一種用于防治犬外耳炎的藥物組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于防治犬外耳炎的藥物組合物，屬于獸藥領(lǐng)域。本發(fā)明藥物組合物的組成成分及其比例為：每100ml溶液中含有氟苯尼考2.0～3.0g，甲硝唑0.2～0.4g，丁香提取物0.5～3.0g，茶樹油0.5～3.0ml，丙二醇為溶劑。本發(fā)明還公開了該藥物組合物的制備方法和用途。本發(fā)明藥物組合物對(duì)犬外耳炎的療效高；其次，本發(fā)明藥物組合物含有組成成分復(fù)雜的天然提取物，減少了細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的可能性，能夠長久保持其藥效，便于準(zhǔn)確用藥；此外，因本發(fā)明藥物組合物藥效高，可減少治療犬外耳炎的時(shí)間和治療次數(shù)，減少動(dòng)物的痛苦，增加動(dòng)物福利。
【專利說明】一種用于防治犬外耳炎的藥物組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于獸藥領(lǐng)域，具體涉及一種用于防治犬外耳炎的藥物組合物。
【背景技術(shù)】
[0002]犬外耳炎是指犬外耳道上皮的急性或慢性炎癥，有時(shí)伴發(fā)耳廓疾病或中耳炎。主要癥狀為耳朵瘙癢，耳廓和耳道紅斑，耳內(nèi)分泌物過多并有異味，嚴(yán)重時(shí)可能化膿并發(fā)出惡臭，甚至增生閉塞耳道。病犬食欲減退，頻頻搖頭擦耳，致使耳殼抓傷、擦傷、出血或血腫、上皮潰爛，甚至是聽力減退等嚴(yán)重后果。犬外耳炎患病率較高，犬外耳炎發(fā)病率在5%~20%之間(張迪等.中國獸醫(yī)雜志，2007，43 (12):90-91.)。
[0003]引起犬外耳炎的因素很多，機(jī)械性損傷、細(xì)菌、真菌和寄生蟲感染都是引起犬外耳炎的重要原因。其中細(xì)菌主要有金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、變形桿菌等；真菌主要有馬拉色菌、酵母等；寄生蟲主要有犬耳螨和蠕形螨等(張迪等.中國獸醫(yī)雜志，2007，43 (12):90-91;王秀云等.中國牧業(yè)通訊，2006:72 ;姜濤等.中國工作犬業(yè)，2010，7:16 ;夏兆飛等.中國獸醫(yī)雜志，2003，39 (6):44-45)。40%的犬外耳炎中有一個(gè)或多個(gè)耳癢螨，許多被診斷為細(xì)菌或馬拉色菌的病例實(shí)際上是由寄生蟲感染引發(fā)的(夏兆飛等.中國獸醫(yī)雜志，2003，39 (6):44-45)。
[0004]犬外耳炎的治療方法主要抗生素藥物及手術(shù)治療，如未出現(xiàn)嚴(yán)重增生的病例，一般使用抗生素進(jìn)行治療。由于臨床上犬耳炎病因復(fù)雜，常常呈現(xiàn)混合感染的情況，而治療使用的抗生素只有少數(shù)對(duì)細(xì)菌、真菌、螨蟲均有較好效果，如氟苯尼考-甲硝唑在較強(qiáng)的抗菌作用下對(duì)犬耳螨和蠕形螨也有較好的殺滅作用(李冰等.中國工作犬業(yè)，2005，4:10-12.)。但使用抗生素易產(chǎn)生耐藥性。氟苯尼考在中國批準(zhǔn)使用未超過14年，但其對(duì)腸球菌、葡萄球菌的耐藥率在2001~2009年間出現(xiàn)明顯的上升趨勢(shì)(Dai L等.FEMS Microbiol Lett,2008,286 =178—183 ;戴磊.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士論文，2010);甲硝唑的使用也使細(xì)菌產(chǎn)生了耐藥基因，已成為細(xì)菌治療失敗的重要原因之一(Cover TL等.Gastroenterogy, 2009,136(6):1863-1873)。而天然植物提取物因其有效成分多且含量低，可作用于細(xì)菌的不同靶位點(diǎn)和代謝繁殖的不同階段，作用緩慢，故不易產(chǎn)生耐藥性，保持治療效果。如用黃岑、連翹、黃柏等10中植物提取物對(duì)大腸桿菌進(jìn)行了耐藥性誘導(dǎo)試驗(yàn)，結(jié)果顯示傳代菌對(duì)中藥不易形成耐藥性(曹翠萍等.西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2007，20 (5):1101-1104.)。利用含黃連、丹參提取液的培養(yǎng)基對(duì)耐喹諾酮類藥物的大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)，結(jié)果表明植物提取物可部分逆轉(zhuǎn)大腸桿菌耐藥性的作用(羅音久等.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2006，5:7-9.)。目前植物提取物已成為抗生素重要的替代物之一。
[0005]丁香提取物是以乙醇為溶劑，從丁香中萃取得到，成分較為復(fù)雜。丁香中含有多種抑菌成分，如丁香酚、乙酰丁香酚、丁香烯、甲基正成基酮、苯甲醛、乙酸卞酯等，主要抑菌成分為丁香酚(關(guān)文強(qiáng)等.食品科學(xué)，2005，26 (12):227—230)。這些物質(zhì)對(duì)假單胞菌、金黃色葡萄球菌和大腸桿菌等多種細(xì)菌有一定的抑制作用(關(guān)文強(qiáng)等.食品科學(xué)，2005，26 (12):227— 230 ;周建新等.食品工業(yè)，2003(3):24— 25.)。丁香對(duì)人體螨蟲也有較好的殺滅作用(黃麗娟等.中國中醫(yī)眼科雜志，2007，17(4):211-214.)。目前，丁香提取物主要用于食品防腐、殺蝴蟲等相關(guān)領(lǐng)域。
[0006]茶樹油是通過蒸餾方式從港木桃金娘科白千層液提取出的植物精油。主要成分復(fù)雜，主要含有4-萜品醇和 1，8_桉油素等(Cox SD等.J Appl Microbiol, 2001,91 (3):492—497.)。因具有廣譜抗細(xì)菌、抗真菌和抗炎等活性(王懿等.Herald of Medicine, 2004,23(1):363-365.),常用于治療口腔潰瘍、牙齦炎、手足癬、皮膚感染等疾病，也是生產(chǎn)護(hù)膚品的原料。研究表明，對(duì)人體螺形螨有較好的殺滅活性(walton SF等.Arcb Deematol,2004，140(5):563—566)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]針對(duì)當(dāng)前在治療犬外耳炎的藥物中存在的治療范圍單一、抗生素耐藥性的問題，本發(fā)明目的在于提供一種用于防治犬外耳炎的藥物組合物，該藥物組合物對(duì)犬外耳炎的療效高、防治譜廣。
[0008]實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0009]本發(fā)明一種用于防治犬外耳炎的藥物組合物，其組成成分及其比例為:每100ml溶液中含有氟苯尼考2.0~3.0g,甲硝唑0.2~0.4g，丁香提取物0.5~3.0g,茶樹油
0.5~3.0ml，丙二醇為溶劑。
[0010]上述用于防治犬外耳炎的藥物組合物，其所述的含有氟苯尼考的比例優(yōu)選為每100ml溶液中含有氟苯尼考2.5g。
[0011]上述用于防治犬外耳炎的藥物組合物，其所述的含有甲硝唑的比例優(yōu)選為每100ml溶液中含有甲硝唑0.3g。
[0012]上述用于防治犬外耳炎的藥物組合物，其所述的含有丁香提取物的比例優(yōu)選為每100ml溶液中含有丁香提取物1.0g。
[0013]上述用于防治犬外耳炎的藥物組合物，其所述的含有茶樹油的比例優(yōu)選為每100ml溶液中含有茶樹油1.0ml0
[0014]上述用于防治犬外耳炎的藥物組合物，其組成成分及其比例為:每100ml溶液中含有氟苯尼考2.5g，甲硝唑0.3g，丁香提取物1.0g，茶樹油1.0ml，丙二醇為溶劑。
[0015]所述的的丁香提取物和茶樹油均可于市場(chǎng)上購買得到，如丁香提取物可于西安昌岳植物化工有限公司購買；茶樹油可于江西吉安海瑞天然植物有限公司購買。
[0016]上述用于防治犬外耳炎的藥物組合物的劑型為滴耳劑或其他外用溶液劑。
[0017]上述用于防治犬外耳炎的藥物組合物的滴耳劑的制備方法，包括如下步驟:
[0018](I)、按照比例將氟苯尼考溶解于丙二醇中，得氟苯尼考溶液；將甲硝唑溶解于丙二醇中，得甲硝唑溶液；將氟苯尼考溶液和甲硝唑溶液混合均勻，得混合物I;
[0019](2)、按照比例將丁香提取物溶解于丙二醇中，得丁香提取物溶液；將茶樹油溶解于丙二醇中，得茶樹油溶液；將丁香提取物溶液和茶樹油溶液混合均勻，得混合物II;
[0020](3)、將混合物I和混合物II混合，并用丙二醇定容,攪拌均勻。
[0021]本發(fā)明藥物組合物的使用方法:滴耳，一次3~4滴，一日2次；視病情，連用5~7天。
[0022]上述藥物組合物在制備防治犬外耳炎藥物上的應(yīng)用。[0023]與現(xiàn)有得氟本尼考-甲硝唑滴耳液相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)和有益效果:(1)、本發(fā)明藥物組合物對(duì)犬外耳炎的療效高，療效可達(dá)93.3%。而氟苯尼考和甲硝唑滴耳液的療效僅為76.7%，兩者防治效果有顯著差異。(2)、本發(fā)明藥物組合物含有組成成分復(fù)雜的天然提取物，減少了細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的可能性，能夠長久保持其藥效，便于準(zhǔn)確用藥。(3)、本發(fā)明藥物組合物藥效高，可減少治療犬外耳炎的時(shí)間和治療次數(shù)，減少動(dòng)物的痛苦，增加動(dòng)物福利。
【具體實(shí)施方式】
[0024]以下通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明，但是對(duì)本發(fā)明的保護(hù)范圍不構(gòu)成任何限制。 [0025]實(shí)施例1本發(fā)明用于防治犬外耳炎的藥物組合物制備
[0026](I)、將氟苯尼考2.5g溶解于丙二醇中，得氟苯尼考溶液；將甲硝唑0.3g溶解于丙二醇中，得甲硝唑溶液；將氟苯尼考溶液和甲硝唑溶液混合均勻，得混合物I ;
[0027](2)、將丁香提取物(購自西安昌岳植物化工有限公司)1.0g溶解于丙二醇中，丁香提取物溶液；將茶樹油(購自江西吉安海瑞天然植物有限公司)1.0ml溶解于丙二醇中，得茶樹油溶液；將丁香提取物溶液和茶樹油溶液混合均勻，得混合物II ;
[0028](3)、將混合物I和混合物II混合，用丙二醇定容至100ml，攪拌均勻即得本發(fā)明用于防治犬外耳炎的藥物組合物。
[0029]實(shí)施例2利用本發(fā)明藥物組合物防治細(xì)菌對(duì)比藥效試驗(yàn)
[0030]按照如下方法進(jìn)行
[0031](一)、供試菌種:金黃色葡萄球菌(編號(hào):CAU0509)、大腸桿菌(編號(hào):CAU0507)、變形桿菌(編號(hào):CVCC1971)，以上菌株均購自國家獸醫(yī)微生物菌種保藏中心(北京市海淀區(qū)中關(guān)村南大街8號(hào))。
[0032](二)試驗(yàn)處理:
[0033]處理1:氟苯尼考-甲硝唑滴耳液，規(guī)格20ml:氟苯尼考500mg+甲硝唑60mg (相當(dāng)于每100ml溶液中含有氟本尼考2.5g和甲硝唑0.3g，南京金盾動(dòng)物藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn))。
[0034]處理I1:丁香提取物溶液(重量體積比(g/ml)為:1.0:100)，將丁香提取物(購自西安昌岳植物化工有限公司)1.0g溶解于100ml丙二醇中而得。
[0035]處理II1:茶樹油溶液(體積比1%)，將茶樹油(購自江西吉安海瑞天然植物有限公司)1.0ml溶于100ml丙二醇中而得。
[0036]處理IV:實(shí)施例1制備的本發(fā)明藥物組合物
[0037](三)試驗(yàn)方法
[0038](I)、菌懸液的制備。挑取供試菌種進(jìn)行斜面活化后，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h，重復(fù)2次。在無菌條件下，在活化好的供試菌中挑取單菌落，接種于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，搖床培養(yǎng)過夜(37°C，120rpm)，調(diào)節(jié)菌種濃度到IXlO6 ~ IXlO7Cfu / ml。
[0039](2)、含菌平板的制備。在無菌條件下，吸取0.1ml的菌懸液加入滅菌好的培養(yǎng)皿中，倒入15ml左右融化冷卻至40°C的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，輕輕搖動(dòng)使培養(yǎng)基與菌種混合均勻。[0040](3)、抑菌直徑的測(cè)定。采用濾紙片法。用打孔器將定性濾紙打成直徑為6_的濾紙片，于160°C干熱滅菌15min，在無菌條件下加入滅菌藥液(處理1、I1、II1、IV)，充分浸泡lh，干燥，每個(gè)含菌平板均勻貼3片，每組作3個(gè)平行作為重復(fù)，于37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，然后測(cè)量各處理的抑菌圈直徑(mm)。
[0041](4)、聯(lián)合抑菌試驗(yàn)。采用單藥紙片搭橋法。將(3)中制備的紙片分別貼于含菌平板上，將含丁香提取物和茶樹油的紙片分別放置于氟苯尼考-甲硝唑藥敏紙片旁邊，兩種藥敏紙片的距離略大于已測(cè)得的氟苯尼考-甲硝唑抑菌圈范圍。若氟苯尼考-甲硝唑抑菌圈向丁香提取物或茶樹油紙片遷移，判定為正相關(guān)；若抑菌圈逆向遷移，判定為減小作用；若抑菌圈沒有變化，判定為無關(guān)作用。
[0042](5)、數(shù)據(jù)分析:所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異顯著性分析通過PS 0.05水平檢驗(yàn)。
[0043]結(jié)果抑菌圈直徑(見表1)顯示本發(fā)明藥物組合物(處理IV)對(duì)三種細(xì)菌的抑菌圈直徑顯著大于其他處理的抑菌圈直徑(P ( 0.05)，說明加入了丁香提取物和茶樹油的本發(fā)明藥物組合物的抑菌效果顯著增強(qiáng)。
[0044]聯(lián)合抑菌試驗(yàn)(見表1)顯示，金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基中氟苯尼考-甲硝唑抑菌圈向丁香和茶樹油都有遷移；大腸桿菌培養(yǎng)基中氟苯尼考-甲硝唑抑菌圈向丁香有明顯遷移，向茶樹油方向的抑菌圈沒有變化；變形桿菌培養(yǎng)基中抑菌圈向丁香和茶樹油方向有輕微遷移，但不明顯。說明針對(duì)引起犬外耳炎的三種主要細(xì)菌，氟苯尼考-甲硝唑與丁香、茶樹油的抑菌效果呈正相關(guān)，即抑菌呈協(xié)同作用。
[0045]表1本發(fā)明藥物組合物防治細(xì)菌對(duì)比藥效試驗(yàn)結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.一種用于防治犬外耳炎的藥物組合物，其特征在于其組成成分及其比例為:每100ml溶液中含有氟苯尼考2.0~3.0g,甲硝唑0.2~0.4g，丁香提取物0.5~3.0g,茶樹油0.5~3.0ml，丙二醇為溶劑。
2.按照權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于其所述的含有氟苯尼考的比例為每100ml溶液中含有氟苯尼考2.5g。
3.按照權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于其所述的含有甲硝唑的比例為每100ml溶液中含有甲硝唑0.3g。
4.按照權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于其所述的含有丁香提取物的比例為每100ml溶液中含有丁香提取物1.0g。
5.按照權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于其所述的含有茶樹油的比例為每100ml溶液中含有茶樹油1.0ml0
6.按照權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于其組成成分及其比例為:每100ml溶液中含有氟苯尼考2.5g，甲硝唑0.3g，丁香提取物1.0g，茶樹油1.0ml，丙二醇為溶劑。
7.權(quán)利要求1所述的藥物組合物的劑型為滴耳劑。
8.權(quán)利要求1所述的藥物組合物的滴耳劑的制備方法，包括如下步驟: (1)、按照比例將氟苯尼考溶解于丙二醇中，得氟苯尼考溶液；將甲硝唑溶解于丙二醇中，得甲硝唑溶液；將氟苯尼考溶液和甲硝唑溶液混合均勻，得混合物I ; (2)、按照比例將丁香提取物溶解于丙二醇中，得丁香提取物溶液；將茶樹油溶解于丙二醇中，得茶樹油溶液；將丁香提取物溶液和茶樹油溶液混合均勻，得混合物II ;` (3)、將混合物I和混合物II混合,并用丙二醇定容,攪拌均勻。
9.權(quán)利要求1所述的藥物組合物在制備防治犬外耳炎藥物上的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K31/4164GK103550303SQ201310587175
【公開日】2014年2月5日 申請(qǐng)日期:2013年11月20日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月20日
【發(fā)明者】李忠生, 馮秀娟, 王智群, 賀星亮, 李冰, 劉新貴, 冒勇 申請(qǐng)人:南京金盾動(dòng)物藥業(yè)有限責(zé)任公司