替莫唑胺納米緩釋微球及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及替莫唑胺納米緩釋微球及采用自組裝方式制備替莫唑胺納米緩釋微球的方法，特別涉及一種以樹枝狀大分子聚L-丙交酯-dendron-聚乙二醇-dendron-聚L-丙交酯為材料、以分子自組裝的方式制備替莫唑胺載藥納米緩釋微球的方法。該方法制備得到的替莫唑胺載藥微球的平均粒徑為100nm~1000nm，可根據(jù)臨床的需要，通過替莫唑胺和聚合物投料比的調(diào)節(jié)、內(nèi)相和外相溶劑的選擇、溫度和pH值的控制、洗滌方式等，得到的納米微球最優(yōu)載藥量可達(dá)85%以上，并且具有緩釋、緩釋靶向功能。
【專利說明】替莫唑胺納米緩釋微球及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及化工制藥領(lǐng)域，更進(jìn)一步地是涉及替莫唑胺納米緩釋微球及以分子自組裝方式制備替莫唑胺納米緩釋微球的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]替莫唑胺是近年來出現(xiàn)的用于治療腦膠質(zhì)瘤和惡性黑色素瘤的新型藥物，其是由英國Schering-Plough公司首先研發(fā)并生產(chǎn)，于1999年8月11日通過FDA批準(zhǔn)在美國上市，其化學(xué)名為3，4-二氫-3-甲基-4-氧代咪唑并[5，l-d]-l，2，3，5-四嗪_8_酰胺，微溶于水，pH < 5下穩(wěn)定，pH > 7時易分解。該藥物的優(yōu)點是可口服，可以透過血腦屏障，具有廣譜的抗腫瘤性，與其它藥物沒有疊加毒性，是目前單藥療效最好的腦膠質(zhì)瘤化療藥物。但是在臨床研究中發(fā)現(xiàn)，替莫唑胺的半衰期只有1.3小時左右，在腦內(nèi)難以維持有效的藥物濃度，且口服劑量通常較大，治療時產(chǎn)生一定的副作用，因此臨床應(yīng)用上受到了一定的限制。各種緩釋藥物制劑的開發(fā)，為腦膠質(zhì)瘤局部緩釋化療提供了條件，其中緩釋納米微球(膠囊)就是一種很好的緩釋藥物制劑，替莫唑胺制成緩釋微球后，可以降低給藥頻率，提高病變部位的藥物濃度，極大減少替莫唑胺對病人產(chǎn)生的毒副作用，提高療效。臨床上由于給藥方式的不同，對微膠囊粒徑大小有著顯著不同的要求，腦部植入、經(jīng)肺吸入和靜脈注射是替莫唑胺較為理想的給藥方式。
[0003]國內(nèi)外有許多研究者對替莫唑胺藥物載體進(jìn)行了研究，總體的效果都不理想，雖然有的載體體外釋放時間可達(dá)到30天以上，但這些微球的粒徑都比較大，只能口服，或作為植入體內(nèi)使用 ；而粒徑小于1000nm (在醫(yī)學(xué)上，可歸入納米微球的范圍)可通過血液輸送的，則都載藥量低，釋放速度快。例如，Michael Aiello等使用羥丙基纖維素-聚丙烯酸-硒化鎘混合凝膠制成的替莫唑胺載藥顆粒和使用Ag-Au雙金屬納米粒子同PEG修飾的羥丙基纖維素聚丙烯酸水凝膠制成的替莫唑胺載藥顆粒，其粒徑均小于lOOnm，載藥量分別達(dá)到了55.4%和46.2%，但是其釋放速度很快，在2h內(nèi)釋放80%，這是因為替莫唑胺分子的酰胺基和混合凝膠的羥基、羧酸基之間的絡(luò)合作用，由于是化學(xué)鍵的作用，所以載藥量會有所提高但釋放會很難控制，很難達(dá)到緩釋的要求。而張翮，高申等使用聚乳酸羧基醋酸TM飽和水制備的替莫唑胺載藥顆粒，粒徑124.4 μ m，載藥量僅為7.47%。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明可針對不同的給藥方式，制備出不同粒徑大小、不同載藥量和不同緩釋速度的替莫唑胺納米緩釋微球。制成的替莫唑胺納米緩釋微球可以解決目前替莫唑胺原料藥對病患者療效不佳的問題，以及克服文獻(xiàn)報道中的替莫唑胺緩釋制劑載藥量低、釋放較快且不穩(wěn)定的缺點，期望為腫瘤患者提供一種有實際療效的藥物制劑，使眾多腫瘤患者能得到有效的治療。
[0005]一種替莫唑胺納米緩釋微球，其采用自組裝的方式制備得到，該納米微球最高載藥量可達(dá)85%以上，并且具有緩釋、緩釋靶向功能，在體內(nèi)具有長效緩釋特點，可以應(yīng)用于局部而有效地降低全身的毒副作用。
[0006]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
一種替莫唑胺納米緩釋微球，其有效成分包含替莫唑胺，此外其載藥體為樹枝狀大分子聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯。
[0007]優(yōu)選的是，聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯的平均粒徑為 100-1000nm。
[0008]如上所述的替莫唑胺載藥納米緩釋微球采用透析法制備，其制備方法包含有以下步驟: (1)將替莫唑胺與聚合物(聚L-丙交酯-dendron-聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯)溶于內(nèi)相溶劑中作為油相；
(2)將油相放入外相溶劑中進(jìn)行透析處理；
(3)透析后，待內(nèi)相溶劑揮發(fā)完畢，得到載藥膠束溶液；
(4)將替莫唑胺載藥膠束溶液進(jìn)行分離，得到的沉淀物洗滌后冷凍干燥制成得到替莫唑胺載藥納米緩釋微球干粉。
[0009]如上所述的制備方法，優(yōu)選的是，步驟(1)中替莫唑胺與聚合物(聚L-丙交酯_dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯)的質(zhì)量比例為10-100:100。
[0010]如上所述的制備方法，優(yōu)選的是，步驟(2)的透析處理過程中，其處理條件為溫度10-38°C。更優(yōu)選的是，步驟(2)的透析處理過程中，其處理條件為溫度15-35°C。
[0011]如上所述的制備方法，優(yōu)選的是，步驟(2)的透析處理過程中，其處理條件為pH為3.5-7。更優(yōu)選的是，步驟(2)的透析處理過程中，其處理條件為pH為4-5。
[0012]如上所述的制備方法，優(yōu)選的是，步驟(3)采用減壓干燥促進(jìn)內(nèi)相溶劑的揮發(fā)。更有選的是，在真空恒溫烘箱內(nèi)減壓干燥。
[0013]如上所述的干燥，還可以為其它任一常見的方法干燥。
[0014]作為一優(yōu)選的實施方式，替莫唑胺載藥納米緩釋微球的制備方法包含有以下步驟:
(1)將替莫唑胺與聚合物(聚L-丙交酯-dendron-聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯)按10-100:100溶于內(nèi)相溶劑中，超聲混均后作為油相，其中超聲功率為Ι-lOOOw，超聲時間為 0.1-1Omin ；
(2)將油相放入透析袋后，將透析袋放入外相溶劑中，在一定攪拌速度和溫度的恒溫水浴中透析，所述溫度為10-40°C，攪拌速度為30-1000r/min，所述的外相溶劑，其體積為內(nèi)相溶劑的1-10倍，pH為4-5，透析8-24個小時；
(3)透析后，再減壓干燥至內(nèi)相溶劑揮發(fā)完畢后，透析袋內(nèi)得到載藥膠束溶液；
(4)將替莫唑胺載藥膠束溶液進(jìn)行分離，除去上層清液，將得到的沉淀物洗滌后，冷凍干燥制成得到替莫唑胺載藥納米緩釋微球干粉。
[0015]如上所述的替莫唑胺載藥微球，其平均粒徑為lOO-lOOOnm，載藥量最高可達(dá)85%以上。
[0016]如上所述的聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯,其分子結(jié)構(gòu)式通式為P(pllay-gx-pegz-gx-pllay)表示，其中x為樹狀高分子的合成代數(shù)，Y代表聚乳酸鏈的相對分子量，Z代表PEG的相對分子量，聚乙二醇(PEG)的分子量為1000-30000 ；合成代數(shù)X=2~6 ;聚乳酸鏈的分子量Υ=500-50000。例如，Χ=4,分子量為10000的PEG兩端各接有16個PLLA接枝鏈段，每個鏈段R的分子量Υ=18000，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為:
【權(quán)利要求】
1.一種替莫唑胺納米緩釋微球，有效成分包含替莫唑胺，其特征在于:載藥體為樹枝狀大分子聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯。
2.如權(quán)利要求1所述的替莫唑胺納米緩釋微球，其特征在于:聚L-丙交酯-dendron-聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯的平均粒徑為100-1000nm。
3.制備如權(quán)利要求1或2所述的替莫唑胺載藥納米緩釋微球方法，其采用透析法制備，所述制備方法包含有以下步驟: 將替莫唑胺與聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯溶于內(nèi)相溶劑中作為油相； 將油相放入外相溶劑中進(jìn)行透析處理； 透析后，待內(nèi)相溶劑揮發(fā)完畢，得到載藥膠束溶液； 將替莫唑胺載藥膠束溶液進(jìn)行分離，得到的沉淀物洗滌后干燥制成得到替莫唑胺載藥納米緩釋微球干粉。
4.如權(quán)利要求3所述的替莫唑胺納米緩釋微球的制備方法，其特征在于:步驟(1)中替莫唑胺與聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯的質(zhì)量比例為10-100:100。
5.如權(quán)利要求3所述的替莫唑胺納米緩釋微球的制備方法，其特征在于:步驟(2)的透析處理過程中，其處理條件為溫度10-38°C。
6.如權(quán)利要求3所述的替莫唑胺納米緩釋微球的制備方法，其特征在于:步驟(2)的透析處理過程中，其處理條件為PH3.5-7。
7.如權(quán)利要求3所述的替莫唑胺納米緩釋微球的制備方法，其特征在于:制備得到的替莫唑胺納米緩釋微球的平均粒徑為100-1000nm。
8.如權(quán)利要求3所述的替莫唑胺納米緩釋微球的制備方法，其特征在于:聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯的分子結(jié)構(gòu)式通式為P (PLLAY-Gx-PEGz-Gx-PLLAY)表示，其中，合成代數(shù)X=2~6 ;聚乳酸鏈的分子量y=500-50000 ；聚乙二醇的分子量Ζ=1000-30000。
9.如權(quán)利要求3所述的替莫唑胺納米緩釋微球的制備方法，其特征在于:內(nèi)相溶劑為四氫呋喃、丙酮、甲醇和乙腈中的一種或幾種。
10.如權(quán)利要求3所述的替莫唑胺納米緩釋微球的制備方法，其特征在于:外相溶劑為水、飽和替莫唑胺的水溶液、甲醇、乙醇、丙醇和異丙醇中的一種或幾種。
【文檔編號】A61P35/00GK103961321SQ201310040194
【公開日】2014年8月6日 申請日期:2013年2月1日 優(yōu)先權(quán)日:2013年2月1日
【發(fā)明者】戎宗明, 鐘平, 范霄宇, 龔飛榮, 徐健, 程樹軍 申請人:華東理工大學(xué), 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院