亚洲成年人黄色一级片,日本香港三级亚洲三级,黄色成人小视频,国产青草视频,国产一区二区久久精品,91在线免费公开视频,成年轻人网站色直接看

治療溶血性疾病的方法

文檔序號:1259497閱讀:340來源:國知局
治療溶血性疾病的方法
【專利摘要】使用結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物,例如抑制補體的抗體,來治療陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白血癥或其它溶血性疾病。
【專利說明】治療溶血性疾病的方法
[0001]本申請是2005年2月3日提交的申請?zhí)枮镃N200580010631.0、名稱為“治療溶血性疾病的方法”的發(fā)明專利申請的分案申請。
[0002]相關(guān)申請
[0003]本申請要求美國專利申請系列號10/771,552的優(yōu)先權(quán),并且本申請是其連續(xù)的部分,美國專利申請系列號10/771,552是2004年2月3日申請的,該專利全部公開內(nèi)容在文中引用作為參考。
[0004]背景
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0005]本公開涉及通過施用結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物來治療溶血性疾病如陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白血癥(“PNH”)的方法。
[0006]相關(guān)領(lǐng)域的背景
[0007]陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白血癥(“PNH”)是一種罕見的血液疾病,其累及紅細胞,因此與正常紅細胞相比紅細胞的破壞更快。PNH由導(dǎo)致異常血細胞產(chǎn)生的骨髓細胞突變引起。更明確地說,PNH是產(chǎn)生不同種群成熟血細胞的造血干細胞的疾病。該疾病的基礎(chǔ)是導(dǎo)致不能合成糖基磷脂酰肌醇(“GPI”)錨的體細胞突變,其中糖基磷脂酰肌醇錨負責將蛋白質(zhì)結(jié)合至細胞膜。所突變基因PIG-A(A型磷脂酰肌醇聚糖)位于X染色體并且可能具有從缺失突變到點突變的幾種不同的突變。
[0008]PNH引起對補體蛋白質(zhì)的敏感性并且該種敏感性在細胞膜上發(fā)生。PNH細胞缺乏大量蛋白質(zhì),特別是必需的補體調(diào)節(jié)表面蛋白質(zhì)。這些調(diào)節(jié)補體的表面蛋白質(zhì)包括衰變加速因子(“DAF”)或CD55和膜反應(yīng)性溶解抑制物(“MIRL”)或CD59。
[0009]PNH的特征為溶血性貧血(紅細胞數(shù)量減少)、血紅蛋白尿(在尿中存在血紅蛋白,睡眠后特別明顯)和血紅蛋白血癥(血液中存在血紅蛋白)?;加蠵NH的個體為陣發(fā),在這里定義為黑尿發(fā)生率。溶血性貧血歸因于補體成分對紅細胞的血管內(nèi)破壞。其它已知的癥狀包括吞咽困難、疲勞、勃起功能障礙、血栓形成和復(fù)發(fā)性腹痛。
[0010]由溶血性疾病引起的溶血通過游離血紅蛋白的釋放引起局部和全身一氧化氮(NO)缺乏。游離血紅蛋白是非常有效的NO清除劑,這部分地因為非紅細胞腔室內(nèi)的NO的可接近性和血紅素部分對NO的親和力比氧大IO6倍。血管內(nèi)溶血作用的發(fā)生通常產(chǎn)生足夠的游離血紅蛋白直至完全耗盡觸珠蛋白。一旦超出了`這種清除血紅蛋白的蛋白質(zhì)的能力,接著就會發(fā)生內(nèi)源性NO的消耗。例如,在血管內(nèi)溶血作用例如PNH的情況下,LDH水平可以容易地超過其正常水平的2-3倍,游離血紅蛋白將有可能達到0.8-1.6g/l的濃度。由于取決于觸珠蛋白的同種異型體,觸珠蛋白有可能僅結(jié)合大約0.7-1.5g/l的血紅蛋白,所以將產(chǎn)生大量過量的游離血紅蛋白。一旦超過了腎近端小管對血紅蛋白重吸收的能力,接著將發(fā)生血紅蛋白尿。血管內(nèi)溶血作用過程中游離血紅蛋白的釋放導(dǎo)致NO過渡消耗,隨后伴隨增強的平滑肌收縮、血管收縮和血小板激活和聚集。與血紅蛋白清除NO相關(guān)的PNH相關(guān)病狀包括腹部疼痛、勃起功能障礙、食管痙攣和血栓形成。
[0011]溶血作用的實驗室評價通常包括血液學(xué)、血清學(xué)和尿檢驗。血液學(xué)檢驗包括觀察RBC形態(tài)異常的血涂片檢查(以確定起因)以及對全血網(wǎng)織紅細胞進行計數(shù)測量(以確定對RBC損失的骨髓補償)。血清學(xué)檢驗包括檢測乳酸脫氫酶(LDH ;廣泛進行檢測)以及作為溶血作用的直接量度的游離血紅蛋白(不廣泛進行檢測)。在其它器官中缺乏組織損傷情況下,LDH水平能夠用于診斷和監(jiān)測患有溶血的患者。其它血清學(xué)檢驗包括膽紅素或觸珠蛋白,分別作為降解產(chǎn)物或清除儲備的測量指標。尿檢驗包括膽紅素、血鐵黃素和游離血紅蛋白,并且通常用于測量溶血作用的總體嚴重性,并且通常用于檢測與溶血作用血管外病因?qū)W相對的血管內(nèi)的分化,而不是常規(guī)監(jiān)測溶血作用。另外,通常檢測RBC數(shù)量、RBC(即細胞結(jié)合的)血紅蛋白和血細胞比容以確定任何伴隨性貧血的程度,而不是作為溶血活性本身的量度。
[0012]盡管長期使用類固醇治療會帶來許多反面的副作用,但是類固醇已經(jīng)被用于溶血性疾病的治療并且可以在一些患者中有效地抑制溶血作用,盡管長期使用類固醇療法會帶來許多反面的副作用。受累患者可能需要輸血,但輸血具有感染的危險。可能還需要抗凝血治療以防止血栓形成。已知骨髓移植可以治療PNH,然而,相匹配的骨髓通常極難找到并且此種治療的死亡率高。
[0013]提供能夠安全可靠地消除和/或限制溶血性疾病如PNH及其影響的治療將是有益的。
[0014]發(fā)明概沭
[0015]根據(jù)本公開,使用結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物治療陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白血癥(“PNH”)或其它溶血性疾病。適宜化合物包括例如結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的抗體,如對補體成分C5特異的抗體。在特別有用的實施方案中,化合物是選自h5Gl.1-mAb (eculizumab)、h5Gl.1-scFv (pexelizumab)和 h5Gl.1 的其它功能片段的抗 C5抗體。已經(jīng)驚奇地發(fā)現(xiàn)本方法可以在施用化合物24小時內(nèi)使PNH患者得到改善。例如,如通過血紅蛋白尿消退所指示,施用化合物24小時內(nèi)溶血作用顯著降低。
[0016]抑制補體的化合物可以預(yù)防性施用于已知患有溶血性疾病的個體,以防止或有助于防止癥狀的出現(xiàn)。備選地,抑制補體的化合物可以作為一種治療方案施用于已出現(xiàn)溶血性疾病癥狀的個體。
[0017]另一方面,考慮了增加患有溶血性疾病的患者中補體敏感性III型紅細胞的比例并因此增加紅細胞總數(shù)的方法。本方法包括將結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物施用于患有溶血性疾病的患者。通過增加III型紅細胞數(shù),可以減輕患有溶血性疾病的患者的癥狀,諸如疲勞和貧血。
[0018]還在另一方面,本公開考慮了通過將化合物施用于受試者而使得患有溶血性疾病的受試者較少依賴于輸血或者不依賴于輸血,化合物選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分的活性的化合物。已經(jīng)令人驚訝地發(fā)現(xiàn),根據(jù)本方法可以使患者不依賴于輸血。意想不到的是,在一些實施方案中輸血不依賴性能夠維持12個月或更長時間,長度超過了紅細胞的120天生活周期。在其它實施方案中,輸血不依賴性能夠維持兩年或更長??紤]到紅細胞的長半壽期,為了評價輸血不依賴性需要治療6個月或更長時間。
[0019]在另一方面,本公開考慮了通過將化合物施用于受試者來治療受試者體內(nèi)一氧化氮(NO)失調(diào)的方法,化合物選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分的活性的化合物。通過減少紅細胞的溶解,本方法降低血液中游離血紅蛋白的量,從而增加血清一氧化氮(NO)水平。在特別有用的實施方案中,NO體內(nèi)穩(wěn)態(tài)得到恢復(fù),其中歸NO缺乏所致的癥狀消除。
[0020]在另一方面,本公開考慮了通過將化合物施用于受試者來治療受試者體內(nèi)血栓形成的方法,化合物選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分的活性的化合物。
[0021]在另一方面,本公開考慮了通過將化合物施用于受試者而治療患有溶血性疾病受試者的疲勞的方法,化合物選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分的活性的化合物。
[0022]在另一方面,本公開考慮了通過將化合物施用于受試者而治療患有溶血性疾病受試者的勃起功能障礙的方法,化合物選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分的活性的化合物。
[0023]在另一方面,本公開考慮了通過將化合物施用于受試者而治療患有溶血性疾病受試者的腹痛的方法,化合物選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分的活性的化合物。
[0024]還在在另一方面,本公開考慮了通過施用如下化合物治療患有溶血性疾病的受試者的方法,所述施用即組合施用I) 一種或多種已知增加血細胞生成的化合物(例如,或者通過加速產(chǎn)生、消除干細胞破壞或者消除干細胞抑制)與2)選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分的活性的化合物的化合物。已知增加血細胞生成的適宜化合物包括,例如類固醇、免疫抑制劑(如環(huán)孢菌素)、抗凝劑(如華法林)、葉酸、鐵等、促紅細胞生成素(EPO)和抗胸腺細胞球蛋白
(ATG)、抗淋巴細胞球蛋白(ALG)、EPO衍生物和達依泊汀α (以Aranesp?商業(yè)性獲得于
Amgen, Inc.,Thousand Oaks, CA (Aranesp?是人造形式的EPO,通過重組DNA技術(shù)在中國
倉鼠卵巢細胞(CHO)中產(chǎn)生))。在特別有用的實施方案中,促紅細胞生成素(EPO)(已知增加血細胞生成的化合物)、ΕΡ0衍生物或達依泊汀α可以與選自h5Gl.l-mAb、h5Gl.1-scFv和h5Gl.1的其它功能片段的抗C5抗體組合施用。
[0025]還在另一方面,本公開考慮了通過施用選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分的活性的化合物的化合物來治療受試者溶血性疾病的一種或多種癥狀的方法,其中受試者在治療之前或治療期間總的紅細胞含量中III型紅細胞的比例大于10%,所述化合物可單獨施用或與已知增加血細胞生成的一種或多種化合物如EPO、EPO衍生物或達依泊汀α組合施用。
[0026]還在另一方面,本公開考慮了通過施用選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分的活性的化合物的化合物,治療血小板計數(shù)超過每毫升40,000個的受試者中溶血性疾病的一種或多種癥狀的方法,所述化合物可單獨施用或與已知增加血細胞生成的一種或多種化合物如EPO、EPO衍生物或達依泊汀α組合施用。
[0027]還在另一方面,本公開考慮了通過施用選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分的活性的化合物的化合物,治療網(wǎng)織紅細胞計數(shù)超過80Χ IO9/升的受試者中溶血性疾病的一種或多種癥狀的方法,所述化合物可單獨施用或與已知增加血細胞生成的一種或多種化合物如EPO、EPO衍生物或達依泊汀α組合施用。
[0028]附圖簡述
[0029]圖1A報道了在使用抗C5抗體治療PNH患者期間所測量的溶血作用的生物化學(xué)參數(shù)。
[0030]圖1B圖解描述使用抗C5抗體治療對乳酸脫氫酶(LDH)水平的影響。
[0031]圖2顯示了設(shè)計用于檢測PNH患者血紅蛋白尿陣發(fā)發(fā)生的尿色度。
[0032]圖3是與治療前陣發(fā)率相比,eculizumab治療對患者陣發(fā)率的影響的圖表。
[0033]圖4顯示PNH患者的尿樣和血紅蛋白尿、吞咽困難、LDH、AST、藥物代謝動力學(xué)(PK)和藥效動力學(xué)(PD)的測量,反映了本方法對適宜完全阻斷補體的溶血作用、癥狀和藥效動力學(xué)的即時影響和肯定影響。
[0034]圖5圖解描述抗C5抗體劑量方案隨著時間對血紅蛋白尿的影響。
[0035]圖6a和6b是比較使用抗C5抗體治療之前或治療期間每個患者每個月需要的輸血單位數(shù)量的圖表:圖6a為血細胞減少癥患者;圖6b為非血細胞減少癥患者。
[0036]圖7顯示通過施用抗C5抗體和促紅細胞生成素(EPO)對血小板減少患者的治療。
[0037]圖8圖解描述抗C5抗體的藥效動力學(xué)。
[0038]圖9是抗C5治療法期間完成的尋訪生活質(zhì)量問題的歐洲癌癥治療研究組織調(diào)查表(“EORTC QLC-C30”)的結(jié)果圖表。
[0039]圖10是描繪抗C5抗體治療對與PNH相關(guān)的不良癥狀的影響。
[0040]發(fā)明詳沭
[0041]本公開涉及在哺乳動物中治療陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白血癥(“PNH”)和其它溶血性疾病的方法。具體而言,文中所描述的治療溶血性疾病的方法包括使用結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本方法提供了令人驚奇的結(jié)果。例如,一旦施用結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物,溶血作用迅速停止,同時治療后血紅蛋白尿顯著降低。同樣,溶血的患者能夠獲得對輸血更少依賴或不依賴于輸血達到延長的階段(12個月或更長),適當超過了紅細胞120天的生命周期。此外,在紅細胞溶解的其它機制中(非補體介導(dǎo)的和/或早期補體成分介導(dǎo)的例如Cb3),III型紅細胞數(shù)可以急劇增加。令人驚奇的結(jié)果的另一個例子是癥狀消退,表明甚至在存在其它紅細胞溶解機制的情況下血清NO水平增加也足夠高。文中報道的這些結(jié)果和其它結(jié)果是出乎意料的,并且不能從溶血性疾病的現(xiàn)有治療進行預(yù)測。
[0042]結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物能夠用于本方法。特別有用的特定類別的此類化合物包括人補體成分的特異性抗體,特別是抗C5抗體??笴5抗體抑制補體級聯(lián)反應(yīng)并最終通過補體蛋白質(zhì)復(fù)合物C5b-9阻止紅細胞(“RBC”)溶解。通過抑制和/或減少RBC溶解,PNH和其它溶血性疾病的影響(包括諸如血紅蛋白尿、貧血、血紅蛋白血癥、吞咽困難、疲勞、勃起功能障礙、復(fù)發(fā)性腹痛和血栓形成的癥狀)得到消除或減輕。
[0043]在另一個實施方案中,可溶形式的蛋白質(zhì)⑶55和⑶59能夠單獨或彼此組合施用于受試者以便抑制其替代途徑中的補體級聯(lián)反應(yīng)。CD55在C3水平進行抑制,從而阻止級聯(lián)反應(yīng)的進一步進行。CD59阻止C5b-8復(fù)合物與C9結(jié)合形成膜攻擊復(fù)合物(見下面論述)。
[0044]補體系統(tǒng)與機體的其它免疫系統(tǒng)相聯(lián)合以便防御細菌和病毒病原體的侵入。至少有25種蛋白質(zhì)參與補體級聯(lián)反應(yīng),它們作為血漿蛋白質(zhì)和膜輔因子的復(fù)合物集合。補體成分通過在一系列錯綜復(fù)雜但精確的酶切割和膜結(jié)合事件中相互作用實現(xiàn)其免疫防御功能。所產(chǎn)生的補體級聯(lián)反應(yīng)導(dǎo)致產(chǎn)生具有調(diào)理、免疫調(diào)節(jié)和溶解功能的產(chǎn)物。例如,在TheMerck Manual,第16版中提供了與補體活化作用相關(guān)的生物學(xué)活性的簡要概述。
[0045]補體級聯(lián)過程經(jīng)由經(jīng)典途徑、替代途徑或凝集素途徑進行。這些途徑共用許多成分,并且雖然它們的起始步驟不同,但它們會合于并共享負責靶細胞活化和破壞的同一“末端補體”成分(C5至C9)。經(jīng)典補體途徑一般是通過抗體識別并結(jié)合至靶細胞上的抗原位點而起始的。替代途徑通常是抗體不依賴性的,并且能夠通過病原體表面上的特定分子起始。另外,凝集素途徑 一般由甘露糖結(jié)合凝集素(“MBL”)結(jié)合至高甘露糖底物進行起始。這些途徑匯聚于一點,在這里補體成分C3由活性蛋白酶溶解產(chǎn)生C3a和C3b。
[0046]C3a是過敏毒素(見下面論述)。C3b除了結(jié)合某些病毒和免疫復(fù)合物之外還結(jié)合細菌或其它細胞,并且標記它們以便從循環(huán)中去除。(該種作用中的C3b已知為調(diào)理素)。C3b的調(diào)理功能通常被認為是補體系統(tǒng)最重要的抗感染作用。患有阻斷C3b功能基因損害的患者易于受到廣泛多種病源生物的感染,而患有補體級聯(lián)反應(yīng)順序較后事件損害的患者,即患有阻斷C5功能的損害的患者僅更加傾向于奈瑟菌屬(Neisseria)感染,并且然后僅多少有點更容易感染(Fearon, Intensive Review of Internal Medicine,第 2版,Fanta和 Minaker 編著,Brigham and Women's and Beth Israel Hospitals, 1983)。
[0047]C3b還與每條途徑中獨特的其它成分形成復(fù)合物以便形成經(jīng)典的或替代的C5轉(zhuǎn)變酶,該酶溶解C5形成C5a和C5b。因此C3被認為是補體反應(yīng)連續(xù)事件中的中心蛋白質(zhì),因為其對于全部三種活化途徑都是必需的(Wurzner等人,Complement Inflamm,8:328-340, 1991)。C3b的該種特性受到血清蛋白酶因子I的調(diào)節(jié),血清蛋白酶因子I作用于C3b產(chǎn)生iC3b(失活的C3b)。雖然iC3b仍然行使調(diào)理素的功能,但其不能形成活性C5轉(zhuǎn)變酶。
[0048]pro-C5前體在氨基酸655和659之后切割,產(chǎn)生作為氨基末端片段的β鏈(序列的氨基酸殘基+1 — 655)和作為羧基末端片段的α鏈(序列的氨基酸殘基660 — 1658),兩者之間缺失4個氨基酸(序列的氨基酸殘基656-659)。C5是糖基化的,其質(zhì)量的大約
1.5-3%屬于糖類。成熟C5是通過二硫鍵連接的999個氨基酸的115kDaa鏈和655個氨基酸的75kDa β鏈的異源二聚體。C5的正常血清濃度為大約75 μ g/ml (0.4 μ Μ)。C5作為單拷貝基因的單鏈前體蛋白質(zhì)產(chǎn)物而合成(Haviland等人,J.1mmunol.1991, 146:362-368)。經(jīng)預(yù)測該基因轉(zhuǎn)錄物的cDNA序列編碼1658個氨基酸的分泌的pro_C5前體和18個氨基酸的前導(dǎo)序列(見美國專利6,355,245)。
[0049]C5溶解釋放C5a,其為有效的過敏毒素和趨化因子,并且導(dǎo)致溶解末端補體復(fù)合物C5b_9的形成。C5a是通過替代的或經(jīng)典的C5轉(zhuǎn)變酶從C5的α鏈溶解形成的氨基末端片段,包含α鏈最開始的74個氨基酸(即,序列的氨基酸殘基660-733)。C5a的IlkDa質(zhì)量的大約20%屬于糖類。轉(zhuǎn)變酶作用的溶解位點位于或者緊鄰序列的氨基酸殘基733。在該溶解位點或與該溶解位點相鄰的位點結(jié)合的化合物將具有阻斷C5轉(zhuǎn)變酶進入溶解位點的潛能并且因此可作為補體抑制劑起作用。
[0050]C5b與C6、C7和C8結(jié)合在靶細胞表面形成C5b_8復(fù)合物。一旦結(jié)合幾種C9分子,則形成膜攻擊復(fù)合物(“MAC”,C5b-9,末端補體復(fù)合物一TCC)。當足夠數(shù)量的MAC插入到靶細胞膜時,它們產(chǎn)生的開口(MAC孔)將介導(dǎo)靶細胞的快速滲透性溶解。較低的、非溶解濃度的MAC可以產(chǎn)生其它促炎癥反應(yīng)作用。具體而言,少量C5b-9復(fù)合物插入到內(nèi)皮細胞膜和血小板膜中可引起有害的細胞活化。在一些情況下,活化可能發(fā)生細胞溶解。
[0051]C5a和C5b_9還通過放大下游炎癥因子的釋放而具有多效的細胞活化特性,下游炎癥因子例如水解酶、活性氧類別、花生四烯酸代謝產(chǎn)物和多種細胞因子。C5除了通過C5轉(zhuǎn)變酶活性激活之外,還可以通過其他方式被激活。有限胰蛋白酶消化(Minta和Man, J.1mmunol.1977,119:1597-1602;ffetsel 和 Kolb, J.1mmunol.1982,128:2209-2216)和酸處理(Yammamoto 和 Gewurz,J.Tmmunol.1978, 120:2008;Damerau 等人,Molec.1mmunol.1989,26:1133-1142)也能夠斷裂C5并產(chǎn)生有活性的C5b。
[0052]如上所述,C3a和C5a是過敏毒素。這些活化的補體成分能夠引發(fā)肥大細胞脫粒,這可釋放組胺和其它炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)物,導(dǎo)致平滑肌收縮、血管滲透性增加、白細胞活化,以及其他炎癥現(xiàn)象,包括導(dǎo)致細胞過多的細胞增殖。C5a還能夠作為趨化肽而行使將促炎粒細胞吸引至補體活化位點的作用。
[0053]根據(jù)本公開,可以使用結(jié)合至任意人補體成分或阻斷任意人補體成分產(chǎn)生和/或活化的任意化合物。在一些實施方案中,抗人補體成分的特異性抗體在此處是有用的。一些化合物包括直接針對補體成分C-1、C-2、C-3、C-4、C-5、C_6、C_7、C_8、C-9、因子D、因子B、因子P、MBL、MASP-1和MASP-2的抗體,因此阻止了與C5a相關(guān)的過敏毒素活性的產(chǎn)生和/或阻止了與C5b相關(guān)的膜攻擊復(fù)合物的組`裝。
[0054]天然存在或可溶形式的抑制補體的化合物,例如CRl、LEX-CRl、MCP、DAF、⑶59、因子H、眼鏡蛇毒因子、FUT-175、補體結(jié)合抑制素和K76C00H也用于本方法??梢岳玫慕Y(jié)合至任意人補體成分或阻斷任意人補體成分產(chǎn)生和/或活性的其它化合物包括但不限于蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段、肽、小分子、包括ARC187 (從Archemix Corp.,Cambridge, MA商業(yè)獲得)的RNA適體、L-RNA適體、spiegelmer、反義化合物、絲氨酸蛋白酶抑制劑、可以用于RNA干擾(RNAi)的分子例如包括小干擾RNA (siRNA)的雙鏈RNA、鎖核酸(LNA)抑制劑、肽核酸(PNA)抑制劑等等。
[0055]在功能上,一種適當類型的化合物抑制C5斷裂,這可阻斷有效促炎分子C5a和C5b-9(末端補體復(fù)合物)的產(chǎn)生。優(yōu)選地,化合物不阻止C3b的形成,C3b的形成促進調(diào)理和免疫復(fù)合物清除的關(guān)鍵免疫保護功能。
[0056]雖然可阻止這些膜攻擊復(fù)合物分子的產(chǎn)生,但在C5的補體級聯(lián)抑制作用保留了產(chǎn)生C3b的能力,這對于許多致病微生物的調(diào)理作用以及免疫復(fù)合物溶解和清除是至關(guān)重要的。作為用于溶血性疾病補體抑制作用的治療因子,保留產(chǎn)生C3b的能力顯得特別重要,因為增加的血栓形成易感性、感染、疲勞、嗜睡和受損的免疫復(fù)合物清除是疾病進程的預(yù)先存在的臨床癥狀。[0057]文中使用的特別有用的化合物是直接或間接降低補體成分C5轉(zhuǎn)變成補體成分C5a和C5b的抗體。一類有用的抗體是那些具有至少一個抗原結(jié)合位點并呈現(xiàn)出與人補體成分C5特異性結(jié)合的抗體。特別有用的補體抑制劑是以大于大約30%降低C5a和/或C5b-9產(chǎn)生的化合物。至少在1982年在本領(lǐng)域中就已經(jīng)知道了具有所期望的阻斷 C5a 產(chǎn)生能力的抗 C5 抗體(Moongkarndi 等人,Tmmunobi ο I.1982, 162:397; Moongkarndi等人,Immunobiol.1983,165:323)。本領(lǐng)域已知的對C5或C5片段具有免疫反應(yīng)的抗體包括抗 C50 鏈的抗體(Moongkarndi 等人,Tmmunobi ο 1.1982, 162:397; Moongkarndi 等人,Tmmunobi ο I.1983, 165:323; Wurzner 等人,1991,同上;Mollnes 等人,Scand.J.1mmunol.1988,28:307-312) ;C5a(見例如 Ames 等人,J.1mmunol.1994,152:4572-4581、美國專利號4,686,100和歐洲專利公布號0411306)和抗非人C5抗體(見例如Giclas等人,J.1mmunol.Meth.1987,105:201-209)。特別有用的抗 C5 抗體是 h5Gl.1-mAb,h5Gl.1-scFv 和 h5Gl.1 的其它功能片段。制備 h5Gl.1-mAb、h5Gl.1-scFv 和 h5Gl.1 的其它功能片段的方法描述于美國專利號6,355,245和“Inhibition of Complement Activityby Humanized Anti_C5Antibody and Single Chain Fv”, Thomas 等人,MolecularImmunology,第33卷,第17/18期,第1389-1401頁,1996,其中公開的內(nèi)容在文中整體引用作為參考??贵wh5Gl.Ι-mAb目前正在以商品名eculizumab進行臨床試驗。
[0058]按照Sims等人在美國專利號5,135,916中的教導(dǎo),可以獲得產(chǎn)生與補體成分C5反應(yīng)的單克隆抗體的雜交瘤。按照已知方法使用純化的補體C5成分作為免疫原制備了抗體。根據(jù)本公開,補體成分C5、C5a或C5b優(yōu)選地用作免疫原。根據(jù)特別優(yōu)選的有用實施方案,免疫原是C5的α鏈。
[0059]特別有用的抗體具有先前段落中所論述的必需功能特性并且具有任意以下特征:
[0060](I)它們競爭結(jié)合至C5中與5G1.1特異性免疫反應(yīng)的部分;
[0061](2)它們特異性結(jié)合至C5a鏈一此種特異性結(jié)合和對結(jié)合的競爭作用可通過本領(lǐng)域眾所周知的多種方法,包括表面胞質(zhì)團共振方法(Johne等人,J.1mmunol.Meth.1993,160:191-198)確定;和
[0062](3)它們阻斷C5與C3或C4的結(jié)合(C3和C4是C5轉(zhuǎn)變酶的組成成分)。
[0063]抑制至少一種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物可以以多種單位劑型進行施用。劑量將隨所應(yīng)用的特定化合物而改變。例如,不同的抗體可以具有不同的質(zhì)量和/或親和性,并且因此需要不同的劑量水平。制備成片段(例如Fab、F(ab’)2、scFv)的抗體也將需要與相應(yīng)完整免疫球蛋白不同的劑量,因為它們比完整免疫球蛋白質(zhì)量更小,并且因此需要更低劑量以便在患者血液中達到相同的摩爾水平。
[0064]劑量還將依賴于施用方式、所治療患者的特殊癥狀、患者的總體健康情況、條件、大小和年齡以及開處方醫(yī)師的判斷而變化。
[0065]抑制至少一種補體成分的產(chǎn)生和活性的化合物的施用將通常為與適當藥物載體形成氣溶膠形式、通過注射進行靜脈輸注、皮下注射、口服或舌下給藥。如果期望可以使用其它施用途徑。
[0066]此外還考慮到能夠使用聯(lián)合治療,其中抑制補體的化合物與已知的溶血性疾病治療方案相組合施用。此類治療方案包括施用I) 一種或多種已知增加血細胞生成的化合物(例如,通過加速產(chǎn)生、消除干細胞破壞或消除干細胞抑制),與2)選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分的活性的化合物的化合物相組合。已知增加血細胞生成的適當化合物包括,例如類固醇、免疫抑制劑(如環(huán)孢菌素)、抗凝劑(如華法林)、葉酸、鐵等、促紅細胞生成素(EPO)和抗胸腺細
胞球蛋白(ATG)、抗淋巴細胞球蛋白(ALG)、ΕΡ0衍生物和達依泊汀α (以Aranesp?商業(yè)
性獲得于Amgen, Inc., Thousand Oaks, CA (Aranesp?.是人造形式的EPO,通過重組DNA技
術(shù)在中國倉鼠卵巢(CHO)細胞中產(chǎn)生))。在特別有用的實施方案中,促紅細胞生成素(EPO)(已知增加血細胞生成的化合物)、EPO衍生物或達依泊汀α可以與選自h5Gl.1-mAb、h5Gl.1-scFv和h5Gl.1的其它功能片段的抗C5抗體組合施用。
[0067]適于注射的制劑可以在Remington’s Pharmaceutical Sciences, MackPublishing Company, Philadelphia, Pa.,第17版(1985)中找到。此類制劑必須是無菌的和無熱原的,并且通常包括藥物有效載體例如鹽水、緩沖(例如磷酸鹽緩沖)鹽水、Hank溶液、Ringer溶液、葡萄糖/鹽水、葡萄糖溶液等等。如果需要,制劑可以包含可藥用輔助物質(zhì),例如張力調(diào)節(jié)劑、潤濕劑、殺菌劑、防腐劑、穩(wěn)定劑等等。[0068]本公開考慮了通過施用一種或多種結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物在患有溶血性疾病的患者體內(nèi)降低溶血作用的方法。降低溶血作用意思是指患者發(fā)生溶血的時間階段降低大約25%或更多。以本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的用于確定患者中溶血作用水平的任何多種方式評價治療的效果。一種檢測溶血作用的定性方法是觀察血紅蛋白尿的出現(xiàn)。非常令人驚訝的是,如通過血紅蛋白尿快速減少所確定,按照本方法的治療降低了溶血作用。
[0069]測量溶血作用的更加定性的方式是測量患者血液中乳酸脫氫酶(LDH)的水平。LDH催化丙酮酸和乳酸的互相轉(zhuǎn)換。紅細胞代謝葡萄糖形成乳酸,乳酸釋放入血液并被肝臟攝入。LDH水平用作溶血作用的目標指示物。如本領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解,LDH水平的“正常上限”的測量將依賴于大量因素,包括所應(yīng)用的特定測定法和進行測定的精確方法而在不同實驗室之間不同。一般而言,無論如何,正如患者中LDH水平降低至正常LDH水平上限的20%以內(nèi)所反映出來的那樣,本方法能夠降低患有溶血性疾病的患者的溶血。備選地,本方法能夠降低患有溶血性疾病的患者的溶血作用,反映為患者LDH水平降低大于患者治療前LDH水平的50%,優(yōu)選地大于患者治療前LDH水平的65%,最優(yōu)選地為大于患者治療前LDH水平的80%。
[0070]溶血作用降低的另一種定量測量法是GP1-缺陷紅細胞(III型紅細胞)的存在。如本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解,III型紅細胞在細胞表面上沒有GPI錨蛋白表達。GP1-缺陷細胞的比例能夠利用例如Richards等人(Clin.Appl.1mmunol.Rev.,第I卷,第315-330頁,2001)所描述的技術(shù)通過流式細胞儀進行確定。如通過III型紅細胞增加所反映的那樣,本方法能夠降低患有溶血性疾病的患者的溶血作用。優(yōu)選地,患者III型紅細胞水平增加達到大于總紅細胞數(shù)的25%,更加優(yōu)選地,患者III型紅細胞水平增加達到大于總紅細胞數(shù)的50%,最優(yōu)選地,患者III型紅細胞水平增加達到大于總紅細胞數(shù)的75%。
[0071]減輕一種或多種與PNH或其它溶血性疾病相關(guān)的癥狀也在本公開范圍之內(nèi)。此類癥狀包括例如腹痛、疲勞、呼吸困難和失眠。癥狀可以是紅細胞溶解的直接結(jié)果(例如血紅蛋白尿、貧血、疲勞、低紅細胞計數(shù)等等)或者癥狀可以源自患者血液中的低一氧化氮(NO)水平(例如腹痛、勃起功能障礙、吞咽困難、血栓形成等等)。最近已經(jīng)報道,在具有超過40%PNH III型粒細胞克隆的患者中,幾乎全部患者具有血栓形成、腹痛、勃起功能障礙和吞咽困難,表明具有高溶血率(見 Moyo 等人,British J.Haematol.126:133-138 (2004))。
[0072]在特別有用的實施方案中,本方法使血小板計數(shù)超過40,000/微升(細胞減生患者)、優(yōu)選地超過75,000/微升、最優(yōu)選地超過150,000/微升的患者的一種或多種與PNH或其它溶血性疾病相關(guān)癥狀減輕。在其它實施方案中,本方法使得在受試者總紅細胞含量的PNH III型紅細胞的比例大于10%、優(yōu)選地大于25%、最優(yōu)選地為超過50%的情況下,患者中的一種或多種與PNH或其它溶血性疾病相關(guān)的癥狀減輕。還在其它實施方案中,本方法使得網(wǎng)織紅細胞計數(shù)超過80 X IO9/升、優(yōu)選地超過120 X IO9/升、最優(yōu)選地超過150 X IO9/升的患者中的一種或多種與PNH或其它溶血性疾病相關(guān)的癥狀的減輕。在上述最優(yōu)選的范圍內(nèi)的患者具有活性骨髓并且將產(chǎn)生足夠數(shù)量的紅細胞。雖然在患有PNH或其它溶血性疾病的患者中紅細胞可能在一種或多種途徑上是有缺陷的(例如GPI缺陷),本方法在保護此類細胞免于源自補體活化的溶解中仍然是特別有用的。因此,在優(yōu)選范圍內(nèi)的患者最能從本方法獲得益處。
[0073]在一方面,考慮了減輕疲勞的方法,該方法包括將結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物施用于患有或者易患溶血性疾病的受試者的步驟。減輕疲勞意味著患者感受疲勞的時間階段減少大約25%或更多。疲勞被認為是與血管內(nèi)溶血作用相關(guān)的癥狀,因為甚至在貧血存在情況下,當血紅蛋白尿消失,疲勞就會減輕。通過降低紅細胞的溶解,本方法減輕了疲勞。III型紅細胞、網(wǎng)織紅細胞和血小板在上述優(yōu)選范圍內(nèi)的患者最能從本方法獲得益處。
[0074]在另一方面,考慮了減輕腹痛的方法,該方法包括將結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物施用于患有或者易患溶血性疾病的受試者的步驟。減輕腹痛意味著患者感受腹痛的時間階段減少大約25%或更多。腹痛是因為患者天然水平觸珠蛋白不能加工由于血管內(nèi)溶血作用釋放入血液的全部游離血紅蛋白,導(dǎo)致NO消除和腸張力障礙和痙攣而產(chǎn)生的癥狀。通過降低紅細胞的溶解,本方法減少了血液中游離血紅蛋白的量,從而減輕腹痛。III型紅細胞、網(wǎng)織紅細胞和血小板在上述優(yōu)選范圍內(nèi)的患者最能從本方法獲得益處。
[0075]在另一方面,考慮了減輕吞咽困難的方法,該方法包括將結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物施用于患有或者易患溶血性疾病的受試者的步驟。減輕吞咽困難意味著患者吞咽困難發(fā)作的時間階段減少大約25%或更多。吞咽困難是因為患者天然水平觸珠蛋白不能加工由于血管內(nèi)溶血作用釋放入血液的全部游離血紅蛋白,導(dǎo)致NO消除和食管痙攣而產(chǎn)生的癥狀。通過降低紅細胞的溶解,本方法減少了血液中游離血紅蛋白的量,從而減輕吞咽困難。III型紅細胞、網(wǎng)織紅細胞和血小板在上述優(yōu)選范圍內(nèi)的患者最能從本方法獲得益處。
[0076]還在另一方面,考慮了減輕勃起功能障礙的方法,該方法包括將結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物施用于患有或者易患溶血性疾病的受試者的步驟。減輕勃起功能障礙意味著患者經(jīng)歷勃起功能障礙的時間階段減少大約25%或更多。勃起功能障礙被認為是與由于血管內(nèi)溶血作用釋放入血液的游離血紅蛋白引起的NO消除相關(guān)的癥狀。通過降低紅細胞的溶解,本方法減少了血液中游離血紅蛋白的量,從而增加血清NO水平并減輕勃起功能障礙。III型紅細胞、網(wǎng)織紅細胞和血小板在上述優(yōu)選范圍內(nèi)的患者最能從本方法獲得益處。
[0077]還在另一方面,考慮了減輕少血紅蛋白尿的方法,該方法包括將結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物施用于患有或者易患溶血性疾病的受試者的步驟。減輕血紅蛋白尿意味著患者具有紅、棕或黑尿的時間次數(shù)減少,其中減少一般大約25%或更多。血紅蛋白尿是因為患者天然水平觸珠蛋白不能加工由于血管內(nèi)溶血作用釋放入血液的全部游離血紅蛋白產(chǎn)生的癥狀。通過降低紅細胞的溶解,本方法減少了血液和尿中游離血紅蛋白的量,從而減輕血紅蛋白尿。相當令人驚訝的是,血紅蛋白尿的降低發(fā)生得非??臁II型紅細胞、網(wǎng)織紅細胞和血小板在上述優(yōu)選范圍內(nèi)的患者最能從本方法獲得益處。
[0078]還在另一方面,考慮了減輕血栓形成的方法,該方法包括將結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物施用于患有或者易患溶血性疾病的受試者的步驟。減輕血栓形成意味著患者血栓形成發(fā)作的時間階段減少大約25%或更多。血栓形成被認為與由于血管內(nèi)溶血作用釋放入血液的游離血紅蛋白引起的NO消除相關(guān)和/或與血小板表面缺乏CD59而導(dǎo)致末端補體介導(dǎo)的血小板活化相關(guān)的癥狀。通過降低紅細胞的溶解,本方法減少了血液中游離血紅蛋白的量,從而增加血清NO水平并減輕血栓形成。此外,封閉補體將避免末端補體介導(dǎo)的血小板活化和血栓形成。通過這種經(jīng)由血小板和內(nèi)皮細胞上的C5a受體可誘導(dǎo)血小板聚集的方法還將抑制C5a。
[0079]血栓形成在病因?qū)W上被認為是多因素的,包括游離血紅蛋白所致的NO消除、循環(huán)血小板表面上末端補體抑制的缺乏和細胞游離血紅素對內(nèi)皮表面的改變。游離血紅蛋白的血管內(nèi)釋放可以直接促成小血管血栓形成。已經(jīng)表明,NO可抑制血小板聚集、誘導(dǎo)聚集的血小板解聚并且抑制血小板粘附。相反,血紅蛋白所致的NO消除或者通過抑制精氨酸代謝作用減少NO產(chǎn)生導(dǎo)致血小板聚集增加。PN`H血小板還缺乏末端補體抑制劑CD59,并且多項研究已經(jīng)顯示,末端補體(C5b-9)沉積于血小板上引起膜囊泡化和微泡產(chǎn)生。微泡作為凝血成分因子Va、Xa或凝血酶原酶復(fù)合物產(chǎn)生的位點而起作用。應(yīng)該認為這些顆粒還可以促成PNH中血栓的發(fā)生。通過降低紅細胞的溶解,本方法減少了血液中游離血紅蛋白的量,從而增加血清NO水平并減輕血栓形成。此外,在C5處抑制補體將阻止C5b-9和C5a介導(dǎo)的血小板和/或內(nèi)皮細胞活化。
[0080]在特別有用的實施方案中,本方法降低血栓形成,特別是在血小板計數(shù)超過40,000/微升、優(yōu)選地超過75,000/微升、最優(yōu)選地超過150,000/微升的患者中。在其它實施方案中,本方法降低患者血栓形成,其中受試者總紅細胞含量中PNH III型紅細胞的比例大于10%,優(yōu)選地大于25%,更加優(yōu)選地超過50%,最優(yōu)選地超過75%。還在另一個實施方案中,本方法在網(wǎng)織紅細胞計數(shù)超過80X IO9/升、更加優(yōu)選地超過120X IO9/升、最優(yōu)選地超過150X IO9/升的患者中降低輸血血栓形成。
[0081]還在另一方面,考慮了減輕貧血的方法,該方法包括將結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物施用于患有或易患溶血性疾病的受試者的步驟。減輕貧血意味著患者患有貧血的時間階段降低大約25%或更多。溶血性疾病中的貧血源于由于紅細胞損失而造成的血液攜帶氧的能力降低。通過減少紅細胞的溶解,本方法有助于紅細胞水平增加,從而減輕貧血。
[0082]在另一方面,考慮了增加患有溶血性疾病的患者中補體敏感性III型紅細胞的比例并因此增加總紅細胞計數(shù)的方法。通過增加患者RBC計數(shù),患者的疲勞、貧血和對輸血的需求降低了。輸血的減少可以是輸血頻率下降、所輸?shù)难簡挝粩?shù)量減少,或者兩者。
[0083]在患有溶血性疾病的患者中增加紅細胞計數(shù)的方法包括將結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物施用于患有溶血性疾病的患者的步驟。在特別有用的實施方案中,本方法在患有溶血性疾病的患者中、尤其是血小板計數(shù)超過40,000/微升、優(yōu)選地超過75,000/微升、最優(yōu)選地超過150,000/微升的患者中增加紅細胞計數(shù)。在其它實施方案中,本方法在患有溶血性疾病的患者中增加紅細胞計數(shù),其中受試者總紅細胞含量中PNH III型紅細胞的比例大于10%、優(yōu)選地大于25%、加優(yōu)選地超過50%、最優(yōu)選地超過75%。還在另一個實施方案中,本方法在患有溶血性疾病的患者中增加紅細胞計數(shù),其中患者的網(wǎng)織紅細胞計數(shù)超過80X IO9/升、更加優(yōu)選地超過120X IO9/升、最優(yōu)選地超過150X107升。在一些實施方案中,本公開的方法可以使得輸血頻率降低大約50%,代表性地為輸血頻率降低大約70%,更加代表性地為輸血頻率降低大約90%。
[0084]還在另 一方面,本公開考慮了通過將化合物施用于受試者使得患有溶血性疾病的受試者較少依賴輸血或者不依賴于輸血的方法,其中化合物選自結(jié)合至一種或多種補體成分的化合物、阻斷一種或多種補體成分產(chǎn)生的化合物和封閉一種或多種補體成分活性的化合物。如本領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解,紅細胞的正常生命周期為大約120天??紤]到紅細胞具有長的半壽期,為了評價輸血不依賴性需要治療6個月或更長。已經(jīng)意外地發(fā)現(xiàn),在一些患者中輸血不依賴性能夠維持12個月或更長,在一些情況下超過2年,長度超過紅細胞120天的生命周期。在特別有用的實施方案中,本方法在患有溶血性疾病的患者中提供了降低的輸血依賴性或者不依賴于輸血,尤其是在血小板計數(shù)超過40,000/微升、優(yōu)選地超過75,000/微升、最優(yōu)選地超過150,000/微升的患者中。在其它實施方案中,本方法在患有溶血性疾病的患者中提供了降低的輸血依賴性或者輸血不依賴性,其中受試者總紅細胞含量中PNH III型紅細胞的比例大于10%、優(yōu)選地大于25%、更加優(yōu)選地超過50%、最優(yōu)選地超過75%。還在其它實施方案中,本方法在患有溶血性疾病的患者中提供了降低的輸血依賴性或者輸血不依賴性,其中患者的網(wǎng)織紅細胞計數(shù)超過80X IO9/升、更加優(yōu)選地超過120X IO9/升、最優(yōu)選地超過150 X IO9/升。
[0085]在患有PNH或一些其它溶血性疾病的患者中增加一氧化氮(NO)水平的方法也在本公開的范圍之內(nèi)。這些增加NO水平的方法包括將結(jié)合至一種或多種補體成分或阻斷一種或多種補體成分的產(chǎn)生和/或活性的化合物施用于患有或者易患溶血性疾病的受試者的步驟。由于通過血管內(nèi)溶血作用而釋放入血液中的游離血紅蛋白對NO的清除,在患有PNH或一些其它溶血性疾病的患者中出現(xiàn)低NO水平。通過減少紅細胞溶解,本方法降低了血液中游離血紅蛋白的量,從而增加了血清NO水平。在特別有用的實施方案中,如通過因NO缺乏所致癥狀的消退證明NO體內(nèi)穩(wěn)態(tài)得到恢復(fù)。
實施例
[0086]11名患者參與治療試驗以評價抗C5抗體對PNH及與其相關(guān)的癥狀的效果。PNH患者是輸血依賴性的并且是溶血性的。在12個月內(nèi)有4次或更多次輸血史的患者定義為輸血依賴性的。在先前12個月中患者群體中輸血中位數(shù)為9。在先前12個月中,患者群體所使用的輸血單位中位數(shù)為24。
[0087]在4周的療程中,11名患者的每一名每周接受靜脈輸注抗C5抗體600mg,輸注大約30分鐘。用于本研究的特異抗C5抗體是eculizumab?;颊呓邮?00mg eculizumab, I周后以兩周一次接受900mg eculizumab。本研究最開始的12周構(gòu)成初步研究。完成12周的初期急性期后,全部患者參加總共進彳了 64周的擴展研究。11名患者中的10名患者參加總共進行2年的擴展研究。
[0088]測試了抗C5抗體治療對PNH III型紅細胞(“RBC”)的影響。“PNH型”是指表達于細胞表面的GPI錨定蛋白質(zhì)的密度。I型是正常表達,II型是中間表達,而III型為細胞表面無GPI錨定蛋白質(zhì)表達。以Richards等人(Clin.Appl.1mmunol.Rev.,第I卷,第315-330頁,2001)所描述的方式,通過流式細胞儀確定GPI缺陷細胞的比例。與治療前的狀況相比較,在擴展研究期間PNH III型紅細胞增加大于50%。研究前III型紅細胞平均值為全部紅細胞的36.7%,在64周III型紅細胞平均值為58.4%,這種增加表明溶血作用急劇降低(見下表I)。Eculizumab治療保護了 PNH III型RBC不進行補體介導(dǎo)的溶解,延長細胞存活。在所試驗全部患者中,PNH累及細胞的這種保護作用降低了對輸血的需求、陣發(fā)和溶血作用。
[0089]表I全部患者中的eculizumab治療前和治療后PNH細胞群
[0090]
【權(quán)利要求】
1.拮抗劑抗C5抗體在制備用于治療患有陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白血癥的患者的藥物中的用途,其中所述患者在以下給藥方案后經(jīng)歷或?qū)⒔?jīng)歷補體活性突破:(i)每周接受600mgeculizumab進行4周;(ii)在第5周接受900mg eculizumab ;并且之后(iii)每兩周一次接受900mg eculizumab,所述藥物用于每12天至少一次向所述患者施用拮抗劑抗C5抗體,由此維持所述患者中血清補體活性在低于正常血清補體活性的20%的水平,其中每12天至少一次向所述患者施用拮抗劑抗C5抗體的劑量為900mg,其中所述藥物用于治療所述患者的補體活性突破或用于減小所述患者經(jīng)歷補體活性突破的可能性。
2.拮抗劑抗C5抗體在制備用于治療患有陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白血癥的患者的藥物中的用途,其中所述患者在以下給藥方案后經(jīng)歷或?qū)⒔?jīng)歷補體活性突破:(i)每周接受600mgeculizumab進行4周;(ii)在第5周接受900mg eculizumab ;并且之后(iii)每兩周一次接受900mg eculizumab,所述藥物用于以有效地維持拮抗劑抗C5抗體的血清濃度大于35μ g/ml的量向所述患者施用拮抗劑抗C5抗體,以由此維持所述患者中血清補體活性在低于正常血清補體活性的20%的水平,其中所述藥物用于治療所述患者的補體活性突破或用于減小所述患者經(jīng)歷補體活性突破的可能性。
3.如權(quán)利要求1或2所述的用途,其中所述患者具有一種或多種以下特征: a)所述患者的總紅細胞計數(shù)中III型紅細胞的比例大于10%; b)所述患者的總紅細胞含量中III型紅細胞的比例大于25%; c)所述患者的總紅細胞含量中III型紅細胞的比例大于50%; d)所述患者的血小板計數(shù)大于40,000/微升; e)所述患者的血小板計數(shù)大于75,000/微升; f)所述患者的血小板計數(shù)大于`150,000/微升; g)所述患者的網(wǎng)織紅細胞計數(shù)大于80XIO9/升; h)所述患者的網(wǎng)織紅細胞計數(shù)大于120X107升; i)所述患者的網(wǎng)織紅細胞計數(shù)大于150X107升; j)所述患者的III型粒細胞克隆大于40% ;和 k)所述患者的LDH水平大于或等于人正常LDH水平上限的1.5倍。
4.如權(quán)利要求1至3之任一項所述的用途,其中所述藥物用于向所述患者施用拮抗劑抗C5抗體和一種或多種增加血細胞生成的化合物。
5.如權(quán)利要求4所述的用途,其中所述一種或多種增加血細胞生成的化合物選自:a)類固醇、b)免疫抑制劑、c)抗凝劑、d)葉酸、e)鐵、f)促紅細胞生成素、g)抗胸腺細胞球蛋白和h)抗淋巴細胞球蛋白。
6.如權(quán)利要求1至5之任一項所述的用途,其中所述拮抗劑抗C5抗體是eculizumab。
【文檔編號】A61K48/00GK103446584SQ201310381757
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2005年2月3日 優(yōu)先權(quán)日:2004年2月3日
【發(fā)明者】L·貝爾, R·P·羅特爾 申請人:阿萊克申藥物公司
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
1