專利名稱：一種用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其涉及一種用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物。
背景技術(shù)：
糖尿病是嚴(yán)重危害人類健康的重大疑難病癥，在50歲以上的人群中有超過(guò)1/5的人有不同程度的糖尿病以及其誘發(fā)的并發(fā)癥，治療這類疾病的藥物在于能否有效控制血糖濃度，糖尿病根據(jù)對(duì)胰島素的耐受性差異又分為I型和II型，I型糖尿病是胰島素不足造成，而II糖尿病是胰島素非依賴性，因此治療糖尿病的有效途徑也大致分為兩種:對(duì)于I型糖尿病，主要通過(guò)直接或間接增加胰島素的量或穩(wěn)定性來(lái)實(shí)現(xiàn)；對(duì)于II型糖尿病，由于胰島素注射對(duì)II型糖尿病患者效果不顯著，則往往通過(guò)干預(yù)單糖合成的途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)。而現(xiàn)有的藥物只能針對(duì)單一的I型或I型糖尿病進(jìn)行治療，而且對(duì)因其誘發(fā)的適應(yīng)癥的療效也不顯著。因此，現(xiàn)有技術(shù)還有待于改進(jìn)和發(fā)展。

發(fā)明內(nèi)容
鑒于上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，不僅可以治療I型糖尿病，也能治療II型糖尿病及相關(guān)并發(fā)癥，旨在解決現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題。本發(fā)明的技術(shù)方 案如下:
一種用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其中，所述用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物的有效成分是由藥材抽提物、輔酶QlO和葉酸組成；所述藥材抽提物由郁金、大黃、姜黃、蘆薈、虎杖的抽提物組成。所述的用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其中，所述藥材抽提物是由郁金、大黃、姜黃、蘆薈、虎杖的抽提物按等重量混合形成。所述的用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其中，所述藥材抽提物、輔酶QlO和葉酸之間的重量份之比為0.5-5:0.2-2:20-200。所述的用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其中，所述用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物的輔料為淀粉。所述的用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其中，所述用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物制成為膠囊。有益效果:本發(fā)明提供的用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物能大大抑制a -葡萄糖苷酶、己糖激酶、醛糖還原酶三個(gè)靶點(diǎn)酶的活性；而且能有效抑制糖尿病動(dòng)物模型中的血糖、血脂升高，并能治療其誘發(fā)的適應(yīng)癥包括高血脂、視網(wǎng)膜病變。


圖1為本發(fā)明實(shí)施例3中本發(fā)明藥物組合對(duì)葡萄糖苷酶的活性抑制作用的檢測(cè)結(jié)果圖。圖2為本發(fā)明實(shí)施例3中本發(fā)明藥物組合對(duì)己糖激酶的活性抑制作用的檢測(cè)結(jié)果圖。圖3為本發(fā)明實(shí)施例3中本發(fā)明藥物組合對(duì)醛糖還原酶的活性抑制作用的檢測(cè)結(jié)果圖。圖4為本發(fā)明實(shí)施例4中本發(fā)明藥物組合對(duì)I型糖尿病大鼠模型的降血糖作用的檢測(cè)結(jié)果圖。圖5為本發(fā)明實(shí)施例4中本發(fā)明藥物組合對(duì)II型糖尿病大鼠模型的降血脂作用的檢測(cè)結(jié)果圖。圖6為本發(fā)明實(shí)施例5中本發(fā)明藥物組合對(duì)對(duì)I型糖尿病大鼠模型的視網(wǎng)膜保護(hù)作用的檢測(cè)結(jié)果圖。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明提供一種用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及效果更加清楚、明確，以下對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。本發(fā)明提出了一種用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其中的有效成分包括藥材抽提物以及輔酶QlO和葉酸，所述藥材抽提物包括郁金、大黃、姜黃、蘆薈、虎杖的抽提物。所述藥物組合物能有效抑制糖尿病動(dòng)物模型中的血糖、血脂升高，并能治療其誘發(fā)的適應(yīng)癥包括高血脂、視網(wǎng)膜病變。優(yōu)選地，所述藥材抽提物是由郁金、大黃、姜黃、蘆薈、虎杖的抽提物按等重量 混合形成。所述藥材抽提物、輔酶QlO和葉酸之間的重量份之比為
0.5_5:0.2-2:20_200。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，這種藥物組合大大抑制a-葡萄糖苷酶、己糖激酶、醛糖還原酶三個(gè)靶點(diǎn)酶的活性。由于與糖代謝及糖尿病發(fā)生密切相關(guān)主要有三個(gè)靶點(diǎn)酶:a -葡萄糖苷酶、己糖激酶、醛糖還原酶。能抑制這些酶活性的藥物均有望形成治療糖尿病及其并發(fā)癥的有效藥物。因此，本發(fā)明所描述的藥物組合不僅可以治療I型糖尿病，也能治療II型糖尿病及相關(guān)并發(fā)癥。下面用實(shí)例來(lái)對(duì)本發(fā)明所述用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物做進(jìn)一步說(shuō)明，所述實(shí)例不應(yīng)當(dāng)構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例1:糖尿病模型的建立
本發(fā)明實(shí)施例中采用STZ (鏈脲佐菌素)法誘導(dǎo)I型糖尿病大鼠。I型糖尿病大鼠模型的制備:取體重為160g左右的SD大鼠，禁食24小時(shí)，以60mg STZ/kg體重的劑量注射腹腔注射(STZ用0.05 M檸檬酸溶液(pH4.5)配制)；24、48、72小時(shí)后斷尾取血測(cè)血糖，將連續(xù)3天超過(guò)250 mg/dL的大鼠，確定為糖尿病大鼠；第24、48小時(shí)后未成功的大鼠重新注射等量的STZ，血糖低于250 mg/dL的大鼠將被排除，如此制備的大鼠模型為I型糖尿病模型。II型糖尿病大鼠模型的制備:先高脂飼養(yǎng)大鼠4周之后，再一次性100 mg STZ/kg體重的劑量注射腹腔注射；24、48、72小時(shí)后斷尾取血測(cè)血糖，將連續(xù)3天超過(guò)250 mg/dL的大鼠，確定為糖尿病大鼠；第24、48小時(shí)后未成功的大鼠重新注射等量的STZ，血糖低于250mg/dL的大鼠將被排除，如此制備的大鼠模型為II型糖尿病模型。實(shí)驗(yàn)例2:藥物抽提及藥物組合膠囊的制備以及使用
郁金、大黃、姜黃、蘆薈、虎杖抽提物的制備:研磨粉碎適量藥材，以乙醇回流法抽提數(shù)次，過(guò)濾并合并濾液，冷凍干燥成干燥。各藥材抽提物按等重量混合形成藥材抽提混合物，并加葉酸、輔酶Q10，以淀粉為填料做成膠囊，每個(gè)膠囊各組分用量范圍為:以上藥材抽提混合物2.5mg、葉酸Img及輔酶QlO 50mg,以淀粉為填料加工成膠囊。飼養(yǎng)動(dòng)物時(shí),每個(gè)膠囊溶解于500 ml飼養(yǎng)用的水中。實(shí)施例3:組合配方對(duì)a-葡萄糖苷酶、己糖激酶、醛糖還原酶的抑制作用 針對(duì)I型糖尿病大鼠模型，用含有以上藥物組合的水喂養(yǎng)一個(gè)月之后，尾靜脈取血樣，
并分別測(cè)定a -葡萄糖苷酶、己糖激酶、醛糖還原酶的活力。參照Matsui等人方法，以pNP_G為底物測(cè)定a -葡萄糖苷酶的活性(J.Agr1.Food Chem.2001 (49): 1948-1951 )，將 a-葡萄糖苷酶(0.lU/ml)在 37°C 水浴中孵育 10分鐘之后加入底物pNP-G(2 mM, 0.1ml)以啟動(dòng)反應(yīng)，20分鐘后加入ImL 0.5 M Na2CO3終止反應(yīng)。最后于405nm處測(cè)定在酶作用下從pNP_G中釋放出的對(duì)硝基苯的光吸收值,計(jì)算抑制效率。己糖激酶活性的測(cè)定參考文獻(xiàn)所述(Anal Biochem.1978 (9):451_63)，具體地，葡萄糖和ATP在HK的催化下，生成6-磷酸葡萄糖和ADP ;6_磷酸葡萄糖和NADP在G6PDH的催化下，生成6-磷酸葡萄糖酸內(nèi)脂和NADPH。在NADP和G6PDH充足的條件下，利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)的偶聯(lián)反應(yīng)，NADPH的含量變化與6-磷酸葡萄糖含量變化成正比，通過(guò)340 nm下檢測(cè)NADPH含量的變化，即吸光度的增加量可反映出己糖激酶活力的大小，計(jì)算抑制效率。
醛糖還原酶活性活性測(cè)定參考文獻(xiàn)所述(Pharmacol Rev, 1998 (50):21-33.)，反應(yīng)體系為:135 mM PBS, 100 mM硫酸銨，0.04 mM DL甘油醛，150 u M NADPH，5 y I紅細(xì)胞溶血液，總體積200 ill。實(shí)驗(yàn)管加上述所有試劑，空白管以去離子水代替NADPH。加入DL甘油醛后立即37°C水浴反應(yīng)。5 min后，將樣本同時(shí)放入冰浴中，加入600 0.5 M HCl后60°C水浴15 min來(lái)終止反應(yīng)并破壞反應(yīng)剩余的NADPH。冰浴冷卻后加入250 U I 6%高氯酸3 000 r/minX10 min離心沉淀血紅蛋白，吸取上清I ml。加入2 ml 6 M NaOH (內(nèi)含10 mM咪唑)，37°C水浴5 min激發(fā)NADP產(chǎn)生熒光，Ex360 nm/Em460 nm測(cè)定熒光強(qiáng)度。檢測(cè)結(jié)果如圖f 3所示，其中，治療組為經(jīng)過(guò)藥物組合物飼養(yǎng)的I型糖尿病大鼠模型；未治療組為未經(jīng)過(guò)藥物組合物飼養(yǎng)的I型糖尿病大鼠模型；正常組為正常健康大鼠。經(jīng)過(guò)藥物治療后的I型糖尿病大鼠模型，葡萄糖苷酶活性比未治療組降低了 2.7倍，己糖激酶活性比未治療組降低3.3倍，醛酶活性比未治療組降低3.4倍(n=6，p〈0.01)。檢測(cè)結(jié)果表明，經(jīng)藥物組合物飼養(yǎng)之后，I型糖尿病大鼠模型的a-葡萄糖苷酶、己糖激酶、醛糖還原酶的活力接近正常鼠，而未經(jīng)以上藥物喂養(yǎng)的I型糖尿病大鼠比飼養(yǎng)過(guò)的I型糖尿病大鼠高出3-4倍以上，說(shuō)明以上藥物組合對(duì)對(duì)糖代謝及糖尿病發(fā)生的關(guān)鍵酶具有明顯的抑制作用。實(shí)施例4:組合配方對(duì)糖尿病模型的降血糖及降血脂作用 針對(duì)I型糖尿病大鼠模型，用含有以上藥物組合物的水喂養(yǎng)一個(gè)月之后，尾靜脈取血樣，用血糖測(cè)定儀測(cè)定血糖含量。檢測(cè)結(jié)果如圖4所示，其中，治療組為經(jīng)過(guò)藥物組合物飼養(yǎng)的I型糖尿病大鼠模型；未治療組為未經(jīng)過(guò)藥物組合物飼養(yǎng)的I型糖尿病大鼠模型；正常組為正常健康大鼠。I型糖尿病大鼠模型經(jīng)過(guò)藥物治療后，血糖含量比未治療組低3.3倍(n=6, p〈0.01)。結(jié)果表明，喂養(yǎng)藥物的治療組比未飼養(yǎng)藥物的未治療組的血糖含量低70%以上，說(shuō)明以上藥物組合對(duì)糖尿病模型有顯著的降血糖作用。針對(duì)II型糖尿病大鼠模型，用含有以上藥物組合的水喂養(yǎng)一個(gè)月之后，尾靜脈取血樣，用血脂測(cè)定儀測(cè)定血脂含量。檢測(cè)結(jié)果如圖5所示，其中，治療組為經(jīng)過(guò)藥物組合物飼養(yǎng)的I型糖尿病大鼠模型；未治療組為未經(jīng)過(guò)藥物組合物飼養(yǎng)的I型糖尿病大鼠模型；正常組為正常健康大鼠。II型糖尿病大鼠模型經(jīng)過(guò)藥物治療后，血脂含量比未治療組低
3.4倍(n=6，p〈0.01)。結(jié)果表明，喂養(yǎng)藥物的治療組比未飼養(yǎng)藥物的未治療組的血脂含量低90%以上，說(shuō)明以上藥物組合對(duì)糖尿病模型有顯著的降血脂作用。實(shí)施例5:組合配方對(duì)糖尿病模型的視網(wǎng)膜保護(hù)作用
針對(duì)I型糖尿病大鼠模型，用含有以上藥物組合的水喂養(yǎng)一個(gè)月之后，采用視網(wǎng)膜電圖法測(cè)定視網(wǎng)膜對(duì)光刺激的反應(yīng)能力。本實(shí)施例中將測(cè)定藥物喂養(yǎng)后，以視網(wǎng)膜電圖(Eletroretinogram, ERG)測(cè)定動(dòng)物對(duì)光刺激的反應(yīng)能力，實(shí)驗(yàn)采用的ERG記錄系統(tǒng)為Epic-3000 system (LKC Technologies, Inc.)。暗視ERG測(cè)定是在暗箱適應(yīng)過(guò)夜后進(jìn)行，給予不同強(qiáng)度的白色光刺激，強(qiáng)度分別為-30db，-20db，-1Odb, Odb, +10db，+20db，刺激時(shí)間為100毫秒。明視ERG測(cè)定則在+IOdb的背景白光照射下進(jìn)行,給予_10db, Odb,+IOdb，+20db的刺激并記錄其反應(yīng)。對(duì)照組包括年齡相同的正常動(dòng)物視網(wǎng)膜的正常組及未經(jīng)藥物飼養(yǎng)的病理狀態(tài)動(dòng)物的視網(wǎng)膜的未治療組。分別統(tǒng)計(jì)A波與B波的強(qiáng)度，確定藥物對(duì)退行性視網(wǎng)膜視功能的保護(hù)作用。檢測(cè)結(jié)果如圖6所示，治療組經(jīng)藥物治療后A波比未治療組提高2.1倍，B波比未治療組提高1.9倍(n=·9，P〈0.01)。結(jié)果表明，喂養(yǎng)藥物的治療組比未飼養(yǎng)藥物的未治療組對(duì)光刺激的反應(yīng)能力好，說(shuō)明以上藥物組合對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變模型有明顯的保護(hù)作用。應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明的應(yīng)用不限于上述的舉例，對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，可以根據(jù)上述說(shuō)明加以改進(jìn)或變換，所有這些改進(jìn)和變換都應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其特征在于，所述用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物的有效成分是由藥材抽提物、輔酶QlO和葉酸組成；所述藥材抽提物由郁金、大黃、姜黃、蘆薈、虎杖的抽提物組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其特征在于，所述藥材抽提物是由郁金、大黃、姜黃、蘆薈、虎杖的抽提物按等重量混合形成。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其特征在于，所述藥材抽提物、輔酶QlO和葉酸之間的重量份之比為0. 5-5 :0. 2-2 :20-200。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其特征在于，所述用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物的輔料為淀粉。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其特征在于，所述用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物制成為膠囊。
全文摘要
本發(fā)明公開一種用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物，其中，所述用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物的有效成分是由藥材抽提物以及輔酶Q10和葉酸組成；所述藥材抽提物由郁金、大黃、姜黃、蘆薈、虎杖的抽提物組成。本發(fā)明提供的用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥的藥物組合物能大大抑制α-葡萄糖苷酶、己糖激酶、醛糖還原酶三個(gè)靶點(diǎn)酶的活性；而且能有效抑制糖尿病動(dòng)物模型中的血糖、血脂升高，并能治療其誘發(fā)的適應(yīng)癥包括高血脂、視網(wǎng)膜病變。
文檔編號(hào)A61K31/519GK103251887SQ20131018672
公開日2013年8月21日 申請(qǐng)日期2013年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月20日
發(fā)明者應(yīng)明, 劉小青 申請(qǐng)人:深圳市佰維生物科技有限公司