專利名稱：含有難溶性喜樹(shù)堿類藥物的脂質(zhì)體制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉 及ー種含有難溶性喜樹(shù)堿類藥物的脂質(zhì)體制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
喜樹(shù)堿或其衍生物，也稱為喜樹(shù)堿類藥物，是DNA合成抑制劑，用于多種癌癥疾病的治療。目前市場(chǎng)上喜樹(shù)堿類藥物的品種有喜樹(shù)堿、9-輕基喜樹(shù)堿、9-氨基喜樹(shù)堿、10-輕基喜樹(shù)堿、硝基喜樹(shù)堿、7-(β-三甲基甲硅烷基)こ基喜樹(shù)堿、7-(叔丁氧基)亞氨甲基喜樹(shù)堿、7-こ基-10-羥基喜樹(shù)堿(SN-38)、9_硝基喜樹(shù)堿(9-NC)等，主要通過(guò)靜脈、ロ服、噴霧等方式給藥。喜樹(shù)堿類藥物以拓?fù)洚悩?gòu)酶為作用部位，通過(guò)靶抑制DNA的合成而發(fā)揮抗癌作用，適用于不同生長(zhǎng)速度的腫瘤，細(xì)胞毒性強(qiáng)，對(duì)于胃癌、肝癌、骨癌、白血病、膀胱癌等多種惡性腫瘤的治療效果明顯。其作用機(jī)制是選擇性抑制DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I (Τ0Ρ0 I)。在作用過(guò)程中，喜樹(shù)堿類藥物內(nèi)酯環(huán)打開(kāi)，?；cTOPO II的親核部分相互作用，并通過(guò)與TOPOI-DNA的可裂解復(fù)合物可逆結(jié)合形成喜樹(shù)堿類藥物-T0P0I-DNA三元復(fù)合物，從而穩(wěn)定TOPOI-DNA復(fù)合物，抑制DNA解旋，導(dǎo)致DNA磷酸ニ酯鍵斷裂，進(jìn)而出現(xiàn)程序性細(xì)胞凋亡和死亡。喜樹(shù)堿類藥物在體內(nèi)具有抗腫瘤活性必須保持六元α -羥基內(nèi)酯環(huán)(環(huán)Ε)的完整性，即保持內(nèi)酷環(huán)的閉合，內(nèi)酯環(huán)打開(kāi)則活性大大降低或無(wú)活性。但水難溶性喜樹(shù)堿類藥物的α -羥基內(nèi)酯環(huán)對(duì)水性環(huán)境具有敏感性，在血液等PH高的水性環(huán)境中可以水解開(kāi)環(huán)，使其失去抗腫瘤活性。而目前臨床上是通過(guò)將喜樹(shù)堿類藥物堿化開(kāi)環(huán)制成鈉鹽水針劑使用的，該方法雖增加了水溶性，但活性只有原來(lái)的1/10甚至更低。為了提高難溶性喜樹(shù)堿類藥物的穩(wěn)定性和藥效，可以考慮將難溶性喜樹(shù)堿類藥物制備成脂質(zhì)體制劑。脂質(zhì)體是磷脂分散在水中時(shí)形成的脂質(zhì)雙分子層，其內(nèi)部為水相的閉合囊泡，主要具有以下特點(diǎn)脂質(zhì)體是一種脂質(zhì)雙分子層小囊，結(jié)構(gòu)與細(xì)胞生物膜類似，因此具有良好的細(xì)胞相容性；膜材可在體內(nèi)生物降解且無(wú)毒性和免疫原性；既可包裹水溶性藥物，又可包裹脂溶性藥物，為脂溶性藥物的靜脈給藥提供了可能；脂質(zhì)體可具備靶向功能，降低藥物的毒性。因此，將難溶性喜樹(shù)堿類藥物制備成脂質(zhì)體制劑可以保護(hù)其內(nèi)酯環(huán)，維持其活性，降低其毒副作用。目前，已有多種喜樹(shù)堿類藥物的脂質(zhì)體制劑的報(bào)道，公開(kāi)號(hào)為CN1537534A的專利報(bào)道了ー種含有磷脂、膽固醇、凍干保護(hù)劑以及10-羥基喜樹(shù)堿的脂質(zhì)體及其制備方法；公開(kāi)號(hào)為CN1980671A的專利公開(kāi)了ー種含有磷脂、脂肪酸以及水難溶性喜樹(shù)堿的脂質(zhì)體制劑；公開(kāi)號(hào)為CN101003556A的專利公開(kāi)了ー種10-羥基喜樹(shù)堿衍生物、其脂質(zhì)體制劑及制備方法；公開(kāi)號(hào)為CN1650864A、CN1582932A、CN101019834A的專利均公開(kāi)了ー種喜樹(shù)堿或其類似物的脂質(zhì)體的專利。但由于水難溶性喜樹(shù)堿類藥物通常為水不溶、脂難溶性，與磷脂等脂質(zhì)的親和カ較差，因此采用上述方法制備的脂質(zhì)體包封率通常較低，不超過(guò)50%。為此，專利CN1562021A公開(kāi)了ー種通過(guò)調(diào)節(jié)外相pH來(lái)提高包封率的方法，該方法首先是將該類藥物在堿性溶液中溶解，然后以溶液(開(kāi)環(huán))形式包封入脂質(zhì)體后再調(diào)節(jié)外相pH使喜樹(shù)堿類藥物成沉淀(閉環(huán))形式包裹于脂質(zhì)體內(nèi)部，由此可以提高藥物的包封率，但該方法仍限于將包封率由現(xiàn)有技術(shù)的10% -30%提高到高于75%。如果能進(jìn)一歩提高難溶性喜樹(shù)堿類藥物脂質(zhì)體的包封率，將有利于其作為抗腫瘤藥物在臨床中的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
為了進(jìn)一歩提高難溶性喜樹(shù)堿類藥物脂質(zhì)體制劑的包封率，發(fā)明人通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)，證明在脂質(zhì)體的制備過(guò)程中加入高濃度的鹽及糖能夠使更多的藥物包封于脂質(zhì)體中，由此完成了本發(fā)明。由于本發(fā)明涉及的喜樹(shù)堿類藥物屬于水不溶脂難溶性藥物，在水和有機(jī)溶劑中的溶解度均較低，而組成脂質(zhì)體的磷脂屬于兩親性材料，在水相中加入高濃度的鹽和糖導(dǎo)致溶液離子強(qiáng)度的增加，降低藥物在水相中的溶解度，促使在水相中的藥物向脂質(zhì)體中的分布，從而提高藥物的包封率。本發(fā)明的ー個(gè)方面涉及ー種脂質(zhì)體制劑，其包含難溶性喜樹(shù)堿類藥物、磷脂、鹽以及糖或多元醇，其特征在于所述鹽的濃度為O. lmol/L I. Omol/L,優(yōu)選為O. 3mol/L O. 8mol/L,在本發(fā)明的實(shí)施方案中，為O. 3,0. 5或O. 7mol/L ;所述糖或多元醇的濃度為200mg/ml 1000mg/ml,優(yōu)選為300mg/ml 800mg/ml,在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述糖或多兀醇的濃度為 300mg/ml、400mg/ml 或 500mg/ml。其中所述的難溶性喜樹(shù)堿類藥物是指水不溶性脂難溶性喜樹(shù)堿類藥物，其包括但不限于喜樹(shù)喊、9_輕基喜樹(shù)喊、9_氨基喜樹(shù)喊、10-輕基喜樹(shù)喊、硝基喜樹(shù)喊、7_ ( β - ニ甲基甲硅烷基)こ基喜樹(shù)堿、7-(叔丁氧基)亞氨甲基喜樹(shù)堿和7-こ基-10-羥基喜樹(shù)堿，以及它們的藥用鹽。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述難溶性喜樹(shù)堿包括10-羥基喜樹(shù)堿、9-氨基喜樹(shù)堿及SN-38。所述的磷脂可以為飽和磷脂，也可以為不飽和磷脂，可以為天然磷脂，也可以為合成磷脂，可以為普通磷脂，也可以為修飾后的磷脂如親水基修飾的磷脂或具有特殊性質(zhì)的磷脂如具有長(zhǎng)循環(huán)性質(zhì)的磷脂和具有熱敏特性的磷脂，所述磷脂包括但不限于蛋黃磷脂、大豆磷脂、氫化大豆磷脂、氫化蛋黃磷脂、ニ硬脂酰磷脂酰甘油、ニ硬脂酰磷脂酰こ醇胺、單硬脂酰磷脂酸膽堿、ニ棕櫚酰磷脂酰膽堿、ニ硬脂酰磷脂酰膽堿、l，2-Dierucoyl-Sn-glyceiO-3-phosphocholine、ニ油酰磷脂酰膽堿、ニ硬脂酰磷脂酰こ醇胺、ニ棕櫚酰磷脂酰こ醇胺、ニ油酰磷脂酰こ醇胺、ニ棕櫚酰磷脂酰甘油、ニ硬脂酰磷脂酰甘油、神經(jīng)鞘磷脂、磷脂酰絲氨酸、磷脂酸、溶血磷脂、單棕櫚酰磷脂酰膽堿、單硬脂酰磷脂酰膽堿、不同分子量的聚こニ醇化的磷脂、腦磷脂、蛋磷脂酰膽堿、磷脂酰膽堿、磷脂酰こ醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、磷脂酰絲氨酸、ニ肉豆蘧酰卵磷脂、磷脂酰こ醇胺、磷脂酰膽堿、ニ鯨蠟磷酸酷、ニ棕櫚酰磷脂酸、二月桂磷脂酰膽堿、ニ硬脂酰磷脂酰膽堿、ニ芥?；蚜字ⅴ擞仓Ａ字８视?、ニ癸?；蚜字ⅴ擞王；蚜字-肉豆蘧酰-2-棕櫚酰卵磷脂、I-肉豆蘧酰-2-硬脂酰卵磷脂、I-棕櫚酰-2-肉豆蘧酰卵磷脂、I-棕櫚酰-2-硬脂酰卵磷脂、I-硬脂酰-2-肉豆蓮酰卵磷脂、I-硬脂酰-2-棕櫚酰卵磷脂、I-肉豆蘧酰-2-油酰卵磷脂、I-棕櫚酰-2-油酰卵磷脂、肉豆蘧酰溶血卵磷脂、棕櫚酰溶血卵磷脂、硬脂酰溶血卵磷脂、二月桂酰磷脂酰甘油、ニ肉豆蘧酰磷脂酰甘油、ニ棕櫚酰磷脂酰甘油、ニ硬脂酰磷脂酰甘油、ニ油酰磷脂酰甘油、ニ芥?；字８视汀-棕櫚酰-2-油酰磷脂酰甘油、ニ肉豆蘧酰磷脂酸、ニ棕櫚酰磷脂酸、ニ硬脂酰磷脂酸、ニ肉豆蘧酰磷脂酰こ醇胺、ニ棕櫚酰磷脂酰こ醇胺、ニ硬脂酰磷脂酰こ醇胺、ニ油酰磷脂酰こ醇胺、ニ芥?；字￥炒及贰-棕櫚酰-2-油酰磷脂酰こ醇胺、ニ肉豆蘧酰磷脂酰絲氨酸、ニ硬脂酰磷脂酰絲氨酸、ニ棕櫚酰磷脂酰絲氨酸、ニ油酰磷脂酰絲氨酸、ニ硬脂酰こ醇胺-聚こニ醇或其兩種或兩種以上的混合物。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述磷脂為ニ棕櫚酰磷脂酰膽堿DPPC和長(zhǎng)循環(huán)磷脂ニ硬脂酰こ醇胺-聚こニ醇2000的混合物、不飽和磷脂蛋黃卵磷脂、或者蛋黃卵磷脂和ニ硬脂酰こ醇胺-聚こニ醇2000的混合物。在本發(fā)明中，所述的難溶性喜樹(shù)堿類藥物與磷脂的重量百分比為O. 0001 I I I ;優(yōu)選為 O. 005 I O. I I。在本發(fā)明中，所述的鹽為可溶性鹽，例如為緩沖鹽和/或可溶性無(wú)機(jī)鹽中的ー種或多種，例如為磷酸鹽、碳酸鹽、醋酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、硫酸鹽、亞硫酸鹽或鹽酸鹽中的ー種或多種，優(yōu)選為磷酸鹽，在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述的鹽為磷酸鈉鹽或者磷酸鉀/鈉 鹽。在本發(fā)明中，所述的糖或多元醇選自單糖、雙糖、可溶性多糖以及小分子多元醇中的ー種或多種，優(yōu)選為單糖、雙糖及小分子多元醇中的ー種或多種，例如為蔗糖、海藻糖、葡萄糖、山梨糖、乳糖、果糖、山梨醇和甘露醇中的ー種或數(shù)種，在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述的糖或多元醇為蔗糖或海藻糖。在本發(fā)明中，所述的脂質(zhì)體制劑還含有添加剤，所述添加劑選自抗氧化劑、膽固醇、表面活性齊[J、磁性物質(zhì)、抗體、配體、穩(wěn)定齊U、荷電物質(zhì)、PH調(diào)節(jié)劑和高分子聚合物中的一種或數(shù)種。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述添加劑為抗氧化劑維生素E ;在本發(fā)明的ー個(gè)實(shí)施方案中，所述添加劑為膽固醇。所述的抗氧化劑如維生素E、亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉等具有抗氧化作用的物質(zhì)；所述的表面活性劑如泊洛沙姆、吐溫、司盤(pán)等具有表面活性作用的物質(zhì)；所述的磁性物質(zhì)如三氧化ニ鐵、四氧化三鐵等具有磁性物質(zhì)；所述的抗體為可特異性作用于某些受體的物質(zhì)，如抗HIV的抗體F105等；所述的配體是指可特異性作用于某些受體的小分子的物質(zhì)如甘露醇、半乳糖等；所述的荷電物質(zhì)為本身帶有電荷的物質(zhì)，如磷脂酸(PA)、磷脂酰絲氨酸(PS)、十八胺等；所述的pH調(diào)節(jié)劑為可以調(diào)節(jié)pH的物質(zhì)，如檸檬酸、鹽酸、磷酸、三こ胺等；所述的高分子聚合物可以為右旋糖酐、聚こニ醇等。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)實(shí)際需要添加不同的添加剤，所得到的脂質(zhì)體可以為普通脂質(zhì)體、長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體、熱敏脂質(zhì)體、長(zhǎng)循環(huán)熱敏脂質(zhì)體、磁性脂質(zhì)體或免疫脂質(zhì)體。在本發(fā)明中，所述脂質(zhì)體制劑的包封率可達(dá)到85%以上，在經(jīng)過(guò)反復(fù)凍融后，包封率可達(dá)到90%以上，甚至接近100%。本發(fā)明的另一方面涉及ー種藥物組合物，其含有治療有效量的本發(fā)明的脂質(zhì)體制齊U，以及藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。 本發(fā)明的還一方面涉及本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑的制備方法，其可以采用被動(dòng)載藥技術(shù)制備，包括薄膜分散法、有機(jī)溶劑凍干法、噴霧干燥法、流化床包衣法、単相溶液凍干法、反相蒸發(fā)法、二次乳化法、こ醇注入法或交叉流注射法；在本發(fā)明具體實(shí)施方案中，所述制備方法為薄膜分散法和噴霧干燥法，具體包括以下步驟
(I)將難溶性喜樹(shù)堿類藥物、磷脂及添加劑溶解于有機(jī)溶劑，例如氯仿和/或甲醇中；(2)蒸發(fā)(I)中所得溶液以除去有機(jī)溶劑，得到混合粉或薄膜；或者將(I)所得溶液進(jìn)行噴霧干燥，得到混合粉；(3)在(2)中所得混合粉或薄膜或者(I)中所得溶液加入含有鹽及糖的溶液，水化或乳化后將懸液移出，超聲或均質(zhì)過(guò)膜，除菌，得到脂質(zhì)體；任選地，在除菌前加入反復(fù)凍融的步驟。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述的難溶性喜樹(shù)堿類藥物脂質(zhì)體制劑采用薄膜分散法制備，即將藥物、磷脂及其他添加劑溶解于有機(jī)溶劑中，超聲溶解。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，置真空干燥箱中一定時(shí)間后加入含有高濃度鹽及糖的溶液，水化后將懸液移出，超聲或均質(zhì)過(guò)膜，即得脂質(zhì)體。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的難溶性喜樹(shù)堿類藥物脂質(zhì)體制劑采用噴霧 干燥法制備，即將藥物、磷脂及其他添加劑溶解于有機(jī)溶劑中，超聲溶解。噴霧干燥即得混合粉，置真空干燥箱中一定時(shí)間后加入含有高濃度鹽及糖的溶液，水化后將懸液移出，超聲或均質(zhì)過(guò)膜，即得脂質(zhì)體。所述的脂質(zhì)體經(jīng)不同方法制備后可以直接經(jīng)過(guò)濾除菌后儲(chǔ)存或使用，也可以反復(fù)凍融以進(jìn)一步增加脂質(zhì)體的包封率，然后經(jīng)過(guò)濾除菌儲(chǔ)存或使用。所述的脂質(zhì)體可以進(jìn)一步制成注射液、凍干粉針劑、大輸液或噴霧劑。采用本方法，不僅可以制備普通脂質(zhì)體，還可以制備成長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體、長(zhǎng)循環(huán)熱敏脂質(zhì)體以及其他主動(dòng)或被動(dòng)靶向脂質(zhì)體，可以增加藥物的穩(wěn)定性，提高藥物活性，可以增加藥物在靶區(qū)的釋放，提高療效，還可以減少藥物在全身循環(huán)系統(tǒng)的分布，從而降低總的用藥量，同時(shí)降低全身毒副作用。本發(fā)明的另一方面涉及本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑在制備抗腫瘤藥物中的用途。發(fā)明的有益效果本發(fā)明在難溶性喜樹(shù)堿類藥物的脂質(zhì)體制劑中，加入高濃度的鹽和糖，使得在保證藥物活性的同時(shí)，大大提高了含有難溶性喜樹(shù)堿類藥物脂質(zhì)體制劑的包封率，其包封率可達(dá)到85%以上，且在經(jīng)過(guò)反復(fù)凍融后，包封率可達(dá)到90%以上，接近100%。難溶性喜樹(shù)堿類藥物脂質(zhì)體制劑包封率的大大提高將更有利于該類藥物在臨床治療腫瘤中的應(yīng)用。同時(shí)，該脂質(zhì)體制劑制備方法簡(jiǎn)單、方便，無(wú)需將藥物先轉(zhuǎn)化成無(wú)活性的開(kāi)環(huán)形式然后再包封于脂質(zhì)體中或再轉(zhuǎn)換成閉環(huán)形式，而是可以直接將該類藥物以閉環(huán)形式包封于脂質(zhì)體內(nèi)，適合大規(guī)模生產(chǎn)。


圖I實(shí)施例I制備的脂質(zhì)體的粒徑分布圖。其中縱坐標(biāo)“cumulative distribution”表不累積分布，單位為“densitydistribution”表示密度分布；橫坐標(biāo)“particle size”表示粒度,單位為納米(nm)。
具體實(shí)施例方式下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解，下列實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行，或參照《微載體藥物遞送系統(tǒng)》(梅興國(guó)編，200 9年11月I日出版，華中科技大學(xué)出版社)。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過(guò)市購(gòu)獲得的常規(guī)產(chǎn)品。實(shí)施例110-羥基喜樹(shù)堿長(zhǎng)循環(huán)熱敏脂質(zhì)體的制備采用薄膜分散-均質(zhì)過(guò)膜法制備脂質(zhì)體將10-羥基喜樹(shù)堿lg，DPPC (二棕櫚酰基卵磷脂)46g、二硬脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000 3. 0g，溶于氯仿甲醇=I I中，超聲至完全溶解，55°C 150rpm的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)40min以除去有機(jī)溶劑,真空干燥3h,加入含有500mg/ml海藻糖的O. 3M、pH5. O的磷酸鈉鹽溶液中，50°C IOOrpm條件下水化40min后,均質(zhì)過(guò)O. 15 μ m的聚碳酸酯膜，然后將過(guò)O. 22 μ m膜后的混合液均分為2份，一份直接儲(chǔ)存使用，一份經(jīng)如下程序凍融后儲(chǔ)存使用，即得10-羥基喜樹(shù)堿的長(zhǎng)循環(huán)熱敏脂質(zhì)體。凍融程序凍融程序-70O 50 0C -70 0C 50 °C -70 °C 50 °C -20 °C時(shí)間2h IOmin 2h IOmin 2h IOmin 保存實(shí)施例210-羥基喜樹(shù)堿脂質(zhì)體的制備將10-羥基喜樹(shù)堿2g，蛋黃卵磷脂47.5g，維生素E 0.5g，溶于氯仿甲醇=2 I中，超聲至完全溶解，45°C 150rpm的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)40min以除去有機(jī)溶劑,真空干燥3h,力口入含有400mg/ml鹿糖的O. 5M、pH5. O的磷酸鈉鹽溶液中，45°C IOOrpm條件下水化40min后，均質(zhì)過(guò)O. IOym的聚碳酸酯膜，經(jīng)反復(fù)凍融后儲(chǔ)存使用，即得10-羥基喜樹(shù)堿脂質(zhì)體。實(shí)施例39-氨基喜樹(shù)堿長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體的制備將9-氨基喜樹(shù)堿4g，蛋黃卵磷脂43g，二硬脂酰乙醇胺-聚乙二醇20002. 5g，膽固醇O. 5g,溶于氯仿甲醇=2 I中，超聲至完全溶解,50°C 150rpm的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)40min以除去有機(jī)溶劑，真空干燥3h，加入含有300mg/ml蔗糖的O. 7M、pH5. O的磷酸鈉鹽溶液中，450C IOOrpm條件下水化40min后,均質(zhì)過(guò)O. 10 μ m的聚碳酸酯膜,經(jīng)反復(fù)凍融后儲(chǔ)存使用，即得9-氨基喜樹(shù)堿長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體。實(shí)施例4SN-38長(zhǎng)循環(huán)熱敏脂質(zhì)體的制備將SN-38(7-乙基_10_羥基喜樹(shù)堿)2g，DPPC46g、二硬脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000 2. 0g，加入到乙醇中，超聲至完全溶解，噴霧干燥得干燥物，加入含有500mg/ml蔗糖的O. 3M>pH5. O的磷酸鉀/鈉鹽(鉀/鈉=I : 4)溶液中，45°C IOOrpm條件下水化40min后，均質(zhì)過(guò)O. 15 μ m的聚碳酸酯膜，經(jīng)反復(fù)凍融后儲(chǔ)存使用，即得SN-38的長(zhǎng)循環(huán)熱敏脂質(zhì)體。 實(shí)施例5脂質(zhì)體包封率的測(cè)定取脂質(zhì)體適量,置于超高速條件下12000rpm離心8min,若有沉淀則反復(fù)離心,直至無(wú)沉淀出現(xiàn)，取上清液，加入適量的甲醇或添加適當(dāng)Triton水溶液的甲醇破膜，然后經(jīng)HPLC法測(cè)定溶液中藥物的含量，通過(guò)對(duì)比離心前后脂質(zhì)體中藥物的含量計(jì)算包封率，結(jié)果見(jiàn)表I。表I脂質(zhì)體包封率的測(cè)定
權(quán)利要求
1.一種脂質(zhì)體制劑，其包含難溶性喜樹(shù)堿類藥物、磷脂、鹽以及糖或多元醇，其特征在于所述鹽的濃度為O. lmol/L I. Omol/L,優(yōu)選為O. 3mol/L O. 8mol/L ;所述糖或多兀醇的濃度為 200mg/ml 1000mg/ml,優(yōu)選為 300mg/ml 800mg/ml。
2.權(quán)利要求I的脂質(zhì)體制劑，其中所述的難溶性喜樹(shù)堿類藥物選自喜樹(shù)堿、9-羥基喜樹(shù)堿、9-氨基喜樹(shù)堿、10-羥基喜樹(shù)堿、硝基喜樹(shù)堿、7-( β -三甲基甲硅烷基)こ基喜樹(shù)堿、7-(叔丁氧基)亞氨甲基喜樹(shù)堿和7-こ基-10-羥基喜樹(shù)堿，以及它們的藥用鹽。
3.權(quán)利要求I的脂質(zhì)體制劑，其中所述的鹽為可溶性鹽，例如為緩沖鹽和/或可溶性無(wú)機(jī)鹽。
4.權(quán)利要求3的脂質(zhì)體制劑，其中所述的可溶性鹽選自磷酸鹽、碳酸鹽、醋酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、硫酸鹽、亞硫酸鹽和鹽酸鹽中的ー種或多種。
5.權(quán)利要求I的脂質(zhì)體制劑，其中所述的糖或多元醇選自單糖、雙糖、可溶性多糖以及小分子多元醇中的ー種或多種，優(yōu)選為單糖、雙糖及小分子多元醇中的ー種或多種。
6.權(quán)利要求5的脂質(zhì)體制劑，其中所述的糖或多元醇選自蔗糖、海藻糖、葡萄糖、山梨糖、乳糖、果糖、山梨醇和甘露醇中的ー種或多種。
7.權(quán)利要求I的脂質(zhì)體制劑，其中所述的難溶性喜樹(shù)堿類藥物與磷脂的重量百分比為O.0001 : I I : I;優(yōu)選為 0.005 I 0.1 I。
8.權(quán)利要求1-7任ー項(xiàng)的脂質(zhì)體制劑，其還含有添加剤，所述添加劑選自抗氧化劑、膽固醇、表面活性劑、磁性物質(zhì)、抗體、配體、穩(wěn)定劑、荷電物質(zhì)、pH調(diào)節(jié)劑和高分子聚合物中的ー種或數(shù)種。
9.藥物組合物，其含有治療有效量的權(quán)利要求1-8任ー項(xiàng)的脂質(zhì)體制劑，以及藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
10.權(quán)利要求1-8任ー項(xiàng)的脂質(zhì)體制劑的制備方法，其包括以下步驟 (1)將難溶性喜樹(shù)堿類藥物、磷脂及添加劑溶解于有機(jī)溶劑，例如氯仿和/或甲醇中； (2)蒸發(fā)(I)中所得溶液以除去有機(jī)溶劑，得到混合粉或薄膜；或者將(I)所得溶液進(jìn)行噴霧干燥，得到混合粉； (3)在(2)中所得混合粉或薄膜或者(I)中所得溶液加入含有鹽及糖的溶液，水化或乳化后將懸液移出，超聲或均質(zhì)過(guò)膜，除菌，得到脂質(zhì)體；任選地，在除菌前加入反復(fù)凍融的步驟。
11.權(quán)利要求1-8任ー項(xiàng)的脂質(zhì)體制劑在制備抗腫瘤藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有難溶性喜樹(shù)堿類藥物的脂質(zhì)體制劑及其制備方法。所述脂質(zhì)體制劑包含難溶性喜樹(shù)堿類藥物、磷脂、鹽以及糖或多元醇，所述鹽選自緩沖鹽和/或無(wú)機(jī)鹽，其濃度為0.1mol/L～1.0mol/L，優(yōu)選為0.3mol/L～0.8mol/L，所述糖或多元醇選自蔗糖、海藻糖、葡萄糖、山梨糖、乳糖、果糖、山梨醇和甘露醇，其濃度為200mg/ml～1000mg/ml，優(yōu)選為300mg/ml～800mg/ml。本發(fā)明還涉及包含所述脂質(zhì)體制劑的藥物組合物，以及所述脂質(zhì)體制劑用于制備抗腫瘤藥物的用途。本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑包封率高，制備簡(jiǎn)單、方便，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K47/36GK102670509SQ20111005539
公開(kāi)日2012年9月19日 申請(qǐng)日期2011年3月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月8日
發(fā)明者李志平, 李雪如, 梅興國(guó) 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所