專利名稱：甘蒙錦雞兒提取物的提取方法及其用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及藏藥甘蒙錦雞兒的新用途。
背景技術：
甘蒙錦雞兒(Caragana opulens)系豆科錦雞兒屬灌木，廣泛產(chǎn)于內(nèi)蒙古、河北、山西、陜西、寧夏、甘肅等地(中國科學院中國植物志編輯委員會主編.中國植物志.42卷.第一分冊。北京科學出版社，1993年59頁)，是藏藥 查瑪?shù)脑参镏?，性涼、味苦，可清各種肌肉熱和脈熱，能排脈病并有催吐作用，其莖枝皮可祛風活血，止痛利尿，補氣益腎(中國科學院西北高原生物研究所編著.藏藥志.西寧青海人民出版社，1991年，237-238頁)。但到目前為止，還未見對甘蒙錦雞兒現(xiàn)代藥理研究的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供甘蒙錦雞兒的α -葡萄糖糖苷酶抑制活性的新用途。本發(fā)明是甘蒙錦雞兒提取物的提取方法，其步驟為(I)將甘蒙錦雞兒樹皮進行粉碎，干燥處理；(2)將粉碎物料放置在大極性有機溶劑中浸潤提取2-3次，每次浸潤5-10 ；(3)將提取液進行過濾、減壓濃縮得醇提浸膏，浸膏用40_70°C熱水溶解得水懸浮液，水懸浮液用等體積量小極性有機溶劑萃取除去油脂性成分，最后用中極性有機溶劑萃取，得到甘蒙錦雞兒提取物。甘蒙錦雞兒提取物的用途，是用作制備治療糖尿病藥物。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)甘蒙錦雞兒的中極性有機溶劑提取物具有顯著的α -葡萄糖糖苷酶抑制活性，具有良好的降低餐后血糖的作用，可作為有效成分制成一類新型的降低餐后血糖的藥物。
具體實施例方式下面詳細說明本發(fā)明本發(fā)明是甘蒙錦雞兒提取物的提取方法，其步驟為(I)將甘蒙錦雞兒樹皮進行粉碎，干燥處理；(2)將粉碎物料放置在大極性有機溶劑中浸潤提取2-3次，每次浸潤5-10 ；(3)將提取液進行過濾、減壓濃縮得醇提浸膏，浸膏用40_70°C熱水溶解得水懸浮液，水懸浮液用等體積量小極性有機溶劑萃取除去油脂性成分，最后用中極性有機溶劑萃取，得到甘蒙錦雞兒提取物。小極性有機溶劑可以是石油醚、環(huán)己烷、正己烷、汽油中的一種或幾種混合，除去油脂性成分的水懸浮液用等體積量中極性有機溶劑萃取得中極性有機溶劑提取物，其中的中極性有機溶劑可是乙酸乙酯、乙醚、氯仿、二氯甲烷中的一種或幾種混合。生物活性測試方法
I.甘蒙錦雞兒提取物對α-葡萄糖苷酶的體外抑制作用以淀粉為底物，測定甘蒙錦雞兒提取物對α-葡萄糖苷酶的抑制作用，具體為稱取一定量甘蒙錦雞兒提取物，用10%乙醇水溶液配置成濃度為100mg/ml的藥物溶液，取此溶液20 μ I與2 μ I α -淀粉酶(O. 4U/ml，Sigma公司)混合，37°C孵育15分鐘，加入I %的淀粉溶液室溫放置5分鐘，用碘滴定顯色法，在630nm波長下測定OD值，通過淀粉消耗量計算α-葡萄糖苷酶抑制率，陽性對照藥為拜唐蘋，設空白和陰性對照，抑制率=((樣品-陰性)/(空白-陰性))Χ100%。結(jié)果見實施例。2.甘蒙錦雞兒提取物對四氧嘧啶誘導糖尿病小鼠淀粉負荷糖耐量的影響用小鼠整體動物模型，采用腹腔注射四氧嘧啶復制小鼠糖尿病模型，觀察甘蒙錦雞兒提取物對四氧嘧啶誘導糖尿病小鼠淀粉負荷糖耐量的影響。具體做法為取體重20-30g昆明種小鼠，腹腔注射200mg/kg四氧嘧啶，72小時后測定血糖，選取血糖值大于13mM的小鼠，每組12只，雌雄各半分為5組，即糖尿病模型組、拜唐蘋組、甘蒙錦雞兒提取物的高、中、低劑量組，測定空腹血糖(O分鐘)，給藥10分鐘后，各組均灌胃以淀粉5g/kg，模 型組灌胃以生理鹽水，分別于30，60，90，120分鐘后取眶后靜脈叢血，用葡萄糖氧化酶法在96孔板中測定血糖含量。結(jié)果見實施例。生物活性實驗表明，甘蒙錦雞兒經(jīng)大極性溶劑提取、小極性溶劑脫脂后，中極性溶劑萃取得到的中極性提取物具有顯著的抑制α-葡萄糖苷酶活性，能明顯抑制糖尿病小鼠的血糖升聞。具體實驗示例I :藏藥甘蒙錦雞兒提取物的制備取藏藥甘蒙錦雞兒樹皮IOkg用95%乙醇浸泡3次，每次用95%乙醇30L，每次浸泡5-10天。浸泡液合并濃縮得浸膏(GJ-l)550g，浸膏用60°C熱水溶解得懸浮液，懸浮液依次用石油醚、乙酸乙酯萃取3次，得石油醚提取物128g(GJ-2)、乙酸乙酯提取物132g(GJ-3)。2 :藏藥甘蒙錦雞兒提取物對α -葡萄糖苷酶的體外抑制作用測定方法見“發(fā)明內(nèi)容”；結(jié)果如表I表I.甘蒙錦雞兒提取物對α -葡萄糖苷酶的抑制率
提取物待測物濃度_抑制率_
GJ-11 mg/ml57.4%GJ-21 mg/ml34.6%
GJ-31 mg/ml _94.6%_
拜唐蘋 1 mg/ml98.8°/?？梢钥闯?，甘蒙錦雞兒提取物GJ-1、GJ_3具有明顯的α-葡萄糖苷酶抑制活性，其中GJ-3活性最強。實施例3 :藏藥甘蒙錦雞兒提取物GJ-3對四氧嘧啶誘導糖尿病小鼠淀粉負荷糖耐量的影響
測定方法見“發(fā)明內(nèi)容”；拜唐蘋組劑量為20mg/kg，甘蒙錦雞兒提取物GJ-3高、中、低劑量組劑量分別為200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg)。結(jié)果如表2表2. GJ-3對四氧嘧啶誘導糖尿病小鼠淀粉負荷糖耐量的影響

權利要求
1.甘蒙錦雞兒提取物的提取方法，其步驟為 (1)將甘蒙錦雞兒樹皮進行粉碎，干燥處理； (2)將粉碎物料放置在大極性有機溶劑中浸潤提取2-3次，每次浸潤5-10； (3)將提取液進行過濾、減壓濃縮得醇提浸膏，浸膏用40-70°C熱水溶解得水懸浮液，水懸浮液用等體積量小極性有機溶劑萃取除去油脂性成分，最后用中極性有機溶劑萃取，得到甘蒙錦雞兒提取物。
2.根據(jù)權利要求I所述的甘蒙錦雞兒提取物的提取方法，其特征在于大極性有機溶劑為甲醇，或者乙醇。
3.根據(jù)權利要求I所述的甘蒙錦雞兒提取物的提取方法，其特征在于小極性有機溶劑為，石油醚，或者環(huán)己烷，或者正己烷，或者汽油。
4.根據(jù)權利要求I所述的甘蒙錦雞兒提取物的提取方法，其特征在于中極性有機溶劑為乙酸乙酯，或者乙醚，或者氯仿，或者二氯甲烷。
5.甘蒙錦雞兒提取物的用途，是用作制備治療糖尿病藥物。
6.權利要求5所述的甘蒙錦雞兒提取物的用途，其特征在于所述的藥物是降低餐后血糖的藥物。
7.權利要求5所述的甘蒙錦雞兒提取物的用途，其特征在于所述的藥物是a-葡萄糖苷酶抑制劑類藥物。
全文摘要
甘蒙錦雞兒提取物的提取方法及其用途，涉及藏藥甘蒙錦雞兒的新用途，其方法的步驟為(1)將甘蒙錦雞兒樹皮進行粉碎，干燥處理；(2)將粉碎物料放置在大極性有機溶劑中浸潤提取2-3次，每次浸潤5-10；(3)將提取液進行過濾、減壓濃縮得醇提浸膏，浸膏用40-70℃熱水溶解得水懸浮液，水懸浮液用等體積量小極性有機溶劑萃取除去油脂性成分，最后用中極性有機溶劑萃取，得到甘蒙錦雞兒提取物。其用途是用作制備治療糖尿病藥物。
文檔編號A61K36/48GK102626437SQ20111005941
公開日2012年8月8日 申請日期2011年3月8日 優(yōu)先權日2011年3月8日
發(fā)明者李濤, 楊中鐸, 賴東海 申請人:蘭州理工大學