專(zhuān)利名稱(chēng)：一種抗口腔致齲菌的多肽Pm8及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及Fmoc化學(xué)合成多肽，即一種抗口腔致齲菌的多肽Pm8及制備方法，該多肽具有抗口腔致齲菌能力，尤其是鏈球菌屬的細(xì)菌。
背景技術(shù)：
雖然投入了大量的人力、物力，齲病(dental caries)仍然是世界性非傳染性的三大疾病之一。齲病是在口腔內(nèi)外環(huán)境中多種因素影響下，牙齒硬組織發(fā)生的一種慢性進(jìn)行性破壞的細(xì)菌感染性疾病。變異鏈球菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌是主要的致齲菌。1946年，McClure 和Hewitt證實(shí)青霉素可以抑制大鼠齲病的發(fā)生，主要機(jī)理是抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成、抑制或干擾細(xì)菌的核酸和蛋白質(zhì)的代謝與合成途徑來(lái)達(dá)到抗菌的目的。然而這些傳統(tǒng)抗生素容易誘使細(xì)菌發(fā)生突變而產(chǎn)生抗菌素的耐藥性。因此，國(guó)內(nèi)外學(xué)者一直致力于開(kāi)發(fā)新型的抗菌素，而多肽是一段具有抗菌活性的短的氨基酸。魚(yú)類(lèi)具有強(qiáng)有力的天然免疫系統(tǒng)，從而能夠應(yīng)對(duì)大量的病原微生物。我們?cè)谥耙呀?jīng)證明了 a 螺旋線性陽(yáng)離子多肽 Pleurocidin (GWGSFFKKAAHVGKHVGKAALTHYL_NH2)具有抗致頻菌、真菌的能力，并對(duì)變異鏈球菌生物膜有一定的抑制作用。但是pleurocidin的長(zhǎng)度為25個(gè)氨基酸，過(guò)長(zhǎng)的氨基酸提高了合成成本和對(duì)細(xì)菌生物膜的滲透能力，因此開(kāi)發(fā)出新的短肽就更為必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種抗口腔致齲菌的多肽PmS及制備方法，以克服天然抗菌肽長(zhǎng)度過(guò)長(zhǎng),合成成本相對(duì)較高的問(wèn)題。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種抗口腔致齲菌的多肽Pm8，其制備方法是通過(guò)對(duì)天然多肽pleurocidin的活性中心的查找,對(duì)口腔常見(jiàn)致頻菌有一定的抗菌、殺菌能力,在確定活性中心的基礎(chǔ)上，對(duì)其進(jìn)行氨基酸的刪除和替換形成新型的具有殺菌能力的抗菌多肽；所述新型抗菌多肽Pm8，序列為GWGKFFKKFFKFG。其制備方法中所述口腔常見(jiàn)致齲菌為變異鏈球菌。其制備方法中所述口腔常見(jiàn)致齲菌為遠(yuǎn)緣鏈球菌。其制備方法中所述口腔常見(jiàn)致齲菌為血鏈球菌。多肽使細(xì)菌細(xì)胞膜表面失去原有性狀，變得粗糙甚至有出現(xiàn)孔隙，通過(guò)在細(xì)菌表面形成離子通道，引起細(xì)菌內(nèi)容物的流出，從而導(dǎo)致了細(xì)菌的死亡?？箍谇恢慢x菌的多肽Pml制備方法是，其特征在于通過(guò)保持、改進(jìn)a螺旋特性， 對(duì)天然多肽pleurocidin活性中心氨基酸進(jìn)行刪除和替換,通過(guò)直接化學(xué)Fmoc合成的方法，構(gòu)建有抗菌能力的多肽。本發(fā)明的特點(diǎn)是發(fā)現(xiàn)并合成了新型的抗菌短肽。該多肽通過(guò)在細(xì)菌表面形成離子通道的原理來(lái)引起細(xì)菌的崩解、死亡。提高了合成成本和利用效率，從而更好的用于齲病的預(yù)防和治療。本發(fā)明通過(guò)對(duì)天然多肽pleurocidin活性中心的刪除和替換,構(gòu)成了新的抗菌多肽。該多肽對(duì)口腔中的變異鏈球菌、血鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌都有一定的抗菌能力。多肽對(duì)細(xì)菌的最小抑菌濃度范圍為8-32l^g/ml，最小殺菌濃度范圍為8-64l^g/ml之間。多肽比天然多肽的長(zhǎng)度更小，而抑菌、抗菌能力相當(dāng)。本發(fā)明的多肽的抗菌原理為多肽使細(xì)菌表面失去原有性狀，變得粗糙甚至有出現(xiàn)孔隙；在細(xì)菌表面形成離子通道，引起細(xì)菌內(nèi)容物的流出，從而導(dǎo)致了細(xì)菌的崩解、死亡；從而具有抗口腔致齲菌的能力。
以下結(jié)合附圖
和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)描述
圖I是本發(fā)明中的多肽Pmll和Pml4的a螺線結(jié)構(gòu)軟件推測(cè)圖2是多肽處理細(xì)菌的電鏡照片；
圖3是多肽處理2個(gè)小時(shí)的結(jié)果；
圖4是多肽處理2個(gè)小時(shí)的結(jié)果。
具體實(shí)施例方式—種抗口腔致頻菌的多肽Pm8,其制備方法是通過(guò)對(duì)天然多肽pleurocidin的活性中心的查找，對(duì)口腔常見(jiàn)致齲菌有一定的抗菌、殺菌能力，在確定活性中心的基礎(chǔ)上， 對(duì)其進(jìn)行氨基酸的刪除和替換形成新型的具有殺菌能力的抗菌多肽；所述新型抗菌多肽 Pm8，序列為 GWGKFFKKFFKFG。其制備方法中所述口腔常見(jiàn)致齲菌為遠(yuǎn)緣鏈球菌。其制備方法中所述口腔常見(jiàn)致齲菌為血鏈球菌。多肽使細(xì)菌細(xì)胞膜表面失去原有性狀，變得粗糙甚至有出現(xiàn)孔隙，通過(guò)在細(xì)菌表面形成離子通道，引起細(xì)菌內(nèi)容物的流出，從而導(dǎo)致了細(xì)菌的死亡?？箍谇恢慢x菌的多肽制備方法是，其特征在于通過(guò)保持、改進(jìn)a螺旋特性，對(duì)天然多肽pleurocidin活性中心氨基酸進(jìn)行刪除和替換,通過(guò)直接化學(xué)Fmoc合成的方法,構(gòu)建有抗菌能力的多肽。實(shí)施例
圖I是多肽Pmll和Pml4的a螺線結(jié)構(gòu)軟件推測(cè)圖。圖2是多肽處理細(xì)菌的電鏡照片。A，正常變異鏈球菌；B，Pmll處理過(guò)后的變異鏈球菌；C，Pml4處理過(guò)后的變異鏈球菌；D，正常血鏈球菌；E，Pmll處理過(guò)后的變異鏈球菌； F，Pml4處理過(guò)后的變異鏈球菌。可以看見(jiàn)多肽處理過(guò)后的細(xì)菌表面發(fā)生變化，出現(xiàn)多孔狀或是細(xì)菌崩解，皺縮的現(xiàn)象。I.多肽的設(shè)計(jì)合成
I.I多肽的設(shè)計(jì)
多肽采用截取pleurocidin活性中心的方法，刪除、替換氨基酸的方法設(shè)計(jì)。設(shè)計(jì)后多肽的物理性質(zhì)如表I。a螺線結(jié)構(gòu)的參數(shù)見(jiàn)表1，示意圖見(jiàn)圖2。
權(quán)利要求
1.一種抗口腔致頻菌的多肽Pm8,其制備方法是通過(guò)對(duì)天然多肽pleurocidin的活性中心的查找，對(duì)口腔常見(jiàn)致齲菌有一定的抗菌、殺菌能力，在確定活性中心的基礎(chǔ)上，對(duì)其進(jìn)行氨基酸的刪除和替換形成新型的具有殺菌能力的抗菌多肽；所述新型抗菌多肽Pm8， 序列為 GWGKFFKKFFKFG。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的抗口腔致齲菌的多肽Pm8，其制備方法中所述口腔常見(jiàn)致齲菌為變異鏈球菌。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的抗口腔致齲菌的多肽Pm8，其制備方法中所述口腔常見(jiàn)致齲菌為遠(yuǎn)緣鏈球菌。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的抗口腔致齲菌的多肽Pm8，其制備方法中所述口腔常見(jiàn)致齲菌為血鏈球菌。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的抗口腔致齲菌的多肽Pm8，其特征是多肽使細(xì)菌細(xì)胞膜表面失去原有性狀，變得粗糙甚至有出現(xiàn)孔隙，通過(guò)在細(xì)菌表面形成離子通道，引起細(xì)菌內(nèi)容物的流出，從而導(dǎo)致了細(xì)菌的死亡。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的抗口腔致齲菌的多肽PmS制備方法是，其特征在于通過(guò)保持、改進(jìn)ct螺旋特性,對(duì)天然多肽pleurocidin活性中心氨基酸進(jìn)行刪除和替換,通過(guò)直接化學(xué)Fmoc合成的方法,構(gòu)建有抗菌能力的多肽。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及Fmoc化學(xué)合成多肽，即一種抗口腔致齲菌的多肽Pm8及制備方法，其制備方法是通過(guò)對(duì)天然多肽pleurocidin的活性中心的查找，對(duì)口腔常見(jiàn)致齲菌有一定的抗菌、殺菌能力，在確定活性中心的基礎(chǔ)上，對(duì)其進(jìn)行氨基酸的刪除和替換形成新型的具有殺菌能力的抗菌多肽；所述新型抗菌多肽Pm8，序列為GWGKFFKKFFKFG；其制備方法中所述口腔常見(jiàn)致齲菌為變異鏈球菌；其制備方法中所述口腔常見(jiàn)致齲菌為遠(yuǎn)緣鏈球菌；其制備方法中所述口腔常見(jiàn)致齲菌為血鏈球菌。它克服天然抗菌肽長(zhǎng)度過(guò)長(zhǎng)，合成成本相對(duì)較高的問(wèn)題。
文檔編號(hào)A61P31/04GK102584948SQ201110381229
公開(kāi)日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2011年11月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月26日
發(fā)明者倪龍興, 陶睿 申請(qǐng)人:倪龍興