專利名稱：華中五味子藤莖中木脂素的提取方法
華中五味子藤莖中木脂素的提取方法技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于天然藥物成分木脂素的提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從植物華中五味子的藤莖中提取木脂素的方法。
背景技術(shù)：
Ψ ^ Ji ^ (Schisandra sphenanthera Rehd. et ffils.)力 _ 〒禾斗 (Schisandraceae)五味子屬(Schisandra Michx.)多年生落葉木質(zhì)藤本，其干燥成熟果實被稱為南五味子，收錄于中華人民共和國藥典2010年版第一部，具有收斂固澀、益氣生津、 補腎寧心之功效。五味子屬植物藥用成分主要是木脂素和揮發(fā)油，其中木脂素是其主要活性成分，具有降酶保肝、抗衰老、抗腫瘤、抗艾滋病毒等作用。
華中五味子藤莖在自然狀況下生長量很大，與花芽的分化和果實的生長爭奪營養(yǎng)物質(zhì)，為了保證植株的正常開花結(jié)果，人工野生撫育華中五味子每年都要進(jìn)行枝條修剪，剪下的枝條重量占原藤的三分之一左右。目前，對華中五味子同屬植物五味子(Schisandra chinensis)的藤莖研究表明，其含有與果實相同的木脂素成分，三年以上藤莖的木脂素含量與果實相當(dāng)，可作為代替果實入藥之選。生產(chǎn)實踐表明，長期以來都將華中五味子修剪掉的藤莖當(dāng)作廢物拋棄，造成了資源的巨大浪費。因此，有效的提取華中五味子藤莖中木脂素，充分利用自然資源，變廢為寶，對提高藥農(nóng)的經(jīng)濟(jì)收入和降低藥品生產(chǎn)成本均具有深遠(yuǎn)的意義。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服上述華中五味子修剪掉的藤莖當(dāng)作廢物拋棄的缺點，提供一種操作簡單、成本低廉、提取效率高的從華中五味子藤莖中提取木脂素的方法。
解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案由下述步驟組成
1、處理藤莖
取1 2年生直徑小于0. 5cm的華中五味子藤莖或者取3年生以上直徑為0. 5 2cm的華中五味子藤莖，自然陰干，粉碎，過60目篩，得到華中五味子藤莖粉末。
2、提取華中五味子藤莖中的木脂素
將華中五味子藤莖粉末與提取劑混合均勻，每克華中五味子藤莖粉末中加入5 20mL提取劑，密封，升溫至40°C，用超聲波發(fā)生器功率為IOOHz的超聲波超聲處理30 60 分鐘，25°C浸泡6 12小時，蒸除提取劑，加入甲醇溶解，置于75°C水浴中加熱至液體完全蒸干，得到木脂素。
上述的提取劑為乙醇、甲醇、乙腈中的任意一種。
本發(fā)明的提取劑優(yōu)選乙腈，在提取華中五味子藤莖中的木脂素步驟2中，優(yōu)選將華中五味子藤莖粉末與乙腈混合均勻，每克華中五味子藤莖粉末中加入IOmL乙腈，密封， 升溫至40°C，用超聲波發(fā)生器功率為IOOHz的超聲波超聲處理30分鐘，25°C浸泡12小時。
本發(fā)明充分利用野生撫育中被修剪掉或廢棄掉的藤莖作為原料，成本低廉，而且對藤莖的生長年限要求不高，藤莖可以一年四季隨時獲得，從而解決了生產(chǎn)上嚴(yán)格的時間限制，減少了工作強度；采用超聲處理法提取華中五味子藤莖中的各種木脂素，操作簡單， 華中五味子藤莖中各種木脂素的提取效率高，新生藤莖提取的五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲的含量平均值分別為0. 7394%,0. 2229%,0. 1474%和0. 1237%, 多年生藤莖提取的五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲的含量平均值分別為 1. 1901%,0. 4760%,0. 2850%和 0. 1768%，可用于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。


圖1是五味子酯甲的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
圖2是五味子甲素的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
圖3是五味子乙素的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
圖4是五味子醇甲的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
具體實施方式
下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明不限于這些實施例。
實施例1
1、處理藤莖
取2010年5月赴陜西省柞水縣華中五味子野生撫育基地采集1 2年生直徑小于0. 5cm的華中五味子藤莖，自然陰干，粉碎，過60目篩，得到華中五味子藤莖粉末。
2、提取華中五味子藤莖中的木脂素
稱取華中五味子藤莖粉末5. Og置于IOOmL燒瓶中，加入50mL乙腈，混合均勻，密封，升溫至40°C，用超聲波發(fā)生器功率為IOOHz的超聲波超聲處理30分鐘，25°C浸泡12小時，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸掉乙腈，冷卻至室溫，加入5mL甲醇，用超聲波發(fā)生器功率為IOOHz的超聲波超聲5分鐘，使固體充分溶解，置于75°C水浴中加熱至液體完全蒸干，得到木脂素。
實施例2
在實施例1的處理藤莖步驟1中，取2010年5月赴陜西省柞水縣華中五味子野生撫育基地采集3年以上生直徑為0.5 2cm的華中五味子藤莖，自然陰干，粉碎，過60目蹄， 得到華中五味子藤莖粉末。其他步驟與實施例1相同，得到木脂素。
實施例3
在實施例1 2的提取華中五味子藤莖中的木脂素步驟2中，稱取華中五味子藤莖粉末5. Og置于IOOmL燒瓶中，加入25mL乙腈，混合均勻，密封，升溫至40°C，用超聲波發(fā)生器功率為IOOHz的超聲波超聲處理60分鐘，25°C浸泡10小時，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸掉乙腈， 冷卻至室溫，加入5mL甲醇，用超聲波發(fā)生器功率為IOOHz的超聲波超聲5分鐘，使固體充分溶解，置于75°C水浴中加熱至液體完全蒸干，得到木脂素。其他步驟與相應(yīng)實施例相同， 得到木脂素。
實施例4
在實施例1 2的提取華中五味子藤莖中的木脂素步驟2中，稱取華中五味子藤莖粉末5. Og置于IOOmL燒瓶中，加入IOOmL乙腈，混合均勻，密封，升溫至40°C，用超聲波發(fā)生器功率為IOOHz的超聲波超聲處理45分鐘，25°C浸泡6小時，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸掉乙腈，冷卻至室溫，加入5mL甲醇，用超聲波發(fā)生器功率為IOOHz的超聲波超聲5分鐘，使固體充分溶解，置于75°C水浴中加熱至液體完全蒸干，得到木脂素。其他步驟與相應(yīng)實施例相同，得到木脂素。
實施例5
在實施例1 4的提取華中五味子藤莖中的木脂素步驟2中，所用乙腈用等體積的乙醇替換，該步驟的其他步驟與相應(yīng)實施例相同。其他步驟與相應(yīng)實施例相同，得到木脂ο
實施例6
在實施例1 4的提取華中五味子藤莖中的木脂素步驟2中，所用乙腈用等體積的甲醇替換，該步驟的其他步驟與相應(yīng)實施例相同。其他步驟與相應(yīng)實施例相同，得到木脂ο
為了確定本發(fā)明的最佳工藝條件，發(fā)明人進(jìn)行了大量的實驗室研究試驗，各種試驗情況如下
實驗材料華中五味子新生藤莖(為1 2年，包括2年，直徑范圍小于0. 5cm,表皮綠色)、華中五味子多年生藤莖(為3年生以上藤莖，直徑范圍0. 5 2cm，表皮褐色)， 于2010年5月21日采自陜西省柞水縣華中五味子野生撫育基地，標(biāo)本保存于陜西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，藤莖陰干，干燥保存?zhèn)溆茫晃逦蹲吁ゼ?、五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲?biāo)準(zhǔn)品，由中國藥品生物制品檢定所提供；乙醇、乙腈為分析純，甲醇為色譜純。
實驗儀器LC_2010高效液相色譜儀(日本Siimadzu公司)；50g手提式高速中藥粉碎機(jī)(溫嶺市林大機(jī)械有限公司)；SL202N型藥物電子天平(上海明橋精密科學(xué)儀器有限公司)；MILLI-Q超純水儀(美國Millipore公司)；KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)；反相色譜柱島津α8(150πιπιΧ4·6πιπι，5μπι)(日本Shimadzu公司)； RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)。
1、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
精密稱取五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲標(biāo)準(zhǔn)品各ang，分別以甲醇作溶劑，定容于5mL容量瓶中，配制成0. 4mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，4°C避光保存?zhèn)溆谩?br> 將標(biāo)準(zhǔn)品溶液用0.45口!11濾器過濾到進(jìn)樣小瓶，分別進(jìn)樣2、6、10、14、18、22、26、 30 μ L，采用高效液相色譜法分別測定四種木脂素標(biāo)準(zhǔn)品溶液，色譜條件為以甲醇與蒸餾水的體積比為70 30的混合液為流動相、流速0. SmL/分鐘、檢測波長^Onm、柱溫30°C、 進(jìn)樣量8 μ L、檢測時間50分鐘，記錄色譜峰的峰面積，以各木脂素標(biāo)準(zhǔn)品溶液的進(jìn)樣量⑴ 為橫坐標(biāo)，峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，分別繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(見圖1 圖4)，計算線性回歸方程，并計算R2值，計算結(jié)果見表1。
表1五味子木脂素線性回歸方程
木脂素回歸方程R2線性范圍五味子酯甲y = 448075x+1918260. 99990. 8 12 μ g
權(quán)利要求
1.一種華中五味子藤莖中木脂素的提取方法，其特征在于它由下述步驟組成(1)處理藤莖取1 2年生直徑小于0. 5cm的華中五味子藤莖或者取3年生以上直徑為0. 5 2cm的華中五味子藤莖，自然陰干，粉碎，過60目篩，得到華中五味子藤莖粉末；(2)提取華中五味子藤莖中的木脂素將華中五味子藤莖粉末與提取劑混合均勻，每克華中五味子藤莖粉末中加入5 20mL提取劑，密封，升溫至40°C，用超聲波發(fā)生器功率為IOOHz的超聲波超聲處理30 60分鐘，25°C浸泡6 12小時，蒸除提取劑，加入甲醇溶解，置于75°C水浴中加熱至液體完全蒸干，得到木脂素；上述的提取劑為乙醇、甲醇、乙腈中的任意一種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的華中五味子藤莖中木脂素的提取方法，其特征在于所述的提取劑為乙腈。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的華中五味子藤莖中木脂素的提取方法，其特征在于在提取華中五味子藤莖中的木脂素步驟O)中，將華中五味子藤莖粉末與乙腈混合均勻，每克華中五味子藤莖粉末中加入IOmL乙腈，密封，升溫至40°C，用超聲波發(fā)生器功率為IOOHz的超聲波超聲處理30分鐘，25°C浸泡12小時。
全文摘要
一種華中五味子藤莖中木脂素的提取方法，以被修剪掉或廢棄掉的華中五味子藤莖作為原料，成本低廉，而且對藤莖的生長年限要求不高，藤莖可以一年四季隨時獲得，從而解決了生產(chǎn)上嚴(yán)格的時間限制，減少了工作強度；采用超聲處理法提取華中五味子藤莖中的各種木脂素，操作簡單，華中五味子藤莖中各種木脂素的提取效率高，新生藤莖提取的五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲的含量平均值分別為0.7394％、0.2229％、0.1474％和0.1237％，多年生藤莖提取的五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲的含量平均值分別為1.1901％、0.4760％、0.2850％和0.1768％，可用于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61K135/00GK102552408SQ20121002113
公開日2012年7月11日 申請日期2012年1月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月30日
發(fā)明者劉錦, 孫茂, 王喆之, 顧蔚 申請人:陜西師范大學(xué)