β羥基丁酸在治療安非它明類精神藥物成癮中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了β羥基丁酸在治療安非它明類精神藥物成癮中的應(yīng)用。本發(fā)明經(jīng)藥理學(xué)和行為學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，β羥基丁酸促進(jìn)安非它明類精神藥物成癮消退，并減少安非它明類精神藥物成癮重現(xiàn)的發(fā)生。
【專利說(shuō)明】β羥基丁酸在治療安非它明類精神藥物成癮中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及β羥基丁酸的應(yīng)用，具體涉及β羥基丁酸在安非它明類藥物成癮治療中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]上世紀(jì)90年代以來(lái)，安非它明類中樞興奮劑濫用增長(zhǎng)迅速，聯(lián)合國(guó)禁毒署公布安非它明類中樞興奮劑是最廣泛的毒品，如冰毒、搖頭丸等。給個(gè)人、家庭和社會(huì)帶來(lái)巨大危害。
[0003]安非它明類中樞興奮劑成癮是慢性、復(fù)發(fā)性腦病，其精神依賴性非常嚴(yán)重，其核心特征是對(duì)藥物強(qiáng)烈的渴求感，以及在渴求感的驅(qū)使下，形成強(qiáng)迫性藥物尋覓和使用行為。學(xué)習(xí)記憶在安非它明類藥物成癮及復(fù)發(fā)過(guò)程中占重要地位。成癮患者一旦來(lái)到與以前接受藥物有關(guān)環(huán)境中(人、地點(diǎn)或其他與藥物有關(guān)的暗示)就會(huì)表現(xiàn)出對(duì)藥物強(qiáng)烈的渴求感和覓藥行為。致依賴性藥物所導(dǎo)致的成癮記憶十分深刻，甚至在戒斷若干年后，再接觸與成癮有關(guān)的暗示(如人、物、與過(guò)去用藥有關(guān)的環(huán)境等)都可以誘發(fā)復(fù)吸。
[0004]因此，安非它明成癮治療中迫切需要能促使成癮消退，使患者回歸正常社會(huì)，避免復(fù)發(fā)的治療方案。β羥基丁酸是機(jī)體能量代謝中間產(chǎn)物，在持續(xù)運(yùn)動(dòng)和禁食饑餓狀態(tài)下的重要能源物質(zhì)。饑餓狀態(tài)下，肝臟增強(qiáng)脂肪酸代謝，血中β羥基丁酸升高至1-2 mM，長(zhǎng)時(shí)間禁食，升高至6-8 mM以上。本發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，β羥基丁酸在安非它明類精神藥物成癮治療中的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是公開β羥基丁酸的一種新用途。
[0006]具體的說(shuō)，本發(fā)明提供了 β羥基丁酸在治療安非它明類興奮劑成癮中的應(yīng)用，即β羥基丁酸能促進(jìn)安非它明類成癮消退，并減少成癮重現(xiàn)的發(fā)生。
[0007]本發(fā)明公開了 β羥基丁酸在治療安非它明類興奮劑成癮中的用途。
[0008]本發(fā)明所述的成癮指與成癮有關(guān)的行為，主要包括強(qiáng)迫性覓藥和用藥，在動(dòng)物模型中通常表現(xiàn)為條件位置偏愛(ài)(conditioned place preference, CPP)。
[0009]本發(fā)明所述的β羥基丁酸在治療安非它明類興奮劑精神藥物成癮中的應(yīng)用，其特征在于β羥基丁酸促進(jìn)安非它明類精神藥物成癮消退。
[0010]本發(fā)明所述的β羥基丁酸在治療安非它明類興奮劑精神藥物成癮中的應(yīng)用，其特征在于β羥基丁酸減少安非它明類精神藥物成癮行為消退后重建。
[0011]本發(fā)明所述的 安非它明類藥物為安非它明(Amphetamine, A)、甲基安非它明(Methamphetamine, MA)、搖頭丸、冰毒等社會(huì)常見(jiàn)毒品。
[0012]本發(fā)明所述的藥物β羥基丁酸通過(guò)市售得到。
[0013]本發(fā)明通過(guò)動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，采用條件位置偏愛(ài)(CPP)來(lái)判斷安非它明類精神藥物成癮獲得、消退、重建，以進(jìn)行成癮研究。[0014]本發(fā)明所述的β羥基丁酸在治療安非它明類興奮劑精神藥物成癮中的應(yīng)用，β羥基丁酸的有效劑量范圍為100-2000 mg/kg，最佳劑量范圍為300-600 mg/kg。
[0015]本發(fā)明研究了 β羥基丁酸在安非它明類成癮行為消退中的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)β羥基丁酸促進(jìn)安非它明類成癮小鼠條件位置偏愛(ài)的消退。
[0016]本發(fā)明研究了 β羥基丁酸在安非它明類成癮消退后重建中的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)β羥基丁酸減少安非它明類成癮小鼠成癮消退后的重建。
[0017]本發(fā)明研究了 β羥基丁酸的成癮性，結(jié)果表明β羥基丁酸(100-2000 mg/kg)本身并不引起條件性位置偏愛(ài)，也不產(chǎn)生條件性的厭惡效應(yīng)，不具有成癮性。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0018]圖1是甲基安非它明CPP建立流程示意圖。其中MA為甲基安非它明，NS為生理鹽水。
[0019]圖2是甲基安非它明誘導(dǎo)CPP建立結(jié)果。其中MA為甲基安非它明，β-OHB為β羥基丁酸。
[0020]圖3是非限制性消退實(shí)驗(yàn)流程圖。其中MA為甲基安非它明，NS為生理鹽水，β-OHB為β羥基丁酸。
[0021]圖4是在甲基安非它明成癮一消退操作中，β羥基丁酸促進(jìn)CPP非限制性消退結(jié)果O
[0022]圖5是限制性消退實(shí)驗(yàn)流程圖。其中MA為甲基安非它明，NS為生理鹽水，β -OHB為β羥基丁酸。
[0023]圖6是在甲基安非它明成癮一消退操作中，β羥基丁酸促進(jìn)CPP限制性消退結(jié)果。
[0024]圖7是消退后重建實(shí)驗(yàn)流程圖。其中MA為甲基安非它明，NS為生理鹽水，β -OHB為β羥基丁酸。
[0025]圖8是在甲基安非它明成癮一消退一重建操作中，β羥基丁酸減少消退后重建結(jié)果。其中A圖表示經(jīng)4次重復(fù)的限制性消退程序，小鼠CPP完全消退。B圖顯示重建Test3結(jié)果，消退期β羥基丁酸使用明顯減少偏愛(ài)重建。
[0026]圖9是安非它明誘導(dǎo)CPP建立結(jié)果。
[0027]圖10是在安非它明成癮一消退操作中，β羥基丁酸促進(jìn)CPP非限制性消退結(jié)果。
[0028]圖11是在安非它明成癮一消退操作中，β羥基丁酸促進(jìn)了 CPP限制性消退結(jié)果。
[0029]圖12是在安非它明成癮一消退一重建操作中，β羥基丁酸減少消退后重建結(jié)果。其中A圖表示經(jīng)4次重復(fù)的限制性消退程序，小鼠CPP完全消退；Β圖顯示重建Test 3結(jié)果，消退期β羥基丁酸使用明顯減少偏愛(ài)重建。
【具體實(shí)施方式】
[0030]以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步描述本發(fā)明，應(yīng)該理解的是，這些實(shí)施例僅用于例證的目的，不限制本發(fā)明的范圍。
[0031]本發(fā)明實(shí)施例中所使用的甲基安非它明(MA)和安非它明(A)為標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)自中國(guó)藥品檢定所羥基丁酸購(gòu)自TOKYO CHEMICAL INDUSTRY CO。
[0032]本實(shí)施例中所使用的CPP實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)為紅外視頻跟蹤-計(jì)算機(jī)自動(dòng)分析的條件位置偏愛(ài)黑白箱實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(上海移數(shù)信息科技有限公司型號(hào):RD1111-CPP-M-4)。
[0033]計(jì)量資料以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差表示，應(yīng)用SPSS16.0軟件進(jìn)行方差分析，p〈0.05為有顯著性差異，圖中用*標(biāo)識(shí)。
[0034]實(shí)施例1:甲基安非它明誘導(dǎo)的條件位置偏愛(ài)(CPP)形成
小鼠分層隨機(jī)分為4組,生理鹽水組、MA paired組、MA無(wú)關(guān)環(huán)境組和β -OHB paired組，每組8只小鼠。只是在CPP建立訓(xùn)練時(shí)，四組處理不同，其余相同。甲基安非它明誘導(dǎo)條件位置偏愛(ài)(CPP)實(shí)驗(yàn)流程見(jiàn)圖1。
1)天然偏愛(ài)測(cè)試:實(shí)驗(yàn)前三天(dl、d2、d3)，每天8:30左右，先將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(每亞組小鼠4只同籠)運(yùn)送至CPP裝置測(cè)試室，開啟CPP裝置，打開CPP穿梭盒中間通道型隔板，將小鼠(頭朝向白盒)輕柔放置兩盒交界處，讓其在兩盒內(nèi)自由活動(dòng)15分鐘，并于d3測(cè)試攝錄活動(dòng)情況，由電腦輔助系統(tǒng)紀(jì)錄各小鼠在每個(gè)盒子中的停留時(shí)間，即記錄偏愛(ài)基礎(chǔ)值t black(秒)、t white (秒)分析其天然偏愛(ài)情況。根據(jù)天然偏愛(ài)測(cè)試結(jié)果確定小鼠的天然偏愛(ài)箱。記錄各小鼠的CPP基礎(chǔ)值,即TO =非天然偏愛(ài)盒時(shí)間-天然偏愛(ài)盒時(shí)間。
2)CPP建立:
MA paired 組
訓(xùn)練:根據(jù)天然偏愛(ài)結(jié)果以及相關(guān)文獻(xiàn)，天然偏愛(ài)盒不易建立CPP，故選擇非偏愛(ài)盒作為甲基安非它明伴藥盒，進(jìn)行條件化訓(xùn)練。訓(xùn)練期間采用封閉型隔板，將穿梭盒分隔成兩個(gè)獨(dú)立的盒子，甲基安非它明處理(MA paired)小鼠在d4、d6, d8腹腔注射lmg/kg的鹽酸甲基安非它明后放置非偏愛(ài)盒訓(xùn)練30分鐘；d5、d7，d9腹腔注射0.2ml/10g生理鹽水后放置自然偏愛(ài)盒訓(xùn)練30分鐘。
生理鹽水組小鼠6天內(nèi)均給 予生理鹽水，其它處理訓(xùn)練同MA paired實(shí)驗(yàn)組小鼠。甲基安非它明無(wú)關(guān)環(huán)境組小鼠，d4-9，均在所設(shè)無(wú)關(guān)環(huán)境內(nèi)處置，并不放入CPP裝置，給藥同MA-paired 組。β-OHB paired 組 β-OHB 劑量為 300 mg/kg,其處理訓(xùn)練同 MA-paired 實(shí)驗(yàn)組。
偏愛(ài)測(cè)試:實(shí)驗(yàn)dlO，開啟CPP裝置，打開CPP穿梭盒中間通道型隔板，將小鼠(頭朝向白盒)輕柔放置兩盒交界處，讓其在兩盒內(nèi)自由活動(dòng)15 min，由電腦輔助系統(tǒng)紀(jì)錄各小鼠在每個(gè)盒子中的停留時(shí)間，記錄CPP測(cè)試值t black (秒)、t white (秒),取其值為Tl,為非天然偏愛(ài)盒時(shí)間_天然偏愛(ài)盒時(shí)間的差。
CPP結(jié)果計(jì)算:
為了減少系統(tǒng)誤差，平衡實(shí)驗(yàn)各因素，CPP值定義為:測(cè)試值-基礎(chǔ)值，即:Τ (η)(非天然偏愛(ài)盒時(shí)間[即伴藥側(cè)]-天然偏愛(ài)盒時(shí)間)-TO (非天然偏愛(ài)盒時(shí)間-天然偏愛(ài)盒時(shí)間)。
3)MA paired組建立對(duì)伴藥箱的偏愛(ài)。見(jiàn)附圖2。
與生理鹽水對(duì)照組和無(wú)關(guān)環(huán)境組相比，MA-paired組建立對(duì)伴藥箱的偏愛(ài)，差異有顯著性意義。而β-OHB本身并不引起條件性位置偏愛(ài)，也不產(chǎn)生條件性的厭惡效應(yīng)，不具有成癮性。
在實(shí)施例1中確定了小鼠形成CPP的實(shí)驗(yàn)方案。實(shí)施例2 — 4以MA paired組的實(shí)驗(yàn)流程先建立CPP，此基礎(chǔ)上進(jìn)行消退和重建實(shí)驗(yàn)研究。
[0035]實(shí)施例2:甲基安非它明成癮非限制性消退實(shí)驗(yàn)小鼠分2組，β羥基丁酸組和生理鹽水組，每組8只。
DDl-1O同實(shí)施例1 1 ）~2)中的MA paired組，進(jìn)行天然偏愛(ài)(Test 0)、CPP訓(xùn)練和偏愛(ài)測(cè)試(Test I)。
2) D10-17:每天接受15 min偏愛(ài)測(cè)試(test 1-test 8),并與每次偏愛(ài)測(cè)試后,按分組立即給予①β羥基丁酸注射(100 mg/kg,腹腔注射)，或②蒸餾水注射(0.2 ml/10g，腹腔注射)，注射后放入home cage。
本實(shí)施例有10次測(cè)試結(jié)果Test 0，1，2，3，4，5，6，7，8。
4)結(jié)果顯示:甲基安非它明成癮一非限制性消退操作中，非限制性消退期使用β羥基丁酸促進(jìn)CPP消退。見(jiàn)圖4。
[0036]實(shí)施例3:甲基安非它明成癮限制性消退實(shí)驗(yàn)
小鼠分2組，β羥基丁酸組和生理鹽水組。每組8只。限制性消退實(shí)驗(yàn)流程見(jiàn)圖5。OD1-9同實(shí)施例1 I)~2)中的MA-paired組，進(jìn)行天然偏愛(ài)(Test O)、CPP訓(xùn)練和偏愛(ài)測(cè)試(Test I)。
2)Dll-12為限制性消退期。
Dll,動(dòng)物限制在MA-paired側(cè)3 min,然后立即，β羥基丁酸組給予100 mg/kg β輕基丁酸，生理鹽水組給生理鹽水；
D12,動(dòng)物限制在MA-unpaired側(cè)3 mi n,然后立即，2組均給生理鹽水。
3)D13，進(jìn)行偏愛(ài)測(cè)試(Test 2)。
本實(shí)施例有3次測(cè)試結(jié)果Test 0,l,2o
4)結(jié)果顯示:甲基安非它明成癮一限制性消退操作中，限制性消退期使用β羥基丁酸促進(jìn)CPP消退。見(jiàn)圖6。
[0037]實(shí)施例4:甲基安非它明成癮消退后重建實(shí)驗(yàn)
小鼠分2組，β羥基丁酸組和生理鹽水組。①β羥基丁酸組注射(100 mg/kg, ip)②蒸餾水注射(0.2 ml/10g)。每組8只。消退后重建實(shí)驗(yàn)流程見(jiàn)圖7。
OD1-9同實(shí)施例1 I 2)中的MA paired組，進(jìn)行天然偏愛(ài)(Test O)、CPP訓(xùn)練和偏愛(ài)測(cè)試(Test I)。
2)Dll-18為限制性消退期。
D11，動(dòng)物限制在MA伴藥側(cè)3 min，然后β羥基丁酸組給予β羥基丁酸100 mg/kg，生理鹽水組給生理鹽水；D12，動(dòng)物限制在MA非伴藥側(cè)3 min，然后2亞組均給生理鹽水；D13-18:再重復(fù) Dll-12，3 次；
3)D19:進(jìn)行偏愛(ài)測(cè)試(Test 2)。
4)D20:Test 2 后 24 小時(shí)，進(jìn)行重建試驗(yàn) reinstatement test (Test 3)。即給予 MA(0.2 mg/kg)立即進(jìn)行偏愛(ài)測(cè)試。
本實(shí)施例有有4次測(cè)試結(jié)果Test 0,l,2,3o
5)結(jié)果顯示:在甲基安非它明成癮一消退一重建操作中，β羥基丁酸組減少消退后的重建。見(jiàn)圖8，其中A圖表示經(jīng)4次重復(fù)的限制性消退程序，小鼠CPP完全消退。B圖顯示重建Test 3結(jié)果，消退期β羥基丁酸使用明顯減少偏愛(ài)重建。
[0038]實(shí)施例5: β羥基丁酸對(duì)安非它明成癮消退和重建的影響
同實(shí)施例1-4實(shí)驗(yàn)步驟，研究β羥基丁酸對(duì)安非它明(A)成癮消退和重建的影響。安非它明誘導(dǎo)小鼠CPP的劑量為I mg/kg，重建試驗(yàn)中安非它明劑量為0.2 mg/kg。
O安非它明誘導(dǎo)的條件位置偏愛(ài)(CPP)形成，操作流程同實(shí)施例1，其中MA組在本實(shí)驗(yàn)中為安非它明(A)組。安非它明劑量為I mg/kg。結(jié)果顯示與生理鹽水對(duì)照組和無(wú)關(guān)環(huán)境組相比，A paired組建立對(duì)伴藥箱的偏愛(ài)，差異有顯著性意義，見(jiàn)圖9。
2)安非它明成癮非限制性消退，操作流程同實(shí)施例2，其中誘導(dǎo)小鼠CPP的藥物為安非它明。結(jié)果顯示:在安非它明成癮一非限制性消退操作中，非限制性消退期使用β羥基丁酸促進(jìn)CPP消退。見(jiàn)圖10。
3)安非它明成癮限制性消退，操作流程同實(shí)施例3，其中誘導(dǎo)小鼠CPP的藥物為安非它明。結(jié)果顯示:在安非它明成癮一限制性消退操作中，限制性消退期使用β羥基丁酸促進(jìn)CPP消退。見(jiàn)圖11。
4)安非它明成癮消退后重建，操作流程同實(shí)施例4，其中誘導(dǎo)小鼠CPP的藥物為安非它明。進(jìn)行消退后重建試驗(yàn)時(shí)給予安非它明的劑量為0.2 mg/kg。結(jié)果顯示:在安非它明成癮一消退一重建操作中，β羥基丁酸組減少成癮消退后的重建。見(jiàn)圖12，其中A圖表示經(jīng)4次重復(fù)的限制性消退程序，小鼠CPP完全消退。B圖顯示重建Test 3結(jié)果，消退期β羥基丁酸使用明顯減少偏愛(ài)重建。
【權(quán)利要求】
1.β羥基丁酸在治療安非它明類興奮劑精神藥物成癮中的應(yīng)用。
2.權(quán)利要求1所述的β羥基丁酸在治療安非它明類興奮劑精神藥物成癮中的應(yīng)用，其特征在于β羥基丁酸促進(jìn)安非它明類精神藥物成癮消退。
3.權(quán)利要求1所述的β羥基丁酸在治療安非它明類興奮劑精神藥物成癮中的應(yīng)用，其特征在于β羥基丁酸減少安`非它明類精神藥物成癮行為消退后重建。
【文檔編號(hào)】A61P25/30GK103860534SQ201410048807
【公開日】2014年6月18日 申請(qǐng)日期:2014年2月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月12日
【發(fā)明者】趙營(yíng), 翟德勝, 王守英, 陳志國(guó), 谷爭(zhēng), 楊云雷, 張瑞嶺, 李嵩箕, 周度爽, 趙二奇, 何歡歡, 侯田田 申請(qǐng)人:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院