一種用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑及其制備方法，屬于獸用中醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】。該中草藥微生態(tài)制劑主要由以下原料制備而成：原料藥以重量份數(shù)計為：白頭翁1?10份、黃連3?20份、黃柏5?15份、秦皮6?25份，菌液以體積分?jǐn)?shù)計為：嗜酸乳桿菌菌液1?3份、糞腸球菌菌液1?6份、枯草芽孢桿菌菌液1?6份，菌液的總重量與原料藥的總重量的比值為（1?5):(40?50)。上述中藥與益生菌聯(lián)用，在防治仔豬細(xì)菌性痢疾方面具有無抗藥性、毒副作用小、不易產(chǎn)生有害殘留等特點；益生菌能產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，并與有害細(xì)菌競爭生態(tài)位，抑制致病菌的生長繁殖，調(diào)整恢復(fù)腸道的菌群平衡，降低仔豬腹瀉率，改善仔豬發(fā)育。
【專利說明】一種用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑及其制 備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明具體涉及一種用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑，以及該中草 藥微生態(tài)制劑的制備方法，屬于獸用中醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 目前，因細(xì)菌感染引起的仔豬下痢十分常見，它包括由沙門氏菌感染引起的仔豬 副傷寒，由大腸桿菌感染引起的仔豬白痢、黃痢，由C型魏氏梭菌感染引起的仔豬紅痢。仔 豬出現(xiàn)細(xì)菌性痢疾不但直接增加藥物投入，降低飼料利用率，使養(yǎng)豬成本大幅度上升，而且 嚴(yán)重影響仔豬的育成率，威脅仔豬健康。當(dāng)前，臨床防治仔豬細(xì)菌性痢疾常用抗生素類藥 品，但抗生素易產(chǎn)生耐藥性，且仔豬胃腸功能不全，其治療效果并不理想。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑。
[0004] 同時，本發(fā)明還提供一種用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備方 法。
[0005] 為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：
[0006] -種用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑，主要由以下原料制備而成： 原料藥以重量份數(shù)計為：白頭翁1?10份、黃連3?20份、黃柏5?15份、秦皮6?25份， 菌液以體積分?jǐn)?shù)計為：嗜酸乳桿菌菌液1?3份、糞腸球菌菌液1?6份、枯草芽孢桿菌菌 液1?6份，菌液的總重量與原料藥的總重量的比值為（1?5) : (40?50)。
[0007] 優(yōu)選的，一種用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑，主要由以下原料制 備而成：原料藥以重量份數(shù)計為：白頭翁6份、黃連3份、黃柏5份、秦皮6份，菌液以體積分 數(shù)計為：嗜酸乳桿菌菌液1份、糞腸球菌菌液3份、枯草芽孢桿菌菌液2份，菌液的總重量與 原料藥的總重量的比值為3:50。
[0008] 所述的嗜酸乳桿菌菌液的濃度為0. 5 X 108?1. 0 X 108CFU/ml。
[0009] 所述的糞腸球菌菌液的濃度為0. 5 X 108?1. 0 X 108CFU/ml。
[0010] 所述的枯草芽孢桿菌菌液的濃度為0. 5X 108?1. OX 108CFU/ml。
[0011] 各原料藥功效簡述如下：
[0012] 白頭翁：為毛茛科白頭翁屬植物白頭翁的根；含有三萜化合物如白頭翁素、白樺 脂酸、3-氧代脂酸、白頭翁皂苷A、B、C、D等多種有效成分；性味苦、寒，歸胃、大腸經(jīng)；能清 熱解毒、涼血止痢、燥濕殺蟲；主治赤白痢疾、鼻衄、血痔、寒熱溫瘧、瘰疬、濕疹癰瘡、眼目赤 痛等；現(xiàn)代藥理學(xué)證明白頭翁具有抗病原微生物、抗阿米巴原蟲、抗其他病原體、抗腫瘤、抗 炎及增強免疫功能等作用。
[0013] 黃連：為毛根科黃連屬植物黃連、三角葉黃連或云南黃連的根莖；含有生物堿類 如黃連堿、黃柏堿等多種活性成分；黃連性味苦，寒，歸心、肝、胃、大腸經(jīng)；能清熱瀉火，燥 濕，解毒；主治熱病邪入心經(jīng)之高熱，煩躁，濕熱胸痞，泄瀉，痢疾，心火亢盛之心煩失眠，胃 熱嘔吐，消谷善饑，肝火目赤腫痛，以及熱毒瘡瘍，疔毒走黃，牙齦腫痛，口舌生瘡，痔血，濕 疹，燙傷等；現(xiàn)代藥理學(xué)證明黃連對循環(huán)系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生影響，還具有抗微生物、抗原 蟲、抗?jié)?、抗病毒、抗炎、抗腫瘤、降血糖、抑制血小板聚集等作用。
[0014] 黃柏：為蕓香科黃檗屬植物黃皮樹或黃檗的樹皮；含有生物堿類如小檗堿、黃柏 堿、木蘭花堿、藥根堿等，還含有檸檬苦素、黃柏酮、菜油留醇、豆留醇等多種有效成分；性味 苦、寒，歸腎、膀胱、大腸經(jīng)；能清熱燥濕、瀉火解毒；主治濕熱痢疾、泄瀉、黃疸、骨蒸勞熱、 口舌生瘡、目赤腫痛、癰疽瘡毒等；現(xiàn)代藥理學(xué)證明黃柏具有抗病原微生物、解熱和抗炎癥、 抗血小板聚集等功效，對心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)和中樞腎經(jīng)系統(tǒng)具有促進作用等。
[0015] 秦皮：為木犀科白蠟樹屬植物大葉涔、尖葉涔、白蠟樹和宿柱涔的樹皮；含有馬栗 樹皮苷、馬栗樹皮素，還含有香豆素類如秦皮乙素、秦皮素及生物堿等多種活性成分；性味 苦、澀，寒，歸肝、膽、大腸經(jīng)；能清熱燥濕、清肝明目；主治濕熱瀉痢、目赤腫痛、肺熱氣喘咳 嗽等；現(xiàn)代藥理學(xué)證明秦皮具有抗菌、止咳祛痰作用等。
[0016] 一種用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑，可以采用常規(guī)方法制備。本 發(fā)明僅提供一種具體的制備方法，包括以下步驟：
[0017] (1)按照重量份數(shù)準(zhǔn)確取白頭翁、黃連、黃柏和秦皮，烘干后粉碎、過篩，再加水煎 煮3次，合并3次煎液，濾過得藥液備用；
[0018] (2)按照體積份數(shù)準(zhǔn)確取嗜酸乳桿菌菌液、糞腸球菌菌液和枯草芽孢桿菌菌液，混 勻后根據(jù)菌液總量與原料藥總量之間的比值，將混合菌液加入到步驟（1)的藥液中，在密閉 條件下厭氧發(fā)酵，發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)冷凍干燥即得。
[0019] 所述步驟（1)中的烘干溫度為60?80°C。
[0020] 所述步驟（1)中的過篩為過60?100目篩。
[0021] 所述步驟（1)中加水煎煮為每次煎煮加5?6倍量的水，煎煮1?2小時。
[0022] 所述步驟（2)中嗜酸乳桿菌菌液的制備方法為：先將嗜酸乳桿菌接種于斜面培養(yǎng) 基中，將斜面培養(yǎng)基上產(chǎn)生的懸浮液加入到MRS液體培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)，至對數(shù)生長期時 菌液的濃度為〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
[0023] 所述步驟（2)中糞腸球菌菌液的制備方法為：先將糞腸球菌接種于斜面培養(yǎng)基 中，將斜面培養(yǎng)基上產(chǎn)生的懸浮液加入到MRS液體培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)，至對數(shù)生長期時菌 液的濃度為〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
[0024] 所述步驟（2)中枯草芽孢桿菌菌液的制備方法為：先將枯草芽孢桿菌接種于斜面 培養(yǎng)基中，將斜面培養(yǎng)基上產(chǎn)生的懸浮液加入到LB液體培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)，至對數(shù)生長期 時菌液的濃度為〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
[0025] 所述步驟（2)中厭氧發(fā)酵的溫度為30?37°C，發(fā)酵時間為36?72小時。
[0026] 用法與用量：混飲，每100g兌水200kg，連用2?3天，為預(yù)防量；治療量加倍。
[0027] 本發(fā)明的有益效果：
[0028] 本發(fā)明是在中獸醫(yī)學(xué)衛(wèi)氣營血辯證理論方法的指導(dǎo)下，篩選出白頭翁、黃連、黃 柏、秦皮共4味純天然中草藥，按照君臣佐使原則配伍組方。方中白頭翁清血分熱毒為主 藥；黃連苦寒清濕熱、厚腸胃，黃柏瀉下焦?jié)駸?，兩藥共為清解涼血的輔佐藥；秦皮性寒，味 苦而澀，具有收斂止痢之功，與上藥相配，清熱解毒，涼血止痢之效俱備，以使清熱毒解，痢 止而后重自除。
[0029] 本發(fā)明采用采用嗜酸乳桿菌、糞腸球菌和枯草芽孢桿菌制備微生態(tài)制劑，其中嗜 酸乳桿菌能調(diào)整腸道菌群平衡，抑制腸道不良微生物的增殖，分泌抗生物素類物質(zhì)如嗜酸 乳菌素、嗜酸桿菌素、乳酸菌素等，對腸道致病菌產(chǎn)生拮抗作用；糞腸球菌有利于改善腸道 內(nèi)微生態(tài)平衡，防治動物腸道菌叢區(qū)系紊亂，還能分解蛋白質(zhì)為小肽，合成B族維生素，增 強巨嗜細(xì)胞的活性，促進動物的免疫反應(yīng)，提高抗體水平等；枯草芽孢桿菌能迅速消耗環(huán) 境中的游離氧，造成腸道低氧，促進有益厭氧菌生長，并產(chǎn)生乳酸等有機酸類，降低腸道pH 值，間接抑制其它致病菌生長。刺激動物免疫器官的生長發(fā)育，激活T、B淋巴細(xì)胞，提高免 疫球蛋白和抗體水平，增強細(xì)胞免疫和體液免疫功能，提高群體免疫力。三種益生菌聯(lián)用可 通過動物消化道生物的競爭性排斥作用，抑制病原菌繁殖，阻止病原菌吸附于腸壁，促進其 排出體外；補充有益菌群，調(diào)整動物腸道菌群微生態(tài)平衡；發(fā)揮營養(yǎng)助消化作用，提高飼料 轉(zhuǎn)化率，合成營養(yǎng)物質(zhì)，促進動物生長；還可通過增強非特異性免疫功能來預(yù)防疾病，提高 機體免疫力；抑制腸道內(nèi)氨及胺等毒性物質(zhì)的產(chǎn)生，改善環(huán)境衛(wèi)生，凈化環(huán)境。
[0030] 本發(fā)明將上述4味純天然中草藥與三種益生菌復(fù)配制備微生態(tài)制劑，可以在動物 體內(nèi)產(chǎn)生多種水解酶，促進蛋白、淀粉、脂肪和半纖維素的分解，有利于飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的 消化吸收，同時可合成營養(yǎng)物質(zhì)以及一些未知促生長因子參與新陳代謝，促進動物生長。將 二者聯(lián)用來防治仔豬細(xì)菌性痢疾，標(biāo)本兼治。不僅可以抑制病原微生物的生長，維持腸道生 態(tài)平衡，有效防治斷乳仔豬的腹瀉，還能提高仔豬成活率，促使機體產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì)，增 強免疫功能，提高仔豬的抗應(yīng)激能力，同時促進仔豬腸道發(fā)育，增強消化酶的活性，提高采 食量，提高日增重，降低料重比。
[0031] 本發(fā)明制備的中草藥微生態(tài)制劑在養(yǎng)豬生產(chǎn)中可階段性或長期的通過飲水或拌 料的方式用藥，有利于促進養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展與保障動物性食品的安全。
[0032] 本發(fā)明制備微生態(tài)制劑的方法簡單、易操作，使用方便，成本低，適于大規(guī)模生產(chǎn) 及推廣應(yīng)用。

【具體實施方式】
[0033] 下述實施例僅對本發(fā)明作進一步詳細(xì)說明，但不構(gòu)成對本發(fā)明的任何限制。
[0034] 實施例1
[0035] 本實施例中用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑，由以下原料制備而 成：原料藥以重量份數(shù)計為：白頭翁1份、黃連20份、黃柏5份、秦皮25份，菌液以體積分?jǐn)?shù) 計為：嗜酸乳桿菌菌液1份、糞腸球菌菌液6份、枯草芽孢桿菌菌液1份，菌液的總重量與原 料藥的總重量的比值為1:50。
[0036] 本實施例中用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備方法，包括以下 步驟：
[0037] (1)按照重量份數(shù)準(zhǔn)確取白頭翁、黃連、黃柏和秦皮，60°C烘干后粉碎，過60目篩， 再加水煎煮3次，每次煎煮加5倍量的水，煎煮1. 5小時，合并3次煎液，濾過得藥液備用；
[0038] (2)按照體積份數(shù)準(zhǔn)確取嗜酸乳桿菌菌液、糞腸球菌菌液和枯草芽孢桿菌菌液，混 勻后根據(jù)菌液總量與原料藥總量之間的比值，將混合菌液加入到步驟（1)的藥液中，在密閉 條件下厭氧發(fā)酵，發(fā)酵的溫度為30°C，發(fā)酵時間為72小時，將發(fā)酵產(chǎn)物冷凍干燥即得。
[0039] 所述步驟（2)中嗜酸乳桿菌菌液、糞腸球菌菌液、枯草芽孢桿菌菌液的制備方法 為：先將嗜酸乳桿菌、糞腸球菌、糞腸球菌分別接種于各自的斜面培養(yǎng)基中，將各個斜面培 養(yǎng)基上產(chǎn)生的懸浮液依次加入到MRS液體培養(yǎng)基、MRS液體培養(yǎng)基、LB液體培養(yǎng)基中擴大培 養(yǎng)，至對數(shù)生長期時菌液的濃度分別為0. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
[0040] 用法與用量：混飲，每l〇〇g兌水200kg，連用2?3天，為預(yù)防量；治療量加倍。
[0041] 實施例2
[0042] 本實施例中用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑，由以下原料制備而 成：原料藥以重量份數(shù)計為：白頭翁6份、黃連3份、黃柏5份、秦皮6份，菌液以體積分?jǐn)?shù)計 為：嗜酸乳桿菌菌液1份、糞腸球菌菌液3份、枯草芽孢桿菌菌液2份，菌液的總重量與原料 藥的總重量的比值為3:50。
[0043] 本實施例中用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備方法，包括以下 步驟：
[0044] (1)按照重量份數(shù)準(zhǔn)確取白頭翁、黃連、黃柏和秦皮，70°C烘干后粉碎，過100目 篩，再加水煎煮3次，每次煎煮加6倍量的水，煎煮2小時，合并3次煎液，濾過得藥液備用；
[0045] (2)按照體積份數(shù)準(zhǔn)確取嗜酸乳桿菌菌液、糞腸球菌菌液和枯草芽孢桿菌菌液，混 勻后根據(jù)菌液總量與原料藥總量之間的比值，將混合菌液加入到步驟（1)的藥液中，在密閉 條件下厭氧發(fā)酵，發(fā)酵的溫度為35°c，發(fā)酵時間為50小時，將發(fā)酵產(chǎn)物冷凍干燥即得。
[0046] 所述嗜酸乳桿菌菌液、糞腸球菌菌液、枯草芽孢桿菌菌液的制備方法同上。
[0047] 用法與用量：混飲，每100g兌水200kg，連用2?3天，為預(yù)防量；治療量加倍。
[0048] 實施例3
[0049] 本實施例中用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑，由以下原料制備而 成：原料藥以重量份數(shù)計為：白頭翁10份、黃連3份、黃柏15份、秦皮6份，菌液以體積分?jǐn)?shù) 計為：嗜酸乳桿菌菌液3份、糞腸球菌菌液1份、枯草芽孢桿菌菌液6份，菌液的總重量與原 料藥的總重量的比值為1:8。
[0050] 本實施例中用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備方法，包括以下 步驟：
[0051] (1)按照重量份數(shù)準(zhǔn)確取白頭翁、黃連、黃柏和秦皮，80°C烘干后粉碎，過80目篩， 再加水煎煮3次，每次煎煮加5倍量的水，煎煮1. 5小時，合并3次煎液，濾過得藥液備用；
[0052] (2)按照體積份數(shù)準(zhǔn)確取嗜酸乳桿菌菌液、糞腸球菌菌液和枯草芽孢桿菌菌液，混 勻后根據(jù)菌液總量與原料藥總量之間的比值，將混合菌液加入到步驟（1)的藥液中，在密閉 條件下厭氧發(fā)酵，發(fā)酵的溫度為37°C，發(fā)酵時間為36小時，將發(fā)酵產(chǎn)物冷凍干燥即得。
[0053] 所述嗜酸乳桿菌菌液、糞腸球菌菌液、枯草芽孢桿菌菌液的制備方法同上。
[0054] 用法與用量：混飲，每100g兌水200kg，連用2?3天，為預(yù)防量；治療量加倍。
[0055] 對比例1
[0056] 本對比例中用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中藥組合物，由以下重量份數(shù)的原料藥組 成：白頭翁6份、黃連3份、黃柏5份、秦皮6份。制備方法包括以下步驟：按照重量份數(shù)準(zhǔn) 確取各味原料藥，粉碎后混勻、過1〇〇目篩即得粉劑。
[0057] 用法與用量：混飼，每100kg飼料拌藥1kg，自由采食，連用3?5天。
[0058] 試驗例
[0059] 試驗動物：隨機選取某養(yǎng)殖場5日齡仔豬150頭，隨機分為5組，每組30頭。
[0060] 試驗組別：試驗組1?3依次飼喂實施例1?3制備的中草藥微生態(tài)制劑，混飲， 每l〇〇g粉劑兌水200kg ;對照組飼喂對比例1制備的粉劑，混飲，每100g粉劑兌水200kg ; 空白對照組飼喂常規(guī)飲用水。
[0061] 試驗方法：對150頭5日齡仔豬按照分組依次飼喂添加實施例1?3制備粉劑的 飲用水、添加對比例1制備粉劑的飲用水以及常規(guī)飲用水，定時定量連續(xù)飼喂10天，每天觀 察仔豬臨床變化。10天后人工攻毒(致病性大腸桿菌和沙門氏菌)，攻毒后再定時定量連續(xù) 飼喂20天，記錄發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)和存活數(shù)，計算發(fā)病率、死亡率和存活率，試驗結(jié)果詳見下 表1。
[0062] 療效判斷標(biāo)準(zhǔn)：
[0063] 發(fā)?。涸囼炛凶胸i出現(xiàn)病癥，腹瀉，拉黃色、白色稀糞，精神萎靡不振；
[0064] 死亡：試驗結(jié)束仔豬發(fā)病死亡；
[0065] 存活：試驗期間出現(xiàn)癥狀，試驗結(jié)束仔豬恢復(fù)如常。
[0066] 表1各處理組的試驗結(jié)果
[0067]

【權(quán)利要求】
1. 一種用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑，其特征在于：主要由以下原料 制備而成：原料藥以重量份數(shù)計為：白頭翁1?10份、黃連3?20份、黃柏5?15份、秦皮 6?25份，菌液以體積分?jǐn)?shù)計為：嗜酸乳桿菌菌液1?3份、糞腸球菌菌液1?6份、枯草 芽孢桿菌菌液1?6份，菌液的總重量與原料藥的總重量的比值為（1?5) : (40?50)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑，其特征在 于：主要由以下原料制備而成：原料藥以重量份數(shù)計為：白頭翁6份、黃連3份、黃柏5份、 秦皮6份，菌液以體積分?jǐn)?shù)計為：嗜酸乳桿菌菌液1份、糞腸球菌菌液3份、枯草芽孢桿菌菌 液2份，菌液的總重量與原料藥的總重量的比值為3:50。
3. -種如權(quán)利要求1或2所述的用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備 方法，其特征在于：包括以下步驟： (1) 按照重量份數(shù)準(zhǔn)確取白頭翁、黃連、黃柏和秦皮，烘干后粉碎、過篩，再加水煎煮3 次，合并3次煎液，濾過得藥液備用； (2) 按照體積份數(shù)準(zhǔn)確取嗜酸乳桿菌菌液、糞腸球菌菌液和枯草芽孢桿菌菌液，混勻后 根據(jù)菌液總量與原料藥總量之間的比值，將混合菌液加入到步驟（1)的藥液中，在密閉條件 下厭氧發(fā)酵，發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)冷凍干燥即得。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備方法， 其特征在于：所述步驟（1)中的烘干溫度為60?80°C。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備方法， 其特征在于：所述步驟（1)中的過篩為過60?100目篩。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備方法， 其特征在于：所述步驟（1)中加水煎煮為每次煎煮加5?6倍量的水，煎煮1?2小時。
7. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備方法， 其特征在于：所述步驟（2)中嗜酸乳桿菌菌液的制備方法為：先將嗜酸乳桿菌接種于斜面 培養(yǎng)基中，將斜面培養(yǎng)基上產(chǎn)生的懸浮液加入到MRS液體培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)，至對數(shù)生長 期時菌液的濃度為〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
8. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備方法， 其特征在于：所述步驟（2)中糞腸球菌菌液的制備方法為：先將糞腸球菌接種于斜面培養(yǎng) 基中，將斜面培養(yǎng)基上產(chǎn)生的懸浮液加入到MRS液體培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)，至對數(shù)生長期時 菌液的濃度為〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
9. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備方法， 其特征在于：所述步驟（2)中枯草芽孢桿菌菌液的制備方法為：先將枯草芽孢桿菌接種于 斜面培養(yǎng)基中，將斜面培養(yǎng)基上產(chǎn)生的懸浮液加入到LB液體培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)，至對數(shù)生 長期時菌液的濃度為〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
10. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于防治仔豬細(xì)菌性痢疾的中草藥微生態(tài)制劑的制備方 法，其特征在于：所述步驟（2)中厭氧發(fā)酵的溫度為30?37°C，發(fā)酵時間為36?72小時。
【文檔編號】A61P1/12GK104208240SQ201310463380
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2013年9月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月30日
【發(fā)明者】陳建暉, 李鳳娟, 李建正 申請人:鄭州后羿制藥有限公司