專利名稱：一種提取瑪咖有效成分的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然生物資源提取與精制純化的技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種綜合利用瑪咖，充分提取瑪咖有效成分的方法。
背景技術(shù)：
瑪咖(Maca)植物學(xué)名為Lepidium. meyenii Walp,屬十字花科、獨行菜屬一年生草本植物，為天然藥食兩用植物。原產(chǎn)于海拔3500-4500m的南美安第斯山區(qū)，在南美已有幾千年的種植和食用歷史?，斂ё鳛槊耖g藥物，用于增強精力、提高生育力、緩解絕經(jīng)期婦女的更年期綜合癥、抑郁癥、治療哮喘癥和促進(jìn)傷口愈合等。但由于科技發(fā)展水平的限制，瑪咖的精深加工水平低，長期以來瑪咖僅僅作為普通食品或做簡單加工，如加工成瑪咖酒、瑪咖面食、瑪咖飲料等。隨著瑪咖的營養(yǎng)和藥用價值被歐美科學(xué)家揭示，聯(lián)合國糧農(nóng)組織 (FAO)給予瑪咖很高的評價并將其大力推廣，2011年5月18日，我國衛(wèi)生部第13號公告正式批準(zhǔn)瑪咖粉作為新資源食品。可見，瑪咖的化學(xué)成分、結(jié)構(gòu)鑒定、活性成分分離及其藥理活性、新產(chǎn)品開發(fā)等已成為當(dāng)前的研究熱點之一。天然植物提取物是藥品、保健品開發(fā)的重要趨勢，因此開展瑪咖中活性成分的高效提取及新產(chǎn)品研究開發(fā)具有重要的發(fā)展前景。但由于傳統(tǒng)瑪咖中活性成分的分離提取和純化技術(shù)中存在著提取效率低，分離步驟繁瑣，有效成分穩(wěn)定性差，不適合大規(guī)模生產(chǎn)等不足，嚴(yán)重影響了瑪咖在生物醫(yī)藥、保健品領(lǐng)域的開發(fā)應(yīng)用。中國專利文獻(xiàn)公開了一種瑪咖的提取方法，該專利的專利名稱為“瑪咖有效成分提取方法”，專利號為“01138330. 5”，該方法的步驟為新鮮瑪咖根經(jīng)真空干燥后，粉碎成粉未備用，將瑪咖根粉未采用CO2+夾帶劑的超臨界CO2萃取技術(shù)萃取，得到提取液，提取液真空蒸發(fā)濃縮液加入水和乳化劑，均質(zhì)乳化后噴霧干燥制粒，該方法采用超臨界二氧化碳萃取，可以保持萃取物中的有效成分，把高沸點、低揮發(fā)性、易熱解的物質(zhì)在遠(yuǎn)低于其沸點溫度下萃取出來，且萃取物中無溶劑殘留，防止了提取過程中對人體有害物質(zhì)的存在和對環(huán)境的污染，保證了 100%的天然性，但由于瑪咖中即有脂性成分，也有水溶性成分，該方法對瑪咖的有效成分提取不完全。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種提取瑪咖有效成分的方法，本發(fā)明采用超臨界二氧化碳萃取技術(shù)提取瑪咖中的功能活性因子，再用熱水提取法提取萃余物殘渣中的瑪咖多糖；采用從粗提物開始，經(jīng)有效部位到活性成分，分離和篩選相結(jié)合的辦法，實現(xiàn)瑪咖原料中有效成分的高效提取和綜合利用。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明一種提取瑪咖有效成分的方法，以瑪咖根莖(瑪咖根莖包括根和莖兩部分)為原料，經(jīng)真空干燥、破壁碎粉、濕法制粒后，采用超臨界二氧化碳萃取并經(jīng)分離得到瑪咖中的脂溶性活性物質(zhì)，再將瑪咖萃取物殘渣用熱水提取法提取瑪咖多糖。
上述的提取瑪咖有效成分的方法，其中，真空干燥時，真空度O. 06-0. 08Mpa，溫度為45-50 C，使瑪咖根莖的水份含量達(dá)到6-8%。上述的提取瑪咖有效成分的方法，其中，破壁粉碎采用液氮低溫研磨進(jìn)行破壁粉碎，破壁粉碎粒度為100 200目，以保證瑪咖根莖中有關(guān)生物活性成分在干燥破壁過程中不被破壞。上述的提取瑪咖有效成分的方法，其中，制粒為酒精濕法制粒，制粒粒度為14-20目。上述的提取瑪咖有效成分的方法，其中，所述超臨界二氧化碳萃取時，在萃取壓力為28 32Mpa、萃取溫度為35 40 C，CO2流速為20_30L/hr的條件下萃取2小時，再通入物料量3-5%食用95%乙醇作為攜帶劑，再萃取I小時；再經(jīng)二級分離，一級分離壓力為7 9Mpa，溫度40 50 C ;二級分離壓力為5 6Mpa，溫度35 45 C，分離得瑪咖脂溶性活性物質(zhì)。 上述的一種提取瑪咖有效成分的方法，其中，提取瑪咖多糖的步驟為瑪咖萃取物殘渣加入熱水進(jìn)行提取，瑪咖萃取物殘渣與熱水的料液比為1:10—1:4(^/1111，熱水水溫為80-100 C，提取時間為l_3h，提取次數(shù)為1-2，離心分離上清液，并濃縮至原體積的1/3-1/5，加入淀粉酶調(diào)節(jié)pH值7，在水浴60 C酶解2_4小時，后升溫至100 C滅酶，離心分離沉淀，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇的含量達(dá)80%，靜置沉淀12-24小時，抽濾，得棕黃色沉淀物，用中性蛋白酶水解結(jié)合sevag法去除蛋白質(zhì)，然后依次用乙醇、丙酮、乙醚洗滌二次，真空干燥得瑪咖多糖提取物。本發(fā)明大大改進(jìn)了以往的提取濃縮工藝，可實現(xiàn)以下有益效果第一，提高了原料利用率，從粗提物開始，經(jīng)有效部位到活性成分，采用分離和篩選相結(jié)合的辦法，實現(xiàn)瑪咖原料中有效成分的高效提取，其中，瑪咖多糖的提取率顯著提聞;第二，脂溶性活性物質(zhì)和瑪咖多糖可單獨或配伍使用開發(fā)各種藥品、保健食品及食品，本發(fā)明提高了瑪咖原料的利用率和有效成分提取率，顯著提高了瑪咖這一天然藥物資源的綜合利用價值；第三，由于瑪咖根莖的厚壁細(xì)胞細(xì)胞壁不但阻礙提取溶劑向細(xì)胞內(nèi)滲透，也影響脂溶性活性物質(zhì)的擴散。因此在提取前必須先進(jìn)行破壁處理，以破壞瑪咖根莖的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而提高脂溶性活性物質(zhì)的提取率；第四，瑪咖粉經(jīng)酒精濕法制粒，保證瑪咖根莖中有關(guān)生物活性成分在干燥破壁過程中不被破壞，增加物料間的間隙度，解決了物料板結(jié)與管路堵塞的問題。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明一種提取瑪咖有效成分的方法的步驟如下A、以瑪咖根莖為原料，將其在真空度O. 06-0. 08Mpa，溫度45_50 C的條件下真空干燥，干燥后，瑪咖根莖的水份為6-8% ；B、破壁粉碎；利用液氮低溫純物理破壁技術(shù)進(jìn)行破壁處理，破壁粒度為100 200目；
C、制粒；瑪咖粉經(jīng)酒精濕法制粒，顆粒粒度14-20目；D、超臨界萃取分離條件先在萃取壓力28 32Mpa、萃取溫度35 40 C，CO2流速20-30L/hr條件下萃取2小時，再通入物料量3_5%食用95%乙醇作為攜帶劑，再萃取I小時；再經(jīng)二級分離，一級分離壓力為7 9Mpa，溫度40 50 C ;二級分離壓力為5 6Mpa，溫度35 45 C，分離得瑪咖脂溶性活性物質(zhì)，并收集瑪咖萃取物殘渣；E、提取瑪咖多糖按瑪咖萃取物殘渣與熱水的料液比l:10—l:40g/ml投料，在熱水水溫80-100 C條件下，提取l_3h，提取1-2次，離心分離上清液，并濃縮至原體積的1/3-1/5，加入淀粉酶調(diào)節(jié)pH值至7，在水浴60 C酶解2_4小時，后升溫至100滅酶，離心分離沉淀，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇的含量達(dá)80%，靜置沉淀12-24小時，抽濾，得棕黃色沉淀物；用中性蛋白酶水解(酶濃度0. 05mg/L,酶解I小時)結(jié)合sevag法去除蛋白質(zhì)，然后依次用試劑級乙醇、丙酮、乙醚各洗滌二次，真空干燥得瑪咖多糖提取物。(中性蛋白酶就是在PH值中性的條件下酶解蛋白質(zhì)，sevag法就是利用蛋白質(zhì)在 三氯乙烷等有機溶劑中變性的特點，將提取液與Sevage試劑5 1混合，振蕩，離心，變性后的蛋白質(zhì)介于提取液與Sevage試劑交界處。此法的優(yōu)點是條件溫和，不會引起多糖的變性)實施例一選擇云南麗江新鮮優(yōu)質(zhì)瑪咖根莖，置于真空干燥室中，在真空度為O. 08Mpa，溫度為45 C條件真空干燥至水份含量6% ;利用液氮低溫純物理破壁技術(shù)進(jìn)行破壁過篩處理，破壁粒度為100目，將干燥瑪咖粉經(jīng)酒精濕法制粒，顆粒粒度14目，稱取瑪咖粒9kg，放入萃取容器中，先在萃取壓力30Mpa、萃取溫度38 C，CO2流速20L/hr條件下萃取2小時，再通入物料量5%食用95%乙醇作為攜帶劑，再萃取I小時。經(jīng)分離釜I分離壓力7Mpa，溫度40 C ;分離釜2分離壓力5Mpa，溫度35 C分離得瑪咖脂溶性活性物質(zhì)，并收集瑪咖萃取物殘渣；，按瑪咖萃取物殘渣與熱水的料液比1:30g/ml投料，在熱水水溫80C條件下，提取3h，離心分離上清液，并濃縮至原體積的1/4，加入淀粉酶調(diào)節(jié)pH值至7，在水浴60 C酶解4小時，后升溫至100 C滅酶，離心分離沉淀，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇的含量達(dá)80%，靜置沉淀12小時，抽濾，得棕黃色沉淀物；再用中性蛋白酶水解(酶濃度0. 05mg/L，酶解I小時)結(jié)合sevag法去除蛋白質(zhì)，然后依次用試劑級乙醇、丙酮、乙醚各洗滌二次，真空干燥得瑪咖多糖提取物。檢測瑪咖超臨界萃取物有效成分含量，其中異硫氰酸芐酯、瑪咖酰胺和瑪咖烯、甾醇的總含量達(dá)45. 5% ;瑪咖多糖的提取率達(dá)75. 8%實施例二 選擇云南麗江新鮮優(yōu)質(zhì)瑪咖根莖，置于真空干燥室中，在真空度為O. 07Mpa，溫度為50 C條件真空干燥至水份含量6% ;利用液氮低溫純物理破壁技術(shù)進(jìn)行破壁過篩處理，破壁粒度為200目，將干燥瑪咖粉經(jīng)酒精濕法制粒，顆粒粒度20目，稱取瑪咖粒9kg，放入萃取容器中，先在萃取壓力32Mpa、萃取溫度40 C，CO2流速25L/hr條件下萃取2小時，再通入物料量7%食用95%乙醇作為攜帶劑，再萃取I小時。經(jīng)分離釜I分離壓力9Mpa，溫度50 C;分離釜2分離壓力6Mpa，溫度45 C分離得瑪咖脂溶性活性物質(zhì)，并收集瑪咖萃取物殘渣；
，按瑪咖萃取物殘渣與熱水的料液比1:40g/ml投料，在熱水水溫100C條件下，提取3h，離心分離上清液，并濃縮至原體積的1/3，加入淀粉酶調(diào)節(jié)pH值至7，在水浴60 C酶解4小時，后升溫至100 C滅酶，離心分離沉淀，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇的含量達(dá)80%，靜置沉淀16小時，抽濾，得棕黃色沉淀物；再用中性蛋白酶水解(酶濃度
O.05mg/L,酶解I小時)結(jié)合sevag法去除蛋白質(zhì),然后依次用試劑級乙醇、丙酮、乙醚各洗滌二次，真空干燥得瑪咖多糖提取物。檢測瑪咖超臨界萃取物有效成分含量，其中異硫氰酸芐酯、瑪咖酰胺和瑪咖烯、甾醇的總含量達(dá)48. 5% ;瑪咖多糖的提取率達(dá)78. 2%。實施例二
選擇云南麗江新鮮優(yōu)質(zhì)瑪咖根莖，置于真空干燥室中，在真空度為O. 06Mpa，溫度為50 C條件真空干燥至水份含量8% ;利用液氮低溫純物理破壁技術(shù)進(jìn)行破壁過篩處理，破壁粒度為150目，將干燥瑪咖粉經(jīng)酒精濕法制粒，顆粒粒度20目，稱取瑪咖粒9kg，放入萃取容器中，先在萃取壓力32Mpa、萃取溫度40 C，CO2流速25L/hr條件下萃取2小時，再通入物料量7% (重量比)食用95% (體積百分比濃度)乙醇作為攜帶劑，再萃取I小時。經(jīng)分尚圣分尚，一級分尚壓力9Mpa，溫度50 C ；_■級分尚壓力6Mpa，溫度45 C分尚得瑪咖脂溶性活性物質(zhì)，并收集瑪咖萃取物殘渣；按瑪咖萃取物殘渣與熱水的料液比l:40g/ml投料，在熱水水溫100 C條件下，提取3h，離心分離上清液，并濃縮至原體積的1/3，加入淀粉酶調(diào)節(jié)PH值至7，在水浴60 C酶解4小時，后升溫至100 C滅酶，離心分離沉淀，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇的含量達(dá)80%，靜置沉淀16小時，抽濾，得棕黃色沉淀物；再用中性蛋白酶水解(酶濃度0. 05mg/L,酶解I小時)結(jié)合sevag法去除蛋白質(zhì),然后依次用試劑級乙醇、丙酮、乙醚各洗滌二次，真空干燥得瑪咖多糖提取物。檢測瑪咖超臨界萃取物有效成分含量，其中，異硫氰酸芐酯、瑪咖酰胺和瑪咖烯、甾醇的總含量達(dá)48. 5% ;瑪咖多糖的提取率達(dá)78. 2%。
權(quán)利要求
1.一種提取瑪咖有效成分的方法，其特征在于，以瑪咖根莖為原料，經(jīng)真空干燥、破壁碎粉、濕法制粒后，采用超臨界二氧化碳萃取并經(jīng)分離得到瑪咖中的脂溶性活性物質(zhì)，再將瑪咖萃取物殘渣用熱水提取法提取瑪咖多糖。
2.如權(quán)利要求I所述的提取瑪咖有效成分的方法，其特征在于，真空干燥時，真空度O.06-0. 08Mpa,溫度為45-50 C，使瑪咖根莖的水份含量達(dá)到6_8%。
3.如權(quán)利要求I的述的提取瑪咖有效成分的方法，其特征在于，破壁粉碎采用液氮低溫研磨進(jìn)行破壁粉碎，破壁粉碎粒度為100 200目，以保證瑪咖根莖中有關(guān)生物活性成分在干燥破壁過程中不被破壞。
4.如權(quán)利要求I所述的提取瑪咖有效成分的方法，其特征在于，制粒為酒精濕法制粒，制粒粒度為14-20目。
5.如權(quán)利要求I所述的提取瑪咖有效成分的方法，其特征在于，所述超臨界二氧化碳萃取時，在萃取壓力為28 32Mpa、萃取溫度為35 40 C，CO2流速為20_30L/hr的條件下萃取2小時，再通入物料量3-5%食用95%乙醇作為攜帶劑，再萃取I小時；再經(jīng)二級分離，一級分離壓力為7 9Mpa，溫度40 50 C ;二級分離壓力為5 6Mpa，溫度35 45 C，分離得瑪咖脂溶性活性物質(zhì)。
6.如權(quán)利要求I所述的提取瑪咖有效成分的方法，其特征在于，提取瑪咖多糖的步驟為瑪咖萃取物殘渣加入熱水進(jìn)行提取，瑪咖萃取物殘渣與熱水的料液比為l:10—l:40g/ml，熱水水溫為80-100 C，提取時間為l_3h，提取次數(shù)為1_2，離心分離上清液，并濃縮至原體積的1/3-1/5，加入淀粉酶調(diào)節(jié)pH值7，在水浴60 C酶解2_4小時，后升溫至100 C滅酶，離心分離沉淀，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇的含量達(dá)80%，靜置沉淀12-24小時，抽濾，得棕黃色沉淀物，用中性蛋白酶水解結(jié)合sevag法去除蛋白質(zhì)，然后依次用乙醇、丙酮、乙醚洗滌二次，真空干燥得瑪咖多糖提取物。
全文摘要
本發(fā)明一種提取瑪咖有效成分的方法，以瑪咖根莖為原料，經(jīng)真空干燥、破壁碎粉、濕法制粒后，采用超臨界二氧化碳萃取并經(jīng)分離得到瑪咖中的脂溶性活性物質(zhì)，再將瑪咖萃取物殘渣用熱水提取法提取瑪咖多糖，本發(fā)明采用超臨界二氧化碳萃取技術(shù)提取瑪咖中的功能活性因子，再用熱水提取法提取萃余物殘渣中的瑪咖多糖；采用從粗提物開始，經(jīng)有效部位到活性成分，分離和篩選相結(jié)合的辦法，實現(xiàn)瑪咖原料中有效成分的高效提取和綜合利用。
文檔編號A61P17/02GK102895281SQ201210436048
公開日2013年1月30日 申請日期2012年11月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月5日
發(fā)明者毛日文, 朱惠芬, 王健, 楊琴, 張 林 申請人:江蘇江大源生態(tài)生物科技有限公司