一種獸用復方硫酸小檗堿注射劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種獸用復方硫酸小檗注射劑的組方及其制備工藝，屬獸藥技術。由主藥、延效劑、助溶劑、抗氧化劑、水組成，能制得高濃度的注射劑。該注射劑工藝先進、穩(wěn)定性好、長效、廣譜高效、對注射部位刺激性小，使用方便，療效顯著優(yōu)于硫酸小檗堿注射劑及恩諾沙星注射劑單方制劑。原料為硫酸小檗堿0.5-5.0％、恩諾沙星2.5-20.0％；延效劑為聚乙二醇、聚乙烯醇、聚維酮、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、透明質(zhì)酸、黃原膠、明膠、殼聚糖、海藻酸鹽等一種或其混合物，其總用量為1-10%；助溶劑為硫酸、鹽酸、乳酸、檸檬酸、醋酸等一種或多種混合物，其總量為1-10%；抗氧化劑為亞硫酸氫鈉、無水亞硫酸鈉、甲醛合次硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫尿、L-半光胺鹽酸鹽、維生素C、乙二胺等的一種或其混合物，其總量為0.1-0.5％。
【專利說明】一種獸用復方硫酸小檗堿注射劑及其制備方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種獸用復方硫酸小檗堿注射劑及其制備方法。

【背景技術】
[0002] 硫酸小檗堿為中藥提純精制抗菌藥物，黃色針狀結(jié)晶，無臭，味極苦，其對多種革 蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均有抑制作用，對溶血性鏈球菌、痢疾桿菌、沙門氏菌、傷寒桿 菌、巴氏桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、弗氏、志賀氏痢疾桿菌等均有抗菌作用，并有增 強白血球吞噬作用，對結(jié)核桿菌、鼠疫菌也有不同程度的抑制作用，還具有退熱作用及抗心 率失常作用。硫酸小檗堿主用于細菌病毒引起的腸道感染，各種急慢性胃腸炎、流行性腹 瀉、久瀉不止、惡性腹瀉、梭菌性腸炎、季節(jié)性拉稀，各種化膿性感染癥等。硫酸小檗堿中的 硫酸根卻對人體有害，小鼠腹腔注射硫酸小檗堿的半數(shù)致死量為24. 3 mg/kg，所以硫酸小 檗堿只能一般用來做獸藥，其功能主治具一定的局限性。硫酸小檗堿一般不單用，本發(fā)明將 其與恩諾沙星配合制成長效注射劑，取得了較好的臨床效果。
[0003] 恩諾沙星為合成的新型第三代喹諾酮類抗菌藥物，又名乙基環(huán)丙沙星，為畜禽和 水產(chǎn)專用喹諾酮類抗菌藥物。能與細菌DNA回旋酶亞基A結(jié)合，阻止了細菌DNA的復制，而 呈現(xiàn)抗菌作用。具有廣譜抗菌活性、具有很強的滲透性，本品對革蘭氏陰性菌有很強的殺滅 作用，對革蘭氏陽性菌也有良好的抗菌作用。對由耐藥性致病菌引起的嚴重感染有效，與其 它抗菌素無交叉耐藥性。本品為廣譜殺菌藥，對支原體有特效。對大腸桿菌、克雷白桿菌、 沙門氏菌、變形桿菌、綠膿桿菌、嗜血桿菌、多殺性巴氏桿菌、溶血性巴氏桿菌、金葡菌、鏈球 菌等都有殺菌效用。恩諾沙星在動物體內(nèi)之半衰期長，有良好之組織分布性，屬于廣效性抑 菌劑。
[0004] 本發(fā)明研制一種復方硫酸小檗堿注射劑，其克服了原硫酸小檗堿注射液的局限 性，抗菌譜增寬，防治效果優(yōu)于單方制劑，能很好地防治各種敏感菌、支原體、衣原體引起的 呼吸道及胃腸道感染，同時制劑具有長效性，按治療量一次給藥，藥效可維持48小時以上。 資料查新也表明，該制劑目前還沒有研究報道，也沒有產(chǎn)品面市，因此該制劑的研究發(fā)明具 有發(fā)明專利的基本屬性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種獸用復方硫酸小檗堿注射劑及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的，其特征是每IOOOml的獸用復方硫酸小檗堿注射劑中含 硫酸小檗堿5-50g、恩諾沙星25-200g、一種或混合助溶劑10-100g、一種或混合延效劑 10-100g、一種或混合抗氧化劑l-5g。
[0007] 上述延效劑可以是聚乙二醇、聚乙烯醇、聚維酮、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羧 甲基纖維素、透明質(zhì)酸、黃原膠、明膠、殼聚糖和海藻酸鹽等一種或其混合物。
[0008] 上述助溶劑可以是硫酸、鹽酸、乳酸、檸檬酸、醋酸等一種或多種混合物。
[0009] 上述抗氧化劑可以是亞硫酸氫鈉、無水亞硫酸鈉、甲醛合次硫酸氫鈉、焦亞硫酸 鈉、硫尿、L-半光胺鹽酸鹽、維生素 C、乙二胺等的一種或其混合物。
[0010] 上述的獸用復方硫酸小檗堿注射劑的制備方法是按以下步驟進行：取適量水，力口 熱至70-90°C，加入適量的助溶劑，使混勻或溶解，依次加入處方量的恩諾沙星及硫酸小檗 堿，使溶解，后加入用水預溶好的抗氧劑，再加入用水預溶好的延效劑，50_80°C保溫1-2小 時，調(diào)PH值至2. 5-5. 5,加水至全量；中檢硫酸小檗堿及恩諾沙星相對含量應符合規(guī)定要 求，否則用硫酸小檗堿、恩諾沙星或水進行調(diào)節(jié)；濾過，灌封；KKTC、滅菌30分鐘即得。 [0011] 上述的獸用復方氟苯尼考注射液，其適用對象是：各種家畜、家禽、其它經(jīng)濟動物 及寵物等。其用藥途徑可以是：肌肉注射、皮下注射、靜脈滴注、口服或其它給藥途徑。其性 狀可以是：黃色至棕褐色澄明稍粘稠液體。其用途可以是：防治牛傳染性胸膜肺炎、犢牛腹 瀉；羊肺疫、羔羊痢疾；豬傳染性胸膜肺炎、肺疫、喘氣病、仔豬黃白痢、斷奶后腹瀉；家禽慢 呼、雛禽白痢等。
[0012] 本發(fā)明的優(yōu)點是：（1)制劑抗菌譜廣、抗菌效力強、標本兼治：制劑為二藥聯(lián)合的 中西復方制劑，不僅抗菌譜更廣，且呈現(xiàn)協(xié)同抗菌作用，標本兼治。通過體外藥敏試驗及臨 床藥效試驗表明，該制劑的抗菌效果顯著優(yōu)于單方的硫酸小檗堿注射劑及恩諾沙星注射 齊U，抗菌效果提高2-4倍，不僅可以用于防治由大腸桿菌、沙門氏菌等引起的胃腸道疾病， 而且可防治肺炎球菌、巴氏桿菌、支原體、衣原體等引起的呼吸道感染，制劑使用劑量小。 (2)制劑質(zhì)量穩(wěn)定：制劑原料與延效劑反應充分，結(jié)合率高，制劑不易受光、熱的影響而變 質(zhì)，室溫條件下也不會結(jié)晶析出。試驗表明，在獸藥通常二年的保質(zhì)期內(nèi)，產(chǎn)品的外觀及有 效成份仍在規(guī)定的范圍內(nèi)，好于市場同類產(chǎn)品。（3)制劑為長效制劑：制劑在體內(nèi)半衰期長， 一次治療量給藥后的作用時間可以維持48小時以上，用藥次數(shù)少。制劑主藥在特殊條件下 與延效劑進行鍵合反應，藥物吸收入血后會在體內(nèi)緩慢解除鍵合狀態(tài)而均勻釋放，節(jié)省了 獸醫(yī)大量的勞動成本。（4)制劑可工業(yè)化生產(chǎn)：生產(chǎn)的工藝條件可控，適合于工業(yè)化生產(chǎn)， 在生產(chǎn)過程中除需精確稱量取處方量的各種原輔料外，只需對鍵合反應溫度和反應時間進 行控制，沒有其它特殊的藝要求，生產(chǎn)技術容易掌控。

【具體實施方式】
[0013] 實施例1 處方：硫酸小檗堿5g、恩諾沙星25 g、聚乙二醇（PEG400)10g、硫酸5ml (約)、亞硫酸氫 鈉2g、水加至1000ml。
[0014] 工藝步驟：取適量水，加熱至70-90°C，加入適量的硫酸，使混勻，依次加入處方量 的恩諾沙星及硫酸小檗堿，使溶解，后加入用水預溶好的亞硫酸氫鈉，再加入用水預溶好的 聚乙二醇（PEG400)，50-80°C保溫1-2小時鍵合，余量硫酸調(diào)PH值至2. 5-5. 5,加水至全量； 中檢硫酸小檗堿及恩諾沙星相對含量應符合規(guī)定要求，否則用硫酸小檗堿、恩諾沙星或水 進行調(diào)節(jié)；濾過，灌封；I〇〇°C、滅菌30分鐘即得。
[0015] 實施例2 處方：硫酸小檗堿5g、恩諾沙星25 g、黃原膠10g、明膠IOg硫酸3ml、醋酸3ml (約）、 亞硫酸氫鈉2g、L-半胱氨酸鹽酸鹽lg，水加至1000ml。
[0016] 工藝步驟：取適量水，加熱至70-90°C，加入處方量的硫酸，使混勻，依次加入處 方量的恩諾沙星及硫酸小檗堿，使溶解，后加入用水預溶好的亞硫酸氫鈉和L-半胱氨酸 鹽酸鹽，再加入用水預溶好的黃原膠和明膠，50-80°C保溫1-2小時鍵合，醋酸調(diào)PH值至 2. 5-5. 5,加水至全量；中檢硫酸小檗堿及恩諾沙星相對含量應符合規(guī)定要求，否則用硫酸 小檗堿、恩諾沙星或水進行調(diào)節(jié)；濾過，灌封；KKTC、滅菌30分鐘即得。
[0017] 實施例3 處方：硫酸小檗堿l〇g、恩諾沙星50 g、聚乙烯醇（分子量為110,000) 25g、鹽酸15ml (約)、無水亞硫酸鈉2g、水加至1000ml。
[0018] 工藝步聚：取適量水，加熱至70-90°C，加入適量的鹽酸，使混勻，依次加入處方量 的恩諾沙星及硫酸小檗堿，使溶解，后加入用水預溶好的無水亞硫酸鈉，再加入用水預溶好 的聚乙烯醇，50-80°C保溫1-2小時，余量鹽酸調(diào)PH值至2. 5-5. 5,加水至全量；中檢硫酸小 檗堿及恩諾沙星相對含量應符合規(guī)定要求，否則用硫酸小檗堿、恩諾沙星或水進行調(diào)節(jié)；濾 過，灌封；KKTC、滅菌30分鐘即得。
[0019] 實施例4 處方：硫酸小檗堿l〇g、恩諾沙星50 g、明膠20g、殼聚糖15g、鹽酸15ml、醋酸15ml (約)、無水亞硫酸鈉 lg、乙二胺2g、水加至1000ml。
[0020] 工藝步聚：取適量水，加熱至70-90°C，加入處方量的鹽酸，使混勻，依次加入處方 量的恩諾沙星及硫酸小檗堿，使溶解，后加入用水預溶好的無水亞硫酸鈉和乙二胺，再加入 用水預溶好的明膠和殼聚糖，50-80°C保溫1-2小時，醋酸調(diào)PH值至2. 5-5. 5,加水至全量； 中檢硫酸小檗堿及恩諾沙星相對含量應符合規(guī)定要求，否則用硫酸小檗堿、恩諾沙星或水 進行調(diào)節(jié)；濾過，灌封；KKTC、滅菌30分鐘即得。
[0021] 實施例5 處方：硫酸小檗堿20g、恩諾沙星100 g、聚維酮(分子量400) 30g、羥乙基纖維素20g、 乳酸45ml (約)、甲醒合次亞硫酸氫鈉4g、水加至1000ml。
[0022] 工藝步聚：取適量水，加熱至70_90°C，加入適量的乳酸，使混勻，依次加入處方量 的恩諾沙星及硫酸小檗堿，使溶解，后加入用水預溶好的甲醛合次亞硫酸氫鈉，再依次加入 用水預溶好的聚維酮和羥乙基纖維素，50-80°C保溫1-2小時，余量乳酸調(diào)PH值至2. 5-5. 5， 加水至全量；中檢硫酸小檗堿及恩諾沙星相對含量應符合規(guī)定要求，否則用硫酸小檗堿、恩 諾沙星或水進行調(diào)節(jié)；濾過，灌封；KKTC、滅菌30分鐘即得。
[0023] 實施例6 處方：硫酸小檗堿20g、恩諾沙星100 g、海藻酸鹽25g、輕乙基纖維素25g、乳酸45ml (約)、甲醛合次亞硫酸氫鈉2g、焦亞硫酸鈉 lg、水加至1000ml。
[0024] 工藝步聚：取適量水，加熱至70_90°C，加入適量的乳酸，使混勻，依次加入處方量 的恩諾沙星及硫酸小檗堿，使溶解，后加入用水預溶好的甲醛合次亞硫酸氫鈉和焦亞硫酸 鈉，再依次加入用水預溶好的海藻酸鹽和羥乙基纖維素，50-80°C保溫1-2小時，余量乳酸 調(diào)PH值至2. 5-5. 5,加水至全量；中檢硫酸小檗堿及恩諾沙星相對含量應符合規(guī)定要求，否 則用硫酸小檗堿、恩諾沙星或水進行調(diào)節(jié)；濾過，灌封；KKTC、滅菌30分鐘即得。
[0025] 實施例7 處方：硫酸小檗堿25g、恩諾沙星100 g、羥丙基纖維素20g、羧甲基纖維素20g、檸檬酸 45g、焦亞硫酸鈉2g、水加至1000ml。
[0026] 工藝步聚：取適量水，加熱至70-90°C，加入適量的檸檬酸，使溶解，依次加入處 方量的恩諾沙星及硫酸小檗堿，使溶解，后加入用水預溶好的焦亞硫酸鈉，再依次加入用 水預溶好的羥丙基纖維素和羧甲基纖維素，50-80°C保溫1-2小時，余量檸檬酸調(diào)PH值至 2. 5-5. 5,加水至全量；中檢硫酸小檗堿及恩諾沙星相對含量應符合規(guī)定要求，否則用硫酸 小檗堿、恩諾沙星或水進行調(diào)節(jié)；濾過，灌封；KKTC、滅菌30分鐘即得。
[0027] 實施例8 處方：硫酸小檗堿25g、恩諾沙星100 g、羥丙基纖維素20g、明膠15g、檸檬酸35g、醋 酸15ml (約）、焦亞硫酸鈉2g、無水亞硫酸鈉 lg、水加至1000ml。
[0028] 工藝步聚：取適量水，加熱至70_90°C，加入處方量的檸檬酸，使溶解，依次加入 處方量的恩諾沙星及硫酸小檗堿，使溶解，后加入用水預溶好的焦亞硫酸鈉和無水亞硫酸 鈉，再依次加入用水預溶好的羥丙基纖維素和明膠，50-80°C保溫1-2小時，醋酸調(diào)PH值至 2. 5-5. 5,加水至全量；中檢硫酸小檗堿及恩諾沙星相對含量應符合規(guī)定要求，否則用硫酸 小檗堿、恩諾沙星或水進行調(diào)節(jié)；濾過，灌封；KKTC、滅菌30分鐘即得。
[0029] 實施例9 處方：硫酸小檗堿50g、恩諾沙星200 g、羥丙基纖維素40g、透明質(zhì)酸30g、醋酸75g、乳 酸25ml (約)、硫脲2g、維生素 C lg、水加至1000ml。
[0030] 工藝步聚：取適量水，加熱至70-90°C，加入處方量的醋酸，使混勻，依次加入處方 量的恩諾沙星及硫酸小檗堿，使溶解，后加入用水預溶好的硫脲和維生素 C，再依次加入用 水預溶好的羥丙基纖維素和透明質(zhì)酸，50-80°C保溫1-2小時，乳酸調(diào)PH值至2. 5-5. 5,加水 至全量；中檢硫酸小檗堿及恩諾沙星相對含量應符合規(guī)定要求，否則用硫酸小檗堿、恩諾沙 星或水進行調(diào)節(jié)；濾過，灌封；KKTC、滅菌30分鐘即得。
[0031] 實施例10 處方：硫酸小檗堿50g、恩諾沙星200 g、輕乙基纖維素50g、黃原膠50g、醋酸65ml、 檸檬酸35g(約）、亞硫酸氫鈉2g、L-半胱氨酸鹽酸鹽lg、水加至1000ml。
[0032] 工藝步聚：取適量水，加熱至70_90°C，加入處方量的乳酸，使混勻，依次加入處方 量的恩諾沙星及硫酸小檗堿，使溶解，后加入用水預溶好的亞硫酸氫鈉和L-半胱氨酸鹽酸 鹽，再依次加入用水預溶好的羥乙基纖維素和黃原膠，50-80°C保溫1-2小時，余量乳酸調(diào) PH值至2. 5-5. 5,加水至全量；中檢硫酸小檗堿及恩諾沙星相對含量應符合規(guī)定要求，否則 用硫酸小檗堿、恩諾沙星或水進行調(diào)節(jié)；濾過，灌封；KKTC、滅菌30分鐘即得。
[0033] 臨床試驗結(jié)果 1、 急性毒性試驗：取健康成年小白鼠40只，精確稱定體重，平均體重為19. 8 g，按體重 大小均勻分成5組，每組10只，組別之間平均體重沒有顯著差異（P>0. 05)。分別按每公斤 體重0. 01ml、0. lml、0. 5ml、2ml 口服本品（產(chǎn)品規(guī)格：含硫酸小檗堿2. 5%、恩諾沙星10%，下 同)，注射后觀察7天，結(jié)果無一例出現(xiàn)死亡，也未發(fā)現(xiàn)有任何的中毒反應，其最高耐受量超 過2ml/kg體重。結(jié)果表明，本品無嚴重急性中毒的危險性，其使用是安全的。 2、 藥物代謝試驗：取健康試驗兔6只，精確稱定，平均體重2. 5 公斤，均按每公斤體重肌肉注射本品〇. 2ml，分別于0. 5h、lh、2h、4h、8h、16h、32h、48h、 72h、84、96h，采試驗兔耳血，分別測定試驗兔血液中硫酸小檗堿及恩諾沙星的含量，結(jié)果硫 酸小檗堿及恩諾沙星血藥高峰時間（Tmax)分別在I. 6h和2. 3h ;最大血藥濃度（Cmax)分別 為1.2即/1111，3.81^/1111，后緩慢下降，第4811分別為0.4 1^/1111、1.6 1^/1111(均在有效抑菌 濃度)，均為有效血藥濃度；生物利用度（AUC)依次為82. 3%和86. 9%，藥物消除半衰期（t1/2) 依次為17. 6h和15. 9h。結(jié)果表明，吸收快，生物利用度高，作用時間長，藥效持續(xù)時間長達 48h以上。
[0035] 3、藥物殘留試驗：取健康試驗兔12只，精確稱定，平均體重2. 7公斤，均按每公斤 體重肌肉注射本品0. 2ml，分別于3d、6d、12d、18d、28d、36d采試驗兔血及肝、腎組織，每次2 只兔子，分別測定其恩諾沙星的含量，結(jié)果恩諾沙星，結(jié)果均在第13d時檢測不出恩諾沙星 (檢測限為lOppb)。結(jié)果表明，獸藥標準規(guī)定的最長停藥期可以是28天，因此本品如規(guī)定休 藥期28天是沒有恩諾沙星殘留，不會給動物產(chǎn)品帶來安全風險。 4、 體外抑菌對比試驗：取市售同規(guī)格的單方硫酸小檗堿注射劑及恩諾沙星注射劑作 對照；以致病株大腸桿菌、沙門氏菌和鏈球菌作為試驗菌，以二倍稀釋法將二種藥物進行稀 釋，結(jié)果本品的最小抑菌濃度（Cmin)均為單方注射劑的1/4-1/8,結(jié)果見下表。結(jié)果表明， 硫酸小檗堿與恩諾沙星配伍具增效作用，增效高達4-8倍。
[0037] 三種不同制劑對三種不菌最小抑菌濃度表 單位：ug/ml

【權利要求】
1. 一種獸用復方硫酸小檗堿注射劑及其制備方法，其特征在于：每1000ml的獸用復方 硫酸小檗堿注射劑中含硫酸小檗堿5-50g、恩諾沙星25-200g、一種或混合助溶劑10-100g、 一種或混合延效劑l〇-l〇〇g、一種或混合抗氧化劑l-5g。
2. 根據(jù)權利要求1所述的一種獸用復方硫酸小檗堿注射劑及其制備方法，其特征在 于：上述延效劑可以是聚乙二醇、聚乙烯醇、聚維酮、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基 纖維素、透明質(zhì)酸、黃原膠、明膠、殼聚糖和海藻酸鹽等一種或其混合物。
3. 根據(jù)權利要求1所述的一種獸用復方硫酸小檗堿注射劑及其制備方法，其特征在 于：所述助溶劑可以是硫酸、鹽酸、乳酸、檸檬酸、醋酸等一種或多種混合物。
4. 根據(jù)權利要求1所述的一種獸用復方硫酸小檗堿注射劑及其制備方法，其特征在 于：所述抗氧化劑可以是亞硫酸氫鈉、無水亞硫酸鈉、甲醛合次硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫 尿、L-半光胺鹽酸鹽、維生素 C、乙二胺等的一種或其混合物。
5. 根據(jù)權利要求1所述的一種獸用復方硫酸小檗堿注射劑及其制備方法，其特征在 于：所述獸用復方硫酸小檗堿注射劑的制備方法是按以下步驟進行： 取適量水，加熱至70-90°C，加入適量的助溶劑，使混勻或溶解，依次加入處方量的恩 諾沙星及硫酸小檗堿，使溶解，后加入用水預溶好的抗氧劑，再加入用水預溶好的延效劑， 50-80°C保溫1-2小時，調(diào)PH值至2. 5-5. 5,加水至全量；中檢硫酸小檗堿及恩諾沙星相對 含量應符合規(guī)定要求，否則用硫酸小檗堿、恩諾沙星或水進行調(diào)節(jié)；濾過，灌封；KKTC、滅 菌30分鐘即得。
【文檔編號】A61P11/00GK104288152SQ201410466716
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年9月15日 優(yōu)先權日:2014年9月15日
【發(fā)明者】陳金興, 李龍瑞, 王新斌, 孔晟, 郭春玉, 柳濤, 陳玉林 申請人:江西核工業(yè)瑞豐生物藥業(yè)有限公司