吸窘迫（包括細菌性肺炎誘發(fā)的，創(chuàng)傷誘發(fā)的，病毒性肺炎誘發(fā)的，呼吸機誘發(fā)的，非肺性（non-pulmonary)膿毒癥誘發(fā)的和吸入（aspiration)誘發(fā)的）；[0083](II)與損傷/纖維化（腎纖維化）相關(guān)的慢性腎病，例如，狼瘡、糖尿病、硬皮病、腎小球腎炎、局灶節(jié)段性腎小球硬化、IgA腎病、高血壓、同種異體移植、狼瘡和Alport;[0084](III)腸纖維化，例如，硬皮病和輻射誘發(fā)的腸纖維化；[0085](IV)肝纖維化，例如，肝硬化，酒精誘發(fā)的肝纖維化、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，膽管損傷，原發(fā)性膽汁性肝硬化，感染或病毒誘發(fā)的肝纖維化（例如慢性HCV感染）和自身免疫肝炎；[0086](V)頭頸纖維化，例如，輻射誘發(fā)的；[0087](VI)角膜瘢痕形成，例如，LASIX?、角膜移植和小梁切除術(shù)（trabeculectomy);[0088](VII)肥厚性瘢痕形成和疤痕疙瘩，例如，燒傷誘發(fā)的和手術(shù)誘發(fā)的；和其他纖維化疾病，例如，肉瘤樣病、硬皮病、脊髓損傷/纖維化、骨髓纖維化、血管再狹窄、動脈粥樣硬化、韋格納氏肉芽腫（Wegener'sgranulomatosis)、混合性結(jié)締組織病和佩羅尼氏病(Peyronie'sdisease)〇[0089]術(shù)語"纖維肌痛"也稱為纖維肌痛綜合征。纖維肌痛的AmericanCollegeofRheumatology(ACR)1990分類標(biāo)準(zhǔn)包括3個月以上的慢性泛發(fā)性疼痛史和體檢時在18個壓痛點中的11個（或更多個）點上疼痛的存在，其中壓痛點在腰部以上和以下以及在軀體兩側(cè)都有發(fā)生（參見例如，Wolfe等人，ArthritisRheum.，1990;33:160-172)。纖維肌痛患者通常展示以異常性疼痛（響應(yīng)正常非疼痛刺激的疼痛）和痛覺過敏（增加的對疼痛刺激的敏感性）形式存在的疼痛感覺異常。人患者中纖維肌痛的影響可使用下列來評估：ACR標(biāo)準(zhǔn)、纖維肌痛指數(shù)問卷（FIQ)總分、疼痛嚴(yán)重度指數(shù)（例如，VAS或Likert疼痛等級）和干擾、壓痛點的數(shù)目或疼痛閾值評估。[0090]雖然慢性泛發(fā)性疼痛是纖維肌痛的標(biāo)志性癥狀，但患者通常還展現(xiàn)其他癥狀，包括下列癥狀的一個或多個：疲勞、睡眠障礙、偏頭痛或緊張性頭痛、腸易激綜合征、尿頻率的變化、晨僵、麻木和麻刺感、痛經(jīng)、多種化學(xué)物質(zhì)過敏（multiplechemicalsensitivities)、難以集中注意力和影響皮膚小血管的循環(huán)問題（雷諾現(xiàn)象（Raynaud'sphenomenon))。與引起慢性疼痛的許多狀況一樣，纖維肌痛患者還可經(jīng)歷纖維肌痛誘發(fā)的焦慮、抑郁或兩者。一些纖維肌痛患者發(fā)現(xiàn)，冷、潮濕的天氣、情緒壓力、用力過度和其他因素加重他們的癥狀。[0091]與纖維肌痛相關(guān)的疼痛是指與纖維肌痛綜合征相關(guān)的任何疼痛，包括作為纖維肌痛的標(biāo)志的慢性泛發(fā)性疼痛和與纖維肌痛的其他癥狀相關(guān)的疼痛。[0092]強直性脊柱炎是引起脊柱和骶髂關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)炎的風(fēng)濕性疾病。其從終生存在的背痛的間歇性發(fā)作變化至攻擊脊柱、外周關(guān)節(jié)和其他身體器官的嚴(yán)重慢性疾病。一般地，第一癥狀是在數(shù)周或數(shù)月的過程中逐漸發(fā)生的腰部和臀部的頻繁疼痛和僵硬。疼痛通常是隱約的和彌漫性的，而不是局部性的。強直性脊柱炎通常通過徹底的體檢包括X-射線、個體醫(yī)療史和強直性脊柱炎的家族史以及血液工作（包括對HLA-B27的檢測）來診斷。[0093]銀屑病是可折磨所有年齡的人的慢性炎性皮膚病癥。臨床上，銀屑病最常影響肘、膝、頭皮、腰骶部、臀溝或龜頭的皮膚。受銀屑病影響的皮膚通常包含一個或多個干燥損傷（其包含界限清楚的、粉紅色至鮭魚色的斑（由特征性銀白色的、疏松粘著的鱗屑覆蓋））。在大約30%的銀屑病患者中，指甲（趾甲）也受到例如蝕損斑或甲剝離影響。涉及所有形式的銀屑病，包括環(huán)狀銀屑?。╬soriasisannularis)和環(huán)形銀屑?。╬soriasisannulata)，其也稱為環(huán)狀銀屑病（psoriasiscircinata);關(guān)節(jié)病性銀屑?。粡浡糟y屑病或彌散性銀屑??；剝脫性銀屑病；屈側(cè)銀屑病；地圖狀銀屑??；回旋狀銀屑病；錢幣形銀屑??；掌銀屑?。稽c狀銀屑?。缓头Q為Zambusch型普通膿皰性銀屑病或簡稱膿皰性銀屑病的罕見變型。在形態(tài)學(xué)上，已確定的銀屑病損傷具有熟知的組織學(xué)特征例如表皮增厚和角化不全的鱗屑。在病理上，銀屑病目前被認(rèn)為是T細胞介導(dǎo)的自身免疫疾病。銀屑病的發(fā)作通常是漸進的，并且典型時程特征在于慢性好轉(zhuǎn)和復(fù)發(fā)以及偶爾急劇惡化。銀屑病的診斷通過評估患者的臨床體征和癥狀以及銀屑病的家族史來進行。僅通過目視檢查患者的皮膚損傷來診斷銀屑病很少是困難的，因此這通常是完整診斷所需要的全部。然而，有時將皮膚活檢組織經(jīng)歷組織學(xué)分析以尋找銀屑病的體征。[0094]系統(tǒng)性紅斑狼瘡（"SLE")，也稱為散布性紅斑狼瘡，是原因不明的慢性炎性結(jié)締組織病癥，其可累及關(guān)節(jié)、腎、漿液性表面和血管壁并且主要在年輕婦女中但也在兒童中發(fā)生。90%的SLE病例在婦女中發(fā)生。SLE可以以發(fā)熱突然開始（模擬急性感染）或可在數(shù)月或數(shù)年中隱伏發(fā)展（伴隨發(fā)熱和身體不適）。血管性頭痛，癲癇或精神病可能是初始的發(fā)現(xiàn)。可能顯現(xiàn)與任何器官系統(tǒng)有關(guān)的表現(xiàn)。范圍從間歇性關(guān)節(jié)痛至急性多關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)癥狀在大約90%的患者中發(fā)生并且可在其他表現(xiàn)出現(xiàn)之前存在數(shù)年。在長期疾病中，具有明顯的繼發(fā)關(guān)節(jié)變形的掌指關(guān)節(jié)上的囊性插入糜爛（capsularinsertionalerosion)可發(fā)生，而無明顯邊緣糜爛（Jaccoud'關(guān)節(jié)炎）的X射線證據(jù)。然而，大多數(shù)狼瘡多關(guān)節(jié)炎是非破壞性的和非致畸形的。[0095]系統(tǒng)性紅斑狼瘡在5歲以下是罕見的，大多數(shù)具有SLE的兒童在青春期發(fā)生該疾病。青少年SLE的體征和癥狀與成人中的類似。然而，兒童具有特別高水平的從盤狀至全身性疾病的轉(zhuǎn)換。[0096]痛風(fēng)（也稱為痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎）是由于體內(nèi)積累太多的尿酸（所述尿酸形成晶體，沉積在關(guān)節(jié)中并且引起炎癥）而引起的外周關(guān)節(jié)的復(fù)發(fā)性急性或慢性關(guān)節(jié)炎。在痛風(fēng)的急性發(fā)作期間，在關(guān)節(jié)中，通常在大趾的關(guān)節(jié)中存在腫脹、炎癥和劇痛。慢性痛風(fēng)可在發(fā)作數(shù)年后開始，永久性損傷關(guān)節(jié)和使關(guān)節(jié)變形并且破壞腎細胞。大多數(shù)情況發(fā)生在男性中并且第一次發(fā)作極少在30歲以前發(fā)生。[0097]未分化脊椎關(guān)節(jié)?。║SpA)是用于描述不滿足強直性脊柱炎或相關(guān)疾病的明確診斷的標(biāo)準(zhǔn)的人中的脊柱炎的癥狀和體征的術(shù)語。許多明確確定的綜合征包括在脊椎關(guān)節(jié)病家族中，包括強直性脊柱炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、炎性腸病的關(guān)節(jié)炎、萊特爾綜合征、慢性反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎和起止點炎（enthesitis)相關(guān)青少年關(guān)節(jié)炎。隨著時間流逝，一些具有USpA的人將發(fā)展明確確定形式的脊柱炎例如強直性脊柱炎。[0098]青少年脊椎關(guān)節(jié)炎（JSpA)，也稱為青少年脊椎關(guān)節(jié)病是用于一組兒童風(fēng)濕性疾病的醫(yī)學(xué)術(shù)語，其在16歲以前引起關(guān)節(jié)炎并且可持續(xù)終生。青少年脊椎關(guān)節(jié)病包括未分化脊椎關(guān)節(jié)病、青少年強直性脊柱炎、青少年銀屑病關(guān)節(jié)炎、與炎性腸病相關(guān)的關(guān)節(jié)炎（腸致病性關(guān)節(jié)炎（enteropathogenicarthritis))、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、（萊特爾綜合征是反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎的一種類型）和SEA綜合征（血清陰性、起止點病、關(guān)節(jié)病）。JSpA通常引起身體下部例如骨盆、髖、膝和踝的關(guān)節(jié)的疼痛和炎癥。身體的其他部位也可受到影響，例如脊柱、眼、皮膚和腸。也可發(fā)生疲勞和昏睡（lethargy)。[0099]克羅恩病是通常影響末端回腸和結(jié)腸但可在GI道的任何部位發(fā)生的非特異性慢性透壁炎性疾病。慢性腹瀉伴隨腹痛、發(fā)熱、厭食、體重減輕和右下部腫塊或發(fā)脹是最常見的克羅恩病癥狀。較不常見的癥狀包括食欲不振、發(fā)熱、盜汗、直腸痛和直腸出血?？肆_恩病可影響結(jié)腸、直腸和小腸并且，在罕見的情況下，也影響胃、口和食道?？肆_恩病病理的最常見模式是（1)特征在于右下部腹痛和壓痛的炎癥；（2)由腸狹窄引起并且導(dǎo)致嚴(yán)重的絞痛、腹脹、便秘和嘔吐的復(fù)發(fā)性部分梗阻；（3)彌散性空腸回腸炎（diffusejejunoileitis)，伴隨導(dǎo)致營養(yǎng)不良和慢性衰弱的炎癥和阻塞；和（4)腹瘺和膿腫，通常在晚期發(fā)生，通常引起發(fā)熱、疼痛性腹部腫塊和全身性消瘦。在患有上述炎性或梗阻癥狀的患者中和不具有顯著GI癥狀但具有肛周瘺或膿腫或具有原因不明的關(guān)節(jié)炎、結(jié)節(jié)性紅斑、發(fā)熱、貧血或生長矮?。ㄔ趦和校┑幕颊咧袘?yīng)當(dāng)懷疑患有克羅恩病。實驗室檢查所見是非特異性的并且可包括貧血、白細胞增多、低白蛋白血癥和增加的急性期反應(yīng)物水平（反映在升高的ESR、C反應(yīng)蛋白或血清類粘蛋白中）。伴隨升高的堿性磷酸酶和谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶的結(jié)腸病通常反映原發(fā)性硬化性膽管炎。診斷通常利用x射線來進行。[0100]在晚期的情況下，可看到拉絲征（stringsign)，伴隨明顯的回腸狹窄和腸袢的分離。在早期的情況下，x射線診斷有時可能非常困難，但氣鋇雙重造影灌腸劑（airdouble-contrastbariumenema)和灌腸法可顯示淺表口瘡和線性潰瘍。結(jié)腸鏡檢查和活組織檢查可幫助確認(rèn)克羅恩結(jié)腸炎的診斷并且允許直接顯現(xiàn)和活組織檢查回腸末端。上GI內(nèi)窺鏡檢查法可鑒定具有上GI癥狀的克羅恩病患者的胃和十二指腸受累。[0101]潰瘍性結(jié)腸炎是在結(jié)腸粘膜中產(chǎn)生的慢性、炎性和潰瘍性疾病，其最常見的特征在于出血性腹瀉。不同強度和持續(xù)時間的出血性腹瀉之間存在無癥狀間隔，這是潰瘍性結(jié)腸炎的最常見癥狀。通常發(fā)作隱伏性地始于增加的排便緊迫性、輕微的下腹部絞痛以及糞便中的血和粘液。然而，發(fā)作可以是急性的和爆發(fā)性的，伴隨突然強烈的腹瀉、發(fā)熱、腹膜炎的體征和深度的毒血癥。一些病例在有記載的感染（例如，阿米巴病、桿菌性痢疾）后發(fā)生。當(dāng)潰瘍被限制在直腸乙狀結(jié)腸時，糞便可以是正常的或硬的和干燥的，但在排便之間伴隨或發(fā)生含有紅細胞和白細胞的粘液的直腸排放。全身性癥狀是輕微的或不存在。如果潰瘍鄰近地延伸，那么糞便就會變得松散，并且患者可具有大于10次排便/天，并通常伴有嚴(yán)重的絞痛并和令人痛苦的直腸里急后重（tenesmus)，在晚上也不停息。糞便可以是水樣的，可含有粘液，并且通常幾乎完全由血和膿組成。全身乏力、發(fā)熱、貧血、厭食癥、體重減輕、白細胞增多和低白蛋白血癥可伴隨廣泛活動的潰瘍性結(jié)腸炎存在?；颊叩牟∈泛图S便檢查允許假定地診斷潰瘍性結(jié)腸炎（其應(yīng)當(dāng)總是通過乙狀結(jié)腸鏡檢查確認(rèn)，所述乙狀結(jié)腸鏡檢查提供疾病活動的直接即時的指征）。在早期病例中，粘膜是細小顆粒狀和易碎的，喪失正常血管模式并且通常具有分散的出血區(qū)；極微小的創(chuàng)傷（易碎性）引起多個極小點中的出血。粘膜迅速破裂成紅色的海綿狀表面，其上點布有許多微小的滲出血和膿的潰瘍。隨著粘膜進行性受累，炎癥和出血延伸入腸肌肉。具有大量膿性滲出物的大粘膜潰瘍表征嚴(yán)重的疾病。相對正常的或增生性炎性粘膜的島（假息肉）突出在潰瘍粘膜區(qū)域的上方?；罱M織檢查可以是非特異性的并且有時不能排除急性感染（自限性）結(jié)腸炎；然而，表明慢性的特征(例如，扭曲的隱窩結(jié)構(gòu)、隱窩萎縮、慢性炎性浸潤）支持潰瘍性結(jié)腸炎的診斷。甚至在無癥狀間隔期間，乙狀結(jié)腸鏡檢查的表現(xiàn)極少正常；一定程度的易碎性或顆粒性幾乎總是存在。正常血管模式喪失，并且活組織檢查顯示慢性炎癥的證據(jù)。腹部的普通X射線檢查（plainx-ray)有時通過顯示袋形成（haustration)的喪失、粘膜水腫和患病腸中成形糞便的不存在來幫助判斷結(jié)腸炎的嚴(yán)重度和接近程度。然而，在疾病過程的晚期，應(yīng)當(dāng)評估整個結(jié)腸以確定受累的程度。全結(jié)腸鏡檢查是最靈敏的且廣泛使用的方法，雖然鋇灌腸也可提供信息。結(jié)腸鏡檢查和活組織檢查是評估狹窄的性質(zhì)所必須進行的。如果炎癥是高度局灶性的或如果能看到肉芽腫，那么活組織檢查還可幫助區(qū)分潰瘍性結(jié)腸炎與克羅恩病。[0102]腸易激綜合征（IBS)是牽涉整個GI道，引起復(fù)發(fā)性上GI或下GI癥狀包括不同程度的腹痛、便秘和/或腹瀉以及腹部氣脹的運動性病癥。腸易激綜合征（IBS)的病因還不清楚。未發(fā)現(xiàn)解剖學(xué)病因。情緒因素、飲食、藥物或激素可加重或惡化加強的GI運動性。IBS的特征是可通過排便來緩解的疼痛、腸排便習(xí)慣的交替模式、腹脹、粘液便（mucusinthestool)和在排便后不完全排空的感覺。一般而言，疼痛的特征和部位、促發(fā)因素和排便模式對每一個患者來說都不相同。IBS患者還可具有腸外癥狀（例如，纖維肌痛、頭痛、性交困難、顳下頜關(guān)節(jié)綜合征）。已描述了IBS的兩個主要臨床類型。在便秘型IBS中，便秘是共同的，但腸排便習(xí)慣可發(fā)生變化。大多數(shù)患者在結(jié)腸的至少一個區(qū)域具有疼痛，其與周期性便秘和更正常的大便頻率交替相關(guān)。糞便通常含有清亮或白色的粘液。疼痛是疝氣痛的，突如其來的或持續(xù)鈍痛；其可通過排便來緩解。飲食通常觸發(fā)癥狀。還可發(fā)生胃氣脹、腸胃氣脹、惡心、消化不良和胃灼熱。腹瀉型IBS的特征在于在起床時或在飲食過程中或其后立即發(fā)生的急促腹瀉。夜間腹瀉是不常見的。疼痛、胃氣脹和直腸急迫是共同的，并且可發(fā)生失禁。IBS的診斷基于特征性排便模式、疼痛的時間和特征以及通過體檢和常規(guī)診斷測試對其他疾病過程的排除。由于在該綜合征中缺乏可容易辨認(rèn)的結(jié)構(gòu)或生物化學(xué)異常，因此醫(yī)學(xué)界已開發(fā)了稱為羅馬標(biāo)準(zhǔn)（Romecriteria)的共同定義和標(biāo)準(zhǔn)來幫助診斷IBS。根據(jù)羅馬標(biāo)準(zhǔn)，IBS通過下列來指征：腹痛或不適（其（1)通過排便來緩解和/或（2)與大便的頻率或稠度的變化相關(guān)），加上2個或更多個下列指征：改變的大便頻率、改變的大便組成、改變的大便排泄、粘液排泄和胃氣脹或腹脹的感覺。腹部的觸診可顯示壓痛，特別在左下部，有時與可觸知的觸痛的乙狀結(jié)腸相關(guān)。應(yīng)當(dāng)對所有患者進行常規(guī)直腸指診和對婦女進行骨盆檢查。[0103]腸易激病（Irritableboweldisease,IBD)，也稱為炎性腸病，特征在于GI道中不同部位上的慢性炎癥。IBD包括兩個已知的臨床亞型，克羅恩?。á牵┖蜐冃越Y(jié)腸炎（UC)。疾病模式中的某些差異表明了克羅恩病與潰瘍性結(jié)腸炎之間的區(qū)別。[0104]與IBD和IBS相關(guān)的疼痛可表現(xiàn)為慢性或急性疼痛。例如，IBS的特征是可通過排便緩解的急性疼痛，而慢性腹痛是克羅恩病的特征。雖然與IBD和IBS相關(guān)的疼痛可在腸外或內(nèi)臟外發(fā)生，但通常這些疾病產(chǎn)生內(nèi)臟痛。內(nèi)臟痛是與內(nèi)臟（包括腹腔的器官）相關(guān)的疼痛。這些器官包括性器官、脾、腸、結(jié)腸、直腸和消化系統(tǒng)的其他器官。內(nèi)臟痛具有5個重要的臨床特征：（1)其不是從所有內(nèi)臟引起（器官例如肝、腎、大多數(shù)實體內(nèi)臟和肺實質(zhì)對疼痛不敏感）；（2)其并非總是與內(nèi)臟損傷關(guān)聯(lián)；（3)其是彌散性的并且難以定位；(4)其涉及其他位置；以及（5)其伴隨著運動反射和自主反射，例如惡心、嘔吐和在腎絞痛中發(fā)生的腰部肌肉緊張。[0105]疼痛是用于警告來自外部環(huán)境的潛在有害刺激的危險的重要的生理保護機制。系統(tǒng)通過一套特殊的初級感覺神經(jīng)元運轉(zhuǎn)并且通過外周傳導(dǎo)機制由有害性刺激激活（關(guān)于綜述，參見Mi1lan，1999,Prog.Neurobiol.，57,1-164)。這些感覺纖維稱為傷害感受器，其是具有慢傳導(dǎo)速度的特征性小直徑軸突。傷害感受器編碼有害刺激的強度、持續(xù)時間和性質(zhì)以及刺激的位置（通過它們至脊髓的區(qū)域組織性投射（topographicallyorganizedprojection))。在感受傷害的神經(jīng)纖維上發(fā)現(xiàn)傷害感受器，所述神經(jīng)纖維存在兩種主要類型，A-S纖維（有髓鞘的）和C纖維（無髓鞘的）。在背角中進行復(fù)雜加工后，將通過傷害感受器輸入而產(chǎn)生的活性直接或通過腦干中繼核而轉(zhuǎn)移至腹側(cè)基底丘腦（ventrobasalthalamus)，然后傳遞至皮層，并在皮層中產(chǎn)生疼痛的感覺。[0106]疼痛通?？煞诸悶榧毙曰蚵蕴弁?。急性疼痛突然開始并且是短暫的（通常12周或更短）。其通常與明確的原因例如明確的損傷相關(guān)并且通常是急劇且嚴(yán)重的。其是可在由手術(shù)、牙科工作、擰傷或扭傷導(dǎo)致的特定損傷后發(fā)生的疼痛類型。急性疼痛通常不導(dǎo)致任何持續(xù)的心理反應(yīng)。相反地，慢性疼痛是長期疼痛，通常持續(xù)3個月以上并且導(dǎo)致嚴(yán)重的心理和情緒問題。慢性疼痛的常見實例是神經(jīng)性疼痛（例如糖尿病性神經(jīng)痛（painfuldiabeticneuropathy)、皰疹后神經(jīng)痛）、腕管綜合征、背痛、頭痛、癌癥痛、關(guān)節(jié)炎痛和慢性手術(shù)后疼痛。[0107]當(dāng)通過疾病或創(chuàng)傷對身體組織產(chǎn)生重大損傷時，傷害感受器激活的特征被改變，并且在外圍，圍繞損傷局部和傷害感受器終止的中心，存在敏化作用（sensitisation)。這些效應(yīng)導(dǎo)致提高的疼痛的感覺。在急性疼痛中，這些機制在促進可更好地確保修復(fù)過程發(fā)生的保護性行為中是有用的。正常預(yù)期是，在損傷愈合后，敏感性回復(fù)至正常。然而，在許多慢性疼痛狀態(tài)中，超敏性遠比愈合過程更持久并且通常因神經(jīng)系統(tǒng)損傷而產(chǎn)生。該損傷通常導(dǎo)致與適應(yīng)不良和異常活性相關(guān)的感覺神經(jīng)纖維的異常（Woolf&Salter，2000,Science，288,1765-1768)。[0108]在臨床上，當(dāng)不適和異常敏感性特征存在于患者的癥狀中時，疼痛存在?；颊邇A向于是十分異質(zhì)性的并且可呈現(xiàn)不同的疼痛癥狀。此類癥狀包括：1)自發(fā)性疼痛（其可以是鈍痛、灼痛或刺痛）；2)對有害刺激的夸大的疼痛響應(yīng)（痛覺過敏）；和3)由正常無害刺激產(chǎn)生的疼痛（異常性疼痛-Meyer等人，1994,TextbookofPain,13-44)。雖然患有不同形式的急性和慢性疼痛的患者可具有相似的癥狀，但背后的機制可以不同，從而可能需要不同的治療策略。因此，疼痛還可按照不同的病理生理學(xué)分成許多不同的亞型，包括傷害性、炎性和神經(jīng)性疼痛。[0109]傷害性疼痛由組織損傷或具有引起損傷的潛能的強烈刺激誘發(fā)。疼痛傳入通過損傷部位上的傷害感受器對刺激的傳導(dǎo)而被激活，然后以它們結(jié)束時的水平激活脊髓中的神經(jīng)元。然后其順著脊徑向上分程傳遞至大腦，在大腦中疼痛被感知（Meyer等人，1994，TextbookofPain，13-44)。傷害感受器的活化激活了兩種類型的傳入神經(jīng)纖維。有髓鞘的A-S纖維快速傳遞并且負(fù)責(zé)劇痛和刺痛感，而無髓鞘的C纖維以較慢的速率傳遞并且傳遞鈍痛或酸痛。中度至嚴(yán)重的急性傷害性疼痛是來自中樞神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷、擰傷/扭傷、燒傷、心肌梗塞和急性胰腺炎的疼痛、手術(shù)后疼痛（在任何類型的手術(shù)過程后的疼痛）、創(chuàng)傷后疼痛、腎絞痛、癌癥痛和背痛的顯著特征。癌癥痛可以是慢性疼痛例如腫瘤相關(guān)疼痛（例如骨痛、頭痛、面部疼痛或內(nèi)臟痛）或與癌癥治療相關(guān)的疼痛（例如化療后綜合征、慢性手術(shù)后疼痛綜合征或輻射后綜合征）。癌癥痛也可響應(yīng)化學(xué)治療、免疫治療、激素治療或放射治療而發(fā)生。背痛可由突出的或破裂的椎間盤（intravertebraldisc)或腰椎小關(guān)節(jié)、骶髂關(guān)節(jié)、椎旁肌或后縱韌帶的異常而引起。背痛可自然消退，但在一些患者中，其持續(xù)12周以上，變成可使人特別虛弱的慢性狀況。[0110]神經(jīng)性疼痛目前被定義為由神經(jīng)系統(tǒng)中的原發(fā)性損傷或功能障礙引發(fā)或引起的疼痛。神經(jīng)損害可由創(chuàng)傷和疾病引起，從而術(shù)語"神經(jīng)性疼痛"包括具有不同病因?qū)W的許多病癥。此類病癥包括但不限于周圍神經(jīng)病變、糖尿病性神經(jīng)病變、皰疹后神經(jīng)痛、三叉神經(jīng)痛、背痛、癌癥神經(jīng)病變、HIV神經(jīng)病變、幻肢痛、腕管綜合癥、中樞性中風(fēng)后疼痛以及與慢性酒精中毒、甲狀腺功能減退、尿毒癥、多發(fā)性硬化、脊髓損傷、帕金森病、癲癇和維生素缺乏相關(guān)的疼痛。神經(jīng)性疼痛是病理性的，因為其不具有保護作用。其通常在最初病因已消失后仍然存在，并且通常持續(xù)數(shù)年，大大地降低了患者的生活質(zhì)量（Woolf?和Mannion，1999，Lancet，353,1959-1964)。神經(jīng)性疼痛的癥狀難以治療，因為它們甚至在具有相同疾病的患者之間通常都不同（Woolf&Decosterd，1999，PainSupp.，6，S141_S147;Woolf^PMannion，1999,Lancet，353,1959-1964)。它們包括自發(fā)性疼痛，其可以是連續(xù)的和陣發(fā)的或異常引起的疼痛，例如痛覺過敏（增加的對有害刺激的敏感性）和異常性疼痛（對正常無害刺激的敏感性）。[0111]炎性過程是一系列復(fù)雜的響應(yīng)組織損傷或外來物質(zhì)的存在而被激活的生物化學(xué)和細胞事件，其導(dǎo)致腫脹和疼痛（Levine和Taiwo，1994，TextbookofPain,45-56)。關(guān)節(jié)炎痛是最常見的炎性疼痛。類風(fēng)濕病是發(fā)達國家中最常見的慢性炎性狀況之一并且類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是失能（disability)的共同原因。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的確切病因?qū)W還不清楚，但目前的假說認(rèn)為遺傳和微生物因素可能是重要的（Grennan&Jayson，1994，TextbookofPain,397-407)。據(jù)估計幾乎1600萬美國人患有癥狀性骨關(guān)節(jié)炎（0A)或退行性關(guān)節(jié)病，其中大部分在60歲以上，隨著人口年齡的增加，預(yù)期這將增加至4000萬人，從而使得這成為巨大的公共衛(wèi)生問題（Houge&Mersfelder，2002，AnnPharmacother.，36,679_686;McCarthy等人，1994,TextbookofPain，387-395)。大多數(shù)骨關(guān)節(jié)炎患者由于相關(guān)的疼痛而尋求醫(yī)療照顧。關(guān)節(jié)炎對心理社會和軀體功能具有顯著影響，并且已知是后期生活中失能的首要原因。強直性脊柱炎也是風(fēng)濕性疾病，其引起脊柱和骶髂關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)炎。其從終生存在的背痛的間歇性發(fā)作變化至攻擊脊柱、外周關(guān)節(jié)和其他軀體器官的嚴(yán)重慢性疾病。[0112]另一種類型的炎性疼痛是包括與炎性腸?。↖BD)相關(guān)的疼痛的內(nèi)臟痛。內(nèi)臟痛是與內(nèi)臟（包括腹腔器官）相關(guān)的疼痛。此類器官包括性器官、脾和消化系統(tǒng)的部分。與內(nèi)臟相關(guān)的疼痛可分成消化性內(nèi)臟疼痛和非消化性內(nèi)臟疼痛。通常遇到的引起疼痛的胃腸道(GI)病癥包括功能性腸紊亂（FBD)和炎性腸?。↖BD)。此類GI病癥包括目前只能適度控制的許多疾病狀態(tài)，包括，對于FBD，胃食管反流、消化不良、腸易激綜合征（IBS)和功能性腹痛綜合征（FAPS)，以及對于IBD，克羅恩病、回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎，其全都有規(guī)律地產(chǎn)生內(nèi)臟痛。其他類型的內(nèi)臟痛包括與痛經(jīng)、膀胱炎和胰腺炎相關(guān)的疼痛和骨盆痛。[0113]應(yīng)當(dāng)指出，一些類型的疼痛具有多種病因?qū)W，從而可分類在多于一個領(lǐng)域中，例如背痛和癌癥痛具有傷害性和神經(jīng)性成分。[0114]其他類型的疼痛包括：[0115]?由肌肉骨骼病癥引起的疼痛，所述病癥包括肌痛、纖維肌痛、脊柱炎、血清陰性(非類風(fēng)濕性）關(guān)節(jié)病、非關(guān)節(jié)性風(fēng)濕病、抗肌營養(yǎng)不良蛋白?。╠ystrophinopathy)、糖原分解、多肌炎和化膿性肌炎；[0116]?心臟和血管疼痛，包括由咽痛、心肌梗塞、二尖瓣狹窄、心包炎、雷諾現(xiàn)象、硬化病(scleredoma)和骨豁肌局部缺血引起的疼痛；[0117]?頭痛，例如偏頭痛（包括有先兆的偏頭痛和無先兆的偏頭痛）、叢集性頭痛、緊張型頭痛混合性頭痛和與血管病癥相關(guān)的頭痛；和[0118]?口面疼痛，包括牙痛、耳痛、口灼傷綜合征和顳下頜肌筋膜痛。[0119]可將IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分與一種或多種其他治療劑組合使用。例如，可將抗體或其抗原結(jié)合部分與C0X-2抑制劑例如塞來考昔一起用于治療疾病例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎和疼痛?？梢栽谙嗤瑒┬椭谢蛟诓煌瑒┬椭薪o患者施用IL-6抗體其抗原結(jié)合部分和其他治療劑。此外，可同時或在不同時間施用它們。下面是一些可與抗IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分組合使用的治療劑的實例。[0120]類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[0121]IL-6抗體和其抗原結(jié)合部分還可用于協(xié)同治療（co-therapy)。合適的抗炎協(xié)同治療化合物包括：[0122]環(huán)孢菌素、唑來膦酸、依法珠單抗、阿來法塞、依托度酸、氯諾昔康、0M-89、伐地考昔、托珠單抗、阿巴他塞、美洛昔康、依那西普、萘丁美酮（nambumetone)、利美索龍、153Sm-EDTMP、prosorba、水楊酸咪唑、奧普瑞白介素、透明質(zhì)酸、萘普生、批羅昔康、雙醋瑞因、lumericoxib、他克莫司、醋氯芬酸、阿克他利、替諾昔康、羅格列酮、地夫可特、阿達木單抗、來氟米特、利塞膦酸鈉、米索前列醇和雙氯芬酸、SK-1306X、英利昔單抗、阿那白滯素、塞來考昔、雙氯芬酸、依托考昔和聯(lián)苯乙酸、reumacon、戈利木單抗、地舒單抗、奧法木單抗、lOrTl抗體、培比洛芬、利考非隆、坦羅莫司、依庫珠單抗、艾拉莫德和潑尼松。其他合適的抗炎藥包括CP-481715、ABN-912、MLN-3897、HuMax-IL-15、RA-1、紫杉酚、0rg-37663、Org39141、AED-9056、AMG-108、芳妥珠單抗、培那西普、普那卡生、阿匹莫德、GW-274150、AT-001、681323(GSK)K-832、R-1503、奧瑞珠單抗、DE-096、CpnlO、THC+CBD(GWPharma)、856553(GSK)、ReN-1869、免疫球蛋白、mm-093、阿美盧班、SCIO-469、ABT-874、LenkoVAX、LY-2127399、TRU-015、KC-706、阿莫沙平（amoxapinet)和雙嘧達莫、TAK-715、PG760564、VX-702、潑尼松龍和雙嘧達莫、PMX-53、貝利木單抗、普立貝瑞、CF-101、tgAAV-TNFR:Fc、R-788、潑尼松龍和SSRI、CP-690550和PMI-001。[0123]骨關(guān)節(jié)炎[0124]還可將IL-6抗體和其抗原結(jié)合部分與用于治療骨關(guān)節(jié)炎的一個或多個指征的一種或多種試劑共施用以治療骨關(guān)節(jié)炎。用于與抗IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分組合的用于治療骨關(guān)節(jié)炎的一個或多個指征的試劑的實例包括基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP)抑制劑、聚集蛋白聚糖酶抑制劑、誘導(dǎo)型氮氧化物（iNOS)抑制劑、胰島素樣生長因子（IGF)的表達或活性的抑制劑、成纖維細胞生長因子（FGF)的表達或活性的抑制劑、CD44的表達或活性的抑制齊U、白細胞介素（IL)的表達或活性的抑制劑、腫瘤壞死因子a(TNF-a)表達或活性的抑制齊U、腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白6(TSG-6)的表達或活性的抑制劑、Bikunin的表達或活性的抑制劑、分泌酶（BACE)的抑制劑、PACE-4的抑制劑、細胞核受體rev-ErbAa(NR1D1)的表達或活性的抑制劑、內(nèi)皮分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1(EDG-1)的表達或活性的抑制劑、蛋白酶活化受體（PAR)的表達或活性的抑制劑、軟骨源性視黃酸敏感蛋白（CD-RAP)的表達或活性的抑制劑、蛋白激酶C((PKCz)的抑制劑、抵抗素的表達或活性的抑制劑、解聯(lián)蛋白和金屬蛋白酶8(ADAM8)的抑制劑，補體成分Is亞成分（Cls)的表達或活性的抑制劑、甲?；氖荏w樣l(FPRLl)的表達或活性的抑制劑。[0125]用于與IL-6抗體和其抗原結(jié)合部分組合的試劑的另外的實例包括MMP-2、-3、-9或-13的抑制劑；聚集蛋白聚糖酶-1或-2的抑制劑；IGF-1或-2的表達或活性的抑制劑；FGF-2、-18或-9的表達或活性的抑制劑；和IL-1、-4或-6的表達或活性的抑制劑。[0126]用于與IL-6抗體和其抗原結(jié)合部分組合的試劑的另外的實例包括IGF-1或-2抗體；FGF受體-2或-3拮抗劑、CD44抗體、IL-1、-4或-6抗體、TNF-a抗體；TSG-6抗體；bikunin抗體；NR1D1拮抗劑；EDG-1拮抗劑；PAR拮抗劑、CD-RAP抗體、抵抗素抗體、Cls抗體和FPRL1抗體。[0127]疼痛[0128]可將IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分與一種或多種用于治療疼痛的另外的藥物活性化合物組合施用。可以以單個劑型同時施用或以分開的劑型（其可以是相同或不同的）施用化合物?？蛇x擇地，可相繼施用化合物。藥物活性化合物的藥學(xué)可接受的鹽也可用于組合中。[0129]可與IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分一起施用的化合物的實例包括：[0130]環(huán)氧化酶_2(C0X-2)選擇性抑制劑例如塞來考昔、羅非考昔、帕瑞考昔、伐地考昔、地拉考昔、依托考昔和lumiracoxib;阿片類鎮(zhèn)痛藥例如嗎啡、氫嗎啡酮、輕嗎啡酮、芬太尼、可待因、雙氫可待因、羥考酮、氫可酮、丁丙諾啡、曲馬朵和納布啡；非類固醇類抗炎藥物（NSAID)例如阿司匹林、雙氯芬酸、二氟尼柳、布洛芬、非諾洛芬、萘普生、奈帕芬胺和對乙酰氨基酚；磷酸二酯酶V抑制劑（PDEV)例如西地那非；a-2-S配體例如加巴噴丁和普瑞巴林；和局部麻醉藥例如苯佐卡因、利多卡因、羅哌卡因、薄荷腦、樟腦和水楊酸甲酯。[0131]可與IL-6抗體和其抗原結(jié)合部分組合使用的化合物的其他類型和分類的實例包括：巴比妥酸鹽鎮(zhèn)靜藥；苯二氮卓類；具有鎮(zhèn)靜作用的組胺氏拮抗劑；鎮(zhèn)靜藥；骨骼肌松弛藥；N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA)受體拮抗劑；a-腎上腺素能藥物；三環(huán)類抗抑郁藥；抗驚厥藥例如卡馬西平；速激肽（NK)拮抗劑，特別是NK-3、NK-2或NK-1拮抗劑；毒蕈堿拮抗劑；精神安定藥；辣椒素（vanilloid)受體激動劑或拮抗劑邛腎上腺素能藥物；皮質(zhì)類固醇；血清素（5-HT)受體激動劑或拮抗劑例如5-111^/11)、5-111^和5-111'3受體拮抗劑；膽堿能（煙堿）鎮(zhèn)痛藥；大麻素；代謝型谷氨酸受體亞型1(mGluRl)拮抗劑；血清素再攝取抑制劑例如舍曲林；正甲腎上腺素（去甲腎上腺素）再攝取抑制劑例如瑞波西汀，特別地（S，S)_瑞波西?。浑p血清素-去甲腎上腺素再攝取抑制劑例如度洛西?。徽T導(dǎo)型氮氧化物合酶(iNOS)抑制劑例如：S-[2-[(l-亞氨基乙基）氨基]乙基]-L-高半胱氨酸、S-[2-[(l-亞氨基乙基）-氨基]乙基]_4,4_二氧-L-半胱氨酸、S-[2-[(l-亞氨基乙基）氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸、（2S，5Z)-2-氨基-2-甲基-7-[(1-亞氨基乙基）氨基]-5-庚烯酸、2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羥基-1-(5-噻唑基）-丁基]硫代]-5-氯-3-氰基吡啶；2-[[(11?，35)-3-氨基-4-羥基-1-(5-噻唑基）丁基]硫代]-4-氯苯腈、（25,41〇-2-氨基-4-[[2-氯-5-(三氟甲基）苯基]硫代]-5-噻唑丁醇、2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羥基-1-(5-噻唑基）丁基]硫代]-6-(三氟甲基）-3氰基吡啶、2-[[(1R，3S)-3-氨基-4-羥基-1-(5_喔唑基）丁基]硫代]_5_氣苯臆、N-[4_[2_(3_氣節(jié)基氛基）乙基]苯基]喔吩-2_羧胺和胍基乙基二硫化物（guanidinoethyldisulfide);乙酰膽堿酯酶抑制劑；前列腺素&亞型4出?4)拮抗劑例如^[({2-[4-(2-乙基-4,6-二甲基-111-咪唑[4,5-(3]吡啶-1-基）苯基]乙基}氨基）-羰基]-4-甲苯磺酰胺或4-[(IS)-1-({[5-氯-2-(3-氟苯氧基）批陡-3-基]撰基}氨基）乙基]苯甲酸；白二烯B4拮抗劑例如1-(3-聯(lián)苯基_4_基甲基-4-羥基-色原-7-基）-環(huán)戊烷羧酸；5-脂氧合酶抑制劑；和鈉通道阻斷劑。[0132]纖維肌痛綜合征[0133]產(chǎn)品：鎮(zhèn)痛藥例如對乙酰氨基酚、萘普生鈉、布洛芬、曲馬朵、曲唑酮；環(huán)苯扎林；阿司匹林、塞來考昔、伐地考昔、吲哚美辛和其他NSAID;抗抑郁藥例如三環(huán)類抗抑郁藥和選擇性血清素再攝取抑制藥，例如抗抑郁藥例如阿米替林、丙咪嗪、去甲替林、多塞平、氟西汀、舍曲林和帕羅西??；肌肉松弛藥例如環(huán)苯扎林；睡眠輔助藥例如唑吡坦。[0134]分類：去甲腎上腺素-血清素再攝取抑制劑（NSRI和SNRI);去甲腎上腺素再攝取抑制劑（NRI);選擇性血清素再攝取抑制劑（SSRI);三環(huán)類抗抑郁藥；選擇性環(huán)氧化酶2(C0X-2)抑制劑；非類固醇類抗炎藥（NSAID);鎮(zhèn)痛藥。[0135]強直性脊柱炎[0136]產(chǎn)品：鎮(zhèn)痛藥例如對乙酰氨基酚、萘普生鈉、布洛芬、曲馬朵、阿司匹林、塞來考昔、伐地考昔、吲哚美辛和其他NSAID;緩解疾病的抗風(fēng)濕藥（DMARD)例如柳氮磺吡啶或甲氨蝶呤；皮質(zhì)類固醇；和腫瘤壞死因子（TNF)阻斷劑例如依那西普和英利昔單抗。[0137]分類：鎮(zhèn)痛藥；NSAID;C0X-2抑制劑；DMARD;皮質(zhì)類固醇；TNF阻斷劑。[0138]銀屑病[0139]產(chǎn)品：光療法，包括補骨脂素紫外線A(補骨脂素UVA或PUVA)療法、窄帶紫外線B(UVB)療法和組合光療法；局部用皮質(zhì)類固醇；維生素D類似物例如卡泊三烯；地蒽酚；局部用維生素A類（即維生素A衍生物）例如阿維A和他扎羅?。槐崧缺端?；甲氨蝶呤；硫唑嘌呤；環(huán)孢菌素；羥基脲；和免疫調(diào)節(jié)藥例如阿來法塞、依法珠單抗和依那西普。[0140]分類：光療法；皮質(zhì)類固醇；維生素D類似物；維生素A衍生物。[0141]痛風(fēng)[0142]產(chǎn)品：NSAID例如對乙酰氨基酚、萘普生鈉、布洛芬、曲馬朵、阿司匹林、塞來考昔、伐地考昔和吲哚美辛；和皮質(zhì)類固醇例如潑尼松。[0143]分類：鎮(zhèn)痛藥；NSAID;C0X_2抑制劑；和皮質(zhì)類固醇。[0144]克羅恩病[0145]產(chǎn)品：鎮(zhèn)痛藥例如對乙酰氨基酚、萘普生鈉、布洛芬、曲馬朵、阿司匹林、塞來考昔、伐地考昔、吲哚美辛和其他NSAID;抗炎藥；柳氮磺吡啶、氨水楊酸、巴柳氮和奧沙拉嗪；和皮質(zhì)類固醇例如潑尼松和布地奈德；免疫抑制劑例如硫唑嘌呤、巰嘌呤、TNF阻斷劑例如英利昔單抗和阿達木單抗、甲氨蝶呤和環(huán)孢菌素；抗生素例如甲硝唑和環(huán)丙沙星；止瀉藥例如洛哌丁胺；和輕瀉藥。[0146]分類：鎮(zhèn)痛藥；NSAIDs;C0X_2抑制劑；抗炎藥；TNF阻斷劑；抗生素；止瀉藥；和輕瀉藥。[0147]潰瘍性結(jié)腸炎[0148]分類：鎮(zhèn)痛藥例如對乙酰氨基酚、萘普生鈉、布洛芬、曲馬朵、阿司匹林、塞來考昔、伐地考昔、吲哚美辛和其他NSAID;抗炎藥；柳氮磺吡啶、氨水楊酸、巴柳氮和奧沙拉嗪；皮質(zhì)類固醇；免疫抑制藥例如硫唑嘌呤、巰嘌呤、TNF阻斷劑例如英利昔單抗和阿達木單抗、甲氨蝶呤和環(huán)孢菌素；止瀉藥例如洛哌丁胺；和輕瀉藥。[0149]分類：NSAID;C0X_2抑制劑；抗炎藥；TNF阻斷劑；皮質(zhì)類固醇；免疫抑制劑Janus激酶-3(Jak-3)抑制劑；TNF阻斷劑；止瀉藥；和輕瀉藥。[0150]腸易激綜合征[0151]產(chǎn)品：止瀉藥例如洛哌丁胺；輕瀉藥；抗膽堿能藥；抗抑郁藥例如三環(huán)類抗抑郁藥和選擇性血清素再攝取抑制劑，例如抗抑郁藥例如阿米替林、丙咪嗪、去甲替林、多塞平、氟西汀、舍曲林和帕羅西??；阿洛司瓊；和替加色羅。[0152]分類：止瀉藥；輕瀉藥；抗膽堿能藥；去甲腎上腺素-血清素再攝取抑制劑（NSRI和SNRI);去甲腎上腺素再攝取抑制劑（NRI);選擇性血清素再攝取抑制劑（SSRI);三環(huán)類抗抑郁藥。[0153]藥物纟目合物和施用[0154]還提供了用于治療哺乳動物包括人中異常細胞浸潤的藥物組合物，其包含在異常細胞浸潤的治療中是有效的量的本文中描述的IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分，和藥學(xué)可接受的載體。組合物為患有炎癥和自身免疫疾病例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣硬化、肉芽腫病、多發(fā)性硬化、哮喘和癌癥中的一種或多種疾病的患者提供了治療益處。[0155]可將IL-6抗體和其抗原結(jié)合部分摻入適合于給受試者施用的藥物組合物。通常，藥物組合物包含IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分，和藥學(xué)可接受的載體。如本文中所使用的，"藥學(xué)可接受的載體"是指生理上相容的任何和所有溶劑、分散介質(zhì)、包衣、抗菌劑和抗真菌齊U、等滲劑和吸收延遲劑等。藥學(xué)可接受的載體的一些實例是水、鹽溶液、磷酸緩沖鹽溶液、葡萄糖、甘油、乙醇等以及其組合。在許多情況下，優(yōu)選在組合物中包含等滲劑，例如糖、多元醇例如甘露醇、山梨醇或氯化鈉。藥學(xué)可接受的物質(zhì)的另外的實例是濕潤劑或少量輔助物質(zhì)例如濕潤劑或乳化劑、防腐劑或緩沖劑，其增加抗體的貯存期限或功效。[0156]本發(fā)明的組合物可以以多種形式存在，例如液體、半固體和固體劑型，例如液體溶液（例如，可注射和可輸注溶液）、分散體或懸浮液、片劑、丸劑、粉劑、脂質(zhì)體和栓劑。形式取決于期望的施用模式和治療應(yīng)用。典型的組合物以可注射或可輸注溶液的形式存在，例如與用于人的被動免疫的組合物相似的組合物。在一種情況下，施用模式是胃腸外的（例如，靜脈內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)）。在另一種情況下，通過靜脈內(nèi)輸注或注射施用抗體。在另一種情況下，通過肌內(nèi)或皮下注射施用抗體。用于注射的制劑可以以單位劑型存在，例如在安瓿瓶中或多劑量容器中，并且具有或不具有添加的防腐劑。組合物可采取形式例如懸浮液、溶液或油性或水性媒介物中的乳劑，并且可包含配制試劑例如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。可選擇地，活性成分可以以粉劑形式存在，其可在使用前用合適的媒介物例如滅菌無熱原水重構(gòu)?？赏ㄟ^將IL-6抗體以需要的量與上面列舉的成分之一或組合（需要時）一起摻入適當(dāng)?shù)娜軇┲?，然后進行過濾滅菌來制備無菌可注射液。在一種情況下，將抗體以無菌水溶液形式的制劑施用，所述無菌水溶液具有范圍在約5.0至大約6.5之間的pH并且含有大約lmg/ml至大約200mg/ml的抗體，大約ImM至大約lOOmM的組氨酸緩沖劑，大約0.Olmg/ml至大約10mg/ml聚山梨酯80或聚山梨酯20,大約lOOmM至大約400mM的非還原糖（選自但不限于海藻糖或蔗糖）、大約0.OlmM至大約1.OmM的EDTA二鈉二水合物，和任選地包含除了螯合劑外的藥學(xué)可接受的抗氧化劑。合適的抗氧化劑包括但不限于甲硫氨酸、硫代硫酸鈉、過氧化氫酶和鉬。例如，組合物可以包含ImM至大約lOOmM，特別地大約27mM濃度的甲硫氨酸。在一些情況下，制劑在20mM朽1檬酸鈉，pH5.5,140mMNaCl和0.2mg/ml聚山梨酯80的緩沖液中包含5mg/ml的抗體。要指出的是，劑量值可隨待緩解的狀況的類型和嚴(yán)重度而變化。在用于制備無菌可注射溶液的無菌粉劑的情況下，合適的制備方法包括真空干燥和冷凍干燥，其產(chǎn)生活性成分加上來自之前其滅菌過濾的溶液的任何另外想要的成分的粉劑?？梢岳缤ㄟ^使用包衣例如卵磷脂，在分散體的情況下通過維持需要的顆粒大小，和通過使用表面活性劑來維持溶液的適當(dāng)流動性?？勺⑸浣M合物的延長的吸收可通過在組合物中包含延遲吸收的試劑例如單硬脂酸鹽和明膠來產(chǎn)生。[0157]可通過許多方法施用IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分，雖然對于許多治療應(yīng)用，施用的途徑/模式可以是皮下、肌內(nèi)或靜脈內(nèi)輸注。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的，施用的途徑和/或模式可根據(jù)期望的結(jié)果而改變。[0158]在某些情況下，可使用載體制備IL-6抗體組合物，所述載體將保護抗體免于快速釋放，例如控釋制劑，包括埋植劑、透皮貼劑和微型膠囊遞送系統(tǒng)?？墒褂蒙锟山到獾纳锵嗳菪跃酆衔铮缫蚁┐姿嵋蚁?、聚酐、聚乙醇酸、膠原、多正酯和聚乳酸?？墒褂糜糜谥苽浯祟愔苿┑脑S多方法。參見，例如，SustainedandControlledReleaseDrugDeliverySystems，J.R.Robinson，ed.，MarcelDekker，Inc.，NewYork，1978,其通過引用合并入本文。[0159]還可將另外的活性化合物摻入組合物。在一些情況下，將抑制性IL-6抗體與一種或多種另外的治療劑共配制和/或共施用。此類試劑包括但不限于結(jié)合其他靶的抗體、抗腫瘤劑、抗血管生成劑、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑、抗增殖劑、化學(xué)治療劑或抑制IL-6的肽類似物。此類聯(lián)合治療可需要更低劑量的抑制性IL-6抗體以及共施用的試劑，從而避免與各種單一治療相關(guān)的可能的毒性或并發(fā)癥。[0160]組合物可包含"治療有效量"或"預(yù)防有效量"的抗體或抗原結(jié)合部分。"治療有效量"是指在劑量上和在所需的一段時間內(nèi)有效地實現(xiàn)期望的治療結(jié)果的量。治療有效量的抗體或抗原結(jié)合部分可根據(jù)因素例如個體的疾病狀態(tài)、年齡、性別和體重以及抗體或抗體部分在個體中引發(fā)期望的應(yīng)答的能力而變化。治療有效量也是其中抗體或抗原結(jié)合部分的任何毒性或有害效應(yīng)被治療有益效應(yīng)超越的劑量。"預(yù)防有效量"是指在劑量上和在所需的一段時間內(nèi)有效地實現(xiàn)期望的預(yù)防結(jié)果的量。通常，因為預(yù)防性劑量在疾病之前或在其早期用于受試者，因此預(yù)防有效量可低于治療有效量。[0161]可調(diào)整劑量方案以提供最佳的期望應(yīng)答（例如，治療性或預(yù)防性應(yīng)答）。例如，可施用單次團注，可在一段時間內(nèi)施用幾個分開的劑量或可根據(jù)治療情況的緊迫性而相應(yīng)地減少或增加劑量。以劑量單位形式配制胃腸外組合物對于施用的容易性和劑量的一致性是特別有利的。劑量單位形式，如本文中所使用的，是指用于待治療的哺乳動物受試者的適合作為單元劑量的物理上分開的單位；各單位包含預(yù)先確定量的IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分，所述量經(jīng)計算與需要的藥物載體一起產(chǎn)生期望的治療效果。[0162]IL-6抗體或抗體部分的治療有效量或預(yù)防有效量的示例性非限定性范圍是0?025至50mg/kg，0?1至50mg/kg，0?1-25,0?1至10或0?1至3mg/kg。在一種情況下，將IL-6抗體或其抗體部分以無菌水溶液形式的制劑施用，所述無菌水溶液具有范圍在約5.0至約6.5之間的pH并且含有大約lmg/ml至大約200mg/ml的抗體，大約ImM至大約100mM的組氨酸緩沖劑，大約〇.〇lmg/ml至大約10mg/ml聚山梨酯80,大約100mM至大約400mM的海藻糖和大約〇.OlmM至大約1.〇mM的EDTA二鈉二水合物。要指出的是，劑量值可隨待緩解的狀況的類型和嚴(yán)重度而變化。還應(yīng)理解，對于任何特定的受試者，應(yīng)當(dāng)隨時間根據(jù)個體需要以及施用或指導(dǎo)組合物的施用的人的專業(yè)判斷來調(diào)整特定劑量方案，并且本文中所示的劑量范圍只是示例性的并且無意限定所請求保護的組合物的范圍或施用。[0163]本文中提供的另一個方面是包括IL-6抗體或抗原結(jié)合部分或含有這樣的抗體或抗原結(jié)合部分的組合物的試劑盒。除了抗體或組合物以外，試劑盒還可包括診斷劑或治療齊IJ。試劑盒還可包括用于診斷或治療方法的說明書。在一種情況下，試劑盒包括抗體或包含抗體的組合物以及可用于本文中描述的方法的診斷劑。在另一種情況下，試劑盒包括抗體或包含抗體的組合物以及一種或多種可用于本文中描述的方法的治療劑。[0164]俥用的診斷方法[0165]本文中提供的另一個方面是診斷方法?？笽L-6抗體或其抗原結(jié)合部分可用于體內(nèi)或體外檢測生物樣品中的IL-6。一個方面提供了用于在有此需要的受試者中診斷表達IL-6的細胞的存在或定位的方法，其包括步驟：將抗體注射入受試者，通過定位抗體結(jié)合的地方來確定IL-6在受試者中的表達，將受試者中的表達與正常參照受試者或標(biāo)準(zhǔn)的表達相比較，以及診斷細胞的存在或定位?？笽L-6抗體還可用作炎癥和/或免疫細胞例如單核細胞和T細胞至組織的浸潤的標(biāo)記物。[0166]抗IL-6抗體可用于任何合適的免疫測定，包括但不限于，ELISA、RIA、流式細胞術(shù)、組織免疫組織化學(xué)、Western印跡或免疫沉淀?？笽L-6抗體或其抗原結(jié)合部分可用于檢測來自人的IL-6。在另一種情況下，抗IL-6抗體可用于檢測來自食蟹猴、獼猴和嚙齒類動物例如小鼠和大鼠的IL-6。[0167]用于檢測生物樣品中的IL-6的方法通常包括將生物樣品與抗IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分接觸，然后檢測結(jié)合的抗體。在一種情況下，用可檢測的標(biāo)記物直接標(biāo)記抗IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分。在另一種情況下，不標(biāo)記抗IL-6抗體（一抗），而是標(biāo)記可結(jié)合抗IL-6抗體的二抗或其他分子。選擇能夠特異性結(jié)合特定類別和種類的一抗的二抗。例如，如果抗IL-6抗體是人IgG，則二抗可以是抗人IgG?？山Y(jié)合抗體的其他分子包括但不限于蛋白A和蛋白G，其兩者都可例如從PierceChemicalCo商購獲得。[0168]本文中公開了用于抗體或二抗的合適的標(biāo)記物，其包括各種酶、輔基、熒光材料、發(fā)光材料和放射性材料。合適的酶的實例包括辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、3_半乳糖苷酶或乙酰膽堿酯酶；合適的輔基復(fù)合物的實例包括鏈霉抗生物素蛋白/生物素和抗生物素蛋白/生物素；合適的熒光材料的實例包括傘形酮、熒光素、異硫氰酸熒光素、羅丹明、二氯三嗪基胺熒光素、丹磺酰氯或藻紅蛋白；發(fā)光材料的實例包括魯米諾；以及合適的放射性材料的實例包括125I、131I、35S或3h。[0169]還可使用用可檢測物質(zhì)標(biāo)記的IL-6標(biāo)準(zhǔn)和未標(biāo)記的抗IL-6抗體通過競爭性免疫測定來測定生物樣品中的IL-6。在該測定中，將生物樣品、標(biāo)記的IL-6標(biāo)準(zhǔn)和抗IL-6抗體組合，然后測定結(jié)合至未標(biāo)記的抗體的經(jīng)標(biāo)記的IL-6標(biāo)準(zhǔn)的量。生物樣品中IL-6的量與結(jié)合至抗IL-6抗體的經(jīng)標(biāo)記的IL-6標(biāo)準(zhǔn)的量成反比。[0170]可將此類免疫測定用于許多目的。例如，可將抗IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分用于檢測培養(yǎng)的細胞中的IL-6。在一種情況下，將抗IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分用于測定已用不同化合物處理的細胞的表面上的IL-6的量。該方法可用于鑒定調(diào)控IL-6蛋白水平的化合物。根據(jù)該方法，用受試化合物處理一個細胞樣品一段時間，同時讓另一個樣品不接受處理。如果要測量總IL-6的表達，則裂解細胞，使用任何合適的免疫測定來測量總IL-6的表達。將經(jīng)處理的細胞與未經(jīng)處理的細胞中的總IL-6表達相比較以測定受試化合物的作用。[0171]用于測量總IL-6表達的免疫測定包括流式細胞術(shù)和免疫組織化學(xué)。如果要測量細胞表面IL-6表達，則不裂解細胞，使用上述免疫測定之一測量IL-6的細胞表面水平。用于測定IL-6的細胞表面水平的優(yōu)選免疫測定包括步驟：用可檢測的標(biāo)記物例如生物素或1251標(biāo)記細胞表面蛋白，用抗IL-6抗體免疫沉淀IL-6,然后檢測標(biāo)記的IL-6。[0172]用于確定IL-6的定位例如細胞表面水平的另一個免疫測定是使用免疫組織化學(xué)。用于檢測IL-6的細胞表面水平的免疫測定包括：結(jié)合用適當(dāng)?shù)臒晒鈭F例如熒光素或藻紅蛋白標(biāo)記的抗IL-6抗體，然后使用流式細胞術(shù)檢測一抗。在另一個實例中，不標(biāo)記抗IL-6抗體，而標(biāo)記可結(jié)合抗IL-6抗體的二抗或其他分子。方法例如ELISA、RIA、流式細胞術(shù)、Western印跡、免疫組織化學(xué)、膜蛋白質(zhì)的細胞表面標(biāo)記以及免疫沉淀在本領(lǐng)域內(nèi)都是熟知的。參見，例如，Harlow和Lane。此外，為了就IL-6的激活或抑制檢測大量化合物，可將免疫測定按比例放大以進行高通量篩選。[0173]抗IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分還可用于測定組織中或來源于組織的細胞中IL-6的水平。在一些實例中，組織是患病組織或活檢組織?？赏ㄟ^上述方法在免疫測定中使用組織或活檢組織來測定例如總IL-6表達、IL-6的細胞表面水平或IL-6的定位。此類方法可用于確定組織是否表達高水平的IL-6,高表達水平可表示組織是用抗IL-6抗體進行治療的靶。[0174]還可將IL-6抗體和其抗原結(jié)合部分用于體內(nèi)鑒定表達IL-6的組織和器官。在一些情況下，抗IL-6抗體用于鑒定表達IL-6的細胞。與非人來源的抗體或與人源化或嵌合抗體不同，人抗IL-6抗體可在體內(nèi)安全使用而不會在施用后引起針對抗體的顯著免疫應(yīng)答。[0175]該方法包括步驟：將可檢測地標(biāo)記的抗IL-6抗體或包含其的組合物施用給需要這樣的診斷測試的患者，然后使患者經(jīng)歷成像分析以確定表達IL-6的組織的位置。成像分析在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)是熟知的，其包括但不限于x射線分析、磁共振成像（MRI)或，計算機x射線斷層攝影（computedtomography,CT)?？捎眠m合于體內(nèi)成像的任何試劑例如造影劑例如鋇（其可用于x射線分析）或磁性造影劑例如釓螯合劑（其可用于MRI或CT)來標(biāo)記抗體。其他標(biāo)記試劑包括但不限于放射性同位素例如"Tc。在另一種情況下，不標(biāo)記抗IL-6抗體，而可通過施用可檢測的并且可結(jié)合抗IL-6抗體的二抗或其他分子來進行成像。在一個實例中，從患者獲得活檢組織以測定目的組織是否表達IL-6。[0176]可檢測地標(biāo)記的抗IL-6可包含熒光團。在某些情況下，熒光團選自近紅外熒光染料、二硝基苯基、熒光素和其衍生物、羅丹明、羅丹明的衍生物、藻紅蛋白、藻青蛋白、別藻藍蛋白、鄰苯二醒和突光胺、德克薩斯紅、羅丹明綠、Oregongreen、Cascadeblue、藻紅蛋白、CY3、CY5、CY2、CY7、香豆素、紅外線40、MR200、IRD40、AlexaFluor、CascadeBlue、四甲基羅丹明、PacificBlue、SYBR和BODIPY。在另一個實例中，熒光團包括下列化合物之一（在括號中以nm標(biāo)示它們的最大發(fā)射）：Cy2.TM.(506)、GFP(RedShifted)(507)、Y0-PR0?-1(509)、Y0Y0?-1(509)丐黃綠素（517)、fitc(518)、FluorX?(519)、Alexa?(520)、羅丹明110(520)、5-FAM(522)、OregonGreen?500(522)、OregonGreen?488(524)、RiboGreen?(525)、RhodamineGreen?(527)、羅丹明123(529)、MagnesiumGreen?(531)、CalciumGreen?(533)、TO-PRO?-1(533)、T0T0?-1(533)、JOE(548)、B0DIPY?530/550(550)、Dil(565)、B0DIPY?(568)、B0DIPY?558/568(568)、B0DIPY?564/570(570)、Cy3?(570)、Alexa?546(570)、TRITC(572)、MagnesiumOrange?(575)、藻紅蛋白R&B(575)、羅丹明鬼筆環(huán)肽（575)、Calcium〇range?(576)、派洛寧Y(580)、羅丹明B(580)、TAMRA(582)、Rhodamine(590)、Cy3.5?(596)、ROX(608)、CalciumCrimson.TM.(615)、Alexa?594(615)'TexasRed.RTM.(615)、NileRed(628)、Y0-PR0?-3(631)、Y0Y0?_3(631)、R-藻青蛋白（642)、c-藻青蛋白（648)、T0-PR0?-3(660)、T0T0?_3(660)、DiDDilC(5)(665)、Cy5.TM.(670)、Thiadicarbocyanine(671)和Cy5.5(694)〇[0177]在另外的實例中，抗IL-6抗體還可用于測定細胞例如淋巴細胞或單核細胞上IL-6的表面細胞表達的減少。[0178]人抗IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分使對非人或非人衍生的單克隆抗體（Mab)固有的免疫原性和變應(yīng)性應(yīng)答降至最低，從而增加施用的抗體或其抗原結(jié)合部分的功效和安全性。[0179]另一個方面提供了部分由種系序列編碼的人抗IL-6抗體?；谛蛄型葱詫H、VK、VA基因分類入家族中。如果它們在超過80%的位點上共有相同的核苷酸序列，則兩fVH、VK*VA基因?qū)儆谙嗤易濉？笽L-6抗體可包含人k輕鏈（VK)或人X輕鏈（VA)或從其衍生的氨基酸序列。在一些包含A輕鏈的情況下，輕鏈可變結(jié)構(gòu)域（\)部分由人￥人1、￥;^2、￥;^3、￥;^4、￥;^5、￥;^6、￥;^7、￥;^8、￥;^9或￥;^0家族基因編碼（町111&1^5.(：.等人J.Mol.Bio.264:220-232,1996)。在一些包含k輕鏈的情況下，輕鏈可變結(jié)構(gòu)域（')部分由人乂1；1、￥1；11、￥1；111、￥1；1￥、￥1^或￥1^1家族基因（(：(《丄？丄.等人，￡111'.了.1臟1111〇124:827-836,1994)，優(yōu)選VKI、VKII、VKIII*VKIV家族基因和優(yōu)選乂，〗*VKVI家族基因編碼。在一些情況下，輕鏈種系序列選自人Vk序列，包括但不限于，A1、A10、A11、A14、A17、A18、A19、A2、A20、A23、A26、A27、A3、A30、A5、A7、B2、B3、L1、L10、L11、L12、L14、L15、L16、L18、L19、L2、L20、L22、L23、L24、L25、L4/18a、L5、L6、L8、L9、01、011、012、014、018、02、04和08。在某些情況下，該輕鏈人種系構(gòu)架選自V1-11、V1-13、V1-16、V1-17、V1-18、V1-19、V1-2、V1-20、V1-22、V1-3、V1-4、V1-5、V1-7、V1-9、V2-1、V2-11、V2-13、V2-14、V2-15、V2-17、V2-19、V2-6、V2-7、V2-8、V3-2、V3-3、V3-4、V4-1、V4-2、V4-3、V4-4、V4-6、V5-1、V5-2、V5-4和￥5-6?？?1-6抗體可包含由人￥111、￥112、￥113、￥114、￥115、￥116或￥117家族基因編碼的重鏈可變結(jié)構(gòu)域（VH)。在特定的實例中，該重鏈人種系構(gòu)架選自VH1-18、VH1-2、VH1-24、VH1-3、VH1-45、VH1-46、VH1-58、VH1-69、VH1-8、VH2-26、VH2-5、VH2-70、VH3-11、VH3-13、VH3-15、VH3-16、VH3-20、VH3-21、VH3-23、VH3-30、VH3-33、VH3-35、VH3-38、VH3-43、VH3-48、VH3-49、VH3-53、VH3-64、VH3-66、VH3-7、VH3-72、VH3-73、VH3-74、VH3-9、VH4-28、VH4-31、VH4-34、VH4-39、VH4-4、VH4-59、VH4-61、VH5-51、VH6-1和VH7-81。在特定的情況下，輕鏈可變區(qū)和/或重鏈可變區(qū)包含構(gòu)架區(qū)或至少部分的構(gòu)架區(qū)（例如，包含2或3亞區(qū)，例如FR2和FR3)。在某些情況下，至少FRL1、FRL2、FRL3或FRL4是完全人的。在其他實例中，至少FRHUFRH2、FRH3或FRH4是完全人的。在一些情況下，至少FRL1、FRL2、FRL3或FRL4是種系序列（例如，人種系）或包含特定構(gòu)架的人共有序列（可容易地在本文中描述的已知的人Ig序列的來源中獲得）。在其他實例中，至少FRH1、FRH2、FRH3或FRH4是種系序列（例如，人種系）或包含特定構(gòu)架的人共有序列。[0180]IL-6抗體的'相對于人基因的種系氨基酸序列可包含一個或多個氨基酸置換。在一些情況下，IL-6抗體的相對于種系氨基酸序列包含1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸置換。在一個實例中，來自種系的一個或多個此類置換位于輕鏈的CDR區(qū)中。在一個實例中，相對于種系的氨基酸置換在一個或多個與抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl的任一個或多個'中相對于種系的置換相同的位點上。例如，IL-6抗體的'可包含一個或多個在抗體9C8IgGl的'中發(fā)現(xiàn)的與種系相比較的氨基酸置換。在一些情況下，氨基酸變化在一個或多個相同的位點上，但牽涉與參照抗體中的置換不同的置換。[0181]在一些情況下，相對于種系的氨基酸變化發(fā)生在一個或多個與抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl的任何中的那些相同的位點上，但變化可代表這些位置上的保守氨基酸置換（相對于參照抗體中的氨基酸）。例如，如果這些抗體之一中的特定位點相對于種系已改變并且是谷氨酸，那么在該位點可用天冬氨酸進行置換。類似地，如果與種系相比較氨基酸置換是絲氨酸，那么可在該位點用蘇氨酸保守置換絲氨酸。[0182]在一些情況下，人抗IL-6抗體的輕鏈包含抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和2285461的\氨基酸序列或具有直至1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個保守氨基酸置換和/或總共直至3個非保守氨基酸置換的所述氨基酸序列。在一些情況下，輕鏈包含任一上述抗體的從⑶R1開始至⑶R3結(jié)束的氨基酸序列。[0183]在一些情況下，輕鏈可包含分別獨立地選自抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl的輕鏈的輕鏈CDR1、CDR2和CDR3的⑶R1XDR2和⑶R3區(qū)，或各自具有少于4或少于3個保守氨基酸置換和/或總共3個或更少的非保守氨基酸置換的⑶R區(qū)。在一些情況下，抗IL-6抗體的輕鏈包含輕鏈⑶R1XDR2和CDR3，其各自獨立地選自單克隆抗體9C81gG1、9C81gG2、9C8N68TT83SIgG1、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl的輕鏈CDR1、CDR2和CDR3區(qū)。在些情況下，抗IL-6抗體的輕鏈包含抗體（其包含選自9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl的抗體的八區(qū)的氨基酸序列）的輕鏈CDR1、CDR2和CDR3區(qū)，或各自具有少于4個或少于3個保守氨基酸置換和/或總共3個或更少的非保守氨基酸置換的⑶R區(qū)。[0184]在一些情況下，可變結(jié)構(gòu)域（VH)至少部分由人基因編碼。在一些情況下，IL-6抗體的VH序列相對于種系氨基酸序列包含一個或多個氨基酸置換、缺失或插入（添加）。在一些情況下，重鏈的可變結(jié)構(gòu)域相對于種系氨基酸序列包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17個突變。在一些情況下，與種系氨基酸序列相比較，突變是非保守置換、缺失或插入。在一些實例中，突變位于重鏈的⑶R區(qū)。在一些實例中，在一個或多個與抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl的任何一個或多個VH中的相對于種系的突變相同的位點上產(chǎn)生氨基酸變化。在其他實例中，氨基酸變化在一個或多個相同的位點上但牽涉與參照抗體中的突變不同的突變。[0185]在一些情況下，重鏈包含抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22851861的￥11氨基酸序列，或具有直至1、2、3、4、6、8或10個保守氨基酸置換和/或總共直至3個非保守氨基酸置換的所述VH氨基酸序列。在一些實例中，重鏈包含任一上述抗體的從⑶R1開始至⑶R3結(jié)束的氨基酸序列。[0186]在一些情況下，重鏈包含抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl的重鏈CDR1、CDR2和CDR3區(qū)，或各自具有少于8個、少于6個、少于4個或少于3個保守氨基酸置換和/或總共3個或更少的非保守氨基酸置換的CDR區(qū)。[0187]在一些情況下，重鏈CDR區(qū)獨立地選自抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl的CDR區(qū)。在其他情況下，重鏈包含獨立地選自從9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl中選擇的兩個或更多個VH區(qū)的⑶R區(qū)。[0188]在其他情況下，抗體包含輕鏈和重鏈。在另外的實例中，輕鏈⑶R和重鏈⑶R來自相同的抗體。[0189]可產(chǎn)生的一種類型的氨基酸置換是改變抗體中的一個或多個半胱氨酸，所述半胱氨酸可與另一個殘基例如但不限于丙氨酸或絲氨酸化學(xué)反應(yīng)。在一個實施例中，存在非典范（canonical)半胱氨酸的置換?？稍诳贵w的可變結(jié)構(gòu)域的CDR或構(gòu)架區(qū)中或恒定結(jié)構(gòu)域中產(chǎn)生置換。在一些情況下，半胱氨酸是典范的。[0190]可產(chǎn)生的另一種類型的氨基酸置換是改變抗體中任何潛在的蛋白質(zhì)水解位點。此類位點可發(fā)生在抗體的可變結(jié)構(gòu)域的CDR或構(gòu)架區(qū)中或恒定結(jié)構(gòu)域中。半胱氨酸殘基的置換和蛋白質(zhì)水解位點的去除可減少抗體產(chǎn)物中任何異質(zhì)性的風(fēng)險，從而增加其同質(zhì)性。另一種類型的氨基酸置換是通過改變天冬酰胺和甘氨酸中的一個或兩個來消除形成潛在的脫酰胺位點的天冬酰胺-甘氨酸對。[0191]在某些情況下，IL-6抗體的重鏈和輕鏈可任選地包括信號序列。[0192]在一些情況下，抗體包含單克隆抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl的重鏈和輕鏈的變體。如實施例3中更詳細地描述的，產(chǎn)生許多重鏈和輕鏈變異突變以匹配種系CDR區(qū)域中的那些。通過比較種系與非種系抗體的序列，被突變以達到種系形式的特定氨基酸對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯然的。例如，在抗體9C8的重鏈中提供一個氨基酸置換，其中將殘基24上的異亮氨酸改變成纈氨酸并且將其稱為9C8I24V。第二個示例性氨基酸置換在抗體9C8的輕鏈中，用天冬酰胺置換殘基92上的賴氨酸，并且將其稱為9C8K92N。[0193]如將意識到的，基因利用分析提供了抗體結(jié)構(gòu)的有限概觀。由于人B細胞隨機產(chǎn)生V-D-J重鏈或V-Jk輕鏈轉(zhuǎn)錄物，因此存在許多發(fā)生的次發(fā)過程，包括但不限于，體細胞高度突變、添加和⑶R3延伸。因此，為了進一步檢查抗體結(jié)構(gòu)，從獲自克隆的cDNA產(chǎn)生抗體的預(yù)測的氨基酸序列。此外，通過蛋白質(zhì)測序獲得N末端氨基酸序列。[0194]抗IL-6抗體的種類和亞類[0195]IL-6抗體的種類（例如，IgG、IgM、IgE、IgA或IgD)和亞類（例如IgGl、IgG2、IgG3或IgG4)可通過任何合適的方法來確定。一般地，使用特異于特定抗體種類和亞類的抗體來確定抗體的種類和亞類。此類抗體是可商購獲得的?？梢酝ㄟ^ELISA或Western印跡以及其他技術(shù)來確定種類和亞類。[0196]可選擇地，可通過下列來確定種類和亞類：測定抗體的輕鏈和/或重鏈的恒定結(jié)構(gòu)域的全部或部分的序列，將它們的氨基酸序列與不同種類和亞類的免疫球蛋白的已知的氨基酸序列相比較，然后確定抗體的種類和亞類。IL-6抗體可以是IgG、IgM、IgE、IgA或IgD分子。例如，IL-6抗體可以是為IgGl、IgG2、IgG3或IgG4亞類的IgG。在一個實例中，IL-6抗體是IgG2亞類。在另一個實例中，IL-6抗體是IgGl亞類。[0197]在一個方面，提供了將IL-6抗體的種類或亞類轉(zhuǎn)換成另一個種類或亞類的方法。在一些情況下，使用任何合適的方法分離編碼'或VH的核酸分子，其不包含編碼Q或CH的序列。然后將核酸分子有效地連接至編碼來自期望的免疫球蛋白種類或亞類的Q或CH的核酸序列。這可使用包含Q或CH鏈的載體或核酸分子來實現(xiàn)，如上所述的。例如，可將本來是IgM的IL-6抗體類別轉(zhuǎn)換成IgG。此外，類別轉(zhuǎn)換可用于將一個IgG亞類轉(zhuǎn)換成另一個亞類，例如將IgGl轉(zhuǎn)換成IgG2。用于產(chǎn)生抗體（其包括期望的同種型）的另一個方法包括步驟：分離編碼IL-6抗體的重鏈的核酸和編碼IL-6抗體的輕鏈的核酸，分離編碼VH區(qū)的序列，將VH序列連接至編碼期望的同種型的重鏈恒定結(jié)構(gòu)域的序列，在細胞中表達輕鏈基因和重鏈構(gòu)建體，然后收集具有期望的同種型的IL-6抗體。[0198]1L-6抗體對IL-6的結(jié)合親和力[0199]抗IL-6抗體對IL-6的結(jié)合親和力和解離速率可使用任何合適的方法來測定。結(jié)合親和力可使用ELISA、RIA、流式細胞術(shù)和表面等離子共振術(shù)例如BIAC0RE?來測量。解離速率可使用表面等離子共振術(shù)來測量。可通過使用任何合適的方法來確定抗體是否具有與抗IL-6抗體大體上相同的KD。實施例7例舉了用于測定抗IL-6單克隆抗體的親和力常數(shù)的方法。[0200]被抗IL-6抗體識別的IL-6表位的鑒定[0201]可通過使用任何合適的方法來確定抗體是否與IL-6抗體結(jié)合相同的表位或交叉競爭結(jié)合。在一個實例中，讓IL-6抗體在飽和條件下結(jié)合IL-6,然后測量受試抗體結(jié)合IL-6的能力。如果受試抗體能夠與IL-6抗體同時結(jié)合IL-6,那么受試抗體結(jié)合與IL-6抗體不同的表位。然而，如果受試抗體不能同時結(jié)合IL-6,那么受試抗體結(jié)合相同的表位、重疊的表位或與人IL-6抗體所結(jié)合的表位十分靠近的表位。該實驗可使用ELISA、RIA、BIAC0RE?或流式細胞術(shù)（FACS)來進行。[0202]為了測試IL-6抗體是否與另一種IL-6抗體交叉競爭，可以以兩個方向使用本文中描述的競爭方法，即，確定參照抗體是否阻斷受試抗體和反之亦然。在一個實例中，使用ELISA進行實驗。[0203]產(chǎn)?？贵w的方法[0204]IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分可使用多種技術(shù)來產(chǎn)生，包括常規(guī)單克隆抗體方法，例如Kohler和Milstein(1975)Nature256:495的標(biāo)準(zhǔn)體細胞雜交技術(shù)。還可使用用于產(chǎn)生單克隆抗體的其他技術(shù)例如B淋巴細胞的病毒或致癌轉(zhuǎn)化。[0205]用于制備雜交瘤的示例性動物系統(tǒng)是鼠系統(tǒng)。免疫方案和用于分離免疫的脾細胞以進行融合的技術(shù)在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的。融合伴侶（例如，鼠骨髓瘤細胞）和融合方法也是已知的。[0206]可基于如上所述制備的鼠單克隆抗體的序列制備嵌合或人源化抗體?？墒褂脴?biāo)準(zhǔn)分子生物學(xué)技術(shù)從目的鼠雜交瘤獲得編碼重鏈和輕鏈免疫球蛋白的DNA，并且對其進行工程改造以包含非鼠（例如，人）免疫球蛋白序列。例如，為了產(chǎn)生嵌合抗體，可使用本領(lǐng)域內(nèi)已知的方法（參見例如，屬于Cabilly等人的美國專利4,816,567)，將鼠可變區(qū)有效連接至人恒定區(qū)。為了產(chǎn)生人源化抗體，可使用本領(lǐng)域內(nèi)已知的方法（參見例如，美國專利5,225,539和美國專利：5,530,101;5,585,089;5,693,762和6,180,370)，將鼠CDR區(qū)插入人構(gòu)架區(qū)。[0207]在一種情況下，抗IL-6抗體是人單克隆抗體?？墒褂脭y帶人免疫系統(tǒng)的部分而非小鼠系統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因或轉(zhuǎn)染色體小鼠產(chǎn)生此類抗IL-6的人單克隆抗體。此類轉(zhuǎn)基因和轉(zhuǎn)染色體小鼠包括在本文中分別稱為HuMAbM()use_?.和KMMouse'?的小鼠，并且在本文中統(tǒng)稱為"人Ig小鼠"。[0208]HuMAbMouse?(Medarex'?，Inc.)包含人免疫球蛋白基因的微小基因座，所述基因座編碼未重排的人重鏈（]i和Y)和K輕鏈免疫球蛋白序列以及使內(nèi)源]i和K鏈基因座失活的靶向突變（參見例如，Lonberg，等人（1994)Nature368(6474):856-859)。因此，小鼠展示減少的小鼠IgM或k的表達，并且響應(yīng)免疫，引入的人重鏈和輕鏈轉(zhuǎn)基因經(jīng)歷類別轉(zhuǎn)換和體細胞突變，產(chǎn)生高親和力人IgGK單克隆抗體（Lonberg，N.等人（1994);綜述于Lonberg，N.(1994)HandbookofExperimentalPharmacology113:49-101中；Lonberg，N?和Huszar，D.(1995)Intern.Rev.Immunol.13:65-93,以及Harding，F(xiàn)?和Lonberg，N.(1995)Ann.N.Y.Acad.Sci.764:536-546)。HuMAbMouse*的制備和使用以及此類小鼠攜帶的基因組修飾進一步描述于Taylor,L.等人（1992)NucleicAcidsResearch20:6287-6295;Chen，J?等人（1993)InternationalImmunology5:647-656;Tuai1Ion等人（1993)Proc.Nat1.Acad.Sci.USA90:3720-3724;Choi等人（1993)NatureGenetics4:117-123;Chen，J?等人（1993)EMBOJ.12:821-830;Tuai1Ion等人（1994)J.Immunol.152:2912-2920;Taylor，L?等人（1994)InternationalImmunology6:579-591;和Fishwild，D?等人（1996)NatureBiotechnology14:845-851，所有文獻的內(nèi)容以其全文通過引用明確地合并入本文。還參見，美國專利：5,545,806;5,569,825;5,625,126;5,633,425;5,789,650;5,877,397;5,661，016;5,814,318;5,874,299和5,770,429;美國專利5,545,807;PCT公開案：W092/03918、W093/12227、W094/25585、W097/13852、WO98/24884和WO99/45962以及PCT公開案WO01/14424。[0209]在另一個方面，可使用在轉(zhuǎn)基因和轉(zhuǎn)染色體上攜帶人免疫球蛋白序列的小鼠（例如攜帶人重鏈轉(zhuǎn)基因和人輕鏈轉(zhuǎn)染色體的小鼠）產(chǎn)生人抗IL-6抗體。此類小鼠，在本文中稱為"KMmice?"，詳細地描述于PCT公開案W002/43478中。[0210]此外，表達人免疫球蛋白基因的可選擇的轉(zhuǎn)基因動物系統(tǒng)在本領(lǐng)域內(nèi)是可獲得的并且可用于產(chǎn)生IL-6抗體。例如，可使用稱為Xenomouse?(Abgenix，Inc.)的可選擇的轉(zhuǎn)基因系統(tǒng)；此類小鼠描述于例如美國專利：5,939,598;6,075,181;6,114,598;6,150,584和6,162,963中。[0211]此外，表達人免疫球蛋白基因的可選擇的轉(zhuǎn)染色體動物系統(tǒng)在本領(lǐng)域內(nèi)是可獲得的并且可用于產(chǎn)生IL-6抗體。例如，可使用攜帶人重鏈轉(zhuǎn)染色體和人輕鏈轉(zhuǎn)染色體的小鼠（稱為"TC小鼠"）；此類小鼠描述于Tomizuka等人（2000)Proc.Natl.Acad.Sci.USA97:722-727。此外，攜帶人重鏈和輕鏈轉(zhuǎn)染色體的牛已描述于本領(lǐng)域中（Kuroiwa等人(2002)NatureBiotechnology20:889-894)并且可用于產(chǎn)生IL-6抗體。[0212]還可使用已在其中重建了人免疫細胞（以便在免疫后可產(chǎn)生人抗體應(yīng)答）的SCID小鼠制備人單克隆抗體。此類小鼠描述于例如美國專利：5,476,996和5,698,767。[0213]人Ig小鼠的免疫[0214]抗體和抗體產(chǎn)生性細胞系的產(chǎn)生[0215]在用IL-6抗原免疫動物后，可從動物獲得抗體和/或抗體產(chǎn)生性細胞。在一些情況下，通過采血或殺死動物從動物獲得含有IL-6抗體的血清。可使用血清，因為其獲自動物，可從血清獲得免疫球蛋白級分，或可從血清純化IL-6抗體。[0216]在一些情況下，從分離自經(jīng)免疫的動物的細胞制備產(chǎn)生抗體的永生化細胞系。在免疫后，殺死動物，然后通過本領(lǐng)域內(nèi)已知的任何方法使淋巴結(jié)和/或脾B細胞永生化。永生化細胞的方法包括但不限于，用癌基因轉(zhuǎn)染它們，用致癌病毒感染它們和在選擇永生化細胞的條件下培養(yǎng)它們，將它們經(jīng)歷致癌或突變化合物，將它們與永生化細胞例如骨髓瘤細胞融合，以及使腫瘤抑制基因失活。如果使用與骨髓瘤細胞的融合，那么骨髓瘤細胞優(yōu)選不分泌免疫球蛋白多肽（非分泌型細胞系）。使用IL-6或其部分或表達IL-6的細胞篩選永生化細胞。在一些情況下，使用酶聯(lián)免疫測定（ELISA)或放射性免疫測定來進行初步篩選。在PCT公開案W000/37504(通過引用合并入本文）中提供了ELISA篩選的實例。[0217]選擇、克隆產(chǎn)生IL-6抗體的細胞例如雜交瘤并且就期望的特征（包括旺盛的生長、高抗體產(chǎn)量和期望的抗體特征）對其進行進一步篩選?？稍谕騽游铮╯yngeneicanimal)中，在缺乏免疫系統(tǒng)的動物例如裸小鼠中體內(nèi)擴增或在細胞培養(yǎng)物中體外擴增雜交瘤。選擇、克隆和擴增雜交瘤的方法對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是熟知的。[0218]在一個實例中，免疫的動物是表達人免疫球蛋白基因的非人動物，并且將脾B細胞融合至來自與該非人動物相同物種的骨髓瘤細胞系。一個這樣的免疫的動物是KirinTCMouse?小鼠，并且骨髓瘤細胞系是非分泌型小鼠骨髓瘤。在另外的實例中，骨髓瘤細胞系是Sp2/0-Agl4(美國典型培養(yǎng)物保藏中心（ATCC)CRL-1581)。[0219]還提供了用于制備產(chǎn)生抗IL-6的人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分的細胞系的方法，其包括：(a)用IL-6、IL-6的部分或表達IL-6的細胞或組織免疫本文中描述的非人轉(zhuǎn)基因動物；(b)讓轉(zhuǎn)基因動物發(fā)起對IL-6的免疫應(yīng)答；（c)從轉(zhuǎn)基因動物分離抗體產(chǎn)生性細胞；（d)永生化抗體產(chǎn)生性細胞；(e)產(chǎn)生永生化的抗體產(chǎn)生性細胞的個體單克隆群體；和（f)篩選永生化的抗體產(chǎn)生性細胞以鑒定抗IL-6的抗體。[0220]在另一個方面，提供了產(chǎn)生人IL-6抗體的雜交瘤。由雜交瘤產(chǎn)生的人IL-6抗體可以是IL-6的拮抗劑?？稍诜侨?、非小鼠物種例如大鼠、綿羊、豬、山羊、?；蝰R中產(chǎn)生雜交瘤。[0221]在一種情況下，分離抗體產(chǎn)生性細胞并且在宿主細胞例如骨髓瘤細胞中進行表達。在另一個實例中，用IL-6免疫轉(zhuǎn)基因動物，從免疫的轉(zhuǎn)基因動物分離原代細胞（例如，脾或外周血細胞），鑒定產(chǎn)生特異于期望的抗原的抗體的個體細胞。從各個個體細胞分離多腺苷酸化的mRNA，使用與可變區(qū)序列退火的有義引物（例如，識別人重鏈和輕鏈可變區(qū)基因的大多數(shù)或所有FR1區(qū)的簡并引物）以及與恒定區(qū)或連接區(qū)序列退火的反義引物進行逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR)。然后克隆重鏈和輕鏈可變結(jié)構(gòu)域的cDNA，并在任何合適的宿主細胞例如骨髓瘤細胞中進行表達，對于嵌合抗體，使用各自的免疫球蛋白恒定區(qū)例如重鏈和k或入恒定結(jié)構(gòu)域。參見Babcook，J.S.等人（1996)Proc.Natl.Acad.Sci.USA93:7843-48(通過引用合并入本文）。然后可鑒定和分離IL-6抗體。[0222]產(chǎn)?？贵w的重纟目方法[0223]IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分可通過在宿主細胞中重組表達免疫球蛋白輕鏈和重鏈基因來制備。例如，為了重組表達抗體，用一個或多個攜帶編碼抗體的免疫球蛋白輕鏈和重鏈的DNA片段的重組表達載體轉(zhuǎn)染宿主細胞，以便輕鏈和重鏈在宿主細胞中表達并且，優(yōu)選分泌入培養(yǎng)所述宿主細胞的培養(yǎng)基中，然后可從該培養(yǎng)基中回收抗體?？墒褂酶鞣N重組DNA方法來獲得抗體重鏈和輕鏈基因，將此類基因整合入重組表達載體，和將載體引入宿主細胞，例如Sambrook，F(xiàn)ritsch和Maniatis(eds)，MolecularCloning;ALaboratoryManual，第2版，ColdSpringHarbor，N.Y.,(1989)，Ausubel，F(xiàn).M?等人（eds.)CurrentProtocolsinMolecularBiology,GreenePublishingAssociates,(1989)和美國專利4,816,397(其公開內(nèi)容通過引用合并入本文）中描述的方法。[0224]突變和修飾[0225]為了表達IL-6抗體，可首先使用本文中論述的任何方法獲得編碼VJP八區(qū)的DNA片段。還可使用各種合適的方法來將各種突變、缺失和/或添加引入DNA序列。例如，可使用標(biāo)準(zhǔn)方法例如PCR介導(dǎo)的誘變來進行誘變，在所述PCR介導(dǎo)的誘變中，將突變的核苷酸整合入PCR引物以便PCR產(chǎn)物包含期望的突變或定點誘變。例如，可產(chǎn)生的一種類型的置換改變抗體中可與另一個殘基例如但不限于丙氨酸或絲氨酸化學(xué)反應(yīng)的一個或多個半胱氨酸。例如，可存在非典范或典范半胱氨酸的置換?？稍诳贵w的可變結(jié)構(gòu)域的CDR或構(gòu)架區(qū)中或恒定結(jié)構(gòu)域中產(chǎn)生置換。還可在重鏈和/或輕鏈的可變結(jié)構(gòu)域中突變抗體，例如以改變抗體的結(jié)合性質(zhì)。例如，可在一個或多個CDR區(qū)中產(chǎn)生突變以增加或減少抗體對IL-6的Kd，增加或減少k。^，或改變抗體的結(jié)合特異性。定點誘變中的技術(shù)包括例如Sambrook等人和Ausubel等人，其通過引用合并入本文。[0226]還可在構(gòu)架區(qū)或恒定結(jié)構(gòu)域中產(chǎn)生突變以增加IL-6抗體的半衰期。參見，例如，PCT公開案W000/09560,通過引用合并入本文。還可在構(gòu)架區(qū)或恒定結(jié)構(gòu)域中產(chǎn)生突變以改變抗體的免疫原性，為與另一個分子的共價或非共價結(jié)合提供位點，或改變性質(zhì)例如補體結(jié)合、FcR結(jié)合和抗體依賴性細胞介導(dǎo)的細胞毒性（ADCC)。單個抗體可在可變結(jié)構(gòu)域的任何一個或多個CDR或構(gòu)架區(qū)中或在恒定結(jié)構(gòu)域中具有突變。[0227]在稱為"種系化（germlining)"的過程中，可突變VH和八序列中的某些氨基酸以匹配在種系￥11和'序列中天然發(fā)現(xiàn)的氨基酸。特別地，可突變￥11和\序列中的構(gòu)架區(qū)的氨基酸序列以匹配種系序列，從而在施用抗體時減少免疫原性的風(fēng)險。人'基因的種系DNA序列在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的（參見例如，〃Vbase"人種系序列數(shù)據(jù)庫；也參見Kabat，E.A.，等人（1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIHPublicationNo.91-3242;Tomlinson等人（1992)J.Mol.Biol.227:776-798;和Cox等人已證.J.Immunol.24:827-836(1994);其各自的內(nèi)容通過引用合并入本文）。[0228]可產(chǎn)生的另一種類型的氨基酸置換是除去抗體中的潛在蛋白質(zhì)水解位點。此類位點可存在于抗體的可變結(jié)構(gòu)域的CDR或構(gòu)架區(qū)中或恒定結(jié)構(gòu)域中。半胱氨酸殘基的置換和蛋白質(zhì)水解位點的去除可減少抗體產(chǎn)物的異質(zhì)性的風(fēng)險，從而增加其同質(zhì)性。另一種類型的氨基酸置換是通過改變天冬酰胺和甘氨酸中的一個或兩者來消除形成潛在的脫酰胺位點的天冬酰胺-甘氨酸對。在另一個實例中，可切割I(lǐng)L-6抗體的重鏈的C末端賴氨酸。在各種實例中，IL-6抗體的重鏈和輕鏈可任選地包括信號序列。在一些情況下，可通過蛋白水解切割抗IL-6抗體的重鏈的C末端賴氨酸。[0229]在獲得編碼VH和'區(qū)段的DNA片段后，可利用標(biāo)準(zhǔn)重組DNA技術(shù)進一步操作此類DNA片段，例如以將可變區(qū)基因轉(zhuǎn)換成全長抗體鏈基因，轉(zhuǎn)換成Fab片段基因或轉(zhuǎn)換成scFv基因。在此類操作中，將編碼'或VJ^DNA片段有效地連接至編碼另一種蛋白質(zhì)（例如抗體恒定區(qū)或柔性連接體）的另一個DNA片段。術(shù)語"有效連接"，如本說明書中使用的，旨在表示連接兩個DNA片段以便由這兩個DNA片段編碼的氨基酸序列保持符合讀框。[0230]可通過將編碼VH的DNA有效地連接至編碼重鏈恒定區(qū)（CHI、CH2和CH3)的另一個DNA分子來將編碼VH區(qū)的分離的DNA轉(zhuǎn)換成全長重鏈基因。人重鏈恒定區(qū)基因的序列在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的（參見例如，Kabat，E.A.，等人（1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIHPublicationNo.91-3242)并且包含這些區(qū)域的DNA片段可通過標(biāo)準(zhǔn)PCR擴增獲得。重鏈恒定區(qū)可以是IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD恒定區(qū)，但最優(yōu)選是IgGl或IgG2恒定區(qū)。IgGl恒定區(qū)序列可以是已知在不同個體中發(fā)生的任何等位基因或同種異型，例如Gm(l)、Gm(2)、Gm(3)和Gm(17)。此類同種異型代表了IgGl恒定區(qū)中天然發(fā)生的氨基酸置換。對于Fab片段重鏈基因，可將編碼VH的DNA有效地連接至只編碼重鏈CH1恒定區(qū)的另一個DNA分子。CH1重鏈恒定區(qū)可來源于任何重鏈基因。[0231]可通過將編碼VL的DNA有效地連接至編碼輕鏈恒定區(qū)CL的另一個DNA分子來將編碼VL區(qū)的分離的DNA轉(zhuǎn)換成全長輕鏈基因（以及Fab輕鏈基因）。人輕鏈恒定區(qū)基因的序列在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的（參見例如，Kabat，E.A.,等人（1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIHPublicationNo.91-3242)并且可通過標(biāo)準(zhǔn)PCR擴增來獲得包含此類區(qū)域的DNA片段。輕鏈恒定區(qū)可以是k或A恒定區(qū)。K恒定區(qū)可以是已知在不同個體中發(fā)生的任何等位基因例如Inv(l)、Inv(2)和Inv(3)。X恒定區(qū)可來源于3個X基因的任一個。[0232]為了產(chǎn)生scFv基因，將編碼VH和編碼\的DNA片段有效連接至編碼柔性連接體(例如編碼氨基酸序列（Gly4_Ser)3)的另一個片段，以便Vj^P'序列可表達為連續(xù)單鏈蛋白，且'和VHg通過柔性連接體連接（參見例如，Bird等人Science242:423-426(1988);Huston等人Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:5879-5883(1988);McCafTerty等人，Nature348:552-554(1990))。如果只使用單個VH和'，則單鏈抗體可以是單價的，如果使用兩個VH和'，則其可以是二價的，或如果使用2個以上的VH和'，則其可以是多價的。可產(chǎn)生特異性結(jié)合IL-6和另一個分子的雙特異性或多價抗體。[0233]在另一種情況下，可制備包含連接至另一個多肽的IL-6抗體的全部或部分的融合抗體。在另一種情況下，只將IL-6抗體的可變結(jié)構(gòu)域連接至多肽。在另一種情況下，將IL-6抗體的VH結(jié)構(gòu)域連接至第一多肽，同時將IL-6抗體的'結(jié)構(gòu)域連接至第二多肽，所述第二多肽以使％和'結(jié)構(gòu)域能夠彼此相互作用以形成抗原結(jié)合部位的方式結(jié)合第一多肽。在另一種情況下，通過連接體將VH結(jié)構(gòu)域與'結(jié)構(gòu)域分開，以便VH和'結(jié)構(gòu)域可彼此相互作用。然后將％_連接體抗體連接至目的多肽。此外，可產(chǎn)生其中兩個（或更多個）單鏈抗體彼此連接的融合抗體。如果想要在單個多肽鏈上產(chǎn)生雙價或多價抗體，或如果想要產(chǎn)生雙特異性抗體，這是很有用的。[0234]在其他情況下，可使用編碼IL-6抗體的核酸分子制備其他修飾的抗體。例如，可按照本文中論述的教導(dǎo)使用合適的分子生物學(xué)技術(shù)制備"Kappabodies"（I11等人，ProteinEng.10:949-57(1997))、"微小抗體''（Martin等，EMB0J.13:5303-9(1994))、"雙抗體"（Hoi1iger等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448(1993))或"Janusins"（Traunecker等，EMB0J.10:3655-3659(1991)和Traunecker等，Int.J.Cancer(Suppl.)7:51-52(1992))。[0235]可利用許多方法（包括雜交瘤的融合或Fab'片段的連接）產(chǎn)生雙特異性抗體或抗原結(jié)合片段。參見，例如，3〇叩8；[￥；[]^&1^111]^1111，（]1；[11.￡叉口.Immunol.79:315-321(1990)，Kostelny等人，J.Immunol.148:1547-1553(1992)。此外，可將雙特異性抗體形成為"雙抗體"或"Janusins"。在一些情況下，雙特異性抗體結(jié)合IL-6的兩個不同表位。在一些情況下，使用來自人IL-6抗體的一個或多個可變結(jié)構(gòu)域或CDR區(qū)來制備本文中描述的修飾的抗體。[0236]載體和宿豐細朐[0237]為了表達IL-6抗體和其抗原結(jié)合部分，將如本文所述獲得的編碼部分或全長輕鏈和重鏈的DNA插入表達載體，以便將基因有效地連接至轉(zhuǎn)錄和翻譯控制序列。在本說明書中，術(shù)語"有效連接"旨在表示將抗體基因連接入載體以便載體內(nèi)的轉(zhuǎn)錄和翻譯控制序列能夠發(fā)揮它們期望的調(diào)控抗體基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯的功能。選擇表達載體和表達控制序列以與使用的表達宿主細胞相容。表達載體包括例如質(zhì)粒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒、腺伴隨病毒(AAV)、植物病毒例如花椰菜花葉病毒、煙草花葉病毒、粘粒、YAC和EBV衍生附加體。將抗體基因連接入載體以便載體內(nèi)的轉(zhuǎn)錄和翻譯控制序列能夠發(fā)揮它們期望的調(diào)控抗體基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯的功能。選擇表達載體和表達控制序列以與使用的表達宿主細胞相容。可將抗體輕鏈基因和抗體重鏈基因插入分開的載體或?qū)蓚€基因都插入相同的表達載體。利用各種方法（例如，抗體基因片段與載體上的互補限制性位點的連接，或者如果不存在限制性位點則平端連接）將抗體基因插入表達載體。[0238]方便的載體是這樣的載體，其編碼功能上完整的人CH或Q免疫球蛋白序列，具有適當(dāng)?shù)慕?jīng)工程改造的限制性位點以便任何VH或'序列可容易地插入和表達，如上所述的。在此類載體中，剪接通常在插入的J區(qū)中的剪接供體位點與人C結(jié)構(gòu)域之前的剪接受體位點之間發(fā)生，也可在存在于人CH外顯子中的剪接區(qū)域上發(fā)生。多腺苷酸化和轉(zhuǎn)錄終止在編碼區(qū)下游的天然染色體位點上發(fā)生。重組表達載體還可編碼促進抗體鏈從宿主細胞分泌的信號肽?？蓪⒖贵w鏈基因克隆入載體以便信號肽符合讀框地連接至免疫球蛋白鏈的氨基端。信號肽可以是免疫球蛋白信號肽或異源信號肽（即，來自非免疫球蛋白蛋白質(zhì)的信號肽）。[0239]除了抗體鏈基因外，重組表達載體具有控制抗體鏈基因在宿主細胞中的表達的調(diào)控序列。表達載體的設(shè)計（包括調(diào)控序列的選擇）可取決于因素例如待轉(zhuǎn)化的宿主細胞的選擇、期望的蛋白質(zhì)表達水平。用于哺乳動物宿主細胞表達的調(diào)控序列包括在哺乳動物細胞中指導(dǎo)高水平的蛋白質(zhì)表達的病毒元件，例如來源于逆轉(zhuǎn)錄病毒LTR、巨細胞病毒（CMV)(例如CMV啟動子/增強子），猿猴病毒40(SV40)(例如SV40啟動子/增強子）、腺病毒（例如，腺病毒主要晚期啟動子（AdMLP))、多瘤和強哺乳動物啟動子例如天然免疫球蛋白和肌動蛋白啟動子的啟動子和/或增強子。關(guān)于病毒調(diào)控元件和其序列的進一步描述，參見例如，美國專利5,168,062、美國專利4,510,245和美國專利4,968,615,其通過引用合并入本文。用于在植物中表達抗體（包括啟動子和載體的描述）以及植物的轉(zhuǎn)化的方法，在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的。參見，例如，美國專利6,517,529,其通過引用合并入本文。[0240]除了抗體鏈基因和調(diào)控序列外，重組表達載體可攜帶另外的序列，例如調(diào)控載體在宿主細胞中的復(fù)制的序列（例如，復(fù)制起點）和選擇標(biāo)記基因。選擇標(biāo)記基因幫助選擇已向其中引入了載體的宿主細胞（參見例如，美國專利4,399,216、4,634,665和5,179,017，其通過引用合并入本文）。例如，通常選擇標(biāo)記基因為向其中引入了載體的宿主細胞提供對藥物例如G418、潮霉素或甲氨蝶呤的抗性。選擇標(biāo)記基因包括二氫葉酸還原酶（DHFR)基因(用于使用甲氨蝶呤選擇/擴增的dhfr-宿主細胞）、新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因（用于G418選擇）和谷氨酸合酶基因。[0241]編碼IL-6抗體的核酸分子和包含此類核酸分子的載體可用于轉(zhuǎn)染適當(dāng)?shù)牟溉閯游?、植物、細菌或酵母宿主細胞。轉(zhuǎn)化可以是將多核苷酸引入宿主細胞的任何適當(dāng)?shù)姆椒āＳ糜趯愒炊嗪塑账嵋氩溉閯游锛毎姆椒òㄆ暇厶墙閷?dǎo)的轉(zhuǎn)染、磷酸鈣沉淀、聚凝胺介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染、原生質(zhì)體融合、電穿孔、多核苷酸在脂質(zhì)體中的封裝和DNA至細胞核內(nèi)的直接顯微注射。此外，可利用病毒載體將核酸分子引入哺乳動物細胞。轉(zhuǎn)化細胞的方法在本領(lǐng)域內(nèi)是熟知的。參見，例如，美國專利4,399,216、4,912,040、4,740,461和4,959,455，其通過引用合并入本文）。轉(zhuǎn)化植物細胞的方法在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的，包括，例如農(nóng)桿菌(Agrobacterium)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化、基因槍轉(zhuǎn)化（biolistictransformation)、直接注射、電穿孔和病毒轉(zhuǎn)化。用于轉(zhuǎn)化細菌和酵母細胞的方法在本領(lǐng)域內(nèi)也是熟知的。[0242]可獲得作為用于表達的宿主的哺乳動物細胞系在本領(lǐng)域內(nèi)是熟知的，其包括許多可從美國典型培養(yǎng)物保藏中心（ATCC)獲得的永生化的細胞系。此類細胞包括例如中國倉鼠卵巢（CH0)細胞、NS0細胞、SP2細胞、HEK-293T細胞、NIH-3T3細胞、HeLa細胞、幼倉鼠腎(BHK)細胞、非洲綠猴腎細胞（C0S)、人肝細胞癌細胞（例如，HepG2)、A549細胞和許多其他細胞系。通過確定哪些細胞系具有高表達水平來選擇特別優(yōu)選的細胞系。可使用的其他細胞系是昆蟲細胞系例如Sf9或Sf21細胞。當(dāng)將編碼抗體基因的重組表達載體引入哺乳動物宿主細胞時，通過培養(yǎng)宿主細胞并進行足以允許抗體在宿主細胞中表達或更優(yōu)選，允許抗體分泌入培養(yǎng)宿主細胞的培養(yǎng)基中的時間來產(chǎn)生抗體。可使用各種蛋白質(zhì)純化方法來從培養(yǎng)基回收抗體。細胞宿主細胞包括大腸桿菌（E.coli)和鏈霉菌屬（Streptomyces)的種。酵母宿主細胞包括粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomycespombe)、釀酒酵母（Saccharomycescerevisiae)和畢赤酵母（Pichiapastoris)。[0243]此外，可使用任何合適的技術(shù)來增強抗體從產(chǎn)生性細胞系的表達。例如，谷氨酰胺合成酶（GS系統(tǒng)）和DHFR基因表達系統(tǒng)是用于在某些條件下增強表達的常用方法?？墒褂贸Ｒ?guī)技術(shù)例如有限稀釋克隆和微滴（Microdrop)技術(shù)來鑒定高表達細胞克隆。在歐洲專利0216846、0256055、0323997和0338841中論述了GS系統(tǒng)。[0244]由不同細胞系或在轉(zhuǎn)基因動物中表達的抗體可能具有彼此不同的糖基化。然而，由本文中提供的核酸分子編碼的或包含本文中提供的氨基酸序列的所有抗體都是本公開內(nèi)容的部分，無論抗體的糖基化如何。[0245]噬菌體展示t?庫[0246]還提供了用于產(chǎn)生IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分的方法，其包括步驟：在噬菌體上合成人抗體的文庫，用IL-6或其部分篩選文庫，分離結(jié)合IL-6的噬菌體，以及從噬菌體獲得抗體。例如，用于制備抗體文庫（其用于噬菌體展示技術(shù)）的一個方法包括步驟：用IL-6或其抗原性部分免疫包含人免疫球蛋白基因座的非人動物以產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從免疫的動物提取抗體產(chǎn)生性細胞；從提取的細胞分離編碼抗體的重鏈和輕鏈的RNA，逆轉(zhuǎn)錄RNA以產(chǎn)生cDNA，使用引物擴增cDNA，然后將cDNA插入噬菌體展示載體以便在噬菌體上表達抗體。可用該方法獲得重組IL-6抗體。[0247]可通過篩選重組組合抗體文庫來分離重組IL-6人抗體。優(yōu)選文庫是使用從分離自B細胞的mRNA制備的人'和VHcDNA產(chǎn)生的scFv噬菌體展示文庫。用于制備和篩選此類文庫的方法在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的。用于產(chǎn)生噬菌體展示文庫的試劑盒是可商購獲得的（例如，PharmaciaRecombinantPhageAntibodySystem，catalogno.27-9400-01;和StratageneSurfZAPTM噬菌體展不試劑盒，catalogno.240612)。還存在可用于產(chǎn)生和篩選抗體展示文庫的其他方法和試劑（參見，例如，美國專利5,223,409;PCT公開案W092/18619,W091/1727UW092/2079UW092/15679,W093/01288,W092/01047,W092/09690;Fuchs等人，Bio/Technology9:1370-1372(1991);Hay等人，Hum.Antibod.Hybridomas3:81-85(1992);Huse等人，Science246:1275-1281(1989);McCafferty等人，Nature348:552-554(1990);Griffiths等人，EMBOJ.12:725-734(1993);Hawkins等人，J.Mol.Biol.226:889-896(1992);Clackson等人，Nature352:624-628(1991);Gram等人，Proc.Nat1.Acad.Sci.USA89:3576-3580(1992);Garrad等人，Bio/Technology9:1373-1377(1991);Hoogenboom等人，Nuc.AcidRes.19:4133-4137(1991);和Barbas等人，Proc.Nat1.Acad.Sci.USA88:7978-7982(1991)，其全部通過引用合并入本文。[0248]為了分離和產(chǎn)生具有期望的特征的人IL-6抗體，首先使用PCT公開案TO93/06213(其通過引用合并入本文）中描述的表位印跡法將人IL-6抗體用于選擇具有對IL-6的相似結(jié)合活性的人重鏈和輕鏈序列。用于該方法的抗體文庫優(yōu)選是如PCT公開案TO92/01047,McCafferty等人，Nature348:552-554(1990);和Griffiths等人，EMB0J.12:725-734(1993)(其全部通過引用合并入本文）中所述制備和篩選的scFv文庫。[0249]在選擇了初始的人'和VH結(jié)構(gòu)域后，進行"混合和匹配（mixandmatch)"實驗，其中就IL-6結(jié)合篩選初始選擇的'和VH區(qū)段的不同配對以選擇優(yōu)選的'/VH配對組合。此外，為了進一步提高抗體的質(zhì)量，可在與體內(nèi)體細胞突變過程（其在天然免疫應(yīng)答過程中負(fù)責(zé)抗體的親和力成熟）相似的過程中，隨機突變優(yōu)選的/VH對的'和VH區(qū)段（優(yōu)選在V!^P/或'的⑶R3區(qū)域內(nèi)）?？赏ㄟ^使用分別與VHOTR3或'⑶R3互補的PCR引物擴增VH和'結(jié)構(gòu)域來完成該體外親和力成熟，所述引物已在某些位點上用4種核苷酸堿基的隨機混合物進行"換雜"以便所得的PCR產(chǎn)物編碼已將隨機突變引入VH和/或'CDR3區(qū)域的VH和'區(qū)段?？删蛯L-6的結(jié)合再篩選這些隨機突變的VH和'區(qū)段。[0250]在從重組免疫球蛋白展示文庫篩選和分離IL-6抗體后，可從展示包裝（例如，從噬菌體基因組）回收編碼所選擇的抗體的核酸，然后通過標(biāo)準(zhǔn)重組DNA技術(shù)將其亞克隆入其他表達載體。需要時,還可操縱核酸以產(chǎn)生其他抗體形式，如本文中所描述的。為了表達通過篩選組合文庫而分離的重組人抗體，如上所述,將編碼抗體的DNA克隆入重組表達載體并且引入哺乳動物宿主細胞。[0251]去免疫化的抗體[0252]在另一個方面，可使用例如PCT公開案：W098/52976和W000/34317(其通過引用合并入本文）中描述的技術(shù)將IL-6抗體或其抗原結(jié)合部分去免疫化以減小它們的免疫原性。[0253]衍牛的和標(biāo)記的抗體[0254]可衍生IL-6抗體或抗原結(jié)合部分或?qū)⑵溥B接至另一個分子（例如，另一個肽或蛋白質(zhì)）。一般地，衍生抗體或其抗原結(jié)合部分以使IL-6結(jié)合不受衍生或標(biāo)記不利地影響。因此，抗體和抗原結(jié)合部分旨在包括本文中描述的人IL-6抗體的原封不動（intact)的形式和修飾的形式。例如，可將抗體或抗原結(jié)合部分功能性地連接（通過化學(xué)偶聯(lián)、基因融合、非共價結(jié)合等）至一個或多個其他分子實體，例如另一個抗體（例如，雙特異性抗體或雙抗體）、檢測試劑、標(biāo)記、細胞毒性劑、藥劑和/或可介導(dǎo)抗體或抗原結(jié)合部分與另一個分子的結(jié)合的蛋白質(zhì)或肽（例如鏈霉抗生物素蛋白核心區(qū)或多組氨酸標(biāo)簽）。[0255]通過交聯(lián)兩種或更多種抗體（相同類型或不同類型的，例如，以產(chǎn)生雙特異性抗體）來產(chǎn)生一種類型的衍生抗體。合適的交聯(lián)劑包括具有被適當(dāng)?shù)拈g隔子分隔的兩個不同的反應(yīng)性基團的異雙功能的（例如，m-馬來酰亞胺基苯甲?；?N-羥基琥珀酰亞胺酯）或同雙功能的（例如，二琥拍酰亞胺基辛二酸酯）交聯(lián)劑。此類交聯(lián)劑可從PierceChemicalCompany,Rockford,IL獲得。[0256]另一種類型的衍生抗體是標(biāo)記抗體?？捎闷溲苌贵w或抗原結(jié)合部分的有用的檢測試劑包括熒光化合物，包括例如，熒光素、異硫氰酸熒光素、羅丹明、5-二甲胺基-1-萘-磺酰氯、藻紅蛋白、鑭系元素磷光體?？贵w還可用用于檢測的酶標(biāo)記，所述酶例如辣根過氧化物酶、半乳糖苷酶、螢光素酶、堿性磷酸酶或葡糖氧化酶。當(dāng)用可檢測的酶標(biāo)記抗體時，通過加入另外的試劑（酶可用其產(chǎn)生可辨別的反應(yīng)產(chǎn)物）來檢測酶。例如，當(dāng)提供試劑辣根過氧化物酶時，過氧化氫和二氨基聯(lián)苯胺的加入導(dǎo)致可檢測的有色反應(yīng)產(chǎn)物。還可用生物素標(biāo)記抗體，并通過間接測量抗生物素蛋白或鏈霉抗生物素蛋白的結(jié)合來對其進行檢測。還可用預(yù)先確定的被第二報道分子識別的多肽表位（例如，亮氨酸拉鏈對序列，二抗的結(jié)合部位，金屬結(jié)合結(jié)構(gòu)域、表位標(biāo)簽）標(biāo)記抗體。在一些情況下，通過不同長度的間隔臂連接標(biāo)記以減小潛在的空間位阻。還可用化學(xué)基團例如聚乙二醇（PEG)、甲基或乙基或碳水化合物基團衍生IL-6抗體。此類基團可用于改進抗體的生物學(xué)特征，例如，增加血清半衰期。[0257]本文中所示的特定實施例旨在舉例說明本公開內(nèi)容的特定方面并且無意限定權(quán)利要求的范圍。[0258]實施例1[0259]產(chǎn)牛抗IL-6抗體的雜奪瘤的產(chǎn)牛[0260]如下制備、選擇和測定根據(jù)本公開內(nèi)容的示例性抗體：[0261]小鼠品系[0262]使用人Ig轉(zhuǎn)基因小鼠品系HC〇7和HC〇12以及人轉(zhuǎn)染色體/轉(zhuǎn)基因品系KM(Medarex，Inc.)制備抗人IL-6的完全人單克隆抗體。這些品系都表達不能與從人分離的抗體相區(qū)分的完全人抗體。[0263]在所有3個品系中，分別如Chen等人（1993)EMB0J.12:811-820和PCT公開案TO01/09187的實施例1中所述，純合地破壞內(nèi)源小鼠k輕鏈基因和內(nèi)源小鼠重鏈基因。此外，所有3個品系都具有人k輕鏈轉(zhuǎn)基因KCo5,如FishwiId等人（1996)NatureBiotechnology14:845-851中描述的。相反地，在它們的人重鏈基因方面，3個品系是不同的。HCo7品系具有如美國專利：5,545,806、5,625,825和5,545,807中描述的HCo7人重鏈轉(zhuǎn)基因；HC〇12品系具有如PCT公開案W001/09187的實施例2中描述的HC〇12人重鏈轉(zhuǎn)基因；以及疆品系具有如181^(^等人，（2002)，(：1〇111叩311(13七6111〇6118,4:91-102中描述的人微型染色體。[0264]俥用IL-6抗原的免疫和產(chǎn)?？笽L-6單克降抗體的HuMab小鼠的詵擇[0265]用于HuMab小鼠的一般免疫方案描述于Lonberg等（1994)Nature368(6474):856_859;Fishwild等人（1996)NatureBiotechnologyl4:845_851和PCT公開案W098/24884中。在本發(fā)明中，用5-25iig的在Ribi佐劑中的純化的人IL-6在6-16周齡時開始免疫HC〇7、HC〇12和KM品系的總共81只HuMab小鼠。從人骨髓衍生的基質(zhì)細胞HS-5(ATCCCRL-11882，RoeckleinB.A.&Torok-StorbB.，Blood85:997-1005，1995)(其將IL-6內(nèi)源地分泌入培養(yǎng)基）分離人IL-6。從表達IL-6的HS-5培養(yǎng)基純化人IL-6,其通過超濾，然后通過QSepharose陰離子交換層析步驟和使用小鼠抗hIL_6MAb(R&DSystems,CatalognumberMAB2061，克隆1936)的親和層析步驟來進行濃縮。純化的人IL-6具有大約90%的純度（通過SDS-PAGE測定的）。從SDS-PAGE凝膠上切取主條帶，用胰蛋白酶降解，并在4700T0F/T0FProteomicsAnalyzer上通過MALDI/MS分析提取的、凝膠純化的胰蛋白酶降解的肽，確認(rèn)其為人IL-6?？蛇x擇地，可使用商業(yè)來源的重組人IL-6(例如，重組人IL-6,產(chǎn)品目錄號206-IL-6/CF.R&DSystemInc.614MckinleyPlaceNE，Minneapolis,MN55413)。以3至14天的間隔通過腹膜內(nèi)、皮下或至足墊（footpad)內(nèi)的注射進行施用，直至總共8次免疫。如下所述，通過ELISA篩選來監(jiān)控免疫應(yīng)答。[0266]產(chǎn)?？笽L-6抗體的HuMab小鼠的詵擇[0267]通過眶后采血獲得來自上述轉(zhuǎn)基因小鼠的血，并且就對純化的人IL-6重組蛋白的特異性結(jié)合通過ELISA對其進行分析，如由FishwiId等人（1996)，NatureBiotechnology14:845-851所描述的。[0268]簡而言之，使用50ii1/孔的在PBS中的純化的重組IL-6溶液（liig/ml)包被微量滴定板，然后在41：下溫育過夜。然后使用200111/孔的在？85/1'肌^11(0.05%)中的5%雞血清封閉孔。向各孔中加入來自IL-6免疫的小鼠的血漿的稀釋物，然后在環(huán)境溫度下溫育1小時。用PBS/Tween清洗板，然后將其與綴合有辣根過氧化物酶（HRP)的山羊抗人IgGFc多克隆抗體一起在室溫下溫育1小時。在清洗后，用ABTS底物對板進行顯色（MossInc，product#:ABTS-1000mg/ml)，然后在0D415-495處用分光光度計進行分析。將產(chǎn)生最高滴度的抗IL-6抗體的小鼠（總共22只動物）用于融合。[0269]產(chǎn)?？笽L-6的人單克降抗體的雜奪瘤的產(chǎn)牛：[0270]在殺死和取出脾和/或淋巴結(jié)之前3天用IL-6靜脈內(nèi)加強上述選擇的小鼠，并在其之前2天再次進行加強。進行總共17個融合。[0271]按照標(biāo)準(zhǔn)的或制造商推薦的方案，使用電融合（E-fusion，CytoPulse?technology，CytoPulse?Sciences，Inc.,GlenBurnie，MD)將從免疫的HuMab或KM小鼠分離的小鼠脾細胞和/或淋巴結(jié)淋巴細胞融合至SP2/0非分泌型小鼠骨髓瘤細胞（ATCC，CRL-1581，ATCC美國典型培養(yǎng)物保藏中心，1080UniversityBoulevard，Manassas，VA20110-2209USA)〇[0272]簡而言之，制備來自免疫的小鼠的脾細胞和/或淋巴結(jié)淋巴細胞的單細胞懸浮液，然后將其與等數(shù)量的Sp2/0非分泌型小鼠骨髓瘤細胞組合；然后進行E-fusion。[0273]然后將細胞以2xl04個細胞/孔涂板在平底微量滴定板中，并在含有10%胎牛血清，10%?38801仏10：，0^-1'18-63)條件培養(yǎng)基，3-5%的在01^]\1(]^(113七6(*，拖111(1〇11，VA，Cat.No.CRL10013,具有高葡萄糖、L-谷氨酰胺和丙酮酸鈉）中的（IGEN)、5mMHEPES、0.055mM2-巰基乙醇、50mg/ml慶大霉素和lxHAT(Sigma，Cat.No.CRL-P-7185)的選擇性培養(yǎng)基中溫育10至14天。[0274]1至2周后，將細胞培養(yǎng)在其中用HT替代了HAT的培養(yǎng)基中。在細胞涂板后大約10至14天，就人y、k抗體的存在篩選來自單個孔的上清液。就人抗IL-6單克隆IgG抗體通過ELISA(使用上述方案）篩選對于人y、k評分為陽性的上清液。將分泌抗體的雜交瘤轉(zhuǎn)移至24孔板，再次進行篩選，并且如果確認(rèn)對于人抗IL-6IgG單克隆抗體為陽性，則通過有限稀釋將其亞克隆至少2次。然后體外培養(yǎng)穩(wěn)定的亞克隆以在組織培養(yǎng)基中產(chǎn)生少量抗體用于進一步表征。[0275]實施例2[0276]IL-6抗體的測序[0277]如下從雜交瘤克隆全長抗IL-6抗體并進行序列驗證：使用RNeasyMiniKit(Qiagen)分離Poly(A)+mRNA，然后用AdvantageRT-for-PCR試劑盒（BDBiosciences)，利用寡聚（dT)引物從mRNA合成cDNA。分別使用表1中所列的簡并引物擴增克隆9C8的寡聚（dT)引發(fā)的cDNA。[0278]表1:用于9C8的簡并引物（5'至3')[0279]【權(quán)利要求】1.包含重鏈可變（VH)結(jié)構(gòu)域氨基酸序列的分離的人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分，所述重鏈可變結(jié)構(gòu)域氨基酸序列包含選自下列的⑶R1、⑶R2和⑶R3區(qū)：a)如SEQIDN0:5中所示如SEQIDN0:6中所示和如SEQIDN0:7中所示的VHCDR3;b)如SEQIDN0:35中所示如SEQIDN0:6中所示和如SEQIDN0:7中所示的VHCDR3;c)如SEQIDN0:5中所示如SEQIDN0:6中所示的\^：01?2和如SEQIDN0:41中所示的VHCDR3;d)如SEQIDN0:5中所示如SEQIDN0:6中所示的\^：01?2和如SEQIDN0:44中所示的VfDR3;和e)如SEQIDN0:5中所示如SEQIDN0:6中所示的\^：01?2和如SEQIDN0:45中所示的VHCDR3;其中所述抗體特異性結(jié)合人IL-6。2.權(quán)利要求1的分離的人抗體或抗原結(jié)合部分，其還包含輕鏈可變（\)結(jié)構(gòu)域氨基酸序列，所述輕鏈可變結(jié)構(gòu)域氨基酸序列含有如SEQIDNO:16中所示的\CDR1、如SEQIDNO:17中所示的'CDR2和如SEQIDNO:18中所示的'CDR3。3.包含輕鏈可變（VJ結(jié)構(gòu)域氨基酸序列的分離的人抗體或其抗原結(jié)合部分，所述輕鏈可變結(jié)構(gòu)域氨基酸序列含有如SEQIDNO:16中所示的\CDR1，如SEQIDNO:17中所示的'CDR2和如SEQIDNO:18中所示的'CDR3;其中所述抗體特異性結(jié)合人IL-6。4.權(quán)利要求2的分離的抗體或其抗原結(jié)合部分，其包含：如SEQIDN0:5中所示的711〇01?1，如5￡010勵:6中所示的￥11〇)1?2，如5￡010勵:7中所示的￥11〇)1?3，如5￡010勵：16中所示的八CDR1，如SEQIDNO:17中所示的'CDR2和如SEQIDNO:18中所示的\CDR3。5.包含重鏈可變（VH)結(jié)構(gòu)域氨基酸序列的分離的人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分，所述重鏈可變結(jié)構(gòu)域氨基酸序列選自SEQIDN0:4、SEQIDN0:29、SEQIDN0:34、SEQIDNO:37和SEQIDNO:40,或與SEQIDNO:4、SEQIDNO:29、SEQIDNO:34、SEQIDNO:37和SEQIDN0:40的任一個相異在于具有至少一個保守氨基酸置換，或與SEQIDN0:4、SEQIDN0:29、SEQIDN0:34、SEQIDN0:37和SEQIDN0:40的任一個相異在于具有至少一個與SEQIDNO:46相比較的種系氨基酸置換；其中所述抗體特異性結(jié)合人IL-6。6.權(quán)利要求5的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中VH結(jié)構(gòu)域在氨基酸序列上與SEQIDNO:4,SEQIDNO:29,SEQIDNO:34,SEQIDNO:37和SEQIDNO:40中的任一個至少90%同一。7.包含輕鏈可變（VJ結(jié)構(gòu)域氨基酸序列的分離的人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分，所述輕鏈可變結(jié)構(gòu)域氨基酸序列選自SEQIDNO:15,或與SEQIDNO:15相異在于具有保守氨基酸置換，或與SEQIDN0:15相異在于具有與SEQIDN0:47相比較的種系氨基酸置換；其中所述抗體特異性結(jié)合人IL-6。8.權(quán)利要求7的抗體或其抗原結(jié)合部分，其包含在氨基酸序列上與SEQIDNO:15至少90%同一的'結(jié)構(gòu)域。9.權(quán)利要求5的分離的人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分，其還包含輕鏈可變（VJ結(jié)構(gòu)域氨基酸序列，所述輕鏈可變結(jié)構(gòu)域氨基酸序列選自SEQIDNO:15,或與SEQIDNO:15相異在于具有保守氨基酸置換，或與SEQIDNO:15相異在于具有與它們各自的選自SEQIDNO:47的種系序列相比較的種系氨基酸置換。10.包含'和VH結(jié)構(gòu)域的分離的人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分，所述'和VH結(jié)構(gòu)域在氨基酸序列上分別與抗體9C8、9C8N68TT83S、9C8E31GN68TT83S、9C8I24VN68TT83S和22B5的'和VH結(jié)構(gòu)域至少90%同一；其中所述抗體特異性結(jié)合人IL-6。11.分離的人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分，其包含：a)至少一個獨立地選自從單克隆抗體9C8IgGl，9C8IgG2,9C8N68TT83SIgGl，9C8N68TT83SIgG2,9C8E31GN68TT83SIgGl，9C8E31GN68TT83SIgG2,9C8I24VN68TT83SIgGl，9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl中選擇的抗體的重鏈的重鏈CDR1、CDR2和/或CDR3;或b)至少一個獨立地選自從單克隆抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2,9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl中選擇的抗體的輕鏈的輕鏈CDR1、CDR2和/或CDR3;或c)至少一個獨立地選自從單克隆抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2、9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl中選擇的抗體的重鏈的重鏈CDR1、CDR2和/或CDR3以及至少一個獨立地選自從單克隆抗體9C8IgGl、9C8IgG2、9C8N68TT83SIgGl、9C8N68TT83SIgG2、9C8E31GN68TT83SIgGl、9C8E31GN68TT83SIgG2，9C8I24VN68TT83SIgGl、9C8I24VN68TT83SIgG2和22B5IgGl中選擇的抗體的輕鏈的輕鏈⑶Rl、⑶R2和/或⑶R3;其中所述抗體特異性結(jié)合人IL-6。12.包含重鏈的分離的人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分，所述重鏈具有這樣的氨基酸序列，其選自3￡〇10勵：3、5￡〇10勵：24、5￡〇10勵：28和5￡〇10勵：32，或與5￡〇10N0:3、SEQIDN0:24、SEQIDN0:28和SEQIDN0:32的任一個相異在于具有保守氨基酸置換，或與3￡〇10勵:3、5￡〇10勵:24、5￡〇10勵:28和5￡〇10勵:32的任一個相異在于具有與它們各自的選自SEQIDN0:46的種系序列相比較的種系氨基酸置換；其中所述抗體特異性結(jié)合人IL-6。13.包含輕鏈的分離的人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分，所述輕鏈具有這樣的氨基酸序列，其選自SEQIDN0:14、SEQIDN0:26和SEQIDN0:43,或與SEQIDN0:14、SEQIDNO:26和SEQIDNO:43的任一個相異在于具有保守氨基酸置換，或與SEQIDNO:14、SEQIDNO:26和SEQIDNO:43的任一個相異在于具有與選自SEQIDNO:47的相應(yīng)種系序列相比較的種系氨基酸置換；其中所述抗體特異性結(jié)合人IL-6。14.分離的人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分，其包含選自下列的輕鏈和重鏈：a)具有SEQIDNO:3的氨基酸序列的重鏈和具有SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈；b)具有SEQIDNO:24的氨基酸序列的重鏈和具有SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈；c)具有SEQIDNO:28的氨基酸序列的重鏈和具有SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈；和(1)具有3￡〇10勵:31的氨基酸序列的重鏈和具有3￡〇10勵:14的氨基酸序列的輕鏈。15.權(quán)利要求14的分離的人單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分，其中重鏈氨基酸序列是SEQIDN0:28并且輕鏈氨基酸序列是SEQIDN0:26。16.權(quán)利要求1、2、3、4和11的任一項的分離的單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分，其還包含選自9C8、9C8N68TT83S、9C8E31GN68TT83S、9C8I24VN68TT83S和22B5的抗體的一個或多個VHFR1、FR2、FR3或FR4和/或'FR1、FR2、FR3或FR4氨基酸序列。17.包含權(quán)利要求1至16的任一項的抗體或抗原結(jié)合部分以及藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物。18.分離的細胞系，其產(chǎn)生權(quán)利要求1至16的任一項的抗體或抗原結(jié)合部分或所述抗體或所述抗原結(jié)合部分的重鏈或輕鏈。19.分離的核酸分子，其包含編碼權(quán)利要求1至16的任一項的抗體的核苷酸序列。20.包含權(quán)利要求19的核酸分子的載體，其中載體任選地包含與所述核酸分子有效連接的表達控制序列。21.包含權(quán)利要求20的載體或權(quán)利要求19的核酸分子的宿主細胞。22.用于治療、預(yù)防或緩解有此需要的受試者中IL-6介導(dǎo)的病癥的癥狀的方法，其包括給所述受試者施用權(quán)利要求1至16的任一項的抗體或抗原結(jié)合部分或權(quán)利要求17的藥物組合物。23.權(quán)利要求22的方法，其中所述受試者患有一種或多種選自下列的狀況或病癥：炎性病癥、變應(yīng)性病癥、自身免疫病癥、移植排斥病癥、動脈粥樣硬化、骨質(zhì)疏松癥、神經(jīng)性疼痛、2型糖尿病、慢性阻塞性肺疾病、多發(fā)性硬化、膿毒癥、癌癥和纖維化狀況。24.權(quán)利要求23的方法，其中所述炎性病癥選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，青少年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、強直性脊柱炎、銀屑病、卡斯?fàn)柭?、克羅恩病和成人斯蒂爾病。25.權(quán)利要求23的方法，其中所述纖維化狀況選自肝纖維化、腎纖維化和肺纖維化。26.權(quán)利要求23的方法，其中所述癌癥選自多發(fā)性骨髓瘤、腎細胞癌和卡斯?fàn)柭　！疚臋n編號】A61P37/06GK104387471SQ201410698311【公開日】2015年3月4日申請日期:2009年6月10日優(yōu)先權(quán)日:2008年6月18日【發(fā)明者】A·拉吉帕爾,M·德瓦拉賈亞,K·托伊,揚嵐,黃海春,J·Z·張,P·布拉姆斯,B·德沃克斯,D·B·帕斯莫爾申請人:百時美施貴寶公司,輝瑞大藥廠