從藤黃中提取的抗腫瘤化合物及其制備方法與用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及從藤黃中提取的抗腫瘤化合物及其制備方法與用途。所述化合物制法為：(1)取藤黃藥材用乙酸乙酯提取，提取物經(jīng)硅膠柱色譜分離，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得到11個(gè)組分A～K；(2)棄去油脂組分及藤黃酸組分，再經(jīng)HPLC-PDA-MS去重復(fù)分析，得到重點(diǎn)組分I；(3)組分I再經(jīng)硅膠柱色譜分離，氯仿-甲醇梯度洗脫，得到流分I-3；(4)取I-3經(jīng)反相RP-18色譜分離，乙腈-水梯度洗脫，得到亞流分I-3E；(5)I-3E經(jīng)純化、乙腈洗脫，得到本發(fā)明化合物。本發(fā)明所述化合物可用于腫瘤的治療。
【專利說明】從藤黃中提取的抗腫瘤化合物及其制備方法與用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種從中藥材藤黃中提取分離的化合物、制備所述化合物的方法、包含所述化合物的醫(yī)藥組合物，及使用所述化合物制備抗腫瘤藥物的用途。
【背景技術(shù)】
[0002]藤黃為藤黃科植物藤黃(Garcinia hanburyi Hook f.)的樹干被割傷后流出的膠狀樹脂，又名海藤、玉黃、月黃、臘黃等。原產(chǎn)東南亞，我國部分地區(qū)如云南、廣西、廣東等地有引種栽培。
[0003]藤黃始載于《海藥本草》，其性寒，味酸、澀、辛，有毒，具有破血散結(jié)、解毒、止血、殺蟲之功效，中醫(yī)多用于治癰疽腫毒，頑癬惡瘡，損傷出血，牙疳蛀齒，湯火傷。
[0004]目前，已報(bào)道從藤黃中共分離和鑒定了二十余個(gè)化合物，大多為含橋環(huán)的咕噸酮(xanthone)類化合物，即藤黃酸類、莫里林類、藤黃素類，以及藤黃醛、白樺脂酸等等多種化合物。
[0005]現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，藤黃提取物具有廣譜的抗菌活性，對(duì)金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌等有較強(qiáng)抑菌作用。而且，藥理實(shí)驗(yàn)和臨床經(jīng)驗(yàn)證明，其具有抗腫瘤作用，能夠有效抑制腫瘤增殖，對(duì)多種腫瘤有 顯著療效。
[0006]發(fā)明人從藤黃中提取得到具有生物活性的本發(fā)明化合物，與藤黃酸相比具有更為優(yōu)越的抗腫瘤活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明提供了一種從藤黃中提取分離的具有生物活性的式(I)化合物，并提供了該化合物的制備方法以及制備治療腫瘤藥物的用途。
[0008]式(I)化合物具有下式:
[0009]



Z 19


I

OH

HO、丫』、,O
24I|[ ?1423
I 21 Il I t1I
1O OH ιη >^



15
(i)
[0010]本發(fā)明還提供了該式(I)化合物的制備方法，具體步驟為:
[0011](I)取藤黃藥材用乙酸乙酯提取，提取物經(jīng)硅膠柱色譜分離，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得到11個(gè)組分A~K;[0012](2)棄去油脂組分及藤黃酸組分，經(jīng)HPLC-PDA-MS分析，得到重點(diǎn)組分I ;
[0013](3)組分I再經(jīng)硅膠柱色譜分離，氯仿-甲醇梯度洗脫，每30ml收集一個(gè)流分，合并第11份至第16份洗脫液，流速為2mL/min，得到流分1_3 ；
[0014](4)取1-3經(jīng)反相RP-18色譜分離，乙腈-水梯度洗脫，每20ml收集一個(gè)流分，合并第13份至第18份洗脫液，流速為2mL/min，得到亞流分1-3E ；
[0015](5) 1-3E經(jīng)純化、乙腈等度洗脫，得到式(I)化合物。
[0016]優(yōu)選的，步驟(1)中石油醚-乙酸乙酯按體積比50~O:1的比例進(jìn)行梯度洗脫；
[0017]更優(yōu)選的，石油醚-乙酸乙酯分為六個(gè)梯度進(jìn)行洗脫，分別為50: 1,10: 1，5: 1,2: 1,1: 1,0: 1。
[0018]優(yōu)選的，步驟(3)中氯仿-甲醇按體積比50~10:1的比例進(jìn)行梯度洗脫；
[0019]優(yōu)選的，步驟⑷中乙腈-水按體積比40~90: 60~10的比例進(jìn)行梯度洗脫；
[0020]更優(yōu)選的，乙腈-水分為五個(gè)梯度進(jìn)行洗脫，分別為40: 60,50: 50,60: 40、80: 20,90: 10。
[0021]優(yōu)選的，步驟(5)中乙腈的濃度為80%~95% ;
[0022]更優(yōu)選的，乙腈的濃度為80%~85%。
[0023]發(fā)明人通過理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜學(xué)手段CH-NMR(圖2), 13C-NMR(圖3)、HR-ES1-MS^1H-1H COSY和HSQC)對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，證實(shí)其為結(jié)構(gòu)如式
(I)所示的化合物。
[0024]在一個(gè)方面，本發(fā)明的式(I)化合物可以用于治療腫瘤疾病。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞具有廣譜的抑制活性。所述腫瘤疾病包括選自以下組成的群組:鼻咽癌、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、肝癌和宮頸癌。
[0025]另一個(gè)方面，本發(fā)明還提供了治療腫瘤疾病的藥物組合物，其包含治療有效量的式(I)化合物，以及至少一種選自以下的醫(yī)藥學(xué)上可接受的非活性成分:醫(yī)藥學(xué)上可接受的稀釋劑、醫(yī)藥學(xué)上可接受的賦形劑及醫(yī)藥學(xué)上可接受的載劑。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0026]圖1為式(I)化合物結(jié)構(gòu)式；
[0027]圖2為式(I)化合物的1H-NMR譜；
[0028]圖3為式(I)化合物的13C-NMR譜。
【具體實(shí)施方式】
[0029]化合物
[0030]式⑴化合物具有以下結(jié)構(gòu):
[0031]
【權(quán)利要求】
1.一種式⑴化合物:
2.一種醫(yī)藥組合物，其包含治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，以及至少一種選自以下的醫(yī)藥學(xué)上可接受的非活性成分:醫(yī)藥學(xué)上可接受的稀釋劑、醫(yī)藥學(xué)上可接受的賦形劑及醫(yī)藥學(xué)上可接受的載劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的醫(yī)藥組合物，其中所述醫(yī)藥組合物是片劑、膠囊、注射用粉針劑、注射劑、滴丸劑和緩釋片劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中所述的化合物或醫(yī)藥組合物的用途，其用于制備用于治療腫瘤疾病的藥物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，所述腫瘤疾病選自以下組成的群組:鼻咽癌、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、肝癌和宮頸癌。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，所述腫瘤疾病為神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤。
7.一種制備根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物的方法，其包括以下步驟: (1)取藤黃藥材用乙酸乙酯提取，提取物經(jīng)硅膠柱色譜分離，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得到11個(gè)組分A~K; (2)棄去油脂組分及藤黃酸組分，經(jīng)HPLC-PDA-MS分析，得到重點(diǎn)組分I; (3)組分I再經(jīng)硅膠柱色譜分離，氯仿-甲醇梯度洗脫，每30ml收集一個(gè)流分，合并第11份至第16份洗脫液，流速為2mL/min，得到流分1_3 ； (4)取1-3經(jīng)反相RP-18色譜分離，乙腈-水梯度洗脫，每20ml收集一個(gè)流分，合并第13份至第18份洗脫液，流速為2mL/min，得到亞流分1-3E ； (5)1-3E經(jīng)純化、乙腈等度洗脫，得到式(I)化合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述步驟(1)中石油醚-乙酸乙酯按體積比50~O: I的比例進(jìn)行梯度洗脫。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述石油醚-乙酸乙酯分為六個(gè)梯度進(jìn)行洗脫，分別為 50: 1，10: 1，5: 1，2: 1，1: 1，0:1。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述步驟(3)中氯仿-甲醇按體積比50~10: I的比例進(jìn)行梯度洗脫。
11.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述步驟(4)中乙腈-水按體積比40~90: 60~10的比例進(jìn)行梯度洗脫。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中乙腈-水分為五個(gè)梯度進(jìn)行洗脫，分別為40: 60、50: 50,60: 40,80: 20,90: 10。
13.如權(quán)利要求7所述的方法，其中所述步驟(5)中乙腈的濃度為80%~95%。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述乙腈的濃度為80%~85%。
15.根據(jù)權(quán) 利要求14所述的方法，其中所述乙腈的濃度為82%。
【文檔編號(hào)】A61K31/352GK103724313SQ201310654391
【公開日】2014年4月16日 申請(qǐng)日期:2013年11月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月28日
【發(fā)明者】蕭偉, 王振中, 趙祎武, 章晨峰, 徐豐果, 于丹, 宋亞玲 申請(qǐng)人:江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司