專利名稱：一種復(fù)方美貝霉素肟納米乳抗寄生蟲(chóng)藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于獸藥領(lǐng)域，涉及一種抗寄生蟲(chóng)藥的新劑型，特別涉及一種用于防治寵物體內(nèi)外寄生蟲(chóng)的復(fù)方美貝霉素肟納米乳抗寄生蟲(chóng)藥物及其制備方法。
背景技術(shù)：
隨著經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和人們生活水平的提高，越來(lái)越多的人開(kāi)始養(yǎng)殖寵物，然而，目前市場(chǎng)上能夠?qū)ｉT(mén)用于寵物的藥品尚不健全，寵物一旦感染疾病，威脅最大的就是人類，因此，開(kāi)發(fā)新的寵物藥品迫在眉睫。美貝霉素廂(Milbemycin Oxime)是一種大環(huán)內(nèi)酯類抗寄生蟲(chóng)藥,它是美貝霉素A4和A3半合成的衍生物。1975年由日本Sankyo公司的科學(xué)家從鏈霉菌的發(fā)酵物中分離得到的，美國(guó)于上世紀(jì)90年代初批準(zhǔn)該藥上市，2003年又批準(zhǔn)該藥與氯芬奴隆的復(fù)方藥品上市；我國(guó)臺(tái)灣地區(qū)在諾華公司的極力爭(zhēng)取下于1997年正式上市，商品名為倍脈心。美貝霉素肟是通過(guò)激發(fā)！■氨基丁酸(GABA )的離子通道，影響蟲(chóng)體的神經(jīng)傳導(dǎo)進(jìn)而發(fā)揮其藥效。該藥是目前防治犬貓?bào)w內(nèi)外寄生蟲(chóng)的藥物，能特效防治心絲蟲(chóng)，高效防治鉤蟲(chóng)、圓蟲(chóng)、鞭蟲(chóng)、蛔蟲(chóng)等體內(nèi)寄生蟲(chóng)，以及毛囊蟲(chóng)、疥癬、虱、跳蚤等體外寄生蟲(chóng)。其藥理作用獨(dú)特，廣譜，高效，用藥劑量小，按推薦劑量使用時(shí)對(duì)寄生蟲(chóng)毒性強(qiáng)大，而對(duì)動(dòng)物機(jī)體幾乎無(wú)毒副作用，口服用藥也很方便，符合安全高效的新型抗寄生蟲(chóng)藥的要求。左旋咪唑(Levamisole)是一種廣譜、高效、低毒的驅(qū)蟲(chóng)藥，用于畜禽胃腸道線蟲(chóng)病、肺線蟲(chóng)病、犬心絲蟲(chóng)病和豬腎蟲(chóng)病。其次，也用于免疫功能低下動(dòng)物的輔助治療和提高疫苗的免疫效果，具有較好的免疫增強(qiáng)作用。美貝霉素肟雖廣譜驅(qū)蟲(chóng)，但對(duì)某些線蟲(chóng)的作用不如其他阿維菌素類藥物，而左旋咪唑除了對(duì)線蟲(chóng)有好的驅(qū)除作用外，對(duì)免疫功能低下的動(dòng)物具有較好的免疫增強(qiáng)作用，還具有抗腫瘤、抗感染等的作用。將這兩種藥物相互結(jié)合，大大增加了抗蟲(chóng)譜作用，還可以起到免疫增強(qiáng)作用，滿足了寵物用藥的需求，在獸藥領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的問(wèn)題與缺陷，提供一種穩(wěn)定性好，吸收迅速，靶向釋藥，具有高效、廣譜、低毒特點(diǎn)的體內(nèi)外防治寵物寄生蟲(chóng)病的復(fù)方美貝霉素肟納米乳抗寄生蟲(chóng)藥物。實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的的技術(shù)方案是一種復(fù)方美貝霉素肟納米乳抗寄生蟲(chóng)藥物，該納米乳液滴直徑大小在I IOOnm之間，由下列質(zhì)量百分比的原料組成美貝霉素肟0. 5%
3.5%，左旋咪唑0. 1% I. 5%，表面活性劑23. 5% 38. 5%、油3. 0% 17. 0%、余量為蒸餾水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100%。所述的表面活性劑為RH-40、吐溫-80、EL-40中的任一種或幾種的混合物。所述油是乙酸丁酯、肉桂醛、蓖麻油、肉豆蘧酸異丙酯和三乙酸甘油酯中的任一種或幾種的混合物。 本發(fā)明采用的納米乳由表面活性劑、油相、和水組成，是一種粒徑在I IOOnm之間的各向同性的熱力學(xué)穩(wěn)定體系。處方設(shè)計(jì)原則作為藥物載體，納米乳首先應(yīng)符合一般藥物載體的要求，即無(wú)毒、無(wú)刺激、無(wú)不良藥理作用、具有良好的生物相容性、不影響主藥的藥效和穩(wěn)定性；另外由于納米乳自身的特性，它對(duì)處方組成還有特殊的要求，對(duì)藥物有較強(qiáng)的增溶能力并能在較大范圍內(nèi)形成穩(wěn)定的納米乳區(qū)。本發(fā)明遵循此原則。在表面活性劑的選擇上，本發(fā)明選用無(wú)毒性和生物相容性好的非離子型表面活性劑。非離子型表面活性劑在溶液中比較穩(wěn)定，不易受強(qiáng)電解質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽類的影響，也不易受酸堿的影響，并且與其他表面活性劑的相容性好，溶血作用較小?？紤]到制備工藝的簡(jiǎn)單性，即納米乳的易形成性和制備出來(lái)的納米乳的穩(wěn)定性，本發(fā)明選用HLB介于10 15之間的液態(tài)非離子型表面活性劑，或者與一種HLB〈10的非離子型表面活性劑復(fù)配?？蛇x用的表面活性劑有RH-40、吐溫-80、EL-40中的任一種或幾種的混合物。常見(jiàn)的乳化劑的HLB值可以在一些化工手冊(cè)中查到，如化工出版的《化學(xué)產(chǎn)品手冊(cè)》。由于表面活性劑的親水親油平衡(HLB)值具有加合性，可用質(zhì)量平均法求出表面活性劑的HLB值。例如，兩種表面活性劑A、B混合后，其混合表面活性劑的親水親油平衡值HLBab值為
HLBab= (Wa XHLBa+Wb XHLBb)/(Wa+Wb)
式中 WA，WB—混合表面活性劑A、B的質(zhì)量；
HLBA, HLBB—表面活性劑A、B的HLB值。本發(fā)明根據(jù)當(dāng)乳化油相所需的表面活性劑的HLB與表面活性劑相近時(shí)，所形成的乳狀液穩(wěn)定的原則，所述油是乙酸丁酯、肉桂醛、蓖麻油、肉豆蘧酸異丙酯和三乙酸甘油酯中的任一種或幾種的混合物。本發(fā)明經(jīng)透射電子顯微鏡檢測(cè)，液滴直徑分布在I lOOnm，外觀為黃色或無(wú)色透明液體，具有很好的穩(wěn)定性
I、經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性
經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性是指納米乳口服液在室溫自然變化條件下貯藏時(shí)，外觀隨時(shí)間延長(zhǎng)而發(fā)生變化的程度。該復(fù)方美貝霉素肟納米乳持久透明，未發(fā)現(xiàn)渾濁或沉淀，則說(shuō)明經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性好。這是評(píng)價(jià)納米乳的一個(gè)重要指標(biāo)。2、熱貯穩(wěn)定性
將該復(fù)方美貝霉素肟納米乳置于試管，密封，置于37 °C恒溫水浴箱中貯存14天，該液熱貯后外觀透明。3、抗冷凍穩(wěn)定性
將該復(fù)方美貝霉素肟納米乳在冰箱中_4°C保存一周后。恢復(fù)至室溫。如果納米乳在_4°C成固體，恢復(fù)至室溫，恢復(fù)至透明，且放置一周后繼續(xù)透明，則認(rèn)為抗冷凍性好。4、加速穩(wěn)定性
將該復(fù)方美貝霉素肟納米乳置于試管，密封，在15000r/min的轉(zhuǎn)速下離心20分鐘，沒(méi)有分層，仍澄清透明。用法根據(jù)體重，口服,每次I. Omg/kg ;外用，每次I. 5mg/kg。本發(fā)明的復(fù)方美貝霉素肟納米乳抗菌藥物，與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)1)本發(fā)明的0/W型復(fù)方美貝霉素肟納米乳屬納米級(jí)藥物，
粒徑在I IOOnm,穩(wěn)定性好,粘度低,滲透性強(qiáng),作用迅速高效；
2)本發(fā)明的復(fù)方美貝霉素肟納米乳用途廣泛，既可口服也
可外用，口服可通過(guò)飲水，外用可生產(chǎn)成噴霧劑和涂抹劑，使用方便；
3)本發(fā)明的技術(shù)方法解決了美貝霉素肟的水不溶性問(wèn)題，提高了載藥量，復(fù)方制劑使其抗蟲(chóng)譜廣泛，更加滿足了寵物的需求；
4)本發(fā)明的制備方法簡(jiǎn)單，安全性高，便于推廣應(yīng)用。
具體實(shí)施例方式以下通過(guò)藥效學(xué)試驗(yàn)和對(duì)比試驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述藥物的抗菌效果。試驗(yàn)例I本發(fā)明的復(fù)方美貝霉素肟納米乳抗寄生蟲(chóng)藥物的毒性試驗(yàn)
I.試驗(yàn)方法
1.I急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)參照霍恩氏法，選擇健康的小鼠50只，
雌雄各半，根據(jù)預(yù)測(cè)結(jié)果，設(shè)500、1000、3000、5000mg/kg 4個(gè)劑量組和生理鹽水對(duì)照組，隨機(jī)分為5組，每組雌雄各5只，并按5ml/(kg* w)量一次灌胃，觀察10 d，給藥后記錄小鼠的飲食、活動(dòng)和精神狀態(tài)以及出現(xiàn)死亡的時(shí)間和數(shù)量，并解剖觀察各臟器官，根據(jù)一次最大計(jì)量法計(jì)算LD5tl值。I. 2急性皮膚刺激性試驗(yàn)選取健康無(wú)皮膚損傷的新西蘭家兔6
只，體重2. 5±0. 3kg，分為兩組，每組3只，在試驗(yàn)前24h給家兔背部中間脊柱兩側(cè)的皮膚脫毛，每側(cè)脫毛區(qū)以2cmX 3cm左右為宜，一側(cè)裸露皮膚涂本發(fā)明復(fù)方美貝霉素肟納米乳0.5g (實(shí)施例1)，并覆蓋紗布，用透明膠帶固定；另一側(cè)皮膚涂以等量蒸餾水作對(duì)照，敷藥時(shí)間為4h。涂藥4 h后，以溫?zé)嵘睇}水清洗兩側(cè)涂藥部位，分別于清除受試物后的I、24、48h,觀察并記錄兩側(cè)涂藥部位皮膚反應(yīng)。2.結(jié)果
2.I急性經(jīng)口毒性復(fù)方美貝霉素肟納米乳對(duì)小鼠急性經(jīng)口毒
性10 d觀察，各劑量組無(wú)明顯中毒癥狀，未見(jiàn)死亡。小鼠解剖未見(jiàn)異常?？梢?jiàn)，該復(fù)方美貝霉素肟納米乳使用安全，其LD5tl值大于5000mg/kg。2. 2急性皮膚刺激受試家兔給藥4h后，在各個(gè)觀察期內(nèi)兩側(cè)
皮膚未見(jiàn)紅斑或水腫，對(duì)皮膚刺激性反應(yīng)的積分值為0，表明該復(fù)方美貝霉素肟納米乳對(duì)皮膚局部無(wú)刺激作用。試驗(yàn)例2本發(fā)明復(fù)方美貝霉素肟納米乳抗寄生蟲(chóng)藥物對(duì)犬驅(qū)蟲(chóng)藥效試驗(yàn)
通過(guò)糞撿，選擇50條自然感染腸道寄生蟲(chóng)的病犬，另外每條犬補(bǔ)飼40個(gè)蛔蟲(chóng)，正常飼喂30天后，對(duì)所有病犬糞便進(jìn)行蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)，根據(jù)蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)情況將50條病犬分為5組，每組10條，盡量使各組蟲(chóng)卵數(shù)接近。按照臨床給藥量將犬分為以下幾個(gè)劑量組低劑量組 0. 6mg/kg、中劑量組I. 5 mg/kg、高劑量組3 mg/kg、單方美貝霉素廂微乳對(duì)照組I. 5 mg/kg,不給藥對(duì)照組。根據(jù)每條犬的體重及給藥量計(jì)算出所需藥量，進(jìn)行一次口服給藥，并在服藥后連續(xù)7天收集所有試驗(yàn)犬的糞便，在顯微鏡下對(duì)每克糞便中的蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)，結(jié)果如下表I所示
表I復(fù)方美貝霉素肟納米乳給藥后驅(qū)蟲(chóng)效果
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方美貝霉素肟納米乳抗寄生蟲(chóng)藥物，其特征在于，由下列質(zhì)量百分比的原料組成 美貝霉素肟O. 5% 3. 5% 左旋咪唑O. 1% I. 5% 表面活性劑23. 5% 38. 5% 油3. 0% 17. 0% 余量為蒸餾水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100%; 所述的表面活性劑是吐溫-80、RH-40、EL-40中的任一種； 所述油是乙酸丁酯、肉桂醛、蓖麻油、肉豆蘧酸異丙酯和三乙酸甘油酯中的任一種或幾種的混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的復(fù)方美貝霉素肟納米乳抗寄生蟲(chóng)藥物，其特征在于，該納米乳液滴直徑大小在I IOOnm之間。
3.制備權(quán)利要求I所述的復(fù)方美貝霉素肟納米乳抗寄生蟲(chóng)藥物的方法，其特征在于，包括下列步驟 (1)按配方比例稱取表面活性劑、油、美貝霉素肟、左旋咪唑、蒸餾水，備用； (2)將所述量的美貝霉素肟加入油中，攪拌使其充分溶解，作為油相； (3)將所述量的左旋咪唑加入蒸餾水中，攪拌使其充分溶解，作為水相； (4)在室溫下迅速攪拌油相和表面活性劑，攪拌的同時(shí)緩慢滴加水相，不斷攪拌直至體系呈透明澄清的液體，即得復(fù)方美貝霉素肟納米乳。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種復(fù)方美貝霉素肟納米乳抗寄生蟲(chóng)藥物，該納米乳藥物的液滴直徑大小在1～100nm之間，由下列質(zhì)量百分比的原料組成美貝霉素肟0.5%～3.5%，左旋咪唑0.1%～1.5%，表面活性劑23.5%～38.5%、油3.0%～17.0%、余量為蒸餾水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100%。該納米乳制劑是澄清透明液體，穩(wěn)定性好，吸收迅速，靶向釋藥，具有高效、廣譜、低毒等特點(diǎn)，是一種防治寵物體內(nèi)外寄生蟲(chóng)的藥物，主要用于防治惡絲蟲(chóng)病，驅(qū)除線蟲(chóng)、鉤蟲(chóng)、蛔蟲(chóng)、鞭蟲(chóng)等體內(nèi)寄生蟲(chóng)和疥螨、鼻螨、毛囊蟲(chóng)、虱、跳蚤等體外寄生蟲(chóng)。本發(fā)明解決了美貝霉素肟的水不溶性問(wèn)題，制備工藝簡(jiǎn)單，安全性高，便于推廣。
文檔編號(hào)A61K31/429GK102614173SQ20121005756
公開(kāi)日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2012年3月7日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月7日
發(fā)明者歐陽(yáng)五慶, 歐陽(yáng)伸雨, 鄭星星 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)