專利名稱：一種魚鱗蛋白肽鈣螯合物補(bǔ)鈣劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種魚鱗蛋白肽鈣螯合物，其微膠囊及它們的制備方法，以及生物學(xué)用途。
背景技術(shù)：
鈣是人體必需的礦質(zhì)元素之一，鈣是構(gòu)成骨骼和牙齒的重要組分，鈣參與神經(jīng)和肌肉組織的應(yīng)激過(guò)程，另外還參與凝血、酶活性的調(diào)節(jié)、激素分泌、維持體液酸堿平衡和調(diào)節(jié)細(xì)胞正常生理功能。但食物中的磷酸鹽和草酸等成分干擾鈣的吸收，無(wú)機(jī)補(bǔ)鈣產(chǎn)品和有機(jī)補(bǔ)鈣產(chǎn)品的吸收利用率也較低。因此，尋找一種安全、有效的補(bǔ)鈣產(chǎn)品對(duì)人體健康有著重
要意義。研究證明氨基酸和小肽具有促進(jìn)鈣吸收的作用，而且氨基酸和肽的金屬?gòu)?fù)合體如狗、&1和Mn的生物學(xué)利用率比無(wú)機(jī)離子高，且無(wú)毒副作用。天然蛋白質(zhì)經(jīng)水解生成的肽與微量元素結(jié)合形成的螯合物可通過(guò)小腸直接吸收，因此蛋白酶解物的鈣螯合物和促進(jìn)鈣吸收的研究收到普遍關(guān)注。魚鱗中富含蛋白質(zhì)和鈣，是安全、高效補(bǔ)鈣制劑的理想原料。魚鱗蛋白肽鈣螯合物不僅能提高鈣的吸收利用率，而且可提高水產(chǎn)品加工副產(chǎn)物的附加值，促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康持續(xù)發(fā)展，具有重要的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種魚鱗蛋白肽鈣螯合物及其制備方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述肽鈣螯合物的生物學(xué)用途，即將其微膠囊化處理后得到的一種魚鱗蛋白肽鈣螯合物微膠囊補(bǔ)鈣劑，并提供其制備方法。本發(fā)明是利用酶解技術(shù)制備魚鱗蛋白肽鈣螯合物微膠囊補(bǔ)鈣劑，并提供其制備方法，以克服傳統(tǒng)補(bǔ)鈣產(chǎn)品副作用大、吸收利用率低的缺陷，使微膠囊補(bǔ)鈣劑在腸道中保持可溶性狀態(tài)，從而開發(fā)出天然、安全、高效的生物態(tài)補(bǔ)鈣制劑。本發(fā)明所述的魚鱗蛋白肽鈣螯合物微膠囊補(bǔ)鈣劑為魚鱗蛋白肽鈣螯合物微膠囊化制得的。魚鱗蛋白肽鈣螯合物為魚鱗蛋白酶解產(chǎn)物和Ca2+化合物的螯合物，是將魚鱗蛋白酶解產(chǎn)物活性肽與Ca2+化合物在一定的條件下進(jìn)行螯合反應(yīng)制得。本發(fā)明使用的魚鱗蛋白是魚鱗蛋白中的一種或多種，魚鱗可以是海水魚魚鱗也可是淡水魚魚鱗。其中生物活性肽是魚鱗蛋白在一定的條件下進(jìn)行酶解反應(yīng)和超濾制得的酶解物，一般其分子量在3000Da —下，含有3-20個(gè)氨基酸殘基。所述的Ca2+化合物是各種適于生物體補(bǔ)鈣的含鈣化合物，包括氯化鈣、氧化鈣和葡萄糖酸鈣等。本發(fā)明所述的魚鱗蛋白肽鈣螯合物微膠囊補(bǔ)鈣劑的制備方法如下1)魚鱗蛋白提取魚鱗打漿破碎后添加0. 01-0. 04% (重量體積比)的稀鹽酸進(jìn)行蛋白提取。2)酶解按每克蛋白添加胰蛋白酶0.01-0. 05%進(jìn)行酶解，酶解溫度20-60°C，酶
3解時(shí)間 3-10h, pH 值 7. 0-9. 0。3)滅酶酶解結(jié)束后，60_90°C滅酶5-30min，得到魚鱗蛋白酶解產(chǎn)物生物活性肽。4)螯合酶解產(chǎn)物生物活性肽與Ca2+化合物，以Ca計(jì)，質(zhì)量比為5 1-1 6，反應(yīng)PH值為3. 0-9. 0，反應(yīng)溫度為20-60°C，酶解時(shí)間為10-60min，進(jìn)行螯合，獲得魚鱗蛋白肽鈣螯合物。5)微膠囊化處理以魚鱗蛋白和多糖的混合物作為壁材，壁材中魚鱗蛋白和多糖的質(zhì)量比為2 1-20 1，反應(yīng)體系pH值為3. 0-8.0，芯壁材的質(zhì)量比為1 3_1 15，包埋溫度為20-60°C，包埋時(shí)間為5-35min對(duì)魚鱗蛋白肽鈣螯合物進(jìn)行微膠囊化包被處理，獲得魚鱗蛋白肽鈣螯合物微膠囊補(bǔ)鈣劑。本發(fā)明魚鱗蛋白肽鈣螯合物補(bǔ)鈣劑制備過(guò)程安全、無(wú)污染，制得的魚鱗蛋白肽鈣螯合物補(bǔ)鈣劑在胃中溶解度較低，在腸道微堿性條件下逐漸溶解，緩慢釋放出Ca2+，可有效提高Ca2+的吸收利用率，作為高效、安全的補(bǔ)鈣劑。而且，因?yàn)橛恤~鱗蛋白生物活性肽的存在，還具有抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、降低血壓等生理功能。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1取魚鱗蛋白OJkg，配成6% (重量體積比)的蛋白溶液，添加胰蛋白酶6g，調(diào)整酶解溫度為42°C，酶解時(shí)間他，pH為7. O進(jìn)行酶解，酶解結(jié)束后，90°C滅酶lOmin，用超濾設(shè)備(超濾膜分子量為3000Da)進(jìn)行超濾，得到較高純度的魚鱗蛋白生物活性肽，冷卻至室溫備用。將魚鱗蛋白生物活性肽溶液，按生物活性肽與CaCl2(以Ca2+計(jì))的質(zhì)量比為5 1、 反應(yīng)pH為6. O、反應(yīng)溫度為45°C、反應(yīng)時(shí)間為30min進(jìn)行螯合反應(yīng)，獲得魚鱗蛋白肽鈣螯合物。以魚鱗蛋白和多糖的混合物作為壁材，壁材中魚鱗蛋白和多糖的質(zhì)量比為3 1， 反應(yīng)體系PH值為5. 5，芯壁材的質(zhì)量比為1 5，包埋溫度為30°C，包埋時(shí)間為IOmin對(duì)魚鱗蛋白肽鈣螯合物進(jìn)行微膠囊化包被處理，獲得魚鱗蛋白肽鈣螯合物微膠囊補(bǔ)鈣劑。實(shí)施例2取魚鱗蛋白0. ^ig,配成6% (重量體積比)的蛋白溶液，添加胰蛋白酶10g，調(diào)整酶解溫度為45°C，酶解時(shí)間5h，pH為7. 2進(jìn)行酶解，酶解結(jié)束后，70°C滅酶20min，用超濾設(shè)備(超濾膜分子量為3000Da)進(jìn)行超濾，得到較高純度的魚鱗生物活性肽，冷卻至室溫備用。將魚鱗蛋白生物活性肽溶液，按生物活性肽與CaCl2 (以Ca2+計(jì))的質(zhì)量比為4 1、 反應(yīng)PH為6. 3、反應(yīng)溫度為55°C、反應(yīng)時(shí)間為20min進(jìn)行螯合反應(yīng)，獲得魚鱗蛋白肽鈣螯合物。以魚鱗蛋白和多糖的混合物作為壁材，壁材中魚鱗蛋白和多糖的質(zhì)量比為5 1， 反應(yīng)體系PH值為6.0，芯壁材的質(zhì)量比為1 8，包埋溫度為45°C，包埋時(shí)間為20min對(duì)魚鱗蛋白肽鈣螯合物進(jìn)行微膠囊化包被處理，獲得魚鱗蛋白肽鈣螯合物微膠囊補(bǔ)鈣劑。實(shí)施例3取魚鱗蛋白0. ^ig,配成6% (重量體積比)的蛋白溶液，添加胰蛋白酶15g，調(diào)整酶解溫度為45°C，酶解時(shí)間證，pH為7. 5進(jìn)行酶解，酶解結(jié)束后，85°C滅酶15min，用超濾設(shè)備(超濾膜分子量為3000Da)進(jìn)行超濾，得到較高純度的魚鱗蛋白生物活性肽，冷卻至室溫備用。將魚鱗蛋白生物活性肽溶液，按生物活性肽與CaCl2(以Ca2+計(jì))的質(zhì)量比為3 1、 反應(yīng)pH為6. 5、反應(yīng)溫度為60°C、反應(yīng)時(shí)間為15min進(jìn)行螯合反應(yīng)，獲得魚鱗蛋白肽鈣螯合物。以魚鱗蛋白和多糖的混合物作為壁材，壁材中魚鱗蛋白和多糖的質(zhì)量比為 10 1，反應(yīng)體系pH值為7.0，芯壁材的質(zhì)量比為1 10，包埋溫度為55°C，包埋時(shí)間為 Smin對(duì)魚鱗蛋白肽鈣螯合物進(jìn)行微膠囊化包被處理，獲得魚鱗蛋白肽鈣螯合物微膠囊補(bǔ)鈣劑。上述魚鱗原料為羅非魚魚鱗，購(gòu)自青島農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。上述胰蛋白酶購(gòu)自諾維信生物有限公司。
權(quán)利要求
1.一種魚鱗蛋白肽鈣螯合物補(bǔ)鈣劑，其特征在于，是魚鱗蛋白酶解產(chǎn)物生物活性肽和 Ca2+化合物的螯合物。
2.如權(quán)利要求1所述的螯合物補(bǔ)鈣劑，其特征在于，所述酶解產(chǎn)物生物活性肽與所述 Ca2+化合物，以Ca計(jì)，質(zhì)量比為5 1-1 6。
3.—種如權(quán)利要求1所述的魚鱗蛋白肽鈣螯合物補(bǔ)鈣劑的制備方法，包括1)魚鱗蛋白提取魚鱗打漿破碎后添加0.01-0.04% (重量體積比)的稀鹽酸進(jìn)行蛋白提取。2)酶解按每克蛋白添加胰蛋白酶0.01-0.05%進(jìn)行酶解，酶解溫度20-60°C，酶解時(shí)間 3-10h，pH 值 7. 0-9. 0。3)滅酶酶解結(jié)束后，60-90°C滅酶5-30min，得到魚鱗蛋白酶解產(chǎn)物生物活性肽。4)螯合酶解產(chǎn)物生物活性肽與Ca2+化合物，以Ca計(jì)，質(zhì)量比為5 1-1 6，反應(yīng)pH 值為3. 0-9. 0，反應(yīng)溫度為20-60°C，酶解時(shí)間為10-60min，進(jìn)行螯合，獲得魚鱗蛋白肽鈣螯合物。5)微膠囊化處理以魚鱗蛋白和多糖的混合物作為壁材，對(duì)魚鱗蛋白肽鈣螯合物進(jìn)行微膠囊化包被處理，獲得魚鱗蛋白肽鈣螯合物微膠囊補(bǔ)鈣劑。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，所述步驟幻壁材中魚鱗蛋白和多糖的質(zhì)量比為 2 1-20 1，反應(yīng)體系pH值為3. 0-8.0，芯壁材的質(zhì)量比為1 3_1 15，包埋溫度為 20-60°C，包埋時(shí)間為 5-35min。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種魚鱗蛋白肽鈣螯合物，該螯合物的微膠囊補(bǔ)鈣劑及它們的制備方法。本發(fā)明將氯化鈣與魚鱗蛋白酶解產(chǎn)物螯合，可以提高鈣鹽在腸道微堿性條件下的溶解性，提高鈣的吸收利用率，制備過(guò)程安全、無(wú)污染；本發(fā)明還采用適當(dāng)壁材將魚鱗蛋白肽鈣螯合物進(jìn)行微膠囊化，制得魚鱗蛋白肽鈣螯合物微膠囊補(bǔ)鈣劑，該補(bǔ)鈣劑能夠掩蓋鈣鹽自身的異味，并能夠在腸道的微堿性條件下逐漸釋放Ca2+，Ca2+的生物吸收利用率高，無(wú)毒副作用；而且由于魚鱗蛋白肽的存在，不僅可以預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松，還具有抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、降血壓等生理功能。
文檔編號(hào)A61K38/17GK102172393SQ20101061298
公開日2011年9月7日 申請(qǐng)日期2010年12月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月17日
發(fā)明者劉尊英, 吳浩浩, 黃海 申請(qǐng)人:中國(guó)海洋大學(xué)