專(zhuān)利名稱(chēng)：包含合生元的營(yíng)養(yǎng)配方的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本公開(kāi)內(nèi)容涉及包含益生菌(probiotic)鼠李糖乳酸桿菌{Lactobacillusrhamnosus)\MQQl和基于碳水化合物的益生元(prebiotic)如低聚果糖、低聚半乳糖、人乳低聚糖或其組合的合生元(synbiotic)組合物，以及該組合物用于變應(yīng)性疾病的預(yù)防和/或治療的用途。
背景技術(shù)：
變應(yīng)性疾病如特應(yīng)性皮炎、變應(yīng)性鼻炎和哮喘代表了世界上慢性疾病的重要部分。例如，據(jù)估計(jì)，世界上有1.5億人患有哮喘，而死亡率已達(dá)到超過(guò)每年18萬(wàn)人。僅在美國(guó)，在2001年估計(jì)有2030萬(wàn)哮喘患者，自1980年代早期以來(lái)，哮喘患者的數(shù)量已劇增 超過(guò)60%,死亡數(shù)已加倍至一年5000人。參見(jiàn)Li等，“Allergic Asthma: Symptoms andTreatment”，世界變態(tài)反應(yīng)組織網(wǎng)站，2009年8月11日訪問(wèn)。變應(yīng)性疾病的發(fā)病在嬰兒和早期兒童期間可能是特別成問(wèn)題的。嬰兒出生時(shí)缺乏腸道菌群。由于在出生期間與母親接觸和隨后的人或配方奶喂養(yǎng)，腸道菌群迅速發(fā)展。通常，人乳喂養(yǎng)的嬰兒的腸道菌群主要由雙歧桿菌(Bifidobacteria)和乳酸桿菌(Lactobacilli)組成。雙歧桿菌和乳酸桿菌被認(rèn)為在維持良好平衡的腸道生物群中是重要的，并且已假定，雙歧桿菌和乳酸桿菌具有數(shù)種促進(jìn)健康的作用，可能在宿主的早期免疫系統(tǒng)刺激中起作用。已經(jīng)測(cè)試施用了包括乳酸桿菌ilactobaciIIus)的各種菌株的益生菌在治療和預(yù)防嬰兒變態(tài)反應(yīng)中的效應(yīng)。然而，乳酸桿菌益生菌在變態(tài)反應(yīng)預(yù)防中的作用是有爭(zhēng)議的。例如，一些研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)在懷孕和早期嬰兒期間施用時(shí)，乳酸桿菌益生菌的施用不降低特應(yīng)性皮炎的發(fā)病率，且事實(shí)上其與喘息性支氣管炎的復(fù)發(fā)事件的增加率相關(guān)(參見(jiàn)Kopp等，Pediatrics,2W^, Vol. 121，p. e850_e856，其中施用了鼠李糖乳酸桿菌GC益生菌)。也參見(jiàn) Taylor 等，J Allergy Clin. Immunol. ,2007, Vol. 119,號(hào) I, p. 184-191,其描述的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，早期應(yīng)用益生菌補(bǔ)充嗜酸乳酸桿菌ilactobacillus acidophilous)不降低特應(yīng)性皮炎的風(fēng)險(xiǎn)，并且與兒童的生命的第二個(gè)6個(gè)月時(shí)發(fā)生相關(guān)喘息的顯著增加的可能性有關(guān)；KalIiomaki 等，J Allergy Clin. Immunol. ,2007, Vol. 119,號(hào) 4, p.1019-1021描述的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，變應(yīng)性鼻炎和哮喘傾向于在兒童生命的前7年更常見(jiàn)，該兒童的母親從預(yù)產(chǎn)期前四周和出生后達(dá)6個(gè)月服用鼠李糖乳酸桿菌仏。現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)與特定基于碳水化合物的益生元結(jié)合施用于個(gè)體時(shí)，鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌不僅可用于治療和/或預(yù)防變應(yīng)性皮膚疾病，而且出乎意料并且與乳酸桿菌其它菌種的以前報(bào)道的研究相比，也可用于治療和/或預(yù)防變應(yīng)性肺病。也可以在產(chǎn)前不施用鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌和益生元的情況下實(shí)現(xiàn)這種效果。

發(fā)明內(nèi)容
本公開(kāi)內(nèi)容涉及用于治療或預(yù)防變應(yīng)性疾病的組合物。在一種實(shí)施方案中，該組合物包含含有鼠李糖乳酸桿菌HNOOl的益生菌和選自低聚果糖、低聚半乳糖、人乳低聚糖及其組合的益生元。在一種示例性實(shí)施方案中，該組合物可以是營(yíng)養(yǎng)配方或嬰兒配方。本公開(kāi)內(nèi)容進(jìn)一步涉及在需要這樣的治療或預(yù)防的個(gè)體中治療或預(yù)防變應(yīng)性疾病的方法。在本公開(kāi)內(nèi)容的一個(gè)方法中，將有效量的包含含有鼠李糖乳酸桿菌HN001的益生菌和選自低聚果糖、低聚半乳糖、人乳低聚糖及其組合的益生元的組合物經(jīng)腸道施用于個(gè)體。出乎意料地發(fā)現(xiàn)，可以在變應(yīng)性疾病發(fā)生之前或隨后將鼠李糖乳酸桿菌HN001和選自低聚果糖、低聚半乳糖、人乳低聚糖及其組合的基于碳水化合物的益生元施用于個(gè)體，以預(yù)防變應(yīng)性疾病的發(fā)生和/或降低變應(yīng)性反應(yīng)的嚴(yán)重度。



圖I的圖表顯示，如實(shí)施例中討論的實(shí)驗(yàn)中討論的，在口服施用對(duì)照食物、包含鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌的食物、包含基于低聚果糖的益生元的食物或包含鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌和基于低聚果糖的益生元(合生元組合物)的食物的豬中，在呼吸挑戰(zhàn)后各個(gè)時(shí)間PO2水平距基線的平均變化。圖2的圖表顯示，如實(shí)施例中討論的，在口服施用對(duì)照食物、包含鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌的食物、包含基于低聚果糖的益生元的食物或包含鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌和基于低聚果糖的益生元(合生元組合物)的食物的豬中，在呼吸挑戰(zhàn)后各個(gè)時(shí)間胸膜腔壓力距基線的平均變化。圖3的圖表顯示，如實(shí)施例中討論的，呼吸挑戰(zhàn)后24小時(shí)從口服施用對(duì)照食物、包含鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌的食物、包含基于低聚果糖的益生元的食物或包含鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌和基于低聚果糖的益生元(合生元組合物)的食物的豬采集的支氣管肺泡灌洗液中各種細(xì)胞因子的平均水平。圖4的圖表顯示，如實(shí)施例中討論的，與施用包含鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌的食物(■)、包含基于低聚半乳糖的益生元的食物(▲)或包含鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌和基于低聚半乳糖的益生元(合生元組合物)的食物(籲)的豬相比，施用對(duì)照食物
(O)的豬在第45天以各種劑量的抗原挑戰(zhàn)后20分鐘時(shí)的平均變應(yīng)性皮膚潮紅反應(yīng)。
具體實(shí)施方案本公開(kāi)內(nèi)容涉及包含益生菌鼠李糖乳酸桿菌HN001和選自低聚果糖、低聚半乳糖、人乳低聚糖及其組合的基于碳水化合物的益生元的合生元組合物?？梢詫⒑仙M合物配制為營(yíng)養(yǎng)配方或嬰兒配方、棒，或配制為用于施用于嬰兒、兒童或成人的補(bǔ)充劑。本公開(kāi)內(nèi)容進(jìn)一步提供了通過(guò)將本公開(kāi)內(nèi)容的合生元組合物施用于個(gè)體而在需要這樣的治療或預(yù)防的個(gè)體中治療和/或預(yù)防變應(yīng)性疾病的方法。本公開(kāi)內(nèi)容的合生元組合物和方法的這些和其它必要的或任選的要素或限制在后面詳細(xì)描述。此處所用的術(shù)語(yǔ)“嬰兒”，除非另外說(shuō)明，是指不超過(guò)大約一歲大的兒童，包括O-約4個(gè)月大的嬰兒、約4-約8個(gè)月大的嬰兒、約8-約12個(gè)月大的嬰兒，出生時(shí)少于2，500克的低出生體重嬰兒、和在小于約37周孕齡(通常是約26周-約34周孕齡)出生的早產(chǎn)(preterm)嬰兒。此處所用的術(shù)語(yǔ)“兒童”或“兒童是指不超過(guò)12歲大的兒童，包括約12個(gè)月-約12歲大的兒童。此處所用的術(shù)語(yǔ)“成人”是指成人以及約12歲和更大的兒童。此處所用的術(shù)語(yǔ)“嬰兒配方”，除非另外說(shuō)明，是指含有可能作為補(bǔ)充、主要或唯一的營(yíng)養(yǎng)源的足夠營(yíng)養(yǎng)物如蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂類(lèi)、維生素和礦物質(zhì)的為嬰兒設(shè)計(jì)的營(yíng)養(yǎng)組合物。此處所用的術(shù)語(yǔ)“營(yíng)養(yǎng)配方”，除非另外說(shuō)明，是指含有可能作為補(bǔ)充、主要或唯一的營(yíng)養(yǎng)源的足夠營(yíng)養(yǎng)物如蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂類(lèi)、維生素、礦物質(zhì)和電解質(zhì)的為嬰兒、幼兒、兒童、成人或其組合設(shè)計(jì)的營(yíng)養(yǎng)組合物。此處所用的術(shù)語(yǔ)“即食(ready-to-feed) ”，除非另外說(shuō)明，是指適合施用的液體形式的營(yíng)養(yǎng)配方，包括重構(gòu)的粉末、稀釋的濃縮物和制備的液體。此處所用的“益生元”，除非另外說(shuō)明，是指選擇性刺激消化系統(tǒng)中有益于宿主健 康的一種或多種細(xì)菌物種的生長(zhǎng)和/或活性的基本上不消化的食物組分。此處所用的術(shù)語(yǔ)“益生菌”，除非另外說(shuō)明，是指當(dāng)以足夠量施用時(shí)賦予宿主健康益處的活的或死的微生物。此處所用的益生菌的例子是鼠李糖乳酸桿菌HN001。此處所用的術(shù)語(yǔ)“難消化的低聚糖”，除非另外說(shuō)明，是指通過(guò)人上消化道(小腸和胃)中存在的酸或消化酶的作用在腸道中不消化或僅僅部分消化、但是被人腸道菌群發(fā)酵的糖類(lèi)。此處所用的所有百分比、份和比例是以總組合物的重量計(jì)，除非另外說(shuō)明。當(dāng)所有這種重量涉及所列出的組分時(shí)，它們是基于活性水平計(jì)，因此不包括可能包含在商業(yè)獲得的物質(zhì)中的溶劑或副產(chǎn)物，除非另外說(shuō)明。無(wú)論是否特別公開(kāi)，此處所用的數(shù)值范圍意在包括在該范圍內(nèi)包含的每個(gè)數(shù)值和數(shù)值亞組。而且，這些數(shù)值范圍應(yīng)當(dāng)被解釋為為該范圍內(nèi)任何數(shù)值或數(shù)值亞組涉及的權(quán)利要求提供支持。例如，1-10的公開(kāi)內(nèi)容應(yīng)當(dāng)被解釋為支持2-8、3-7、5-6、1-9、3. 6-4. 6、
3.5-9. 9等等范圍。對(duì)本公開(kāi)內(nèi)容的單數(shù)特征或限定的所有提及應(yīng)當(dāng)包括相應(yīng)的復(fù)數(shù)特征或限定，反之亦然，除非其中進(jìn)行提及的上下文另外說(shuō)明或清楚地作相反暗示。此處所用的方法或過(guò)程步驟的全部組合可以任何順序進(jìn)行，除非其中進(jìn)行所提到的組合的上下文另外說(shuō)明或清楚地作相反暗示。本公開(kāi)內(nèi)容的組合物，包括營(yíng)養(yǎng)和嬰兒配方，也可以基本上不含任何任選或所選的在此所述的必需組分或特征，條件是剩下的組合物仍然包含全部的在此所述的需要的組分或特征。在此上下文中，除非另外說(shuō)明，術(shù)語(yǔ)“基本上不含”是指所選組合物包含少于功能量的任選的組分，通常少于0. I %重量,還包括0%重量的這種任選或所選的必需組分。本公開(kāi)內(nèi)容的組合物、營(yíng)養(yǎng)配方、嬰兒配方和相應(yīng)的方法可以包含此處所述的本公開(kāi)內(nèi)容的必需要素和限制，以及在此所述的或者另外用于營(yíng)養(yǎng)配方應(yīng)用中的任何額外的或任選的組分、成分或限制；由它們組成；或基本上由它們組成。益生菌
本公開(kāi)內(nèi)容的合生元組合物包括益生菌，尤其是益生菌鼠李糖乳酸桿菌菌株HN001 (Z.rhamnosus HNOOI),也被稱(chēng)為鼠李糖乳酸桿菌DR20。已驚訝地發(fā)現(xiàn)，當(dāng)與此處所述的特定的基于碳水化合物的益生元結(jié)合經(jīng)腸道施用于個(gè)體時(shí)，益生菌鼠李糖乳酸桿菌HN001在個(gè)體中治療和/或預(yù)防變應(yīng)性疾病中是有效的。
鼠李糖乳酸桿菌HNOOl是異型發(fā)酵細(xì)菌，它是革蘭氏陽(yáng)性的、非運(yùn)動(dòng)的、非孢子形成的、過(guò)氧化氫酶陰性的、兼性厭氧桿狀菌，表現(xiàn)出371°C的最適生長(zhǎng)溫度和6. 0-6.5的最適pH。參見(jiàn)W02004/031389，其在此處被完整地通過(guò)引用并入。美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6，379，663 (在此處被完整地通過(guò)引用并入)中更詳細(xì)地描述了鼠李糖乳酸桿菌HN001。之前已將鼠李糖乳酸桿菌HN001保藏在澳大利亞政府分析實(shí)驗(yàn)室(AGAL)，保藏號(hào)為NM97/09514，由新西蘭乳品局(New Zealand Dairy Board),現(xiàn)在被稱(chēng)為 Fonterra (Auckland, New Zealand)在1997年8月18日保藏。鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌可以作為活細(xì)胞或非活細(xì)胞提供，盡管其通常優(yōu)選作為活細(xì)胞提供；即到達(dá)攝取益生菌的個(gè)體的腸道的活細(xì)胞。益生菌可以是各種形式，包括，例如，凍干細(xì)胞、濕細(xì)胞、培養(yǎng)液、酸乳酪或其組合。在一種實(shí)施方案中，優(yōu)選凍干細(xì)胞。本公開(kāi)內(nèi)容的合生元組合物可以是粉末、液體或棒形式，可以被包括進(jìn)下文所述的營(yíng)養(yǎng)配方中。組合物可以包括當(dāng)與本公開(kāi)內(nèi)容的益生元結(jié)合經(jīng)腸道施用于個(gè)體時(shí)有效治 療和/或預(yù)防變應(yīng)性疾病的任何量的鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌。典型地，組合物將包含在攝取組合物后為個(gè)體提供每日劑量為約IO6集落形成單位(cfu)-約IO12 cfu、或約IO6cfu-約101° cfu、或約IO8 cfu-約IO12 cfu、或約IO8 cfu-約101° cfu的益生菌的足量益生菌。在一些實(shí)施方案中，組合物將包含在攝取組合物后足以為個(gè)體提供每日劑量為約IO6cfu、或約 IO7 cfu、或約 IO8 cfu、或約 IO9 cfu、或約 IO10 cfu、或約 IO11 cfu 或約 IO12 cfu的益生菌。當(dāng)合生元組合物被配制為營(yíng)養(yǎng)配方時(shí)，營(yíng)養(yǎng)配方可以包含約IO4Cfu-約IOltlCfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方、或約IO4Cfu-約IO9 cfu/克干重營(yíng)養(yǎng)配方、或約IO4Cfu-約IO8Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方、或約IO4Cfu-約IO7Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方、或約IO4Cfu-約IO6Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方或約IO4Cfu-約IO5Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方。在另一種實(shí)施方案中，營(yíng)養(yǎng)配方可以包含約IO6Cfu-約IO8Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方或約IO6Cfu-約IO7Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方。在另一種實(shí)施方案中，營(yíng)養(yǎng)配方可以包含約IO4Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方、或約IO5Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方、或約IO6Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方、或約IO7Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方、或約IO8Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方、或約IO9Cfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方或約IOiciCfu益生菌/克干重營(yíng)養(yǎng)配方。益牛元
本公開(kāi)內(nèi)容的合生元組合物包括至少一種基于碳水化合物的益生元。本公開(kāi)內(nèi)容的益生元是選擇性刺激消化系統(tǒng)中細(xì)菌、尤其是鼠李糖乳酸桿菌HN001的生長(zhǎng)和/或活性的難消化的低聚糖。已令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，本公開(kāi)內(nèi)容的益生元與鼠李糖乳酸桿菌HN001益生菌結(jié)合作用以降低變應(yīng)性疾病的發(fā)病率或嚴(yán)重度并預(yù)防變應(yīng)性疾病的發(fā)生。本公開(kāi)內(nèi)容的基于碳水化合物的益生元選自長(zhǎng)鏈低聚果糖、短鏈低聚果糖(通常被稱(chēng)為低聚果糖)、含半乳糖的低聚糖(通常被稱(chēng)為低聚半乳糖)、人乳低聚糖及其組合。低聚果糖(FOS),此處也被稱(chēng)為基于低聚果糖的益生元,是包含優(yōu)選通過(guò)β (2, I)和/或β (2,6)糖苷鍵連接的β_連接的果糖單元的糖。合適的低聚果糖的例子包括菊粉、果聚糖、graminan。通常,菊粉、果聚糖、graminan在它們的果糖鏈中存在的分支的數(shù)量和連接個(gè)別的果糖單元的鍵的類(lèi)型上有差別。例如，果聚糖通常由典型地由β (2-6)鍵連接的果糖單元鏈組成。盡管果聚糖可以以直鏈碳水化合物存在，它們更典型地由分支的果糖鏈組成。相反，菊粉型通常由典型地由P (2-1)鍵連接的果糖單元的直鏈組成。Graminan或混合型果聚糖可以在果糖單元之間包含P (2-1)和P (2-6)連接鍵。本公開(kāi)內(nèi)容的低聚果糖在還原末端優(yōu)選包含3 (2，I)糖苷連接的葡萄糖。低聚果糖可被發(fā)現(xiàn)在自然界廣泛分布。例如，菊粉型可作為植物儲(chǔ)存碳水化合物被發(fā)現(xiàn)，這是菊科植物共有的。菊粉型可以源自許多植物，如菊芋(Jerusalem artichoke)和大麗花莖(Dahlia tuber)，是一些藥草如牛蒡根、蒲公英根、土木香根、菊苣根和黨參等等的主要成分。低聚果糖也可以從如Raftilose (Orafti)、Actilight (Beghin-Meiji)或Synergy I (Orafti)等等商業(yè)獲得。本公開(kāi)內(nèi)容的低聚果糖典型地具有2-約20的聚合度。該低聚果糖優(yōu)選具有2-約10或者甚至2-7的聚合度。應(yīng)當(dāng)理解的是，不是所有存在于本公開(kāi)內(nèi)容的組合物中的低聚果糖都需要具有相同的聚合度。例如，術(shù)語(yǔ)“低聚果糖”或“F0S”也可以是指具有不同的鏈長(zhǎng)度、即長(zhǎng)的鏈長(zhǎng)度和/或短的鏈長(zhǎng)度的低聚果糖的混合物。合適的益生元的另一個(gè)例子是包含半乳糖的低聚糖，通常被稱(chēng)為低聚半乳糖(GOS)。GOS是包含通過(guò)P (1,4)和/或P (1,6)糖苷鍵連接的一個(gè)或多個(gè)半乳糖分子和一個(gè)葡萄糖分子的難消化的低聚糖。本公開(kāi)內(nèi)容的組合物中使用的GOS可以選自￠-低聚半乳糖、a-低聚半乳糖和(阿拉伯糖_)半乳聚糖。在一些實(shí)施方案中，GOS可能是反式低聚半乳糖(TOS)。GOS可以用下式表示[半乳糖]n-葡萄糖，其中，n是1-20的整數(shù)，優(yōu)選選自2、3、4、5、6、7、8、9或10。術(shù)語(yǔ)“低聚半乳糖”或“G0S”也可以是指具有不同的鏈長(zhǎng)度、SP長(zhǎng)的鏈長(zhǎng)度和/或短的鏈長(zhǎng)度的低聚半乳糖的混合物。低聚半乳糖也可以從如Vivinal GOS (Friesland)和 GOS (Clasado)商業(yè)獲得。合適的益生元的另一個(gè)例子是人乳低聚糖。術(shù)語(yǔ)“人乳低聚糖”或“HM0”通常是指在人乳中發(fā)現(xiàn)的許多復(fù)雜的碳水化合物。乳低聚糖中發(fā)現(xiàn)的單體通常包括D-葡萄糖(Glc)、D-半乳糖(Gal)、N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAC)、L-巖藻糖(Fuc)和唾液酸[N-乙酰神經(jīng)氨酸(NeuAc)]?？梢酝ㄟ^(guò)將以P 1-3或0 1-4鍵連接的GlcNAc殘基連接至Gal殘基、隨后進(jìn)一步以￠1-3或P 1-4鍵添加Gal而實(shí)現(xiàn)這些單體的伸長(zhǎng)。大多數(shù)HMO在它們的還原末端攜帶乳糖。從這些單體可以形成大量的核心結(jié)構(gòu)?？梢杂捎谌樘前贰uc和/或NeuAc的連接而發(fā)生進(jìn)一步的變化。可包括在本公開(kāi)內(nèi)容的組合物中的合適的HMO的例子包括乳-N-四糖、乳-N-新四糖、乳-N-巖藻五糖I、乳-N-巖藻五糖II、乳-N-巖藻五糖III、乳-N-巖藻五糖V、乳_(kāi)N_六糖、對(duì)_乳-N-六糖、乳-N-新六糖、對(duì)_乳-N-新六糖、單巖操糖基乳-N-六糖II、同分異構(gòu)的巖藻糖基化的乳-N-六糖(I)、單巖藻糖基乳-N-六糖、同分異構(gòu)的巖藻糖基化的乳-N-六糖(3)、同分異構(gòu)的巖藻糖基化的乳-N-六糖(2)、二巖藻糖基_對(duì)-乳-N-新六糖、二巖操糖基_對(duì)-乳_(kāi)N_六糖、二巖操糖基乳-N-六糖、乳-N-新八糖、對(duì)_乳-N-八糖、異_乳_(kāi)N_八糖、乳-N-八糖、單巖操糖基乳_(kāi)新八糖、單巖操糖基乳-N-八糖、二巖操糖基乳-N-八糖I、二巖藻糖基乳-N-八糖II、二巖藻糖基乳-N-新八糖II、二巖藻糖基乳_(kāi)N_新八糖I、乳-N-十糖(decaose)、二巖操糖基乳-N-新八糖、二巖操糖基乳-N-八糖、三巖藻糖基乳_(kāi)異-乳-N-八糖及其組合。美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?009/0098240 (其在此處被完整地通過(guò)引用并入)中更完全地描述了這些HM0。本公開(kāi)內(nèi)容的組合物中可包括的其它合適的HMO的例子包括乳N-二巖藻-六糖II、唾液酰a (2-3)乳糖、唾液酰a (2-6)乳糖、唾液酰-乳-N-四糖a、唾液酰-乳-N-四糖b、唾液酰-乳-N-四糖C、唾液酰-巖藻糖基-乳_(kāi)N_四糖I、唾液酸-巖操糖基_乳-N-四糖II和二唾液酸_乳-N-四糖。HMO可以具有2-約20的聚合度。HMO優(yōu)選具有2_約10的聚合度。術(shù)語(yǔ)“人乳低聚糖”或“ΗΜ0”也可以是指具有不同鏈長(zhǎng)度的人乳低聚糖的混合物。HMO可以用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何數(shù)量來(lái)源和方法得到。例如，HMO可以用本領(lǐng)域已知的方法從人乳中純化。從合并的母乳中提取低聚糖的一種這樣的方法需要在4°C5，OOOxg離心乳30分鐘并去除脂肪。然后可以添加乙醇以沉淀蛋白質(zhì)。離心以沉積沉淀的蛋白質(zhì)后，收集獲得的溶劑并通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥?？梢杂昧姿猁}緩沖液將獲得的物質(zhì)調(diào)整至6. 8的合適的pH并添加β-半乳糖苷酶。孵育后，用氯仿-甲醇提取溶液并收集水層。用石墨化的無(wú)孔碳盒的固相提取法通過(guò)HMO的選擇性吸附去除單糖和二糖。可以用水-乙 腈(60:40)以及O. 01%三氟乙酸洗脫保留的低聚糖?？梢杂帽绢I(lǐng)域已知的方法如毛細(xì)管電泳、HPLC (如，具有脈沖安培檢測(cè)的高效陰離子交換色譜；HPAEC-PAD)和薄層色譜進(jìn)一步分離個(gè)別ΗΜ0。參見(jiàn)，例如，美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?009/0098240。另外,可以使用酶方法來(lái)合成MO。通常,可使用將底物轉(zhuǎn)換為任何HMO結(jié)構(gòu)(或它們的中間體)的任何低聚糖生物合成酶或分解代謝酶(以相反運(yùn)行的反應(yīng))來(lái)制備ΗΜ0。HMO合成的另一種方法需要來(lái)自非人類(lèi)的哺乳動(dòng)物乳源(如牛、綿羊、水牛、山羊等)的包含乳-N- 二糖或乳-N-四糖的低聚糖骨架的化學(xué)或酶法合成或分離以及按需要將乳-N- 二糖、巖藻糖和唾液酸單元酶法添加以得到HMO結(jié)構(gòu)。這種低聚糖修飾酶的例子包括唾液酸酶、唾液酸O-乙酰酯酶、N-乙酰神經(jīng)氨酸裂合酶、N-乙酰-β -氨基己糖苷酶、β -半乳糖苷酶、N-乙酰甘露糖胺-6-磷酸2 -差向異構(gòu)酶、a -L-巖藻糖苷酶和巖藻糖異化途徑蛋白等等，在適當(dāng)條件下可將其用于催化生物合成反應(yīng)。另外，常規(guī)的化學(xué)方法可用于將以前存在的低聚糖從頭有機(jī)合成或轉(zhuǎn)化為HMO結(jié)構(gòu)。美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?009/0098240中更詳細(xì)地描述了這些用于合成HMO的技術(shù)。在一種示例性實(shí)施方案中，與鼠李糖乳酸桿菌ΗΝ001組合使用的益生元是低聚半乳糖、低聚果糖和/或人乳低聚糖中的兩種或更多種的組合。本公開(kāi)內(nèi)容的合生元組合物可以是粉末或液體形式，和/或可以被包括進(jìn)下文所述的營(yíng)養(yǎng)或嬰兒配方中。組合物可以包括當(dāng)與鼠李糖乳酸桿菌ΗΝ001益生菌結(jié)合經(jīng)腸道施用于個(gè)體時(shí)有效治療和/或預(yù)防變應(yīng)性疾病的任何量的益生元。典型地，該組合物包含為攝取組合物后的個(gè)體提供約O. 4克益生元/天-約9. 2克益生元/天、或約I. 5克益生元/天-約8. 5克益生元/天、或約I. 5克益生元/天-約7. O克益生元/天、或約I. 5克益生元/天-約6. O克益生元/天、或約I. 5克益生元/天-約4. O克益生元/天或約I. 5克益生元/天-約2. O克益生元/天的足量的益生元。在另一種實(shí)施方案中，該組合物包含為攝取組合物后的個(gè)體提供約3. O克益生元/天-約6. O克益生元/天、或約3. O克益生元/天-約5. O克益生元/天或約3. O克益生元/天-約4. O克益生元/天的足量的益生元。在另一種實(shí)施方案中，該組合物包含為攝取組合物后的個(gè)體提供約I. 5克益生元/天、或2. O克益生元/天、或2. 5克益生元/天、或3. O克益生元/天、或3. 5克益生元/天、或
4.O克益生元/天、或4. 5克益生元/天、或5. O克益生元/天、或5. 5克益生元/天、或6. O克益生元/天、或6. 5克益生元/天、或7. O克益生元/天、或7. 5克益生元/天、或8. O克益生元/天、或8. 5克益生元/天、或9. O克益生元/天或9. 2克益生元/天的足量的益生J Li o當(dāng)合生元組合物被配制為營(yíng)養(yǎng)或嬰兒配方時(shí)，營(yíng)養(yǎng)或嬰兒配方可以包含約0.35克益生元/100克營(yíng)養(yǎng)配方-約9. 2克益生元/100克營(yíng)養(yǎng)配方、或約I. 5克益生元/100克營(yíng)養(yǎng)配方-約7. 0克益生元/100克營(yíng)養(yǎng)配方、或約I. 5克益生元/100克營(yíng)養(yǎng)配方-約6. 0克益生元/100克營(yíng)養(yǎng)配方，優(yōu)選約3. 0克益生元/100克營(yíng)養(yǎng)配方-約6. 0克益生元/100克營(yíng)養(yǎng)配方。營(yíng)養(yǎng)物
可以將本公開(kāi)內(nèi)容的合生元組合物摻入可以由人嬰兒或成人或動(dòng)物食用的任何食物或飲料中。因此，一方面，將本公開(kāi)內(nèi)容的組合物配制為營(yíng)養(yǎng)或嬰兒配方。本公開(kāi)內(nèi)容的營(yíng)養(yǎng)或嬰兒配方可以包含滿足意圖用戶的目標(biāo)膳食需求的足夠種類(lèi)和數(shù)量的營(yíng)養(yǎng)物。因此，這些營(yíng)養(yǎng)或嬰兒配方除上面討論的益生菌和益生元之外可以包含蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂類(lèi)成分(均為有機(jī)的或無(wú)機(jī)的)。營(yíng)養(yǎng)或嬰兒配方也可以包括維生素、礦物質(zhì)或適合用于營(yíng) 養(yǎng)配方中的其它成分。例如，當(dāng)營(yíng)養(yǎng)配方是成人配方時(shí)，蛋白成分可以占所述營(yíng)養(yǎng)配方的總含熱量(caloric content)的約10%-約80% ;碳水化合物成分可以占所述營(yíng)養(yǎng)配方的總含熱量的約10%-約70% ;脂類(lèi)成分可以占所述營(yíng)養(yǎng)配方的總含熱量的約5%-約50%.營(yíng)養(yǎng)配方可以是液體或粉末形式。這些范圍僅作為示例提供，不是用來(lái)限制的。當(dāng)營(yíng)養(yǎng)配方是非成人配方如嬰兒配方時(shí)，非成人配方包括那些實(shí)施方案，其中蛋白成分可以占所述營(yíng)養(yǎng)配方的含熱量的約7. 5%-約25% ;碳水化合物成分可以占所述營(yíng)養(yǎng)配方的總含熱量的約35%-約50% ;脂類(lèi)成分可以占所述營(yíng)養(yǎng)配方的總含熱量的約30%-約60%。這些范圍僅作為示例提供，不是用來(lái)限制的。其它合適的范圍在下表中注明。
權(quán)利要求
1.用于治療或預(yù)防變應(yīng)性疾病的組合物，其包含 含有鼠李糖乳酸桿菌{Lactobacillus rhamnosus) HNOOI的益生菌，和 選自低聚果糖、低聚半乳糖、人乳低聚糖及其組合的益生元。
2.權(quán)利要求I的組合物，其中所述益生元是低聚果糖。
3.權(quán)利要求I的組合物，其中所述益生元是低聚半乳糖。
4.權(quán)利要求I的組合物，其中所述益生元是人乳低聚糖。
5.權(quán)利要求I的組合物，其包含約I.5克益生元/100克組合物至約9. 2克益生元/100克組合物的量的益生元。
6.權(quán)利要求I的組合物,其包含約IO4cfu益生菌/克組合物至約101° cfu益生菌/ 克組合物的量的益生菌。
7.權(quán)利要求I的組合物，其進(jìn)一步包含維生素、礦物質(zhì)、碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)中的至少一種。
8.權(quán)利要求7的組合物，其包含作為總熱量的百分比的約10%至約70%的碳水化合物、約5%至約50%的脂類(lèi)成分和約10%至約80%的蛋白質(zhì)。
9.權(quán)利要求I的組合物，其中所述組合物是營(yíng)養(yǎng)配方。
10.權(quán)利要求9的組合物，其中所述營(yíng)養(yǎng)配方是嬰兒配方。
11.權(quán)利要求9的組合物，其中所述營(yíng)養(yǎng)配方是粉末化的營(yíng)養(yǎng)配方。
12.權(quán)利要求9的組合物，其中所述營(yíng)養(yǎng)配方選自即食的液體配方、補(bǔ)充劑和棒。
13.治療或預(yù)防需要這種治療或預(yù)防的個(gè)體中的變應(yīng)性疾病的方法，所述方法包括將包含含有鼠李糖乳酸桿菌HN001的益生菌和選自低聚果糖、低聚半乳糖、人乳低聚糖及其組合的益生元的有效量的組合物經(jīng)腸道施用于所述個(gè)體。
14.權(quán)利要求13的方法，其中所述變應(yīng)性疾病是變應(yīng)性肺病。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述變應(yīng)性肺病選自哮喘、枯草熱和過(guò)敏性肺炎。
16.權(quán)利要求16的方法，其中所述變應(yīng)性肺病是哮喘。
17.權(quán)利要求13的方法，其中所述變應(yīng)性疾病是變應(yīng)性皮膚病。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述變應(yīng)性皮膚病選自變應(yīng)性鼻炎、枯草熱、接觸性皮炎、濕疹和食物變態(tài)反應(yīng)。
19.權(quán)利要求13的方法，其中在個(gè)體暴露于變應(yīng)原之前施用所述組合物。
20.權(quán)利要求13的方法，其中所述組合物是營(yíng)養(yǎng)配方。
全文摘要
本公開(kāi)內(nèi)容涉及包含益生菌鼠李糖乳酸桿菌(Lactobacillusrhamnosus)HN001和基于碳水化合物的益生元如低聚果糖、低聚半乳糖、人乳低聚糖或其組合的合生元組合物，以及該組合物用于變應(yīng)性疾病的預(yù)防和/或治療的用途。在一個(gè)實(shí)施方案中，包含益生菌和益生元的合生元組合物可以包含在營(yíng)養(yǎng)組合物或嬰兒配方中。
文檔編號(hào)A61K31/702GK102985105SQ201180014101
公開(kāi)日2013年3月20日 申請(qǐng)日期2011年1月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月19日
發(fā)明者D.J.托馬斯, R.H.巴克 申請(qǐng)人:雅培制藥有限公司