一種維酶素的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種維酶素的制備方法,包括:(1)豆渣與水按重量比1:5~20加水打漿,然后過膠體磨研磨;(2)繼續(xù)加入葡萄糖,加入量為10-30g/L,調節(jié)pH至6.5~7,分裝滅菌;(3)冷卻后按照10%接種量接種阿氏假囊酵母種子液,28℃、180r/min搖瓶發(fā)酵;(4)發(fā)酵72h后開始進行低頻超聲刺激,超聲頻率為18~30kHZ,每4~12h刺激一次,每次30min,刺激30s,間隔30s;(5)烘干,粉碎,即得;該方法可以顯著提高維酶素的產(chǎn)率和發(fā)酵效率,維酶素中主要成分核黃素產(chǎn)量提高近2倍,發(fā)酵周期縮短36h。
【專利說明】一種維酶素的制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種藥物制備方法,尤其是一種維酶素的制備方法。
【背景技術】
[0002]維酶素是一種治療萎縮性胃炎、食道上皮增生的藥物,因其療效較好且無毒副作用而被廣泛應用。其主要成分為核黃素及核黃素的衍生物。其中維生素12種,以B2和VE含最多,氨基酸18種,微量元素23種,其他尚包括糖類、粗纖維等。
[0003]現(xiàn)有維酶素的生產(chǎn)是多以黃豆或豆渣為原料采用固態(tài)發(fā)酵方法進行生產(chǎn),固態(tài)發(fā)酵效率低,周期長。
【發(fā)明內容】
[0004]本發(fā)明所要解決的技術問題在于提供一種維酶素的制備方法。
[0005]為解決上述技術問題,本發(fā)明的技術方案是:
[0006]一種維酶素的制備方法,具體步驟如下:
[0007](I)豆渣與水按重量比1:5?20加水打漿,然后過膠體磨研磨;
[0008](2)繼續(xù)加入葡萄糖,加入量為10_30g/L,調節(jié)pH至6.5?7,分裝滅菌;
[0009](3)冷卻后按照10%接種量接種阿氏假囊酵母種子液,28°C、180r/min搖瓶發(fā)酵;
[0010](4)發(fā)酵72h后開始進行低頻超聲刺激,超聲頻率為18?30kHZ,每4?12h刺激一次,每次30min,刺激30s,間隔30s ;
[0011](5)烘干,粉碎,即得。
[0012]優(yōu)選的,上述維酶素的制備方法,所述步驟(I)中豆渣與水的重量比為1:10。
[0013]優(yōu)選的,上述維酶素的制備方法,所述步驟(2)中葡萄糖加入量為25g/L。
[0014]優(yōu)選的,上述維酶素的制備方法,所述步驟(2)中pH 6.5。
[0015]優(yōu)選的,上述維酶素的制備方法,所述步驟(4)中超聲頻率為25kHZ,每6h刺激一次。
[0016]本發(fā)明的有益效果是:
[0017]上述維酶素的制備方法,可以顯著提高維酶素的產(chǎn)率和發(fā)酵效率,維酶素中主要成分核黃素產(chǎn)量顯著提高,發(fā)酵周期縮短36h。
【具體實施方式】
[0018]下面結合具體實施例對本發(fā)明所述技術方案作進一步的說明。
[0019]實施例1
[0020]一種維酶素的制備方法,具體步驟如下:
[0021](I)豆渣與水按重量比1:10加水打漿,然后過膠體磨研磨;
[0022](2)繼續(xù)加入葡萄糖,加入量為25g/L,調節(jié)pH至6.5,分裝滅菌;
[0023](3)冷卻后按照10%接種量接種阿氏假囊酵母種子液,28°C、180r/min搖瓶發(fā)酵;
[0024](4)發(fā)酵72h后開始進行低頻超聲刺激,超聲頻率為25kHZ,每6h刺激一次,每次30min,刺激 30s,間隔 30s ;
[0025](5)烘干,粉碎,即得,經(jīng)檢測,核黃素產(chǎn)量為0.421mg/L。
[0026]實施例2
[0027]一種維酶素的制備方法,具體步驟如下:
[0028](I)豆渣與水按重量比1:5加水打漿,然后過膠體磨研磨;
[0029](2)繼續(xù)加入葡萄糖,加入量為10g/L,調節(jié)pH至7,分裝滅菌;
[0030](3)冷卻后按照10%接種量接種阿氏假囊酵母種子液,28°C、180r/min搖瓶發(fā)酵;
[0031](4)發(fā)酵72h后開始進行低頻超聲刺激,超聲頻率為30kHZ,每12h刺激一次,每次30min,刺激 30s,間隔 30s ;
[0032](5)烘干,粉碎,即得,經(jīng)檢測,核黃素產(chǎn)量為0.410mg/L。
[0033]實施例3
[0034]一種維酶素的制備方法,具體步驟如下:
[0035](I)豆渣與水按重量比1:20加水打漿,然后過膠體磨研磨;
[0036](2)繼續(xù)加入葡萄糖,加入量為30g/L,調節(jié)pH至6.5,分裝滅菌;
[0037](3)冷卻后按照10%接種量接種阿氏假囊酵母種子液,28°C、180r/min搖瓶發(fā)酵;
[0038](4)發(fā)酵72h后開始進行低頻超聲刺激,超聲頻率為18kHZ,每4h刺激一次,每次30min,刺激 30s,間隔 30s ;
[0039](5)烘干,粉碎,即得,經(jīng)檢測,核黃素產(chǎn)量為0.486mg/L。
[0040]實施例4
[0041]一種維酶素的制備方法,具體步驟如下:
[0042](I)豆渣與水按重量比1:15加水打漿,然后過膠體磨研磨;
[0043](2)繼續(xù)加入葡萄糖,加入量為20g/L,調節(jié)pH至6.5,分裝滅菌;
[0044](3)冷卻后按照10%接種量接種阿氏假囊酵母種子液,28°C、180r/min搖瓶發(fā)酵;
[0045](4)發(fā)酵72h后開始進行低頻超聲刺激,超聲頻率為20kHZ,每8h刺激一次,每次30min,刺激 30s,間隔 30s ;
[0046](5)烘干,粉碎,即得,經(jīng)檢測,核黃素產(chǎn)量為0.453mg/L。
[0047]鑒別試驗
[0048]取實施例1-4所得產(chǎn)物,鑒別方法及結果如下:
[0049](I)取含量測定項下溶液,在透射光下檢視顯淡黃色,并有強烈的黃綠色熒光。將溶液分為3份:于第一份中加稀鹽酸溶液,熒光即消失;于第二份中加入氫氧化鈉試液適量,熒光亦消失;于第三份中加連二亞硫酸鈉結晶少許,搖勻后,黃色消退,熒光亦消失。
[0050](2)取本品細粉0.1g,加水5ml,振搖10分鐘,濾過,濾液加茚三酮2mg,置水浴中加熱,溶液顯藍紫色。
[0051]上述參照實施例對該一種維酶素的制備方法進行的詳細描述,是說明性的而不是限定性的,可按照所限定范圍列舉出若干個實施例,因此在不脫離本發(fā)明總體構思下的變化和修改,應屬本發(fā)明的保護范圍之內。
【權利要求】
1.一種維酶素的制備方法,其特征在于:具體步驟如下: (1)豆渣與水按重量比1:5?20加水打漿,然后過膠體磨研磨; (2)繼續(xù)加入葡萄糖,加入量為10-30g/L,調節(jié)pH至6.5?7,分裝滅菌; (3)冷卻后按照10%接種量接種阿氏假囊酵母種子液,28°C、180r/min搖瓶發(fā)酵; (4)發(fā)酵72h后開始進行低頻超聲刺激,超聲頻率為18?30kHZ,每4?12h刺激一次,每次30min,刺激30s,間隔30s ; (5)烘干,粉碎,即得。
2.根據(jù)權利要求1所述的維酶素的制備方法,其特征在于:所述步驟(I)中豆渣與水的重量比為1:10。
3.根據(jù)權利要求1所述的維酶素的制備方法,其特征在于:所述步驟(2)中葡萄糖加入量為25g/L。
4.根據(jù)權利要求1所述的維酶素的制備方法,其特征在于:所述步驟(2)中pH6.5。
5.根據(jù)權利要求1所述的維酶素的制備方法,其特征在于:所述步驟(4)中超聲頻率為25kHZ,每6h刺激一次。
【文檔編號】A61K36/48GK104224896SQ201410494459
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年9月24日 優(yōu)先權日:2014年9月24日
【發(fā)明者】周甄鴻, 高永清, 劉晨 申請人:中恩(天津)醫(yī)藥科技有限公司