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用于促進脂肪細胞分化的、含有地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮或葛根的提取物的...的制作方法

文檔序號:1201705閱讀:434來源:國知局
專利名稱:用于促進脂肪細胞分化的、含有地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮或葛根的提取物的 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及用于促進脂肪細胞分化及脂滴形成的組合物。
背景技術(shù)
脂肪細胞分化是前脂肪細胞變成脂肪細胞的過程,其中有許多外界的刺激物如激素及復(fù)雜的基因表達參與到其中。在誘導(dǎo)脂肪細胞分化的外部信號中,胰島素是最常見的激素,并且在調(diào)節(jié)脂肪代謝中起著關(guān)鍵作用。在胰島素的刺激之下,前脂肪細胞開始分化成為脂肪細胞。胰島素還通過涉及增加的葡萄糖的吸收及甘油三酯的合成的復(fù)雜機理,以脂質(zhì)形式貯存能量,而且通過激活脂朊脂酶促進源于血液循環(huán)中脂蛋白的脂肪酸的吸收。脂肪細胞中胰島素的各種作用將伴隨著由胰島素調(diào)節(jié)的基因轉(zhuǎn)錄的增加,以及特異性蛋白質(zhì)的磷酸化及其快速激活。由于胰島素誘導(dǎo)脂肪細胞分化,轉(zhuǎn)錄因子如PPAR γ、C/EBP家族、 ADD1/SREBP1等的轉(zhuǎn)錄及表達將會增加,從而所述轉(zhuǎn)錄因子將通過引發(fā)相互之間的轉(zhuǎn)錄來誘導(dǎo)脂肪細胞分化。脂肪細胞分化以匯合(confluence)、激素誘導(dǎo)、克隆擴充、生長停滯及終末分化的順序發(fā)生。首先,前脂肪細胞生長至匯合時,在G0/G1細胞周期邊界處會發(fā)生生長停滯。對 C/ΕΒΡβ和C/ΕΒΡδ給予適當?shù)拇碳ぜ氨磉_,將發(fā)生一或兩輪細胞分裂,這被稱之為克隆擴充。在所述前脂肪細胞通過PPAR Y和C/ΕΒΡα的表達充分地分化之前,它們會經(jīng)歷生長停滯期。在最后階段,即在終末分化時,在連續(xù)的生長停滯后生成成熟的脂肪細胞。在分化初期類似于成纖維細胞的所述前脂肪細胞會變?yōu)閳A形(形態(tài)學(xué)的圓化)。由于脂朊脂酶的mRNAs等的表達,會瞬時誘導(dǎo)所述轉(zhuǎn)錄因子C/ΕΒΡβ和δ。然后,PPARY和 C/ΕΒΡα表達,以調(diào)節(jié)實際上決定脂肪細胞的顯型或激活脂肪細胞表達的基因。那些基因包括甘油磷酸脫氫酶(GPDH)、乙酰輔酶A羧化酶(ACC)、蘋果酸酶(ME)、葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4 (Glut4)、胰島素受體(IR)、脂肪細胞的選擇性脂肪酸結(jié)合蛋白2 (aP2)等。通過這個過程, 在細胞質(zhì)內(nèi)生成脂滴。它們生長并結(jié)合,且隨著時間的推移,將形成一個或多個較大的脂滴。如果可以促進人體的脂肪細胞分化,從而能促進脂滴的形成和積累,那么皮膚皺紋和彈性將得到改善。

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問題
本發(fā)明涉及提供用于改善皮膚皺紋、增強皮膚彈性及防治皮膚老化的組合物。技術(shù)方案
在一個總的方面,本發(fā)明提供用于增強皮膚彈性的組合物,其包含作為活性成分的、選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種的提取物。在另一個總的方面,本發(fā)明提供用于改善皮膚皺紋的組合物,其包含作為活性成分的、選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種的提取物。在另一個總的方面,本發(fā)明提供用于防止皮膚老化的組合物,其包含作為活性成分的、選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種的提取物。在另一個總的方面,本發(fā)明提供用于外部皮膚涂敷的組合物,其包含作為活性成分的、選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種的提取物。有益效果
本發(fā)明的所述組合物包含選自作為活性成分的地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種提取物,該組合物通過促進脂肪細胞分化和脂滴的形成提供增強皮膚彈性、改善皮膚皺紋及防止皮膚老化的效果。當所述組合物包含含有多于一種的以上提取物的復(fù)合提取物時,將獲得更好的效果。本發(fā)明的所述組合物包含選自作為活性成分的地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種提取物,該組合物可以用作用于外部皮膚涂敷的組合物。


圖1展示了用地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮、葛根的提取物或其復(fù)合提取物處理3T3-L1細胞以誘導(dǎo)分化,然后使用油紅0染色以確定脂滴的形成的結(jié)果。圖2展示了用地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮、葛根的提取物或其復(fù)合提取物處理3T3-L1細胞以誘導(dǎo)分化,并用油紅0染色,然后在提取油紅0染料后檢測吸光率的結(jié)果。
具體實施例方式這里使用的術(shù)語“提取物”包括從天然產(chǎn)品中提取的任何物質(zhì),不論提取方法或物質(zhì)種類。例如,它包括使用溶劑如水或有機溶劑從天然產(chǎn)品中提取的提取物,或者從天然產(chǎn)品中提取的具體的物質(zhì)如油。這里使用的術(shù)語“復(fù)合提取物”是指包含兩種或多種成分的混合物。它包括含有兩種或多種提取物的混合物,或含有兩種或多種成分的提取物的混合物。這里使用的術(shù)語“皮膚”是指動物的外皮。文中使用該術(shù)語最廣泛的意義,不僅包括面部或身體,而且包括頭皮和頭發(fā)。下面,將更為詳細地描述本發(fā)明。一方面,本發(fā)明提供用于增強皮膚彈性、改善皮膚皺紋或防止皮膚老化的組合物, 其包含選自作為活性成分的地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種提取物。另一方面,本發(fā)明提供用于外部皮膚涂敷的組合物,其包含選自作為活性成分的地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種提取物。地黃、Rehimnnia glutinosa)為透骨草科多年生牧草,原產(chǎn)于中國。根部厚而肥。 根橫向延伸,為棕紅色。其莖挺直,高20-30cm并有毛。葉片源于根部向上簇集。葉片呈橢圓形,葉柄尖銳末端圓鈍,邊緣為鋸齒狀。葉片的表面具有皺紋。葉脈在葉片背面突起,形成網(wǎng)絡(luò)。葉片在莖上交替互生。在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)上,當其根(原始的)經(jīng)干燥,或經(jīng)蒸熟并干燥后,主要用作草藥。
甘草(Plycyrrhiza uralensis)為蝶形花科多年生牧草。其紅棕色的根部向地下深處延伸。莖具有角且筆直地生長至近lm。它由于具有茂密的白色毛,呈灰白色,而且分布著斑點。葉片交替互生并為奇數(shù)的羽狀。小葉的數(shù)量為7 17枚,呈橢圓形,且末端尖銳。小葉長2 5cm,寬l-3cm。小葉具有白色的毛且兩面都有斑點,且不是鋸齒狀的?;ㄔ?月和8月盛開。其紫色的花長1.4-2. 5cm且為串狀花?;ㄩ_在葉腋處。豆莢為薄的、 長的且彎成弓形。它含有6 8粒腎形種子。其甜味的根通常用來入藥。薏苡仁是指去除外殼的、禾本科薏苡(Cbiz hcrj^-j^i)的種子。它為橢圓形或?qū)挋E圓形。兩端都有點凹進去。背面為圓凸形,而且在中間形成深長形的槽。背面幾乎為白色并沾滿粉末。種子被棕色的膜狀殼和皮所覆蓋。麥芽是指通過控制濕度、溫度及氧氣之下發(fā)芽的大麥OYori/皿 ra^are)的谷物。木瓜是指榲梓(aamoffld^ Siz^z7lSi1S)的橢圓形或圓形的果實。其未成熟的果實為綠色。當它成熟后,顏色會變?yōu)辄S色且表面變得不平坦。雖然香氣濃郁,但其味道酸澀。 由于其能提供芳香和效果的油狀成分,外皮硬且粘粘的。它原產(chǎn)于中國。五加皮是指五加科刺五加屬的根、樹干或樹枝的皮。葛根是指去皮的葛(/^eraria A^aia)的根。—方面,選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根的至少一種提取物包含相應(yīng)植物的每部分的一部分。例如,選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根的至少一種提取物可以包括每種植物的葉、花、莖、枝、根、果實和種子的一部分。一方面,選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根的至少一種提取物可以通過常用的提取方法制備。一方面,所述提取方法可以為溶劑提取法。一方面,所述溶劑可以為C1-C5的低級醇、乙醚、乙酸乙酯、丙酮或氯仿,但是不限于這些溶劑。所述C1-C5的低級醇可以為,例如選自甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇、正丁醇和異丁醇中的一種或多種。一方面,包含選自作為活性成分的地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種提取物的所述組合物,促進前脂肪細胞分化成脂肪細胞且增加脂滴的數(shù)量及大小。通過促進脂肪細胞分化和脂滴的形成及增強皮膚的密度,本發(fā)明的組合物有效的防止皮膚皺紋、增強皮膚彈性及防治皮膚老化。所有包含單獨的提取物的所述組合物都具有這種效果。包含復(fù)合提取物的組合物能獲得最佳效果。一方面,包含選自作為活性成分的地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種提取物的組合物,可以包含重量比為20-30 1-10 20-30 1-10 1-10 5-15 20-30的地黃提取物、甘草提取物、薏苡仁提取物、麥芽提取物、木瓜提取物、五加皮提取物和葛根提取物。當所述組合物含有上述重量比的單獨提取物時,將獲得很好的促進脂肪細胞分化及脂滴的形成的效果,進而獲得很好的增強皮膚彈性、改善皮膚皺紋或防止皮膚老化的效果。另一方面,包含由地黃提取物、甘草提取物、薏苡仁提取物、麥芽提取物、木瓜提取物、五加皮提取物和葛根提取物作為活性成分的復(fù)合提取物的組合物,可以包括占復(fù)合提取物總重量的25wt%的地黃提取物、5wt%的甘草提取物、的薏苡仁提取物、6wt%的麥芽提取物、5wt%的木瓜提取物、10wt%的五加皮提取物和25wt%的葛根提取物。一方面,本發(fā)明提供一種藥物組合物,其包括含有選自作為活性成分的地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種提取物的組合物。所述藥物組合物可以進一步包含藥物佐劑如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、乳化劑、用于控制滲透壓的鹽類、緩沖劑等,或者其它在治療上有效的制劑,而且可根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法制備成用于口服或腸胃外給藥的劑型。用于口服給藥的劑型可以包括片劑、丸劑、顆粒劑、硬或軟膠囊劑、粉劑、細顆粒齊U、粉末劑、液體劑、乳劑、糖漿劑、小丸劑等。除所述活性成分外,這些劑型可以包含,稀釋齊IJ(如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素或甘氨酸)或潤滑劑(如二氧化硅、云母、 硬脂酸和其鎂或鈣鹽、或聚乙二醇)。片劑可以進一步包括粘合劑,如硅酸鎂鋁、淀粉糊、凝膠、黃芪膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮,以及藥物佐劑,例如分解質(zhì)如淀粉、瓊脂和褐藻酸或其鈉鹽、吸收劑、著色劑、調(diào)味劑、甜味劑等。所述片劑可以通過普遍采用的混合法、成粒法或包衣法制備。用于腸胃外給藥的劑型可以包括用于外部皮膚涂敷的制劑、注射劑、洗劑、軟膏齊 、凝膠劑、霜、懸浮劑、乳液、栓劑、貼劑或噴劑,但是不限于這些劑型。一方面,本發(fā)明的所述藥物組合物可以口服給藥或腸胃外給藥,例如直腸給藥、局部給藥、經(jīng)皮給藥、靜脈注射給藥、肌肉給藥、腹部給藥、皮下給藥等。所述活性成分的給藥劑量將根據(jù)待治療的受試者的年齡、性別和體重、待治療的疾病的具體類型、病理狀態(tài)、疾病的嚴重程度或病理狀態(tài)、給藥途徑或?qū)I(yè)醫(yī)療人員的判斷而不同??紤]這些因素而確定給藥劑量在本領(lǐng)域的技術(shù)人員的知識范圍內(nèi)。另一方面,本發(fā)明提供美容護理組合物,其包含含有作為活性成分的選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種提取物的組合物。所述美容護理組合物可以為,例如,化妝品組合物,且可以含有化妝品或皮膚可接受的媒介物或堿。它可以為適合局部涂敷的任何劑型,包括,例如溶液、凝膠劑、固體、無水膏劑、水包油型乳劑、油包水型乳劑、懸浮液、微型乳劑、微膠囊、微粒劑、離子(脂質(zhì)體)或非離子型小囊狀分散劑、泡沫劑或噴霧劑,進一步包括壓縮推進劑??梢酝ㄟ^本領(lǐng)域常用的方法制備這些組合物。所述美容護理組合物可以進一步含有在美容學(xué)或皮膚學(xué)領(lǐng)域常用的佐劑如脂肪、 有機溶劑、增溶劑、增稠劑、膠凝劑、潤膚劑、抗氧化劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑、發(fā)泡劑、芳香劑、表面活性劑、水、離子型或非離子型乳化劑、填充劑、掩蔽劑、螯合劑、防腐劑、維生素、阻斷劑、 潤濕劑、精油、染料、色素、親水或親脂劑、脂質(zhì)囊泡劑或其它化妝品中常用的成分。所述佐劑的用量可以為在美容學(xué)或皮膚學(xué)領(lǐng)域中常用的用量。美容護理組合物的劑型不受具體的限制,然而可根據(jù)所要達到的目的而適當?shù)剡x取。例如,它可以被制成選自滋養(yǎng)乳液、收斂乳液、滋養(yǎng)乳液、滋養(yǎng)霜、按摩霜、精華液、眼霜、 眼部精華液、潔面霜、潔面乳、潔面泡沫、潔面水、面膜、粉、遮瑕筆、潤膚乳、潤膚霜、潤膚油、 身體精華液、潔膚露、軟膏、凝膠、貼片或噴霧中的劑型,但不限于這些劑型。含有本發(fā)明的組合物的所述藥物或美容護理組合物可以用于臉部,特別地用于眼部或唇部周圍、臉頰或前額、頸部、手、腳等,但不限于這些部位。
實施例下面將說明制備實施例及測試實施例。下述實施例和實驗僅以說明為目的,不用于限制本發(fā)明的范圍。制備實施例
根據(jù)常用的提取方法制備地黃提取物、甘草提取物、薏苡仁提取物、麥芽提取物、木瓜提取物、五加皮提取物和葛根提取物。然后,制備復(fù)合提取物,其含有占所述復(fù)合提取物總重量的25wt%的地黃提取物、5wt%的甘草提取物、的薏苡仁提取物、6wt%的麥芽提取物、5wt%的木瓜提取物、10wt%的五加皮提取物和25wt%的葛根提取物。[測試實施例1]脂肪細胞分化的誘導(dǎo)
將前脂肪細胞3T3-L1 (KCLB-10092. 1,韓國細胞株銀行)接種于12孔板上,每個孔具有5X104細胞/mL。待加入含有10%小牛血清、Gibco BRL 16170-078)的杜爾貝科的改良 Eagle培養(yǎng)基Gibco BRL 11965-084、后,在37°C 和5% (v/v) CO2的條件下培養(yǎng)所述細胞2天。在用含有10%(v/v)的小牛血清、10 μ M地塞米松(DEX)、0. 5mM的1-甲基_3_異丁基黃嘌呤(IBMX)及1 μ g/mL胰島素(分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基)的DMEM代替所述培養(yǎng)基后,在同等條件下繼續(xù)培養(yǎng)所述細胞2天。然后,加入含有10%(v/v)小牛血清的DMEM(Sigma Chem. Co., USA),并繼續(xù)培養(yǎng)之后,將所得細胞作為對照組。[測試實施例2]每種提取物對脂滴形成的效果
將在制備實施例中制備的每種所述地黃提取物、甘草提取物、薏苡仁提取物、麥芽提取物、木瓜提取物、五加皮提取物、葛根提取物及復(fù)合提取物添加到濃度為IOppm的分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基內(nèi),以獲得含有每種提取物的分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基。然后,以與測試實施例1使用的同樣的方法誘導(dǎo)脂肪細胞的分化。繼續(xù)培養(yǎng)所得的細胞5天。2μ M的曲格列酮用作陽性對照組。用油紅0對分化的脂肪細胞進行染色,以觀察脂滴形成的程度。其結(jié)果列于圖1。暗斑表明脂滴的存在。如圖1所示,與對照組相比,所有的提取物表現(xiàn)出促進脂滴的形成的顯著效果。特別地,所述甘草提取物、麥芽提取物和復(fù)合提取物展現(xiàn)出更好的效果。[測試實施例3]每種提取物對脂滴形成的效果
接下來進行測試實施例2,使用丙二醇(Amresco)提取油紅0的染料。然后,在500nm 處測量吸光率,以確定分化細胞中脂肪的含量。計算相對于未經(jīng)提取處理過的對照組的脂肪含量,以確定分化程度。結(jié)果列于圖2。如圖2所示,與對照組相比,所有的提取物表現(xiàn)出促進脂滴的形成的顯著效果。明顯的是,所述復(fù)合提取物與陽性對照組曲格列酮相比表現(xiàn)出更好的效果。根據(jù)圖2的結(jié)果,計算相對于地黃提取物、甘草提取物、薏苡仁提取物、麥芽提取物、木瓜提取物、五加皮提取物和葛根提取物促進脂滴形成的效果,所述復(fù)合提取物促進脂滴形成的效果。結(jié)果列于表1。表1
權(quán)利要求
1.用于增強皮膚彈性的組合物,其包含作為活性成分的、選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種的提取物。
2.用于改善皮膚皺紋的組合物,包含作為活性成分的、選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、 木瓜、五加皮和葛根中的至少一種的提取物。
3.用于防止皮膚老化的組合物,包含作為活性成分的、選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、 木瓜、五加皮和葛根中的至少一種的提取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1 3中任何一項所述的組合物,其特征在于,所述包含作為活性成分的、選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種的提取物的組合物促進脂肪細胞分化。
5.根據(jù)權(quán)利要求1 3中任何一項所述的組合物,其特征在于,所述包含作為活性成分的、選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種的提取物的組合物促進脂滴的形成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1 3中任何一項所述的組合物,其特征在于,所述組合物包含作為活性成分的地黃提取物、甘草提取物、薏苡仁提取物、麥芽提取物、木瓜提取物、五加皮提取物和葛根提取物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的組合物,其特征在于,所述組合物包括重量比為20-30 1-10 20-30 1-10 1-10 5-15 20-30的地黃提取物、甘草提取物、薏苡仁提取物、 麥芽提取物、木瓜提取物、五加皮提取物和葛根提取物。
8.用于外部皮膚涂敷的組合物,其包含作為活性成分的、選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根中的至少一種的提取物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的組合物,其特征在于,所述組合物包含作為活性成分的地黃提取物、甘草提取物、薏苡仁提取物、麥芽提取物、木瓜提取物、五加皮提取物和葛根提取物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組合物,其特征在于,所述組合物包含重量比為20-30 1-10 20-30 1-10 1-10 5-15 20-30的地黃提取物、甘草提取物、薏苡仁提取物、 麥芽提取物、木瓜提取物、五加皮提取物和葛根提取物。
全文摘要
本發(fā)明公開了含有活性成分的組合物,所述活性成分包括選自地黃、甘草、薏苡仁、麥芽、木瓜、五加皮和葛根的一種或多種物質(zhì)的提取物。所述組合物可以促進脂肪細胞的分化及脂肪球的形成,而且可以有效地減少皮膚皺紋、增強皮膚彈性及防止皮膚老化。
文檔編號A61K8/97GK102470097SQ201080038210
公開日2012年5月23日 申請日期2010年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月30日
發(fā)明者盧浩植, 樸惠胤, 樸葰星, 趙嘉英, 金德姬, 金智晟, 金漢坤, 金銀珠 申請人:株式會社愛茉莉太平洋
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