專利名稱：一種肌氨肽苷注射液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制備方法，特別涉及一種肌氨肽苷注射液的制備方法，屬于醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
肌氨肽苷注射液用于腦功能紊亂；腦卒中、鬧供血不足所致腦功能減退；周圍神經(jīng)疾病等，療效顯著，毒副作用小。目前，現(xiàn)有肌氨肽苷提取工藝對(duì)多肽和次黃嘌呤的提取效果不好，收率相對(duì)較低。本發(fā)明與現(xiàn)有肌氨肽苷注射液制備方法均不同。在申請(qǐng)?zhí)柗謩e為03104642. 8,200510119095. X,200610150889. 7,200910067227. 7 的專利中所述的肌氨肽苷 提取得液收率均較低，質(zhì)量也不穩(wěn)定。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于公開一種肌氨肽苷注射液的制備方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明肌氨肽苷注射液的制備方法包括如下步驟I、肌氨肽苷提取液的制備過程(I)取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機(jī)中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 5-1. 5 4. 5-5. 5的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至4-6，用膠體磨制成勻漿；(2)將勻漿液在3000r/min下離心5_30分鐘或用1_10 u m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；(3)取剩余絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 5-1. 5 4. 5-5. 5的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至4-6,用膠體磨制成勻楽;；(4)將第二次制成的勻漿再以3000r/min離心5_30分鐘或用1_10 y m微孔濾膜過濾，收集第二次提取液；(5)合并兩次提取液，濾過，收集濾液；(6)將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的I 3倍；(7)在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為70-90%，靜置8 24小時(shí)、濾過，收集濾液；(8)回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；(9)將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. I 0. 5倍，即得肌氨肽苷提取液；2、肌氨肽苷注射液的制備過程(I)取總量為20% 30%注射用水，冷卻至25°C以下；(2)量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至40% 60%，攪拌循環(huán)，每體積份溶液中加0. 0005-0. 002重量份活性炭，攪拌循環(huán)10-20分鐘，用鈦棒過濾；
(3)加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調(diào)pH值至7. 0 8. 0，取樣化驗(yàn)含量，按照規(guī)格要求每2體積份含多肽0. 003-0. 004重量份，次黃嘌呤0. 0002-0. 0008重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應(yīng)為標(biāo)示量的90. 0% 110. 0% ;(4)半成品化驗(yàn)合格后，用0. 22 iim微孔濾膜除菌過濾，檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時(shí)充入氮?dú)?，熔封?5)燈檢、包裝、入庫，即得本發(fā)明肌氨肽苷注射液。本發(fā)明肌氨肽苷注射液的制備方法還可以優(yōu)選為如下步驟I、肌氨肽苷提取液的制備取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機(jī)中絞碎，將絞碎組織加0.9%氯化鈉溶液按照I : 5的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至5，用膠體磨制成勻漿；將勻漿液離心或過濾，將勻漿液在3000r/min離心18分鐘或用5 y m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0.9%氯化鈉溶液按照I : 5的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至5，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在3000r/min離心25分鐘或用3iim微孔濾膜過濾，收集第二次提取液；合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的2倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為80%，靜置15小時(shí)、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. 3倍，即得肌氨肽苷提取液；2、肌氨肽苷注射液的制備取總量為25%注射用水，冷卻至25°C以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至50%，攪拌循環(huán)，每體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環(huán)15分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調(diào)pH值至7. 5，取樣化驗(yàn)含量，按照規(guī)格要求每2體積份含多肽0. 0035重量份，次黃嘌呤0. 0005重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應(yīng)為標(biāo)示量的90. 0% 110. 0% ;半成品化驗(yàn)合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時(shí)充入氮?dú)?，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發(fā)明肌氨肽苷注射液。本發(fā)明肌氨肽苷注射液的制備方法還可以優(yōu)選為如下步驟I、肌氨肽苷提取液的制備過程取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機(jī)中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 6 5. 2的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至4. 6，用膠體磨制成勻漿；將勻漿液在3000r/min下離心20分鐘或用2 U m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0.9%氯化鈉溶液按照1.2 4.8的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至
5.5，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在3000r/min下離心10分鐘或用8 y m微孔濾膜過濾，離收集第二次提取液；合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的I. 5倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為85%，靜置10小時(shí)、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. 4倍，即得肌氨肽苷提取液；2、肌氨肽苷注射液的制備過程取總量為22%注射用水，冷卻至25°C以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重、量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至55%，攪拌循環(huán)，每體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環(huán)12分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調(diào)pH值至7. 8、取樣化驗(yàn)含量，按照規(guī)格要求每2體積份含多肽0. 0032重量份，次黃嘌呤0. 0007重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應(yīng)為標(biāo)示量的90. 0% 110. 0% ;半成品化驗(yàn)合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時(shí)充入氮?dú)?，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發(fā)明肌氨肽苷注射液。本發(fā)明肌氨肽苷注射液的制備方法還可以優(yōu)選為如下步驟I、肌氨肽苷提取液的制備過程取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機(jī)中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照1.3 4. 6的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至4. 4，用膠體磨 制成勻漿；將勻漿液在3000r/min下離心15分鐘或用4 U m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 6 5.3的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至
5.8，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在3000r/min下離心12分鐘或用6 y m微孔濾膜過濾，收集第二次提取液合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的2. 5倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為75%，靜置20小時(shí)、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. 2倍，即得肌氨肽苷提取液；2、肌氨肽苷注射液的制備過程取總量為28%注射用水，冷卻至25 V以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至48%，攪拌循環(huán)，每體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環(huán)18分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調(diào)pH值至7. 4、取樣化驗(yàn)含量，按照規(guī)格要求每2體積份含多肽0. 0038重量份，次黃嘌呤0. 0004重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應(yīng)為標(biāo)示量的90. 0% 110. 0% ;半成品化驗(yàn)合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時(shí)充入氮?dú)?，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發(fā)明肌氨肽苷注射液。上述發(fā)明所述的重量份和體積份的關(guān)系是g/ml。本發(fā)明方法簡(jiǎn)單、常規(guī)，肌氨肽苷提取得液收率高，制成的肌氨肽苷注射液的質(zhì)量穩(wěn)定。下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例I肌氨肽苷提取收率試驗(yàn)
表I肌氨肽苷提取收率試驗(yàn)
權(quán)利要求
1.一種肌氨肽苷注射液的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟 A.肌氨肽苷提取液的制備過程 (1)取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機(jī)中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液，按照0. 5-1. 5 4. 5-5. 5的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至4_6，用膠體磨制成勻漿； (2)將勻漿液在3000r/min下離心5_30分鐘或用1_10u m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液； (3)取剩余絞碎組織加0.9%氯化鈉溶液按照0. 5-1. 5 4. 5-5. 5的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至4-6,用膠體磨制成勻楽;； (4)將第二次制成的勻漿再以3000r/min離心5_30分鐘或用1_10u m微孔濾膜過濾，收集第二次提取液； (5)合并兩次提取液，濾過，收集濾液； (6)將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的I 3倍； (7)在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為70-90%，靜置8 24小時(shí)、濾過，收集濾液； (8)回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾； (9)將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0.I 0. 5倍，即得肌氨肽苷提取液； B.肌氨肽苷注射液的制備過程 (1)取總量為20% 30%注射用水，冷卻至25°C以下； (2)量取肌氨肽苷提取液，含多肽3.5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至40% 60%，攪拌循環(huán)，每體積份溶液中加0. 0005-0. 002重量份活性炭，攪拌循環(huán)10-20分鐘，用鈦棒過濾； (3)加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調(diào)pH值至7. 0 8. O、取樣化驗(yàn)含量，按照規(guī)格要求每2體積份含多肽0. 003-0. 004重量份，次黃嘌呤0. 0002-0. 0008重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應(yīng)為標(biāo)示量的90. 0% 110. 0% ; (4)半成品化驗(yàn)合格后，用0.22 u m微孔濾膜除菌過濾，檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時(shí)充入氮?dú)?，熔封? (5)燈檢、包裝、入庫，即得本發(fā)明肌氨肽苷注射液。
2.如權(quán)利要求I所述的肌氨肽苷注射液的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟 A.取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機(jī)中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液，按照I : 5的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至5，用膠體磨制成勻漿；將勻漿液離心或過濾，將勻漿液在3000r/min離心18分鐘或用5 y m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0.9%氯化鈉溶液，按照I : 5的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至5，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在3000r/min離心25分鐘或用3 y m微孔濾膜過濾，收集第二次提取液；合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的2倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為80%，靜置15小時(shí)、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎 組織的0. 3倍，即得肌氨肽苷提取液；B.肌氨肽苷注射液的制備 取總量為25%注射用水，冷卻至25°C以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至50%，攪拌循環(huán)，每體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環(huán)15分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調(diào)pH值至7. 5、取樣化驗(yàn)含量，按照規(guī)格要求每2體積份含多肽0. 0035重量份，次黃嘌呤0. 0005重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應(yīng)為標(biāo)示量的.90. 0% 110. 0% ;半成品化驗(yàn)合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時(shí)充入氮?dú)?，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發(fā)明肌氨肽苷注射液。
3.如權(quán)利要求I所述的肌氨肽苷注射液的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟 A.肌氨肽苷提取液的制備過程 取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機(jī)中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 6 5. 2的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至4. 6，用膠體磨制成勻漿；將勻漿液在3000r/min下離心20分鐘或用2 y m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照I. 2 : 4. 8的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至5. 5，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在在3000r/min下離心10分鐘或用8 y m微孔濾膜過濾，離收集第二次提取液；合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的I. 5倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為85%，靜置10小時(shí)、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. 4倍，即得肌氨肽苷提取液； B.肌氨肽苷注射液的制備過程 取總量為22%注射用水，冷卻至25°C以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至55%，攪拌循環(huán)，每體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環(huán)12分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調(diào)pH值至7. 8、取樣化驗(yàn)含量，按照規(guī)格要求每2體積份含多肽0. 0032重量份，次黃嘌呤0. 0007重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應(yīng)為標(biāo)示量的.90. 0% 110. 0% ;半成品化驗(yàn)合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時(shí)充入氮?dú)?，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發(fā)明肌氨肽苷注射液。
4.如權(quán)利要求I所述的肌氨肽苷注射液的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟 A.肌氨肽苷提取液的制備過程 取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機(jī)中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照1.3 4. 6的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至4. 4，用膠體磨制成勻漿；將勻漿液在3000r/min下離心15分鐘或用4 y m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 6 5. 3的重量比例混合，用醋酸調(diào)pH至5. 8，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在在3000r/min下離心12分鐘或用6 y m微孔濾膜過濾，收集第二次提取液合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的2. 5倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為75%，靜置20小時(shí)、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. 2倍，即得肌氨肽苷提取液； B.肌氨肽苷注射液的制備過程 取總量為28%注射用水，冷卻至25°C以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至48%，攪拌循環(huán)，每 體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環(huán)18分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調(diào)pH值至7. 4、取樣化驗(yàn)含量，按照規(guī)格要求每2體積份含多肽0. 0038重量份，次黃嘌呤0. 0004重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應(yīng)為標(biāo)示量的90. 0% 110. 0% ;半成品化驗(yàn)合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時(shí)充入氮?dú)?，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發(fā)明肌氨肽苷注射液。
全文摘要
本發(fā)明提供一種肌氨肽苷注射液制備方法，取家兔肌肉和心肌，加氯化鈉溶液，用醋酸調(diào)節(jié)混合液，離心、過濾，濾液加乙醇，過超濾柱超濾，濃縮得肌氨肽苷提取液；肌氨肽苷提取液中加入活性炭處理，微孔濾膜除菌過濾，灌裝，熔封等工藝制成本發(fā)明肌氨肽苷注射液。本發(fā)明方法簡(jiǎn)單、常規(guī)，肌氨肽苷提取得液收率高，制成的肌氨肽苷注射液的質(zhì)量穩(wěn)定。
文檔編號(hào)A61K38/17GK102727428SQ20111009087
公開日2012年10月17日 申請(qǐng)日期2011年4月12日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月12日
發(fā)明者余啟波, 吳中華, 張德奎, 張煜華, 梁隆, 申志春, 程志鵬, 胡思玉 申請(qǐng)人:河南科倫藥業(yè)有限公司