專利名稱：具有防曬作用的天然植物提取物及制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域及化妝品技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有防曬作用的天然植物提取物及制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
太陽(yáng)輻射到地球表面的光線中，其中紫外線中波Q90 320nm)和紫外線長(zhǎng)波 (320 400nm)對(duì)人體皮膚作用很大。UVA波段，波長(zhǎng)320 420nm，又稱為長(zhǎng)波黑斑效應(yīng)紫外線。它有很強(qiáng)的穿透力，可以穿透大部分透明的玻璃以及塑料。日光中含有的長(zhǎng)波紫外線超過(guò)98%能穿透臭氧層和云層到達(dá)地球表面，UVA可以直達(dá)肌膚的真皮層，破壞膠原蛋白、彈性纖維組織等皮膚內(nèi)部的微細(xì)結(jié)構(gòu)，產(chǎn)生皺紋和幼紋，令皮膚松弛衰老。在陽(yáng)光產(chǎn)生的紫外線中，UVA是UVB的15 倍，是令皮膚曬黑的主要原因。它能使皮膚里結(jié)合水的透明質(zhì)酸含量減少，令皮膚干燥，力口速黑色素形成，使膚色變黑，同時(shí)也是弓丨起皮膚癌的重要原因。UVB波段，波長(zhǎng)275 320nm，又稱為中波紅斑效應(yīng)紫外線。中等穿透力，它的波長(zhǎng)較短的部分會(huì)被透明玻璃吸收，日光中含有的中波紫外線大部分被臭氧層所吸收，只有不足2%能到達(dá)地球表面，在夏天和午后會(huì)特別強(qiáng)烈。UVB紫外線對(duì)人體具有紅斑作用，能促進(jìn)體內(nèi)礦物質(zhì)代謝和維生素D的形成，但長(zhǎng)期或過(guò)量照射會(huì)令皮膚曬黑，并引起紅腫脫皮。因此，研究開發(fā)各種防曬化妝用品，已成為世界關(guān)注的課題。目前防曬化妝品中的防曬劑一般可分為三類(1)物理防曬劑即紫外線屏蔽劑，是通過(guò)反射及散射紫外線對(duì)皮膚起保護(hù)作用， 主要為無(wú)機(jī)粒子，其典型代表為納米級(jí)的二氧化鈦、氧化鋅粒子。但這類防曬劑具有用量大、防曬效果差等缺點(diǎn)，過(guò)多使用易堵塞毛孔，影響皮脂腺和汗腺的分泌，造成皮膚的新疾病等不良后果。(2)化學(xué)吸收劑這種防曬劑本身對(duì)紫外線有較強(qiáng)的吸收能力，可減少或完全吸收紫外線，使人體皮膚免受傷害，但這類防曬劑大多是刺激性和光敏性物質(zhì)，用量大時(shí)易導(dǎo)致皮膚過(guò)敏，存在不安全因素和對(duì)UVA區(qū)紫外線的吸收防護(hù)不夠完全等問(wèn)題。(3)天然防曬劑這種防曬劑是從天然植物中提取的，天然防曬劑能有效吸收紫外線、清除自由基從而達(dá)到修復(fù)皮膚、延緩老化的作用，且安全性好。中國(guó)有豐富的中草藥資源，人們已發(fā)現(xiàn)一些中草藥不僅具有吸收紫外線防曬能力，而且兼有抗菌、增白、消炎等作用，且對(duì)皮膚作用溫和、刺激性小，如黃芩、蘆薈、槐米等， 是目前被公認(rèn)的天然防曬劑。所以，開發(fā)以中國(guó)傳統(tǒng)中草藥為基礎(chǔ)的天然植物防曬產(chǎn)品具有很好的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的首要目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，提供一種具有防曬作用的天然植物提取物。
本發(fā)明的另一目的在于提供所述具有防曬作用的天然植物提取物的制備方法。
本發(fā)明的另一目的在于提供所述具有防曬作用的天然植物提取物的應(yīng)用。
本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種具有防曬作用的天然植物提取物，以包含下列按質(zhì)量份計(jì)的原料制備而成
卷柏 50 100份
玉蘭 20 60份；
所述的原料，還包含10 50質(zhì)量份雪蓮花和5 25質(zhì)量份茉莉；優(yōu)選包含30 45質(zhì)量份雪蓮花和10 20質(zhì)量份茉莉；
所述的具有防曬作用的天然植物提取物，更優(yōu)選為以包含下列按質(zhì)量份計(jì)的原料制備而成
卷柏 75 80份玉蘭 45 55份雪蓮花30 45份茉莉 10 20份；
上述植物提取物的提取方法、提取過(guò)程均沒有限定，例如可采用溶劑提取法，溶劑為水或乙醇、超聲波提取、超臨界提取等。
本發(fā)明所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物的制備方法，優(yōu)選包括如下步驟
(I)將50 100質(zhì)量份卷柏和20 60質(zhì)量份玉蘭分別干燥、粉碎過(guò)篩，得到粗粉；
(2)首先將粉碎后的玉蘭加入萃取釜，采用CO2超臨界流體萃取，提取溫度35 55°C，提取壓力20 50Mpa，提取時(shí)間為I 3h，CO2流速為10 25L/h ;分離溫度35 55°C，分離壓力為3 IOMpa下收集揮發(fā)油及油脂提取物；
(3)接著在步驟(2)經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(I)粉碎后的卷柏和作為夾帶劑的乙醇，乙醇的用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量10% ;接著于提取溫度35 55°C，提取壓力20 40Mpa，提取時(shí)間I 3h，CO2流速10 25L/h，再次進(jìn)行CO2超臨界流體萃取； 分離溫度35 55°C,分離壓力6 13Mpa ；
(4)將步驟(3)經(jīng)提取后的藥渣，加水煎煮兩次，合并濾液，濃縮，冷卻至40°C以下；接著，在攪拌狀態(tài)下，加入乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá)質(zhì)量百分比60% 65% ；
(5)密閉放置至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，得到濃縮液；
(6)將步驟⑵、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，為具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物；
本發(fā)明所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物的制備方法，更優(yōu)選包括如下步驟
(I)將50 100質(zhì)量份卷柏、20 60質(zhì)量份玉蘭、10 50質(zhì)量份雪蓮花和5 25質(zhì)量份茉莉分別干燥、粉碎過(guò)篩,得到粗粉；
(2)首先將粉碎后的玉蘭和茉莉放入萃取釜，采用(X)2超臨界流體萃取，提取溫度 35 55°C，提取壓力20 50Mpa，提取時(shí)間為1 3h，CO2流速為10 25L/h ；分離溫度 35 55°C，分離壓力為3 IOMpa下收集揮發(fā)油及油脂提取物；(3)接著在步驟( 經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(1)粉碎后的卷柏、雪蓮花和作為夾帶劑的乙醇，乙醇的用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量10% ；接著于提取溫度35 550C，提取壓力20 40Mpa，提取時(shí)間1 汕，CO2流速10 25L/h，再次進(jìn)行CO2超臨界流體萃??；分離溫度35 55°C，分離壓力6 13Mpa ；(4)將步驟C3)經(jīng)提取后的藥渣，加水煎煮兩次，合并濾液，濾液濃縮至原體積的 1/3，冷卻至40°C以下；接著，在攪拌狀態(tài)下，加入無(wú)水乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá)60 65% ；(5)密閉放置1 至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，得到濃縮液；(6)將步驟⑵、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，為具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物；步驟(1)中所述的顆粒的粒度優(yōu)選為能過(guò)10目篩；步驟O)中所述的提取的條件優(yōu)選為提取溫度45°C，提取壓力30Mpa，提取時(shí)間 150min，CO2流速18L/h，分離溫度45°C，分離壓力為6Mpa ；步驟(3)中所述的乙醇的濃度優(yōu)選為體積百分比95%的乙醇；步驟(3)中所述的提取的條件優(yōu)選為提取溫度50°C，提取壓力30Mpa，提取時(shí)間 150min，CO2流速18L/h，分離溫度50°C，分離壓力8Mpa ；步驟中所述的水煮提取的條件優(yōu)選為水的質(zhì)量用量相當(dāng)于所述的藥渣質(zhì)量的5倍；提取兩次，每次1小時(shí)；步驟(5)中所述濃縮液的濃縮程度優(yōu)選為于70°C檢測(cè)，以水的密度為基準(zhǔn)，相對(duì)密度為1. 10 1. 20 ；步驟(6)中所述的天然植物提取物為黃棕色的澄清液體，不渾濁、無(wú)沉淀物、無(wú)懸浮物，有植物特有的香味，無(wú)刺激性氣味；所述的復(fù)方天然植物提取物在防曬化妝品中應(yīng)用；本發(fā)明在防曬護(hù)膚品中上述植物提取物的配合用量為0. 1 20% (w/w)，優(yōu)選用量為2 8% (w/w)；在加入本發(fā)明的防曬護(hù)膚品中，除上述必需成分以外，可以根據(jù)需要適當(dāng)?shù)嘏浜贤ǔＴ诨瘖y品中使用的成分。例如，其它的美白劑、保濕劑、抗氧化劑、表面活性劑、醇類、水等基質(zhì)成分；本發(fā)明所述的防曬護(hù)膚品的劑型沒有特別限定，可以為溶液、懸浮液、乳狀液、霜齊 、膏狀、凝膠、奶液、護(hù)膚液、粉、香皂、油、干粉、粉底液、濕粉或噴劑?！N防曬乳，含有以下按質(zhì)量百分比計(jì)的成分甲氧基肉桂酸乙基己酯3 %、 12-15烷基苯甲酸酯6%、二氧化鈦2%、水楊酸乙基己酯5%、聚甘油-10肉豆蔻酸酯1 %、 甘油硬脂酸酯3%、環(huán)聚二甲基硅氧烷3%、二乙氨羥苯甲?；郊姿峒乎?. 5%、4_甲基芐亞基樟腦2%、鯨蠟醇1%、VP/十六碳烯共聚物1%、聚二甲基硅氧烷1%、丁二醇5%、海藻糖1%、歐洲李果提取物1%、鯨蠟醇磷酸酯鉀2.5%、煙酰胺0.5%、泛醇0.3%、黃原膠 0.2%、香精0. 1%、甘草酸二鉀0.1%、EDTA 二鈉0. 1%、甲基異噻唑啉酮0.01%和權(quán)利要求I 3任一項(xiàng)所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物5% ；
該防曬乳的制備過(guò)程如下
(I)首先將丁二醇5 % (w/w)、海藻糖I % (w/w)、歐洲李果提取物I % (w/w)、鯨蠟醇磷酸酯鉀2. 5% (w/w)、煙酰胺0. 5% (w/w)、泛醇0. 3% (w/w)、黃原膠0. 2% (w/w)和去離子水53. 69% (w/w)混合,加熱至85°C ;往其中加入香精0. 1% (w/w)、甘草酸二鉀0. I % (w/w)、EDTA 二鈉0. I % (w/w)和甲基異噻唑啉酮0. 01 % (w/w)，攬拌均勻；
⑵將氧基肉桂酸乙基己酯3% (w/w)、12-15燒基苯甲酸酯6% (w/w)、二氧化鈦 2% (w/w)、水楊酸乙基己酯5% (w/w)、聚甘油-10肉豆蘧酸酯I % (w/w)、甘油硬脂酸酯3% (w/w)、環(huán)聚二甲基硅氧烷3% (w/w)、二乙氨羥苯甲?；郊姿峒乎?. 5% (w/w)、4_甲基芐亞基樟腦2% (w/w)、鯨蠟醇1% (w/w)、VP/十六碳烯共聚物1% (w/w)和聚二甲基硅氧烷 1% (w/w)混合,加熱至85°C ；
(3)將步驟⑵得到的物料加入步驟⑴得到的物料，均質(zhì)，冷卻至45°C加入權(quán)利要求I 3任一項(xiàng)所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物5% (w/w)，36°C停止攪拌出料，得到防曬乳。
本發(fā)明的原理
卷柏即復(fù)活草，化學(xué)組成主要是以穗花杉雙黃酮為代表的雙黃酮成分和海藻糖。 雙黃酮化合物對(duì)290 400nm的紫外線有一定的吸收。卷柏提取物低濃度時(shí)對(duì)黑色素細(xì)胞活性有強(qiáng)力的抑制，并能增強(qiáng)皮膚細(xì)胞自身的SOD作用，抗氧化作用極強(qiáng)，還能加速清除紫外線照射產(chǎn)生的自由基，抵抗日曬造成的光老化和黑斑。卷柏含有豐富的海藻糖，其保濕性能優(yōu)于蘆薈。
玉蘭，中藥名為辛夷，是傳統(tǒng)中藥材，在我國(guó)有兩千多年的栽培與藥用歷史。花蕾可入藥，性溫味辛，歸肺胃經(jīng)，具有散風(fēng)寒、通鼻竅之功能。其主要含有揮發(fā)油、黃酮和生物堿。玉蘭中的黃酮對(duì)羥基自由基有較強(qiáng)的清除能力；其揮發(fā)油有抗炎、鎮(zhèn)痛和抗過(guò)敏作用， 通過(guò)降低炎癥組織毛細(xì)血管的通透性、抑制非特異性腫脹，能明顯減輕充血、水腫和壞死。 玉蘭可以修復(fù)曬傷的皮膚，對(duì)日曬引起的皮膚紅腫、過(guò)敏有很好的作用。
卷柏和玉蘭花搭配，能有效清除紫外線產(chǎn)生的自由基、抑制酪氨酸酶活性、抑制黑色素生成。雪蓮花和茉莉的加入可以增加本發(fā)明提取物的抗紫外線能力。其中雪蓮花中多糖含量豐富，對(duì)紫外線具有很強(qiáng)的吸收能力；茉莉含揮發(fā)油，其芳香具有理氣、開郁、安神、 和中的作用。
超臨界流體萃取(Supeporitical Fluid Extraction, SFE)技術(shù)是近年發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新技術(shù)。超臨界是處于臨界溫度(Te)和臨界壓力(Pe)以上的流體，例如CO2、氨、乙烯、丙烷、水等。目前研究較多的為CO2，在超臨界狀態(tài)下流體兼有氣液兩相的雙重特點(diǎn)，既具有與氣體相當(dāng)?shù)母邤U(kuò)散系數(shù)和低粘度，又具有與液體相近的密度和對(duì)物質(zhì)良好的溶解能力，因此可作為溶劑進(jìn)行萃取。對(duì)中藥揮發(fā)油的提取，傳統(tǒng)的方法是水蒸氣蒸餾法，但它有許多弊端，如有效成分易被破壞，提取時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等。SFE技術(shù)與之比較其主要優(yōu)點(diǎn)有如揮發(fā)油的收率明顯、提取時(shí)間縮短、沒有殘留的有機(jī)溶劑等。
本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及有益效果本發(fā)明運(yùn)用超臨界提取技術(shù)對(duì)中草藥中的有效成分進(jìn)行提取，具有流程簡(jiǎn)單、操作方便和提取效率高等優(yōu)點(diǎn)。采用本發(fā)明的植物提取物做紫外吸收劑，大大降低單純使用化學(xué)紫外吸收劑引起的接觸致敏作用和光接觸致敏作用，再輔以較少的物理化學(xué)紫外吸收劑制成的防曬化妝品，能有效地防止強(qiáng)紫外線對(duì)皮膚輻射，達(dá)到較高SPF值，同時(shí)大大減少化學(xué)防曬劑對(duì)皮膚的損傷。含有本發(fā)明植物提取物制成的化妝品還能對(duì)日曬引起的皮膚干痛、紅腫有很好的修復(fù)作用，清除紫外線產(chǎn)生的自由基，防止皮膚黑色素沉著，具有防曬黑曬紅、抗衰老抗刺激的作用。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。實(shí)施例1(1)將80質(zhì)量份卷柏、55質(zhì)量份玉蘭、45質(zhì)量份雪蓮花和20質(zhì)量份茉莉分別干燥、粉碎過(guò)10目篩，得到粗粉。(2)第一步萃取將粉碎后的玉蘭和茉莉放入萃取釜，采用(X)2超臨界流體萃取， 提取溫度45°C，提取壓力30Mpa，提取時(shí)間為150min，CO2流速為18L/h，在分離溫度45°C， 分離壓力6Mpa下收集揮發(fā)油及油脂提取物；(3)第二步萃取在步驟( 經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(1)粉碎后的卷柏、雪蓮花和作為夾帶劑的乙醇(濃度為體積百分比95% )，乙醇的質(zhì)量用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量的10%;在提取溫度50°C，提取壓力30Mpa，提取時(shí)間150min，C02流速18L/h下再次進(jìn)行(X)2超臨界流體萃?。环蛛x溫度50°C，分離壓力SMpa ；(4)將步驟C3)超臨界提取后的卷柏、雪蓮、玉蘭和茉莉的藥渣，加入相當(dāng)于藥渣質(zhì)量5倍質(zhì)量的水，加熱提取2次，每次1小時(shí)；合并濾液，濾液濃縮至原體積的1/3，冷卻至40°C以下；接著，在攪拌狀態(tài)下，加入無(wú)水乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá)質(zhì)量百分比60% ；(5)密閉放置1 至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，濃縮程度為相對(duì)密度1. 10(70°c測(cè))，得到濃縮液；(6)將步驟⑵、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，將其命名為防曬植物提取物I。實(shí)施例2(1)將75質(zhì)量份卷柏、45質(zhì)量份玉蘭、30質(zhì)量份雪蓮花和10質(zhì)量份茉莉分別干燥、粉碎過(guò)10目篩，得到粗粉。(2)第一步萃取將粉碎后的玉蘭和茉莉放入萃取釜，采用(X)2超臨界流體萃取， 提取溫度45°C，提取壓力30Mpa，提取時(shí)間為150min，CO2流速為18L/h，在分離溫度45°C， 分離壓力6Mpa下收集揮發(fā)油及油脂提取物；(3)第二步萃取在步驟( 經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(1)粉碎后的卷柏、雪蓮花和作為夾帶劑的乙醇(濃度為體積百分比95% )，乙醇的質(zhì)量用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量的10%;在提取溫度50°C，提取壓力30Mpa，提取時(shí)間150min，C02流速18L/h下再次進(jìn)行(X)2超臨界流體萃取；分離溫度50°C，分離壓力SMpa ；(4)將步驟C3)超臨界提取后的卷柏、雪蓮、玉蘭和茉莉的藥渣，加入相當(dāng)于藥渣質(zhì)量5倍質(zhì)量的水，加熱提取2次，每次1小時(shí)；合并濾液，濾液濃縮至原體積的1/3，冷卻至40°C以下；接著，在攪拌狀態(tài)下，加入無(wú)水乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá)質(zhì)量百分比60% ；(5)密閉放置1 至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，濃縮程度為相對(duì)密度I. 12(70°C測(cè))，得到濃縮液；
(6)將步驟(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，將其命名為防曬植物提取物II。
實(shí)施例3
(I)將50質(zhì)量份卷柏、60質(zhì)量份玉蘭、10質(zhì)量份雪蓮花和25質(zhì)量份茉莉分別干燥、粉碎過(guò)10目篩，得到粗粉。
(2)第一步萃取將粉碎后的玉蘭和茉莉放入萃取釜，采用CO2超臨界流體萃取， 提取溫度35°C，提取壓力35Mpa，提取時(shí)間為180min，CO2流速為10L/h，在分離溫度35°C， 分離壓力3Mpa下收集揮發(fā)油及油脂提取物；
(3)第二步萃取在步驟(2)經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(I)粉碎后的卷柏、雪蓮花和作為夾帶劑的乙醇(濃度為體積百分比95% )，乙醇的質(zhì)量用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量的10%;在提取溫度35°C，提取壓力20Mpa，提取時(shí)間180min，C(V流速10L/h下再次進(jìn)行CO2超臨界流體萃??；分離溫度50°C，分離壓力6Mpa ；
(4)將步驟(3)超臨界提取后的卷柏、雪蓮、玉蘭和茉莉的藥渣，加入相當(dāng)于藥渣質(zhì)量5倍質(zhì)量的水，加熱提取2次，每次I小時(shí)；合并濾液,濾液濃縮至原體積的1/3，冷卻至40°C以下；接著，在攪拌狀態(tài)下，加入無(wú)水乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá)質(zhì)量百分比65% ；
(5)密閉放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，濃縮程度為相對(duì)密度I. 10(70°C測(cè))，得到濃縮液；
(6)將步驟(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，將其命名為防曬植物提取物 III。
實(shí)施例4
(I)將100質(zhì)量份卷柏、20質(zhì)量份玉蘭、50質(zhì)量份雪蓮花和5質(zhì)量份茉莉分別干燥、粉碎過(guò)10目篩，得到粗粉。
(2)第一步萃取將粉碎后的玉蘭和茉莉放入萃取釜，采用CO2超臨界流體萃取， 提取溫度55°C，提取壓力50Mpa，提取時(shí)間為60min，CO2流速為25L/h，在分離溫度55°C，分離壓力IOMpa下收集揮發(fā)油及油脂提取物。
(3)第二步萃取在步驟(2)經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(I)粉碎后的卷柏、雪蓮花和作為夾帶劑的乙醇(濃度為體積百分比95% )，乙醇的質(zhì)量用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量的10% ;在提取溫度55°C，提取壓力40Mpa，提取時(shí)間60min，CO2流速25L/h下再次進(jìn)行CO2超臨界流體萃??；分離溫度55°C，分離壓力13Mpa ；
(4)將步驟(3)超臨界提取后的卷柏、雪蓮、玉蘭和茉莉的藥渣，加入相當(dāng)于藥渣質(zhì)量5倍質(zhì)量的水，加熱提取2次，每次I小時(shí)；合并濾液,濾液濃縮至原體積的1/3，冷卻至40°C以下；接著，在攪拌狀態(tài)下，加入無(wú)水乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá)質(zhì)量百分比60% ；
(5)密閉放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，濃縮程度為相對(duì)密度I. 15(70°C測(cè))，得到濃縮液；
(6)將步驟(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，將其命名為防曬植物提取物IV。
實(shí)施例5
(I)將50質(zhì)量份卷柏和60質(zhì)量份玉蘭分別干燥、粉碎過(guò)10目篩，得到粗粉。
(2)第一步萃取將粉碎后的玉蘭放入萃取釜，采用(X)2超臨界流體萃取，提取溫度35°C，提取壓力20Mpa，提取時(shí)間為180min，CO2流速為10L/h，在分離溫度35°C，分離壓力3Mpa下收集揮發(fā)油及油脂提取物。(3)第二步萃取在步驟( 經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(1)粉碎后的卷柏和作為夾帶劑的乙醇(濃度為體積百分比95% )，乙醇的質(zhì)量用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量的10% ；在提取溫度35°C，提取壓力20Mpa，提取時(shí)間180min，CO2流速10L/h下再次進(jìn)行(X)2超臨界流體萃取；分離溫度35°C，分離壓力6Mpa ；(4)將步驟C3)超臨界提取后的卷柏和玉蘭的藥渣，加入相當(dāng)于藥渣質(zhì)量5倍質(zhì)量的水，加熱提取2次，每次1小時(shí)；合并濾液，濾液濃縮至原體積的1/3，冷卻至40°C以下； 接著，在攪拌狀態(tài)下，加入無(wú)水乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá)質(zhì)量百分比60% ；(5)密閉放置1 至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，濃縮程度為相對(duì)密度的1. 20(70°C測(cè))，得到濃縮液；(6)將步驟⑵、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，將其命名為防曬植物提取物V。實(shí)施例6(1)將100質(zhì)量份卷柏和20質(zhì)量份玉蘭分別干燥、粉碎過(guò)10目篩，得到粗粉。(2)第一步萃取將粉碎后的玉蘭放入萃取釜，采用(X)2超臨界流體萃取，提取溫度55°C，提取壓力50Mpa，提取時(shí)間為60min，CO2流速為25L/h，在分離溫度55°C，分離壓力 IOMpa下收集揮發(fā)油及油脂提取物。(3)第二步萃取在步驟( 經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(1)粉碎后的卷柏和作為夾帶劑的乙醇(濃度為體積百分比95% )，乙醇的質(zhì)量用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量的10% ；在提取溫度55°C，提取壓力40Mpa，提取時(shí)間60min，CO2流速25L/h下再次進(jìn)行(X)2超臨界流體萃取；分離溫度55°C，分離壓力13Mpa ；(4)將步驟C3)超臨界提取后的卷柏和玉蘭的藥渣，加入相當(dāng)于藥渣質(zhì)量5倍質(zhì)量的水，加熱提取2次，每次1小時(shí)；合并濾液，濾液濃縮至原體積的1/3，冷卻至40°C以下； 接著，在攪拌狀態(tài)下，加入無(wú)水乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá)質(zhì)量百分比60% ；(5)密閉放置1 至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，濃縮程度為相對(duì)密度1. 10(70°c測(cè))，得到濃縮液；(6)將步驟(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，將其命名為防曬植物提取物VI。對(duì)比例1(1)將100質(zhì)量份卷柏和20質(zhì)量份香薷分別干燥、粉碎過(guò)過(guò)10目篩，得到粗粉。(2)第一步萃取將粉碎后的香薷放入萃取釜，采用CO2超臨界流體萃取，提取溫度55°C，提取壓力50Mpa，提取時(shí)間為60min，CO2流速為25L/h，在分離溫度55°C，分離壓力 lOMpa，下收集揮發(fā)油及油脂提取物。(3)第二步萃取在步驟( 經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(1)粉碎后的卷柏和作為夾帶劑的乙醇(濃度為體積百分比95% )，乙醇的質(zhì)量用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量的10% ；在提取溫度55°C，提取壓力40Mpa，提取時(shí)間60min，CO2流速25L/h下再次進(jìn)行(X)2超臨界流體萃??；分離溫度55°C，分離壓力13Mpa ；(4)將步驟C3)超臨界提取后的卷柏和香薷的藥渣，加入相當(dāng)于藥渣質(zhì)量5倍量的水，加熱提取2次，每次1小時(shí)；合并濾液，濾液濃縮至原體積的1/3，冷卻至40°C以下；接著，在攪拌狀態(tài)下，加入無(wú)水乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá)質(zhì)量百分比65% ；
(5)密閉放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，濃縮程度為相對(duì)密度的I. 10(70°C測(cè))，得到濃縮液；
(6)將步驟(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，將其命名為防曬植物提取物VII。
對(duì)比例2
(I)將100質(zhì)量份卷柏、20質(zhì)量份香薷、50質(zhì)量份雪蓮花和5質(zhì)量份茉莉分別干燥、粉碎過(guò)過(guò)10目篩,得到粗粉。
(2)第一步萃取將粉碎后的香薷和茉莉放入萃取釜，采用CO2超臨界流體萃取， 提取溫度55°C，提取壓力50Mpa，提取時(shí)間為60min，CO2流速為25L/h，在分離溫度55°C，分離壓力lOMpa，下收集揮發(fā)油及油脂提取物。
(3)第二步萃取在步驟(2)經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(I)粉碎后的卷柏、雪蓮花和作為夾帶劑的乙醇(濃度為體積百分比95% )，乙醇的質(zhì)量用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量的10%，與用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量的10%的95%乙醇夾帶劑一次性加入萃取釜；在提取溫度55°C，提取壓力40Mpa，提取時(shí)間60min，CO2流速25L/h下再次進(jìn)行 CO2超臨界流體萃??；分離溫度55°C，分離壓力13Mpa ；
(4)將步驟(3)超臨界提取后的卷柏、雪蓮、香薷和茉莉的藥渣，加入相當(dāng)于藥渣質(zhì)量5倍質(zhì)量的水，加熱提取2次，每次I小時(shí)；合并濾液,濾液濃縮至原體積的1/3，冷卻至40°C以下；接著，在攪拌狀態(tài)下，加入無(wú)水乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá)質(zhì)量百分比60% ；
(5)密閉放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，濃縮程度為相對(duì)密度的I. 10(70°C測(cè))，得到濃縮液；
(6)將步驟(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，將其命名為防曬植物提取物VIII。
效果實(shí)施例
一、檢測(cè)方法
用二甲基亞砜分別將前述實(shí)施例的復(fù)方中藥提取物配制成濃度為質(zhì)量體積比1% 的活性成分溶液，進(jìn)行以下的實(shí)驗(yàn)。
(I)自由基清除作用的測(cè)定
取活性成分溶液2ml及濃度為100 u mol/L的二苯基苦基苯肼(DPPH)溶液(該溶液的溶劑是為水)2ml先后加入同一具塞試管中，搖勻；室溫下靜置30分鐘，以溶劑為空白于517nm波長(zhǎng)下測(cè)定樣品吸光度。
抑制率K%=[I-(Ai-Aj)/Ac] X 100% ；
Ai 2ml DPPH溶液+2ml活性成分溶液的吸光度；
Aj 2ml活性成分溶液+2ml溶劑(即二甲基亞砜)的吸光度；
Ac 2ml DPPH溶液+2ml溶劑(即二甲基亞砜)的吸光度。
(2)抗紫外線性能測(cè)定
在280 400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)，每隔IOnm進(jìn)行掃描，確定各波長(zhǎng)下活性成分溶液的透光率，計(jì)算波長(zhǎng)范圍的平均吸收率。
(3)抑制小鼠黑色素細(xì)胞中酪氨酸活力試驗(yàn)將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的B16小鼠黑色素細(xì)胞(中科院上海細(xì)胞所)接種于96孔板中，培養(yǎng)基為RPMI1640+體積百分比10%的小牛血清，每孔100 μ 1 (IO4個(gè)細(xì)胞/孔)，置 37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，添加過(guò)濾除菌后的活性成分溶液50 μ 1。繼續(xù)培養(yǎng)3d 后，棄去上清液，用ρΗ值為6. 8的0. 15% (w/v)聚丁二酸丁二醇酯沖洗兩遍，每孔加90 μ 1 含(體積分?jǐn)?shù))Triton X-100的PBS(0· 01M，pH值7. 4)。冰浴中超聲破碎，每孔加10 μ 1 10mmol/L的L-多巴(L-dopa)，37°C孵育60min，于475nm處比色，空白孔調(diào)零，測(cè)各孔吸光度值。抑制率=(1-藥物組平均吸光度值+對(duì)照組平均吸光度值)X 100%(4)抑制小鼠黑色素細(xì)胞中中黑素合成試驗(yàn)將B16小鼠黑素瘤細(xì)胞以IX IO5個(gè)/ml的密度接種于直徑為9cm的培養(yǎng)皿，在 37°C,5% CO2的條件下培養(yǎng)2天，棄上清液，加入過(guò)濾除菌后的活性成分溶液18 22ml，接著培養(yǎng)3天，棄上清液，(0. 01M，pH值7. 4) PBS洗滌，每孔加入0. 5ml質(zhì)量百分比0. 2%的胰酶溶液消化細(xì)胞3min，每皿加2ml維持液終止消化。吹打混勻后，每種濃度取出0. 5ml做細(xì)胞計(jì)數(shù)。其余細(xì)胞懸液以2500r/min離心5min，棄上清液，于沉淀中加入NaOH溶液，加熱使黑色素溶解，選擇490nm波長(zhǎng)的酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀上測(cè)吸光度值。黑色素合成抑制率=[1_(藥物孔吸光度值+藥物孔細(xì)胞密度)+ (對(duì)照孔吸光度值+對(duì)照孔細(xì)胞密度)]X100%(5)天然植物提取物對(duì)UVA損傷的修復(fù)作用測(cè)定乳酸脫氫酶(LDH)釋放法是反映細(xì)胞膜損傷的一個(gè)重要指標(biāo)，LDH是在細(xì)胞水平上對(duì)天然提取物的防紫外線能力進(jìn)行評(píng)估。實(shí)驗(yàn)方法將人皮膚成纖維細(xì)胞ESF-I (中科院上海細(xì)胞所)接種于96孔培養(yǎng)板， 采用DMEM培養(yǎng)基，在37°C、5% CO2的條件下培養(yǎng)。細(xì)胞貼壁24h后吸出上清，PBS(0. 01M, PH值7. 4)洗滌一次，每孔加入5 μ L PBS, UVA 10J/cm2照射，照射完畢，吸出上清，加入用 DMEM稀釋的濃度分別為5mg/mL提取物，培養(yǎng)24h后取上清進(jìn)行LDH檢測(cè)。采用乳酸脫氫酶 (LDH)試劑盒(四川邁克)，在7020Automatic Analyzer(HITACH)上進(jìn)行乳酸脫氫酶活性測(cè)定。同時(shí)設(shè)細(xì)胞對(duì)照、陰性對(duì)照和空白對(duì)照(如表1所示)。表權(quán)利要求
1.一種具有防曬作用的天然植物提取物，其特征在于以包含下列按質(zhì)量份計(jì)的原料制備而成卷柏50 100份和玉蘭20 60份。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的具有防曬作用的天然植物提取物，其特征在于所述的原料還包含10 50質(zhì)量份雪蓮花和5 25質(zhì)量份茉莉。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的具有防曬作用的天然植物提取物，其特征在于以包含下列按質(zhì)量份計(jì)的原料制備而成卷柏75 80份、玉蘭45 55份、雪蓮花30 45份和茉莉 10 20份。
4.權(quán)利要求I所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物的制備方法，其特征在于包括如下步驟(1)將50 100質(zhì)量份卷柏和20 60質(zhì)量份玉蘭分別干燥、粉碎過(guò)篩，得到粗粉；(2)首先將粉碎后的玉蘭加入萃取釜，采用CO2超臨界流體萃取，提取溫度35 55°C， 提取壓力20 50Mpa，提取時(shí)間為I 3h，CO2流速為10 25L/h ;分離溫度35 55°C， 分離壓力為3 IOMpa下收集揮發(fā)油及油脂提取物；(3)接著在步驟(2)經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(I)粉碎后的卷柏和作為夾帶劑的乙醇，乙醇的用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量10% ;接著于提取溫度35 55°C，提取壓力20 40Mpa，提取時(shí)間I 3h，CO2流速10 25L/h，再次進(jìn)行CO2超臨界流體萃??；分離溫度35 55°C,分離壓力6 13Mpa ；(4)將步驟(3)經(jīng)提取后的藥渣，加水煎煮兩次，合并濾液，濃縮，冷卻至40°C以下；接著，在攪拌狀態(tài)下，加入乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá)60 65% ；(5)密閉放置至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，得到濃縮液；(6)將步驟(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，為具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物的制備方法，其特征在于包括如下步驟(1)將50 100質(zhì)量份卷柏、20 60質(zhì)量份玉蘭、10 50質(zhì)量份雪蓮花和5 25質(zhì)量份茉莉分別干燥、粉碎過(guò)篩，得到粗粉；(2)首先將粉碎后的玉蘭和茉莉放入萃取釜，采用CO2超臨界流體萃取，提取溫度35 55°C，提取壓力20 50Mpa，提取時(shí)間為I 3h，CO2流速為10 25L/h ;分離溫度35 55°C，分離壓力為3 IOMpa下收集揮發(fā)油及油脂提取物；(3)接著在步驟(2)經(jīng)超臨界提取后的藥渣中加入步驟(I)粉碎后的卷柏、雪蓮花和作為夾帶劑的乙醇，乙醇的用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量10% ;接著于提取溫度35 55°C， 提取壓力20 40Mpa，提取時(shí)間I 3h，CO2流速10 25L/h，再次進(jìn)行CO2超臨界流體萃取；分離溫度35 55°C，分離壓力6 13Mpa ；(4)將步驟(3)經(jīng)提取后的藥渣，加水煎煮兩次，合并濾液，濾液濃縮至原體積的1/3， 冷卻至40°C以下；接著，在攪拌狀態(tài)下，加入無(wú)水乙醇，使最終得到的混合液中乙醇含量達(dá) 60 65% ；(5)密閉放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清減壓回收乙醇，得到濃縮液；(6)將步驟(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均勻，為具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述的顆粒的粒度為能過(guò)10目篩；步驟⑵中所述的提取的條件為提取溫度45°C，提取壓力30Mpa，提取時(shí)間150min，C02 流速18L/h，分離溫度45°C，分離壓力為6Mpa ；步驟(3)中所述的乙醇的濃度為體積百分比95% ；步驟(3)中所述的提取的條件為提取溫度50°C，提取壓力30Mpa，提取時(shí)間150min，C02 流速18L/h，分離溫度50°C，分離壓力8Mpa ；步驟(4)中所述的水煮提取的條件為水的質(zhì)量用量相當(dāng)于所述的藥渣質(zhì)量的5倍；提取兩次，每次I小時(shí)。
7.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物的制備方法，其特征在于步驟(5)中所述濃縮液的濃縮程度為于70°C檢測(cè)、相對(duì)密度為I. 10 I. 20。
8.權(quán)利要求I 3任一項(xiàng)所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物在防曬化妝品中應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物在防曬化妝品中應(yīng)用， 其特征在于所述的防曬化妝品的劑型為溶液、懸浮液、乳狀液、霜?jiǎng)?、膏狀、凝膠、奶液、護(hù)膚液、粉、香皂、油、干粉、粉底液、濕粉或噴劑。
10.一種防曬乳，其特征在于含有以下按質(zhì)量百分比計(jì)的成分甲氧基肉桂酸乙基己酯3%、12-15烷基苯甲酸酯6%、二氧化鈦2%、水楊酸乙基己酯5%、聚甘油-10肉豆蘧酸酯1%、甘油硬脂酸酯3%、環(huán)聚二甲基硅氧烷3%、二乙氨羥苯甲酰基苯甲酸己酯2. 5%、 4-甲基芐亞基樟腦2%、鯨蠟醇I %、VP/十六碳烯共聚物I %、聚二甲基硅氧烷I %、丁二醇 5 %、海藻糖I %、歐洲李果提取物I %、鯨蠟醇磷酸酯鉀2. 5 %、煙酰胺0. 5 %、泛醇0. 3 %、黃原膠0. 2%、香精0. I %、甘草酸二鉀0. I % > EDTA 二鈉0. 1%、甲基異噻唑啉酮0.01%和權(quán)利要求I 3任一項(xiàng)所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物5% ；所述的具有防曬作用的復(fù)方天然植物提取物于70°C檢測(cè)、相對(duì)密度為I. 10 I. 20。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有防曬作用的天然植物提取物及其制備方法與應(yīng)用。該天然植物提取物是以包含下列按質(zhì)量份計(jì)的原料制備而成卷柏50～100份和玉蘭20～60份。還可以以雪蓮花30～45份和茉莉10～20份為輔助劑添加到前述原料中進(jìn)行提取。本發(fā)明利用超臨界流體技術(shù)提取原料中的有效成分，得到的提取物中有效成分高，并且有很強(qiáng)的紫外線吸收能力，能清除紫外線產(chǎn)生的自由基，防止皮膚老化，減少黑色素的生成和修復(fù)曬傷的皮膚。本發(fā)明終端產(chǎn)品制備簡(jiǎn)單，質(zhì)量穩(wěn)定，安全性高，可廣泛用于制備防曬化妝品。
文檔編號(hào)A61K8/97GK102525852SQ20111043952
公開日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2011年12月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月23日
發(fā)明者王興林 申請(qǐng)人:廣州市嬌蘭化妝品有限公司