專利名稱：一種半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒及其制備方法。
背景技術(shù)：
肝癌是世界范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率和病死率有上升趨勢(shì)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球每年新發(fā)病的惡性腫瘤約635萬(wàn)，其中原發(fā)性肝癌30萬(wàn)，占4.7%。我國(guó)大陸和臺(tái)灣都是肝癌的高發(fā)地區(qū)，肝癌年發(fā)病人數(shù)逾13萬(wàn)人，占全世界肝癌年死亡人數(shù)的43. 7%。因此尋求高效的方法治療肝癌變得更加急迫。目前臨床上的治療一般是手術(shù)、放療、化療，但由·于肝癌起病隱匿，惡性程度高，發(fā)展變化快，患者在患病初期往往覺察不到，等到就診時(shí)往往已進(jìn)入中晚期，失去了最佳手術(shù)時(shí)機(jī)。因此，在肝癌的臨床治療中廣泛應(yīng)用的是化學(xué)藥物療法，大多數(shù)化療藥物雖可抑制腫瘤細(xì)胞過度增生，但其毒副作用大，對(duì)正常細(xì)胞組織也有很強(qiáng)的殺傷作用。為此，需要尋求有效的方法將治療藥物分子直接輸送到腫瘤細(xì)胞內(nèi)，提高藥物靶向性，大幅度提高藥物對(duì)局部腫瘤臟器的治療效果。納米給藥系統(tǒng)作為一種新型的抗腫瘤藥物輸送系統(tǒng)，已成為當(dāng)今藥劑學(xué)的熱點(diǎn)研究領(lǐng)域，抗癌藥物可通過吸附、溶解、鍵合等作用包裹于天然或合成的載體材料中，形成粒度在納米數(shù)量級(jí)的固態(tài)膠體微粒。由于惡性腫瘤細(xì)胞具有較強(qiáng)的吞噬能力，腫瘤組織的血管通透性也較大，且腫瘤的血管壁對(duì)納米粒具有一定生物粘附性，因此靜脈途徑給予的納米粒易在腫瘤組織聚集，從而表現(xiàn)出對(duì)腫瘤細(xì)胞很強(qiáng)的殺傷作用。研究己證實(shí)，納米?？赏ㄟ^被動(dòng)擴(kuò)散和彌散作用滲透進(jìn)入腫瘤的脈管系統(tǒng)，并最終濃集于腫瘤細(xì)胞內(nèi)。此外，納米粒注射進(jìn)入血循環(huán)后，往往會(huì)與血漿蛋白或糖蛋白等多種成分結(jié)合，進(jìn)而作為異物被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(MPS)吞噬，從而靶向分布于吞噬細(xì)胞豐富的肝、脾、肺和淋巴等組織中，有助于藥物對(duì)這些組織內(nèi)腫瘤疾病的治療。另外由于其自身具有很高的表面積和體積比例，納米?？梢员恍揎椗潴w分子用于主動(dòng)靶向。提高制備納米粒的載體材料有很多，其中白蛋白以無(wú)毒、無(wú)抗原性、可生物降解等優(yōu)點(diǎn)引起了很多學(xué)者的注意。白蛋白納米粒載藥系統(tǒng)可以通過控制粒徑靶向于肝和肺，也可以通過表面修飾或加入磁性物質(zhì)靶向于其他的病變器官，或達(dá)到緩控釋的效果。由美國(guó)Abraxis BioScience Inc.開發(fā)的紫杉醇人血清白蛋白納米粒注射劑獲得FDA批準(zhǔn)上市，成為首個(gè)白蛋白納米粒給藥系統(tǒng)的成功案例。隨著中藥現(xiàn)代研究的不斷深入，中藥在治療肝癌方面因其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)而被臨床廣泛采納，其在治療局部的同時(shí)，重視全身治療，能夠改善和提高病人的生活質(zhì)量，延長(zhǎng)生命周期，并且副作用小。冬凌草甲素就是其中的一個(gè)典型藥物。冬凌草甲素(Oridonin, 0RI)為唇形科香茶菜屬植物冬凌草(Rabdosiarubescens)的主要抗癌有效成分，分子中與環(huán)外亞甲基共軛的環(huán)戊酮結(jié)構(gòu)是其抗癌活性中心，結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒，其特征在于由原料和輔料制成，原料為冬凌草甲素，輔料為半乳糖基化白蛋白、交聯(lián)劑、凍干保護(hù)劑和水，其中，原料與輔料的用量配比如下以IOml納米粒制劑計(jì),冬凌草甲素2. Omg 40. Omg,半乳糖基化白蛋白50. O 400. Omg，交聯(lián)劑O. 4 8. 4mg，凍干保護(hù)劑O或O. I O. 5g，余量為水。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒，其特征在于所述原料與輔料的用量配比如下以IOml納米粒制劑計(jì),冬凌草甲素4. Omg 20. Omg,半乳糖基化白蛋白50. O 300. Omg,交聯(lián)劑O. 6 6. 3mg，凍干保護(hù)劑O. 15 O. 5g，余量為水。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒，其特征在于所述半乳糖基化白蛋白是由乳糖酸與牛血清白蛋白或人血清白蛋白反應(yīng)而得。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒，其特征在于所述半乳糖基化白蛋白是通過以下方法制備得到的將乳糖酸溶于含有EDAC和NHS的蒸餾水中，用TMEA調(diào)pH至4 5，活化O. 5h后用NaOH溶液調(diào)pH至中性，然后加入牛血清白蛋白或人血清白蛋白，500r/min攪拌反應(yīng)48h，得含半乳糖基化白蛋白的溶液，將該溶液在透析袋中透析2天，每天換三次水，透析后進(jìn)行冷凍干燥，即得半乳糖基化白蛋白。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒，其特征在于各組分的用量關(guān)系如下乳糖酸EDAC NHS :牛血清白蛋白或人血清白蛋白=0. 03 O. 3g :O.03 O. 3g :0. 015 O. 15g :0. 02 O. 2g。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒，其特征在于所述交聯(lián)劑選自甲醛、戊二醛、2，3_ 丁二酮或苯酰氯中的任一種或任意兩種以上的組合。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒，其特征在于所述凍干保護(hù)劑選自乳糖、葡萄糖、甘露醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、山梨醇中的任一種或任意兩種以上的組合。
8.權(quán)利要求I 7中任一項(xiàng)所述的一種半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒的制備方法，其特征在于步驟如下 (1)將冬凌草甲素加入到乙醇中，在超聲下使冬凌草甲素溶解，得到冬凌草甲素乙醇溶液； (2)將半乳糖基化白蛋白溶于注射用水中，并用NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至8 9，逐滴加入冬凌草甲素乙醇溶液，在磁力攪拌作用下，勻速滴加無(wú)水乙醇至出現(xiàn)納米乳光，然后加入交聯(lián)劑化學(xué)交聯(lián)24h，在真空條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，得冬凌草甲素納米粒膠體溶液； (3)冬凌草甲素納米粒膠體溶液于低溫高速離心機(jī)離心，棄去上清，得下層的納米粒； (4)納米粒用蒸餾水重分散，加入凍干保護(hù)劑凍干，即得半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法其特征在于所述步驟(2)中，勻速滴加無(wú)水乙醇的速度為O. 75 I. 25ml/min。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法其特征在于所述步驟(3)中，冬凌草甲素納米粒膠體溶液于低溫高速離心機(jī)離心的具體步驟是在15°C、20000r/min的條件下離心15min,棄去上清再加蒸懼水洗漆離心兩次,離心條件同上,棄去上清,得納米粒。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒，由原料和輔料制成，原料為冬凌草甲素，輔料為半乳糖基化白蛋白、交聯(lián)劑、凍干保護(hù)劑和水，其中，原料與輔料的用量配比如下以10ml納米粒制劑計(jì)，冬凌草甲素2.0mg～40.0mg，半乳糖基化白蛋白50.0～400.0mg，交聯(lián)劑0.4～8.4mg，凍干保護(hù)劑0或0.1～0.5g，余量為水。本發(fā)明的半乳糖介導(dǎo)的冬凌草甲素白蛋白納米粒，生物相容性好，做成注射用納米粒溶液有利于增加藥物的生物利用度，減小給藥劑量，降低毒副作用，可以達(dá)到改變藥物體內(nèi)分布、延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間、提高生物利用度等目的。制備方法簡(jiǎn)單易行，適于大規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K31/352GK102846562SQ20121037655
公開日2013年1月2日 申請(qǐng)日期2012年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月28日
發(fā)明者張典瑞, 李彩云, 郭和堅(jiān), 鄭丹丹, 郝蕾蕾, 劉光璞 申請(qǐng)人:山東大學(xué)