用于治療劑的方法和組合物的制作方法
【專利摘要】本公開(kāi)內(nèi)容特別地提供了包含治療劑(例如減毒活病毒抗原、治療性蛋白質(zhì)等)和脂質(zhì)組分的組合物。所述脂質(zhì)組分可包含由本文描述的不同類型的一種或更多種脂質(zhì)或者由其組成。在一些實(shí)施方案中，所述治療劑是不耐熱的。本公開(kāi)內(nèi)容還提供了制備組合物(包括前述組合物)的方法(例如尤其是熔融法和噴霧注射法)。
【專利說(shuō)明】用于治療劑的方法和組合物
[0001] 相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002] 本申請(qǐng)要求2012年1月27日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)序列號(hào)61/591，837的優(yōu)先權(quán)， 其內(nèi)容通過(guò)引用被整體并入本文。

【背景技術(shù)】
[0003] 大多數(shù)疫苗（包括減毒病毒疫苗）隨時(shí)間損失效價(jià)且效價(jià)損失速度是溫度依賴 的。因此，已經(jīng)建立了冷鏈體系來(lái)確保疫苗保持效價(jià)，其通過(guò)將疫苗儲(chǔ)存在冷藏條件（大多 數(shù)情況下2至8°C之間）下直至使用。建立用于疫苗儲(chǔ)存和分發(fā)的冷鏈?zhǔn)谴蠊こ滩⑶揖S護(hù) 困難。即使盡最大努力，也很顯然的是，出于許多原因，冷鏈并不總是如預(yù)期那樣起作用， 這些原因諸如維護(hù)不恰當(dāng)?shù)幕蛘哌^(guò)時(shí)的冷藏設(shè)備、導(dǎo)致設(shè)備故障的電力中斷、不嚴(yán)格遵守 冷鏈程序以及監(jiān)控不足。結(jié)果就是冷鏈中的疫苗經(jīng)常遭受溫度偏移（即目標(biāo)范圍之外的溫 度）。
[0004] 其它治療劑例如某些治療性蛋白質(zhì)在暴露于高溫時(shí)也會(huì)損失效價(jià)。因此本領(lǐng)域中 仍然存在改進(jìn)組合物和方法以使得這些治療劑能夠在暴露于高溫時(shí)穩(wěn)定并且保持效價(jià)的 需求。
[0005] 發(fā)明概述
[0006] 本公開(kāi)內(nèi)容提供了尤其是包含治療劑（例如減毒活病毒抗原、治療性蛋白質(zhì)等） 和脂質(zhì)組分的組合物。所述脂質(zhì)組分可包含或者由本文描述的不同類型的一種或更多種脂 質(zhì)組成。在一些實(shí)施方案中，所述治療劑是不耐熱的。
[0007] 在一個(gè)方面，所述脂質(zhì)組分由一種或更多種非離子型表面活性劑組成。在一些實(shí) 施方案中，這些組合物中的所述脂質(zhì)組分是單一的非離子型表面活性劑（例如MPG)。
[0008] 在另一個(gè)方面，所述脂質(zhì)組分由一種或更多種非離子型表面活性劑和類固醇組 成。在一些實(shí)施方案中，這些組合物中的所述脂質(zhì)組分由單一的非離子型表面活性劑（例 如MPG)和單一的類固醇（例如膽固醇）組成。
[0009] 在另一個(gè)方面，所述脂質(zhì)組分包含一種或更多種脂質(zhì)，其合并形成囊泡（vesicle) (即"囊泡組合物")。在一些實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)在不存在治療劑的情況下被合并形成囊 泡，然后與治療劑混合（即所述組合物包括"預(yù)形成的囊泡"）。在這些實(shí)施方案的一些中， 所述脂質(zhì)包含非離子型表面活性劑、類固醇和離子型兩親物。根據(jù)這些實(shí)施方案制備的囊 泡組合物可包括任何離子型兩親物，其包括本文描述的任何示例性離子型兩親物。在一些 實(shí)施方案中，在治療劑存在的情況下，所述脂質(zhì)被合并以形成囊泡。根據(jù)這些實(shí)施方案制備 的囊泡組合物可包括本文描述作為離子型兩親物的任何示例性磷脂酰甘油。在一些實(shí)施方 案中，這些囊泡組合物中的所述脂質(zhì)組分由單一的非離子型表面活性劑（例如MPG)、單一 的類固醇（例如膽固醇）和單一的離子型兩親物（例如DCP或DPPG)組成。在一些實(shí)施方 案中，這些囊泡組合物中的所述脂質(zhì)組分由單一的非離子型表面活性劑（例如MPG)、單一 的類固醇（例如膽固醇）和單一的離子型兩親物（例如DCP)組成并且所述囊泡是預(yù)形成 的。在一些實(shí)施方案中,這些囊泡組合物中的所述脂質(zhì)組分由非離子型表面活性劑（例如 MPG)、類固醇（例如膽固醇）和作為離子型兩親物的碡脂酰甘油（例如DPPG)組成并且所 述囊泡是在治療劑存在條件下預(yù)形成的或者形成的。
[0010]本公開(kāi)內(nèi)容還提供了制備組合物（包括前述組合物）的方法（例如尤其是溶融法 和噴霧注射法）。
[0011] 附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明
[0012]圖1顯示了得自麻疹效價(jià)測(cè)定（TCID5q)的示例性結(jié)果，該測(cè)定是使用不同的重配 疫苗（用25mg/ml的脂質(zhì)配制）進(jìn)行的，其曾被儲(chǔ)存在約代和約371;下！ 周、2周和多達(dá)12周。
[0013]圖2顯示了得自麻疹效價(jià)測(cè)定（TCID5q)的示例性結(jié)果，該測(cè)定是使用不同的重配 M?蘭疫苗（用12_ 5mg/ml的脂質(zhì)配制）進(jìn)行的，其曾被儲(chǔ)存在約代和約37r下 1周、2周和多達(dá)12周。
[0014]圖3顯示了得自尺寸排阻色譜法的百分比純度結(jié)果，所述尺寸排阻色譜法是使用 重新配制的曲妥珠單抗（trastuzumab)作為示例性治療性蛋白質(zhì)（由12. 5mg/ml的脂質(zhì)配 制）進(jìn)行的，所述示例性治療性蛋白質(zhì)曾被儲(chǔ)存在約4°C和約40°C下4周和多達(dá)8周。
[0015] 圖4顯示了得自BT-474抗增殖生物學(xué)效價(jià)測(cè)定的效價(jià)結(jié)果，是使用重配曲妥珠單 抗作為示例性治療性蛋白質(zhì)（由12. 5mg/ml的脂質(zhì)配制）進(jìn)行的，其曾被儲(chǔ)存在約4°C和約 40°C下4周和多達(dá)8周。
[0016] 定義
[0017] 貫穿本公開(kāi)內(nèi)容采用的一些術(shù)語(yǔ)在以下段落中進(jìn)行定義。
[0018] 本文使用的術(shù)語(yǔ)"抗原"或"病毒抗原"是指含有可被抗體識(shí)別的一種或更多種表 位的物質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，抗原可以是病毒。術(shù)語(yǔ)"抗原"尤其涵蓋減毒的和滅活的病 毒。在一些實(shí)施方案中，抗原可以是"免疫原"。
[0019] 本文使用的術(shù)語(yǔ)"免疫應(yīng)答"是指在動(dòng)物中引發(fā)的應(yīng)答。免疫應(yīng)答可以指細(xì)胞免 疫、體液免疫或者可以包括兩者。免疫應(yīng)答也可以限于一部分免疫系統(tǒng)。例如，在一些實(shí)施 方案中，免疫原性組合物可以誘導(dǎo)增強(qiáng)的IFNy應(yīng)答。在一些實(shí)施方案中，免疫原性組合物 可以誘導(dǎo)粘膜IgA應(yīng)答（例如在鼻腔和/或直腸沖洗中所測(cè)到的）。在一些實(shí)施方案中，免 疫原組合物可以誘導(dǎo)全身性IgG應(yīng)答（例如在血清中所測(cè)到的）。
[0020] 本文使用的術(shù)語(yǔ)"免疫原性"意為能夠在宿主動(dòng)物中產(chǎn)生針對(duì)非宿主個(gè)體（例如 病毒抗原）的免疫應(yīng)答。在一些實(shí)施方案中，這種免疫應(yīng)答形成由疫苗引發(fā)的針對(duì)特定感 染性生物體（例如病毒）的保護(hù)性免疫的基礎(chǔ)。
[0021] 本文使用的術(shù)語(yǔ)"治療有效量"是指足以在被治療對(duì)象中顯示出有意義的益處的 量。組合物的治療有效量可以隨以下因素而變化：期望的生物學(xué)終點(diǎn)、組合物的性質(zhì)、施用 途徑、被治療對(duì)象的健康、尺碼和/或年齡等等。
[0022] 本文使用的術(shù)語(yǔ)"治療"是指為了減輕、緩解、改變、增強(qiáng)、改善或者影響疾病、疾病 的癥狀、或疾病誘因而將組合物施用到具有疾病、疾病癥狀或者疾病誘因的對(duì)象。在一些實(shí) 施方案中，術(shù)語(yǔ)"治療"是指給對(duì)象接種疫苗。

【具體實(shí)施方式】
[0023] I.組合物
[0024] 本公開(kāi)內(nèi)容提供了尤其是包含治療劑和脂質(zhì)組分的組合物。本文使用的術(shù)語(yǔ)"月旨 質(zhì)組分"涵蓋了組合物中存在的所有脂質(zhì)。脂質(zhì)組分可包含由本文描述的不同類型的一種 或更多種脂質(zhì)或由其組成。
[0025] 脂質(zhì)組分
[0026] 在一個(gè)方面，所述脂質(zhì)組分由一種或更多種非離子型表面活性劑組成。在一些實(shí) 施方案中，脂質(zhì)組分由單一的非離子型表面活性劑組成。并非限制，合適的非離子型表面活 性劑的實(shí)例包括以甘油為基礎(chǔ)的酯連接的表面活性劑。這樣的甘油酯可包含兩種高級(jí)脂肪 族?；鶊F(tuán)之一，例如在每個(gè)酰基部分中含有至少十個(gè)碳原子。以這樣的甘油酯為基礎(chǔ)的 非離子型表面活性劑可包含多于一個(gè)的甘油單元，例如多達(dá)5個(gè)甘油單元?？梢允褂酶视?單酯，例如含有C 12-C2q烷?；╝lkanoyl)或烯酰基（alkenoyl)部分（例如己酰基、月桂 ?；?、肉豆蔻酰基、棕櫚酰基、油烯基或硬脂?；┑母视蛦熙ィ?。示例性非離子型表面活性 劑是1 _單棕櫚酸甘油（I-monopalmitoyl glycerol，MPG)。也可以將醋連接的表面活性劑 用作非離子型表面活性劑。例如，以甘油或具有多達(dá)4個(gè)碳原子的低級(jí)脂肪族醇的二元醇 (諸如乙二醇）為基礎(chǔ)的酯連接的表面活性劑是合適的。以這樣的二元醇為基礎(chǔ)的非離子 型表面活性劑可包含多于一個(gè)的二元醇單元，例如多達(dá)5個(gè)二元醇單元（例如二甘醇鯨蠟 基醚（diglycolcetyl ether)和 / 或聚氧乙燔-3-月桂基醚（polyoxyethylene-3-lauryl ether))。可以使用二元醇或甘油的單酯，包括含有C 12-C2。烷?；╝lkanyl)或烯?；?(alkenyl)部分（例如己?；?、月桂?；?、肉豆蔻?；?、鯨蠟基、油烯基或硬脂?；┑膯熙?。 可使用的環(huán)氧乙烷縮合產(chǎn)物包括PCT
【發(fā)明者】馬克·J·赫希邁爾, 大衛(wèi)·E·安德森 申請(qǐng)人:變異生物技術(shù)公司