局部缺血的組合治療的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種治療中樞神經系統(tǒng)中的或影響中樞神經系統(tǒng)的局部缺血情況例如中風的組合治療方法。所述治療方法包括施用PSD-95抑制劑和進行再灌注治療（例如，施用tPA）。PSD-95抑制劑的施用與再灌注治療的組合增加了再灌注治療的功效和/或減緩了局部缺血發(fā)作后隨時間延長再灌注治療功效的下降，由此擴展了實施再灌注治療的窗口。
【專利說明】局部缺血的組合治療
[0001]相關申請的交互參考
[0002]本申請是非臨時的，并且要求2011年6月24日提交的美國申請?zhí)?1/501，117和2012年3月28日提交的美國申請?zhí)?1/617,001的權益，這些美國申請在此次以其整體引入作為參考，用于所有目的。
【背景技術】
[0003]缺血性中風是造成死亡和嚴重殘疾的常見原因，通常是由顱內腔血管或腦血管堵塞造成的。有效的治療方法很少。一種治療方法由去除出現(xiàn)問題的血管內的堵塞構成，而該方法是有爭執(zhí)的。其他治療方法包括通過給大腦增壓來改變大腦中灌注壓力?？梢酝ㄟ^使用各種機械裝置，或者使用靜脈注射的或在動脈內輸入的“凝塊破壞劑”來去除血管堵塞。在這些凝塊破壞劑中，其中一種為組織型血纖維蛋白溶酶原因子tPA，它作為血栓溶解劑被施用于某些中風患者體內可以溶解導致所述局部缺血的栓塞，從而恢復大腦血流，其他重組tPA如阿替普酶，瑞替普酶和替奈普酶。其他分解凝塊的溶栓藥物包括鏈激酶，尿激酶和去氨普酶。機械的再灌注裝置(reperfusion devices)包括動脈內導管,氣囊,支架，和各種凝塊恢復裝置，如半影灌注收集系統(tǒng)。在改變大腦中灌注壓力的處理中，有增加大腦中動脈壓的裝置，例如，是可以在外腦動脈(extra-cerebral arteries)如主動脈中膨脹的氣囊，由此可以自其它身體部位分流血流并且可以增加腦動脈灌注，所述裝置例如CoAxiaNeuroFlo?導管裝置。總的來說，這些策略可以被認為是在大腦局部缺血發(fā)作時或發(fā)作后能提高腦灌注(brain perfusion)的醫(yī)學上的制劑和機械上的裝置(以下統(tǒng)稱為“再灌注治療法”)
[0004]盡管在局部缺血發(fā)作后很快施用tPA和其他再灌注療法可以有效減少局部缺血性中風導致的死亡或殘疾，但是少于約3%的中風受試者采用tPA或其他再灌注療法治療。tPA和其他再灌注療法治療的低使用部分因為如果施用給一個有或處于維持腦出血上升風險的受試者會有死亡的風險。中風可以是局部缺血或出血的結果。把受試者帶到醫(yī)院，得出一個初步診斷，進行腦部掃描區(qū)分局部缺血和出血需要的時間把受試者放在可能是有效果的tPA或其他再灌注治療窗口之外。因此，可能受益于tPA或其他再灌注治療的許多局部缺血性中風受試者沒有接受這種治療。
[0005]一種不同形式的中風治療方法和相關條件目前還處于臨床試驗中(參見W02010144721 和 Aarts et a1.，Science298, 846-850 (2002))。這種治療方法使用Tat-NR2B9c (NA-1)，一種抑制PSD-95以擾亂N-甲基_D_天冬氨酸受體(NMDARs)和神經元一氧化氮合酶(nNOS)的結合并且降低由大腦局部缺血誘導的興奮性毒性的藥劑。這種治療減少梗塞大小和功能障礙。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0006]圖1A，B, C,D:非人類靈長類給藥方案描述(NHPs;A)，顯示受損區(qū)域的MRI上產生的擴散量圖。B.—個持續(xù)4. 5小時的中風發(fā)作后第48小時的DW1MRI。C.一個持續(xù)4.5小時的中風發(fā)作后第48小時的T2體積。D.—個持續(xù)4.5小時的中風發(fā)作后第7天的T2體積。
[0007]圖2A，Β:A.動物經受4.5小時大腦中動脈閉塞(MCA0)，在5min內用Tat_NR2B9c或安慰劑治療。在大腦中動脈閉塞(MCA0)后治療組和對照組的DWI高信號增加的時間進程。B.腦在不同時間點的灌注和MRI圖像
[0008]圖3.安慰劑動物或Tat_NR2B9c動物體內半影不匹配的時間演化。
[0009]圖4A，B.Tat-NR2B9c減少胞內ATP損耗以及保護老鼠皮質神經元抵抗由氧糖剝奪(0GD)誘導的細胞毒性。(A)在氧糖剝奪(0GD)后20小時通過碘化丙啶標記方法測定的細胞死亡碎片。(B)通過化學發(fā)光的ATP檢測方法確定皮層神經元的胞內ATP濃度，以相對無毒對照樣品的ATP濃度的百分比來表示。
[0010]圖5:NA-l(Tat-NR2B9c)，在中風后當以一個單一劑量被施用時，可以停止通過核磁共振成像(MRI)評定的腦損傷的發(fā)展的證明。這種功效通過大腦血流改變不起作用。
[0011]圖6:A:在基線上灌注缺損體積。B:DWI和T2成像測定的30天的中風體積的分析。C:在MCA0發(fā)作后24小時安慰劑治療的動物和藥物治療的動物體內經受的中風的有代表性的T2加權圖像。D:來自NA-1 (Tat-NR2B9c)處理的動物和安慰劑處理的動物第30天的有代表性的系列蘇木精-伊紅染色的組織學切片。E:使用第24小時的DWI體積和第30天的T2加權體積計算的中風體積。F:30天觀察期的HPSS
[0012]圖7A-F:A:灌注缺損體積。B:通過DWI和T2MRI在7天內測定的中風體積。C:來自第48小時DW1、第48小時 T2加權MRI掃描和第7天T2加權MRI掃描的對每個動物的初始灌注缺損歸一化的中風體積。D:有代表性的第7天的MRI。E:有代表性的第7天的組織學結構。F:7天觀察期的NHPSS得分。
[0013]圖8A-F:A:灌注缺損體積。B:基于DWI和T2MRI在14天內測定的中風體積。C:來自第48小時DW1、第48小時T2加權MRI掃描和第14天T2加權MRI掃描的對每個動物的初始灌注缺損歸一化的中風體積。有代表性的第14天的MRI。E:有代表性的第14天組織學結構。F: 14天觀察期的NHPSS得分。
[0014]圖9A，B:A:圖表顯示中風后在老鼠同側半球和對側半球之間PSD-95:NMDAR免疫共沉淀比例，使用NA-1 (Tat-NR2B9c)治療。B:例子的免疫共沉淀展現(xiàn)了在不同濃度NA-1或對照物存在下NMDAR被抗PSD-95抗體免疫沉淀的數(shù)量。
[0015]圖10:圖表顯示在中風發(fā)作后不同時間點在老鼠同側半球和對側半球之間PSD-95:NMDAR免疫共沉淀比例，使用NA_1 (Tat_NR2B9c)治療。
[0016]圖11:在經受中風并采用tPA與NA-1 (Tat_NR2B9c)的各種劑量組合和各種給藥次數(shù)處理后24小時內老鼠腦中梗塞體積

【發(fā)明內容】

[0017]本發(fā)明提供了一種由局部缺血導致的中樞神經系統(tǒng)損傷的治療方法，包括給患有局部缺血或有局部缺血風險的受試者使用PSD-95抑制劑，還有給受試者施用再灌注治療，其中所述PSD-95抑制劑和再灌注治療治療由局部缺血導致的中樞神經系統(tǒng)損傷?？蛇x地，PSD-95抑制劑是在再灌注治療之前施用的?？蛇x地，PSD-95-抑制劑是在局部缺血發(fā)作之前給有局部缺血風險的受試者施用的，再灌注治療是在局部缺血發(fā)作之后施用的?？蛇x地，PSD-95抑制劑的施用和再灌注治療是在局部缺血發(fā)作之后進行的。所述局部缺血指大腦局部缺血。所述受試者患有中風。所述局部缺血指通過抑制血液流入或流出中樞神經系統(tǒng)來影響中樞神經系統(tǒng)的心臟缺血、肺缺血、主要肢體缺血。在一些方法中，要檢查患者是腦缺血還是大腦出血。在一些方法中，患者需要評者出血風險。在一些方法中，評估方法包括PET掃描，CAT掃描，核磁共振，患者病史回顧，或一個或更多能顯得缺血跡象的生物標記的使用。在一些方法中，PSD-95抑制劑為肽。在一些方法中，藥劑是NA-l(Tat-NR2B9c)。在一些方法中，所述再灌注是通過使用血栓溶解劑來實現(xiàn)。在一些方法中，所述血栓溶解劑是一種纖溶酶原激活物。在一些方法中，所述血栓溶解劑是一種組織型纖溶酶原激活物。在一些方法中，所述再灌注療法為機械的再灌注。在一些方法中，再灌注治療是在局部缺血發(fā)生后超過3小時后實施。在一些方法中，再灌注治療是在局部缺血發(fā)生后超過4.5小時后實施。在一些方法中，再灌注治療是在局部缺血發(fā)生后4.5小時到24小時之間實施。在一些方法中，再灌注治療是在確定受試者具備再灌注資格后進行的，再灌注資格的確定是基于由CT、MRJ或PET分析而顯示的完整梗塞缺乏、局部缺血半影和出血缺乏。在一些方法中，再灌注治療是在局部缺血發(fā)生后至少12小時后或者至少24小時后實施。在一些方法中，再灌注治療是在局部缺血發(fā)生后275到690分鐘之間實施。在一些方法中，PSD-95給藥和再灌注治療之間的時間間隔為30分鐘到6小時。在一些方法中，血栓溶解劑局部施用于受損血流部位。在上述任一方法中，肽或其他藥劑能與體內肽連接以便通過細胞膜和血腦屏障。一些肽或者其他藥劑是被?；摹ｋ脑贜端更好地被?；?br> [0018]本發(fā)明進一步提供了一種治療有缺血跡象或者癥狀的受試群體的方法，包括給受試者施用PSD-95抑制劑；其中對所述受試者進行再灌注治療副作用的不可接受風險分析，無副作用的不可接受風險 的受試者接受再灌注治療，而有副作用的不可接受風險的受試者不接受再灌注治療。在一些方法中，副作用不可接受的風險分析包括分析是否存在出血或者是否有出血危險。在一些方法中，對于出現(xiàn)中風跡象或癥狀的受試者的分析包括做大腦掃描來識別是缺血性中風還是出血性中風，缺血性中風的受試者可以采用再灌注治療，出血性中風的受試者不能采用再灌注治療。
[0019]本發(fā)明提供了一種藥劑，受試者在接受再灌注治療時，同時使用該藥劑能抑制PSD-95結合N-甲基-D-天門冬氨酸受體2B或其他N-甲基-D-天門冬氨酸受體2亞單元，進而治療缺血導致的中樞神經系統(tǒng)損傷，其中再灌注療法和藥劑都是用來治療缺血導致的中樞神經系統(tǒng)損傷。
[0020]本發(fā)明進一步提供一種藥劑或裝置，該裝置用于受試者再灌注治療，該受試者同時服用一種藥劑，該藥劑能抑制PSD-95結合N-甲基-D-天門冬氨酸受體2B、N-甲基_D_天門冬氨酸受體2A或神經元型一氧化氮合酶，其中再灌注治療和藥劑治療缺血導致的中樞神經系統(tǒng)損傷?？蛇x地，所述裝置是線圈、支架、氣囊(例如，一個主動脈內氣囊、泵)或導管。可選地，所述藥劑是血栓溶解劑、血管擴張劑或升血壓藥物。
[0021]定義
[0022]“嵌合肽”是這樣一種肽，其具有不天然彼此相關聯(lián)的雙組分肽，所述雙組分肽作為融合蛋白或通過化學連接而彼此接合。
[0023]“融合”蛋白質或多肽是指一個復合的多肽，即，它是由來自兩個(或更多)不同的、異源的多肽的序列構成的一個單一的連續(xù)的氨基酸序列，而所述兩個(或更多)不同的、異源的多肽通常不會在一個單一的多肽序列中融合到一起。
[0024]術語“PDZ結構域”指的是一個具有約90個氨基酸的模式蛋白結構域，其特征在于其大腦突觸蛋白PSD-95，果蠅分隔連接蛋白Discs-Large DLG，上皮細胞緊密連接蛋白Z01有顯著的序列一致性，(例如至少60%)。PDZ結構域也被稱為Discs-Large同源性重復(〃DHRs〃)和GLGF(SEQ ID NO:68)重復。PDZ結構域一般表現(xiàn)為維持一個核心共有序列(Doyle, D.A.，196，Cell85:1067-76)。示例性的含PDZ結構域的蛋白和PDZ結構域序列在美國申請N0.10/714，537中被公開，其整體引入本文作為參考。
[0025]術語“PL蛋白 ”或“PDZ配體蛋白”是指與PDZ結構域形成分子復合體的天然存在的蛋白質，或指下述蛋白:其羧基端，當與全長蛋白分開表達時(例如，作為3-25個氨基酸殘基的肽片段，例如3，4，5，8，9，10，12，14ο或16個殘基)，形成所述分子復合物。分子復合物可以運用例如US20060148711中描述的〃Α測定法〃或〃G測定法〃在體外或者在體內觀察。
[0026]術語“Ν-甲基-D-天門冬氨酸受體”或"NMDAR"是指已知與NMDA相互作用的膜關聯(lián)蛋白，該術語包括本申請【背景技術】中描述的各種亞基形式，這些受體可以是人的或非人的(例如，小鼠，大鼠，兔子，猴子)。
[0027]“PL基序”是指PL蛋白竣基端的氣基酸序列(例如，竣基端3，4，5，6，7，8，9，10，12，14，16，20or25個連續(xù)氨基酸殘基)(“C端PL序列”)或已知結合PDZ結構域的內部序列(“內部PL序列”)。
[0028]“PL妝”是指包含PL基序或由PL基序組成的妝,或者以其他方式基于PL基序的肽，所述PL基序與PDZ結構域特異性結合。
[0029]術語“分離的”或“純化的”指目標物類(例如肽)已從樣品中存在的污染物中純化，所述樣品例如從含有目標物類的天然來源獲得的樣品。如果目標物類是分離的活純化的，則其是樣品中存在的主要的大分子(例如多肽)物類(即在摩爾基礎上其比組合物中任何其他個體物類都更加豐富)，并且優(yōu)選地，目標物類構成存在的所有大分子物類的至少約50%(以摩爾為基礎)。通常，分離的、純化的或基本純化的組合物構成組合物中存在的所有大分子物類的多于80%到90%。最優(yōu)選地，目標物類被純化為基本同質(即通過常規(guī)檢測方法不能在組合物中檢測到污染物物類)，其中組合物基本由單一的大分子物類組成。術語分離的或純化的不必須排除其他組分的存在，所述其他組分旨在與分離的物類組合發(fā)揮作用。例如，盡管內化肽與活性肽連接，但是其仍然可以被描述為分離的。
[0030]“擬肽”是指合成的化合物，其具有與天然氨基酸組成的肽的基本相同的結構/或功能特征。擬肽可含有完全合成的、非天然的氨基酸類似物，或可以是部分為天然肽氨基酸、部分為非天然氨基酸類似物的嵌合分子。擬肽也可以摻入任何量的天然氨基酸保守替換，只要這類替換也基本上不改變擬肽的結構/或抑制活性或結合活性即可。多肽模擬組合物可含有非天然結構組件的任何組合，所述非天然結構組件通常來自三種結構組:a)除天然酰胺鍵(肽鍵)連接外的其他殘基連接組山)代替天然存在的氨基酸殘基的非天然殘基；或c)引起二級結構模擬的殘基，即引起或穩(wěn)定二級結構(例如β-轉角、轉角、β_片層、α-螺旋構象等等)的殘基。在包含活性肽和內化肽的嵌合肽的擬肽中，活性部分或內化部分或二者都可以是擬肽。
[0031]術語“特異性結合”是指在兩個分子之間的結合，例如，配體和受體，其特征在于，即使在存在許多其他不同的分子的情況下，一個分子(配體)與另一特異分子(受體)相結合的能力，即，在非均相混合物的分子中，一個分子優(yōu)先結合另一個分子。受體與配體的特異性結合可以通過如下方法證明，即，在過量的未標記的配體的存在下，可檢測到的標記的配體與受體的結合減少了(即，結合競爭實驗)。
[0032]“興奮性中毒”是一個由于興奮性神經遞質谷氨酸受體，比如具有NMDA2B亞單元的N-甲基-D-天冬氨酸受體的過度激活，使神經元細胞受損和死亡的病理過程。
[0033]術語“受試者”包括人類和動物，如哺乳動物，還有實驗動物模型，如在臨床前研究中使用的老鼠或者兔子。
[0034]術語“藥劑”包括有藥物活性的化合物，沒有藥物活性的化合物，天然化合物，合成化合物，小分子，肽，擬肽。PSD-95抑制劑是一個能抑制PSD-95的藥劑，進一步說明如下。
[0035]術語“藥理制劑”指有藥理活性的制劑。藥理制劑包括已經為已知藥物的化合物，已經鑒定了藥理學活性但未在動物模型或臨床試驗中進行進一步治療評價的化合物。嵌合制劑包含與內化肽連接的藥理制劑。藥理學活性表示藥劑在下述篩選體系中顯示活性，所述篩選體系表示活性劑在疾病的預防或治療中有用或者可能有用。篩選系統(tǒng)可以是體外、細胞、動物或人。盡管可能需要進一步測試來確定在疾病治療中的真實預防或治療功效，但藥劑仍然可以被描述為具有藥理學活性。
[0036]Tat (或 TAT 或 tat)肽是指包含 GRKKRRQRRR (SEQ ID NO:60)或由 GRKKRRQRRR(SEQ ID NO:60)組成的肽，該序列中，缺失、取代或插入的殘基不超過5個，其保留促進連接的肽或其他藥劑攝入細胞的能力。優(yōu)選地，任何氨基酸的變化是保守取代。優(yōu)選地，任何的取代、缺失或在內部插入， 作為總體，其留下的肽具有凈陽離子電荷，優(yōu)選地，類似于上述序列。所述的Tat肽的氨基酸可以使用生物素或類似的分子來使之衍生化，以減少炎癥反應。
[0037]藥物制劑共同給藥是指在血漿中存在大量可被檢測到的藥劑時同時及時投放足夠的藥劑和/或這些藥劑在相同疾病發(fā)作時發(fā)揮治療效果或這些藥劑共同或協(xié)同地在相同疾病發(fā)作時起作用。例如，當兩個藥劑及時投放足夠到消炎藥可以抑制由內化肽誘導的抗炎反應時消炎藥與包含tat肽的藥劑共同起作用。
[0038]在統(tǒng)計上顯著是指p-值是〈0.05，優(yōu)選〈0.01，最優(yōu)選〈0.001。
[0039]疾病發(fā)作期指在較長一段時間內間斷出現(xiàn)疾病體征和/或癥狀的時期，其中體征和/或癥狀或不存在或存在程度較輕。
[0040]詳細描述
[0041]1.概要
[0042]本發(fā)明提供了一種用于由局部缺血或其他影響中樞神經系統(tǒng)導致的疾病，如缺血性中風，的組合治療方法。該治療方法包括PSD95抑制劑施用和實施再灌注治療(例如，tPA或另一個血栓溶解劑的施用，或運用機械裝置來增加中樞神經系統(tǒng)中受影響區(qū)域的血流。)在常規(guī)使用tPA或其他再灌注治療時，治療功效會隨局部缺血時間的延長而下降，缺血副作用產生的可能性會增加。所以，就tPA而言，在缺血發(fā)作后3小時到4.5小時后這種溶解血栓的策略是沒有效果的。本發(fā)明部分是基于這樣的觀點:將PSD95抑制劑與再灌注療法聯(lián)合使用會增加再灌注治療的功效，和/或延緩tPA或其他再灌注療法隨局部缺血開始的功效下降，這樣可以擴大tPA或其他再灌注治療的使用范圍。[0043]然而使用tPA和其他再灌注治療僅對于患缺血性中風的中風患者來說是安全的，而使用PSD-95抑制劑對于任何中風或者可能中風的受試者來說都是安全的，不管受試者是缺血性中風還是出血性中風，甚至不管受試者有沒有患中風通過使用PSD-95抑制劑，可以為受試者爭取到更多的時間來做大腦掃描或任何其他的診斷測試，以便確認受試者是否為缺血性中風，然后如果病癥適合就可以為受試者使用tPA或另一個再灌注療治療。從而，更多的患缺血性中風受試者能受益于tPA或其他再灌注治療，同時能受益于PSD-95抑制劑治療。
[0044]11.抑制PSD-95的藥劑[0045]PSD-95 抑制劑能抑制 PSD-95 與一個或更多 NMDARs (如 2A, 2B, 2Cor2D)或 nNOS (如Swiss-Prot P29475)之間的相互作用。抑制作用可能是，例如抑制劑與PSD-95特異性結合導致。這種藥劑對于降低由至少部分因NIVIDAR興奮性中毒引起的中風和其他神經疾病帶來的損傷是有用的。這類藥劑包括含有或基于NMDA受體的PL基序或PSD-95的PDZ結構域的氨基酸序列的肽。這種多肽也能抑制PSD-95和nNOS以及其他谷氨酸受體(例如鉀鹽鎂礬受體或者AMPA受體)，如KV1-4和谷氨酸受體6。所述肽優(yōu)選抑制PSD-95的PDZ結構域 1 和 PDZ 結構域 2 (human amino acid sequence provided by Stathakism, Genomics44 (
1):71-82(1997))與一個或更多N_甲基_D_天冬氨酸受體2亞單位的相互作用，這里NMDA受體2亞單位包括神經元NMDA受體的NR2B亞單位。NMDAR2B的基因庫登錄號是4099612，羧基端的 20 個氨基酸序列是 FNGSSNGHVYEKLSSIESDV(SEQ ID NO: 11),PL 基序是 ESDV(SEQIDN0:12)。所述肽優(yōu)選抑制人的PSD-95和人的NMDA受體。然而，也可以自這些蛋白質的物種變體顯示抑制?？梢允褂玫腘MDA和谷氨酸受體的列表在下文顯示:
[0046]表1:含PL序列的NMDA受體
【權利要求】
1.一種治療局部缺血對中樞神經系統(tǒng)損傷的方法，包括對患有局部缺血或有患局部缺血風險的受試者施用PSD-95抑制劑，并對所述受試者進行再灌注治療，其中所述PSD-95抑制劑和所述再灌注治療治療局部缺血對所述受試者中樞神經系統(tǒng)的損傷。
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述PSD-95抑制劑是在進行所述再灌注治療前施用的。
3.根據權利要求1所述的方法，其中所述PSD-95抑制劑是在局部缺血發(fā)作前對有患局部缺血風險的受試者施用的，并且所述再灌注治療是在局部缺血發(fā)作后進行的。
4.根據權利要求1所述的方法，其中所述PSD-95抑制劑是在局部缺血發(fā)作后施用的，并且所述再灌注治療是在在局部缺血發(fā)作后進行的。
5.根據權利要求1所述的方法，其中所述局部缺血是大腦局部缺血。
6.根據權利要求1所述的方法，其中所述受試者患有中風。
7.根據權利要求1所述的方法，其中所述局部缺血是通過抑制血液流入或流出所述中樞神經系統(tǒng)而影響所述中樞神經系統(tǒng)的心臟局部缺血、肺局部缺血或主要肢體局部缺血。
8.根據權利要求1所述的方法，其中在施用所述PSD-95抑制劑和進行所述再灌注治療之間測試所述受試者大腦局部缺血是否存在和/或大腦出血是否不存在。
9.根據權利要求1所述的方法，其中在施用所述PSD-95抑制劑和進行所述再灌注治療之間評估所述受試者是否存在出血或是否有出血風險。
10.根據權利要求9所述的方法，其中所述評估包括進行PET掃描、CAT掃描、MRI，或回顧所述受試者的病史，或使用一種或多種能提供局部缺血指示的生物標記。
11.根據權利要求1所述的方法，其中所述PSD-95抑制劑為肽。
12.根據權利要求1所述的方法，其中所述PSD-95抑制劑是tat-NR2B9c。
13.根據權利要求1所述的方法，其中所述再灌注是通過施用血栓溶解劑進行的。
14.根據權利要求13所述的方法，其中所述血栓溶解劑是血纖維蛋白溶酶原激活劑。
15.根據權利要求14所述的方法，其中所述血栓溶解劑是tPA。
16.根據權利要求13-15中任一項所述的方法，其中所述施用PSD-95和進行再灌注治療的時間間隔是30分鐘至6小時。
17.根據權利要求13-16中任一項所述的方法，其中所述血栓溶解劑局部施用于受損血流部位。
18.根據權利要求1所述的方法，其中所述再灌注治療是機械的再灌注。
19.根據權利要求1所述的方法，其中所述再灌注治療是在局部缺血發(fā)作后超過3小時后進行的。
20.根據權利要求1所述的方法，其中所述再灌注治療是在局部缺血發(fā)作后超過4.5小時后進行的。
21.根據權利要求1所述的方法，其中所述再灌注治療是在局部缺血發(fā)作后超過4.5小時至不超過24小時之間進行的。
22.根據權利要求1所述的方法，其中所述再灌注治療是在確定所述受試者具備再灌注資格后進行的，所述再灌注資格的確定是基于由CT、MRJ或PET分析而顯示的完整梗塞缺乏、局部缺血半影和出血缺乏。
23.根據權利要求22所述的方法，其中所述再灌注治療是在局部缺血發(fā)作后至少12小時或至少24小時后進行的。
24.根據權利要求1所述的方法，其中所述再灌注治療是在局部缺血發(fā)作后275分鐘至690分鐘之間進行的。
25.根據權利要求11所述的方法，其中所述肽與內化肽連接或所述肽被脂化以促進所述肽跨細胞膜或血腦屏障。
26.根據權利要求25所述的方法，其中所述肽是豆蘧?；?。
27.根據權利要求26所述的方法，其中所述肽具有由KLSSIESDV(SEQID NO:5)或KLSS1ETDV(SEQ ID NO:43)構成的氨基酸序列，或所述肽具有包含KLSSIESDV(SEQ ID NO:5)或 KLSS1ETDV(SEQ ID NO:43)的氨基酸序列。
28.根據權利要求26或27所述的方法，其中所述豆蘧?；l(fā)生在所述肽的N末端。
29.一種治療出現(xiàn)局部缺血跡象和/或癥狀的受試者群體的方法，包括對所述受試者施用PSD-95抑制劑；其中對所述受試者進行再灌注治療副作用的不可接受風險分析，無副作用的不可接受風險的受試者接受再灌注治療，而有副作用的不可接受風險的受試者不接受再灌注治療。
30.根據權利要求29所 述的方法，其中所述副作用的不可接受風險分析包括分析是否存在出血或是否有出血風險。
31.根據權利要求29所述的方法，其中所述受試者出現(xiàn)中風跡象和/或癥狀，所述分析包括進行區(qū)分局部缺血性中風和出血性中風的大腦掃描，患有局部缺血性中風的受試者接受所述再灌注治療，而患有出血性中風的受試者不接受所述再灌注治療。
32.一種用于治療受試者局部缺血對中樞神經系統(tǒng)的損傷的抑制PSD-95與NMDAR2B結合的藥劑，所述受試者同時接受再灌注治療，其中所述再灌注治療和所述藥劑治療所述局部缺血對中樞神經系統(tǒng)的損傷。
33.一種用于受試者再灌注治療的藥劑或裝置，所述受試者同時接受抑制PSD-95與NMDAR2B.2A或nNOS結合的藥劑，其中所述再灌注治療和所述藥劑治療所述局部缺血對中樞神經系統(tǒng)的損傷。
34.根據權利要求33所述的藥劑或裝置，所述藥劑或裝置是線圈、支架、氣囊(例如，主動脈內氣囊、泵)或者導管。
35.根據權利要求33所述的藥劑或裝置，所述藥劑或裝置是血栓溶解劑、血管擴張劑或升血壓藥。
【文檔編號】A61K38/49GK103648518SQ201280031302
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2012年6月23日 優(yōu)先權日:2011年6月24日
【發(fā)明者】邁克爾·蒂米安斯基 申請人:諾諾公司