神經(jīng)內(nèi)分泌病的抑制的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及抑制神經(jīng)內(nèi)分泌病的方法。該療法利用了非細(xì)胞毒性蛋白酶的使用，該蛋白酶靶向神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞，優(yōu)選通過生長抑素或皮質(zhì)抑素受體、GHRH受體、生長素釋放肽受體、鈴蟾肽受體、硬骨魚緊張肽受體、黑色素-濃縮激素受體1、KiSS-1受體或催乳素釋放肽受體。當(dāng)這樣遞送時，蛋白酶被內(nèi)化并且抑制來自所述腫瘤細(xì)胞的分泌。本發(fā)明還涉及用于所述方法中的多肽和核酸。
【專利說明】神經(jīng)內(nèi)分泌病的抑制
[0001] 本申請是國際申請?zhí)朠CT/GB2009/050665，國際申請日2009年6月11日，進(jìn)入中 國國家階段日期為2011年1月30日，中國申請?zhí)?00980130069. 3,發(fā)明名稱為"神經(jīng)內(nèi)分 泌病的抑制"的分案申請。
[0002] 本發(fā)明涉及用于治療神經(jīng)內(nèi)分泌疾病和病癥的治療劑和相應(yīng)療法。
[0003] 神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)從來自胚胎神經(jīng)嵴、神經(jīng)外胚層和內(nèi)胚層的細(xì)胞形成。它可以被 分成形成腺體的細(xì)胞類型和彌散分布的其他細(xì)胞類型，即播散或彌散神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)。第 一組包括形成垂體、甲狀旁腺和腎上腺髓質(zhì)的那些細(xì)胞。第二組包括皮膚、肺、胸腺、甲狀 腺、胰腺和GI、膽道和泌尿生殖道中的細(xì)胞。神經(jīng)內(nèi)分泌瘤可以在所有這些位置中產(chǎn)生并且 可以通過它們的物理尺寸對周圍器官產(chǎn)生局部壓力或收縮，或者通過異常分泌多種激素和 其他生物活性分子而導(dǎo)致病理生理。這些分子通常由非腫瘤細(xì)胞以生理學(xué)合適的量和在嚴(yán) 密的生理控制下分泌。然而，當(dāng)這些細(xì)胞形成腫瘤時，分泌可以是過量的，導(dǎo)致疾病。
[0004] 當(dāng)前對這些分泌過多疾病的療法可以包括手術(shù)去除腫瘤、一般性抗腫瘤化學(xué)療 法、干擾素療法、放射療法和用例如生長抑素類似物的更特異治療。對最初治療模式的優(yōu) 選性根據(jù)會診醫(yī)生而變，并且盡管這些方法的每一種都可能成功，但是它們并不總是合適 的。取決于腫瘤的尺寸和位置，外科手術(shù)可能被認(rèn)為太危險并且腫瘤不能被完全除去?？?腫瘤化學(xué)療法、干擾素療法和放射療法有時候難以被患者忍受或者可能由于其他原因而被 7Mc 〇
[0005] 此外，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡的療法也可以引起發(fā)生腫瘤裂解綜合征（TLS)可能。TLS 是腫瘤療法的非常嚴(yán)重并且有時是威脅生命的并發(fā)癥。它可以定義為自發(fā)或治療相關(guān)腫瘤 壞死或爆發(fā)性細(xì)胞凋亡引起的一群代謝異常。在具有TLS的患者中觀察到的代謝異常包 括：高鉀血癥、高尿酸血癥和具有繼發(fā)性低鈣血癥的高磷酸鹽血癥。TLS也可以導(dǎo)致急性腎 衰竭（ARF)。
[0006] 在具有轉(zhuǎn)移性類癌和胰腺內(nèi)分泌腫瘤的多數(shù)患者中，用當(dāng)前的藥物如奧曲肽治 療可以誘導(dǎo)臨床癥狀如腹瀉、脫水、潮紅發(fā)作、低血鉀、消化性潰瘍、低血糖發(fā)作和壞死性 皮膚病損的快速改善（Kvolsetal. 1986,1987，Ruszniewskietal. 1996，Caplinet al. 1998.Kulke&Mayerl999.Wymengaetal. 1999)。然而，多數(shù)患者在數(shù)周到數(shù)月內(nèi)顯示出 奧曲肽（octreotide)和生長妥林（lanreotide)對激素分泌抑制的脫敏作用。這些對目前 療法的限制代表重要的問題。
[0007] 神經(jīng)內(nèi)分泌瘤，包括胃腸胰內(nèi)分泌腫瘤和垂體腺瘤是罕見并且異質(zhì)性疾病（表 1)。結(jié)果，它們的預(yù)后和長期存活不是公知的。不考慮存活方面，從此類腫瘤的過量分泌可 以顯著影響受侵襲個體的生命質(zhì)量并且因此該異常功能的有效治療是保持患者生命質(zhì)量 所需的。
[0008] 表1主要神經(jīng)內(nèi)分泌瘤的發(fā)病率/患病率（除非另有指出，在美國）
[0009]
【權(quán)利要求】
1. 用于抑制來自神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞的分泌的多肽，所述多肽包含： a. 非細(xì)胞毒性蛋白酶，該蛋白酶能夠切割神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞中的胞吐融合器的蛋白 質(zhì)； b. 靶向結(jié)構(gòu)部分（TM)，其結(jié)合神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞上的結(jié)合位點(diǎn)，該結(jié)合位點(diǎn)能夠經(jīng)歷 胞吞作用以被摻入到神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞內(nèi)的內(nèi)體中；和 c. 易位結(jié)構(gòu)域，其能夠?qū)⑺龅鞍酌笍膬?nèi)體易位穿過內(nèi)體膜并進(jìn)入所述神經(jīng)內(nèi)分泌瘤 細(xì)胞的胞質(zhì)溶膠中。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1的使用的多肽，其中所述神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞選自由下列細(xì)胞組成的 組：來自或促進(jìn)垂體腫瘤、非類癌胃腸胰神經(jīng)內(nèi)分泌瘤、類癌腫瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤的細(xì)胞。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的使用的多肽，其中所述神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞選自由下列細(xì)胞組 成的組：來自或促進(jìn)生長激素瘤、胰島素瘤、胃泌素瘤、舒血管腸肽瘤、胰高血糖素瘤、催乳 素瘤、促腎上腺皮質(zhì)素瘤、促甲狀腺素瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤的細(xì)胞。
4. 根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的使用的多肽，其中所述TM結(jié)合到選自包含下列各項(xiàng)的 組的受體：生長激素釋放激素（GHRH)受體，生長抑素（SST)受體，皮質(zhì)抑素（CST)受體，生 長素釋放肽受體，鈴蟾肽受體，硬骨魚緊張肽受體，黑色素-濃縮激素受體1，KiSS-1受體， 促性腺素釋放激素（GnRH)受體和/或催乳素釋放肽受體。
5. 根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的使用的多肽，其中所述TM包含生長激素釋放激素 (GHRH)肽、生長抑素肽、皮質(zhì)抑素肽、生長素釋放肽、鈴蟾肽、硬骨魚緊張肽、黑色素-濃縮 激素肽、KISS-1肽、促性腺素釋放激素（GnRH)肽或催乳素釋放肽。
6. 根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的使用的多肽，其中所述非細(xì)胞毒性蛋白酶包含梭菌神經(jīng) 毒素L-鏈或IgA蛋白酶。
7. 根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的使用的多肽，其中所述易位結(jié)構(gòu)域包含梭菌神經(jīng)毒素易 位結(jié)構(gòu)域。
8. 多肽，其包含： a. 非細(xì)胞毒性蛋白酶，該蛋白酶能夠切割神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞中的胞吐融合器的蛋白 質(zhì)； b. 靶向結(jié)構(gòu)部分（TM)，其結(jié)合神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞上的結(jié)合位點(diǎn)，該結(jié)合位點(diǎn)能夠經(jīng)歷 胞吞作用以被摻入到神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞內(nèi)的內(nèi)體中；和 c. 易位結(jié)構(gòu)域，其能夠?qū)⑺龅鞍酌笍膬?nèi)體易位穿過內(nèi)體膜并進(jìn)入所述神經(jīng)內(nèi)分泌瘤 細(xì)胞的胞質(zhì)溶膠中。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8的多肽，其中所述神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞選自由下列細(xì)胞組成的組：來 自或促進(jìn)垂體腫瘤、非類癌胃腸胰神經(jīng)內(nèi)分泌瘤、類癌腫瘤、嗜鉻細(xì)胞瘤、胰島素瘤、胃泌素 瘤、舒血管腸肽瘤、胰高血糖素瘤、催乳素瘤、生長激素瘤、促腎上腺皮質(zhì)素瘤、促甲狀腺素 瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤的細(xì)胞。
10. 根據(jù)權(quán)利要求8或權(quán)利要求9的多肽，其中所述TM結(jié)合選自包含下列各項(xiàng)的組的 受體：生長激素釋放激素（GHRH)受體，生長抑素（SST)受體，皮質(zhì)抑素（CST)受體，生長素 釋放肽受體，鈴蟾肽受體（例如，BRS-1，BRS-2或BRS-3)，硬骨魚緊張肽受體（例如，硬骨魚 緊張肽II受體），黑色素_濃縮激素受體1，KiSS-1受體，促性腺素釋放激素（GnRH)受體 和/或催乳素釋放肽受體。
11. 根據(jù)權(quán)利要求8-10任一項(xiàng)的多肽，其中所述TM包含生長激素釋放激素（GHRH) 肽、生長抑素肽、皮質(zhì)抑素肽、生長素釋放肽、鈴蟾肽、硬骨魚緊張肽、黑色素-濃縮激素、 KISS-1肽、促性腺素釋放激素（GnRH)肽或催乳素釋放肽。
12. 根據(jù)權(quán)利要求8-11任一項(xiàng)的多肽，其中所述易位結(jié)構(gòu)域包含梭菌神經(jīng)毒素易位結(jié) 構(gòu)域；和/或其中所述非細(xì)胞毒性蛋白酶包含梭菌神經(jīng)毒素蛋白酶或IgA蛋白酶。
13. 根據(jù)權(quán)利要求8-12任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽包含與SEQ ID N0s:7、8、9、10、 11、12、13、14、15、16、18、19、20、21、22、23、24、26、27、28、29、30、31、33、34、35、36、37、38、 39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、57、58、59. 60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、 72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93 或 94 任一個 具有至少90-92%、或至少95-97%、或至少98-99%序列同一性的氨基酸序列。
14. 核酸，其編碼根據(jù)權(quán)利要求8-13任一項(xiàng)的多肽。
15. 核酸，其編碼根據(jù)權(quán)利要求8的多肽，其中所述核酸包含與SEQ ID NOs: 17或25任 一個具有至少90-94%、或至少95-97%、或至少98-99%序列同一性的核酸序列。
16. 抑制患者中來自神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞的分泌的方法，包括對該患者施用有效量的根 據(jù)權(quán)利要求8-13任一項(xiàng)的多肽或根據(jù)權(quán)利要求14或15的核酸。
17. 根據(jù)權(quán)利要求16的方法，用于抑制來自神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞分泌，所述神經(jīng)內(nèi)分泌 瘤細(xì)胞選自由下列細(xì)胞組成的組：來自或促進(jìn)垂體腫瘤、非類癌胃腸胰神經(jīng)內(nèi)分泌瘤、類癌 腫瘤、胰島素瘤、胃泌素瘤、舒血管腸肽瘤、胰高血糖素瘤、催乳素瘤、生長激素瘤、促腎上腺 皮質(zhì)素瘤、促甲狀腺素瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤。
18. 根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)的使用的多肽或根據(jù)權(quán)利要求17的方法，用于治療庫 欣病，肢端肥大癥，類癌綜合征，低血糖綜合征，壞死松解性游走性紅斑，佐林格-埃利森綜 合征和弗-莫綜合征，肝細(xì)胞瘤，舒血管腸肽瘤，成胰島細(xì)胞增殖，高胰島素癥，胃泌素瘤， 高分泌性腹瀉，腸易激綜合征，上消化道出血，餐后門靜脈高血壓，特別是肝硬化患者中的 餐后門靜脈高血壓，門靜脈高血壓并發(fā)癥，小腸梗阻，糖尿病神經(jīng)病，和癌癥惡病質(zhì)；手術(shù)、 非手術(shù)或組織潰瘍引起的組織創(chuàng)傷所導(dǎo)致的實(shí)體原發(fā)或轉(zhuǎn)移腫瘤的加速生長；和上皮腫瘤 (上皮組織的腫瘤），如前列腺腫瘤、乳腺腫瘤、結(jié)腸腫瘤、肺腫瘤和黑素瘤。
【文檔編號】A61K47/48GK104328100SQ201410295607
【公開日】2015年2月4日 申請日期:2009年6月11日 優(yōu)先權(quán)日:2008年6月12日
【發(fā)明者】斯蒂芬·約翰斯特恩, 菲利浦·馬克斯, 基斯·福斯特 申請人:辛它可辛有限公司