專利名稱：一種菊花莖葉總黃酮的制備方法及其用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種菊花莖葉總黃酮的制備方法及其用途。
背景技術：
菊花是著名的浙八味”藥材之一，藥食兼用，除了傳統(tǒng)的菊花花序入藥具有散風清熱、平肝明目的功效之外，菊花莖葉也具有不同的藥效。如《中藥大詞典》記載菊花苗能清肝，明目，用于治療頭風眩暈，目翳；菊花葉能清肺，平肝膽，用于治療五疔、疳疔毒、癰疽、惡瘡等?，F(xiàn)代化學成分研究表明，菊花莖葉主要含有揮發(fā)油、黃酮類成分等，其中，黃酮類成分為其主要的化學成分類型。前期藥理學實驗表明，本發(fā)明制備的菊花莖葉總黃酮具有良好的抗氧化、增加冠脈流量、抗血栓等作用。本發(fā)明首次提供了采用乙醇提取、樹脂富集菊花莖葉總黃酮的方法，通過該方法制備的菊花莖葉總黃酮質量百分比含量不低于50%，其中蒙花苷的質量百分比含量不低于1%，木犀草素的質量百分比含量不低于1%。對比專利《菊花莖葉提取物及其制備方法和用途》(200910184716. 0)所采用的方法，本發(fā)明提供的方法采用乙醇/水作為提取溶媒，由于黃酮類成分極性較低，更易溶于乙醇中，采用乙醇/水作為提取溶媒提取效率更高；其次，本發(fā)明首次對菊花莖葉總黃酮中的指標性成分蒙花苷、木犀草素的含量進行了限定；采用本方法制備菊花莖葉總黃酮還具有黃酮回收率高的優(yōu)點；此外，本發(fā)明首次提供了采用本方法制備的菊花莖葉總黃酮在治療冠心病方面的應用。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種菊花莖葉總黃酮的制備方法及其用途。菊花莖葉總黃酮的制備方法的步驟如下
1)菊花莖葉采用體積百比濃度10 95%乙醇/水進行提取，乙醇/水是菊花莖葉的 6 15倍重量，加熱回流提取1 5次，提取時間為1 3小時，提取液過濾，提取液濃縮至 0. 25 1. 0 g生藥/mL，得菊花莖葉提取液；
2)將菊花莖葉提取液，經大孔樹脂進行吸附，菊花莖葉與大孔樹脂的重量比為1:1 1:5，上柱流速1 4BV/h，樹脂柱徑高比為1:3 1:9 ；吸附后先用水洗滌樹脂3 8BV， 洗脫流速為2 4BV/h，水洗脫液棄去；用體積百分比濃度為20 95%乙醇/水洗脫3 8BV，流速為2 4BV/h，收集乙醇/水洗脫液，濃縮，干燥，即得菊花莖葉總黃酮。所述的菊花莖葉總黃酮的質量百分比含量不低于50%。所述的菊花莖葉總黃酮含有芹菜素、木犀草素、蒙花苷、橙皮苷、香葉木素-D-葡萄糖苷黃酮類成分，其中，蒙花苷的質量百分比含量不低于1%，木犀草素的質量百分比含量不低于1%。所述的菊花莖葉為滁菊莖葉、貢菊莖葉、亳菊莖葉或杭菊莖葉。所述的菊花莖葉為杭菊莖葉。所述的步驟1)采用體積百比濃度50 80%乙醇/水進行提取。所述的步驟幻用體積百分比濃度為50 75%乙醇/水洗脫3 8BV。所述的大孔樹脂為非極性或弱極性大孔樹脂，如D1(ll、 AB-8、HPD100、LX60。
菊花莖葉總黃酮用于制備治療冠心病藥物。所述的療冠心病藥物具有抗氧化、增加冠脈流量、抗血栓作用。本發(fā)明通過菊花莖葉總黃酮工藝研究，采用優(yōu)選乙醇提取、大孔樹脂富集的制備方法獲得菊花莖葉總黃酮質量百分比含量不低于50%，蒙花苷質量百分比含量不低于1%， 木犀草素質量百分比含量不低于1%，該制備工藝制備的菊花莖葉總黃酮藥效物質基礎基本清楚，指標性成分含量穩(wěn)定，實現(xiàn)了中藥藥物質量的可控性。
具體實施例方式菊花莖葉總黃酮的制備方法的步驟如下
1)菊花莖葉采用體積百比濃度10 95%乙醇/水進行提取，乙醇/水是菊花莖葉的 6 15倍重量，加熱回流提取1 5次，提取時間為1 3小時，提取液過濾，提取液濃縮至 0. 25 1. 0 g生藥/mL，得菊花莖葉提取液；
2)將菊花莖葉提取液，經大孔樹脂進行吸附，菊花莖葉與大孔樹脂的重量比為1:1 1:5，上柱流速1 4BV/h，樹脂柱徑高比為1 3 1 9 ；吸附后先用水洗滌樹脂3 8BV，洗脫流速為2 4BV/h，水洗脫液棄去；用體積百分比濃度為20% 95%乙醇/水洗脫3 8BV，流速為2 4BV/h，收集乙醇/水洗脫液，濃縮，干燥，即得菊花莖葉總黃酮。所述的菊花莖葉總黃酮的質量百分比含量不低于50%。所述的菊花莖葉總黃酮含有芹菜素、木犀草素、蒙花苷、橙皮苷、香葉木素-D-葡萄糖苷黃酮類成分，其中，蒙花苷的質量百分比含量不低于1%，木犀草素的質量百分比含量不低于1%。所述的菊花莖葉為滁菊莖葉、貢菊莖葉、亳菊莖葉或杭菊莖葉。所述的菊花莖葉為杭菊莖葉。所述的步驟 1)采用體積百比濃度50 80%乙醇/水進行提取。所述的步驟幻用體積百分比濃度為 50 75%乙醇/水洗脫3 8BV。菊花莖葉總黃酮用于制備治療冠心病藥物。所述的療冠心病藥物具有抗氧化、增加冠脈流量、抗血栓作用。本發(fā)明同時對菊花莖葉總黃酮治療冠心病的作用進行了考察。研究結果1)菊花莖葉總黃酮能增加小鼠血液中過氧化物歧化酶(SOD)的活性，提高其抗氧化能力；2)不同劑量的菊花莖葉總黃酮均可增加豚鼠離體心臟的冠脈流量；3)菊花莖葉總黃酮能夠明顯延長大鼠體內血栓形成時間，降低大鼠的全血黏度。下面實驗例用于進一步說明但不限于本發(fā)明。實施例1 菊花莖葉采用體積百比濃度10%乙醇/水進行提取，乙醇/水是菊花莖葉的6倍重量，加熱回流提取1次，提取時間為1小時，提取液過濾，合并，濃縮至0. 25g生藥/mL，過濾或離心分離后通過大孔樹脂Dltll大孔樹脂柱，菊花莖葉與大孔樹脂的重量比為 1:1，上柱流速lBV/h，樹脂柱徑高比為1:3 ；用水洗滌樹脂:3BV，洗脫流速為2BV/h，水洗脫液棄去；用體積百分比濃度為20%乙醇/水洗脫;3BV，流速為2BV/h，收集乙醇/水洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，粉碎，即得菊花莖葉總黃酮。所制備的菊花莖葉總黃酮的質量百分比含量為55%，蒙花苷的質量百分比含量為 1%，木犀草素的質量百分比含量為1%。實施例2 菊花莖葉采用體積百比濃度95%乙醇/水進行提取，乙醇/水是菊花莖葉的15倍重量，加熱回流提取5次，提取時間為3小時，提取液過濾，合并，濃縮至1.0 g生藥/mL，過濾或離心分離后通過大孔樹脂HPD100大孔樹脂柱，菊花莖葉與大孔樹脂的重量比為1:5，上柱流速4BV/h，樹脂柱徑高比為1:9 ；用水洗滌樹脂8BV，洗脫流速為4BV/h，水洗脫液棄去；用體積百分比濃度為95%乙醇/水洗脫8BV，流速為4BV/h，收集乙醇/水洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，粉碎，即得菊花莖葉總黃酮。所制備的菊花莖葉總黃酮的質量百分比含量為65%，蒙花苷的質量百分比含量為 3%，木犀草素的質量百分比含量為5%。實施例3 菊花莖葉采用體積百比濃度70%乙醇/水進行提取，乙醇/水是菊花莖葉的10倍重量，加熱回流提取3次，提取時間為2小時，提取液過濾，合并，濃縮至0. 5 g生藥/mL，過濾或離心分離后通過大孔樹脂AB-8大孔樹脂柱，菊花莖葉與大孔樹脂的重量比為1:3，上柱流速2BV/h，樹脂柱徑高比為1:5 ；用水洗滌樹脂4BV，洗脫流速為!3BV/h，水洗脫液棄去；用體積百分比濃度為70%乙醇/水洗脫5BV，流速為!3BV/h，收集乙醇/水洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，粉碎，即得菊花莖葉總黃酮。所制備的菊花莖葉總黃酮的質量百分比含量為60. 5%，蒙花苷的質量百分比含量為2%，木犀草素的含量為2. 5%。實施例4 菊花莖葉總黃酮藥效學試驗
通過對菊花莖葉總黃酮開展的一系列藥理試驗證明，菊花莖葉總黃酮具有良好的抗氧化的作用，同時，能有效增加冠脈流量、延緩血栓形成和降低血黏度，具有治療冠心病的功效。1、抗氧化作用
取昆明種小鼠40只，雌雄各半，體重(20士2)g，隨即分為4組陰性對照組、菊花莖葉總黃酮高劑量組、菊花莖葉總黃酮低劑量組、銀杏葉提取物組(E(ib)，每天給藥1次，連續(xù)給藥1周后，腹主靜脈取血lmL，離心分離出血清，測定MDA、NO及SOD含量。結果見表1。表1 菊花莖葉總黃酮對小鼠血清MXMXSD含量的影響(
權利要求
1.一種菊花莖葉總黃酮的制備方法，其特征在于它的步驟如下1)菊花莖葉采用體積百比濃度10 95%乙醇/水進行提取，乙醇/水是菊花莖葉的 6 15倍重量，加熱回流提取1 5次，提取時間為1 3小時，提取液過濾，提取液濃縮至 0. 25 1. 0 g生藥/mL，得菊花莖葉提取液；2)將菊花莖葉提取液，經大孔樹脂進行吸附，菊花莖葉與大孔樹脂的重量比為1:1 1:5，上柱流速1 4BV/h，樹脂柱徑高比為1:3 1:9 ；吸附后先用水洗滌樹脂3 8BV， 洗脫流速為2 4BV/h，水洗脫液棄去；用體積百分比濃度為20 95%乙醇/水洗脫3 8BV，流速為2 4BV/h，收集乙醇/水洗脫液，濃縮，干燥，即得菊花莖葉總黃酮。
2.根據權利要求1所述的一種菊花莖葉總黃酮的制備方法，其特征在于所述的菊花莖葉總黃酮的質量百分比含量不低于50%。
3.根據權利要求1或2所述的一種菊花莖葉總黃酮的制備方法，其特征在于所述的菊花莖葉總黃酮含有芹菜素、木犀草素、蒙花苷、橙皮苷、香葉木素- _0-β -D-葡萄糖苷黃酮類成分，其中，蒙花苷的質量百分比含量不低于1%，木犀草素的質量百分比含量不低于1%。
4.根據權利要求1所述的一種菊花莖葉總黃酮的制備方法，其特征在于所述的菊花莖葉為滁菊莖葉、貢菊莖葉、亳菊莖葉或杭菊莖葉。
5.根據權利要求4所述的一種菊花莖葉總黃酮的制備方法，其特征在于所述的菊花莖葉為杭菊莖葉。
6.根據權利要求1所述的一種菊花莖葉總黃酮的制備方法，其特征在于所述的步驟1) 采用體積百比濃度50 80%乙醇/水進行提取。
7.根據權利要求1所述的一種菊花莖葉總黃酮的制備方法，其特征在于所述的步驟2) 用體積百分比濃度為50 75%乙醇/水洗脫3 8BV。
8.—種如權利要求1所述方法制備的菊花莖葉總黃酮的用途，其特征在于用于制備治療冠心病藥物。
9.根據權利要求8所述的一種菊花莖葉總黃酮的用途，特征在于所述的療冠心病藥物具有抗氧化、增加冠脈流量、抗血栓作用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種菊花莖葉總黃酮的制備方法及其用途。它是將菊花莖葉經含水乙醇提取，再經大孔樹脂富集得到菊花莖葉總黃酮。本發(fā)明提供的菊花莖葉總黃酮質量百分比含量不低于50%，其中蒙花苷的質量百分比含量不低于1.0%，木犀草素的質量百分比含量不低于1.0%。本發(fā)明提供的菊花莖葉總黃酮可以與不同藥用賦形劑制成固體制劑及液體制劑。本發(fā)明提供的菊花莖葉總黃酮具有抗氧化、增加冠脈流量、抗血栓等作用，以菊花莖葉總黃酮為原料，添加不同藥用賦形劑制備的制劑可以作為治療冠心病的藥物。本發(fā)明提供的菊花莖葉總黃酮以藥食同源的藥材菊花莖葉為原料經無毒害處理精制而成，具有療效明確、藥用物質基礎清楚、毒副作用低等優(yōu)點。
文檔編號A61K127/00GK102228498SQ20111018464
公開日2011年11月2日 申請日期2011年7月4日 優(yōu)先權日2011年7月4日
發(fā)明者付紅偉, 張琳, 李如意, 李文婷, 王偉, 田景奎, 翟興英 申請人:浙江大學