一種體外培育牛黃的方法
【專利摘要】以生物化學(xué)制藥原理，將牛黃成分制成共聚物顆粒，投入緩慢旋轉(zhuǎn)的模擬牛膽囊為結(jié)晶芯；將螯合劑噴涂于結(jié)晶芯；滾動(dòng)涂敷；噴涂共聚物粉末；滾動(dòng)涂敷；使結(jié)晶芯表面粘附一層固體物。此，噴螯合劑→滾動(dòng)涂敷→噴共聚物粉末→滾動(dòng)涂敷的循環(huán)往復(fù)的工作程序，由微機(jī)控制層狀疊加。最終，增大為卵形、有同心圓層狀紋、細(xì)膩、疏松的體外培育牛黃。實(shí)現(xiàn)了，大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說(shuō)明】一種體外培育牛黃的方法
所屬【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種體外培育牛黃的方法。特別是涉及一種以生物化學(xué)制藥原理的體外培育牛黃方法，屬制藥領(lǐng)域。
技術(shù)背景
[0002]目前，公知的，能夠規(guī)模化生產(chǎn)體外培育牛黃的方法，是武漢大鵬藥業(yè)的專利方法。此方法，是模擬牛膽受細(xì)菌感染造成病理環(huán)境，而形成牛黃。原理是:大腸桿菌在牛膽汁中繁殖，產(chǎn)生粘蛋白，使膽紅素、膽酸等，粘附其上，形成顆粒物；在向心力的作用下，顆粒物逐層聚集、沉淀、增 厚、增大，成為卵狀物；取出卵狀物，經(jīng)整形和烘干，成為體外培育牛黃。
[0003]由此可知:病理環(huán)境，就是粘蛋白給膽紅素等，提供一個(gè)附著、聚集、沉積和增厚的平臺(tái)。在制劑原理方面，是建立在病理學(xué)的基礎(chǔ)上，所產(chǎn)粘蛋白的量，極其有限。整個(gè)方法，繁復(fù)而冗長(zhǎng)，生產(chǎn)成本高昂。
[0004]1991年第3期生化藥物雜志《體外模擬膽囊工廠化生產(chǎn)牛黃》的文獻(xiàn)，及200710169054.0的專利，其制劑原理，也是建立在病理學(xué)的基礎(chǔ)上。
[0005]在制造體外牛黃的溶劑方面，除了 200510009260.6的專利，用濃縮牛膽汁做溶劑外，其它的專利與文獻(xiàn)，均是以水作溶劑，簡(jiǎn)單地混合與堆砌。
[0006]在體外牛黃的配劑方面，除了 200510009260.6的專利，在配劑中添加了成品的多糖粘蛋白，提高了粘蛋白的含量外。現(xiàn)有專利與文獻(xiàn)中的配劑，粘蛋白的含量均低。并且都不含，具協(xié)同效力的共價(jià)型膽紅素、鵝去氧膽酸和肽。而，共價(jià)型膽紅素，抗氧化性極強(qiáng)，有著趨勢(shì)緩和的高效力。鵝去氧膽酸，在天然牛黃中，比去氧膽酸的含量高3.5倍。肽，具有抗炎的協(xié)同效力。
[0007]在體外牛黃的成形方面，現(xiàn)有已知專利及文獻(xiàn)，都是應(yīng)用渦旋運(yùn)動(dòng)所產(chǎn)生的向心力，使粘蛋白及其附著物，向著模擬“牛膽囊”的中心區(qū)域聚集和沉積，并層狀疊加，逐漸增厚增大，形成卵形。不同之處是:其渦旋式的向心力，分別由超聲波、電磁脈沖波和機(jī)械能，所產(chǎn)生的共振、振蕩和旋轉(zhuǎn)來(lái)完成，耗費(fèi)了大量的工作時(shí)間和能源。
[0008]綜上所述:體外培育牛黃的制劑，若應(yīng)用細(xì)菌，不僅粘蛋白產(chǎn)量有限；而且須滅菌；存在潛在的污染風(fēng)險(xiǎn)；也勢(shì)必使工序冗長(zhǎng)和高成本。而用水作溶劑，勢(shì)必氧化損失膽紅素。應(yīng)用渦旋式的向心力，勢(shì)必使溶劑中的小比重有效成分，隨著凝聚所析出的水分，一起被棄去；造成浪費(fèi)、污染環(huán)境、成本高、工時(shí)長(zhǎng)和耗能。應(yīng)用金屬器具配劑，勢(shì)必使膽紅素反應(yīng)為膽綠素，而產(chǎn)生危害。缺少協(xié)同性成分，勢(shì)必造成牛黃藥效的不足。
[0009]因此，牛黃絕不是各有效成分的簡(jiǎn)單化學(xué)合成與堆砌。而是，一系列生物酶促反應(yīng)的結(jié)果。生物化學(xué)的酶促反應(yīng)，使牛黃有效成分的分子鏈接鍵被破壞，表面具更多的陰電荷，造成了電荷的不平衡；不僅降低了膽汁粘度、PH值、降解膽酸；而且使各成分相互溶合，協(xié)同產(chǎn)生了高活性的藥效。所以，牛黃是一種極其典型的生物制劑。
[0010]生物制劑，大不同于化學(xué)和中成藥制劑。在反應(yīng)制作時(shí)，有自然的蛋白、肽、核酸、酶、輔酶、激素、維生素、粘多糖等產(chǎn)生。所有成分，都帶有高的生物活性。它們相輔相佐，相得益彰。體現(xiàn)出了化學(xué)和中成藥制劑，所不具備的低毒、高效和生物相容性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011]本發(fā)明，提出一種體外培育牛黃的方法。該方法，應(yīng)用生物化學(xué)制藥原理，不僅克服了現(xiàn)有方法中的諸多弊端，而且符合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)的諸多要求。培育出的體外牛黃，具有生物活性高、成本低、生產(chǎn)速度快、效率高等優(yōu)勢(shì)。
[0012]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是:
[0013]一.屏棄游離型膽紅素
[0014]天然牛黃，含有小于1%的游離型膽紅素。這，具毒性的游離型膽紅素，雖經(jīng)口服，由人體的肝、膽、腎、胃、胰，分泌出的酶、多糖、酸和鹽類，轉(zhuǎn)化為了無(wú)毒性的結(jié)合型膽紅素。但，對(duì)于那些臟器功能有障礙的服用者，易造成溶血性、肝細(xì)胞性和阻塞性黃疸等病癥，是個(gè)巨大的威脅。本發(fā)明，在配劑體外培育牛黃時(shí)，屏棄游離型膽紅素。所需膽紅素，均事先生成結(jié)合和共價(jià)型膽紅素之后，再應(yīng)用于體外培育牛黃的配劑，杜絕了潛在的威脅。
[0015]二.增加有效成分
[0016]增加共價(jià)型膽紅素、鵝去氧膽酸、石膽酸和肽等。以附合，牛黃天然成分的要求。
[0017]三.制取結(jié)合型膽紅素及其鈣鹽
[0018]游離型膽紅素，以生物化學(xué)制藥的方法，生成結(jié)合型膽紅素及其鈣鹽，以附合天然牛黃中膽紅素的性質(zhì)。使牛黃，長(zhǎng)久貯存幾十年，而不變質(zhì)。
[0019]四.制取共價(jià)型膽紅素
`[0020]游離型膽紅素，以生物化學(xué)制藥方法，生成共價(jià)型膽紅素，以附合天然牛黃中膽紅素的性質(zhì)。
[0021]五.制取結(jié)合型膽酸和去氧膽酸等
[0022]游離型膽酸、去氧膽酸、鵝去氧膽酸、膽固醇和石膽酸。以，生物化學(xué)制藥方法進(jìn)行反應(yīng)。以附合其在天然牛黃中高活性的性質(zhì)。
[0023]六.制取共聚物
[0024]以粘蛋白、氨基酸和肽的反應(yīng)物為底物，將結(jié)合和共價(jià)型膽紅素、膽酸、去氧膽酸等，以生物化學(xué)制藥方法生成共聚物。以附合，天然牛黃高活性的性質(zhì)。
[0025]七.制粒與制粉
[0026]以制藥機(jī)械，將共聚物的15%制粒；余者干燥后，微磨為粉。
[0027]八.選擇螯合劑
[0028]與帶羧基共聚物，形成螯合物的物質(zhì)很多。如，環(huán)糊精、殼聚糖、離子型陽(yáng)樹(shù)脂、硅藻土、白蛋白和活性炭等。本專利選用殼聚糖。
[0029]殼聚糖，是天然的大分子生化物質(zhì)，含有大量的羥基和氨基。其，表面積大，吸附容量大，具良好的親水性、生物相容性和抗氧化性。是，著名而優(yōu)異的吸附螯合劑。在本專利中，與配劑中的自由鐵離子、鎂、鋅、鈣等金屬離子，及膽紅素、膽固醇和膽酸等，形成了穩(wěn)定的螯合物。從而，抑制了鐵離子等的催化，避免了膽紅素的損耗。使酶解液的溶解度降低，而產(chǎn)生絮集與凝聚。
[0030]九.制取螯合劑
[0031]為使螯合劑帶有最大量的電荷，將螯合劑做活化處理。[0032]十.模擬牛膽囊[0033]以，具滾動(dòng)涂敷功能的混凝土攪拌機(jī)、荸薺式糖衣機(jī)、包衣機(jī)、湯圓機(jī)、平面篩床和搖床，為模擬牛膽囊。將其改造，使其具備噴涂和自動(dòng)控制工作的功能。
[0034]^^一.制卵形
[0035]將共聚物與螯合劑，在模擬牛膽囊中結(jié)合，形成卵形物。
[0036]十二.篩選與烘干
[0037]人工挑選分揀，卵形勻稱的卵形物，為合格的烘干品，并將其送入烘干機(jī)烘干，使含水量達(dá)到藥典要求。
[0038]本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是:
[0039]一.制取體外培育牛黃配劑
[0040]1.制取結(jié)合型膽紅素及其鈣鹽
[0041]新鮮或速凍的牛膽汁，入搪瓷反應(yīng)釜，按順序分別加入氯化鈉、牛磺酸和甘氨酸，恒溫真空反應(yīng)，產(chǎn)生膽酸鈉溶液；調(diào)PH值，加入維生素C和游離型膽紅素；按反應(yīng)分段工序和加入配劑的順序，再分別加入葡萄糖醛酸；硫酸鋅、硫酸鎂和硫酸鉀；最后加入磷酸鈣，生成結(jié)合型膽紅素及其鈣鹽。
[0042]2.制取共價(jià)型膽紅素
[0043]新鮮或速凍的牛膽汁，入搪瓷反應(yīng)釜，按順序分別加入氯化鈉、牛磺酸和甘氨酸，恒溫真空反應(yīng)，產(chǎn)生膽酸鈉溶液；調(diào)PH值，加牛血清白蛋白和游離型膽紅素，生成共價(jià)型膽紅素。
[0044]3.制取共聚物
[0045]牛膽汁入搪瓷反應(yīng)釜，加氯化鈉、甘氨酸和?；撬?，恒溫真空反應(yīng)，產(chǎn)生膽酸鈉溶液JMPH值，加蛋白酶，加磷酸鐵、磷酸錳，反應(yīng)將酶原激活；牛膽囊皮粉碎后加入，酶解；調(diào)PH值，按順序，梯次加入維生素D、游離型膽酸(牛羊)、去氧膽酸(牛)、鵝去氧膽酸和石膽酸，梯度反應(yīng)；加脂肪酶，加磷酸銅將酶原激活；將膽固醇和卵磷脂溶于熱乙醇后加入，反應(yīng)；最后，加入結(jié)合型膽紅素及其鈣鹽和共價(jià)型膽紅素，加速酶促反應(yīng)；得復(fù)合多聚體的共聚物。
[0046]4.制取螯合劑
[0047]分子量40~100萬(wàn)，脫乙酰度80~89的殼聚糖，加純凈水或蒸餾水，加氯化鈉，調(diào)PH，制成殼聚糖的活化螯合劑。
[0048]二.模擬牛膽囊
[0049]以聚四氟乙烯，做混凝土攪拌機(jī)、荸薺式糖衣機(jī)、包衣機(jī)、湯圓機(jī)、搖床和平面篩的內(nèi)襯和床面；在混凝土攪拌機(jī)、湯圓機(jī)或糖衣機(jī)內(nèi)部的上層空間，及搖床或平面篩的上部，加裝噴涂及噴粉裝置。以，這些具滾動(dòng)涂敷功能機(jī)械中的一種，為模擬牛膽囊。
[0050]二.編程序
[0051]將，噴螯合劑一滾動(dòng)涂敷一噴共聚物粉末一滾動(dòng)涂敷的循環(huán)往復(fù)工序，編為微機(jī)控制程序。以單片機(jī)，控制“模擬牛膽囊” 一個(gè)批次的成形過(guò)程，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、低成本的大批量工業(yè)化生產(chǎn)。
[0052]四.制粒與制粉
[0053]以螺桿擠出機(jī)、制丸機(jī)、顆粒機(jī)或壓片機(jī)中的一種機(jī)械，將15%的共聚物制成顆粒；余者用烘干機(jī)或噴干機(jī)干燥后，經(jīng)微粉磨制碎，成超微粉末。
[0054]五.制卵形
[0055]將共聚物顆粒，投入模擬“牛膽囊”為結(jié)晶芯；以微機(jī)控制的噴螯合劑一滾動(dòng)涂敷—噴共聚物粉末一滾動(dòng)涂敷的循環(huán)往復(fù)程序，形成卵形。
[0056]六.篩選與烘干
[0057]人工挑選分揀，卵形勻稱的卵形物，為合格烘干品，并將其送入烘干機(jī)烘干；使含水量，達(dá)到國(guó)家藥典要求的9 %以內(nèi)。
[0058]本發(fā)明的有益效果是:
[0059]1.游離膽紅素的含量，遠(yuǎn)低于天然牛黃，避免了毒性反應(yīng)。
[0060]2.以生物化學(xué)方式培育的體外牛黃，更合乎牛黃的天然性質(zhì)。
[0061]3.使生產(chǎn)成本更低；收益更高。
[0062]4.使生產(chǎn)速度更快；效率更高。
[0063]5.生產(chǎn)中，無(wú)任何固、液、光、聲、汽的污染環(huán)境物排出。
[0064]6.實(shí)現(xiàn)了大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。
[0065]下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說(shuō)明。
[0066]具體實(shí)施例螺桿擠出機(jī)制成的共聚物顆粒，投入緩慢運(yùn)轉(zhuǎn)的模擬“牛膽囊”為結(jié)晶芯；以微機(jī)控制程序；經(jīng)，噴螯合劑一滾動(dòng)涂敷一噴共聚物粉末一滾動(dòng)涂敷的循環(huán)往復(fù)工序；層狀疊加增大，迅速形成卵形物。烘干卵形物，成為有同心圓層狀紋、細(xì)膩、疏松的體外培育牛黃。模擬牛膽囊單機(jī)，每批次產(chǎn)出直徑可控的卵形體外培育牛黃，50~500公斤。
[0067]本發(fā)明的體外培育牛黃，質(zhì)地細(xì)膩而疏松，易破碎，具同心圓層紋，嚼之先苦后甜。產(chǎn)品，送樣化驗(yàn)，按2010版國(guó)家藥典第一部，162頁(yè)的內(nèi)容檢測(cè):游離膽紅素的吸光度不超過(guò)0.7 ;膽紅素的含量不少于35% ;膽酸含量不低于6.0% ;水分不高于9%。
【權(quán)利要求】
1.一種體外培育牛黃的方法，由生物化學(xué)制藥原理制取結(jié)合型膽紅素及其鈣鹽、制取共價(jià)型膽紅素、制取共聚物和制取螯合劑，模擬牛膽囊、編程序、制粒與制粉、制卵形、篩選和烘干的工序組成。
2.根據(jù)權(quán)利I中所述的一種體外培育牛黃的方法，其特征是:制取結(jié)合型膽紅素及其鈣鹽的工序；是以生物化學(xué)制藥原理，將新鮮和冷凍的牛膽汁為溶劑，入搪瓷反應(yīng)釜，真空反應(yīng)環(huán)境，按順序分別加入氯化鈉、甘氨酸和?；撬幔a(chǎn)生膽酸鈉溶液；調(diào)PH值，加入維生素C和游離型膽紅素；按反應(yīng)分段工序和加入配劑時(shí)的順序，再分別加入葡萄糖醛酸、硫酸鋅、硫酸鎂和硫酸鉀；最后加入磷酸鈣的工序。
3.根據(jù)權(quán)利I中所述的一種體外培育牛黃的方法，其特征是:制取共價(jià)型膽紅素工序，是以生物化學(xué)制藥原理，將新 鮮和冷凍的牛膽汁為溶劑，入搪瓷反應(yīng)釜，真空反應(yīng)環(huán)境，按順序分別加入氯化鈉、甘氨酸和?；撬?，產(chǎn)生膽酸鈉溶液；調(diào)PH值，加牛血清白蛋白和游離型膽紅素的工序。
4.根據(jù)權(quán)利I中所述的一種體外培育牛黃的方法，其特征是:制取共聚物工序，是以生物化學(xué)制藥原理，將牛膽汁入搪瓷反應(yīng)釜，加氯化鈉、甘氨酸和?；撬?，恒溫真空反應(yīng)，產(chǎn)生膽酸鈉溶液；調(diào)PH值，加蛋白酶，加磷酸鐵和磷酸錳，將酶原激活；牛膽囊皮粉碎后加入，酶解；調(diào)PH值，按順序，梯次加入維生素D、游離型膽酸(牛羊)、去氧膽酸(牛)、鵝去氧膽酸和石膽酸，梯度反應(yīng)；加脂肪酶，加磷酸銅將酶原激活；將膽固醇和卵磷脂溶于熱乙醇后加入，反應(yīng)；最后，加入結(jié)合型膽紅素及其鈣鹽和共價(jià)型膽紅素，加速酶促反應(yīng)的工序。
5.根據(jù)權(quán)利I中所述的一種體外培育牛黃的方法，其特征是:以生物化學(xué)制藥原理制取螯合劑工序，是將β_環(huán)糊精、離子型陽(yáng)樹(shù)脂、硅藻土、白蛋白、活性炭和殼聚糖活化的工序；優(yōu)選分子量40~100萬(wàn)，脫乙酰度80~89的殼聚糖活化工序。
6.根據(jù)權(quán)利I中所述的一種體外培育牛黃的方法，其特征是:模擬牛膽囊，是以聚四氟乙烯做混凝土攪拌機(jī)、荸薺式糖衣機(jī)、包衣機(jī)、湯圓機(jī)、搖床和平面篩的內(nèi)襯和床面；并在混凝土攪拌機(jī)、荸薺式糖衣機(jī)、包衣機(jī)、湯圓機(jī)內(nèi)部的上層空間，及搖床或平面篩的上部，加裝噴涂及噴粉裝置；以，這些具滾動(dòng)涂敷功能機(jī)械中的一種，為模擬牛膽囊；優(yōu)選以湯圓機(jī)為模擬牛膽囊。
7.根據(jù)權(quán)利I中所述的一種體外培育牛黃的方法，其特征是:編程序，是將噴螯合劑一滾動(dòng)涂敷一噴共聚物粉末一滾動(dòng)涂敷的循環(huán)往復(fù)工序，編為微機(jī)控制程序。
8.根據(jù)權(quán)利I中所述的一種體外培育牛黃的方法，其特征是:制粒與制粉工序是，以螺桿擠出機(jī)、制丸機(jī)、顆粒機(jī)或壓片機(jī)，將共聚物的15%制粒，余者用烘干機(jī)或噴干機(jī)干燥后，經(jīng)微粉磨制成超微粉末；優(yōu)選螺桿擠出機(jī)制粒；及微粉磨制粉的工序。
9.根據(jù)權(quán)利I中所述的一種體外培育牛黃的方法，其特征是:制卵形工序，是將制成的共聚物顆粒，投入模擬牛膽囊為結(jié)晶芯；以微機(jī)控制的噴螯合劑一滾動(dòng)涂敷一噴共聚物粉末一滾動(dòng)涂敷的循環(huán)往復(fù)程序，制成卵形物的工序。
10.根據(jù)權(quán)利I中所述的一種體外培育牛黃的方法，其特征是:篩選和烘干工序，是人工挑選分揀卵形勻稱的卵形物為合格品，并將其烘干至水分9%以內(nèi)的工序。
【文檔編號(hào)】A61K35/413GK103690563SQ201310697229
【公開(kāi)日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2013年12月8日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月8日
【發(fā)明者】王昌勇, 王晨旭 申請(qǐng)人:王昌勇, 王晨旭