含有8種甘油三酯的薏苡仁油、制劑及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種從薏苡仁中提取的薏苡仁油、制劑及其在抗腫瘤或治療炎癥藥物中的應(yīng)用。具體的，該薏苡仁油中含有如下質(zhì)量百分含量的8種甘油三酯類成分：三亞油酸甘油酯4.87～6.99％、1-油酸-2,3-二亞油酸甘油酯13.00～18.69％、1-棕櫚酸-2,3-二亞油酸甘油酯5.25～7.54％、1,3-二油酸-2-亞油酸甘油酯13.23～19.02％、1-棕櫚酸-2-亞油酸-3-油酸甘油酯10.26～14.75％、1,3-二棕櫚酸-2-亞油酸甘油酯2.28～3.28％、三油酸甘油酯14.44～20.76％和1-棕櫚酸-2,3-二油酸甘油酯8.06～11.58％。
【專利說(shuō)明】含有8種甘油三酯的薏苡仁油、制劑及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥學(xué)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及一種薏苡仁油、制劑、制備方法及其在制備抗腫瘤或治療炎癥藥物中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]薏該仁是禾本科薏該屬植物薏該Coix lacryma-jobi L.var ma-yuen (Roman.)Stapf的成熟干燥種仁，為利水滲濕藥，很久以來(lái)為藥食兩用品種?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)薏苡仁具有鎮(zhèn)痛抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗?jié)儭⒔笛蜏p肥等藥理作用。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者通過(guò)TLC、HPLC-MS、GC等方法對(duì)薏苡仁的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其含有多種活性成分，主要包括薏苡仁酯、甘油三酯類、脂肪酸類、內(nèi)酰胺類、薏苡仁內(nèi)酯、糖類、留醇類、三萜類等化合物。其中，酯類是首先被發(fā)現(xiàn)的具有抗腫瘤活性的成分，也是報(bào)道最多最受關(guān)注的化學(xué)成分。雖然目前在中國(guó)臨床上以薏苡仁油為有效成分的康萊特注射劑已得到普遍應(yīng)用，但其使用的薏苡仁油成分較復(fù)雜，除含有甘油三酯成分外，還含有甘油一酯、甘油二酯以及脂肪酸酯等，這必然會(huì)使實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中的質(zhì)量控制和臨床用藥安全面臨很大的挑戰(zhàn)。
[0003]本發(fā)明以薏苡仁粉為原料，采用超臨界二氧化碳萃取、堿化、中性氧化鋁和高嶺土:活性炭=1:1的混合吸附劑純化等步驟，得到了一種薏苡仁油有效部位；通過(guò)對(duì)其活性成分的分離與鑒定，確定了其組成主要為八種甘油三酯成分；并進(jìn)一步對(duì)其進(jìn)行理化常數(shù)的檢測(cè)，確定了其最優(yōu)酸值、碘值、皂化值、折光率和相對(duì)密度等。采用本發(fā)明所述薏苡仁油用藥，成分及組成確定，保證了工業(yè)生產(chǎn)中各批次間的質(zhì)量穩(wěn)定性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種從薏苡仁中提取的薏苡仁油，其特征在于:該薏苡仁油中含有如下質(zhì)量百分含量的8種甘油三酯類成分:三亞油酸甘油酯4.87?6.99%、1_油酸-2，3-二亞油酸甘油酯13.00?18.69%、1-棕櫚酸-2，3-二亞油酸甘油酯5.25?
7.54%U, 3- 二油酸-2-亞油酸甘油酯13.23?19.02%Λ~棕櫚酸_2_亞油酸-3-油酸甘油酯10.26?14.75%U, 3-二棕櫚酸_2_亞油酸甘油酯2.28?3.28%、三油酸甘油酯14.44?20.76%和1-棕櫚酸_2，3-二油酸甘油酯8.06?11.58%。
[0005]優(yōu)選的，上述8種甘油三酯成分的質(zhì)量百分含量為:三亞油酸甘油酯
5.47-6.69%、1-油酸-2，3- 二亞油酸甘油酯14.63?17.88%、1-棕櫚酸-2，3- 二亞油酸甘油酯5.9?7.21 %、1，3- 二油酸-2-亞油酸甘油酯14.88?18.19%、1-棕櫚酸-2-亞油酸-3-油酸甘油酯11.55?14.11 %、1，3-二棕櫚酸-2-亞油酸甘油酯2.57?3.14%,三油酸甘油酯16.25?19.86%和1-棕櫚酸-2，3- 二油酸甘油酯9.07?11.08% ;
[0006]更優(yōu)選的，上述8種甘油三酯成分的質(zhì)量百分含量為:三亞油酸甘油酯5.96?
6.20 %、1-油酸-2，3- 二亞油酸甘油酯15.93?16.58 %、1-棕櫚酸-2，3- 二亞油酸甘油酯6.43?6.69 %、1，3- 二油酸-2-亞油酸甘油酯16.20?16.87 %、1-棕櫚酸_2_亞油酸-3-油酸甘油酯12.57?13.09%、1，3- 二棕櫚酸_2_亞油酸甘油酯2.79?2.91 %、三油酸甘油酯17.69?18.42%和1-棕櫚酸-2，3- 二油酸甘油酯9.87?10.27%。
[0007]上述含量均指甘油三酯化合物在薏苡仁油中的質(zhì)量百分含量，以本發(fā)明所述方法制備得到的薏苡仁油為原料，經(jīng)過(guò)制備色譜分離得到8個(gè)甘油三酯單體化合物，稱重、計(jì)算而得。也可根據(jù)本領(lǐng)域常規(guī)分析方法得出。
[0008]其中，所述薏苡仁油按脂肪油檢測(cè)理化常數(shù)為:20°C時(shí)相對(duì)密度0.917?0.920，20°C時(shí)折光率1.471?1.474，酸值〈0.2，碘值102?106，皂化值188?195 ；
[0009]本發(fā)明所述的薏苡仁油是通過(guò)如下方法獲得的:
[0010]超臨界二氧化碳萃取:取薏苡仁粉碎成10目?50目，采用超臨界CO2萃取器萃取，將薏苡仁粉裝入萃取釜，用夾套循環(huán)熱水加熱CO2預(yù)熱器、萃取釜和分離柱，使萃取溫度和分離溫度分別達(dá)到33?45°C和30?45°C，保持一級(jí)解析釜和二級(jí)解析釜出口溫度分別為20?50°C和15?35°C ;液態(tài)CO2流量按所萃取薏苡仁粉末質(zhì)量計(jì)，以2.5kg?7.5kg/h -kg的流量經(jīng)高壓泵加壓進(jìn)入CO2預(yù)熱器，成為超臨界狀態(tài)下的流體，進(jìn)入萃取釜，保持壓力19?23Mpa，萃取薏苡仁油；溶有薏苡仁油的CO2流體進(jìn)入分離柱，控制分離柱壓力7?lOMpa，分離得到薏苡仁油；從分離柱出來(lái)的CO2氣體先后進(jìn)入一級(jí)、二級(jí)解析釜，分別保持壓力為5?7Mpa和4?6Mpa，棄去解析得到的水分等雜質(zhì)，CO2氣體經(jīng)冷凝器變成液態(tài)CO2,循環(huán)使用，連續(xù)萃取2?3h，得到薏苡仁油；
[0011]精制:取超臨界CO2萃取得到的薏苡仁油，加入油重量51%的60°C?90°C石油醚，再根據(jù)酸值，加入油重36 %?56 %的2 % NaOH溶液，攪拌1min后，靜置18?24h后，除去下層皂腳，取上層用純化水進(jìn)行水洗，靜置18?24h后，除去下層廢水，取上層進(jìn)行第二次水洗，靜置40?50h后，除去下層廢水；取上層加入油重70%?90%丙酮破乳，靜置2?4h后，除去下層廢丙酮；取上層油溶液，加入油重3?8%的經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌30min后，過(guò)濾；濾液加熱后，加入油重2?6%經(jīng)活化的高嶺土:活性炭=1:1的混合吸附劑，攪拌，在40?50°C下保溫30min，過(guò)濾；濾液減壓回收溶劑后，再加純化水進(jìn)行水洗，靜置I?2h后，除去下層廢水；上層油在充氮條件下，加熱減壓干燥，再加油重8?12%經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌，置冷處?kù)o置，過(guò)濾，過(guò)濾后的油再經(jīng)160?170°C減壓干熱滅菌I?2h，冷卻后經(jīng)0.2 μ m微孔濾膜過(guò)濾，分裝于500ml玻璃輸液瓶中，密封，即得；
[0012]優(yōu)選地，所述精制步驟為:
[0013]取超臨界CO2萃取得到的薏苡仁油，加入油重量51%的60°C?90°C石油醚，再根據(jù)酸值，加入油重36%?56%的2% NaOH溶液，攪拌1min后，靜置20h后，除去下層皂腳，取上層用純化水進(jìn)行水洗，靜置22h后，除去下層廢水，取上層進(jìn)行第二次水洗，靜置46h后，除去下層廢水；取上層加入油重70%?90%丙酮破乳，靜置3h后，除去下層廢丙酮；取上層油溶液，加入油重5%的經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌30min后，過(guò)濾；濾液加熱后，加入油重4%經(jīng)活化的高嶺土:活性炭=1:1的混合吸附劑，攪拌，在40?50°C下保溫30min,過(guò)濾；濾液減壓回收溶劑后，再加純化水進(jìn)行水洗，靜置Ih后，除去下層廢水；上層油在充氮條件下，加熱減壓干燥，再加油重10 %經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌，置冷處?kù)o置，過(guò)濾，過(guò)濾后的油再經(jīng)160?170°C減壓干熱滅菌2h，冷卻后經(jīng)0.2 μ m微孔濾膜過(guò)濾，分裝于500ml玻璃輸液瓶中，密封，即得。
[0014]本發(fā)明所述薏苡仁油為淡黃色的澄明液體，氣微、味淡；其在石油醚或三氯甲烷中極易溶解，在丙酮中易溶、在乙醇中微溶，在水中不溶。
[0015]按照本發(fā)明所述方法制備得到的薏苡仁油，依照《中國(guó)藥典》(2010年版)一部附錄方法進(jìn)行檢測(cè)，其理化常數(shù)均為:201:時(shí)相對(duì)密度0.917?0.920，20°C時(shí)折光率
1.471?1.474，酸值〈0.2，碘值102?106，皂化值188?195。其中，藥典所述酸值系指中和脂肪、脂肪油或其他類似物質(zhì)I克中含有的游離脂肪酸所需氫氧化鉀的重量(毫克數(shù))。在油脂類產(chǎn)品的質(zhì)量研究中，酸值是一個(gè)重要評(píng)價(jià)指標(biāo)，就本申請(qǐng)所述薏苡仁油而言，其酸值均小于0.2，即通過(guò)對(duì)制備工藝中超臨界萃取參數(shù)和堿化等純化工藝的優(yōu)化，制備得到的薏苡仁油具有如下優(yōu)點(diǎn):一方面作為雜質(zhì)的游離脂肪酸含量極低，成品質(zhì)量較好；另一方面富集了大量甘油三酯類活性成分,純度較高,并且其中甘油三酯類成分種類明確、含量穩(wěn)定。除此之外，其它理化常數(shù)，如皂化值、碘值等，多批次樣品測(cè)得該值變化范圍均較小，進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明所述薏苡仁油的質(zhì)量穩(wěn)定、臨床用藥更安全。本發(fā)明所述制備方法收率高、成本低、產(chǎn)品穩(wěn)定，適于工業(yè)化生產(chǎn)，安全可控。
[0016]本發(fā)明的又一目的在于提供一種含有薏苡仁油的藥物制劑，具體包括本發(fā)明所述薏苡仁油及一種或幾種藥學(xué)上可接受的載體。
[0017]其中，所述藥學(xué)上可接受的載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、乳化齊?、粘合劑、潤(rùn)滑劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑或抗氧化劑，必要時(shí)還可以加入香味劑、甜味劑、防腐劑或著色劑。
[0018]所述藥學(xué)上可接受的載體可以選自:甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、大豆磷脂、維生素C、維生素E、EDTA 二鈉、EDTA鈣鈉，一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、羥苯乙酯溶液、苯甲酸、山梨酸鉀、醋酸氯己定、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、吐溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β -環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣或硬脂酸鎂。
[0019]所述藥物制劑可以是口服固體制劑、口服液體制劑或注射劑。
[0020]優(yōu)選的，
[0021]所述口服固體制劑選自膠囊劑、片劑、滴丸、顆粒劑、濃縮丸中的一種；所述口服液體制劑選自水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑，或是一種在使用前可用水或其它適宜的載體復(fù)配的干燥產(chǎn)品；所述注射劑選自納米混懸劑、脂質(zhì)體、乳劑、凍干粉針劑和水針劑中的一種。
[0022]更優(yōu)選的，
[0023]所述注射劑包括如下成分:本發(fā)明所述薏苡仁油50?350g，注射用大豆磷脂或可供注射用大豆磷脂10?40g，注射用甘油或可供注射用甘油15?50g，注射用水加至100ml0
[0024]其可通過(guò)如下方法制備:
[0025]稱取處方配制量的注射用大豆磷脂或可供注射用大豆磷脂，加適量的注射用水后，用高剪切分散乳化機(jī)分散至無(wú)塊狀及顆粒狀固體，加入按配方量稱取的注射用甘油或可供注射用甘油，并加注射用水至規(guī)定量，攪拌均勻備用；
[0026]另稱取薏苡仁油，將稱取的油酯與水相分別加熱至60?70°C后，置高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行高壓乳化，乳化時(shí)均質(zhì)機(jī)低壓為5?12MPa,高壓為25?50MPa,再循環(huán)均質(zhì)3?6遍，至2 μ m以下顆粒應(yīng)不少于95 %，5 μ m以上顆粒不得檢出，必要時(shí)用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至
4.8?8.5，優(yōu)選6.8?7.0，最優(yōu)選為6.8 ；
[0027]將制得均勻乳劑氮?dú)饧訅和ㄟ^(guò)小于等于3 μ m的微孔濾芯過(guò)濾器過(guò)濾，充氮灌裝滅菌，冷卻即得。
[0028]所述膠囊劑包括如下成分:薏苡仁油200?800g，抗氧化劑和/或乳化劑0.20?0.60g，制成 1000 粒。
[0029]其可通過(guò)如下方法制備:
[0030]膠液配制:按重量比為1:0.6?1.2:0.3?0.8:0.0001?0.01稱取適量明膠、純化水、甘油和防腐劑；依次將甘油、純化水、防腐劑(選自10%羥苯乙酯溶液、苯甲酸、山梨酸鉀和醋酸氯己定中的一種)加入化膠罐內(nèi)，加熱至70°C?90°C后，再加入明膠不斷攪拌、抽真空，直至明膠完全溶解，將膠液過(guò)濾，在56?62 °C下存放，備用；
[0031]藥液配制:將配方量的薏苡仁油、抗氧化劑和/或乳化劑(抗氧化劑為維生素E，乳化劑為吐溫80)加入配料罐內(nèi)，不斷攪拌，直至混合均勻；
[0032]壓膠囊:根據(jù)膠囊大小選擇合適的壓丸模具，在15?30°C、相對(duì)濕度小于35%條件下進(jìn)行壓丸定型后干燥，剔除大小丸，再用95%藥用乙醇洗丸后，繼續(xù)干燥至含水量小于12%,目檢剔除不合格膠囊，印字，包裝即得。
[0033]本發(fā)明通過(guò)藥效實(shí)驗(yàn)表明，所述薏苡仁油及其制劑在單獨(dú)或與順鉬、卡鉬、環(huán)磷酰胺、鹽酸吉西他濱、米托蒽醌、絲裂霉素、醋酸亮丙瑞林、多西他賽和/或紫杉醇的組合用藥時(shí)，對(duì)多種人腫瘤細(xì)胞株均有不同程度的抑制作用，可作為治療腫瘤疾病藥物。
[0034]因此，本發(fā)明的目的還在于提供一種上述薏苡仁油、藥物制劑單獨(dú)或與鉬類、烷化劑類、二氟核苷類、抗生素類、細(xì)胞毒類或激素類化學(xué)抗腫瘤藥物在制備抗腫瘤或炎癥藥物中的應(yīng)用。
[0035]其中，所述鉬類優(yōu)選為順鉬、卡鉬，烷化劑類優(yōu)選為環(huán)磷酰胺，二氟核苷類優(yōu)選為鹽酸吉西他濱，抗生素類優(yōu)選為米托蒽醌、絲裂霉素，細(xì)胞毒類優(yōu)選為多西他賽、紫杉醇，激素類優(yōu)選為醋酸亮丙瑞林；所述腫瘤是指早期、中期或晚期的肺癌、肝癌、胰腺癌、前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌、肉瘤樣癌或癌肉瘤；所述炎癥是指前列腺增生。
[0036]以下通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說(shuō)明本發(fā)明所述薏苡仁油及其制劑在抗腫瘤方面的有益效果。
[0037]—、體外MTT法測(cè)定薏苡仁油及其制劑對(duì)8種人腫瘤細(xì)胞株的抑制作用
[0038]1、實(shí)驗(yàn)材料及配制
[0039](I)細(xì)胞株=PANC-1 (人胰腺癌細(xì)胞)、SK0V3(人卵巢癌細(xì)胞)、MCF_7(人乳腺癌細(xì)胞)、Bcap-37 (人乳腺癌細(xì)胞)、SMMC-7721 (人肝癌細(xì)胞)>HepG-2 (人肝癌細(xì)胞)、A549 (人肺癌細(xì)胞)、H460 (人肺癌細(xì)胞)，上述細(xì)胞株由上海醫(yī)藥工業(yè)研究藥理評(píng)價(jià)研究中心保存，傳代維持。
[0040](2)DMEM完全培養(yǎng)基:添加10%新生牛血清(GIBCO BRL)、雙抗。
[0041]⑶0.25%胰蛋白酶溶液(Trypsin):購(gòu)自Invitrogen公司，_20°C保存。
[0042](4)磷酸緩沖液(PBS):NaC18g, KC10.2g，Na2HPO4L 15g，KH2PO40.2g，溶于 IL 雙蒸水，121°C高壓消毒20min，4°C保存。
[0043](5) MTT (AMRESC0)溶液:用 PBS 配成 5mg/ml 溶液。
[0044](6)溶解液:每10ml去離子雙蒸水含SDSlOg，異丁醇5ml，濃鹽酸0.1ml。
[0045]2、實(shí)驗(yàn)方法
[0046]樣品對(duì)上述細(xì)胞株的抑制作用通過(guò)MTT法測(cè)得。
[0047]具體步驟如下:
[0048](I)細(xì)胞培養(yǎng):①將細(xì)胞從液氮中取出，在37°C水浴中迅速解凍，細(xì)胞在無(wú)菌操作臺(tái)中移入1ml無(wú)菌離心管中加6ml細(xì)胞培養(yǎng)基，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘。棄去上清液，沉淀中加入5?6ml細(xì)胞培養(yǎng)基，滴管吹打使其懸浮后移入細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，置37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)。②次日，自培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞，棄去細(xì)胞瓶中細(xì)胞培養(yǎng)基，加入5?6ml細(xì)胞培養(yǎng)基，置37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)。③隔日，自培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞，棄去細(xì)胞瓶中細(xì)胞培養(yǎng)基，加入PBS (pH7.4) 2?3ml晃動(dòng)清洗，倒掉PBS溶液后再重復(fù)一次清洗。在培養(yǎng)瓶中加入3?5滴0.25%胰蛋白酶溶液晃動(dòng)均勻,加蓋置于37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)3分鐘左右，于顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自培養(yǎng)瓶壁上脫離，加細(xì)胞培養(yǎng)基2ml，滴管吹打使細(xì)胞完全脫離瓶壁后，分別移入2個(gè)干凈培養(yǎng)瓶中，加入細(xì)胞培養(yǎng)基5?6ml吹打均勻，置于37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)。④隔日，重復(fù)③步驟。在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中，貼壁細(xì)胞不允許生長(zhǎng)過(guò)密，懸浮細(xì)胞始終保持對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。
[0049](2)樣品及對(duì)照品制備:稱取適量薏苡仁油樣品溶解于DMSO中，得到濃度為1mg/ml 的溶液。再用 PBS 作梯度稀釋，得到濃度 10mg/ml、5000 μ g/ml、2500 μ g/ml、1250 μ g/ml、625 μ g/ml、312.5 μ g/ml 的稀釋樣品。
[0050](3)將稀釋好的樣品加入平底96孔板中，每孔10 μ 1，每點(diǎn)作兩個(gè)平行測(cè)試。將DMSO相應(yīng)作梯度稀釋后加入板中，作為對(duì)照。
[0051](4)取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，細(xì)胞經(jīng)胰酶消化并洗滌后懸浮于含10%小牛血清的培養(yǎng)基中，經(jīng)苔盼藍(lán)染色排除法計(jì)活細(xì)胞數(shù)，并調(diào)節(jié)細(xì)胞懸浮液密度至2 X 15個(gè)細(xì)胞/ml ο
[0052](5)將加入細(xì)胞的平底96孔板在37°C、5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)。
[0053](6)每孔中加入20 μ I的5mg/ml MTT溶液，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中保溫3?4小時(shí)。
[0054](7)每孔加入100 μ I溶解液，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中保溫過(guò)夜，使生成的甲臢晶體充分溶解。測(cè)定570nm光吸收值。
[0055](8)根據(jù)光吸收值計(jì)算各樣品濃度組的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率。計(jì)算公式如下:
[0056](I 一實(shí)驗(yàn)孔平均光吸收值/對(duì)照孔平均光吸收值)X 100%
[0057]3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0058]表I不同濃度樣品對(duì)8種細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制率)
[0059]

【權(quán)利要求】
1.一種薏苡仁油，其特征在于:該薏苡仁油中含有如下質(zhì)量百分含量的8種甘油三酯類成分:三亞油酸甘油酯4.87?6.99%、1-油酸-2，3-二亞油酸甘油酯13.0O?18.69%,1-棕櫚酸_2，3- 二亞油酸甘油酯5.25?7.54%、I, 3- 二油酸-2-亞油酸甘油酯13.23?19.02%、1-棕櫚酸-2-亞油酸-3-油酸甘油酯10.26?14.75%、1，3- 二棕櫚酸_2_亞油酸甘油酯2.28?3.28%、三油酸甘油酯14.44?20.76%和1-棕櫚酸-2，3- 二油酸甘油酯 8.06 ?11.58%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的薏苡仁油，其特征在于:所述薏苡仁油按脂肪油檢測(cè)理化常數(shù)為:20°C時(shí)相對(duì)密度0.917?0.920，20 °C時(shí)折光率1.471?1.474，酸值〈0.2，碘值102?106，皂化值188?195 ;所述甘油三酯成分的質(zhì)量百分含量為:三亞油酸甘油酯5.47?6.69%、1-油酸-2，3-二亞油酸甘油酯14.63?17.88%、1-棕櫚酸-2，3-二亞油酸甘油酯5.90?7.21 %、1，3-二油酸-2-亞油酸甘油酯14.88?18.19%、1-棕櫚酸-2-亞油酸-3-油酸甘油酯11.55?14.11 %、1，3-二棕櫚酸-2-亞油酸甘油酯2.57?3.14%,三油酸甘油酯16.25?19.86%和1-棕櫚酸-2，3- 二油酸甘油酯9.07?11.08% ; 優(yōu)選地,所述甘油三酯成分的質(zhì)量百分含量為:三亞油酸甘油酯5.96?6.20%、1-油酸-2，3-二亞油酸甘油酯15.93?16.58%、1_棕櫚酸-2，3-二亞油酸甘油酯6.43?6.69%, I, 3- 二油酸-2-亞油酸甘油酯16.20?16.87 %、1-棕櫚酸_2_亞油酸-3-油酸甘油酯12.57?13.09%、1，3- 二棕櫚酸_2_亞油酸甘油酯2.79?2.91 %、三油酸甘油酯17.69?18.42%和1-棕櫚酸_2，3-二油酸甘油酯9.87?10.27%。
3.—種權(quán)利要求1所述薏苡仁油的制備方法，具體包括如下步驟: 超臨界二氧化碳萃取:取薏苡仁粉碎成10目?50目，采用超臨界CO2萃取器萃取，將薏苡仁粉裝入萃取釜，用夾套循環(huán)熱水加熱CO2預(yù)熱器、萃取釜和分離柱，使萃取溫度和分離溫度分別達(dá)到33?45°C和30?45°C，保持一級(jí)解析釜和二級(jí)解析釜出口溫度分別為20?50°C和15?35°C ;液態(tài)CO2流量按所萃取薏苡仁粉末質(zhì)量計(jì)，以2.5kg?7.5kg/h.kg的流量經(jīng)高壓泵加壓進(jìn)入CO2預(yù)熱器，成為超臨界狀態(tài)下的流體，進(jìn)入萃取釜，保持壓力19?23Mpa，萃取薏苡仁油；溶有薏苡仁油的CO2流體進(jìn)入分離柱，控制分離柱壓力7?lOMpa，分離得到薏苡仁油；從分離柱出來(lái)的CO2氣體先后進(jìn)入一級(jí)、二級(jí)解析釜，分別保持壓力為5?7Mpa和4?6Mpa,棄去解析得到的水分等雜質(zhì),CO2氣體經(jīng)冷凝器變成液態(tài)CO2,循環(huán)使用，連續(xù)萃取2?3h，得到薏苡仁油； 精制:取超臨界CO2萃取得到的薏苡仁油，加入油重量51%的60°C?90°C石油醚，再根據(jù)酸值，加入油重36 %?56 %的2 % NaOH溶液，攪拌1min后，靜置18?24h后，除去下層皂腳，取上層用純化水進(jìn)行水洗，靜置18?24h后，除去下層廢水，取上層進(jìn)行第二次水洗，靜置40?50h后，除去下層廢水；取上層加入油重70%?90%丙酮破乳,靜置2?4h后，除去下層廢丙酮；取上層油溶液，加入油重3?8%的經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌30min后，過(guò)濾；濾液加熱后，加入油重2?6%經(jīng)活化的高嶺土:活性炭=1:1的混合吸附劑，攪拌，在40?50°C下保溫30min,過(guò)濾；濾液減壓回收溶劑后,再加純化水進(jìn)行水洗,靜置I?2h后，除去下層廢水；上層油在充氮條件下，加熱減壓干燥，再加油重8?12%經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌，置冷處?kù)o置，過(guò)濾，過(guò)濾后的油再經(jīng)160?170°C減壓干熱滅菌I?2h，冷卻后經(jīng)0.2 μ m微孔濾膜過(guò)濾，分裝于500ml玻璃輸液瓶中，密封，即得； 優(yōu)選地，所述精制步驟為: 取超臨界CO2萃取得到的薏苡仁油，加入油重量51%的60°C?90°C石油醚，再根據(jù)酸值，加入油重36 %?56 %的2 % NaOH溶液，攪拌1min后，靜置20h后，除去下層皂腳，取上層用純化水進(jìn)行水洗，靜置22h后，除去下層廢水，取上層進(jìn)行第二次水洗，靜置46h后，除去下層廢水；取上層加入油重70%?90%丙酮破乳，靜置3h后，除去下層廢丙酮；取上層油溶液，加入油重5%的經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌30min后，過(guò)濾；濾液加熱后，加入油重4%經(jīng)活化的高嶺土:活性炭=1:1的混合吸附劑，攪拌，在40?50°C下保溫30min,過(guò)濾；濾液減壓回收溶劑后，再加純化水進(jìn)行水洗，靜置Ih后，除去下層廢水；上層油在充氮條件下，加熱減壓干燥，再加入油重10 %經(jīng)活化的中性氧化鋁，攪拌，置冷處?kù)o置，過(guò)濾，過(guò)濾后的油再經(jīng)160?170°C減壓干熱滅菌2h，冷卻后經(jīng)0.2 μ m微孔濾膜過(guò)濾，分裝于500ml玻璃輸液瓶中，密封，即得。
4.一種藥物制劑，其特征在于含有治療有效量的權(quán)利要求1?3任一所述的薏苡仁油及一種或幾種藥學(xué)上可接受的載體，其中所述藥學(xué)上可接受的載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、乳化劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑或抗氧化劑，必要時(shí)還可以加入香味劑、甜味劑、防腐劑或著色劑； 其中，所述藥學(xué)上可接受的載體可以選自:甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、大豆磷脂、維生素C、維生素E、EDTA 二鈉、EDTA鈣鈉，一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、羥苯乙酯溶液、苯甲酸、山梨酸鉀、醋酸氯己定、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、吐溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β -環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣或硬脂酸鎂。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述藥物制劑，其可以是口服固體制劑、口服液體制劑或注射劑； 其中， 所述口服固體制劑選自膠囊劑、片劑、滴丸、顆粒劑、濃縮丸中的任何一種； 所述口服液體制劑選自水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑，或是一種在使用前可用水或其它適宜的載體復(fù)配的干燥產(chǎn)品； 所述注射劑選自納米混懸劑、脂質(zhì)體、乳劑、凍干粉針劑和水針劑中的任何一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述藥物制劑，其特征在于所述注射劑包含如下成分: 薏該仁油50?350g 注射用大豆磷脂或可供注射用大豆磷脂10?40g 注射用甘油或可供注射用甘油15?50g 注射用水加至1000ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述藥物制劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟: 稱取處方配制量的注射用大豆磷脂或可供注射用大豆磷脂，加適量的注射用水后，用高剪切分散乳化機(jī)分散至無(wú)塊狀及顆粒狀固體，加入按配方量稱取的注射用甘油或可供注射用甘油，并加注射用水至規(guī)定量，攪拌均勻備用； 另稱取薏苡仁油，將稱取的油酯與水相分別加熱至60?70°C后，置高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行高壓乳化，乳化時(shí)均質(zhì)機(jī)低壓為5?12MPa,高壓為25?50MPa,再循環(huán)均質(zhì)3?6遍,至2μηι以下顆粒應(yīng)不少于95%，5μπι以上顆粒不得檢出，必要時(shí)用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至4.8?8.5，優(yōu)選6.8?7.0，最優(yōu)選為6.8 ； 將制得均勻乳劑氮?dú)饧訅和ㄟ^(guò)小于等于3 μ m的微孔濾芯過(guò)濾器過(guò)濾，充氮灌裝滅菌，冷卻即得。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述藥物制劑，其特征在于所述膠囊劑包含如下成分: 薏該仁油200?800g 抗氧化劑和/或乳化劑0.20?0.60g 制成1000粒。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述藥物制劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟: 膠液配制:按重量比為1:0.6?1.2:0.3?0.8:0.0001?0.01稱取適量明膠、純化水、甘油和防腐劑；依次將甘油、純化水、防腐劑加入化膠罐內(nèi)，加熱至70°C?90°C后，再加入明膠不斷攪拌、抽真空，直至明膠完全溶解，將膠液過(guò)濾，在56?62°C下存放，備用； 藥液配制:將配方量的薏苡仁油、抗氧化劑和/或乳化劑加入配料罐內(nèi)，不斷攪拌，直至混合均勻； 壓膠囊:根據(jù)膠囊大小選擇合適的壓丸模具，在15?30°C、相對(duì)濕度小于35%條件下進(jìn)行壓丸定型后干燥，剔除大小丸，再用95%藥用乙醇洗丸后，繼續(xù)干燥至含水量小于12%,目檢剔除不合格膠囊，印字，包裝即得； 其中， 所述防腐劑選自10%羥苯乙酯溶液、苯甲酸、山梨酸鉀和醋酸氯己定中的一種； 所述抗氧化劑為維生素E，乳化劑為吐溫80。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述薏苡仁油在制備抗腫瘤或治療炎癥藥物中的應(yīng)用， 其中， 所述抗腫瘤藥物可以是薏苡仁油與鉬類、烷化劑類、二氟核苷類、抗生素類、細(xì)胞毒類和/或激素類化學(xué)藥物的組合；優(yōu)選為薏苡仁油與順鉬、卡鉬、環(huán)磷酰胺、鹽酸吉西他濱、米托蒽醌、絲裂霉素、醋酸亮丙瑞林、多西他賽和/或紫杉醇等化學(xué)藥物的組合； 所述腫瘤是指早期、中期或晚期的肺癌、肝癌、胰腺癌、前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌、肉瘤樣癌或癌肉瘤；所述炎癥是指前列腺炎或前列腺增生。
【文檔編號(hào)】A61K45/00GK104173824SQ201410342417
【公開(kāi)日】2014年12月3日 申請(qǐng)日期:2014年7月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月18日
【發(fā)明者】李大鵬 申請(qǐng)人:浙江康萊特集團(tuán)有限公司, 浙江康萊特藥業(yè)有限公司