用于治療哮喘和其他肺病患的組合物和方法
【專利摘要】本發(fā)明提供通過施用包含如本文所公開的至少一種電動產(chǎn)生的流體(包括富含氣體的電動產(chǎn)生的流體)的治療組合物在需要其的受治療者中治療或預防特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥、或它們的癥狀(例如，哮喘、鼻炎、過敏性鼻炎(鼻呼吸道)、和慢性阻塞性肺疾病(COPD)和COPD相關(guān)病癥(例如，支氣管炎、肺氣腫、哮喘)、肺氣腫、肺炎、支氣管炎、流行性感冒、SARS、結(jié)核病和鸕鶿咳(百日咳)以及類似病癥)的組合物和方法，所述電動改變的含水流體適合于改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)，其中從而提供了治療肺病患或其癥狀。其他方面涉及治療組合物和組合治療方法，所述方法包括施用至少一種電動產(chǎn)生的流體與至少一種另外的治療劑的組合。
【專利說明】用于治療哮喘和其他肺病患的組合物和方法
[0001]本申請是國際申請?zhí)朠CT / US2008 / 081386，國際申請日2008年10月27日，進入中國國家階段日期為2010年6月25日，中國申請?zhí)?00880122809.4，發(fā)明名稱為“用于治療哮喘和其他肺病患的組合物和方法”的分案申請。
發(fā)明領(lǐng)域
[0002]本文所公開的某些實施方式涉及通過施用包含如本文所公開的至少一種電動產(chǎn)生的流體(包括富含氣體的(例如富含氧的)電動產(chǎn)生的流體)的治療組合物在需要其的受治療者中治療或預防特征為氣流阻塞或限制的至少一種肺或呼吸病患或病癥、或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀的領(lǐng)域，所述病患或病癥或其癥狀包括但不限于哮喘、鼻炎、過敏性鼻炎(例如，鼻呼吸道)、和慢性阻塞性肺疾病(COPD)和COPD相關(guān)病癥(例如，支氣管炎、肺氣腫、哮喘)、肺氣腫、肺炎、支氣管炎、流行性感冒、SARS、結(jié)核病和鸕鶿咳(whoopingcough)(百日咳(pertussis))以及類似病癥。其他方面涉及治療組合物以及使用其的方法，所述方法包括施用如本文所公開的至少一種電動產(chǎn)生的流體(包括富含氣體的電動產(chǎn)生的流體)與至少一種另外的治療劑(例如，支氣管擴張劑、β2-激動劑(短效的和長效的)、皮質(zhì)類固醇(吸入的和其他方式的)、抗膽堿能藥、茶堿、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、沙美特羅、腎上腺素、Hl拮抗劑、解充血藥和異丙托溴銨等)或治療的組合；或與其他組合(例如，抗膽堿能藥和β2-激動劑(短效的和長效的)的組合。
[0003]相關(guān)申請的交叉引用
[0004]本申請要求2007年10月25日提交的美國臨時專利申請系列第60 / 982，719號、2007年10月25日提交的第60 / 982，720號、2008年4月28日提交的第61 / 048, 332號、2008年4月28日提交的第61 / 048, 340號、2008年4月28日提交的第61 / 048, 347號、2008年4月28日提交 的61 / 048, 404號和2008年4月28日提交的第61 / 048, 416號的優(yōu)先權(quán)益，通過引用將這些臨時專利申請系列整體并入本文。
[0005]發(fā)明背景
[0006]包括哮喘和COPD的慢性肺病患影響著世界上數(shù)百萬的人們。需要慢性肺病患的有效治療。
[0007]哮喘。哮喘是與人和其他哺乳動物相關(guān)的涉及呼吸系統(tǒng)的慢性病癥，其中氣道通常對如下的一種或多種觸發(fā)因素反應(yīng)而有時阻塞，變得發(fā)炎并積聚過量粘液:暴露于環(huán)境刺激物(例如，過敏原)、冷空氣、暖空氣、香料、濕空氣、運動或勞累、情感壓力等。在兒童中，病毒性疾病(例如，普通感冒)是常見的觸發(fā)因素。下列癥狀的一種或多種可能存在于哮喘中:氣道變窄、呼吸困難(呼吸急促，S0B)、哮鳴(wheezing)、喘鳴(stridor)、胸部緊迫感、咳嗽和不能從事強體力活動。然而，具有重度SOB和肺緊迫(tightening of the lungs)的一些哮喘患者既不哮鳴也不喘鳴，并且它們的癥狀可能與C0PD型疾病混淆。哮喘性氣道狹窄通常對支氣管擴張劑反應(yīng)。在發(fā)作之間，大部分患者感覺良好，但是可能具有輕度癥狀并且它們在較長時間的運動后可能保持比未受感染的個體急促的呼吸。哮喘癥狀的范圍從輕度到威脅生命，但是通常可以用藥物與環(huán)境變化的組合控制。然而，對哮喘的關(guān)注在日益增加，尤其在發(fā)達國家，因為其流行性迅速增加，影響著多達四分之一的城市兒童。
[0008]在一些情況下，醫(yī)師可以基于包括過敏的存在或過敏歷史或哮喘家族史在內(nèi)的受治療者的臨床歷史和檢查來診斷哮喘。此外，醫(yī)師可以使用最大流量計來測定肺功能的量。在緊急條件下，醫(yī)師可以使用二氧化碳分析儀(capnographer)來測量呼出的二氧化碳水平和/或使用測定血液中溶解的氧水平的脈搏血氧定量法(puls oximetry)。
[0009]諸如氣道狹窄和粘液產(chǎn)生的幾種哮喘癥狀可能是支氣管氣道中免疫反應(yīng)(如炎癥反應(yīng))的結(jié)果。(Maddox 和 Schwartz, Ann.Rev.Med.,53; 477-98 ；2002)。在哮喘性肺的情況下，某些觸發(fā)因素或刺激物會引起支氣管收縮。接下來發(fā)生炎癥，它會進一步導致氣道變窄和過量的粘液產(chǎn)生。這一系列的事件導致了咳嗽和胸部緊迫。
[0010]外源性或過敏性哮喘比內(nèi)源性(非過敏性)哮喘更常見(所有情況中的90%)并且通常在兒童中發(fā)展(約80%的具有哮喘的兒童還具有記錄的過敏并且通常還存在其他過敏病癥，如鼻過敏或濕疹)。過敏性哮喘通常在成年早期消退。然而，75%的情況下，哮喘會在后來再發(fā)。內(nèi)源性哮喘代表所有情況的約10%，其通常在30歲后發(fā)展，并且通常不與過敏相關(guān)。女性更常被涉及并且許多病例似乎是在呼吸道感染之后發(fā)生的。該病癥可以是難以治療并且癥狀通常是慢性的并且持續(xù)全年的。運動誘導的哮喘是由運動或強體力活動觸發(fā)的一類哮喘。許多具有哮喘的人經(jīng)歷某種程度的運動癥狀，但是許多沒有哮喘的人僅在運動時才會發(fā)生癥狀。在稱為咳嗽變異性哮喘的哮喘類型中，哮喘時重度咳嗽是主要癥狀。咳嗽變異性哮喘的哮喘觸發(fā)因素通常為呼吸道感染和運動。
[0011]某些實施方式涉及通過減輕哮喘的至少一種癥狀來預防和/或治療哮喘。有一百余種基因與哮喘相關(guān)，它們中的一些還參與了其他炎癥反應(yīng)。(Ober, Hoffjan, GenesImmunol.7(2):95-100 ；2006)。這些基因中的一些為:GSTM1、IL10、CTLA4、SPINK5、LTC4S、LTA、GRPA, N0D1、CC16、GSTPl、STAT6、N0S1、CCL5、TBXA2R、TGFBl、IL4、IL13、CD14、ADRB2 ( β -2 腎上腺素能受體)、HLA-DRB1、HLA-DQB1、TNF、FCER1B、IL4R、ADAM33 以及其他基因。
[0012]之前，哮喘的最有效治療是鑒定刺激物并限制或消除向它們的暴露。其他特異性治療包括使用以例如吸入器或霧`化器形式施用的支氣管擴張劑。還可以施用吸入的皮質(zhì)類固醇、糖皮質(zhì)激素(即，環(huán)索奈德、倍氯米松、布地奈德、氟尼縮松、氟替卡松、莫米松、曲安西龍等)、口服白三烯調(diào)節(jié)劑(modifier)(即，孟魯司特、扎魯司特、普侖司特、齊留通等)、肥大細胞穩(wěn)定劑(色甘酸鹽、奈多羅米等)、β-2激動劑(即，沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、特布他林、比托特羅、氟替卡松、沙美特羅、布地奈德、福莫特羅等)、腎上腺素、麻黃堿或甲基黃嘌呤(即，茶堿、氨茶堿等)。在重度哮喘中，在重度發(fā)作期間可以將口服糖皮質(zhì)激素加入這些治療中。此外，可以施用抗膽堿能藥物(即，異丙托溴銨、氧托銨(oxitropium)、噻托銨(tiotropium)等)?？菇M胺劑或IgE阻斷劑(如奧馬珠單抗)也可能有益于經(jīng)受“過敏誘導的”哮喘的哮喘患者，在“過敏誘導的”哮喘中受治療者的哮喘是由對特定過敏原的免疫反應(yīng)觸發(fā)的。
[0013]因此，本領(lǐng)域內(nèi)存在對用于治療哮喘的新組合物和方法的顯著需要。
[0014]C0PD.慢性阻塞性肺疾病(COPD) —般描述特征為氣流阻塞或限制的一組呼吸道疾病。與COPD相關(guān)的疾病包括支氣管炎、肺氣腫、哮喘和肺癌。在美國主要疾病中COPD是死亡的第四大起因，并且是重大殘疾的第二大起因。預計到2020年COPD會變?yōu)樗劳龅牡谌笃鹨颉Ｔ诿绹磕暧捎贑OPD而發(fā)生120，000余例死亡，這使得COPD成為前五大死亡因素中僅有的死亡率不斷增加的疾病(從1965年至2002年死亡率增加了 183% )。美國醫(yī)護經(jīng)濟面臨著不斷增加的COPD費用。每年有多于300億的美元花費在醫(yī)療費用、住院、醫(yī)師門診和其他間接費用(例如，工作日的損失和過早的死亡)上并且由于COPD的流行性繼續(xù)升高，這些費用還在繼續(xù)逐步上升。
[0015]慢性支氣管炎。慢性支氣管炎是一種炎癥，并且之后支氣管襯層形成疤痕。支氣管炎癥導致收縮和氣流減少。通常，慢性支氣管炎還包括咳嗽時大量粘液的產(chǎn)生。一旦刺激支氣管一段時間，則襯層便會增厚，氣流可能甚至進一步受阻，導致疤痕形成。疤痕形成容許具有微生物的繁殖場所。
[0016]肺氣腫。肺氣腫是由于肺中氣囊(肺泡)的破壞引起的。肺泡的損壞是不可逆的，并且由于氣囊受損，較少的氧被轉(zhuǎn)移到血流，從而引起呼吸急促。隨后，肺喪失其彈性，并且受治療者可能經(jīng)歷呼氣困難和持續(xù)咳嗽。
[0017]肺感染.包括病毒感染、細菌感染或真菌感染在內(nèi)的肺感染也可能導致肺、環(huán)繞肺的胸膜腔、肺泡和/或支氣管通路的炎癥和/或疤痕形成。具體地，肺炎、流行性感冒、SARS、結(jié)核病和鸕鶿咳(百日咳)全都可能由于肺中的炎癥和疤痕形成而導致慢性肺問題。
[0018]鼻炎和過敏性鼻炎鼻炎是包括鼻內(nèi)區(qū)域的刺激和炎癥的病癥。鼻炎的主要癥狀是流鼻水，它是由因病毒、細菌或刺激物所導致的鼻粘膜的慢性或急性炎癥引起的。這種炎癥導致過量的粘液產(chǎn)生、產(chǎn)生流鼻水、鼻充血和后鼻滴涕。目前有5千萬多的美國人是受害者。除了影響鼻、喉和眼之外，鼻炎還與睡眠問題、耳部問題相關(guān)，并且甚至與學習問題有聯(lián)系。鼻炎是典型地由空氣傳播的過敏原引起的組胺增加所引起的，它影響個體的鼻、喉或目艮，并引起這些區(qū)域內(nèi)流體產(chǎn)生增加。過敏性鼻炎(花粉癥)是在對特定季節(jié)性植物的花粉、空氣散播的化學物質(zhì)和塵粒敏感的人中由這些物質(zhì)所引起的。過敏性鼻炎的癥狀包括噴嚏、流鼻水和眼部瘙癢、感染、炎癥、粘液產(chǎn)生和/或分泌、灼熱(burning)和瘙癢。
[0019]因此，本領(lǐng)域內(nèi)存在對用于治療C0PD、C0ro相關(guān)病癥(例如，支氣管炎、肺氣腫、哮喘)、肺感染、鼻炎和過敏性鼻炎的新組合物和方法的顯著需要。
[0020]胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(TSLP)。胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(TSLP)是觸發(fā)樹突細胞介導的Th2型炎癥反應(yīng)的IL-7樣細胞因子并且它被認為是過敏性炎癥的主要開關(guān)。TSLP是B細胞和T細胞二者的發(fā)育和成熟的必需生長因子(integral growth factor)。具體地，鼠TSLP支持B淋巴細胞生成并且是B細胞增殖所需的。鼠TSLP在控制T細胞受體Y (TCR.Y.)基因座的重排中起關(guān)鍵作用并且對胸腺細胞和成熟T細胞具有明顯的刺激作用 ο 參見，例如，F(xiàn)riend 等人，Exp.Hematol.，22:321-328,1994 ；Ray 等人，Eur.J.1mmunol.，26: 10-16,1996 ;Candeias 等人，Immunology Letters, 57:9-14,1997。
[0021] TSLP具有類似于IL-7的細胞因子活性。例如，在刺激B細胞增殖反應(yīng)中TSLP可以代替IL-7 (Friend等人，如上)。盡管TSLP和IL-7介導對靶細胞類似的作用，但是它們似乎具有不同的信號傳導途徑并且它們的生物學反應(yīng)可能不同。例如，盡管TSLP調(diào)節(jié)STAT5的活性，但是它不能激活任何Janus家族酪氨酸激酶成員(Levin等人，J.1mmunol., 162:677-683, 1999)。
[0022]TSLP對樹突細胞和TNF生成的作用。在2001年克隆了人TSLP和人TSLP受體之后，發(fā)現(xiàn)人TSLP有效地激活不成熟的⑶Ilc+髓樣樹突細胞(mDC)(參見，例如，Reche等人，J.Tmmunol.，167:336-343, 2001 和 Soumelis 等人，Nat.Tmmunol.，3:673-680, 2002)。Th2細胞在免疫學課本和文獻中一般被定義為產(chǎn)生IL-4、IL-5、IL-13和IL-1O的⑶4+T細胞。并且諸如⑶4+T細胞的Thl細胞產(chǎn)生IFN- Y并且有時產(chǎn)生TNF。當TSLP-DC用于體外刺激首次實驗的同種異型CD4+T細胞時，誘導了獨特類型的Th2細胞，該獨特類型的Th2細胞產(chǎn)生經(jīng)典的Th2細胞因子IL-4、IL-5和IL-13以及大量的TNF，但是極少或沒有IL-1O或干擾素-Y (Reche 等人,如上)(還參見，例如，Soumelis 等人，Nat.1mmunol.，3:673-680,2002)。TNF通常不被認為是Th2細胞因子。然而，TNF在哮喘性氣道(asthmatic airway)中是突出的并且與TNF分泌增加相關(guān)的基因型伴隨有哮喘風險的增加。參見Shah等人，(Clin.Exp.Allergy.,25:1038-1044,1995 jPMoffatt，M.F.和 Cookson，ff.0.，Hum.Mo 1.Genet.,6:551-554,1997。
[0023]TSLP誘導人mDC在mRNA和蛋白兩種水平表達TNF超家族蛋白0X40L (Ito等人，J.Exp.Med.,202:1213-1223)。TSLP-DC的0X40L表達對于炎性Th2細胞的形成很重要。因此，TSLP激活的DC通過上調(diào)0X40L而不誘導Thl-極化細胞因子(Thl-polarizingcytokine)產(chǎn)生而產(chǎn)生Th2許可性(Th2_permissive)微環(huán)境。出處同上。
[0024]TSLP表達、過敏原特異性反應(yīng)和哮喘。早期研究已顯示人原代皮膚角質(zhì)形成細胞、支氣管上皮細胞、平滑肌細胞和肺成纖維細胞高度表達TSLP mRNA(Soumelis等人，Nat.1mmunol.，3:673_680，2002)。由于TSLP主要在表皮的頂層的角質(zhì)形成細胞中表達，所以這表明TSLP產(chǎn)生是完全分化的角質(zhì)形成細胞的特征。在具有特應(yīng)性皮炎的患者中TSLP的表達與朗格漢斯細胞遷移和原位激活有關(guān)，這表明TSLP可以直接促進這些細胞的激活，這些激活的細胞隨后可以遷移到引流淋巴結(jié)并引發(fā)過敏原特異性反應(yīng)。出處同上。在最近的研究中，通過原位雜交顯示TSLP表達在哮喘性氣道中增加并且其與Th2吸引性趨化因子表達和疾病嚴重程度兩者都相關(guān)，這提供了 TSLP和哮喘之間的聯(lián)系(Ying等人，J.1mmunol.，174:8183-8190,2005)。
[0025]TSLP受體(TSLPR)和過敏反應(yīng)、哮喘。TSLP受體(TSLPR)是大約50kDa的蛋白并且與共同Y-鏈具有顯著的類似性。TSLPR是新的I型細胞因子受體，它與IL-7Ra (⑶127)結(jié)合構(gòu)成TSLP受體復合體，如在例如Pandey等人,Nat.1mmunol., 1:59-64, 2000中所描述的。TSLPR在其羧基末端附近具有可以與磷酸化的STAT5締合并且在與TSLP結(jié)合時介導多種生物學功能的酪氨酸殘基(Isaksen等人，J.1mmunol.，168 =3288-3294,2002)。
[0026]人TSLPR是由單核細胞和⑶I Ic+樹突細胞表達的，并且TSLP結(jié)合誘導TH2細胞吸引性趨化因子CCL17和CCL22的表達。此外，如上文所述的，TSLPR誘導的樹突細胞的激活間接導致了 Th2細胞因子IL-4、IL-5和IL-13的分泌增加，TH2細胞因子IL_4、IL-5和IL-13的分泌增加可能是調(diào)節(jié)⑶4+T細胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定所必需的。在小鼠中，TSLPR的缺乏對淋巴細胞數(shù)目沒有影響。然而，TSLPR和共同Y-鏈的缺乏導致了與只缺乏共同Y-鏈的小鼠相比較少的淋巴細胞。參見，Reche等人,J.1mmunol.，167:336-343, 2001和Soumelis等人，Nat.1mmunol.,3:673-680, 2002。
[0027]研究已發(fā)現(xiàn)TSLP和TSLPR在小鼠中過敏性疾病的引發(fā)中起關(guān)鍵作用。在一個研究中，顯示被改造為在皮膚中過表達TSLP的小鼠發(fā)展了特應(yīng)性皮炎，該特應(yīng)性皮炎的特征為含有炎性滲液的濕疹性皮膚損傷、循環(huán)的Th2細胞顯著增加和血清IgE增加(Yoo等人，J.Exp.Med.,202:541-549`, 2005)。該研究表明在小鼠中TSLP可直接激活DC。在Li等人進行的另一研究中，研究組證實了在皮膚中過表達TSLP的轉(zhuǎn)基因小鼠發(fā)展了特應(yīng)性皮炎，這加固了 TSLP與特應(yīng)性皮炎發(fā)展之間的聯(lián)系。
[0028]另一組研究顯示TSLP是在小鼠中體內(nèi)引發(fā)過敏性氣道炎癥所需要的。在一個研究中，Zhou等人顯示TSLP轉(zhuǎn)基因的午餐特異性(lunch specific)表達誘導過敏性氣道炎癥(哮喘)，該過敏性氣道炎癥的特征為白細胞(包括Th2細胞)的大量浸潤、杯形細胞超常增生和表皮下纖維化以及血清IgE水平增加(Zhou等人，Nat.1mmunol.，6:1047-1053，2005)。然而，相反的是，缺乏TSLPR的小鼠沒有對吸入的抗原反應(yīng)而發(fā)展哮喘(Zhou等人，如上和 Al-Shami 等人，J.Exp.Med.，202:829-839, 2005)。因此，這些研究一起表明 TSLP是在小鼠中引發(fā)過敏性氣道炎癥所需要的。
[0029]此外，在Yong-Jun等人進行的研究中，顯示表皮細胞來源的TSLP在人中觸發(fā)DC介導的炎性Th2反應(yīng)，這表明TSLP代表了表皮細胞-DC界面處過敏性炎癥的主要開關(guān)(Yong-Jun 等人，J.Exp.Med.，203 =269-273, 2006)。
[0030]在最近的研究中，顯示通過抑制TSLPR調(diào)節(jié)DC功能降低了小鼠中的嚴重程度(Liyun Shi 等人，Clin.1mmunol.，129:202-210, 2008)。在另一組研究中，顯示 TSLPR 不僅在DC中表達，還在巨噬細胞、肥大細胞和⑶4+T細胞中表達(Rochman等人，J.1mmunol.,178:6720-6724,2007 ^Omori Μ.和 Ziegler S.，J.1mmunol.，178:1396-1404，2007)。為了查明TSLPR中和對CD4+T細胞或過敏性炎癥中的其他效應(yīng)細胞的直接作用，Liyun Shi等人進行了其中在過繼轉(zhuǎn)移到首次實驗的小鼠的氣道之前用抗TSLPR體外處理加入OVA的DC的實驗。先前已發(fā)現(xiàn)OVA-DC觸發(fā)強的嗜酸性氣道炎癥并伴隨著諸如IL-4和IL-5的Th2細胞因子的大量產(chǎn)生(Sung 等人,J.1mmunol.，166:1261-1271 和 Lambrecht 等人,J.Clin.1nvest.,106:551_559，2000)。然而，用抗TSLPR預處理0VA-DC導致嗜酸性粒細胞和淋巴細胞浸潤以及IL-4和IL-5水平顯著降低，這進一步說明了 TSLPR在DC引發(fā)的過敏性疾病中所起的作用。這種結(jié)果還支持阻斷DC上的TSLPR將有助于控制氣道的炎癥(Liyun Shi等人，如上)。
`[0031]有不斷增加的大量實驗表明了 TSLP / TSLPR在各種生理過程和病理過程中的作用。TSLP的生理作用包括調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)，尤其是刺激B細胞和T細胞增殖、發(fā)育和成熟。TSLP在過敏性哮喘的病理生物學中起關(guān)鍵作用，并且局部抗體介導的TSLP受體阻斷發(fā)揮了減輕過敏性疾病的功能。因此據(jù)信TSLP和TSLP受體之間的相互作用在如下的許多生理疾病過程中是重要的:過敏性炎癥、具有特應(yīng)性皮炎或特應(yīng)性濕疹的患者的皮膚損害以及哮喘。
[0032]金屬蛋白酶金屬蛋白酶是在例如N.M.Hooper FEBS Letters354:1-6，1994中所述被分類為家族和亞家族的蛋白酶(酶)超家族。金屬蛋白酶的實例包括基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)，如膠原酶(MMP1、MMP8、MMP13)、明膠酶(MMP2、MMP9)、溶基質(zhì)蛋白酶(MMP3、MMP10、MMP II)、基質(zhì)溶解因子(MMP7)、金屬彈性蛋白酶(MMP12)、釉質(zhì)溶解因子(enamelysin) (MMP19)、MT-MMP (MMP14, MMP15、MMP16、MMP17) ；reprolysin 或蛇毒金屬蛋白酶(adamalysin)或MDC家族，MDC家族包括分泌酶和脫落酶(sheddase)，如TNF轉(zhuǎn)化酶(ADAM10和TACE);蝦紅素家族，它包括諸如前膠原加工蛋白酶(PCP)的酶；以及其他金屬蛋白酶，如聚集蛋白聚糖酶、內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶家族和血管緊張素轉(zhuǎn)化酶家族。
[0033]總之，已知金屬蛋白酶裂解大范圍的基質(zhì)底物，如13父原、蛋白聚糖和纖連蛋白。金屬蛋白酶參與了生物學上重要的細胞介質(zhì)如腫瘤壞死因子(TNF)的加工或分泌；和生物學上重要的膜蛋白如低親和力IgE受體CD23的翻譯后蛋白水解加工或脫落(參見，例如N.M.Hooper 等人，Biochem.J.321 =265-279,1997)。
[0034]因此，不奇怪的是，據(jù)信金屬蛋白酶在涉及組織重塑(例如，胚胎發(fā)育、骨形成、月經(jīng)期間子宮重塑、等)的多種生理疾病過程中很重要。此外，一種或多種金屬蛋白酶活性的抑制在如下的這些疾病或病癥中可能很有益，例如:各種炎性疾病和過敏性疾病，如關(guān)節(jié)炎癥(尤其是類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎和痛風)、胃腸道炎癥(尤其炎性腸病、潰瘍性結(jié)腸炎和胃炎)、皮膚炎癥(尤其牛皮癬、濕疹、皮炎)；腫瘤轉(zhuǎn)移或侵襲；與胞外基質(zhì)不受控降解相關(guān)的疾病，如骨關(guān)節(jié)炎；骨吸收疾病(如骨質(zhì)疏松和佩吉特(Paget)病)；與異常血管發(fā)生相關(guān)的疾病；與糖尿病、牙周病(如齦炎)、角膜潰瘍、皮膚潰瘍、手術(shù)后病癥(如結(jié)腸吻合)和皮膚創(chuàng)傷愈合相關(guān)的膠原重塑增強；中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)的脫髓鞘疾病(如多發(fā)性硬化)；阿爾茨海默??；在諸如再狹窄和動脈粥樣硬化的心血管疾病中觀察到的胞外基質(zhì)重塑；哮喘；鼻炎；和慢性阻塞性肺疾病(COPD)。
[0035]MMP12還被稱為巨噬細胞彈性蛋白酶或金屬彈性蛋白酶，它最初是在小鼠中克隆的(Shapiro 等人，Journal of Biological Chemistry267:4664,1992)并且在 1995年相同的小組還在人中克隆了 MMP12。MMP12優(yōu)選在活化的巨噬細胞中表達，并且已顯示其由吸煙者的肺泡巨卩遼細胞分泌(Shapiro等人，1993, Journal of BiologicalChemistry, 268:23824)并且還由動脈粥樣硬化病變中的泡沫細胞分泌(Matsumoto等人，Am.J.Pathol.153:109，1998)。COPD的小鼠模型基于用吸香煙激發(fā)小鼠6個月，每天兩只香煙，一周六天。在這種處理之后，野生型小鼠發(fā)展了肺氣腫。當在這個模型中測試MMPl2敲除 小鼠時，它們不發(fā)展顯著的肺氣腫，這有力地表明了 MMP12是COPD發(fā)病中的關(guān)鍵酶。MMP諸如MMP12在COPD (肺氣腫和支氣管炎)中的的作用在Anderson和Shinagawa，1999,Current Opinion in Ant1-1nflammatory and Immunomodulatory InvestigationalDrugs (抗炎和免疫調(diào)節(jié)考察藥物的現(xiàn)有觀點)I (I):29-38中有所討論。最近發(fā)現(xiàn)抽煙增加了人頸動脈斑塊中的巨噬細胞浸潤和巨噬細胞來源的MMP12的表達(Matetzky S，F(xiàn)ishbeinM C 等人，Circulationl02:(18)，36-39 增刊 S，Oct.31,2000)。
[0036]MMP9-(明膠酶B ;92kDa_IV型膠原酶；92kDa明膠酶)是一種分泌蛋白，它在1989年首次被純化，然后被克隆并測序(S.MWilhelm等人，J.Biol.Chem.264(29):17213-17221,1989 ；在 J.Biol.Chem.265 (36):22570,1990 中發(fā)表的勘誤表)(對于此蛋白酶的詳細信息和參考的綜述參見T.H.Vu&Z.Werb (1998)(于:MatrixMetalloproteinases, 1998,由 W.C.Parks&R.P.Mecham編輯，pp.115-148,Academic Press.1SBN0-12-545090-7)。
[0037]MMP9的表達通常限制在少數(shù)的細胞類型，這些細胞類型包括滋養(yǎng)層細胞、破骨細胞、中性粒細胞和巨噬細胞(Vu&Werb，如上)。然而，其表達可以在這些細胞和其他細胞類型中被幾種介質(zhì)誘導，所述介質(zhì)包括將細胞暴露于生長因子或細胞因子。這些是與常參與啟動炎癥反應(yīng)的介質(zhì)相同的介質(zhì)。正如其他分泌MMP —樣，MMP9是以無活性的酶原釋放的，酶原隨后被裂解形成具有酶活性的酶。體內(nèi)這種活化所需的蛋白酶是未知的?；钚訫MP9與無活性酶的平衡在體內(nèi)進一步由與天然存在的蛋白TIMP-1 (組織金屬蛋白酶-1的抑制劑)的相互作用來調(diào)控。--ΜΡ-1與MMP-9的C末端區(qū)結(jié)合，導致MMP9的催化結(jié)構(gòu)域的抑制。前MMP9 (ProMMP9)的誘導表達的平衡、前MMP9至活性MMP9的裂解與--ΜΡ-1的存在組合決定了局部位置存在的催化活性的MMP9的量。蛋白水解活性的MMP9攻擊包括下列的底物:明膠、彈性蛋白、天然的IV型膠原和V型膠原；它對天然的I型膠原、蛋白聚糖或?qū)诱尺B蛋白沒有活性。
[0038]不斷增加的數(shù)據(jù)表明了 MMP9在多種生理和病理過程中的作用。生理作用包括胚胎移植早期胚胎滋養(yǎng)層細胞穿過子宮上皮的侵襲；在骨生長和發(fā)育中的一些作用；和炎性細胞從脈管系統(tǒng)向組織中的遷移。
[0039]使用酶聯(lián)免疫測定測得在未治療的哮喘患者中的流體和AM上清液中的MMP9釋放與其他群體的流體和AM上清液中的MMP9釋放相比顯著增強。(Am.J.Resp.Cell&Mol.Biol.，5:583-591,1997)。而且，在某些其他的病理狀態(tài)下觀察到了 MMP9表達增加，從而表明在如下的疾病過程中的MMP9導致了諸如心肌梗塞的急性冠狀動脈病癥:C0PD、關(guān)節(jié)炎、腫瘤轉(zhuǎn)移、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化和動脈粥樣硬化中的斑塊破裂(還參見W007087637A3，通過引用并入本文)。
[0040]最近，已經(jīng)證明與健康的對照受治療者相比，MMP-9水平在具有穩(wěn)定的哮喘的患者中顯著增加，并且在具有急性哮喘的患者中甚至更高。MMP-9在氣道炎癥細胞浸潤和氣道高反應(yīng)性誘導中起關(guān)鍵作用，這表明MMP-9可能在誘導和維持哮喘中具有重要作用(Vignola等人，Sputum metalloproteinase-9 / tissue inhibitor of metalloproteinase-lratiocorrelates with airflow obstruction in asthma and chronic bronchitis (疲金屬蛋白酶-9 /金屬蛋白酶-1組織抑制劑的比率與哮喘和慢性支氣管炎中的氣流阻塞相關(guān))，Am J Respir Crit Care Medl58: 1945-1950,1998 ；Hoshino 等人，Inhaledcorticosteroids decrease subepithelial collagen deposition by modulationof the balance between matrix metalloproteinase-9and tissue inhibitor ofmetal loprote inase-1 express ion in asthma (吸入的皮質(zhì)類固醇通過調(diào)節(jié)哮喘中基質(zhì)金屬蛋白酶-9和金屬蛋白酶 -1組織抑制劑表達之間的平衡來降低上皮下的膠原沉積)，J Allergy Clin Immunol 104:356-363,1999 ;Simpson 等人，Differential proteolyticenzyme activity in eosinophilic and neutrophilic asthma(在嗜酸性哮喘和嗜中性哮喘中的差異性蛋白水解酶活性)，Am J Respir Crit Care Medl72 =559-565, 2005 ；Lee等人，A murine model of toluene diisocyanate-1nduced asthma can be treatedwith matrix metalloproteinase inhibitor(二異氰酸甲苯酯誘導的哮喘的鼠科模型可以用基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑來治療)，J Allergy Clin Immunoll08:1021-1026,2001 ；和 Lee 等人，Matrix metalloproteinase inhibitor regulates inflammatory cellmigration by reducing ICAM-1and VCAM-1expression in a murine model of toluenedi isocyanate-1nduced asthma (基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑通過降低二異氰酸甲苯酯誘導的哮喘的鼠科模型中的ICAM-1和VCAM-1表達來調(diào)控炎性細胞遷移)，J Allergy ClinImmunol2003;111:1278-1284)。
[0041]發(fā)明概述
[0042]具體方面提供通過施用包含如本文所公開的至少一種電動產(chǎn)生的流體(包括富含氣體的電動產(chǎn)生的流體)的治療組合物在需要其的受治療者中治療或預防至少一種肺病患或其癥狀的組合物和方法，所述肺病患或其癥狀包括但不限于哮喘、鼻炎、過敏性鼻炎(例如，鼻呼吸道)、和慢性阻塞性肺疾病(COPD)和COPD相關(guān)病癥(例如，支氣管炎、肺氣腫、哮喘)、肺氣腫、肺炎、支氣管炎、流行性感冒、SARS、結(jié)核病和鴻鶴咳(whooping cough)(百日咳(pertussis))以及類似病癥。其他方面涉及治療組合物以及使用其的方法，所述方法包括施用如本文所述的至少一種電動產(chǎn)生的流體(包括富含氣體的電動產(chǎn)生的流體)與至少一種另外的治療劑(例如，支氣管擴張劑、β2-激動劑(短效的和長效的)、皮質(zhì)類固醇(吸入的或其他方式的)、抗膽堿能藥、茶堿、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、沙美特羅、腎上腺素、Hl拮抗劑、解充血藥和異丙托溴銨等)或治療的組合；或與其他組合(例如，抗膽堿能藥和β2-激動劑(短效的和長效的))的組合。
[0043]具體方面提供用于治療特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀的方法，所述方法包括施用治療有效量的電動改變的含水流體給需要其的受治療者，所述電動改變的含水流體適合于改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對受治療者的細胞中的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)，其中從而提供了治療特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀。在某些方面，電動改變的含水流體的改變包括將該流體暴露于流體動力誘導的、局部化的電動效應(yīng)。在【具體實施方式】中，暴露于局部化的電動效應(yīng)包括暴露于電壓脈沖和電流脈沖的至少一個。在某些方面，將流體暴露于流體動力誘導的、局部化的電動效應(yīng)包括將流體暴露于用來產(chǎn)生該流體的裝置的誘導電動效應(yīng)的結(jié)構(gòu)部件。
[0044]在該方法的某些方面中，肺或呼吸病患或病癥或其癥狀包括選自由以下組成的組的至少一種:哮喘、鼻炎、過敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和coro相關(guān)病癥、肺氣腫、肺感染、肺炎、支氣管炎、流行性感冒、SARS、結(jié)核病和鸕鶿咳(百日咳)。在該方法的某些方面，特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥或它們的癥狀包括選自由以下組成的組的至少一種:肺癌、由充血性心力衰竭引起的肺水腫、肺創(chuàng)傷和肺挫傷、和由任何原因引起的肺纖維化。在【具體實施方式】中，肺或呼吸病患或病癥包括哮喘。在某些實施方式中，哮喘包括下列的至少一種:過敏性(外源性)哮喘、非過敏性(內(nèi)源性)哮喘、運動誘導的哮喘和咳嗽變異性哮喘。在某些實施方式中，肺或呼吸病患或病癥包括C0PD。在某些方面，施用是通過吸入進行的。
`[0045]在某些方面，電動改變的含水流體包括電動改變的富含氧的水。
[0046]所述方法的具體方面還包括組合治療，其中將至少一種另外的治療劑施用給患者。在某些方面，所述至少一種另外的治療劑選自由以下組成的組:由β2-激動劑和抗膽堿能藥組成的支氣管擴張劑，所述β2_激動劑包括沙丁胺醇(albuterol)、左旋沙丁胺醇、批布特羅、阿福特羅(artformoterol)、福莫特羅、沙美特羅、沙丁胺醇(salbutamol)、特布他林、比托特羅、氟替卡松、布地奈德，所述抗膽堿能藥包括異丙托銨和異丙托溴銨、氧托銨和噻托銨(tiotropium);皮質(zhì)類固醇，糖皮質(zhì)激素(包括口服的、系統(tǒng)性的和吸入的糖皮質(zhì)激素)并且包括倍氯米松、布地奈德、氟尼縮松、氟替卡松、莫米松、曲安西龍、甲基潑尼松龍(methyprednisolone)、潑尼松龍、潑尼松、環(huán)索奈德；白三烯調(diào)節(jié)劑，包括孟魯司特、扎魯司特、普侖司特和齊留通；肥大細胞穩(wěn)定劑，包括色甘酸鈉(cromolyn)、色甘酸鹽和奈多羅米；腎上腺素、麻黃堿、甲基黃嘌呤(包括茶堿、氨茶堿)；組合藥物，包括異丙托銨和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特羅、布地奈德和福莫特羅；抗組胺劑，包括羥嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪和氫化可的松；免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)藥物，包括他克莫司和吡美莫司；環(huán)孢菌素；硫唑嘌呤；麥考酚酸酯；IgE阻斷劑，包括奧馬珠單抗；以及它們的組合。在具體實現(xiàn)方式中，所述至少一種另外的治療劑選自由以下組成的組:短效β2_激動劑、長效β2_激動劑、抗膽堿能藥、皮質(zhì)類固醇、系統(tǒng)性的皮質(zhì)類固醇、肥大細胞穩(wěn)定劑、白三烯調(diào)節(jié)劑、甲基黃嘌呤以及它們的組合。在某些實施方式中，所述至少一種另外的治療劑選自由沙丁胺醇、布地奈德和它們的活性衍生物組成的組。在具體方面，所述至少一種另外的治療劑選自由TSLP拮抗劑、TSLPR拮抗劑和它們的組合組成的組。在某些實施方式中，拮抗劑選自由以下組成的組:對TSLP或TSLP受體特異性的中和抗體、可溶性TSLP受體分子、TSLP受體融合蛋白、TSLPR-免疫球蛋白Fe分子以及它們的組合。
[0047]在該方法的具體方面，改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能包括改變膜相關(guān)蛋白的構(gòu)象、配體結(jié)合活性或催化活性。在某些實施方式中，膜相關(guān)蛋白包括選自由以下組成的組的至少一種:受體、跨膜受體、離子通道蛋白、細胞內(nèi)附著蛋白、細胞黏著蛋白和整聯(lián)蛋白。在某些方面，跨膜受體包括G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)，并且在具體方面，G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)與G蛋白的α亞基(例如，選自由以下組成的組的至少一種=GapGapGat^PGa12)相互作用。在【具體實施方式】中，所述至少一種G蛋白的α亞基是Ga q。 [0048]在該方法的具體方面，改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能包括改變膜的電導率或膜電位。在某些實施方式中，調(diào)節(jié)細胞膜電導率包括調(diào)節(jié)全細胞電導，并且在某些方面，調(diào)節(jié)全細胞電導包括調(diào)節(jié)全細胞電導的至少一種電壓依賴性貢獻(voltage-depedentcontribution)。
[0049]在該方法的具體方面，細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)包括鈣依賴性細胞通信途徑或系統(tǒng)的調(diào)節(jié)(例如，包括磷脂酶C活性的調(diào)節(jié)和/或包括腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性的調(diào)節(jié))。
[0050]在該方法的具體方面，調(diào)節(jié)細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導包括調(diào)節(jié)與選自由以下組成的組的至少一種病癥或癥狀相關(guān)的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導:炎癥、哮喘、鼻炎、過敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和COPD相關(guān)病癥、肺氣腫、肺炎、支氣管炎、流行性感冒、SARS、結(jié)核病、鸕鶿咳(百日咳)、肺收縮、支氣管收縮和肺泡收縮。
[0051]該方法的某些方面包括施用給細胞網(wǎng)絡(luò)或細胞層，并且還包括其中細胞間連接的調(diào)節(jié)。在【具體實施方式】中，細胞間連接包括由以下組成的組的至少一種:緊密連接、間隙連接、黏著帶(zona adherins)和橋粒(desmasomes)。在某些方面,細胞網(wǎng)絡(luò)或細胞層包括選自由肺上皮細胞、支氣管上皮細胞和腸上皮細胞所組成的組中的至少一種。
[0052]在該方法的具體方面，電動改變的含水流體是充氧的，并且其中在該流體中的氧的存在量為大氣壓下至少8ppm、至少15, ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。
[0053]在具體方面，電動改變的含水流體包含溶劑化電子和電動改性的或帶電的氧類(oxygen species)中的至少一種。在某些實施方式中，溶劑化電子或電動改性的或帶電的氧類的存在量為至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。在【具體實施方式】中，電動改變的充氧的含水流體包含通過分子氧穩(wěn)定的溶劑化電子。
[0054]在具體方面，改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)的能力在封閉的氣密容器中持續(xù)至少兩個月、至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少6個月、至少12個月、至少24個月或更長的時間。[0055]其他方面提供配制適用于治療特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥、或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀的治療劑的方法，所述方法包括:獲得適用于治療受治療者的特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀的治療劑；并將所述治療劑與一定量的電動改變的含水流體混合，所述電動改變的含水流體適合于改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對受治療者的細胞中的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)，其中從而提供了配制適用于治療特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀的治療劑。
[0056]其他方面提供藥用組合物，所述藥用組合物包含:治療劑，所述治療劑適用于治療受治療者的特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀；和一定量的電動改變的含水流體，所述電動改變的含水流體適合于改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對受治療者的細胞中的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)。
[0057]其他方面提供通過本文所公開的方法制備的藥用組合物。
[0058]附圖簡述
[0059]圖1是現(xiàn)有技術(shù)混合裝置的局部橫截面、局部框圖。
[0060]圖2是混合裝置的示例性實施方式的框圖。
[0061]圖3是將第一材料遞送到圖2的混合裝置的示例性系統(tǒng)的圖解。
[0062]圖4是圖2的混合裝置頂端部分的不完全局部橫截面視圖。
[0063]圖5是圖2的混合裝置第一側(cè)面部分的不完全橫截面視圖。
[0064]圖6是圖2的混合裝置第二側(cè)面部分的不完全局部橫截面視圖。
[0065]圖7是位于圖5的第一側(cè)面部分與圖6的第二側(cè)面部分之間的圖2的混合裝置的側(cè)面部分的不完全橫截面視圖。
[0066]圖8是圖2的混合裝置的轉(zhuǎn)子和定子的透視圖。
[0067]圖9是圖2的混合裝置的第一室內(nèi)部的透視圖。
[0068]圖10是包括泵410的替代實施方式的圖2的混合裝置的第一室內(nèi)部的不完全橫截面視圖。
[0069]圖11是圖2的混合裝置的第二室內(nèi)部的透視圖。
[0070]圖12是混合裝置的替代實施方式的側(cè)面部分的不完全橫截面視圖。
[0071]圖13是供混合裝置的替代實施方式使用的殼體的中部替代實施方式的透視圖。
[0072]圖14是供混合裝置的替代實施方式使用的軸承殼體的替代實施方式的不完全橫截面視圖。
[0073]圖15是通過垂直于旋轉(zhuǎn)軸的平面而取得的圖2的混合裝置的混合室的橫截面視圖，描繪了當轉(zhuǎn)子的穿孔接近(但不對齊)定子的孔隙時由穴泡引起的旋轉(zhuǎn)流類型。
[0074]圖16是通過垂直于旋轉(zhuǎn)軸的平面而取得的圖2的混合裝置的混合室的橫截面視圖，描繪了當轉(zhuǎn)子的穿孔對齊定子的孔隙時由穴泡引起的旋轉(zhuǎn)流類型。
[0075]圖17是通過垂直于旋轉(zhuǎn)軸的平面而取得的圖2的混合裝置的混合室的橫截面視圖，描繪了當之前對齊定子的孔隙的轉(zhuǎn)子的穿孔不再與其對齊時由穴泡引起的旋轉(zhuǎn)流類型。
[0076]圖18是轉(zhuǎn)子的替代實施方式的側(cè)視圖。
[0077]圖19通過垂直 于轉(zhuǎn)子的旋轉(zhuǎn)軸的平面而取得的放大的不完全橫截面視圖，描繪了在轉(zhuǎn)子中形成的穿孔和在定子中形成的穿孔的替代構(gòu)型。
[0078]圖20通過經(jīng)過并沿轉(zhuǎn)子的旋轉(zhuǎn)軸延伸的平面而取得的放大的不完全橫截面視圖，描繪了在轉(zhuǎn)子中形成的穿孔和在定子中形成的穿孔的構(gòu)型。
[0079]圖21通過經(jīng)過并沿轉(zhuǎn)子的旋轉(zhuǎn)軸延伸的平面而取得的放大的不完全橫截面視圖，描繪了在轉(zhuǎn)子中形成的穿孔和在定子中形成的穿孔的替代偏移構(gòu)型。
[0080]圖22是可用來構(gòu)建轉(zhuǎn)子的穿孔和/或定子的孔隙的形狀的圖解。
[0081]圖23是可用來構(gòu)建轉(zhuǎn)子的穿孔和/或定子的孔隙的形狀的圖解。
[0082]圖24是可用來構(gòu)建轉(zhuǎn)子的穿孔和/或定子的孔隙的形狀的圖解。
[0083]圖25是可用來構(gòu)建轉(zhuǎn)子的穿孔和/或定子的孔隙的形狀的圖解。
[0084]圖26是在表面附近形成的雙電層(“EDL”)的圖解。
[0085]圖27是混合室的內(nèi)部的模型的透視圖。
[0086]圖28是圖27的模型的橫截面視圖。
[0087]圖29是實驗裝置的圖解。
[0088]圖30圖解了用圖2的混合裝置中的氧處理并儲存于各自在65度華氏溫度封蓋的500ml薄壁塑料瓶和1000ml玻璃瓶中的水中的溶解氧水平。
[0089]圖3 1圖解了用圖2的混合裝置中的氧處理并儲存于均在39度華氏溫度制冷的500ml薄壁塑料瓶和1000ml玻璃瓶中的水中的溶解氧水平。
[0090]圖32圖解了用圖2的混合裝置中的氧處理的500ml飲料流體的溶解氧保留。
[0091]圖33圖解了用圖2的混合裝置中的氧處理的500ml布勞恩(braun)平衡鹽溶液的溶解氧保留。
[0092]圖34圖解了另外一個實驗，其中通過用圖2的混合裝置中的氮氣處理水，圖2的混合裝置被用來排除水中氧。
[0093]圖35圖解了在標準的溫度和壓力下通過圖2的混合裝置排除水中氧。
[0094]圖36是示例性納米籠(nanocage)的圖解。
[0095]圖37A和37B圖解了富含氧的流體的瑞利散射效應(yīng)；
[0096]圖38圖解了在富含氣體的流體和去離子對照流體的存在下促有絲分裂測定的細胞因子概況。
[0097]圖39圖解了在各種溶解氧飽和率的假單胞菌屬(Pseudomonas)細菌的生長速率的差異。
[0098]圖40A和40B圖解了使用富含氧的細胞培養(yǎng)基和非富含氣體的培養(yǎng)基的創(chuàng)傷體外愈合。
[0099]圖41A到41F示出真皮和表皮體內(nèi)創(chuàng)傷愈合的組織學橫切片。
[0100]圖42圖解了用來檢測酸性粘多糖例如透明質(zhì)酸的處理和對照的愈合創(chuàng)傷中Hale染色的表達；
[0101]圖43圖解了用來檢測處理和對照的愈合創(chuàng)傷中血管發(fā)生的血管假性血友病因子(Willebrand's Factor)染色的表達；
[0102]圖44圖解了用來檢測處理和對照的愈合創(chuàng)傷中彈性蛋白的Luna染色的檢測；
[0103]圖45圖解了對于處理和對照的愈合創(chuàng)傷的每個視野的肥大細胞的數(shù)目。
[0104]圖46圖解了在使用本發(fā)明的富含氣體的培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基的角膜成纖維細胞測定中在分開的時間點的死細胞的百分比。
[0105]圖47圖解了在聚合物袋中本發(fā)明的富含氣體的流體的儲存期限。
[0106]圖48圖解了在加壓罐充氧的流體⑴、本發(fā)明的富含氣體的流體⑵或?qū)φ杖ルx子的流體(3)的存在下使脾細胞與MOG接觸的結(jié)果。
[0107]圖49-58示出細胞因子的全血樣品評估結(jié)果。
[0108]圖59-68示出支氣管肺泡灌洗流體(BAL)樣品評估的對應(yīng)的細胞因子結(jié)果。
[0109]圖69-75示出緩激肽B2膜受體被固定到氨丙基硅烷(aminopropylsilane) (APS)生物傳感器上的研究。在圖69中指明了樣品板設(shè)置，并且根據(jù)如圖71中所指明的樣品設(shè)置對緩激肽與固定化受體的結(jié)合進行了評定。緩激肽結(jié)合的結(jié)果示于圖72中。根據(jù)在圖73中所指明的設(shè)置進一步滴定與受體結(jié)合的緩激肽。如圖74所表明的，與B2受體結(jié)合的緩激肽是濃度依賴性的，并且在本發(fā)明公開的專利的富含氣體的鹽水流體中與生理鹽水相比提高了結(jié)合親和力。與B2受體結(jié)合的緩激肽的穩(wěn)定示于圖75中。
[0110]圖76-83示出顯示本文公開的【具體實施方式】影響調(diào)節(jié)性T細胞的能力的數(shù)據(jù)。該研究涉及輻射抗原呈遞細胞并引入抗原和T細胞。
[0111]圖84示出本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體減少了鮭魚降鈣素和動物模型的血清攝入。結(jié)果與緊密連接的增強是一致的。
[0112]圖85-89示出在肺組織中的緊密連接相關(guān)蛋白的表達水平，所述肺組織是來自用于產(chǎn)生圖84的數(shù)據(jù)的動物模型。
[0113]圖90-94示出從暴露于RDC1676-01 (通過具有添加的額外的氧的本文公開的混合裝置處理的無菌鹽水；本發(fā)明公開的富含氣體的電動產(chǎn)生的流體(Rev))的人包皮角質(zhì)形成細胞獲得的數(shù)據(jù)，顯示出NOSl和N0S3、以及Nostrin、N0S3的上調(diào)。
[0114]圖95和96示出支持局部化電動效應(yīng)(電壓/電流)的數(shù)據(jù)，所述電動效應(yīng)發(fā)生在包括絕緣的轉(zhuǎn)子和定子部件的混合裝置中以允許在電動流體產(chǎn)生的過程中檢測電壓/電流效應(yīng)。
[0115]圖97A-C示出為進一步表征本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體的基本性質(zhì)而進行的核磁共振(NMR)研究的結(jié)果。電動產(chǎn)生的流體增加了報道分子海藻糖溶質(zhì)的13C-NMR線寬。
[0116]圖98和99示出為進一步表征本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體的基本性質(zhì)而進行的伏安研究(即方波伏安(圖98)和溶出極譜(圖99))的結(jié)果。在-0.14V、-0.47V、-1.02V和-1.36V觀察到對電動產(chǎn)生的流體唯一的方波伏安峰差異(相比于對照)。對于電動產(chǎn)生的Revera和Solas流體在-0.9伏特看到明顯的極譜峰,并且非電動產(chǎn)生的空白和鹽水對照流體的波譜在-0.19和-0.3伏特示出特征峰，所述特征峰在電動產(chǎn)生的流體的波譜中是不存在的。
[0117]圖100-106示出評定電動產(chǎn)生的流體的測試對上皮細胞膜極性和離子通道活性的影響的膜片鉗技術(shù)的結(jié)果。結(jié)果表明本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體影響全細胞電導的電壓依賴性貢獻。
[0118]圖107A-D和108A-D示出數(shù)據(jù)，所述數(shù)據(jù)表明本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體(例如RDC1676-00、RDC1676-01、RDC1676-02和RDC1676-03)當單獨或作為硫酸沙丁胺醇的稀釋劑在雄性豚鼠中施用時保護免受醋甲膽堿誘導的支氣管收縮。也就是說醋甲膽堿結(jié)果表明在存在本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體的情況下，沙丁胺醇的支氣管擴張延長時間多達至少26小時。
[0119]圖109-114示出為評定本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體在Brown Norway大鼠卵白蛋白敏化模型中的氣道抗炎特性而進行的布地奈德實驗的結(jié)果。本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體降低了嗜酸性粒細胞計數(shù)，示出在降低嗜酸性粒細胞計數(shù)上與布地奈德的強協(xié)同效應(yīng)，降低Penh值，提高潮氣量，降低Eotaxin (嗜酸性粒細胞趨化因子)的血液水平，在用本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體(例如Rev60)單獨或連同布地奈德一起處理所產(chǎn)生的激發(fā)后6小時顯著增強兩種主要的關(guān)鍵抗炎細胞因子ILlO和干擾素Y的血液水平，并且降低了 Rantes的系統(tǒng)水平。數(shù)據(jù)示出存在布地奈德750ug / kg與本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體(例如Rev60)的實質(zhì)的協(xié)同效應(yīng)。
[0120]圖115示出本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體(例如Revera60和Solas)分別減少支氣管上皮細胞(BEC)中的DEP誘導的TSLP受體表達大約90%和50%，而生理鹽水(NS)僅有邊際效應(yīng)。
[0121]圖116示出本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體(例如ReVera60和Solas)分別抑制支氣管上皮細胞中的DEP誘導的細胞表面結(jié)合的MMP9水平大約80%和70%，而生理鹽水(NS)僅有邊際效應(yīng)。
[0122]發(fā)明詳述
[0123]本發(fā)明的具體方面提供通過施用包含如本文所公開的至少一種電動產(chǎn)生的流體(例如，富含氣體的電動產(chǎn)生的流體)的治療組合物在需要其的受治療者中治療或預防至少一種肺病患或其癥狀的組合物和方法，所述肺病患或其癥狀包括但不限于哮喘、過敏性鼻炎(例如，鼻呼吸道)、和慢性阻塞性肺疾病(COPD)和coro相關(guān)病癥(例如，支氣管炎、肺氣腫、哮喘、濕疹)、肺氣腫、肺炎、支氣管炎、流行性感冒、SARS、結(jié)核病和鸕鶿咳(百日咳)以及類似癥狀。其他方面涉及治療組合物以及使用其的方法，所述方法包括施用如本文所公開的至少一種電動產(chǎn)生的流體(例如，富含氣體的電動產(chǎn)生的流體)與至少一種另外的治療劑(例如，支氣管擴張劑、β2-激動劑(短效的和長效的)、抗膽堿能藥、茶堿、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、沙美特羅、腎上腺素、Hl拮抗劑、解充血藥和異丙托溴銨等)或治療的組
口 ο
[0124]電動產(chǎn)牛的流體:
[0125]如本文所用的“電動產(chǎn)生的流體”是指出于本文工作實施例的目的通過本文詳細描述的示例性混合裝置(還參見US200802190088和W02008 / 052143，通過引用將二者整體并入本文)而產(chǎn)生的 申請人:發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體。如本文公開和呈現(xiàn)的資料所證明，電動流體表示相對于現(xiàn)有技術(shù)非電動流體(包括相對于現(xiàn)有技術(shù)充氧的非電動流體)(例如壓力罐充氧的流體及類似物)的新穎的且從根本上不同的流體。如在本文各方面中所公開的那樣，電動產(chǎn)生的流體具有獨特且新穎的物理和生物特性，包括但不限于以下:
[0126]在具體的方面，電動產(chǎn)生的流體是指在流體動力誘導的、局部化(例如就全部流體體積而言是非均一的)的電動效應(yīng)(例如電壓/電流的脈沖)例如本文所述的裝置部件-局部化效應(yīng)的存在下產(chǎn)生的流體。在具體的方面，所述流體動力誘導的、局部化的電動效應(yīng)與本文公開并討論的表面相關(guān)的雙層和/或流動電流效應(yīng)聯(lián)合。
[0127]在具體的方面，電動改變的含水流體適合于調(diào)節(jié)其中溶解的報告溶質(zhì)(例如海藻糖(Trehelose))的13C-NMR線寬。NMR線寬效應(yīng)是在測量例如在具體工作實施例中如本文所述的測試流體中的溶質(zhì)“翻滾”的間接方法中。
[0128]在具體的方面，電動改變的含水流體的特征為以下至少一種:在-0.14V、-0.47￥、-1.02￥和-1.36￥的任何一個的與眾不同的方波伏安峰差異；在_0.9伏特的極譜峰；以及在-0.19和-0.3伏特不存在極譜峰，在-0.19和-0.3伏特的極譜峰是具體工作實施例中本文所公開的電動產(chǎn)生的流體所獨有的。
[0129]在具體的方面，電動改變的含水流體適合于改變細胞膜電導率(例如在本文公開的膜片鉗研究中測量的全細胞電導的電壓依賴性貢獻)。
[0130]在具體的方面，電動改變的含水流體是充氧的，其中在該流體中的氧的存在量為大氣壓下至少15, ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的溶解氧。在具體的方面，電動改變的含水流體具有小于15ppm、小于IOppm的大氣壓下的溶解氧或大約環(huán)境氧水平。
[0131]在具體的方面，電動改變的含水流體是充氧的，其中在該流體中的氧的存在量在大約8ppm與大約15ppm之間，并且在這種情況中有時在本文稱作“Solas”。
[0132]在具體的方面，電動改變的含水流體包括溶劑化電子(例如，通過分子氧穩(wěn)定)和電動改性和/或帶電的氧類的至少一種，并且其中在某些實施方式中所述溶劑化電子和/或電動改性或帶電的氧類的存在量為至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。
[0133]在具體的方面，電動改變的含水流體適合于改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能(例如改變膜相關(guān)蛋白的構(gòu)象、配體結(jié)合活性或催化活性)至足以提供對細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)，其中在具體的方面，所述膜相關(guān)蛋白包括選自由以下組成的組的至少一種:受體、跨膜受體(例如G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR) ,TSLP受體、β 2腎上腺素能受體、緩激肽受體等)、離子通道蛋白、細胞內(nèi)附著蛋白、細胞黏著蛋白和整聯(lián)蛋白。在某些方面，發(fā)揮效應(yīng)的G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)與G蛋白的α亞基(例如G a s、G a 1、G a (j和G α 12)相互作用。
[0134]在具體的方面，電動改變的含水流體適合于調(diào)節(jié)細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導，包括鈣依賴性細胞通信途徑或系統(tǒng)的調(diào)節(jié)(例如磷脂酶C活性的調(diào)節(jié)或腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性的調(diào)節(jié))O
[0135]在具體的方面，電動改變的含水流體的特征為在本文工作實施例和其他地方中描述的各種生物活性(例如細胞因子、受體、酶和其他蛋白質(zhì)和細胞內(nèi)信號傳導途徑的調(diào)控)。
[0136]在具體的方面，電動改變的含水流體顯示出與沙丁胺醇和布地奈德的協(xié)同效應(yīng)，如在本文工作實施例中所示。
[0137]在具體的方面，電動改變的含水流體減少在支氣管上皮細胞(BEC)中DEP誘導的TSLP受體的表達,如本文工作實施例中所示。
[0138]在具體的方面，電動改變的含水流體抑制在支氣管上皮細胞(BEC)中DEP誘導的細胞表面結(jié)合的ΜΜΡ9水平，如本文工作實施例中所示。
[0139]在具體的方面，電動改變的含水流體的生物效應(yīng)被白喉毒素抑制，表明β阻斷、GPCR阻斷和鈣通道阻斷影響電動改變的含水流體的活性(例如關(guān)于調(diào)節(jié)性T細胞的功能)，如在本文工作實施例中所示。
[0140]在具體的方面，電動改變的含水流體的物理和生物效應(yīng)(例如改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)的能力)在一個封閉的容器(例如，封閉的氣密容器)中持續(xù)了至少兩個月、至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更長時間。
[0141]因此，其他方面提供所述電動產(chǎn)生的溶液和制備電動改變的充氧的含水流體或溶液的方法，所述方法包括:在相對運動的兩個間隔的表面間提供流體材料流，并且在所述兩個間隔的表面間界定混合體積，其中流動的流體材料在混合體積內(nèi)和穿過混合體積的單次通過的滯留時間為大于0.06秒或大于0.1秒；和在適于將至少20ppm、至少25ppm、至少
30、至少40、至少50或至少60ppm的氧(O2)溶解在材料中并電動改變流體或溶液的條件下將氧引入混合體積內(nèi)的流動的流體材料。在某些方面，在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒內(nèi)將氧注入材料中。在【具體實施方式】中，表面積與體積比為至少12、至少20、至少30、至少40或至少50。
[0142]其他方面提供制備電動改變的充氧的含水流體或溶液的方法，所述方法包括:在兩個間隔的表面間提供流體材料流，所述兩個間隔的表面在其間界定了混合體積；在適于在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒內(nèi)將至少20ppm、至少25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧擴散到材料中的條件下將氧引入在混合體積中的流動的材料中。在某些方面，在混合體積內(nèi)的所述流動的材料的滯留時間為大于0.06秒或大于0.1秒。在【具體實施方式】中，表面積與體積比為至少12、至少20、至少30、至少40或至少50。
[0143]另外的實施方式提供制備電動改變的充氧的含水流體或溶液的方法，所述方法包括使用用于通過混合第一材料和第二材料來產(chǎn)生輸出混合物的混合裝置，所述裝置包括:第一室，其被構(gòu)造為接納來自第一材料來源的第一材料；定子；具有旋轉(zhuǎn)軸的轉(zhuǎn)子，所述轉(zhuǎn)子被設(shè)置在定子內(nèi)并且被構(gòu)造為環(huán)繞其中的旋轉(zhuǎn)軸旋轉(zhuǎn)，所述轉(zhuǎn)子和定子的至少一個具有多個穿孔；在轉(zhuǎn)子和定子之間界定的混合室，所述混合室與第一室流體聯(lián)通并且被構(gòu)造為接納來自第一室的第一材料，并且所述第二材料經(jīng)由轉(zhuǎn)子和定子中的一個中所形成的多個穿孔供給混合室；第二室，其與混合室流體聯(lián)通并且被構(gòu)造為接納來自混合室的輸出材料；以及安裝在第一室內(nèi)的第一內(nèi)部泵，所述第一內(nèi)部泵被構(gòu)造為將第一材料從第一室抽吸到混合室中。在某些方面，第一內(nèi)部`泵被構(gòu)造為在第一材料進入混合室之前賦予第一材料圓周速度。
[0144]其他實施方式提供制備電動改變的充氧的含水流體或溶液的方法，所述方法包括使用用于通過混合第一材料和第二材料來產(chǎn)生輸出混合物的混合裝置，所述裝置包括:定子；具有旋轉(zhuǎn)軸的轉(zhuǎn)子，所述轉(zhuǎn)子被設(shè)置在定子內(nèi)并且被構(gòu)造為環(huán)繞其中的旋轉(zhuǎn)軸旋轉(zhuǎn)；在轉(zhuǎn)子和定子之間界定的混合室，所述混合室具有:開放的第一末端，第一材料通過該開放的第一末端進入混合室；和開放的第二末端，輸出材料通過該開放的第二末端出混合室，第二材料通過轉(zhuǎn)子和定子的至少一個進入混合室；第一室，其與所述混合室的開放的第一末端的至少大部分聯(lián)通；以及第二室，其與所述混合室的開放的第二末端聯(lián)通。
[0145]其他方面提供根據(jù)上述方法的任何一種制備的電動改變的充氧的含水流體或溶液。
[0146]非電動產(chǎn)生的流體:
[0147]如本文所用的“非電動產(chǎn)生的流體”是指未被電動處理的流體(例如，含水流體，包括水、鹽水、標準鹽水等)；也即是說，未暴露于流體動力誘導的、局部化的電動效應(yīng)(例如暴露于適于產(chǎn)生電動改變的流體的裝置的誘導電動效應(yīng)的結(jié)構(gòu)部件)的流體。例如，未暴露于適于將流體暴露于電壓脈沖與電流脈沖的至少一種來產(chǎn)生電動改變的流體的裝置的誘導電動效應(yīng)的結(jié)構(gòu)部件的流體。
[0148]如本文所用的“非電動產(chǎn)生的超級充氧(superoxygenated)的流體”是指另外被超級充氧的如上文所定義的非電動改變的流體。例如，現(xiàn)有技術(shù)“壓力罐”充氧的流體(例如，水、鹽水、標準鹽水等)是在壓力下被暴露于氧氣以提供超級充氧的流體的非電動產(chǎn)生的流體。[0149]如在本文所公開的，在各種工作實施例中，包括本發(fā)明的電動產(chǎn)生的超級充氧的流體在內(nèi)的本發(fā)明的電動產(chǎn)生的流體與任何現(xiàn)有技術(shù)的非電動產(chǎn)生的流體相比(包括與非電動產(chǎn)生的超級充氧的流體相比)具有不同的且獨特的物理特性和生物特性以及活性。
[0150]肺相關(guān)的病患和病癥
[0151]具體方面提供用于治療或預防哮喘的組合物和方法。
[0152]本文所述的某些實施方式涉及通過減輕COPD的至少一種癥狀來預防和/或治療COPD0 coro的一些癥狀包括但不限于:咳嗽、痰(粘液)產(chǎn)生、呼吸急促(尤其是運動時)、哮鳴、和胸部緊迫感。
[0153]本文所述的某些實施方式涉及通過減輕慢性支氣管炎的至少一種癥狀來預防和/或治療慢性支氣管炎。慢性氣管炎的一些癥狀包括但不限于連續(xù)兩年每年至少三個月中每月的大部分時間都有胸痛(soreness of the chest)、咳嗽、哮鳴和粘液產(chǎn)生。
[0154]本文所述的某些實施方式涉及通過減輕肺氣腫的至少一種癥狀來預防和/或治療肺氣腫。肺氣腫的一些癥狀包括但不限于呼吸困難、咳嗽、哮鳴、粘液產(chǎn)生和皮膚顏色發(fā)藍。
[0155]本文所述的某些實施方式涉及預防和/或治療肺感染，包括病毒感染、細菌感染或真菌感染。肺感染的一些癥狀包括但不限于:干咳或排痰性咳、胸痛、咽喉痛、惡心或嘔吐、頭疼、發(fā)熱、寒戰(zhàn)、出汗過多、淋巴結(jié)腫脹、肌痛、耳痛或眼痛、呼吸急促和呼吸速率快(rapid respiratory rate)。
[0156]本文所述的某些實施方式涉及預防和/或治療過敏性鼻炎和/或過敏性鼻炎，包括感染、炎癥、粘液產(chǎn)生和/或分泌、灼熱、瘙癢和噴嚏。
[0157]組合治療:
[0158]其他方面提供的本文所公開的本發(fā)明方法還包括組合治療，其中將至少一種另外的治療劑(即，除電動產(chǎn)生的流體之外)施用給患者。在某些方面，所述至少一種另外的治療劑選自由下列組成的組:短效β2_激動劑、長效β2_激動劑、抗膽堿能藥、皮質(zhì)類固醇、系統(tǒng)性的皮質(zhì)類固醇、肥大細胞穩(wěn)定劑、白三烯調(diào)節(jié)劑、甲基黃嘌呤以及它們的組合。在【具體實施方式】中，所述至少一種另外的治療劑選自由下列組成的組:由β2_激動劑和抗膽堿能藥組成的支氣管擴張劑，β2_激動劑包括沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、吡布特羅、阿福特羅、福莫特羅、沙美特羅；所述抗膽堿能藥例如異丙托銨和噻托銨；皮質(zhì)類固醇，包括倍氯米松、布地奈德、氟尼縮松、氟替卡松、莫米松、曲安西龍、甲基潑尼松龍、潑尼松龍、潑尼松；白三烯調(diào)節(jié)劑，包括孟魯司特、扎魯司特和齊留通；肥大細胞穩(wěn)定劑，包括色甘酸鈉和奈多羅米；甲基黃嘌呤，包括茶堿；組合藥物，包括異丙托銨和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特羅、布地奈德和福莫特羅；抗組胺劑，包括羥嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪、和氫化可的松；免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)藥物，包括他克莫司和吡美莫司；環(huán)孢菌素；硫唑嘌呤；麥考酚酸酯；以及它們的組合。
[0159]在某些方面，還可以施用選自由以下組成的組的至少一種另外的治療劑:吸入的皮質(zhì)類固醇、糖皮質(zhì)激素(即，環(huán)索奈德、倍氯米松、布地奈德、氟尼縮松、氟替卡松、莫米松、曲安西龍等)、口服白三烯調(diào)節(jié)劑(即，孟魯司特、扎魯司特、普侖司特、齊留通等)、肥大細胞穩(wěn)定劑(色甘酸鹽、奈多羅米等)、β_2激動劑(即，沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、特布他林、比托特羅、氟替卡松、沙美特羅、布地奈德、福莫特羅等)、腎上腺素、麻黃堿或甲基黃嘌呤(即，茶堿、氨茶堿等)。在重度哮喘中，在重度發(fā)作期間可以將口服糖皮質(zhì)激素加入這些治療中。此外，可以施用抗膽堿能藥物(即，異丙托溴銨、氧托銨、噻托銨等)?？菇M胺劑或IgE阻斷劑(如奧馬珠單抗)也可能有益于經(jīng)受“過敏誘導的”哮喘的哮喘患者，在“過敏誘導的”哮喘中受治療者的哮喘是由對特定過敏原的免疫反應(yīng)觸發(fā)的。
[0160]其他方面提供的本文所公開的本發(fā)明方法，還包括與下列的組合治療:TSLP和/或TSLPR拮抗劑(例如，對TSLP和TSLP受體特異性的中和抗體、可溶性TSLP受體分子和TSLP受體融合蛋白，如TSLPR免疫球蛋白Fe分子或編碼多于一種受體鏈的組分從而模擬生理受體異源二聚體或更高級的寡聚物的多肽。如果受體包含多于一種的多肽鏈，則可以采用單鏈融合體)。
[0161]本發(fā)明的富含氣體的流體和溶液
[0162]一種流體用另一種流體擴散或富集可產(chǎn)生這兩種流體的溶液或懸浮液。具體而言，用氣體(例如氧)富集液體可能對包括治療性處理的某些應(yīng)用是有益的。如本文所用“流體” 一般地可指對于任何具體公開的實施方式的液體、氣體、蒸汽、液體和/或氣體的混合物或者它們的任何組合。此外，在某些實施方式中“液體” 一般地可指純的液體或者可指凝膠、溶膠、乳液、 流體、膠體、分散體或混合物以及它們的任何組合；以上任何一種粘度可不同。
[0163]在本文所公開的【具體實施方式】中，溶解的氣體包括環(huán)境空氣。在一個優(yōu)選的實施方式中，溶解的氣體包括氧。在另一個實施方式中，溶解的氣體包括氮氧化物。
[0164]存在幾種領(lǐng)域認可的氣體富集液體(例如氧富集水)的方法。例如，渦輪機充氣系統(tǒng)可在葉輪的一組旋轉(zhuǎn)葉片附近釋放空氣，葉輪將空氣或氧與水混合，或者水可被噴灑到空氣中以提高其氧含量。另外，市場上的其他系統(tǒng)將空氣或氧注入到水中并且使水/氣體經(jīng)歷大規(guī)模渦旋。水中氧的自然存在水平通常是不超過10ppm(百萬分率)，這被認為是100%的溶解氧的水平。在某些裝置上的測試已示出在理想條件下，所述裝置能夠向上達到大約20ppm或水的自然氧水平的兩倍。在某些實施方式中，氧水平可能甚至更高。
[0165]本文提供的【具體實施方式】涉及如本文所定義的擴散器處理的治療性流體，所述流體包括:流體主材料；擴散到該主材料中的輸注材料；和任選地在該主材料中分散的至少一種治療劑，其中該輸注材料包括在該主流體中的氧微泡，其中大多數(shù)的微泡在尺寸上小于0.2微米或者優(yōu)選地小于0.1微米。在某些實施方式中，在輸注的流體主材料中的溶解氧水平可保持在大氣壓下大于約30ppm持續(xù)至少13小時。在其他具體的實施方式中，在輸注的流體主材料中的溶解氧水平可保持在大氣壓下大于40ppm持續(xù)至少3小時。
[0166]在另外的實施方式中，輸注的流體主材料還包括鹽水溶液。在其他的實施方式中，輸注的流體主材料在大氣壓下于密封容器內(nèi)保持至少約20ppm到約40ppm的溶解氧水平持續(xù)至少100天、優(yōu)選至少365天的時間。在某些實施方式中，輸注的流體主材料可具有大氣壓下至少50ppm的溶解氧水平。
[0167]在某些實施方式中，輸注的流體主材料在氧已擴散到其中之后對通過它的激光束發(fā)光表現(xiàn)出瑞利散射持續(xù)選擇的時間段。
[0168]表A說明了在用富含氧的鹽水溶液處理的愈合創(chuàng)傷和在本發(fā)明的富含氣體的富含氧的鹽水溶液的樣品中進行的各種分壓測量。
[0169]表A
[0170]
【權(quán)利要求】
1.一種用于治療特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀的方法，所述方法包括施用治療有效量的電動改變的含水流體給需要其的受治療者，所述電動改變的含水流體適合于改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對受治療者的細胞中的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)，其中從而提供了治療特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述電動改變的含水流體的改變包括將所述流體暴露于流體動力誘導的、局部化的電動效應(yīng)。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中暴露于所述局部化的電動效應(yīng)包括暴露于電壓脈沖和電流脈沖的至少一種。
4.如權(quán)利要求2所述的方法，其中將所述流體暴露于流體動力誘導的、局部化的電動效應(yīng)包括將所述流體暴露于用來產(chǎn)生所述流體的裝置的誘導電動效應(yīng)的結(jié)構(gòu)部件。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述肺或呼吸病患或病癥或它們的癥狀包括選自由以下組成的組的至少一種:哮喘、鼻炎、過敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和CCffD相關(guān)病癥、肺氣腫、肺炎、支氣管炎、肺感染、流行性感冒、SARS、結(jié)核病和鸕鶿咳(百日咳)。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中所述肺或呼吸病患或病癥包括哮喘。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中所述哮喘包括下列的至少一種:過敏性(外源性)哮喘、非過敏性(內(nèi)源性)哮喘、運動誘導的哮喘和咳嗽變異性哮喘。
8.如權(quán)利要求5所述 的方法，其中所述肺或呼吸病患或病癥包括C0PD。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述電動改變的含水流體包括電動改變的富含氧的水。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，所述方法還包括組合治療，其中將至少一種另外的治療劑施用給患者。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述至少一種另外的治療劑選自由以下組成的組:由β2-激動劑和抗膽堿能藥組成的支氣管擴張劑，所述β2-激動劑包括沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、吡布特羅、阿福特羅、福莫特羅、沙美特羅、沙丁胺醇、特布他林、比托特羅、氟替卡松、布地奈德，所述抗膽堿能藥包括異丙托銨、異丙托溴銨、氧托銨和噻托銨；皮質(zhì)類固醇，糖皮質(zhì)激素，包括口服的、系統(tǒng)性的和吸入的糖皮質(zhì)激素并且包括倍氯米松、布地奈德、氟尼縮松、氟替卡松、莫米松、曲安西龍、甲基潑尼松龍、潑尼松龍、潑尼松、環(huán)索奈德；白三烯調(diào)節(jié)劑，包括孟魯司特、扎魯司特、普侖司特和齊留通；肥大細胞穩(wěn)定劑，包括色甘酸鈉、色甘酸鹽和奈多羅米；腎上腺素、麻黃堿、甲基黃嘌呤，包括茶堿、氨茶堿；組合藥物，包括異丙托銨和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特羅、布地奈德和福莫特羅；抗組胺劑，包括羥嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪和氫化可的松；免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)藥物，包括他克莫司和吡美莫司；環(huán)孢菌素；硫唑嘌呤；麥考酚酸酯；IgE阻斷劑，包括奧馬珠單抗；以及它們的組合。
12.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述至少一種另外的治療劑選自由以下組成的組:短效β2_激動劑、長效β2_激動劑、抗膽堿能藥、皮質(zhì)類固醇(吸入的或其他方式的)、系統(tǒng)性的皮質(zhì)類固醇、肥大細胞穩(wěn)定劑、白三烯調(diào)節(jié)劑、甲基黃嘌呤以及它們的組合。
13.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述至少一種另外的治療劑選自由沙丁胺醇、布地奈德和它們的活性衍生物組成的組。
14.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述至少一種另外的治療劑選自由TSLP拮抗劑、TSLPR拮抗劑以及它們的組合組成的組。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述拮抗劑選自由以下組成的組:對TSLP或TSLP受體特異性的中和抗體、可溶性TSLP受體分子、TSLP受體融合蛋白、TSLPR-免疫球蛋白Fe分子以及它們的組合。
16.如權(quán)利要求1所述的方法，其中改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能包括改變膜相關(guān)蛋白的構(gòu)象、配體結(jié)合活性或催化活性。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中所述膜相關(guān)蛋白包括選自由以下組成的組中的至少一種:受體、跨膜受體、離子通道蛋白、細胞內(nèi)附著蛋白、細胞黏著蛋白和整聯(lián)蛋白。
18.如權(quán)利要求17所述的方法，其中所述跨膜受體包括G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)。
19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中所述G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)與G蛋白α亞基相互作用。
20.如權(quán)利要求19所述的方法，其中所述G蛋白α亞基包括選自由Ga3、6^、6%和Ga12K組成組的至少一種。
21.如權(quán)利要求20所述的方法，其中所述至少一種G蛋白a亞基是Gaq。
22.如權(quán)利要求1所述的方法，其中改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能包括改變膜電導率或膜電位。
23.如權(quán)利要求22所述的方法，其中調(diào)節(jié)細胞膜電導率包括調(diào)節(jié)全細胞電導。
24.如權(quán)利要求23所述的方法，其中調(diào)節(jié)全細胞電導包括調(diào)節(jié)所述全細胞電導的至少一種電壓依賴性貢獻。
25.如權(quán)利要求1所述的方法，其中細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)包括鈣依賴性細胞通信途徑或系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。
26.如權(quán)利要求1所述的方法，其中細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)包括磷脂酶C活性的調(diào)節(jié)。
27.如權(quán)利要求1所述的方法，其中細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)包括腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性的調(diào)節(jié)。
28.如權(quán)利要求1所述的方法，其中調(diào)節(jié)細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導包括調(diào)節(jié)與選自由以下組成的組的至少一種病癥或癥狀相關(guān)的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導:炎癥、哮喘、鼻炎、過敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和COro相關(guān)病癥、肺氣腫、肺感染、肺炎、支氣管炎、流行性感冒、SARS、結(jié)核病、鸕鶿咳(百日咳)、肺收縮、支氣管收縮和肺泡收縮。
29.如權(quán)利要求1所述的方法，所述方法包括施用給細胞網(wǎng)絡(luò)或細胞層，并且還包括其中的細胞間連接的調(diào)節(jié)。
30.如權(quán)利要求29所述的方法，其中所述細胞間連接包括選自由緊密連接、間隙連接、黏著帶和橋粒所組成的組中的至少一種。
31.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述細胞網(wǎng)絡(luò)或細胞層包括選自由肺上皮、支氣管上皮和腸上皮所組成的組中的至少一種。
32.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述電動改變的含水流體是充氧的，并且其中在所述流體中氧的存在量為大氣壓下至少8ppm、至少15ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。
33.如權(quán)利要求1到32中任一項所述的方法，其中所述電動改變的含水流體包括溶劑化電子和電動改性或帶電的氧類中的至少一種。
34.如權(quán)利要求33所述方法，其中所述溶劑化電子或者電動改性或帶電的氧類以至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm的量存在。
35.如權(quán)利要求33所述方法，其中所述電動改變的充氧的含水流體包括通過分子氧穩(wěn)定的溶劑化電子。
36.如權(quán)利要求1所述方法，其中改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)的能力在封閉的氣密容器中持續(xù)至少兩個月、至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月、至少十二個月、至少二十四個月或更長的時間。
37.一種配制適用于治療特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥、或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀的治療劑的方法，所述方法包括: 獲得適用于治療受治療者的特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀的治療劑；以及 將所述治療劑與一定量的電動改變的含水流體混合，所述電動改變的含水流體適合于改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對受治療者的細胞中的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)，其中從而提供了配制適用于治療特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸病患或病癥或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀的治療劑。
38.一種藥用組合物，其包含:適用于治療受治療者的特征為氣流阻塞或限制的肺或呼吸疾患或病癥或所述肺或呼吸病患或病癥的癥狀的治療劑；和一定量的電動改變的含水流體，所述電動改變的含水流體適合于改變細胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對受治療者的細胞中的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的調(diào)節(jié)。
39.一種由權(quán)利要求37所述的方法制備的藥用組合物。
40.如權(quán)利要求1所述的方法`，其中施用是通過吸入進行。
【文檔編號】A61K45/00GK103721258SQ201310717654
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2008年10月27日 優(yōu)先權(quán)日:2007年10月25日
【發(fā)明者】理查德·L·華森, 安東尼·B·伍德, 格雷戈里·J·阿咸賓 申請人:利發(fā)利希奧公司