專利名稱：巴西革耳化合物及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明具體涉及一種食藥用大型真菌巴西革耳化合物及其制備方法與應(yīng)用。食藥用大型真菌是生物活性化合物的重要資源如從杯傘屬分離到的化合物 illudin M、diatretyne 2、muscarine和clitocypin分別具有抗生素、乙酰膽堿作用類 似物和半胱氨酸蛋白激酶抑制劑的活性；從木層孔菌屬分離到的化合物cyclophellitol、 phellinsin A、hispidin和phelligridimer A分別具有β-葡糖苷酶抑制劑、抗真 菌、β-分泌酶抑制劑和抗氧化的活性；從奧德蘑屬分離到的化合物mucidin、oudenone 和oudemansin X分別具有抗真菌、抑制酪氨酸羥化酶和抗真菌的活性；從田蘑屬分離 到的化合物agrocybolacton具有抗革蘭氏陽性細(xì)菌的活性；從牛舌菌分離到的化合 物cirmatriacetins A、B具有抗細(xì)菌活性；從香菇屬分離到的化合物Ientinacin具有 降血壓和膽固醇的活性；從長(zhǎng)裙竹蓀分離到的化合物dictyophorines A和B具有促進(jìn) 神經(jīng)生長(zhǎng)因子合成的作用；從猴頭菌分離到的化合物erinacine E、erinapyrorneA, B 和hericenoneC-H分別具有K亞型阿片受體拮抗劑、抗癌、促進(jìn)神經(jīng)生長(zhǎng)因子合成，抗 Alzhimers型老年性癡呆癥的活性；從嗜球果傘分離到的化合物strobilurins分別具有抗 真菌活性等。因此，食藥用菌不但化合物類型豐富，而且生物活性多樣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種巴西革耳化合物及其制備方法與應(yīng)用，通過巴西革耳 菌種的培養(yǎng)，粗提，精致，制備得到的巴西革耳化合物具有抗腫瘤活性。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)施的
一種巴西革耳化合物來源于食藥用大型真菌巴西革耳次生代謝產(chǎn)物，該化合物的結(jié)構(gòu)
為
權(quán)利要求
1. 一種巴西革耳化合物，其特征在于所述化合物來源于食藥用大型真菌巴西革耳次 生代謝產(chǎn)物，該化合物的結(jié)構(gòu)為一種如權(quán)利要求1所述的巴西革耳化合物的制備方法，其特征在于所述制備方法的 具體步驟為(1)制備巴西革耳(Lentinusstriguellus)固體種菌株的斜面與培養(yǎng)皿培養(yǎng)馬鈴薯去皮、切成小塊，加水煮沸，紗布過濾，濾液中加葡 萄糖和瓊脂，用水定容，滅菌，制成試管斜面和培養(yǎng)皿平板培養(yǎng)基，挑取菌種接入斜面活化 培養(yǎng)，再從活化的斜面接入培養(yǎng)皿平板培養(yǎng)基上，得固體種；(2)巴西革耳(Lentinusstriguellus)固體發(fā)酵馬鈴薯去皮、切成小塊，加水煮沸，紗布過濾，濾液中加葡萄糖和瓊脂，用水定容， 滅菌，制成固體發(fā)酵培養(yǎng)基，用培養(yǎng)皿培養(yǎng)，將平板培養(yǎng)的固體種切成菌種小塊，接入到 固體發(fā)酵培養(yǎng)基上培養(yǎng)；⑶巴西革耳化合物的提取將固體發(fā)酵培養(yǎng)好的培養(yǎng)基與菌絲體一起用有機(jī)溶劑浸提，減壓濃縮得浸膏；浸膏再 用有機(jī)溶劑萃取，合并有機(jī)相減壓濃縮得有機(jī)粗提物； (4)巴西革耳化合物的精制將有機(jī)粗提物經(jīng)反相硅膠柱層析，洗脫液為有機(jī)溶劑，減壓濃縮得到組分A，組分A 用凝膠柱層析，有機(jī)溶劑洗脫后，合并洗脫液減壓濃縮后經(jīng)硅膠柱層析，用氯仿/甲醇 (100-1) 1梯度洗脫，獲得目標(biāo)化合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種巴西革耳化合物的制備方法，其特征在于所述步驟 (1)和⑵中馬鈴薯濾液中加葡萄糖比例為每升馬鈴薯濾液加5-30g葡萄糖；每升馬鈴薯濾 液加10-20g瓊脂，馬鈴薯的添加質(zhì)量為150g-250g。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種巴西革耳化合物的制備方法，其特征在于所述步驟⑵ 中巴西革耳化合物的固體發(fā)酵培養(yǎng)溫度為20-35 °C，培養(yǎng)時(shí)間為10-25 d。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種巴西革耳化合物的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中巴西革耳化合物的提取所用的有機(jī)溶劑，首次提取選乙酸乙酯/甲醇/乙酸，其體積 比為70-90/5-25/1-10，浸膏的提取選用乙酸乙酯/水，其體積比為1-2:1:2。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種巴西革耳化合物的制備方法，其特征在于所述步驟⑷ 中巴西革耳化合物的精制過程中，有機(jī)浸膏經(jīng)反相硅膠柱層析，洗脫流動(dòng)相使用體積濃度 為10 - 50%甲醇水溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種巴西革耳化合物的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中巴西革耳化合物的精制過程中，凝膠柱層析時(shí)以甲醇為洗脫劑。
7.—種如權(quán)利要求1或2所述的巴西革耳化合物的應(yīng)用，其特征在于該化合物可應(yīng) 用在制備抗腫瘤的藥物中。HO Η
全文摘要
本發(fā)明涉及一種巴西革耳化合物及其制備方法與應(yīng)用，通過巴西革耳菌種的培養(yǎng)，粗提，精致，制備得到的巴西革耳化合物無色油狀物，具有抗腫瘤活性。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102060683SQ201010584738
公開日2011年5月18日 申請(qǐng)日期2010年12月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月13日
發(fā)明者林戎斌, 林新堅(jiān), 林陳強(qiáng), 沈月毛, 蘇文金, 鄭忠輝, 鄭永標(biāo), 陳濟(jì)琛 申請(qǐng)人:福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所