用于腫瘤治療的組合產(chǎn)品、其用途及相關(guān)方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及用于治療和/或預(yù)防腫瘤，尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的組合產(chǎn)品、其用途及相關(guān)方法。
【專利說明】用于腫瘤治療的組合產(chǎn)品、其用途及相關(guān)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及用于治療和/或預(yù)防腫瘤，尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的組合產(chǎn)品、其用途及相關(guān)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)是癌癥發(fā)病率和死亡率居高不下的主要誘因之一。雖然手術(shù)、化療和/或放療通常能夠控制原發(fā)性腫瘤的生長，但是，轉(zhuǎn)移性的和復(fù)發(fā)性的腫瘤對于這些治療經(jīng)常是有抗性的。
[0003]抗體治療
[0004]被批準(zhǔn)用于癌癥治療的第一種抗體是于1997年被批準(zhǔn)的利妥昔單抗(Rituximab，抗⑶20)。現(xiàn)在有超過10種抗體被美國FDA批準(zhǔn)用于癌癥治療。目前認(rèn)為，抗體通過致癌信號阻斷和/或抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)來抑制腫瘤生長[I]。很多這些抗體靶向腫瘤細(xì)胞表面上的致癌受體，例如肺癌、頭頸癌和結(jié)腸直腸癌中的EGFR，或乳腺癌中的HER2。通常，腫瘤生長的抑制是通過誘導(dǎo)致癌信號阻斷(通過與天然配體競爭)、破壞致癌受體信號途徑或誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞調(diào)亡而實現(xiàn)的?？贵w的另一個重要作用是通過Fc/FcR相互作用而介導(dǎo)的ADCC，其可以誘導(dǎo)FcR+細(xì)胞例如NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞殺死腫瘤細(xì)胞。在癌癥患者中，F(xiàn)cR多態(tài)性直接影響對于抗體的治療應(yīng)答[2-4]。在缺失FcR的小鼠中，癌癥治療性抗體失去它們對于腫瘤生長的效應(yīng)[I]。最近有報道指出，抗體誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡的能力很大程度上依賴于宿主細(xì)胞表達(dá)的FcR[5]。
[0005]關(guān)于抗體作用原理的很多結(jié)論都是來自體外細(xì)胞培養(yǎng)研究和異種移植物腫瘤模型，二者都忽略了適應(yīng)性免疫(adaptive immunity)。因此直到最近為止,關(guān)于抗體是否能夠誘導(dǎo)針對腫瘤的適應(yīng)性免疫以及這是否對于治療效應(yīng)是必不可少的，仍然未明。證明抗體治療能夠誘導(dǎo)細(xì)胞免疫和體液免疫的研究日益增多。例如，曲妥珠單抗(Trastuzumab，抗Her 2)治療能夠在患者中誘導(dǎo)抗腫瘤CTL [6]。類似地，證明了小鼠抗-EGFR抗體能夠以CD4和CD8T細(xì)胞依賴性方式控制腫瘤轉(zhuǎn)移。然而，抗體治療通過何種機(jī)制產(chǎn)生活性的適應(yīng)性免疫在很大程度上仍然是未知的。
[0006]單獨通過抗體完全控制或消除腫瘤轉(zhuǎn)移是極少的。多數(shù)抗體僅部分延遲疾病進(jìn)程。因此，改善抗體治療的效率是該領(lǐng)域中的重大問題。很多公司已經(jīng)開發(fā)了增強抗體的致瘤阻斷和ADCC能力的不同策略。本發(fā)明人認(rèn)為，通過免疫調(diào)節(jié)子的組合來增強抗體治療激發(fā)的適應(yīng)性免疫是一個重要的方面。
[0007]B7-H1/PD1通路對腫瘤免疫抗性起作用
[0008]B7-H1是共抑制分子并且是B7家族的成員，它在腫瘤細(xì)胞、樹突細(xì)胞和巨噬細(xì)胞上被誘導(dǎo)性地表達(dá)[11]。與腫瘤相關(guān)的B7-H1參與誘導(dǎo)腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的凋亡和CTL細(xì)胞毒性能力的破壞[12]。與此同時 ，樹突細(xì)胞上表達(dá)的B7-H1被認(rèn)為抑制T細(xì)胞的增殖及抑制T細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子[13]。
[0009]ro-1是可誘導(dǎo)地表達(dá)于活化的τ細(xì)胞上的抑制因子受體，它促進(jìn)τ細(xì)胞的失能、凋亡和衰竭(exhaustion) [14]。Η)_1信號傳導(dǎo)被認(rèn)為是慢性感染(例如小鼠中的LCMV和人中的HIV和HCV)中抗原特異性T細(xì)胞衰竭的調(diào)節(jié)因子[15-18]。衰竭的T細(xì)胞的標(biāo)志包括增殖功能和效應(yīng)子功能的破壞[19]。數(shù)篇文獻(xiàn)已經(jīng)顯示了 B7-H1/PD1通路對于癌癥中的T細(xì)胞衰竭起作用[20-22]。已顯示阻斷B7-H1/PD1信號傳導(dǎo)可以恢復(fù)功能性T細(xì)胞應(yīng)答并延緩腫瘤的生長[20，22，23]。因此，這些證據(jù)提示抑制B7-H1/PD-1信號傳導(dǎo)有可能對于設(shè)計與輻射療法的聯(lián)合用藥是有重要價值的。
[0010]0X40L/0X40通路促講杭腫瘤免瘡應(yīng)答
[0011]0X40是共刺激分子，是Treg細(xì)胞上組成型表達(dá)的和活化的T細(xì)胞上可誘導(dǎo)地表達(dá)的TNFR家族的成員[24]。0X40調(diào)節(jié)T細(xì)胞活化并與其它免疫刺激分子協(xié)同以治療腫瘤 [25]。越來越多的證據(jù)表明:0Χ40嚙合會消除腫瘤排斥中的Treg細(xì)胞的作用[26]。靶向0X40的激動劑抗體與化療的組合治療提供了強有力的抗腫瘤免疫，其伴隨Treg細(xì)胞調(diào)亡和耗竭[27]?；谶@些證據(jù)，本發(fā)明人推測0X40嚙合可能會增強輻射所引發(fā)的免疫應(yīng)答并抑制腫瘤。
[0012]CTLA4
[0013]CTLA-4 (細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4)，又名⑶152，是一種白細(xì)胞分化抗原，是T細(xì)胞上的一種跨膜受體，與⑶28共同享有Β7分子配體，而CTLA-4與Β7分子結(jié)合后誘導(dǎo)T細(xì)胞無反應(yīng)性，參與免疫反應(yīng)的負(fù)調(diào)節(jié)?；蛑亟M的CTLA-4Ig可在體內(nèi)外有效、特異地抑制細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)，對移植排斥反應(yīng)及各種自身免疫性疾病有顯著的治療作用，毒副作用極低，是目前被認(rèn)為較有希望的新的免疫抑制藥物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0014]本發(fā)明提供了用于治療和/或預(yù)防腫瘤，尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的新的組合產(chǎn)品，其包含:
[0015](a)腫瘤抗原特異性抗體；和
[0016](b)針對共抑制/共刺激分子的抗體。
[0017]在一個方面，所述腫瘤抗原特異性抗體可以是人源化單克隆抗體、嵌合抗體、heterominibody、或單鏈抗體。在一個實施方案中,腫瘤抗原是腫瘤表面抗原。在一個實施方案中，所述抗體能特異識別和結(jié)合腫瘤表面抗原。
[0018]本發(fā)明的組合產(chǎn)品中的腫瘤抗原特異性抗體可以是抗體片段。能夠特異結(jié)合抗原的抗體片段是本領(lǐng)域知曉的。優(yōu)選地，所述抗體是足以識別腫瘤抗原的抗體片段，例如ScFv0
[0019]本發(fā)明的組合產(chǎn)品中的腫瘤抗原特異性抗體包括但不限于針對以下腫瘤特異性抗原的抗體:HER2、CD20、EGFR。
[0020]在一個方面，本發(fā)明的組合產(chǎn)品中的針對共抑制/共刺激分子的抗體是針對共抑制分子B7-H1/HH的阻斷抗體。
[0021]在另一個方面，本發(fā)明的組合產(chǎn)品中的針對共抑制/共刺激分子的抗體是針對共刺激分子0X40的激活抗體。
[0022]在另一個方面，本發(fā)明的組合產(chǎn)品中的針對共抑制/共刺激分子的抗體是針對共刺激分子CTLA4的抗體。在特別的實施方式中，所述抗體是單克隆抗體4F10。[0023]在本發(fā)明的實施方式中，所述腫瘤可以是但不限于:乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌和黑素瘤和/或其細(xì)胞，例如乳腺癌細(xì)胞(如TUBO細(xì)胞)或Myc-Cap腫瘤細(xì)胞系。
[0024]在一個【具體實施方式】中，本發(fā)明的組合產(chǎn)品中所述腫瘤抗原特異性抗體和所述針對共抑制/共刺激分子的抗體向受試者分開施用，例如可以同時或相繼地施用給受試者。在另一個實施方式中，本發(fā)明的組合產(chǎn)品中所述腫瘤抗原特異性抗體和所述針對共抑制/共刺激分子的抗體向受試者分開施用通過形成融合蛋白、化學(xué)綴合、和形成免疫脂質(zhì)體中的一種或者多種方法相連。
[0025]在一個方面，本發(fā)明提供了用于治療和/或預(yù)防腫瘤，尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的試劑盒，其包含:
[0026]( I)腫瘤抗原特異性抗體；
[0027](2)針對共抑制/共刺激分子的抗體；和
[0028]用于施用組分(I)和(2)的說明書，其中所述組分(I)和(2)如上文所定義。
[0029]在另一個方面，本發(fā)明提供了腫瘤抗原特異性抗體和針對共抑制/共刺激分子的抗體在制備用于治療和/或預(yù)防腫瘤，尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的藥物中的用途，其中所述腫瘤抗原特異性抗體和針對共抑制/共刺激分子的抗體如上文所定義。
[0030]在其它的實施方式中，所述藥物可以是適于直接施用在腫瘤位點的形式或者是適于全身性施用的形式。 【專利附圖】

【附圖說明】
[0031]圖1:通過全身性處理,多種抗體對于控制TUBO幾乎無效應(yīng)
[0032]在野生型Balb/c小鼠(n=5/組)的脅腹中皮下注射5xlOsTUBO細(xì)胞。在第11天通過腹膜內(nèi)方式以200 μ g抗-neu抗體7.16.4處理，在第12、15、18和21天以PBS (Ctr)或200 yg抗體(如圖所示)通過腹膜內(nèi)方式處理。每周2次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。
[0033]圖2:腫瘤內(nèi)遞送抗體靶向腫瘤組織相對于全身性注射具有更強的效力。腫瘤內(nèi)注射抗-CTLA-4顯示出對于腫瘤排斥的有效作用。
[0034]在野生型Balb/c小鼠(n=5/組)的脅腹中皮下注射5xl05TUB0細(xì)胞。在第9、11、13、15、18和21天以PBS (Ctr)或100 μ g抗體(如圖中所示)通過腫瘤內(nèi)方式處理小鼠。每周2次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。在抗-CTLA4組中，所有的腫瘤均被排斥。
[0035]圖3:組合治療對于控制TUBO比單一治療更加有效。
[0036]在野生型Balb/c小鼠(n=5/組)的脅腹中皮下注射5xl05TUB0細(xì)胞。在第11、14和17天通過腫瘤內(nèi)方式以PBS (Ctr)、50 μ g單一抗體(如圖中所示)或25 μ g抗-CTLA-4抗體 4F10+25 μ g 抗-Her2/neu 抗體 7.16.4( a -CTLA-4+7.16.4)處理小鼠。每周 2 次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。
[0037]圖4:多種類型的抗體與抗-neu抗體協(xié)同作用以使腫瘤消退。
[0038]在野生型Balb/c小鼠(n=5/組)的脅腹中皮下注射5xl05TUB0細(xì)胞。在第12和 17 天通過腫瘤內(nèi)方式以 PBS (Ctr)、100 μ g 抗 _Her2/neu 抗體 7.16.4 (7.16.4)、或 50ug抗-Her2/neu抗體7.16.4和50ug其它抗體(如圖中所示)處理小鼠。每周2次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。[0039]圖5:組合治療對于淋巴瘤也具有優(yōu)于單一治療的效應(yīng)
[0040]向BALB/c小鼠背部皮下移植IxlO6的A20淋巴瘤細(xì)胞。在第11、13和16天通過腫瘤內(nèi)方式給予PBS和抗體(如圖中所示)。每周2次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。
[0041]圖6:組合治療的抗腫瘤效應(yīng)需要⑶8+細(xì)胞。向BALB/c小鼠施以背部皮下移植IxlO6的A20淋巴瘤細(xì)胞。在第16和22天通過腫瘤內(nèi)方式以抗體處理小鼠(如圖所示)。同時通過腹膜內(nèi)方式施用耗竭抗體抗-CD4和抗-CD8 (200ug)。每周2次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。
【具體實施方式】
[0042]在本發(fā)明的情境中，“腫瘤”、“癌”或者“過度增殖性疾病”是指所有惡性或良性的瘤性細(xì)胞生長和增殖，包括所有轉(zhuǎn)化的細(xì)胞和組織和所有癌性細(xì)胞和組織。
[0043]癌癥的實例包括，但不限于，癌、淋巴瘤、胚細(xì)胞瘤、肉瘤和白血病或者淋巴惡性腫瘤。此類癌癥的更具體的實例包括鱗狀細(xì)胞癌(例如，上皮鱗狀細(xì)胞癌)、肺癌，包括小細(xì)胞肺癌、非小細(xì)胞肺癌、肺的腺癌和肺的鱗狀細(xì)胞癌、腹膜癌、肝細(xì)胞癌、胃癌，包括胃腸癌、胰腺癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、子宮頸癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝細(xì)胞瘤、乳腺癌、結(jié)腸癌、直腸癌、結(jié)腸直腸癌、子宮內(nèi)膜癌或者子宮癌、唾液腺癌、腎癌、前列腺癌、外陰癌、甲狀腺癌、肝癌、肛門癌、陰莖癌，以及頭頸癌。癌癥的其他實例在下面的“過度增殖性疾病”中列出。特別地，所述腫瘤選自:乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌和黑素瘤和/或其細(xì)胞，例如乳腺癌細(xì)胞(如TUBO細(xì)胞)或Myc-Cap腫瘤細(xì)胞系。
[0044]特別地,對 于抗體而言,施用的劑量可以是0.1 μ g/kg到100mg/kg患者體重。例如0.lmg/kg到20mg/kg患者體重，lmg/kg到10mg/kg患者體重。通常，由于對外來多肽的免疫反應(yīng)，人抗體在人體中比來自其他物種的抗體有更長的半壽期。從而，較低劑量的人抗體和較低頻率的施用通常是可能的。此外，通過修飾，如脂化，增強抗體的攝入和組織穿透(例如，進(jìn)入腦)可以減少抗體的劑量和施用頻率。
[0045]根據(jù)本發(fā)明的組合產(chǎn)品可以包含藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體、緩沖質(zhì)、穩(wěn)定劑或本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的其他材料。此類材料應(yīng)當(dāng)是非毒性的并且不應(yīng)干擾活性成分的功效。此類材料可以包括，例如任何一種和所有溶劑、分散介質(zhì)、包衣、抗細(xì)菌劑和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲劑以及生理學(xué)相容的物質(zhì)等。藥學(xué)上可接受的載體可以是例如水、鹽水、磷酸鹽緩沖鹽水、葡萄糖、甘油、乙醇等，以及其組合。在許多情況下，所述藥物組合物中可以包括等滲劑，例如糖，多元醇如甘露醇、山梨糖醇，或氯化鈉將是優(yōu)選的。藥學(xué)上可接受的物質(zhì)的還可以是濕潤劑或少量輔助物質(zhì)例如濕潤劑或乳化劑、防腐劑或緩沖質(zhì)，其增強抗體的保存期或效用。載體或其他材料的精確性質(zhì)將取決于施用途徑，所述施用途徑可以是口服、局部、通過吸入或通過注射，例如靜脈內(nèi)。在一個實施方案中，所述藥物組合物通過靜脈內(nèi)輸注或注射進(jìn)行施用。在另一優(yōu)選實施方案中，所述藥物組合物通過肌內(nèi)或皮下注射進(jìn)行施用。
[0046]用于口服施用的藥物組合物可以是片劑、膠囊、粉劑或液體形式，例如含有惰性稀釋劑或可同化的可食用載體。片劑可以包含固體載體例如明膠或佐劑。液體藥物組合物一般包含液體載體例如水、石油、動物或植物油、礦物油或合成油。可以包括生理鹽水溶液、葡萄糖或其他糖類溶液或者二醇例如乙二醇、丙二醇或聚乙二醇。特異性結(jié)合成員(需要時，以及其他成分)還可包封在硬或軟殼明膠膠囊內(nèi)，壓縮成片劑，或直接摻入受試者飲食中。對于口服治療施用，活性成分可以與賦形劑相摻合，并以可吸收的片劑、頰含片劑、錠劑、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿劑、糯米紙囊劑等的形式進(jìn)行使用。為了通過除腸胃外施用以外的其他方式施用本發(fā)明的化合物，可能必需用防止其失活的材料包被所述化合物或?qū)⑺龌衔锱c所述材料共施用。
[0047]對于靜脈內(nèi)注射，或在痛苦部位(例如腫瘤部位)注射，活性成分將是腸胃外可接受的水溶液的形式，其是無熱原的并且具有合適的PK、等滲性和穩(wěn)定性。本領(lǐng)域相關(guān)技術(shù)人員將能夠容易地例如使用等滲媒介物例如氯化鈉注射液、林格注射液、乳酸鹽林格注射液來制備合適的溶液。需要時，可以包括防腐劑、穩(wěn)定劑、緩沖質(zhì)、抗氧化劑和/或其他添加劑。
[0048]本發(fā)明的試劑或組合物可以單獨地或與其他治療相組合地同時或順次施用，這取決于被治療的病狀。
[0049]下面的實施例僅用于進(jìn)一步闡釋本發(fā)明的內(nèi)容，而不意欲在任何方面限制本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員將領(lǐng)會，可對下述【具體實施方式】進(jìn)行修飾而仍不偏離所附的權(quán)利要求所要求保護(hù)的本發(fā)明的范圍、精神和主旨。
[0050]在下面的所有實施例中，如無特別聲明，均采用本領(lǐng)域技術(shù)人員慣常所用的方法、儀器、試劑和實驗方案等。
[0051]在以下實施例中，抗-Her2/neu抗體 7.16.4 見 Zhang, H.，Wang, Q.，Montone, K.T., Peavey, J.E., Drebin, J.A., Greene, Μ.1., andMurali, R.(1999).Shared antigenicepitopes and pathobiological functions of ant1-pi85(her2/neu)monoclonalantibodies.Exp.Mol.Pathol.67, 15 - 25.[0052]抗-mCD20抗體由 Jeffrey Browning, Biogen 提供。
[0053]下列抗體均購自BioXcell, West Lebanon, NH03784, USA
[0054]抗CTLA4 抗體:4F10
[0055]0X40 激活抗體:0X86
[0056]B7-H1/PD1 阻斷抗體:10F.9G2
[0057]抗CD40 抗體:FGK45
[0058]抗TGFP 抗體:1D11.16.8
[0059]IL-1OR 抗體:1B1.3a
[0060]抗CD4 抗體:GK1.5
[0061]抗CD8 抗體:TIB210
[0062]實施例1:通過全身方式施用，多種抗體對于控制TUBO幾乎無效應(yīng)
[0063]在野生型Balb/c小鼠(n=5/組)的脅腹中皮下注射5xl05TUB0細(xì)胞。在第11天通過腹膜內(nèi)方式以200 μ g抗-neu抗體7.16.4處理，在第12、15、18和21天以PBS (Ctr)或200 yg抗體(如圖1所示)通過腹膜內(nèi)方式處理。每周2次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。結(jié)果表明:通過全身性方式施用抗⑶40抗體FGK45、抗CTLA4抗體4F10、0X40激活抗體0X86、B7-H1/PD1阻斷抗體10F.9G2和抗TGFP抗體IDl1.16.8對于腫瘤生長幾乎無抑制作用。
[0064]實施例2:腫瘤內(nèi)遞送 抗體靶向腫瘤組織相對于全身性注射具有更強的效力。在野生型Balb/c小鼠(n=5/組)的脅腹中皮下注射5xl05TUB0細(xì)胞。在第9、11、13、15、18和21天以PBS(Ctr)或IOOyg抗體(如圖中所示)通過腫瘤內(nèi)方式處理小鼠。每周2次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。
[0065]如圖2所示，在抗-CTLA4組中，所有的腫瘤均被排斥。結(jié)果表明，腫瘤內(nèi)注射抗-CTLA-4顯示出對于腫瘤排斥的有效作用。
[0066]實施例3:組合治療對于控制TUBO比單一治療更加有效。
[0067]在野生型Balb/c小鼠(n=5/組)的脅腹中皮下注射5xl05TUB0細(xì)胞。在第11、14和17天通過腫瘤內(nèi)方式以PBS (Ctr)、50 μ g單一抗體(如圖中所示)或25 μ g抗-CTLA-4抗體 4F10+25 μ g 抗-Her2/neu 抗體 7.16.4( a -CTLA-4+7.16.4)處理小鼠。每周 2 次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。
[0068]如圖3 所示，a -CTLA-4+7.16.4 組即抗-CTLA4 抗體與抗 Her2/neu 抗體 7.16.4的組合顯示出強有力的對于腫瘤生長的抑制，其抑制效應(yīng)大于單獨施用抗Her2/neU抗體
7.16.4。
[0069]實施例4:組合治療比單獨的抗-neu對于抗腫瘤更加有效。
[0070]在野生型Balb/c小鼠(n=5/組)的脅腹中皮下注射5xl05TUB0細(xì)胞。在第12和 17 天通過腫瘤 內(nèi)方式以 PBS (Ctr)、100 μ g 抗 _Her2/neu 抗體 7.16.4 (7.16.4)、或 50ug抗-Her2/neu抗體7.16.4和50ug其它抗體(如圖中所示)處理小鼠。每周2次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。
[0071]如圖4所示,抗Her2/neu抗體7.16.4與抗-CTLA4抗體4F10的組合、抗Her2/neu抗體7.16.4與抗-CD40抗體FGK45的組合、抗Her2/neu抗體7.16.4與抗-B7-H1/PD1阻斷抗體10F.9G2的組合、抗Her2/neu抗體7.16.4與抗-1L-10R抗體1B1.3a的組合、抗Her2/neu抗體7.16.4與0X40激活抗體0X86的組合均抑制腫瘤的生長，其抑制效應(yīng)大于單獨施用抗 Her2/neu 抗體 7.16.4。
[0072]實施例5:組合治療對于淋巴瘤也具有優(yōu)于單一治療的效應(yīng)
[0073]向BALB/c小鼠背部皮下移植1x106的A20淋巴瘤細(xì)胞。在第11、13和16天通過腫瘤內(nèi)方式給予PBS和抗體(如圖中所示)。每周2次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。
[0074]如圖5所示，抗_mCD20與抗_mCTLA4的組合顯著抑制淋巴瘤的生長，其效應(yīng)大于單獨的抗_mCD20。
[0075]實施例6:組合治療的抗腫瘤效應(yīng)需要⑶8+細(xì)胞。向BALB/c小鼠施以背部皮下移植1x106的A20淋巴瘤細(xì)胞。在第16和22天通過腫瘤內(nèi)方式以抗體(如圖所示)處理小鼠。同時通過腹膜內(nèi)方式施用耗竭抗體抗-⑶4 (GK1.5)和抗-⑶8 (TIB210) (200yg)。每周2次測定腫瘤生長并進(jìn)行比較。
[0076]如圖6所示，在存在抗-⑶4耗竭抗體GKl.5的情況下，抗-⑶20或抗⑶20+抗-CTLA4仍然對腫瘤具有明顯抑制效應(yīng)。但是，在存在抗-CD8耗竭抗體TIB210的情況下，抗-⑶20或抗⑶20+抗-CTLA4對腫瘤幾乎無抑制效應(yīng)。
[0077]參考文獻(xiàn):
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【權(quán)利要求】
1.用于治療和/或預(yù)防腫瘤，尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的新的組合產(chǎn)品，其包含: (a)腫瘤抗原特異性抗體；和 (b)針對共抑制/共刺激分子的抗體。
2.權(quán)利要求1的組合產(chǎn)品，其中所述腫瘤抗原特異性抗體是人源化單克隆抗體、嵌合抗體、heterominibody、或單鏈抗體,所述抗體能特異識別和結(jié)合腫瘤表面抗原。
3.權(quán)利要求1的組合產(chǎn)品，其中所述抗體是足以識別腫瘤抗原的抗體片段，例如scFv。
4.權(quán)利要求1-3任一項的組合產(chǎn)品，其中所述組合產(chǎn)品中的腫瘤抗原特異性抗體包括但不限于針對以下腫瘤特異性抗原的抗體:HER2/neu、CD20、EGFR0
5.權(quán)利要求1-3任一項的組合產(chǎn)品，其中所述組合產(chǎn)品中的針對共抑制/共刺激分子的抗體是針對共抑制分子B7-H1/PD1的阻斷抗體，或針對共刺激分子0X40的激活抗體，或針對共刺激分子CTLA4的抗體。
6.權(quán)利要求1-3任一項的組合產(chǎn)品，其中所述腫瘤選自:乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌和黑素瘤和/或其細(xì)胞，例如乳腺癌細(xì)胞(如TUBO細(xì)胞)或Myc-Cap腫瘤細(xì)胞系。
7.權(quán)利要求1-3任一項的組合產(chǎn)品，其中所述腫瘤抗原特異性抗體和所述針對共抑制/共刺激分子的抗體向受試者分開施用，例如可以同時或相繼地施用給受試者。
8.用于治療和/或預(yù)防腫瘤，尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的試劑盒，其包含: (1)腫瘤抗原特異性抗體`； (2)針對共抑制/共刺激分子的抗體；和 用于施用組分(I)和(2)的說明書，其中所述組分(I)和(2)如權(quán)利要求4和5所定義。
9.腫瘤抗原特異性抗體和針對共抑制/共刺激分子的抗體在制備用于治療和/或預(yù)防腫瘤，尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的藥物中的用途，其中所述腫瘤抗原特異性抗體和針對共抑制/共刺激分子的抗體如權(quán)利要求4和5所定義。
【文檔編號】A61P35/00GK103768596SQ201210393680
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2012年10月17日 優(yōu)先權(quán)日:2012年10月17日
【發(fā)明者】傅陽心 申請人:傅陽心