專利名稱：一種舒筋活血片的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑的檢測(cè)方法，具體涉及一種舒筋活血片的檢測(cè)方法，屬于中藥制藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
舒筋活血片由中藥材紅花、香附(制)、狗脊(制)、香加皮、絡(luò)石藤、伸筋草、澤蘭葉、 槲寄生、雞血藤、自然銅(煅)按中成藥合劑的常規(guī)工藝制備而成，產(chǎn)品有舒筋活絡(luò)，活血散瘀的功效，用于治療筋骨疼痛，肢體拘攣，腰背酸痛，跌打損傷等病癥。舒筋活血片處方
紅花80g、香附(制)300g、狗脊(制)400g、香加皮200g、絡(luò)石藤300g、伸筋草300g、澤蘭葉300g、槲寄生400g、雞血藤300g、自然銅(煅)50g。制法以上以上十味，先將紅花、香附、狗脊、香加皮粉碎成細(xì)粉，過篩，自然銅加水煎煮2小時(shí)，然后加入絡(luò)石藤、伸筋草、澤蘭葉、槲寄生、雞血藤煎煮二次，第一次3小時(shí)，第二次2小時(shí)，合并煎液，濾過，靜置，上清液濃縮成稠膏，加入上述粉末980g，淀粉49g，飴糖 147g制成顆粒，干燥，壓制成3818片，即得。舒筋活血片標(biāo)準(zhǔn)WS3-B-2624_97中僅有顯微鑒別，其專屬性較差，且沒有任何有效成分含量檢測(cè)的方法，不能很好控制產(chǎn)品質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有檢測(cè)方法存在的缺陷，本發(fā)明在原質(zhì)量檢測(cè)方法中增加了產(chǎn)品有效成分的鑒別和含量測(cè)定的方法，有效地解決了產(chǎn)品生產(chǎn)過程中質(zhì)量控制問題。本發(fā)明是通過以下方法實(shí)現(xiàn)的
(1)采用薄層色譜法，以狗脊為對(duì)照藥材，鑒別舒筋活血片中的狗脊藥材；
(2)采用薄層色譜法，以4-甲氧基水楊醛為對(duì)照品，鑒別舒筋活血片中香加皮成分；
(3)采用高效液相色譜法，測(cè)定舒筋活血片中紅花的主要成分羥基紅花黃色素的含量。本發(fā)明的舒筋活血片的檢測(cè)方法，其中鑒別方法包括以下步驟
(1)取舒筋活血片10片，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取狗脊對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(2010年版藥典附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液l(^g、對(duì)照藥材溶液4Pg，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，使成條狀，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(3 :5 :6 :1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以m三氯化鐵溶液-1%鐵氰化鉀溶液(1:1)(臨用配制)，放置至斑點(diǎn)顯色清晰，在供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(2 )取舒筋活血片10片，研細(xì)，加甲醇30ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；取4-甲氧基水楊醛對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img 的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(《中國藥典》2005版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述二種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90°C )_乙酸乙酯-冰醋酸(20 3 :0. 5)為展開劑，展開，取出，晾干。噴以二硝基苯胼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。本發(fā)明的舒筋活血片的檢測(cè)方法，其中含量測(cè)定包括以下步驟
對(duì)照品溶液的制備取羥基紅花黃色素A對(duì)照品適量，精密稱定，加25%甲醇制成每 Iml含0. 13mg的溶液；
供試品溶液的制備取舒筋活血片20片，研細(xì)，取約4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入25%甲醇50ml，稱定重量，超聲處量(功率300W，頻率50KH) 40分鐘，放冷，再稱定重量，用25%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液25ml ；
測(cè)定條件色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-0. 7%磷酸溶液(26:2 :72)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為403nm ；理論板數(shù)按羥基紅花黃色素A峰計(jì)算應(yīng)不低于3000 ；
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，本品每片(每素片重0. 35g)含羥基紅花黃色素A (C27H30O15)不得少于0. 05mg。含量測(cè)定方法的方法學(xué)考察
1、線性關(guān)系考察取羥基紅花黃色素A對(duì)照品溶液(0.26(Mmg/mL)用甲醇配成質(zhì)量濃度為 0. 05208，0. 10416，0. 1302，0. 20832 和 0. 26040mg/mL 的對(duì)照品溶液，注入液相色譜儀，按擬定的色譜條件進(jìn)樣，記錄峰面積；以峰面積Γ Y)對(duì)進(jìn)樣量Γ乃進(jìn)行線性回歸，回歸方程為:r 二 781224 J - 4582 , r = 0. 9999 ；結(jié)果表明在 1. 0416 5. 208 μ g 范圍內(nèi)，羥基紅花黃色素A的峰面積與進(jìn)樣量有良好的線性關(guān)系。2、精密度試驗(yàn)精密吸取同一供試品溶液，在上述色譜條件下連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，羥基紅花黃色素A峰面積的RSD為0. 52 %( η = 6)。結(jié)果表明，本法精密度良好。3、重現(xiàn)性試驗(yàn)取同一批號(hào)樣品6份，在上述色譜條件下進(jìn)樣，測(cè)定樣品中羥基紅花黃色素A峰面積，計(jì)算，結(jié)果樣品中羥基紅花黃色素A含量的RSD為0. 83 %( η = 6)。4、穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，分別在0，2，4，6，8，12，24h精密吸取 IOyL，在上述色譜條件下進(jìn)樣，測(cè)定樣品中羥基紅花黃色素A峰面積，結(jié)果羥基紅花黃色素A峰面積的RSD為1.05 %( η = 7)，表明供試品溶液在M h內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。5、回收率實(shí)驗(yàn)精密稱定已知含量的樣品6份，每份約2. 5g，分別精密加入羥基紅花黃色素A對(duì)照品，在上述色譜條件下進(jìn)行分析測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果羥基紅花黃色素 A的平均回收率為98. 3 %，RSD為1.7 %。該測(cè)定方法經(jīng)過方法學(xué)驗(yàn)證，陰性樣品對(duì)測(cè)定無干擾。用本方法測(cè)定十批舒筋活
血片中羥基紅花黃色素A的含量，結(jié)果如下
MM__itkM_
0901010.070906010.05
0901020.080909010.07
0902010.061003010.09
0902020.09 1003020.08 090401_0^06_100401_0. 06根據(jù)以上結(jié)果和原標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定本品每片(每素片重0. 35g)含羥基紅花黃色素A (C27H30O15)計(jì)，不得少于 0. 05mg。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
處方紅花80g、香附(制》00g、狗脊(制)400g、香加皮200g、絡(luò)石藤300g、伸筋草300g、 澤蘭葉300g、槲寄生400g、雞血藤300g、自然銅(煅)50g。制法以上十味，先將紅花、香附、狗脊、香加皮粉碎成細(xì)粉，過篩，自然銅加水煎煮 2小時(shí)，然后加入絡(luò)石藤、伸筋草、澤蘭葉、槲寄生、雞血藤煎煮二次，第一次3小時(shí)，第二次2 小時(shí)，合并煎液，濾過，靜置，上清液濃縮成稠膏，加入上述粉末980g，淀粉49g，飴糖147g制成顆粒，干燥，壓制成3818片，即得。舒筋活血片的質(zhì)量檢測(cè)方法為 鑒別
(1)取舒筋活血片10片，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液。另取狗脊對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法(2010年版藥典附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液l(^g、對(duì)照藥材溶液4Pg，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，使成條狀，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(3 561)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以m三氯化鐵溶液-1%鐵氰化鉀溶液(1:1)(臨用配制)，放置至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(2 )取舒筋活血片10片，研細(xì)，加甲醇30ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；取4-甲氧基水楊醛對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img 的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(《中國藥典》2005版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述二種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90°C )_乙酸乙酯-冰醋酸(20 :3:0. 5)為展開劑，展開，取出，晾干。噴以二硝基苯胼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定
照高相液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-乙腈-0. 7%磷酸溶液(26:2 72)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長為403nm，理論板數(shù)按羥基紅花黃色素A峰計(jì)算應(yīng)不低于 3000 ；
對(duì)照品溶液的制備取羥基紅花黃色素A對(duì)照品適量，精密稱定，加25%甲醇制成每 Iml含0. 13mg的溶液；
供試品溶液的制備取舒筋活血片20片，研細(xì)，取約4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入25%甲醇50ml，稱定重量，超聲處量(功率300W，頻率50KH) 40分鐘，放冷，再稱定重量，用25%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液25ml ；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，本品每片(每素片重0. 35g)含紅花以羥基紅花黃色素A (C27H30O15)計(jì)，不得少于0. 05mg。
權(quán)利要求
1.一種舒筋活血片的檢測(cè)方法，其特征在于，包括產(chǎn)品有效成份的鑒別和含量測(cè)定。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，采用薄層色譜法鑒別產(chǎn)品中的狗脊、 香加皮成分，采用高效液相色譜法測(cè)定紅花主要成分羥基紅花黃色素的含量。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)方法，其特征在于，鑒別方法包括以下步驟取舒筋活血片10片，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取狗脊對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(2010年版藥典附錄VI B)，吸取供試品溶液l(^g、對(duì)照藥材溶液4Pg，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，使成條狀，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(3 5 6 1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 2%三氯化鐵溶液-1%鐵氰化鉀溶液(1 1 )，放置至斑點(diǎn)顯色清晰，在供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
4.權(quán)利要求2的檢測(cè)方法，其特征在于，鑒別方法包括以下步驟取舒筋活血片10片， 研細(xì)，加甲醇30ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；取4-甲氧基水楊醛對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(《中國藥典》2005版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述二種溶液各5μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90°C)-乙酸乙酯-冰醋酸(20 3 :0. 5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯胼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)方法，其中含量測(cè)定包括以下步驟取羥基紅花黃色素A對(duì)照品適量，精密稱定，加25%甲醇制成每Iml含0. 13mg的溶液， 取舒筋活血片20片，研細(xì)，取約4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入25%甲醇50ml，稱定重量，超聲處量(功率300W，頻率50KH) 40分鐘，放冷，再稱定重量，用25%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液25ml，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，本品每片(每素片重0.35g)含羥基紅花黃色素A (C27H3tlO15)計(jì)，不得少于 0. 05mgo
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)方法，包含如下步驟(1)取舒筋活血片10片，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取狗脊對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(2010年版藥典附錄VI B)，吸取供試品溶液l(^g、對(duì)照藥材溶液4Pg，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，使成條狀，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(3 :5 :6 :1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以洲三氯化鐵溶液-1%鐵氰化鉀溶液(1 :1)，放置至斑點(diǎn)顯色清晰，在供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)取舒筋活血片10片，研細(xì)，加甲醇30ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；取4-甲氧基水楊醛對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(《中國藥典》2005版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述二種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90°C )_乙酸乙酯-冰醋酸 (20 3 0. 5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯胼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取羥基紅花黃色素A對(duì)照品適量，精密稱定，加25%甲醇制成每Iml含0.13mg的溶液，取舒筋活血片20片，研細(xì)，取約4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入25%甲醇50ml，稱定重量，超聲處量(功率300W，頻率50KH) 40分鐘，放冷，再稱定重量，用25%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液25ml，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各 20 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，本品每片(每素片重0.35g)含羥基紅花黃色素A (C27H30O15) 計(jì)，不得少于0. 05mg。
全文摘要
本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，涉及一種舒筋活血片中藥制劑檢測(cè)方法，特別涉及舒筋活血片的檢測(cè)方法，所述檢測(cè)方法采用薄層色譜法鑒別產(chǎn)品中的狗脊、香加皮，采用高效液相色譜法測(cè)定紅花主要成分羥基紅花黃色素的含量，本發(fā)明的檢測(cè)方法速度快，準(zhǔn)確性高，能有效控制舒筋活血片的質(zhì)量。
文檔編號(hào)A61K33/26GK102552616SQ20101061013
公開日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2010年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月29日
發(fā)明者鄒武斌 申請(qǐng)人:江西濟(jì)民可信藥業(yè)有限公司, 江西濟(jì)民可信集團(tuán)有限公司