專利名稱：水蛭用于改善黑眼圈或眼袋的應(yīng)用、組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化妝品領(lǐng)域，涉及水蛭用于改善黑眼圈或眼袋的應(yīng)用，以及以水蛭為主要原料，用于改善黑眼圈或眼袋的組合物及其制備方法。水蛭是一味傳統(tǒng)中藥，史載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，歷代本草均有記述。中醫(yī)認(rèn)為它有破血、逐瘀通經(jīng)的功能，歷來用于治療癥瘕、痞塊、血瘀閉經(jīng)、跌打損傷。中國藥典2000年版收載為水蛭科動(dòng)物螞蟥WhitmanpigraWhitman、7jC蛭Hinudenipponicaffhitman或柳葉螞蟥WhitmaniaacranuIataWhitman的干燥體。水蛭中主要成分有1、直接作用于凝血系統(tǒng)的成分，包括凝血酶抑制劑，以及其它抑制血液凝固的物質(zhì)，如水蛭素(Hirudin)、菲牛蛭素 (Bufrudin)、森林山蛭素(Haemadin)等。2、其它蛋白酶抑制劑及其它活性成分，如溶纖素 (Hementerin)、待可森(Decorsin)等。3、其他成分水蛭主含蛋白質(zhì)，此外含有17種氨基酸，包括人體必需的8種氨基酸，還含有Si、Mn、Fe、Co、Cr、Se、Mo、Ni等14種元素，還有吻蛭素、肝素、抗血栓素、氨基酸成分等營養(yǎng)成分。目前，已有較多化妝品中使用到水蛭的提取物或其主要成分水蛭素。如水蛭的提取物可用于祛斑、祛痘、潤膚、嫩膚、美白、預(yù)防皮膚衰老、增強(qiáng)皮膚彈性之功效。由于黑眼圈及眼袋的形成原因較多，睡眠不足、疲勞、腎氣虛損、精氣不足均易出現(xiàn)黑眼圈與眼袋，而且二者常常同時(shí)出現(xiàn)，非常影響個(gè)人形象，但是現(xiàn)有方法對(duì)于改善和完全祛除黑眼圈和眼袋并不明顯?，F(xiàn)有報(bào)道中，尚未見單獨(dú)應(yīng)用水蛭于改善或祛除黑眼圈和眼袋的報(bào)道與應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供一種水蛭的新用途，用于改善或祛除黑眼圈和眼袋。為了更好的應(yīng)用水蛭這一新用途，本發(fā)明所解決的第二個(gè)技術(shù)問題是提供以水蛭為主要原料制備的用于改善或祛除黑眼圈和眼袋的組合物。本發(fā)明組合物主要活性成分為水蛭提取物、天然水蛭素與重組水蛭素中任意一種，可選擇加入珍珠、決明子、茯苓中一種或幾種組成作為活性成分形成復(fù)方。本發(fā)明組合物的活性成分重量配比如下
背景技術(shù)：
水蛭提取物、天然水蛭素或重組水蛭素5 25份
0 5份。 種不為0。
0 5份 0 5份
優(yōu)選重量配比為
水蛭提取物、天然水蛭素或重組水蛭素 5 25份
珍珠 1~5份
決明子提取物茯苓提取物 3~5份 本發(fā)明所采用的活性成分分別是1、水蛭提取物的常規(guī)制備方法為取新鮮水蛭全體絞碎制成水蛭漿，按體積配比 水蛭漿1份濃鹽酸0. 01 0. 1份、丙酮1 10份的配料提取，取丙酮液，殘?jiān)儆帽?，過濾，合并丙酮提取液，干燥即可。2、天然水蛭素提取工藝為取新鮮水蛭唾液，加入丙酮，冷卻，取上清液離心，殘?jiān)尤纫宜崛芙?，取樣上柱層?1)陰離子交換柱層析取適量DEAE-C52加蒸餾水使其膨脹，按常規(guī)方法依次用 NaOH-NaCl混合液、稀鹽酸溶液及NaOH-NaCl混合液各浸泡30min后用蒸餾水洗滌至中性， 裝柱后，用PH4. 6的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液平衡，上述三氯乙酸溶液上樣進(jìn)行梯度洗脫并用記錄儀繪出洗脫曲線，分段收集洗脫液，將有活力部分集中于透析袋中用甘油濃縮，再用雙縮脈法測(cè)總蛋白含量，繼續(xù)以下的柱層析；(2)凝膠過濾柱層析取適量的kphadeX-G25加蒸餾水浸泡4h，按常規(guī)方法用 NaOH-NaCl混合液浸泡0.證，抽濾除去堿液并用蒸餾水洗滌至中性，加熱煮沸除去氣泡。裝柱，用PH7. 4的緩沖液平衡，將上述有活力洗脫液的濃縮液上樣、洗脫并用記錄儀繪出洗脫曲線，分段收集有活力洗脫液；回收溶劑，干燥后即可?；蛑苯淤徺I市售產(chǎn)品。3、重組水蛭素(專利號(hào)01105798. X)，其分子的第32至35位和第53至66位氨基酸序列為Arg32-Gly33-Asp;34-Ser35 ；Gln53-Gly54-Asp55-Phe56-Glu57-Pro58-Ile59 -Pro60-Glu61-Asp62-Ala63-Tyr64-Asp65-Glu66o4、決明子提取物的制備方法為取決明子藥材，粉碎至粗粉，用60 85%乙醇回流提取2 3次，每次6 12倍量溶劑，提取時(shí)間為0. 5 2.證，合并提取液，干燥即可。5、茯苓提取物的制備方法為取茯苓藥材，用藥材6 12倍量的60 85%乙醇回流提取2 3次，每次0. 5 2.證，合并提取液，干燥即可。主藥水蛭提取物、天然水蛭素與重組水蛭素能達(dá)到活血化瘀、暢通血脈的作用；配伍珍珠粉有清熱瀉火，養(yǎng)肝明目的作用，同時(shí)外用能在一定程度上達(dá)到物理遮蓋黑眼圈、眼袋的作用；決明子主入肝經(jīng)，能達(dá)到明目養(yǎng)目的作用；茯苓利水滲濕，能有效的對(duì)抗浮腫， 解決眼袋問題。水蛭、珍珠、決明子與茯苓的配伍使用，能達(dá)到暢通血脈、明目養(yǎng)目、利水消腫的作用，再配合健康的生活方式，對(duì)于改善或徹底祛除黑眼圈、眼袋具有良好的效果。利用水蛭用于改善或祛除黑眼圈和眼袋的新用途，采用水蛭為主要原料制成外用化妝品?？芍瞥傻幕瘖y品有眼霜、眼部凝膠劑、眼膜、眼部按摩精油、眼部精華素等，可根據(jù)各自劑型的需要加入適當(dāng)?shù)妮o料。本發(fā)明利用水蛭用于改善或祛除黑眼圈和眼袋，作用明顯，為公眾提供了一種全新的選擇。
具體實(shí)施例方式利用水蛭可改善或祛除黑眼圈和眼袋的新用途，發(fā)明人針對(duì)其有效濃度及具體劑型做了相關(guān)研究。本發(fā)明使用的主要原料及附加活性成分制備方法如下1、水蛭提取物的常規(guī)制備方法為取新鮮水蛭全體絞碎制成水蛭漿，按體積配比 水蛭漿1份濃鹽酸0. 01 0. 1份、丙酮1 10份的配料提取，取丙酮液，殘?jiān)儆帽?，過濾，合并丙酮提取液，干燥即可。2、天然水蛭素提取工藝為取新鮮水蛭唾液，加入丙酮，冷卻，取上清液離心，殘?jiān)尤纫宜崛芙?，取樣上柱層?1)陰離子交換柱層析取適量DEAE-C52加蒸餾水使其膨脹，按常規(guī)方法依次用 NaOH-NaCl混合液、稀鹽酸溶液及NaOH-NaCl混合液各浸泡30min后用蒸餾水洗滌至中性， 裝柱后，用PH4. 6的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液平衡，上述三氯乙酸溶液上樣進(jìn)行梯度洗脫并用記錄儀繪出洗脫曲線，分段收集洗脫液，將有活力部分集中于透析袋中用甘油濃縮，再用雙縮脈法測(cè)總蛋白含量，繼續(xù)以下的柱層析；(2)凝膠過濾柱層析取適量的kphadeX-G25加蒸餾水浸泡4h，按常規(guī)方法用 NaOH-NaCl混合液浸泡0.證，抽濾除去堿液并用蒸餾水洗滌至中性，加熱煮沸除去氣泡。裝柱，用PH7. 4的緩沖液平衡，將上述有活力洗脫液的濃縮液上樣、洗脫并用記錄儀繪出洗脫曲線，分段收集有活力洗脫液；回收溶劑，干燥后即可。或直接購買市售產(chǎn)品。3、重組水蛭素(專利號(hào)01105798. X)，其分子的第32至35位和第53至66位氨基酸序列為Arg32-Gly33-Asp;34-Ser35 ；Gln53-Gly54-Asp55-Phe56-Glu57-Pro58-Ile59 -Pro60-Glu61-Asp62-Ala63-Tyr64-Asp65-Glu66o4、決明子提取物的常規(guī)制備方法為取決明子藥材，粉碎至粗粉，用60 85% (ν/ ν)乙醇回流提取2 3次，每次6 12倍量溶劑，提取時(shí)間為0. 5 2. 5h，回收溶劑后，干燥即可。優(yōu)選乙醇濃度70 80%，溶劑用量及提取時(shí)間以提取出較多干物質(zhì)為佳。5、茯苓提取物的常規(guī)制備方法為取茯苓藥材，用藥材6 12倍量的60 85% (ν/ν)乙醇回流提取2 3次，每次0. 5 2. 5h，合并提取液，干燥即可。優(yōu)選乙醇濃度70 80 %，溶劑用量及提取時(shí)間以提取出較多干物質(zhì)為佳。以下實(shí)例中均采用優(yōu)選條件制備的水蛭提取物、天然水蛭素、重組水蛭素、決明子提取物、茯苓提取物。一、本發(fā)明活性成分量效關(guān)系的確定實(shí)驗(yàn)1 將水蛭提取物、天然水蛭素和重組水蛭素不同濃度的水溶液?jiǎn)为?dú)使用在同一個(gè)測(cè)試者眼周皮膚上，每天早晚各使用一次，使用5周后，根據(jù)黑眼圈、眼袋祛除效果篩選產(chǎn)品中活性成分的有效濃度。測(cè)試結(jié)果見表1 (-)表示無明顯效果
(+)表示有效果(++)表示有明顯效果(+++)表示有非常明顯效果表1說明，采用不同濃度的水蛭藥物的效果差異為當(dāng)濃度低于5%時(shí)，對(duì)眼周血流量幾乎沒有較大的改善，故祛黑眼圈和眼袋效果不明顯；當(dāng)濃度為5%以上時(shí)，血流量得到較大的改善，祛黑眼圈和眼袋效果明顯；但當(dāng)濃度增加到25%以上時(shí)，測(cè)試者反映會(huì)出現(xiàn)過分油膩的現(xiàn)象，使用時(shí)間較長(zhǎng)后會(huì)產(chǎn)生脂肪粒。綜上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，最終選擇5 25% (g/ g)的濃度。表1單獨(dú)使用水蛭中活性成分對(duì)黑眼圈、眼袋的作用效果表
權(quán)利要求
1.水蛭用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的應(yīng)用，其特征在于采用水蛭的提取物、或天 然水蛭素、或重組水蛭素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水蛭用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的應(yīng)用，其特征在于以 水蛭提取物、天然水蛭素與重組水蛭素為主要活性成分，與珍珠、決明子提取物、獲等提取 物中的ー種或任意組合共同組成活性成分，其重量配比如下水蛭提取物、天然水蛭素或重組水蛭素5 25份珍珠0 5份決明子提取物0 5份獲等提取物0 5份；其中，珍珠、決明子提取物、獲等提取物中至少ー種不為O ；水蛭提取物的制備方法為取新鮮水蛭全體絞碎制成水蛭菜，按體積配比水蛭菜1 份濃鹽酸0. 01 0. 1份、丙酮1 10份的配料提取，取丙酮液，殘漁再用丙酮浸提，過濾， 合并丙酮提取液，干燥即可；決明子提取物的制備方法為取決明子藥材，粉碎至粗粉，用60 85%乙醇回流提取 2 3次，鋒次6 12倍量溶劑，提取時(shí)間為0. 5 2.證，合并提取液，干燥即可；獲等提取物的制備方法為取獲等藥材，用藥材6 12倍量的60 85%乙醇回流提 取2 3次，鋒次0. 5 2.證，合并提取液，干燥即可。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的水蛭用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的應(yīng)用，其特征在于活 性成分重量配比如下水蛭提取物、天然水蛭素或重組水蛭素5 25份珍珠1 5份決明子提取物3 5份獲等提取物3 5份。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的水蛭用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的應(yīng)用，其特征在于 將活性成分加入常規(guī)輔料制成外用化妝品；外用化妝品中主要活性成分占外用化妝品的重 量百分比為5-25%。
5.用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的組合物，其特征在于是以水蛭提取物、天然水蛭 素與重組水蛭素為主要活性成分，與珍珠、決明子提取物、獲等提取物中的ー種或任意組合 作為活性成分制成，活性成分是由如下重量配比的原料藥制成水蛭提取物、天然水蛭素或重組水蛭素5 25份珍珠0 5份決明子提取物0 5份獲等提取物0 5份；其中，珍珠、決明子提取物、獲等提取物中至少ー種不為O ；所述水蛭提取物的制備方法為取新鮮水蛭全體絞碎制成水蛭菜，按體積配比水蛭 菜1份濃鹽酸0. Ol 0. 1份、丙酮1 10份的配料提取，取丙酮液，殘漁再用丙酮浸提，過濾，合并丙酮提取液，干燥即可；所述決明子提取物的制備方法為取決明子藥材，粉碎至粗粉，用60 85%乙醇回流提取2 3次，每次6 12倍量溶劑，提取時(shí)間為0. 5 2. 5h,合并提取液，干燥即可；所述茯苓提取物的制備方法為取茯苓藥材，用藥材6 12倍量的60 85%乙醇回流提取2 3次，每次0. 5 2.證，合并提取液，干燥即可。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的組合物，其特征在于活性成分由如下重量配比的原料藥制成水蛭提取物、天然水蛭素或重組水蛭素5 25份珍珠1 5份決明子提取物3 5份茯苓提取物3 5份。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的組合物，其特征在于 加入常規(guī)輔料制成外用化妝品。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的組合物，其特征在于外用化妝品中水蛭提取物、或天然水蛭素、或重組水蛭素占外用化妝品的重量百分比為5-25%。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的組合物，其特征在于所述的外用化妝品為眼霜、眼部凝膠劑、眼膜、眼部按摩精油、眼部精華素。
10.用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的組合物的制備方法，其特征在于以水蛭提取物、 天然水蛭素與重組水蛭素為主要活性成分，與珍珠、決明子提取物、茯苓提取物中的一種或任意組合作為活性成分制成，活性成分是由如下重量配比的原料藥制成水蛭提取物、天然水蛭素或重組水蛭素5 25份珍珠0 5份決明子提取物0 5份茯苓提取物0 5份；其中，珍珠、決明子提取物、茯苓提取物中至少一種不為0 ；所述水蛭提取物的制備方法為取新鮮水蛭全體絞碎制成水蛭漿，按體積配比水蛭漿1份濃鹽酸0. 01 0. 1份、丙酮1 10份的配料提取，取丙酮液，殘?jiān)儆帽幔?過濾，合并丙酮提取液，干燥即可；所述決明子提取物的制備方法為取決明子藥材，粉碎至粗粉，用60 85%乙醇回流提取2 3次，每次6 12倍量溶劑，提取時(shí)間為0. 5 2. 5h,合并提取液，干燥即可；所述茯苓提取物的制備方法為取茯苓藥材，用藥材6 12倍量的60 85%乙醇回流提取2 3次，每次0. 5 2. 5h,合并提取液，干燥即可； 活性成分優(yōu)選由如下重量配比的原料制成水蛭提取物、天然水蛭素或重組水蛭素5 25份珍珠1 5份決明子提取物3 5份茯苓提取物3 5份。
全文摘要
本發(fā)明屬于化妝品領(lǐng)域，涉及水蛭的新應(yīng)用，具體是以水蛭為主要原料，水蛭用于改善黑眼圈或眼袋的應(yīng)用、組合物及其制備方法。為了更好的應(yīng)用水蛭這一新用途，本發(fā)明提供了一種以水蛭為主要原料制備的用于改善或祛除黑眼圈和眼袋的組合物，該組合物主要活性成分為水蛭提取物、天然水蛭素與重組水蛭素中任意一種，可選擇加入珍珠、決明子提取物、茯苓提取物中一種或幾種組成復(fù)方，其重量配比為其中，珍珠、決明子提取物、茯苓提取物中至少一種不為0。本發(fā)明利用水蛭用于改善或祛除黑眼圈和眼袋，作用明顯，為公眾提供了一種全新的選擇。
文檔編號(hào)A61K8/98GK102188360SQ201110106898
公開日2011年9月21日 申請(qǐng)日期2011年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月27日
發(fā)明者張海燕, 曾新, 甘奇志 申請(qǐng)人:重慶時(shí)珍閣普生藥業(yè)有限公司