一種生物發(fā)酵晚霜及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種生物發(fā)酵晚霜及其制備方法,該方法包括以下步驟:先將鯨蠟硬酯醇、天然霍霍巴油、角鯊?fù)?、維生素E投入油相鍋加熱至75~80℃,充分?jǐn)嚢枞芙庵辆?;將全部水倒入水相鍋中,然后慢慢倒入甘油、低聚麥芽糖基葡糖苷,撒入透明質(zhì)酸,同時(shí)加熱,升溫到75~80℃,原料全部溶解后保溫半小時(shí);先將油相鍋中的油相抽濾至乳化鍋,開(kāi)啟攪拌,慢速均質(zhì)的同時(shí)再將水相鍋中的水相抽濾至乳化鍋,待料體全部抽入后快速均質(zhì)3分鐘;停止均質(zhì),依次加入香精、蘆薈提取液、復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液攪拌均勻,降溫的同時(shí)全程抽真空。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明產(chǎn)品性能溫和,活性成分高,質(zhì)地也比較滋潤(rùn),并具有保濕、修護(hù)、美白、抗衰老、緊致、營(yíng)養(yǎng)滋潤(rùn)。
【專利說(shuō)明】一種生物發(fā)酵晚霜及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種洗滌護(hù)膚用品,尤其是涉及一種生物發(fā)酵晚霜及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]晚霜是常用的護(hù)膚用品,針對(duì)夜間的護(hù)膚,市場(chǎng)上種類(lèi)繁多,各自的功效也參差不齊,品質(zhì)差異較大。
[0003] 基本所有的此類(lèi)產(chǎn)品均采用化工原料合成,雖有功效,但其副作用也非常明顯。本生物發(fā)酵晚霜采用生物發(fā)酵技術(shù),包含發(fā)質(zhì)所需要的全部營(yíng)養(yǎng),在國(guó)內(nèi)是獨(dú)樹(shù)一幟的。本產(chǎn)品性能溫和,活性成分高,質(zhì)地也比較滋潤(rùn),并具有保濕、修護(hù)、美白、抗衰老、緊致、營(yíng)養(yǎng)滋潤(rùn)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種性能溫和,活性成分高,質(zhì)地也比較滋潤(rùn),并具有保濕、修護(hù)、美白、抗衰老、緊致、營(yíng)養(yǎng)滋潤(rùn)的生物發(fā)酵晚霜及其制備方法。
[0005]本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn):一種生物發(fā)酵晚霜,其特征在于,包括以下重量百分含量的組分:
[0006]復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液 10%~15% ;
[0007]低聚麥芽糖基葡糖苷3%~3.5%;
[0008]天然霍霍巴油5.5%~6%;
[0009]甘油4%~6%;
[0010]鯨蠟硬酯醇2.5%~3.5%;
[0011]角鯊?fù)?%~6%;
[0012]維生素E0.25% ~0.35%;
[0013]透明質(zhì)酸0.04%~0.06%;
[0014]蘆薈提取液2.0%~2.5%;
[0015]香精0.2%~0.3%;
[0016]水余量。
[0017]所述的復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液通過(guò)以下方法制得:將原料置于陶器中靜態(tài)發(fā)酵21~30天,然后將得到的產(chǎn)物取出過(guò)濾,收集濾液并控制溫度為100~110°C進(jìn)行高溫滅菌,最后冷卻至室溫,即得到復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液。
[0018]所述的原料包括以下重量百分比含量的組分:乳酸菌菌液0.5~1.0%、粉紅酵母菌液0.5~1.0 %、黃孢原毛平革菌菌液0.5~1.0 %、地衣芽孢桿菌菌液0.5~1.0%、短小芽孢桿菌菌液0.5~1.0 %、麥芽糖假絲酵母菌液0.5~1.0 %、長(zhǎng)枝木霉菌液0.5~1.0%、沙田柚0.4~0.6%、蘋(píng)果0.4~0.6%、香蕉0.4~0.6%、蜂皇漿0.2~0.3%、特種黃豆1.0~1.2%、人參0.5~0.9%、靈芝0.5~0.9%、薰衣草1.0~1.2%、米酒糟20~25%、余量為純水。
[0019]所述的乳酸菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0020](I)準(zhǔn)備乳酸菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:乳酪蛋白胨8~12%、蛋白胨8~12%、酵母膏4~6%、葡萄糖4~6%、吐溫-800.8~1.2%、磷酸氫二鉀1.8~2.5%、醋酸鈉4~6%、檸檬酸二胺1.8~2.5%、硫酸鎂0.1~0.3%、硫酸錳
0.04~0.06%、余量為純水;
[0021](2)液體培養(yǎng)基的制備:按乳酸菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0022](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的乳酸菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0023](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: 1(V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的已滅菌的液體培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到乳酸菌菌液。
[0024]所述的粉紅酵母菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0025](I)準(zhǔn)備粉紅酵母培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:蛋白胨4.1~6%、葡萄糖8~12%、酵母膏2~4%、余量為麥芽汁;
[0026](2)液體培養(yǎng)基的制備:按粉紅酵母培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0027](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的粉紅酵母菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0028](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: 1(V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到粉紅酵母菌液。
[0029]所述的黃孢原毛平革菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0030](I)準(zhǔn)備黃孢原毛平革菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:葡萄糖
1.9 ~2.0 %、KH2PO40.25 ~0.30%、MgSO4.7Η200.14 ~0.15 %、維生素 Β10.01 %、瓊月旨1.4~1.5%、余量為馬鈴薯提取液;
[0031](2)液體培養(yǎng)基的制備:按黃孢原毛平革菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0032](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的黃孢原毛平革菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0033](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: 1(V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到黃孢原毛平革菌菌液。
[0034]所述的地衣芽孢桿菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0035](I)地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基原料包括以下組分及重量百分比含量:麩皮4.5~4.7%、豆餅粉2.7~2.85%、瓊脂1.8~1.85%、余量為0.2?七%的NaOH溶液,將麩皮、豆餅粉混合后,加0.2wt% NaOH溶液煮沸l(wèi)h,用HCl中和到pH為7,然后加入瓊脂并熔化;
[0036](2)液體培養(yǎng)基的制備:將步驟(1)得到的樣品在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;[0037](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的地衣芽孢桿菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0038](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: 1(V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到地衣芽孢桿菌菌液。
[0039]所述的短小芽孢桿菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0040](I)準(zhǔn)備短小芽孢桿菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:蛋白胨
0.4~0.6%、牛肉浸取物0.25~0.35%, NaCl0.4~0.6%、瓊脂1.4~1.5%、余量為蒸餾水;
[0041](2)液體培養(yǎng)基的制備:按短小芽孢桿菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121 °C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0042](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的短小芽孢桿菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0043](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: 1(V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到短小芽孢桿菌菌液。
[0044]所述的麥芽糖假絲酵母菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0045](I)準(zhǔn)備麥芽糖假絲酵母培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:瓊脂
1.4 ~1.6% ;5° 麥芽汁 98.4 ~98.6% ;
[0046](2)液體培養(yǎng)基的制備:按麥芽糖假絲酵母培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0047](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的麥芽糖假絲酵母菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0048](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: 1(V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到麥芽糖假絲酵母菌液;
[0049]所述的長(zhǎng)枝木霉菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0050](I)準(zhǔn)備長(zhǎng)枝木霉培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:瓊脂1.4~1.6% ;5° 麥芽汁 98.4 ~98.6% ;
[0051](2)液體培養(yǎng)基的制備:按長(zhǎng)枝木霉培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0052](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的長(zhǎng)枝木霉菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0053](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: 1(V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到長(zhǎng)枝木霉菌液;
[0054]所述的蘋(píng)果為選用秦嶺或大連的蘋(píng)果,
[0055]所述的香蕉選用云南的香蕉,[0056]所述的特種黃豆選用為陜西或黑龍江的特種黃豆。
[0057]—種生物發(fā)酵晚霜的制備方法,其特征在于,該方法包括以下步驟:
[0058](I)按重量百分比稱取:復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液10%~15% ;低聚麥芽糖基葡糖苷3%~3.5% ;天然霍霍巴油5.5%~6% ;甘油4%~6% ;鯨蠟硬酯醇2.5%~
3.5% ;角鯊?fù)?%~6% ;維生素E0.25%~0.35% ;透明質(zhì)酸0.04%~0.06% ;蘆薈提取液2.0%~2.5% ;香精0.2%~0.3% ;水余量;
[0059](2)先將鯨蠟硬酯醇、天然霍霍巴油、角鯊?fù)?、維生素E投入油相鍋加熱至75~80 0C,充分?jǐn)嚢枞芙庵辆?,攪拌速?0轉(zhuǎn)/分;
[0060](3)將全部水倒入水相鍋中,然后慢慢倒入甘油、低聚麥芽糖基葡糖苷,攪拌10分鐘分散均勻后,撒入透明質(zhì)酸,攪拌30分鐘分散均勻后,同時(shí)加熱,升溫到75~80°C,攪拌速度為50轉(zhuǎn)/分,原料全部溶解后保溫半小時(shí);
[0061](4)先將油相鍋中的油相抽濾至乳化鍋,開(kāi)啟攪拌,攪拌速度為80轉(zhuǎn)/分,慢速均質(zhì)的同時(shí)再將水相鍋中的水相抽濾至乳化鍋,溫度保持75°C,待料體全部抽入后快速均質(zhì)3分鐘;均質(zhì)攪拌速度為2500轉(zhuǎn)/分;
[0062](5)停止均質(zhì),降溫到50°C以下,依次加入香精、蘆薈提取液、復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液攪拌均勻,全部加入后繼續(xù)攪拌30分鐘,降溫的同時(shí)全程抽真空,攪拌50轉(zhuǎn)/分;
[0063](6)攪拌冷卻至38°C,停止攪拌,檢驗(yàn)、出料,得到生物發(fā)酵晚霜產(chǎn)品。
[0064]本發(fā)明所述的生物發(fā)酵晚霜的主要成分是復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液,其富含肌膚細(xì)胞所必需的18種氨基酸、大豆異黃銅、低聚糖,大豆磷脂、大豆皂苷、VitC、VitE、B族群維生素、鋅、硒、磷、鐵、鈣等礦物質(zhì)和微量元素、胡蘿卜素、硫胺素、檸檬酸等40多種人體必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。`
[0065]所述的生物發(fā)酵晚霜采用的復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液、香精等采用自然生物提取物,不添加激素類(lèi)物質(zhì)。
[0066]其中:
[0067]透明質(zhì)酸是目前所公認(rèn)的最佳保濕成分,可以改善皮膚營(yíng)養(yǎng)代謝,使皮膚柔嫩、光滑、去皺、增加彈性、防止衰老,在保濕的同時(shí)又是良好的透皮吸收促進(jìn)劑
[0068]低聚麥芽糖基葡糖苷是由淀粉衍生出的碳水化合物糖漿,含有各種糖類(lèi),可以保護(hù)皮膚細(xì)胞和保濕,產(chǎn)品質(zhì)地優(yōu)良,對(duì)皮膚無(wú)任何刺激。
[0069]天然霍霍巴油是純天然透明液體,含有豐富維生素,具有滋養(yǎng)軟化肌膚的功效,容易被肌膚吸收。
[0070]鯨蠟硬脂醇作為該生物發(fā)酵晚霜的基質(zhì)。角鯊?fù)槭菑纳詈u忯~(yú)肝臟中提取的,對(duì)皮膚有較好的親和性。
[0071]維生素E是一種脂溶性維生素,是人體正常生長(zhǎng)所必須。
[0072]超細(xì)鈦白粉起美容美白的功效。
[0073]甘油有甜味,為無(wú)色透明粘性液體,保濕滋潤(rùn)效果非常好,用后水水潤(rùn)潤(rùn)的柔軟皮膚。
[0074]蘆薈提取液是天然的保濕和鎖水、效果機(jī)制促進(jìn)纖維聚合蛋白降成NMF,從而增加天然保濕因子,即時(shí)增加水含量,通過(guò)輕微成膜作用減少經(jīng)皮水分流失。
[0075]香精采用植物提取香精,根據(jù)需要添加不同種類(lèi),如椰奶、蘭花等。[0076]與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明生物發(fā)酵晚霜采用生物發(fā)酵技術(shù),包含發(fā)質(zhì)所需要的全部營(yíng)養(yǎng),在國(guó)內(nèi)是獨(dú)樹(shù)一幟的。本產(chǎn)品性能溫和,活性成分高,質(zhì)地也比較滋潤(rùn),并具有保濕、修護(hù)、美白、抗衰老、緊致、營(yíng)養(yǎng)滋潤(rùn)。
【具體實(shí)施方式】
[0077]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
[0078]實(shí)施例1
[0079]—種生物發(fā)酵晚霜的制備方法,該方法包括以下步驟:
[0080](I)按重量百分比稱取:復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液12% ;低聚麥芽糖基葡糖苷
3.2% ;天然霍霍巴油5.8% ;甘油5% ;鯨蠟硬酯醇3.0% ;角鯊?fù)?% ;維生素E0.30% ;透明質(zhì)酸0.05% ;蘆薈提取液2.3% ;香精0.25% ;水余量;
[0081](2)先將鯨蠟硬酯醇、天然霍霍巴油、角鯊?fù)?、維生素E投入油相鍋加熱至75~80 0C,充分?jǐn)嚢枞芙庵辆?,攪拌速?0轉(zhuǎn)/分;
[0082](3)將全部水倒入水相鍋中,然后慢慢倒入甘油、低聚麥芽糖基葡糖苷,攪拌10分鐘分散均勻后,撒入透明質(zhì)酸,攪拌30分鐘分散均勻后,同時(shí)加熱,升溫到75~80°C,攪拌速度為50轉(zhuǎn)/分,原料全部溶解后保溫半小時(shí);
[0083](4)先將油相鍋中的油相抽濾至乳化鍋,開(kāi)啟攪拌,攪拌速度為80轉(zhuǎn)/分,慢速均質(zhì)的同時(shí)再將水相鍋中的水相抽濾至乳化鍋,溫度保持75°C,待料體全部抽入后快速均質(zhì)3分鐘;均質(zhì)攪拌速度為2500轉(zhuǎn)/分;
[0084](5)停止均質(zhì),降溫到50°C以下,依次加入香精、蘆薈提取液、復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液攪拌均勻,全部加入后繼續(xù)攪拌30分鐘,降溫的同時(shí)全程抽真空,攪拌50轉(zhuǎn)/分;
[0085](6)攪拌冷卻至38°C,停止攪拌,檢驗(yàn)、出料,得到生物發(fā)酵晚霜產(chǎn)品。
[0086]本發(fā)明所述的生物發(fā)酵晚霜的主要成分是復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液,其富含肌膚細(xì)胞所必需的18種氨基酸、大豆異黃銅、低聚糖,大豆磷脂、大豆皂苷、VitC、VitE、B族群維生素、鋅、硒、磷、鐵、鈣等礦物質(zhì)和微量元素、胡蘿卜素、硫胺素、檸檬酸等40多種人體必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
[0087]上述復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液,原料包括以下組分及重量百分比含量:乳酸菌菌液0.5%、粉紅酵母菌液0.5%、黃孢原毛平革菌菌液0.5%、地衣芽孢桿菌菌液0.5%、短小芽孢桿菌菌液0.5%、麥芽糖假絲酵母菌液0.5%、長(zhǎng)枝木霉菌液0.5%、沙田柚0.4%、產(chǎn)地為秦嶺的蘋(píng)果0.4%、產(chǎn)地為云南的香蕉0.4%、蜂皇漿0.2%、產(chǎn)地為陜西的特種黃豆1.0%、人參0.5%、靈芝0.5%、薰衣草1.0%、米酒糟20%、余量為純水。
[0088]乳酸菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0089](I)準(zhǔn)備乳酸菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:乳酪蛋白胨8%、蛋白胨8 %、酵母膏4 %、葡萄糖4 %、吐溫-800.8 %、磷酸氫二鉀1.8%、醋酸鈉4 %、檸檬酸二胺1.8%、硫酸鎂0.1 %、硫酸錳0.04%、余量為純水;
[0090](2)液體培養(yǎng)基的制備:按乳酸菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0091](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的乳酸菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;[0092](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的已滅菌的液體培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到乳酸菌菌液。
[0093]粉紅酵母菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0094](I)準(zhǔn)備粉紅酵母培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:蛋白胨4.1%,葡萄糖8%、酵母膏2%、余量為麥芽汁;
[0095](2)液體培養(yǎng)基的制備:按粉紅酵母培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0096](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的粉紅酵母菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液; [0097](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: l(v/v)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到粉紅酵母菌液。
[0098]黃孢原毛平革菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0099](I)準(zhǔn)備黃孢原毛平革菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:葡萄糖1.9%,KH2PO40.25%,MgSO4.7Η200.14%、維生素 Β10.01 %、瓊脂 1.4%、余量為馬鈴薯提取液;
[0100](2)液體培養(yǎng)基的制備:按黃孢原毛平革菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0101](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的黃孢原毛平革菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0102](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到黃孢原毛平革菌菌液。
[0103]地衣芽孢桿菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0104](I)地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基原料包括以下組分及重量百分比含量:麩皮4.5%、豆餅粉2.7%、瓊脂1.8%、余量為0.2被%的NaOH溶液,將麩皮、豆餅粉混合后,加0.2wt%Na0H溶液煮沸l(wèi)h,用HCl中和到pH為7,然后加入瓊脂并熔化;
[0105](2)液體培養(yǎng)基的制備:將步驟⑴得到的樣品在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0106](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的地衣芽孢桿菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0107](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到地衣芽孢桿菌菌液。
[0108]短小芽孢桿菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0109](I)準(zhǔn)備短小芽孢桿菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:蛋白胨
0.4%、牛肉浸取物0.25%、NaCl0.4%、瓊脂1.4%、余量為蒸餾水;
[0110](2)液體培養(yǎng)基的制備:按短小芽孢桿菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121 °C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0111](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的短小芽孢桿菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0112](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到短小芽孢桿菌菌液。
[0113]麥芽糖假絲酵母菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0114](I)準(zhǔn)備麥芽糖假絲酵母培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:瓊脂1.4% ;5。麥芽汁 98.6% ;
[0115](2)液體培養(yǎng)基的制備:按麥芽糖假絲酵母培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0116](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的麥芽糖假絲酵母菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0117](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到麥芽糖假絲酵母菌液。
[0118]長(zhǎng)枝木霉菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0119](I)準(zhǔn)備長(zhǎng)枝木霉培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:瓊脂1.4% ;5°麥芽汁98.6% ;
[0120](2)液體培養(yǎng)基的制備:按長(zhǎng)枝木霉培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0121](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的長(zhǎng)枝木霉菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0122](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到長(zhǎng)枝木霉菌液。
[0123]復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液在制備時(shí),按照配方準(zhǔn)備原料后,將原料粉碎混拌均勻,置于陶器中靜態(tài)發(fā)酵30天,然后將得到的產(chǎn)物取出過(guò)濾,收集濾液并控制溫度為110°C進(jìn)行高溫滅菌,最后冷卻至室溫,即得到復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液。
[0124]實(shí)施例2
[0125]一種生物發(fā)酵晚霜的制備方法,該方法包括以下步驟:
[0126](I)按重量百分比稱取:復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液15% ;低聚麥芽糖基葡糖苷3.5% ;天然霍霍巴油6% ;甘油6% ;鯨蠟硬酯醇3.5% ;角鯊?fù)?% ;維生素E0.35% ;透明質(zhì)酸0.06% ;蘆薈提取液2.5% ;香精0.3% ;水余量;
[0127](2)先將鯨蠟硬酯醇、天然霍霍巴油、角鯊?fù)?、維生素E投入油相鍋加熱至75~80 0C,充分?jǐn)嚢枞芙庵辆唬瑪嚢杷俣?0轉(zhuǎn)/分;
[0128](3)將全部水倒入水相鍋中,然后慢慢倒入甘油、低聚麥芽糖基葡糖苷,攪拌10分鐘分散均勻后,撒入透明質(zhì)酸,攪拌30分鐘分散均勻后,同時(shí)加熱,升溫到75~80°C,攪拌速度為50轉(zhuǎn)/分,原料全部溶解后保溫半小時(shí);[0129](4)先將油相鍋中的油相抽濾至乳化鍋,開(kāi)啟攪拌,攪拌速度為80轉(zhuǎn)/分,慢速均質(zhì)的同時(shí)再將水相鍋中的水相抽濾至乳化鍋,溫度保持75°C,待料體全部抽入后快速均質(zhì)3分鐘;均質(zhì)攪拌速度為2500轉(zhuǎn)/分;
[0130](5)停止均質(zhì),降溫到50°C以下,依次加入香精、蘆薈提取液、復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液攪拌均勻,全部加入后繼續(xù)攪拌30分鐘,降溫的同時(shí)全程抽真空,攪拌50轉(zhuǎn)/分;
[0131](6)攪拌冷卻至38°C,停止攪拌,檢驗(yàn)、出料,得到生物發(fā)酵晚霜產(chǎn)品。
[0132]本發(fā)明所述的生物發(fā)酵晚霜的主要成分是復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液,其富含肌膚細(xì)胞所必需的18種氨基酸、大豆異黃銅、低聚糖,大豆磷脂、大豆皂苷、VitC、VitE、B族群維生素、鋅、硒、磷、鐵、鈣等礦物質(zhì)和微量元素、胡蘿卜素、硫胺素、檸檬酸等40多種人體必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
[0133]上述復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液,包括以下組分及重量百分比含量:乳酸菌菌液
0.6%、粉紅酵母菌液0.8%、黃孢原毛平革菌菌液0.8%、地衣芽孢桿菌菌液0.6%、短小芽孢桿菌菌液0.7%、麥芽糖假絲酵母菌液0.7%、長(zhǎng)枝木霉菌液0.8%、沙田柚0.5%、產(chǎn)地大連的蘋(píng)果0.5%、產(chǎn)地云南的香蕉0.5 %、蜂皇漿0.2%、產(chǎn)地黑龍江的特種黃豆1.1 %、人參
0.6%、靈芝0.6%、薰衣草1.1 %、米酒糟22%、余量為純水。
[0134]乳酸菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0135](I)準(zhǔn)備乳酸菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:乳酪蛋白胨10%、蛋白胨10%、酵母膏5%、葡萄糖5%、吐溫-801%、磷酸氫二鉀2%、醋酸鈉5%、檸檬酸二胺2 %、硫酸鎂0.2%、硫酸錳0.05 %、余量為純水;
[0136](2)液體培養(yǎng)基的制備:按乳酸菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0137](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的乳酸菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0138](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的已滅菌的液體培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到乳酸菌菌液。
[0139]粉紅酵母菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0140](1)準(zhǔn)備粉紅酵母培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:蛋白胨5%、葡萄糖10%、酵母膏3%、余量為麥芽汁;
[0141](2)液體培養(yǎng)基的制備:按粉紅酵母培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0142](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的粉紅酵母菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0143](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到粉紅酵母菌液。
[0144]黃孢原毛平革菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0145](1)準(zhǔn)備黃孢原毛平革菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:葡萄糖1.9%,KH2PO40.28%,MgSO4.7Η200.14%、維生素 Β10.01 %、瓊脂 1.4%、余量為馬鈴薯提取液;
[0146](2)液體培養(yǎng)基的制備:按黃孢原毛平革菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0147](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的黃孢原毛平革菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0148](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到黃孢原毛平革菌菌液。
[0149]地衣芽孢桿菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0150](I)地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基原料包括以下組分及重量百分比含量:麩皮4.6%、豆餅粉2.8%、瓊脂1.8%、余量為0.2被%的NaOH溶液,將麩皮、豆餅粉混合后,加0.2wt% NaOH溶液煮沸l(wèi)h,用HCl中和到pH為7,然后加入瓊脂并熔化; [0151](2)液體培養(yǎng)基的制備:將步驟⑴得到的樣品在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0152](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的地衣芽孢桿菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0153](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3#%%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到地衣芽孢桿菌菌液。
[0154]短小芽孢桿菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0155](I)準(zhǔn)備短小芽孢桿菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:蛋白胨
0.5%、牛肉浸取物0.3%, NaCl0.5%、瓊脂1.4%、余量為蒸餾水;
[0156](2)液體培養(yǎng)基的制備:按短小芽孢桿菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0157](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的短小芽孢桿菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0158](4)生產(chǎn)菌液的制備:按4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到短小芽孢桿菌菌液。
[0159]麥芽糖假絲酵母菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0160](I)準(zhǔn)備麥芽糖假絲酵母培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:瓊脂
1.5% ;5。麥芽汁 98.5% ;
[0161](2)液體培養(yǎng)基的制備:按麥芽糖假絲酵母培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0162](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的麥芽糖假絲酵母菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0163](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到麥芽糖假絲酵母菌液。[0164]長(zhǎng)枝木霉菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0165](I)準(zhǔn)備長(zhǎng)枝木霉培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:瓊脂1.5% ;5°麥芽汁98.5% ;
[0166](2)液體培養(yǎng)基的制備:按長(zhǎng)枝木霉培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0167] (3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的長(zhǎng)枝木霉菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0168](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到長(zhǎng)枝木霉菌液。
[0169]復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液在制備時(shí),按照配方準(zhǔn)備原料后,將原料粉碎混拌均勻,置于陶器中靜態(tài)發(fā)酵30天,然后將得到的產(chǎn)物取出過(guò)濾,收集濾液并控制溫度為110°C進(jìn)行高溫滅菌,最后冷卻至室溫,即得到復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液。
[0170]實(shí)施例3
[0171]一種生物發(fā)酵晚霜的制備方法,該方法包括以下步驟:
[0172](I)按重量百分比稱取:復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液10% ;低聚麥芽糖基葡糖苷3% ;天然霍霍巴油5.5% ;甘油4% ;鯨蠟硬酯醇2.5% ;角鯊?fù)?% ;維生素E0.25% ;透明質(zhì)酸0.04% ;蘆薈提取液2.0% ;香精0.2% ;水余量;
[0173](2)先將鯨蠟硬酯醇、天然霍霍巴油、角鯊?fù)?、維生素E投入油相鍋加熱至75~80 0C,充分?jǐn)嚢枞芙庵辆唬瑪嚢杷俣?0轉(zhuǎn)/分;
[0174](3)將全部水倒入水相鍋中,然后慢慢倒入甘油、低聚麥芽糖基葡糖苷,攪拌10分鐘分散均勻后,撒入透明質(zhì)酸,攪拌30分鐘分散均勻后,同時(shí)加熱,升溫到75~80°C,攪拌速度為50轉(zhuǎn)/分,原料全部溶解后保溫半小時(shí);
[0175](4)先將油相鍋中的油相抽濾至乳化鍋,開(kāi)啟攪拌,攪拌速度為80轉(zhuǎn)/分,慢速均質(zhì)的同時(shí)再將水相鍋中的水相抽濾至乳化鍋,溫度保持75°C,待料體全部抽入后快速均質(zhì)3分鐘;均質(zhì)攪拌速度為2500轉(zhuǎn)/分;
[0176](5)停止均質(zhì),降溫到50°C以下,依次加入香精、蘆薈提取液、復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液攪拌均勻,全部加入后繼續(xù)攪拌30分鐘,降溫的同時(shí)全程抽真空,攪拌50轉(zhuǎn)/分;
[0177](6)攪拌冷卻至38°C,停止攪拌,檢驗(yàn)、出料,得到生物發(fā)酵晚霜產(chǎn)品。
[0178]本發(fā)明所述的生物發(fā)酵晚霜的主要成分是復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液,其富含肌膚細(xì)胞所必需的18種氨基酸、大豆異黃銅、低聚糖,大豆磷脂、大豆皂苷、VitC、VitE、B族群維生素、鋅、硒、磷、鐵、鈣等礦物質(zhì)和微量元素、胡蘿卜素、硫胺素、檸檬酸等40多種人體必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
[0179]上述復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液,包括以下組分及重量百分比含量:乳酸菌菌液
1.0%、粉紅酵母菌液1.0%、黃孢原毛平革菌菌液1.0%、地衣芽孢桿菌菌液1.0%、短小芽孢桿菌菌液1.0 %、麥芽糖假絲酵母菌液1.0 %、長(zhǎng)枝木霉菌液1.0 %、沙田柚0.6 %、產(chǎn)地大連的蘋(píng)果0.6%、產(chǎn)地云南的香蕉0.6%、蜂皇漿0.3%、產(chǎn)地黑龍江的特種黃豆1.2%、人參
0.9%、靈芝0.9%、薰衣草1.2%、米酒糟25%、余量為純水。
[0180]乳酸菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:[0181](I)準(zhǔn)備乳酸菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:乳酪蛋白胨12%、蛋白胨12%、酵母膏6%、葡萄糖6%、吐溫-801.2%、磷酸氫二鉀2.5%、醋酸鈉6%、檸檬酸二胺2.5%、硫酸鎂0.3%、硫酸錳0.06 %、余量為純水;
[0182](2)液體培養(yǎng)基的制備:按乳酸菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0183](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的乳酸菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0184](4)生產(chǎn)菌液的制備:按4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的已滅菌的液體培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到乳酸菌菌液。
[0185]粉紅酵母菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0186](I)準(zhǔn)備粉紅酵母培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:蛋白胨6%、葡萄糖12%、酵母膏4%、余量為麥芽汁;
[0187](2)液體培養(yǎng)基的制備:按粉紅酵母培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0188](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的粉紅酵母菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0189](4)生產(chǎn)菌液的制備:按4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵`,即得到粉紅酵母菌液。
[0190]黃孢原毛平革菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0191](I)準(zhǔn)備黃孢原毛平革菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:葡萄糖
2.0KH2PO40.30%,MgSO4.7Η200.15%、維生素 Β10.01 %、瓊脂 1.5%、余量為馬鈴薯提取液;
[0192](2)液體培養(yǎng)基的制備:按黃孢原毛平革菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0193](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的黃孢原毛平革菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0194](4)生產(chǎn)菌液的制備:按4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到黃孢原毛平革菌菌液。
[0195]地衣芽孢桿菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0196](I)地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基原料包括以下組分及重量百分比含量:麩皮4.5~
4.7%、豆餅粉2.7~2.85%、瓊脂1.8~1.85%、余量為0.2?七%的NaOH溶液,將麩皮、豆餅粉混合后,加0.2wt% NaOH溶液煮沸l(wèi)h,用HCl中和到pH為7,然后加入瓊脂并熔化;
[0197](2)液體培養(yǎng)基的制備:將步驟⑴得到的樣品在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0198](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的地衣芽孢桿菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;[0199](4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: 1(V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到地衣芽孢桿菌菌液。
[0200]短小芽孢桿菌菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0201](I)準(zhǔn)備短小芽孢桿菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:蛋白胨
0.6%、牛肉浸取物0.35%、NaCl0.6%、瓊脂1.5%、余量為蒸餾水;
[0202](2)液體培養(yǎng)基的制備:按短小芽孢桿菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0203](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的短小芽孢桿菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0204](4)生產(chǎn)菌液的制備:按4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到短小芽孢桿菌菌液。
[0205]麥芽糖假絲酵母菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0206](I)準(zhǔn)備麥芽糖假絲酵母培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:瓊脂
1.6% ;5。麥芽汁 98.4% ;
[0207](2)液體培養(yǎng)基的制備:按麥芽糖假絲酵母培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0208](3)搖瓶菌種的制備:取斜面`保存的麥芽糖假絲酵母菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0209](4)生產(chǎn)菌液的制備:按4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: l(v/v)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到麥芽糖假絲酵母菌液。
[0210]長(zhǎng)枝木霉菌液通過(guò)以下方法制備得到:
[0211](I)準(zhǔn)備長(zhǎng)枝木霉培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:瓊脂1.6% ;5°麥芽汁98.4% ;
[0212](2)液體培養(yǎng)基的制備:按長(zhǎng)枝木霉培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中;
[0213](3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的長(zhǎng)枝木霉菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;
[0214](4)生產(chǎn)菌液的制備:按4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到長(zhǎng)枝木霉菌液。
[0215]復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液在制備時(shí),按照配方準(zhǔn)備原料后,將原料粉碎混拌均勻,置于陶器中靜態(tài)發(fā)酵30天,然后將得到的產(chǎn)物取出過(guò)濾,收集濾液并控制溫度為110°C進(jìn)行高溫滅菌,最后冷卻至室溫,即得到復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液。
[0216]下表為所獲得生物發(fā)酵晚霜的營(yíng)養(yǎng)成分。
[0217]
【權(quán)利要求】
1.一種生物發(fā)酵晚霜,其特征在于,包括以下重量百分含量的組分: 復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液 10%~15% ; 低聚麥芽糖基葡糖苷3^-3.5%; 天然霍霍巴油5.5%~6%; 甘油4%~6%; 鯨蠟硬酯醇2.5%~3.5%; 角鯊?fù)?%~6%; 維生素E0.25%~0.35%; 透明質(zhì)酸0.04%~0.06%; 蘆薈提取液2.0^-2.5%; 香精0.2%~0.3%;水余量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生物發(fā)酵晚霜,其特征在于,所述的復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液通過(guò)以下方法制得:將原料置于陶器中靜態(tài)發(fā)酵21~30天,然后將得到的產(chǎn)物取出過(guò)濾,收集濾液并控制溫 度為100~110°C進(jìn)行高溫滅菌,最后冷卻至室溫,即得到復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種生物發(fā)酵晚霜,其特征在于,所述的原料包括以下重量百分比含量的組分:乳酸菌菌液0.5~1.0 %、粉紅酵母菌液0.5~1.0 %、黃孢原毛平革菌菌液0.5~1.0 %、地衣芽孢桿菌菌液0.5~1.0 %、短小芽孢桿菌菌液0.5~1.0 %、麥芽糖假絲酵母菌液0.5~1.0 %、長(zhǎng)枝木霉菌液0.5~1.0 %、沙田柚0.4~0.6%、蘋(píng)果0.4~0.6%、香蕉0.4~0.6%、蜂皇漿0.2~0.3%、特種黃豆1.0~1.2%、人參0.5~0.9%、靈芝0.5~0.9%、薰衣草1.0~1.2%、米酒糟20~25%、余量為純水。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種生物發(fā)酵晚霜,其特征在于,所述的乳酸菌菌液通過(guò)以下方法制備得到: (1)準(zhǔn)備乳酸菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:乳酪蛋白胨8~12%、蛋白胨8~12%、酵母膏4~6%、葡萄糖4~6%、吐溫-800.8~1.2%、磷酸氫二鉀1.8~2.5%、醋酸鈉4~6%、檸檬酸二胺1.8~2.5%、硫酸鎂0.1~0.3%、硫酸錳0.04~0.06%、余量為純水; (2)液體培養(yǎng)基的制備:按乳酸菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中; (3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的乳酸菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液; (4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的已滅菌的液體培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到乳酸菌菌液。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種生物發(fā)酵晚霜,其特征在于,所述的粉紅酵母菌液通過(guò)以下方法制備得到: (I)準(zhǔn)備粉紅酵母培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:蛋白胨4.1~6%、葡萄糖8~12%、酵母膏2~4%、余量為麥芽汁;(2)液體培養(yǎng)基的制備:按粉紅酵母培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中; (3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的粉紅酵母菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液; (4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到粉紅酵母菌液。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種生物發(fā)酵晚霜,其特征在于,所述的黃孢原毛平革菌菌液通過(guò)以下方法制備得到: (1)準(zhǔn)備黃孢原毛平革菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:葡萄糖1.9~.2.0 %、KH2PO40.25 ~0.30%、MgSO4.7Η200.14 ~0.15 %、維生素 Β10.01 %、瓊月旨 1.4 ~.1.5%、余量為馬鈴薯提取液; (2)液體培養(yǎng)基的制備:按黃孢原毛平革菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中; (3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的黃孢原毛平革菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液; (4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到黃孢原毛平革菌菌液。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種生物發(fā)酵晚霜,其特征在于,所述的地衣芽孢桿菌菌液通過(guò)以下方法制備得到: (1)地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基原料包括以下組分及重量百分比含量:麩皮4.5~4.7%、豆餅粉2.7~2.85%、瓊脂1.8~1.85%、余量為0.2被%的NaOH溶液,將麩皮、豆餅粉混合后,加0.2wt% NaOH溶液煮沸l(wèi)h,用HCl中和到pH為7,然后加入瓊脂并熔化; (2)液體培養(yǎng)基的制備:將步驟⑴得到的樣品在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中; (3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的地衣芽孢桿菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液; (4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1:1 (V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到地衣芽孢桿菌菌液。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種生物發(fā)酵晚霜,其特征在于,所述的短小芽孢桿菌菌液通過(guò)以下方法制備得到: (1)準(zhǔn)備短小芽孢桿菌培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:蛋白胨0.4~.0.6%、牛肉浸取物0.25~0.35%, NaCl0.4~0.6%、瓊脂1.4~1.5%、余量為蒸餾水; (2)液體培養(yǎng)基的制備:按短小芽孢桿菌培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中; (3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的短小芽孢桿菌菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液;(4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: 1(V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到短小芽孢桿菌菌液。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種生物發(fā)酵晚霜,其特征在于,所述的麥芽糖假絲酵母菌液通過(guò)以下方法制備得到: (1)準(zhǔn)備麥芽糖假絲酵母培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:瓊脂1.4~.1.6% ;5° 麥芽汁 98.4 ~98.6% ; (2)液體培養(yǎng)基的制備:按麥芽糖假絲酵母培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中; (3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的麥芽糖假絲酵母菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液; (4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: 1(V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到麥芽糖假絲酵母菌液; 所述的長(zhǎng)枝木霉菌液通過(guò)以下方法制備得到: (1)準(zhǔn)備長(zhǎng)枝木霉培養(yǎng)基原料,包括以下組分及重量百分比含量:瓊脂1.4~1.6% ;.5。麥芽汁98.4~98.6% ; (2)液體培養(yǎng)基的制備:按長(zhǎng)枝木霉培養(yǎng)基配方配制原料,在0.15MPa,121°C,滅菌.30min,得到滅菌的液體培養(yǎng)基,置于發(fā)酵罐中; (3)搖瓶菌種的制備:取斜面保存的長(zhǎng)枝木霉菌種在無(wú)菌環(huán)境中接入已滅菌的液體培養(yǎng)基中,在30°C,振率100~200次/min,進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)48h,得到搖瓶菌液; (4)生產(chǎn)菌液的制備:按3wt%~4wt%接種量將搖瓶菌液接入發(fā)酵罐中,在30°C,通風(fēng)比為1: 1(V/V)裝液量為1/3的條件下進(jìn)行發(fā)酵,48h后再按上述條件補(bǔ)加1/3體積的培養(yǎng)基繼續(xù)發(fā)酵,96h后終止發(fā)酵,即得到長(zhǎng)枝木霉菌液; 所述的蘋(píng)果為選用秦嶺或大連的蘋(píng)果, 所述的香蕉選用云南的香蕉, 所述的特種黃豆選用為陜西或黑龍江的特種黃豆。
10.一種如權(quán)利要求1所述的生物發(fā)酵晚霜的制備方法,其特征在于,該方法包括以下步驟: (1)按重量百分比稱取:復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液10%~15%;低聚麥芽糖基葡糖苷3%~3.5%;天然霍霍巴油5.5%~6%;甘油4%~6%;鯨蠟硬酯醇2.5%~3.5%;角鯊?fù)?%~6% ;維生素E0.25%~0.35% ;透明質(zhì)酸0.04~0.06% ;蘆薈提取液2.0%~.2.5% ;香精0.2%~0.3% ;水余量; (2)先將鯨蠟硬酯醇、天然霍霍巴油、角鯊?fù)?、維生素E投入油相鍋加熱至75~80°C,充分?jǐn)嚢枞芙庵辆唬瑪嚢杷俣?0轉(zhuǎn)/分; (3)將全部水倒入水相鍋中,然后慢慢倒入甘油、低聚麥芽糖基葡糖苷,攪拌10分鐘分散均勻后,撒入透明質(zhì)酸,攪拌30分鐘分散均勻后,同時(shí)加熱,升溫到75~80°C,攪拌速度為50轉(zhuǎn)/分,原料全部溶解后保溫半小時(shí); (4)先將油相鍋中的油相抽濾至乳化鍋,開(kāi)啟攪拌,攪拌速度為80轉(zhuǎn)/分,慢速均質(zhì)的同時(shí)再將水相鍋中的水相抽濾至乳化鍋,溫度保持75°C,待料體全部抽入后快速均質(zhì)3分鐘;均質(zhì)攪拌速度為2500轉(zhuǎn)/分; (5)停止均質(zhì),降溫到50°C以下,依次加入香精、蘆薈提取液、復(fù)合發(fā)酵氨基酸全效營(yíng)養(yǎng)液攪拌均勻,全部加入后繼續(xù)攪拌30分鐘,降溫的同時(shí)全程抽真空,攪拌50轉(zhuǎn)/分; (6)攪拌冷卻至38°C,停止攪拌,`檢驗(yàn)、出料,得到生物發(fā)酵晚霜產(chǎn)品。
【文檔編號(hào)】A61K8/98GK103655438SQ201310199696
【公開(kāi)日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2013年5月24日 優(yōu)先權(quán)日:2013年5月24日
【發(fā)明者】馮坤范 申請(qǐng)人:錢(qián)臻