專利名稱：一種預(yù)防或/和治療糖尿病的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種預(yù)防或/和治療糖尿病的藥物組合物，屬藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
糖尿病是一種多病因引起的以慢性高血糖為主要特征的代謝紊亂綜合癥，久病可以引起人體多系統(tǒng)的損害；病情嚴(yán)重或應(yīng)激時(shí)可以發(fā)生急性代謝紊亂而危及患者的生命。 目前，糖尿病的發(fā)病率日益增高，嚴(yán)重危害人類健康。但是對(duì)于治療糖尿病尚未有理想的治療方法。糖尿病包括I型糖尿病和II型糖尿病。I型糖尿病是具有一定遺傳基礎(chǔ)、在多種環(huán)境因子觸發(fā)下由T細(xì)胞介導(dǎo)的器官特異性的自身免疫性疾病，其發(fā)生與機(jī)體自身免疫調(diào)節(jié)失衡密切相關(guān)，本質(zhì)是胰島β細(xì)胞的大量破壞(達(dá)80%以上)導(dǎo)致胰島素合成減少，胰島素絕對(duì)缺乏又使體內(nèi)血糖不能維持在正常水平而導(dǎo)致高血糖。相關(guān)文獻(xiàn)都認(rèn)為(尤其是在早期)胰島細(xì)胞損傷死亡的主要特征是細(xì)胞凋亡，機(jī)體T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子是誘導(dǎo)凋亡的免疫效應(yīng)分子，其作用途徑之一是通過(guò)Fas介導(dǎo)β細(xì)胞凋亡。傳統(tǒng)璜酰脲類和雙胍類降糖藥，長(zhǎng)期應(yīng)用會(huì)導(dǎo)致依賴性和毒副作用。近年來(lái)通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)異黃酮是一類天然降血糖成分，其作用機(jī)制主要有保持β細(xì)胞活性，抑制胰島β細(xì)胞凋亡；干擾小腸對(duì)糖的吸收，使餐后血糖峰值后移與降低；胰島素樣作用，促進(jìn)外周組織利用糖，調(diào)整糖代謝； 通過(guò)抗氧化、維護(hù)生物膜穩(wěn)定，保護(hù)胰組織，調(diào)節(jié)與糖代謝有關(guān)的酶類的釋放及其活性等。 為尋求安全、有效的治療本病的藥物和方法一直是國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)界關(guān)注的重點(diǎn)之一。近年來(lái)， 國(guó)內(nèi)外學(xué)者開(kāi)始從天然植物中篩選降糖成分，取得了一些進(jìn)展?！包S豆”、“青豆”和“黑豆”統(tǒng)稱為大豆。據(jù)《中藥大辭典》記載“大豆甘，平。入脾腎經(jīng)。具有活血、利水、祛風(fēng)、解毒的功效?！贝蠖怪泻械鞍踪|(zhì)、碳水化合物、維生素、卵磷脂、大豆皂苷和大豆異黃酮等多種成分。其中大豆異黃酮具有調(diào)節(jié)血脂、類雌激素樣等很強(qiáng)的生理活性作用。據(jù)報(bào)道，以黑豆、黃精加水煎熬，再加以蜂蜜，具有治療糖尿病的作用。膽汁是常用的炮制輔料之一，其主要成分為膽汁酸、膽色素及無(wú)機(jī)鹽類等。牛膽汁是牛科動(dòng)物黃牛Bostaurus domesticus Gmelin或水牛Bubalus L.的膽汁，味苦性寒，具有清肝明目，利膽通腸，解毒消腫之功效，廣泛用于治療肝熱目赤腫痛，小兒驚風(fēng)，癰腫瘡毒及便秘、消渴等疾病。目前尚無(wú)將牛膽汁和黑豆為原料制備成制劑用于治療糖尿病的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了一種預(yù)防或/和治療糖尿病的藥物組合物。本發(fā)明的另一技術(shù)方案是提供了該藥物組合物的制備方法和用途。本發(fā)明提供了一種預(yù)防或/和治療糖尿病的藥物組合物，它是由黑豆、牛膽汁制備而成的制劑。進(jìn)一步優(yōu)選地，它是由下述原料制備而成的制劑黑豆1份、牛膽汁0. 4-1份。
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更進(jìn)一步優(yōu)選地，它是由下述原料制備而成的制劑黑豆1份、牛膽汁0.5份。其中，它是將黑豆與牛膽汁拌勻，煮開(kāi)放冷后，密封放置于陰涼通風(fēng)處，浸泡三天， 攤開(kāi)晾干，60°C溫度下低溫烘干三天，即得牛膽汁炮制的黑豆。再以牛膽汁炮制的黑豆的原生粉末或有機(jī)溶劑提取物為活性成分，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。其中，所述的有機(jī)溶劑是50-90%乙醇。其中，所述的制劑是片劑、膠囊劑、丸劑、口服液。其中，所述的膠囊劑中每粒含大豆異黃酮不得少于0. 30mg。本發(fā)明還提供了該藥物組合物的制備方法，它包括如下步驟a、取原料藥1份黑豆、0. 4-1份牛膽汁；b、將黑豆與牛膽汁拌勻，煮開(kāi)放冷后，密封放置于陰涼通風(fēng)處，浸泡三天，攤開(kāi)晾干，于60°C溫度下低溫烘干三天，即得牛膽汁炮制的黑豆；c、取1/3經(jīng)牛膽汁炮制烘干好的黑豆打成細(xì)粉，其余2/3打成粗粉，過(guò)篩，粗粉加入50-90%乙醇于80°C提取，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇；藥渣加入稀鹽酸提取一次，1. 5小時(shí)每次；合并濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 35 1. 40的稠膏，與細(xì)粉混合后烘干，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學(xué)上常用的制劑。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的乙醇濃度為 70%乙醇。本發(fā)明是以牛膽汁、黑豆為原料，黑豆經(jīng)牛膽汁炮制后制備成膠囊，用于預(yù)防或/ 和治療糖尿病，藥效明確；以黑豆中大豆異黃酮的含量和牛膽汁中膽酸的含量為指標(biāo)，優(yōu)選炮制、制備工藝，并建立牛膽汁制黑豆膠囊的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)；以血糖、血脂等為主要指標(biāo)，建立合理的動(dòng)物模型，探討牛膽汁制黑豆的藥效學(xué)作用；本發(fā)明組合物質(zhì)量穩(wěn)定，可控性強(qiáng)， 為臨床提供了一種新的用藥選擇。


圖1 最大吸收波長(zhǎng)的確定圖2 染料木素的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖3:膽酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖4 對(duì)照品全波長(zhǎng)掃描5 對(duì)照品色譜圖(從左到右依次為染料木苷、大豆苷元、染料木素)圖6 樣品色譜7:陰性色譜8 染料木苷線性范圍考察圖9 大豆苷元線性范圍考察10 染料木素線性范圍考察圖11 空白對(duì)照組小鼠的腎組織切片圖12 模型組小鼠的腎組織切片圖13 給藥高劑量組小鼠的腎組織切片圖14 優(yōu)降糖對(duì)照組小鼠的腎組織切片
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本發(fā)明藥物的制備清洗干凈的黑豆與牛膽汁按2 1的比例拌勻，煮開(kāi)放冷后，密封放置于陰涼通風(fēng)處，浸泡三天，攤開(kāi)晾干，于60°C溫度下低溫烘干三天即得。取經(jīng)牛膽汁炮制烘干好的黑豆，1/3打成細(xì)粉，過(guò)5號(hào)篩；2/3粉碎成粗粉，過(guò)2號(hào)篩，粗粉加入16倍量70%乙醇于80°C提取2次，每次池，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇；藥渣加入10倍量稀酸(0. 15ml稀鹽酸溶液加水定容至100ml)提取一次，1. 5小時(shí)每次。合并濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 35 1. 40的稠膏，與細(xì)粉混合后烘干，研細(xì)，過(guò)六號(hào)篩，混勻后裝入膠
囊即得。實(shí)施例2本發(fā)明牛膽汁制黑豆炮制工藝1、儀器、試劑與試藥1. 1 儀器紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(VARIAN CAVY50 Scan)；美國(guó)安捷倫1100高效液相色譜儀(DAD檢測(cè)器)(美國(guó)安捷倫公司)BP211D AG 電子天平(德國(guó) Sartorius)1. 2 試齊[J冰醋酸、濃硫酸、糠醛；甲醇為色譜純，水為重蒸水，其余試劑均為分析純。1. 3 試藥膽酸對(duì)照品(購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)100078-200414)。染料木素對(duì)照品(購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)111704-200501，含量大于 98% )。染料木苷對(duì)照品(購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)111709-200501，含量大于 98% )。大豆苷元對(duì)照品(購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)111502-200101，含量大于 98% )。黑豆(購(gòu)于成都市溫江區(qū)集貿(mào)市場(chǎng))經(jīng)鑒定確認(rèn)為豆科植物大豆的成熟種子。牛膽汁(購(gòu)于成都市溫江區(qū)集貿(mào)市場(chǎng))經(jīng)鑒定確認(rèn)為牛科動(dòng)物黃?；蛩５哪懼?。2、評(píng)價(jià)指標(biāo)及測(cè)定方法黑豆的主要藥效成分是大豆異黃酮，其苷元——染料木素和大豆苷元起主要作用；牛膽汁主要成分為膽汁酸類和膽色素等，《中國(guó)藥典》2005年版一部以膽酸含量為牛膽汁的含量測(cè)定指標(biāo)。故分別選擇染料木素、膽酸作為指標(biāo)評(píng)價(jià)牛膽汁制黑豆的炮制工藝。2. 1染料木素含量測(cè)定紫外分光光度法測(cè)定大豆異黃酮的含量。①最大吸收波長(zhǎng)的選擇以95%乙醇為空白，標(biāo)準(zhǔn)品溶液在200-400nm進(jìn)行掃描，結(jié)果表明最大吸收峰在 ^3nm，且最大吸收峰周圍干擾較小(結(jié)果見(jiàn)圖1)。②標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配置
精密稱取染料木素標(biāo)準(zhǔn)品5. 2mg置于25ml容量瓶中，以95%乙醇溶解并定容到刻度，搖勻即得。③標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取0. 1,0. 2,0. 3,0. 4,0. 5,0. 6ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液置于IOml容量瓶中，并各加 95%乙醇1. 0ml，加蒸餾水稀釋到刻度，搖勻，以1. 0ml95%乙醇加蒸餾水到IOml作空白對(duì)照。照紫外-可見(jiàn)分光光度法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄VA)，在沈〗 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(結(jié)果見(jiàn)圖2)。④測(cè)定方法取豆粉(過(guò)3號(hào)篩)5g加16倍量70%乙醇80°C提取2次，每次池，合并濾液濃縮到90mL。吸取0. 5ml提取液，加95%乙醇lmL，加蒸餾水稀釋至10ml，搖勻。以lmL95%乙醇加水至IOmL作空白對(duì)照，在^^ 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中大豆異黃酮的含量，計(jì)算，即得。2. 2膽酸含量測(cè)定參照《中國(guó)藥典》2005年版一部牛膽粉項(xiàng)下膽酸含量測(cè)定的方法。①對(duì)照品溶液的制備取膽酸對(duì)照品12. 5mg,置于25ml容量瓶中，加60%冰醋酸溶液使溶解，并稀釋到刻度，搖勻，即得(每Iml中含膽酸0. 5mg)。②標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對(duì)照品溶液0. 2ml,0. 4ml,0. 6ml,0. 8ml與1ml，分別置具塞試管中，各管加60%冰醋酸溶液稀釋成lml，加新制的糠醛溶液(1 — 100)各lml，在冰浴中放置5分鐘， 精密加入硫酸溶液(取硫酸50ml與水65ml混合)13ml，混勻，在70°C水浴中加熱10分鐘， 迅速移至冰浴中，放置2分鐘，以相應(yīng)的試劑為空白。照紫外-可見(jiàn)分光光度法(附錄VA)， 在605nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(結(jié)果見(jiàn)圖 3)。③測(cè)定法取樣品約60mg，精密稱定，加60%冰醋酸溶液數(shù)毫升，充分研磨，轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中，用60%冰醋酸溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液各Iml分別置甲、乙兩個(gè)具塞試管中，于甲管中加新制的糠醛溶液1ml，乙管中加水Iml作空白，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自“在冰浴中放置5分鐘”起，依法測(cè)定吸光度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含膽酸的重量，計(jì)算，即得。3、炮制工藝研究3. 1大豆種類的選擇分別測(cè)定了三批黑豆和黃豆中的大豆異黃酮的含量(結(jié)果見(jiàn)表1)表1黑豆和黃豆中的大豆異黃酮的含量(％ )
值
權(quán)利要求
1.一種預(yù)防或/和治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制備而成的制劑黑豆1份、牛膽汁0. 4-1份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的是由下述重量配比的原料制備而成的制劑黑豆1份、牛膽汁0. 5份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任意一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于它是將黑豆與牛膽汁拌勻，煮開(kāi)放冷后，密封放置于陰涼通風(fēng)處，浸泡三天，攤開(kāi)晾干，60°C溫度下低溫烘干三天，即得牛膽汁炮制的黑豆。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于它是由牛膽汁炮制的黑豆的原生粉末或有機(jī)溶劑提取物為活性成分，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于所述的有機(jī)溶劑是50-90%乙醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的藥物組合物，其特征在于所述的制劑是片劑、膠囊劑、 丸劑、口服液。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于所述的膠囊劑中每粒含大豆異黃酮不得少于0. 30mg。
8.一種制備權(quán)利要求1-7任意一項(xiàng)所述的藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、取原料藥黑豆1份、牛膽汁0.4-1份；b、將黑豆與牛膽汁拌勻，煮開(kāi)放冷后，密封放置于陰涼通風(fēng)處，浸泡三天，攤開(kāi)晾干， 60°C溫度下低溫烘干三天，即得牛膽汁炮制的黑豆；c、取1/3經(jīng)牛膽汁炮制烘干好的黑豆打成細(xì)粉，其余2/3打成粗粉，過(guò)篩，粗粉加入 50-90%乙醇于80°C提取，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇；藥渣加入稀鹽酸提取一次，1. 5小時(shí)每次；合并濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 35 1. 40的稠膏，與細(xì)粉混合后烘干，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學(xué)上常用的制劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于所述的乙醇濃度為 70%乙醇。
10.權(quán)利要求1-7任意一項(xiàng)所述的組合物在治療I型糖尿病中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種預(yù)防或/和治療糖尿病的藥物組合物，它是由下述重量配比的原料制備而成的制劑黑豆1份、牛膽汁0.4-1份。本發(fā)明還提供了該藥物組合物的制備方法和用途。本發(fā)明是以牛膽汁、黑豆為原料，黑豆經(jīng)牛膽汁炮制后制備成膠囊，用于預(yù)防或/和治療糖尿病，藥效明確，質(zhì)量穩(wěn)定，可控性強(qiáng)，為臨床提供了一種新的用藥選擇。
文檔編號(hào)A61K36/48GK102258562SQ20111013743
公開(kāi)日2011年11月30日 申請(qǐng)日期2011年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月26日
發(fā)明者李文兵, 胡昌江, 謝鋒, 黃勤挽 申請(qǐng)人:成都中醫(yī)藥大學(xué)