京尼平交聯(lián)殼聚糖載藥微球的制備方法
【專利摘要】一種京尼平交聯(lián)殼聚糖載藥微球的制備方法，采用乳化化學(xué)交聯(lián)法，將與水互不相溶的油性成分與表面活性劑充分?jǐn)嚢杈鶆蜃鳛橛拖嗷旌衔锖?，將均勻混有殼聚糖和?fù)載的水溶性藥物的混合溶液作為水相加入該油相混合物中，并充分的攪拌，形成油包水（W/O）型混合物，充分?jǐn)嚢韬笥米⑸淦髦鸬渭尤虢宦?lián)劑進(jìn)行交聯(lián)固化，靜置后除去上層溶液，下層沉淀體系分別用有機(jī)溶劑離心洗滌、干燥后，即可得到負(fù)載有相應(yīng)藥物的本發(fā)明殼聚糖載藥微球。本發(fā)明制備的殼聚糖載藥微球克服了傳統(tǒng)制備方法中存在的缺陷和不足，工藝簡(jiǎn)單易行，毒副作用低、機(jī)械強(qiáng)度高，可作為藥用緩控釋載體，可廣泛的應(yīng)用于食品、生物、醫(yī)藥工程等領(lǐng)域。
【專利說(shuō)明】京尼平交聯(lián)殼聚糖載藥微球的制備方法
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明屬于食品、生物、醫(yī)藥工程領(lǐng)域，具體的說(shuō)是涉及ー種粒徑可控、表面狀態(tài)可控、溶脹性可控、可生物降解并可作為藥用緩控釋載體的殼聚糖載藥微球，及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0003]殼聚糖(chitosan)是生物界存在的唯--種堿性氨基多糖，化學(xué)名稱是
(I, 4)-2-氨基-2-脫氧-P -D-匍聚糖，是自然界儲(chǔ)存量豐富的甲殼素脫こ酸基廣物，因其具有許多獨(dú)特的性質(zhì)，如良好的生物相容性、生物降解性、生物粘附性、無(wú)毒性及抗菌性等，受到食品、醫(yī)藥及生物工程材料等領(lǐng)域的廣泛重視。與此同時(shí)，最近其已被證明在微球或者納米球的結(jié)構(gòu)中為活性劑的控制運(yùn)載系統(tǒng)。以殼聚糖為原料制備的殼聚糖微球，具有親水性和較大的表面積體積比，作為藥物載體可起到控制藥物釋放和維持其穩(wěn)定性的作用；一定粒徑的殼聚糖微球具有靶向作用，可將藥物濃集于病灶，提高治療效果并減少藥物的毒副作用；此外，它還可以增加藥物的包封率和載藥量。關(guān)于殼聚糖微球載藥性能的研究，已經(jīng)有不同的探索和成果，但具有市場(chǎng)潛カ的大多成果尚處于研究階段。因此殼聚糖微球的制備研究已經(jīng)成為目前的ー個(gè)研究熱點(diǎn)。
[0004]制備殼聚糖微球的方法，目前，殼聚糖微球的制備方法主要有乳化化學(xué)交聯(lián)法、溶劑揮發(fā)法、凝聚法和噴霧干燥法等。乳化化學(xué)交聯(lián)法可以得到圓形的且具有一定機(jī)械強(qiáng)度的殼聚糖微球，但是`傳統(tǒng)的乳化化學(xué)交聯(lián)法必須引入戊二醛、甲醛等有一定毒性的化學(xué)交聯(lián)劑。溶劑揮發(fā)法在制備殼聚糖微球的過(guò)程中要加入對(duì)人體有害的有機(jī)溶劑，有機(jī)溶劑殘留使該法制備的殼聚糖微球存在較大的安全問(wèn)題。凝聚法是通過(guò)使殼聚糖與三聚磷酸鈉、海藻酸鈉等與殼聚糖帶有相反電荷的物質(zhì)相作用來(lái)形成微球，但得到的產(chǎn)品的機(jī)械強(qiáng)度不高，球形不好，必須另外加入交聯(lián)劑。噴霧干燥法是將藥物、殼聚糖分別溶于冰こ酸/水/丙酮混合溶劑中得到不同濃度的殼聚糖溶液，在惰性的熱氣流中噴霧，溶劑迅速蒸發(fā)，形成殼聚糖微球，該法制備的微球機(jī)械強(qiáng)度也不高，給應(yīng)用帶來(lái)很多問(wèn)題。因此，尋找到ー種反應(yīng)過(guò)程溫和、不使用有毒性物質(zhì)及制備出的殼聚糖微球機(jī)械強(qiáng)度高的微球制備方法是很有意義的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)制備殼聚糖微球時(shí)引入了有毒交聯(lián)劑或有機(jī)溶劑、制備出的殼聚糖微球機(jī)械強(qiáng)度不高的缺陷，提供ー種安全可靠、粒徑可控、表面狀態(tài)可控、可生物降解的殼聚糖載藥微球的制備方法，使微球機(jī)械強(qiáng)度顯著提高；與此同時(shí)，進(jìn)ー步開發(fā)利用殼聚糖的應(yīng)用價(jià)值、拓寬殼聚糖微球的應(yīng)用潛力，通過(guò)對(duì)殼聚糖藥物微球制備技術(shù)和理論的不斷改進(jìn)，制備出更多療效更好的藥物。[0006]為了達(dá)到上述目的本發(fā)明包括下列步驟:
(1)含油相分散系的制備:在液體石蠟中加入表面活性剤，其比值為50:1，所述表面活性劑為 Tween-80 或 Tween-20 和 Span-80,且 Tween-80 或 Tween-20 與 Span-80 的質(zhì)量比為1:1，在30°C條件下，攪拌30 min，轉(zhuǎn)速為660_720rpm，制成含油分散系；
(2)水相的制備:將殼聚糖加入到濃度為2%的こ酸溶液中，殼聚糖與こ酸溶液的比值為6:1，再加入紅景天苷，且殼聚糖與紅景天苷的質(zhì)量比為12:1，超聲溶解后作為水相；
(3)交聯(lián)劑的制備:將京尼平加入到無(wú)水こ醇中，京尼平與無(wú)水こ醇的比值為70:1，制備成交聯(lián)劑；
(4)將步驟(2)制備的水相勻速加入到步驟(1)制備的含油相分散系中，且含油分散系與水相的體積比為5:1，在30で條件下，攪拌30-50min，轉(zhuǎn)速為660_720rpm ；
(5)將步驟(3)制得的交聯(lián)劑緩慢加入到步驟(4)所得溶液中，交聯(lián)劑與殼聚糖こ酸溶液的體積比為3:5，在30°C條件下，攪拌3-4h，轉(zhuǎn)速為660-720rpm，然后靜置2h，棄去上清液得到下層沉淀物；
(6)將步驟(5)所得沉淀物離心，分別用石油醚、丙酮、無(wú)水こ醇各洗滌三次；
(7)在常溫下，真空干燥12h，即得本發(fā)明所述殼聚糖載藥微球。
[0007]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的殼聚糖微球制備方法的有點(diǎn)在于:
(1)制備過(guò)程溫和，エ藝簡(jiǎn)單易行，得到的殼聚糖微球形狀均一、表面積大、具有良好的吸附性；
(2)采用天然化合物京尼平`作為生物交聯(lián)劑，京尼平毒性低、交聯(lián)能力強(qiáng)、生物相容性好，解決了目前乳化化學(xué)交聯(lián)法、溶劑揮發(fā)法等制備殼聚糖微球的過(guò)程中使用毒性化學(xué)交聯(lián)劑的問(wèn)題；
(3)采用乳化化學(xué)交聯(lián)法，制備的微球結(jié)構(gòu)較為致密，球形和載藥量都比較理想，克服了傳統(tǒng)方法所得微球骨架密度較低，難以包載藥物，藥物只能吸附在微球的表面，難以避免突釋效應(yīng)的缺點(diǎn)。
[0008](4)通過(guò)對(duì)制備過(guò)程中反應(yīng)條件的控制和調(diào)整，例如對(duì)攪拌時(shí)間、交聯(lián)劑用量等的考察，可以制備出球形、分散性良好的殼聚糖微球，以滿足實(shí)際需要。
[0009]【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
圖1為殼聚糖與京尼平的反應(yīng)機(jī)理示圖；
圖2為殼聚糖微球相對(duì)于200 V- m的大小不圖；
圖3為殼聚糖微球相對(duì)于10 ii m的大小。
【具體實(shí)施方式】
[0010]實(shí)施例1、取50mL液體石臘于燒杯中，加入Tween-80和Span-80各0.5g,在30°C條件下，攪拌30min,轉(zhuǎn)速為660r/m,制成含油分散系。將60mg殼聚糖加入到IOmL濃度為2%的こ酸溶液中，再加入紅景天5mg，超聲溶解后，將其勻速加入到上述含油分散系中，在30°C條件下攪拌30min，轉(zhuǎn)速為660r/m，然后緩慢加入6mL比值為70:1的京尼平無(wú)水こ醇溶液，并在30°C下攪拌3h，轉(zhuǎn)速為660r/m，靜置2h后棄去上清液得到下層沉淀物進(jìn)行離心，分別用石油醚、丙酮和無(wú)水こ醇各洗滌三次。最后在常溫下，真空干燥12h，即得本發(fā)明所述殼聚糖載藥微球。[0011]實(shí)施例2、取IOOmL液體石蠟于燒杯中，加入Tween-80和Span-80各lg，在30°C條件下，攪拌30min,轉(zhuǎn)速為690r/m,制成含油分散系。將120mg殼聚糖加入到20mL濃度為2%的こ酸溶液中，再加入紅景天苷10mg，超聲溶解后，將其勻速加入到上述含油分散系中，在30°C條件下攪拌40min，轉(zhuǎn)速為690r/m，然后緩慢加入12mL比值為70:1的京尼平無(wú)水こ醇溶液，并在30°C下攪拌3.5h，轉(zhuǎn)速為690r/m，靜置2h后棄去上清液得到下層沉淀物進(jìn)行離心，分別用石油醚、丙酮和無(wú)水こ醇各洗滌三次。最后在常溫下，真空干燥12h，即得本發(fā)明所述微球。
[0012]實(shí)施例3、取150mL液體石臘于燒杯中，加入Tween-20和Span-80各1.5mL,在30°C條件下，攪拌30min,轉(zhuǎn)速為720r/m,制成含油分散系。將180mg殼聚糖加入到30mL濃度為2%的こ酸溶液中，再加入15mg紅景天苷，超聲溶解后，將其勻速加入到上述含油分散系中，在30°C條件下攪拌50min，轉(zhuǎn)速為720r/m，然后緩慢加入18mL比值為70:1的京尼平無(wú)水こ醇溶液，并在30°C下攪拌4h，轉(zhuǎn)速為720r/m，靜置2h后棄去上清液得到下層沉淀物進(jìn)行離心，分別用石油醚、丙酮和無(wú)水こ醇各洗滌三次。最后在常溫下，真空干燥12h，即得本發(fā)明所述微球。`
【權(quán)利要求】
1.一種京尼平交聯(lián)殼聚糖載藥微球的制備方法，其特征在于: (1)含油相分散系的制備:在液體石蠟中加入表面活性剤，其比值為50:1，所述表面活性劑為 Tween-80 或 Tween-20 和 Span-80,且 Tween-80 或 Tween-20 與 Span-80 的質(zhì)量比為1:1，在30°C條件下，攪拌30 min，轉(zhuǎn)速為660_720rpm，制成含油分散系； (2)水相的制備:將殼聚糖加入到濃度為2%的こ酸溶液中，殼聚糖與こ酸溶液的比值為6:1，再加入紅景天苷，且殼聚糖與紅景天苷的質(zhì)量比為12:1，超聲溶解后作為水相； (3)交聯(lián)劑的制備:將京尼平加入到無(wú)水こ醇中，京尼平與無(wú)水こ醇的比值為70:1，制備成交聯(lián)劑； (4)將步驟(2)制備的水相勻速加入到步驟(1)制備的含油相分散系中，且含油分散系與水相的體積比為5:1，在30で條件下，攪拌30-50min，轉(zhuǎn)速為660_720rpm ； (5)將步驟(3)制得的交聯(lián)劑緩慢加入到步驟(4)所得溶液中，交聯(lián)劑與殼聚糖こ酸溶液的體積比為3:5，在30°C條件下，攪拌3-4h，轉(zhuǎn)速為660-720rpm，然后靜置2h，棄去上清液得到下層沉淀物； (6)將步驟(5)所得沉淀物離心，分別用石油醚、丙酮、無(wú)水こ醇各洗滌三次； (7)在常溫下，真空干燥12h，即得本`發(fā)明所述殼聚糖載藥微球。
【文檔編號(hào)】A61K47/36GK103494775SQ201310423523
【公開日】2014年1月8日 申請(qǐng)日期:2013年9月17日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月17日
【發(fā)明者】熊華, 王素芳, 彭海龍, 寧方建, 陳莎, 羅美, 趙強(qiáng), 朱雪梅, 黎文建 申請(qǐng)人:南昌大學(xué)