專利名稱：一種含三磷酸腺苷輔酶胰島素化合物藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種含三磷酸腺苷輔酶胰島素化合物藥物組合物，本發(fā)明還涉及其制備方法。
背景技術(shù)：
三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate, ATP)是一種核苷酸(又叫腺苷三磷酸)，作為細(xì)胞內(nèi)能量傳遞的物質(zhì)，儲存和傳遞化學(xué)能。三磷酸腺苷是體內(nèi)廣泛存在的輔酶，是體內(nèi)組織細(xì)胞所需能量的主要來源，蛋白質(zhì)、脂肪、糖和核苷酸的合成都需ATP參與。ATP經(jīng)腺苷酸環(huán)化酶催化形成環(huán)磷酸腺苷(cAMP)，是細(xì)胞內(nèi)的生物活性物質(zhì)，對細(xì)胞許多代謝過程有重要的調(diào)節(jié)作用。ATP為蛋白質(zhì)、糖原、卵磷脂、尿素等的合成提供能量，促使肝細(xì)胞修復(fù)和再生，增強(qiáng)肝細(xì)胞代謝活性，對治療肝病有較大針對性。 輔酶A(Coenzyme A, Co A)為體內(nèi)乙?；磻?yīng)的輔酶,對糖、脂肪及蛋白質(zhì)的代謝起重要作用，其中對脂肪代謝的促進(jìn)作用更加重要。本品能激活體內(nèi)的物質(zhì)代謝，加強(qiáng)物質(zhì)在體內(nèi)的氧化并供給能量。主要用于白細(xì)胞減少癥及原發(fā)性血小板減少性紫癜，對脂肪肝、急慢性肝炎、冠脈硬化、慢性動脈炎、心肌梗死、慢性腎功能減退引起的腎病綜合征及尿毒癥、新生兒缺氧、糖尿病和酸中毒等可作為輔助治療使用。胰島素(Insulin)是由胰島β細(xì)胞受內(nèi)源性或外源性物質(zhì)如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質(zhì)激素。胰島素能促進(jìn)全身組織細(xì)胞對葡萄糖的攝取和利用，并抑制糖原的分解和糖原異生，因此，胰島素有降低血糖的作用。胰島素分泌過多時，血糖下降迅速，腦組織受影響最大，可出現(xiàn)驚厥、昏迷，甚至引起胰島素休克。相反，胰島素分泌不足或胰島素受體缺乏常導(dǎo)致血糖升高；若超過腎糖閾，則糖從尿中排出，引起糖尿；同時由于血液成份中改變(含有過量的葡萄糖)，亦導(dǎo)致高血壓、冠心病和視網(wǎng)膜血管病等病變。另外胰島素能促進(jìn)脂肪的合成與貯存，使血中游離脂肪酸減少，同時抑制脂肪的分解氧化。胰島素缺乏可造成脂肪代謝紊亂，脂肪貯存減少，分解加強(qiáng)，血脂升高，久之可引起動脈硬化，進(jìn)而導(dǎo)致心腦血管的嚴(yán)重疾患；與此同時，由于脂肪分解加強(qiáng)，生成大量酮體，出現(xiàn)酮癥酸中毒。三磷酸腺苷輔酶胰島素是以上述三者為活性成分，用于肝炎、腎炎、肝硬化、心力衰竭等疾病的癥狀改善。胰島素溶解性較差，在水、乙醇、氯仿或乙醚中幾乎不溶，在現(xiàn)有技術(shù)的制備過程中往往先將其在酸性溶液中溶解，通過添加輔料來提交其溶解性?，F(xiàn)有技術(shù)中往往采用較多種類或者較大劑量的方式，來提高藥品的溶解性以及其他特質(zhì)。專利文獻(xiàn)CN102038939A公開了一種制備三磷酸腺苷輔酶胰島素干粉針劑的制備方法，包括三磷酸腺苷二鈉、輔酶Α、胰島素、L-精氨酸、乙二胺四乙酸二鈉、低分子右旋糖酐、葡萄糖酸鈣、鹽酸半胱氨酸等成分，這些成分種類較多，一方面使得成本增高，另一方面會使得副作用增多，影響用藥安全性。專利文獻(xiàn)CN102397536A公開了一種注射用三磷酸腺苷輔酶胰島素以及其生產(chǎn)工藝，包括了三磷酸腺苷二鈉、輔酶A、胰島素、鹽酸精氨酸、右旋糖酐40、藥用炭等成分，相比CN102038939A而言減少了輔料的總類。但是鹽酸精氨酸以及右旋糖酐40的加入量仍然較大，精氨酸可能會引起的副作用如導(dǎo)致呼吸急促，瘙癢，濕疫，惡心和胃痛，血液化學(xué)品改變等過敏反應(yīng)等，存在肝臟和腎臟疾病的人也容易出現(xiàn)不良反應(yīng)。此外，右旋糖酐存在蕁麻疹、皮膚瘙癢、發(fā)熱、惡心、嘔吐、喘息、關(guān)節(jié)痛、出血等副作用，極個別的有血壓下降、呼吸困難和胸悶等副作用。另外，孟現(xiàn)民等曾報道過關(guān)于注射用三磷酸腺苷輔酶胰島素致過敏性休克的問題(《中國醫(yī)院藥學(xué)雜志》2008年22期)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)中輔料用量大的問題，提供一種穩(wěn)定性好、輔料用量小的三磷酸腺苷輔酶胰島素藥物組合物。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案一種合有三磷酸腺苷輔酶胰島素化合物藥物組合物，其包括以下比例的成分三磷酸腺苷15 25mg、輔酶A40 60單位、胰島素3 5單位、精氨酸4 8mg、低分子右旋糖野 3 7mg, Na0H2 4mg。優(yōu)選地，本發(fā)明藥物組合物包括以下比例的成分三磷酸腺苷20mg、輔酶A60單位、胰島素4單位、精氨酸6mg、低分子右旋糖酐5mg, Na0H3mg。 所述低分子右旋糖酐的分子量為2萬-4萬，優(yōu)選為右旋糖酐40。本發(fā)明的藥物組合物，可以是注射劑或者是粉針劑，優(yōu)選為粉針劑。本發(fā)明還提供一種制備上述藥物組合物的方法，其包括如下步驟I)將低分子右旋糖酐用注射用水溶解，加入針用活性炭，煮沸，冷卻至50 55°C，加入精氨酸，攪拌溶解，過濾除炭，冷卻至15°C以下，加入三磷酸腺苷，攪拌溶解，得溶液I);2)另取注射用水用鹽酸調(diào)節(jié)pH至4. 8 5. 2，加入輔酶A，攪拌溶解，得溶液2)；3)取NaOH用適量注射用水溶解，控制pH9. 5 10. 0，加入胰島素，攪拌溶解，得溶液3)；4)將溶液I)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至全量，再經(jīng)除菌濾器過濾至儲te，半成品檢驗(yàn)合格后，分裝入瓶；5)將分裝好的半成品置于冷凍干燥機(jī)制品室板層，4小時降溫至_45°C，并于_45°C保溫4小時，開啟捕水器制冷開關(guān)，于預(yù)凍保溫結(jié)束后，開啟真空泵，當(dāng)真空泵讀數(shù)降至20帕以下時，按10°C /h逐漸升高板層溫度至_4°C，保溫4小時，升溫至0°C繼續(xù)保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時，繼續(xù)升高板層溫度至30°C并保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時結(jié)束凍干。然后真空壓塞、軋蓋、目檢、包裝。上述本制備過程中針對不同性質(zhì)的溶液采取不同的溶解策略，盡可能地保存了各種藥物的藥效。如前所述，精氨酸可能會引起的副作用如導(dǎo)致呼吸急促，瘙癢，濕疫，惡心和胃痛，血液化學(xué)品改變等過敏反應(yīng)等，存在肝臟和腎臟疾病的人也容易出現(xiàn)不良反應(yīng)。而右旋糖酐存在蕁麻疹、皮膚瘙癢、發(fā)熱、惡心、嘔吐、喘息、關(guān)節(jié)痛、出血等副作用，極個別的有血壓下降、呼吸困難和胸悶等副作用。另外，輔料還會引入其他雜質(zhì)，導(dǎo)致更多未知副作用。
然而，對于凍干粉而言，添加輔料以便實(shí)現(xiàn)其更好的溶解度及穩(wěn)定性，是必要的。本發(fā)明在此方面作了較多的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果意外發(fā)現(xiàn)，三磷酸腺苷輔酶胰島素藥物組合物中，添加適量氫氧化鈉之后，不但能降低精氨酸、低分子右旋糖酐的使用量，而且增加了其穩(wěn)定性和用藥安全。這不僅降低了成本而且受到了良好的藥劑學(xué)上的效果。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。在不背離本發(fā)明精神和實(shí)質(zhì)的前提下，對本發(fā)明所作的修飾或者替換，均屬于本發(fā)明的范疇。實(shí)施例I配方三磷酸腺苷20g、輔酶A50000單位、胰島素4000單位、精氨酸6g、右旋糖酐405g，Na0H3g。制備方法 I)將低分子右旋糖酐用注射用水溶解，加入處方量O. 03% (g/ml)的針用活性炭，煮沸，冷卻至55°C，加入精氨酸，攪拌溶解，過濾除炭，冷卻至15°C以下，加入三磷酸腺苷，攪拌溶解，得溶液I);2)另取注射用水用鹽酸調(diào)節(jié)pH至5. 0，加入輔酶A，攪拌溶解，得溶液2)；3)取NaOH用適量注射用水溶解，控制pH9. 5，加入胰島素，攪拌溶解，得溶液3)；4)將溶液I)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至全量2000ml，再經(jīng)除菌濾器過濾至儲罐，半成品檢驗(yàn)合格后，分裝入瓶(1000支)；5)將分裝好的半成品置于冷凍干燥機(jī)制品室板層，4小時降溫至_45°C，并于_45°C保溫4小時，開啟捕水器制冷開關(guān)，于預(yù)凍保溫結(jié)束后，開啟真空泵，當(dāng)真空泵讀數(shù)降至20帕以下時，按10°C /h逐漸升高板層溫度至_4°C，保溫4小時，升溫至0°C繼續(xù)保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時，繼續(xù)升高板層溫度至30°C并保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時結(jié)束凍干。然后真空壓塞、軋蓋、目檢、包裝。實(shí)施例2配方三磷酸腺苷25g、輔酶A400000單位、胰島素50000單位、精氨酸4g、右旋糖酐 207g，Na0H4goI)將低分子右旋糖酐用250注射用水溶解，加入配置質(zhì)量O. 5%的針用活性炭，煮沸，冷卻至50°C，加入精氨酸，攪拌溶解，過濾除炭，冷卻至15°C以下，加入三磷酸腺苷，攪拌溶解，得溶液I);2)另取200注射用水用鹽酸調(diào)節(jié)pH至4. 8，加入輔酶A，攪拌溶解，得溶液2)；3)取NaOH用200注射用水溶解，控制ρΗΙΟ. 0，加入胰島素，攪拌溶解，得溶液3)；4)將溶液I)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至2000ml，再經(jīng)除菌濾器過濾至儲罐，半成品檢驗(yàn)合格后，分裝入瓶(1000支)；5)將分裝好的半成品置于冷凍干燥機(jī)制品室板層，4小時降溫至_45°C，并于_45°C保溫4小時，開啟捕水器制冷開關(guān)，于預(yù)凍保溫結(jié)束后，開啟真空泵，當(dāng)真空泵讀數(shù)降至20帕以下時，按10°C /h逐漸升高板層溫度至_4°C，保溫4小時，升溫至0°C繼續(xù)保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時，繼續(xù)升高板層溫度至30°C并保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時結(jié)束凍干。然后真空壓塞、軋蓋、目檢、包裝。
實(shí)施例3配方三磷酸腺苷15g、輔酶A60000單位、胰島素3000單位、精氨酸8g、右旋糖酐40 3g, Na0H2g。I)將低分子右旋糖酐用注射用水溶解，加入配置質(zhì)量O. 5%的針用活性炭，煮沸，冷卻至50°C，加入精氨酸，攪拌溶解，過濾除炭，冷卻至15°C以下，加入三磷酸腺苷，攪拌溶解，得溶液I);2)另取注射用水用鹽酸調(diào)節(jié)pH至4. 8，加入輔酶A，攪拌溶解，得溶液2)；3)取NaOH用適量注射用水溶解，控制pH9. 5，加入胰島素，攪拌溶解，得溶液3)；4)將溶液I)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至2000m，再經(jīng)除菌濾器過濾至儲罐，半成品檢驗(yàn)合格后，分裝入瓶(1000支)； 5)將分裝好的半成品置于冷凍干燥機(jī)制品室板層，4小時降溫至_45°C，并于_45°C保溫4小時，開啟捕水器制冷開關(guān)，于預(yù)凍保溫結(jié)束后，開啟真空泵，當(dāng)真空泵讀數(shù)降至20帕以下時，按10°C /h逐漸升高板層溫度至_4°C，保溫4小時，升溫至0°C繼續(xù)保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時，繼續(xù)升高板層溫度至30°C并保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時結(jié)束凍干。然后真空壓塞、軋蓋、目檢、包裝。實(shí)施例4配方本發(fā)明藥物組合物包括以下比例的成分三磷酸腺苷20g、輔酶A55000單位、胰島素4000單位、精氨酸6g、右旋糖酐404g, Na0H3g。制備方法I)將低分子右旋糖酐用注射用水溶解，加入針用活性炭，煮沸，冷卻至55°C，加入精氨酸，攪拌溶解，過濾除炭，冷卻至15°C以下，加入三磷酸腺苷，攪拌溶解，得溶液I)；2)另取注射用水用鹽酸調(diào)節(jié)pH至5. 2，加入輔酶A，攪拌溶解，得溶液2)；3)取NaOH用適量注射用水溶解，控制ρΗΙΟ. 0，加入胰島素，攪拌溶解，得溶液3)；4)將溶液I)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至全量2000ml，再經(jīng)除菌濾器過濾至儲罐，半成品檢驗(yàn)合格后，分裝入瓶(1000支)；5)將分裝好的半成品置于冷凍干燥機(jī)制品室板層，4小時降溫至_45°C，并于_45°C保溫4小時，開啟捕水器制冷開關(guān)，于預(yù)凍保溫結(jié)束后，開啟真空泵，當(dāng)真空泵讀數(shù)降至20帕以下時，按10°C /h逐漸升高板層溫度至_4°C，保溫4小時，升溫至0°C 2繼續(xù)保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時，繼續(xù)升高板層溫度至30°C并保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時結(jié)束凍干。然后真空壓塞、軋蓋、目檢、包裝。對比例I按照專利文獻(xiàn)CN102397536A實(shí)施例公開的配方及配制方式配置，簡述如下配方三磷酸腺苷二鈉20g、輔酶A5萬單位、胰島素4000單位、鹽酸精氨酸12g、右旋糖酐4020g配置方式將右旋糖酐40加適量注射用水，攪拌至完全溶解，加配制體積O. 3%的藥用炭，煮沸30分鐘，降溫至60°C，加處方量鹽酸精氨酸，攪拌溶解，鈦棒過濾過濾除炭，降溫至8 10°C，加三磷酸腺苷二鈉，攪拌溶解，再加輔酶A攪拌使其溶解完全，用2. 5mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至6. O 6. 2，備用。另取注射用水，用lmol/L鹽酸調(diào)節(jié)pH至2. 5，加入胰島素，攪拌使其完全溶解，再將兩濾液混合均勻，用2. 5mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至6. O 6.2，加8 10°C注射用水至2000ml，微孔過濾除菌。分裝成1000支，將分裝好的制品置于凍干箱隔板上，制品冷卻至-30°C，保溫30分鐘。冷凝器溫度至_45°C ±5°C時抽真空，至15Pa時，停止制冷，設(shè)導(dǎo)熱油溫度為10°C進(jìn)行冷凍升華，至載體溫度35°C。制品溫度在30°C保持I. 5小時。干燥結(jié) 束后,壓塞、軋蓋。
實(shí)驗(yàn)例I :安全性試驗(yàn)對實(shí)施例和對比例制備的三磷酸腺苷輔酶胰島素粉針劑進(jìn)行安全性試驗(yàn)考察，試驗(yàn)方法及結(jié)果如下一、血管刺激性實(shí)驗(yàn)取體重為2. 0-2. 5kg的新西蘭大白兔30只，隨機(jī)分為6組，每組5只，包括空白對照組、實(shí)驗(yàn)組I 4，藥物對照組。采用兔耳緣靜脈緩慢注射，注射量為10ml/kg體重/次(按實(shí)施例I 4及對比例I的配置用氯化鈉注射液稀釋至含三磷酸腺苷O. 4mg/ml)。其中空白對照組采用氯化鈉注射液，實(shí)驗(yàn)組1-4組分別采用實(shí)施例1-4制備三磷酸腺苷輔酶胰島素凍干粉針制劑，藥物對照組采用對比例I制備的三磷酸腺苷輔酶胰島素凍干粉針劑，分別加注射用水溶解后注射。每天一次，連續(xù)給藥7天，于最后一次給藥24小時后剪短兔耳，置于10%甲醛溶液中固定標(biāo)本，然后送病理進(jìn)行組織學(xué)檢查(在兔耳緣靜脈的不同部位的5處取材，即從注射初始部位開始向心端每隔Icm作一切片)。經(jīng)兔耳緣靜脈病理學(xué)檢查，空白對照組和實(shí)驗(yàn)組I 4的耳緣靜脈管壁完整，內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)清楚，無明顯病變，無炎細(xì)胞浸潤。藥物對照組部分出現(xiàn)血管輕度擴(kuò)張充血，其他正常。二、過敏實(shí)驗(yàn)Dunkin-Hartley種白化豚鼠，體重250g 350g,臨床健康,符合實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量要求。豚鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，雌雄各半。觀察豚鼠靜脈注射氯化鈉空白對照組、實(shí)驗(yàn)組1-4組與藥物對照組的過敏反應(yīng)，其中空白對照組采用氯化鈉注射液，實(shí)驗(yàn)組1-4組分別采用實(shí)施例1-4制備三磷酸腺苷輔酶胰島素凍干粉針制劑，藥物對照組采用對比例I制備的三磷酸腺苷輔酶胰島素凍干粉針，分別加注射用水溶解后注射。具體方法是按照空白對照組、實(shí)驗(yàn)組I 4組以及藥物對照組分別間日給予腹腔注射三磷酸腺苷輔酶胰島素注射液O. 5ml/只(按實(shí)施例I 4及對比例I的配置用氯化鈉注射液稀釋至含三磷酸腺苷O. 4mg/ml)致敏，連續(xù)三次，然后第14天及21天分別攻擊給藥(2ml/只)，立即觀察I小時。結(jié)果顯示，空白對照組和實(shí)驗(yàn)組1-4組未出現(xiàn)明顯異?，F(xiàn)象，藥物對照組部分實(shí)驗(yàn)對象不同程度上出現(xiàn)了豎毛、呼吸困難、噴嚏、干嘔、抽搐、虛脫等現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)例2 :穩(wěn)定性試驗(yàn)實(shí)施例I 4所得的樣品與對比例I的樣品，按照《中國藥典》(2005版)的要求進(jìn)行外觀、澄明度、有關(guān)物質(zhì)及含量等指標(biāo)的檢測及長期(0、6、12、24個月)穩(wěn)定性試驗(yàn)，結(jié)果如下表I樣品各項指標(biāo)檢測結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種含三磷酸腺苷輔酶胰島素化合物藥物組合物，其包括以下比例的成分三磷酸腺苷15 25mg、輔酶A40 60單位、胰島素3 5單位、精氨酸4 8mg、低分子右旋糖酐3 7mg, NaOH2 4mg。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的藥物組合物，其包括以下比例的成分三磷酸腺苷20mg、輔酶A50單位、胰島素4單位、精氨酸6mg、低分子右旋糖酐5mg, NaOH3mg。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物為凍干粉。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的藥物組合物，其特征在于，所述低分子右旋糖苷為右旋糖酐40。
5.制備權(quán)利要求I 4任一項所述藥物組合物的方法，其包括如下步驟 1)將低分子右旋糖酐用注射用水溶解，加入針用活性炭，煮沸，冷卻至50 55°C，加入精氨酸，攪拌溶解，過濾除炭，冷卻，加入三磷酸腺苷，攪拌溶解，得溶液I); 2)另取注射用水用鹽酸調(diào)節(jié)pH至4.8 5. 2，加入輔酶A，攪拌溶解，得溶液2)； 3)取NaOH用適量注射用水溶解，控制pH9.5 10. O,加入胰島素，攪拌溶解，得溶液3)； 4)將溶液I)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至全量，再經(jīng)除菌濾器過濾至儲罐，半成品檢驗(yàn)合格后，分裝入瓶； 5)將分裝好的半成品置于冷凍干燥機(jī)制品室板層，4小時降溫至_45°C，并于_45°C保溫4小時，開啟捕水器制冷開關(guān)，于預(yù)凍保溫結(jié)束后，開啟真空泵，當(dāng)真空泵讀數(shù)降至20帕以下時，按10°C /h逐漸升高板層溫度至_4°C，保溫4小時，升溫至0°C繼續(xù)保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時，繼續(xù)升高板層溫度至30°C并保溫2小時，當(dāng)制品溫度與板層溫度接近時結(jié)束凍干。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種含三磷酸腺苷輔酶胰島素化合物藥物組合物，本發(fā)明藥物組合物包括以下比例的成分三磷酸腺苷15～25mg、輔酶A40～60單位、胰島素3～5單位、精氨酸4～8mg、低分子右旋糖酐3～7mg，NaOH2～4mg。本發(fā)明制備過程中針對不同性質(zhì)的溶液采取不同的溶解策略，盡可能地保存了各種藥物的藥效。本發(fā)明藥物組合物通過合理配置各種成分，使得輔料的用量降低，不僅降低了成本，而且增加了其穩(wěn)定性和用藥安全性。
文檔編號A61K38/28GK102895656SQ20121035499
公開日2013年1月30日 申請日期2012年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月24日
發(fā)明者羅誠 申請人:羅誠