姜黃素與銀杏內(nèi)酯b配伍組合物及其應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍的組合物及其應(yīng)用，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍的組合物由下列重量比的藥物均勻混合制成：姜黃素1-8份，銀杏內(nèi)酯B1份。該藥物組合物治療多囊腎病具有協(xié)同作用，優(yōu)于單一用藥。
【專(zhuān)利說(shuō)明】姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍組合物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍的藥物組合物的制備及應(yīng)用。
【背景技術(shù)】 [0002]多囊腎病是一種常見(jiàn)的單基因遺傳性疾病，分為常染色體顯性多囊腎病(ADPKD)與常染色體隱性多囊腎病(ARPKD)，發(fā)病率分別為1/1000 - 1/400和1/40000-1/10000 (Jin He, Jianhua Ye, Qiuyan Li, et al.Construction of atransgenic pig model overexpressing polycystic kidney disease 2 (PKD2) gene.Transgenic Res, 2013, DO1: 10.1007/sll248-012-9686_z.)。其中 ADPKD 發(fā)病率高、危害大，以雙腎出現(xiàn)多發(fā)性進(jìn)行性大小不一的囊泡為主要特征，還引起肝囊腫、胰腺囊腫、心瓣膜病等腎外病變，常在成人期導(dǎo)致腎功能衰竭甚至死亡，目前除腎移植和透析外，尚無(wú)特效藥物，給患者、家庭和社會(huì)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
[0003]多囊腎病的發(fā)病機(jī)制主要包括:囊泡上皮細(xì)胞的過(guò)度增殖與囊液的分泌兩方面。囊泡上皮細(xì)胞的過(guò)度增殖主要涉及EGFR的過(guò)度表達(dá)與異常定位(Aguiari G, CatizoneL, Del Senno L.Multidrug therapy for polycystic kidney disease: a review andperspective.Am J Nephrol, 2013, 37(2): 175-182.)，以及下游的 Ras-MAPK 信號(hào)通路(Xu T, Wang NS, Fu LL, et al.Celecoxib inhibits growth of human autosomaldominant polycystic kidney cyst-lining epithelial cells through the VEGF/Raf/MAPK/ERK signaling pathway.Mol Biol Rep, 2012， 39(7): 7743-7753.)和m-T0R 信號(hào)通路(Jardine MJ, Liyanage T, Buxton E, et al.mTOR inhibition inautosomal-dominant polycystic kidney disease (ADPKD): the question remainsopen.Nephrol Dial Transplant, 2013, 28(2): 242-244.)，此外，cAMP信號(hào)通路、Wnt 信號(hào)通路和JAK-STAT信號(hào)通路等也參與了囊泡上皮細(xì)胞過(guò)度增殖這一病理過(guò)程。囊液的分泌主要涉及囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(CFTR) (Yang B, Sonawane ND, Zhao D, et al.Smal1-molecule CFTR inhibitors slow cyst growth in polycystic kidney disease.JAm Soc Nephrol, 2008，19:1300-1310.)、水通道(Aquaporin, AQP)(高晉生，李囿松.姜黃素體外調(diào)控AQP2表達(dá)抑制MDCK囊泡生成的實(shí)驗(yàn)研究.山西中醫(yī).2012，28(8):47-48，53.)、Na+-K+-ATP酶(許書(shū)添，姚小丹.多囊腎病發(fā)病機(jī)制和治療.腎臟病與透析腎移植雜志.2010，19(4): 367-372.)等。這兩個(gè)病理過(guò)程由基因突變引起，ADPKD致病基因?yàn)镻KDl和PKD2。如圖2所示，PKDl與PKD2基因編碼的蛋白分別稱(chēng)為多囊蛋白I (polycystin-1, PCI)和多囊蛋白 2 (polycystin-2, PC2)。PCl 是上皮細(xì)胞膜受體,PC2具有鈣離子通道的作用，兩者相互作用，可以維持腎上皮細(xì)胞內(nèi)Ca2+的正常濃度。當(dāng)PKDl或PKD2基因發(fā)生突變時(shí)，細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度降低，cAMP水平增高，后者通過(guò)影響細(xì)胞內(nèi)相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)通路，引起囊泡細(xì)胞的過(guò)度增殖和囊液的分泌，促進(jìn)囊泡的形成與生長(zhǎng)(高晉生，楊寶學(xué).常染色體顯性遺傳多囊腎病的治療研究進(jìn)展.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)2009，25(2):141-144.)。[0004]姜黃素(curcumin, Cur)是從天然植物姜黃等的根莖中提取的一種多酹類(lèi)化合物，具有抗腫瘤、抗氧化、抗抑郁、抗血管生成等多種藥理作用。銀杏內(nèi)酯(ginkgolides)是從銀杏中提取得到的一種萜類(lèi)內(nèi)酯類(lèi)化合物，包括銀杏內(nèi)酯A、B、C、J、K、L和M，銀杏內(nèi)酯是血小板活化因子(platelet activating factor, PAF)抑制劑，其中，銀杏內(nèi)酯B(ginkgolideB, GB)是銀杏內(nèi)酯中藥理活性最強(qiáng)的一種。研究表明，銀杏內(nèi)酯B具有抗炎、抗氧化、抗過(guò)敏、神經(jīng)保護(hù)等作用(Xia SH, Fang DC.Pharmacological action andmechanisms of ginkgolide B.Chin Med J, 2007, 120 (10): 922-928.)。
[0005]我們研究發(fā)現(xiàn)了姜黃素(JinshengGao, Hong Zhou, Tianluo Lei, et al.Curcumin inhibits renal cyst formation and enlargement in vitro by regulatingintracellular signaling pathways.European Journal of Pharmacology, 2011,654(1): 92-99.)、銀杏內(nèi)酯B (Hong Zhou, Jinsheng Gao, Li Zhou, et al.GinkgolideB inhibits renal cyst development in in vitro and in vivo cyst models.AJP RenalPhysiology, 2012，302(10): F1234-1242.)的抗囊泡生成作用，并發(fā)現(xiàn)兩者均可通過(guò)調(diào)控Ras/MAPK信號(hào)通路抑制體外囊泡上皮細(xì)胞的過(guò)度增殖。其中B_raf與Raf-1是這條信號(hào)通路的關(guān)鍵調(diào)控點(diǎn)，Ras/B-raf/MEK/ERK信號(hào)通路的激活促進(jìn)了囊泡上皮細(xì)胞的過(guò)度增殖，而Ras/Raf-1/MEK/ERK信號(hào)通路的激活使囊泡上皮細(xì)胞的增殖恢復(fù)正常。多囊腎病發(fā)病過(guò)程中，B-raf過(guò)表達(dá)，而Raf-1被抑制，我們研究發(fā)現(xiàn)二者可下調(diào)B_raf表達(dá)，上調(diào)Raf-1表達(dá)，從而使囊泡細(xì)胞增殖恢復(fù)正常。
[0006]盡管姜黃素、銀杏內(nèi)酯B均具有抑制囊泡生長(zhǎng)的作用，但單用二者效果并不令人滿意，目前，姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍治療多囊腎病是否具有協(xié)同作用，即實(shí)現(xiàn)1+1>2的作用國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。應(yīng)用MDCK囊泡模型，我們發(fā)現(xiàn)姜黃素、銀杏內(nèi)酯B單獨(dú)用藥均抑制囊泡的形成，二者作用后囊泡形態(tài)明顯不同，姜黃素作用后的囊泡呈厚壁小囊泡或圓形的細(xì)胞集落，銀杏內(nèi)酯B作用后的囊泡呈薄壁小囊泡或不規(guī)則細(xì)胞集落，提示二者作用機(jī)制存在不同。應(yīng)用PKDl基因敲除小鼠，我們發(fā)現(xiàn)姜黃素、銀杏內(nèi)酯B單獨(dú)用藥均抑制腎囊泡的生長(zhǎng)，二者作用后小鼠精神狀態(tài)`不同，姜黃素作用后小鼠精神狀態(tài)良好，銀杏內(nèi)酯精神狀態(tài)較差，提示姜黃素可能同時(shí)具有抗抑郁作用。因此我們通過(guò)姜黃素配伍銀杏內(nèi)酯B進(jìn)行體內(nèi)外的囊泡抑制研究，發(fā)現(xiàn)兩者配伍重量之比在1:1-8:1時(shí)具有協(xié)同作用，作用后MDCK囊泡多呈小的圓形的細(xì)胞集落(MDCK囊泡抑制率高達(dá)90.46%)，小鼠腎囊泡減少變小(小鼠腎囊泡抑制率高達(dá)87.93%)，精神狀態(tài)良好，生存時(shí)間明顯延長(zhǎng)(小鼠生存期延長(zhǎng)率61.40%)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明涉提供治療效果更好的一種姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍的藥物組合物。
[0008]姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍的藥物組合物，姜黃素與銀杏內(nèi)酯B重量份之比為I~8:1。
[0009]姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍的藥物組合物用于治療多囊腎病。
[0010]姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍的藥物組合物可直接藥用，或添加合適的輔料制成片齊?、膠囊、□服液、顆粒劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、注射劑、栓劑、貼劑、滴劑、噴霧劑、霜?jiǎng)?、混懸劑、酊劑、乳劑、滴丸或粉劑進(jìn)行使用。
[0011]本發(fā)明所述姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍藥物組合物的成人(60kg)用量為:每日姜黃素為528~4224mg (注射)，銀杏內(nèi)酯B為264~528mg (注射)，姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍重量之比在1:1~8:1，分早晚兩次用藥。
[0012]本發(fā)明通過(guò)姜黃素配伍銀杏內(nèi)酯B進(jìn)行體內(nèi)外的囊泡抑制研究，發(fā)現(xiàn)兩者具有協(xié)同作用，MDCK囊泡抑制率高達(dá)90.46% (單用姜黃素、銀杏內(nèi)酯B分別僅為63.82%,66.73%)；小鼠腎囊泡抑制率高達(dá)87.93% (而單用姜黃素、銀杏內(nèi)酯B分別僅為41.22%,46.43%);小鼠生存期延長(zhǎng)率61.40% (而單用姜黃素、銀杏內(nèi)酯B分別僅為20.18%,7.02%)。【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0013]圖1為姜黃素的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。
[0014]圖2為銀杏內(nèi)酯B的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。
[0015]圖3為MDCK囊泡與細(xì)胞集落。
[0016]圖4為姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B對(duì)MDCK囊泡形成的抑制作用表。
[0017]圖5為MTT檢測(cè)姜黃素對(duì)MDCK細(xì)胞的細(xì)胞毒性圖。
[0018]圖6為MTT檢測(cè)銀杏內(nèi)酯B對(duì)MDCK細(xì)胞的細(xì)胞毒性圖。
[0019]圖7為姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B對(duì)PKDl基因敲除小鼠腎囊泡生長(zhǎng)的抑制作用表。
[0020]圖8為姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B對(duì)PKDl基因敲除小鼠生存期的影響圖。
[0021]圖9為姜黃素對(duì)MDCK細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用圖。
[0022]圖10為銀杏內(nèi)酯B對(duì)MDCK細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用圖。
【具體實(shí)施方式】
[0023]下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法；所述試劑和生物材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑獲得。
[0024]實(shí)施例1:姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B對(duì)MDCK囊泡形成的抑制作用
犬腎細(xì)胞(MDCK)在三維基質(zhì)膠中培養(yǎng)時(shí)受cAMP刺激形成囊泡，并可持續(xù)生長(zhǎng)。forskolin是腺苷酸環(huán)化酶的激活劑,腺苷酸環(huán)化酶可介導(dǎo)cAMP的生成，因此forskolin可促進(jìn)MDCK囊泡形成和生長(zhǎng)，其囊泡特性與多囊腎囊泡的特性相似，是篩選評(píng)價(jià)化合物治療多囊腎藥理活性的最佳體外模型。
[0025]將MDCK細(xì)胞(北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥理系贈(zèng)送)分別培養(yǎng)于含不同藥物的三維基質(zhì)膠24孔板中，其中含有IOmM forskolin (FSK，佛司可林，購(gòu)自美國(guó)Sigma公司)和姜黃素(購(gòu)自美國(guó)Sigma公司，商品目錄號(hào)C1386，濃度分別為0mM、0.4mM、2mM、IOmM)聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B(購(gòu)自Sigma公司，商品目錄號(hào)G6910,濃度分別為0.125mM、0.5mM、2mM)的不同配伍方案,每孔大約400個(gè)細(xì)胞，每組設(shè)3個(gè)平行孔。培養(yǎng)4-5天后，在含有IOmM forskolin的培養(yǎng)孔中形成MDCK細(xì)胞的囊泡。培養(yǎng)第6天時(shí)，計(jì)數(shù)圓形囊泡(直徑大于50mm)和非囊泡細(xì)胞的集落，計(jì)算囊泡占總細(xì)胞集落(囊泡和非囊泡集落)的百分率。實(shí)驗(yàn)設(shè)三次重復(fù)，囊泡占總細(xì)胞集落的百分率為39.82 ±0.75%。囊泡與非囊泡細(xì)胞的形態(tài)如圖3所示。姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B對(duì)MDCK囊泡形成的抑制作用如圖4所示。從圖4、圖5中可以看出，姜黃素、銀杏內(nèi)酯B作用后囊泡形態(tài)明顯不同，姜黃素作用后的囊泡大多呈厚壁小囊泡，銀杏內(nèi)酯B作用后的囊泡大多呈薄壁小囊泡，姜黃素配伍銀杏內(nèi)酯B作用后MDCK囊泡大多呈小的圓形的細(xì)胞集落，提示二者作用機(jī)制存在不同。從圖5中可以看出，中低劑量姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B對(duì)MDCK囊泡形成抑制具有協(xié)同作用。
[0026]姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯對(duì)MDCK囊泡抑制作用，通過(guò)金氏公式判斷，即Q=EA+B/(EA+EB—EAXEB)，其中 EA+B為姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B的抑制率，EA、EB分別為姜黃素、銀杏內(nèi)酯B的抑制率，Q為0.85~1.15之間為單純相加( + )，Q為1.15~20之間為增強(qiáng)(++)，Q大于20為顯著增強(qiáng)(+++)，Q為0.85~0.55之間為拮抗(一)，Q小于0.55為明顯拮抗( )。
[0027]實(shí)施例2:通過(guò)MTT法確定姜黃素、銀杏內(nèi)酯B的細(xì)胞毒性
將對(duì)數(shù)期的MDCK細(xì)胞懸液接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔含有4X IO3個(gè)細(xì)胞，每孔給予200 μ L MDCK細(xì)胞培養(yǎng)液(由DMEM培養(yǎng)基(購(gòu)自美國(guó)sigma公司)和F12培養(yǎng)基(購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司)等體積混合而成)，置于37°C的5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。然后在細(xì)胞培養(yǎng)板中加入終濃度分別為1 X10-4、1X 10_5M、1 X 10_6M、1 X1O-7M的姜黃素和銀杏內(nèi)酯B各20 μ L，繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)。除去上清，加入200 μ L MDCK細(xì)胞培養(yǎng)液和20 μ L濃度為5mg/ml的MTT溶液，繼續(xù)培養(yǎng)3小時(shí)。除去上清，每孔加入150 μ L 二甲基亞砜，置搖床上100轉(zhuǎn)/分振蕩lOmin，使結(jié)晶物充分溶解。酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔OD值(檢測(cè)波長(zhǎng)為492nm)，設(shè)置調(diào)零孔(培養(yǎng)基、MTT和二甲基亞砜)和對(duì)照孔(細(xì)胞、相同濃度的姜黃素的溶解介質(zhì)、培養(yǎng)基、MTT和二甲基亞砜)，每組設(shè)定5個(gè)復(fù)孔。按照下述公式計(jì)算抑制率:抑制率=[(對(duì)照孔-調(diào)零孔)_(給藥孔-調(diào)零孔)]/(對(duì)照孔-調(diào)零孔)χ100%。實(shí)驗(yàn)設(shè)三次重復(fù)，加入姜黃素、銀杏內(nèi)酯B后細(xì)胞的MTT結(jié)果如圖5、圖6所示。其中，control表示用不含姜黃素、銀杏內(nèi)酯B的培養(yǎng)液培養(yǎng)。結(jié)果表明，1X10_5 M以下濃度的姜黃素、1X 10_4 M以下濃度的銀杏內(nèi)酯B對(duì)MDCK細(xì)胞均無(wú)細(xì)胞毒性作用。
[0028]實(shí)施例3:通過(guò)PKDl基因敲除小鼠評(píng)價(jià)姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B對(duì)小鼠腎囊泡生長(zhǎng)的抑制作用
本課題組將應(yīng)用多囊腎病PKDl腎臟組織特異性敲除小鼠模型進(jìn)行研究，普通PKDl基因敲除小鼠具有腎臟、胰腺、血管發(fā)育異常，在胚胎期/新生期死亡，而PKDl腎臟組織特異性敲除小鼠可保持其他組織器官正常，只在腎臟發(fā)生囊泡，囊泡迅速生長(zhǎng)(圖7)，在兩周內(nèi)導(dǎo)致腎功能衰竭，死于20天齡。該模型小鼠將用于研究姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B是否抑制多囊腎病小鼠腎囊泡的形成和生長(zhǎng)，同窩雜合子小鼠表現(xiàn)為野生型表型，將被用作正常對(duì)照。野生型小鼠、多囊腎病小鼠分別分為生理鹽水組、姜黃素組(分別為80、160、320mg/kg)、銀杏內(nèi)酯B組(分別為20、40、80mg/kg)、姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B組，每組至少3只小鼠以上保證結(jié)果統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的可靠性。腹部皮下注射給藥，每天2次。每次給藥前觀察小鼠的一般狀態(tài)。7天齡時(shí)每組處死小鼠，取腎組織，檢查腎臟組織學(xué)特征。通過(guò)測(cè)定腎內(nèi)囊泡面積大小觀察腎囊泡的生長(zhǎng)率，通過(guò)記錄小鼠壽命觀察生存期，從而評(píng)價(jià)姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B治療多囊腎病PKDl基因敲除小鼠的藥理學(xué)作用。獲得最佳配伍方案:160mg/kg姜黃素聯(lián)合80mg/kg銀杏內(nèi)酯B，進(jìn)一步研究其對(duì)多囊腎病小鼠生存期的影響，當(dāng)小鼠表現(xiàn)為衰竭垂死狀態(tài)時(shí)處死，統(tǒng)計(jì)生存期(如圖8所示，*P〈0.05，***P〈0.001)，計(jì)算生存期延長(zhǎng)率=(給藥組生存期-空白組生存期)/空白組生存期X 100%。
[0029]囊泡發(fā)展程度的定量分析:囊泡的發(fā)展程度以腎臟指數(shù)，腎囊泡大小作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。腎囊泡大小測(cè)定:在光學(xué)顯微鏡下觀察系列腎臟組織切片(0.1 mm間隔)，應(yīng)用Image-Pro Plus 6.0測(cè)量囊泡總面積、腎臟面積,計(jì)算囊泡大小抑制率=(生理鹽水組囊泡面積一給藥囊泡面積)/生理鹽水組囊泡面積X 100%。結(jié)果如圖1所示。
姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯對(duì)小鼠腎囊泡抑制作用，通過(guò)金氏公式判斷，即Q=EA+B/(EA+EB —EAXEB)，其中EA+B為姜黃素聯(lián)合銀杏內(nèi)酯B的抑制率，EA、EB分別為姜黃素、銀杏內(nèi)酯B的抑制率，Q為0.85~1.15之間為單純相加( + )，Q為1.15~20之間為增強(qiáng)(++)，Q大于20為顯著增強(qiáng)(+++)，Q為0.85-0.55之間為拮抗(一)，Q小于0.55為明顯拮抗(一一)。
[0030]實(shí)施例4:姜黃素、銀杏內(nèi)酯B的作用靶點(diǎn)和機(jī)制
利用Western印跡技術(shù)，檢測(cè)姜黃素對(duì)囊泡上皮細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響。具體實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下:
將MDCK細(xì)胞培養(yǎng)至70%的細(xì)胞密度，換無(wú)血清培養(yǎng)液培養(yǎng)24小時(shí)，然后加入含IOMforskolin的培養(yǎng)液，同時(shí)分別給予姜黃素、銀杏內(nèi)酯B,以不含有forskolin的培養(yǎng)液培養(yǎng)的MDCK細(xì)胞作為control組，上述各組細(xì)胞均刺激60min。
[0031]提取上述各組細(xì)胞的總蛋白，用BCA法作蛋白定量。SDS-PAGE電泳、轉(zhuǎn)膜，加相應(yīng)一抗和二抗?；瘜W(xué)發(fā)光，顯影、定影。結(jié)果如圖9、圖10所示:
隨著forskolin刺激MDCK細(xì)胞不同時(shí)間，通過(guò)Western檢測(cè)ρ-ERK的水平，發(fā)現(xiàn)p_ERK水平在60min左右時(shí)達(dá)到高峰。因此選擇forskolin作用MDCK細(xì)胞60min時(shí)的蛋白進(jìn)行一系列 Western 檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn):在 forskolin 作用下，H-Ras、B_raf、p-MEK、p_ERK、Egr-1、c-fos、p-CREB表達(dá)增加，Raf-U NAB2表達(dá)減少；姜黃素可以下調(diào)細(xì)胞內(nèi)H_Ras、B-raf,p-MEK, p-ERK, Egr-1, c-fos的表達(dá)，同時(shí)上調(diào)Raf_l、NAB2的表達(dá)；而銀杏內(nèi)酯B可以下調(diào)細(xì)胞內(nèi)H-Ras、B-raf、p-MEK、p-ERK、p-CREB的表達(dá)，上調(diào)Raf-1的表達(dá)；提示兩者作用機(jī)制存在一定差異，兩者聯(lián)合可能具有協(xié)同作用。
【權(quán)利要求】
1.姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍的組合物，其特征在于重量份配比為姜黃素I~8份，銀杏內(nèi)酯B 1份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍的組合物，其特征是它的用途是治療多囊腎病。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述姜黃素與銀杏內(nèi)酯B配伍的組合物，其特征是組合物均勻混合制成片劑、膠囊、口服液、顆粒劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、注射劑、栓劑、貼劑、滴劑、噴霧劑、霜?jiǎng)⒒鞈覄?、酊劑、乳劑、滴丸或粉劑進(jìn)行使用。
【文檔編號(hào)】A61P13/12GK103599098SQ201310568288
【公開(kāi)日】2014年2月26日 申請(qǐng)日期:2013年11月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月15日
【發(fā)明者】高晉生, 李囿松, 楊寶學(xué), 王晞星, 鄭建忠, 李廷荃, 劉光珍, 郝旭亮, 劉麗坤, 李宜放 申請(qǐng)人:山西省中醫(yī)藥研究院