專利名稱：擬人參皂苷rt5的提取方法及其藥物用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
西洋參為五加科植物西洋參Zfe^x的干燥根。中醫(yī)認(rèn)為，西 洋參具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰，清熱生津的功能。用于氣虛陰虧，內(nèi)熱，咳喘痰血，虛熱煩倦，消 渴，口燥咽干。現(xiàn)代研究證明，西洋參有抗疲勞、抗氧化、抗應(yīng)激、抑制血小板聚集、 降低血液凝固性的作用，另外，對(duì)糖尿病患者還有調(diào)節(jié)血糖的作用。西洋參中主要的有效成分是人參皂苷，也是生理活性最顯著的物質(zhì)。根據(jù)皂苷 元的結(jié)構(gòu)不同，人參皂苷主要包括以下三種類型達(dá)瑪烷型四環(huán)三萜皂苷(包括原人參 二醇型皂苷和原人參三醇型皂苷)、奧克梯隆型四環(huán)三萜皂苷和齊墩果酸型五環(huán)三萜皂 苷。與人參比較，西洋參中含有擬人參皂苷RT5等奧克梯隆型四環(huán)三萜皂苷特征皂苷。擬人參皂苷RT5分子式C36H62Oltl，分子量654.88，是西洋參特有的奧克梯隆型 四環(huán)三萜皂苷。結(jié)構(gòu)式如下
文獻(xiàn)報(bào)道，擬人參皂苷RT5能夠逆轉(zhuǎn)小膠質(zhì)細(xì)胞活化造成對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞存活率的下 降，降低小膠質(zhì)細(xì)胞活化造成對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞造成的損傷，可用于治療阿爾茨海默??；有 報(bào)道認(rèn)為擬人參皂苷RT5對(duì)嗎啡引起的位置偏愛的形成有明顯抑制作用，具有戒毒的生 物活性。 文獻(xiàn)報(bào)道了一些擬人參皂苷RT5提取分離方法，都是以有機(jī)溶劑提取，然后上硅膠柱純化，成本高，安全性差。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種擬人參皂 苷RT5的提取方法及其藥物用途，以解決目前擬人參 皂苷RT5提取分離方法存在的成本高，安全性差的問題，同時(shí)提供擬人參皂苷RT5抗心 肌缺血的新作用。本發(fā)明擬人參皂苷RT5的提取方法包括下列步驟
將西洋參皂苷加于大孔樹脂后，依次以水、30%-40%乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫至無皂苷 反應(yīng)，再繼續(xù)用40%-50%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，蒸干，重結(jié)晶，得擬人參 皂苷RT5。西洋參皂苷包括西洋參莖葉總皂苷、西洋參總皂苷、西洋參果總皂苷、西洋參 花總皂苷。本發(fā)明采用的大孔樹脂包括AB-8、Dltll或04。2。。本發(fā)明采用的重結(jié)晶試劑包括甲醇、乙醇或乙酸乙酯。擬人參皂苷RT5在制備抗心肌缺血的藥物中的應(yīng)用。當(dāng)本發(fā)明用于制備抗心肌缺血的藥物時(shí)，其口服或胃腸外給藥，均是安全的， 在口服情況下，其可以任何常規(guī)形式給藥，如散劑、粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑、溶液 齊U、懸浮液、糖漿、口腔含片、舌下含片等；當(dāng)該藥物腸胃外給藥時(shí)，可采取任何常規(guī) 形式，例如靜脈內(nèi)注射劑、軟膏劑、栓劑、和吸入劑等。本發(fā)明制備抗心肌缺血的藥物是由有效成分單體或有效成分與固體或液體的賦 形劑一起構(gòu)成的，這里使用的固體或液體的賦形劑在本領(lǐng)域是眾所周知的，下面舉幾個(gè) 具體例子，散劑是內(nèi)服的粉末劑，它的賦形劑有乳糖、淀粉、漿糊精、碳酸鈣、合成或 天然硫酸鋁、氧化鎂、硬脂酸鎂，碳酸氫鈉、干燥酵母等；溶液劑的賦形劑有水、甘 油、1，2-丙二醇、單糖漿、乙醇、乙二醇、聚乙二醇、山梨糖醇等；軟膏劑的賦形劑 可以使用脂油，含水羊毛脂、凡士林、甘油、蜂臘、木臘、液體石臘、樹脂、高級(jí)臘等 組合成的疏水劑或親水劑。本法所得擬人參皂苷RT5純度達(dá)80%以上。為其提取分離建立了一個(gè)簡單高效 的方法。該方法成本低，步驟簡單，無三廢處理，產(chǎn)品純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明提供了一種新型的抗心肌缺血藥物。有效物質(zhì)的劑量可以根據(jù)給 藥方式，病人的年齡和體重及病情嚴(yán)重程度和其它類似的因素而改變，口服量為 30mg~240mg,每日兩次服用；注射，IOmg 120mg，每日一次。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
將西洋參總皂苷lOOOg，加于大孔樹脂后，依次以水、30%乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫至無 皂苷反應(yīng)，再繼續(xù)用40%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，蒸干，重結(jié)晶，得擬人參 皂苷RT5 ；
大孔樹脂采用AB-8 ；重結(jié)晶試劑采用甲醇。實(shí)施例2將西洋參總皂苷lOOOg，加于大孔樹脂后，依次以水、40%乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫至無 皂苷反應(yīng)，再繼續(xù)用45%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，蒸干，重結(jié)晶，得擬人參 皂苷RT5 ；
大孔樹脂采用Dltll;重結(jié)晶試劑采用乙醇。實(shí)施例3
將西洋參總皂苷1000，加于大孔樹脂后，依次以水、35%乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫至無 皂苷反應(yīng)，再繼續(xù)用55%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，蒸干，重結(jié)晶，得擬人參 皂苷RT5 ；
大孔樹脂采用D4020；重結(jié)晶試劑采用乙酸乙酯。下面結(jié)合藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例擬人參皂苷RT5對(duì)AMI大鼠MIS及血清AST、CPK及LDH的影響
2.1藥物
試驗(yàn)藥品擬人參皂苷RT5，純度98%，由吉林圣亞醫(yī)藥科技有限公司提供，批號(hào) 20060820。陽性對(duì)照藥硝酸甘油注射液，規(guī)格5mg/ml，由山西康寶生物制品有限公司提 供，批號(hào)20051103L4674。試驗(yàn)動(dòng)物
Wistar大鼠，156只，雌雄各半，體重280 380g，吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中 心提供，動(dòng)物合格證號(hào)SCXK(吉)2003-0001。給藥劑量
擬人參皂苷RT5 5、10、20mg/kg,硝酸甘油5mg/kg。給藥途徑舌下靜脈給藥。 給藥體積均為2ml/kg。試驗(yàn)方法
大鼠按體重隨機(jī)分為7組，即假手術(shù)組12只、梗死模型組、陽性藥硝酸甘油注 射液5mg/kg組、擬人參皂苷RT5 5、10、20mg/kg組，每組24只。按文獻(xiàn)方法制作心 肌梗死模型在乙醚麻醉下，將大鼠仰位固定于手術(shù)臺(tái)上，測定大鼠II導(dǎo)聯(lián)正常心電圖 后，正中剃毛，以10號(hào)線做荷包縫合，以手術(shù)刀正中切開，用止血鉗剝離肋間肌肉，自 左側(cè)3 4肋間開胸，暴露心臟，在肺動(dòng)脈圓錐及左心房間找出冠脈左前降支，于左心耳 下2 3_處用0號(hào)線立即結(jié)扎之，將心臟送回胸腔，迅速擠出胸腔內(nèi)氣體，拉緊荷包 縫合線結(jié)扎以關(guān)閉胸腔，整個(gè)開胸時(shí)間不超過30秒，假手術(shù)組不結(jié)扎而只置手術(shù)線。各 組動(dòng)物于術(shù)前30min及術(shù)后6h分別舌下靜脈注射給藥1次。待結(jié)扎冠脈24h后，用戊巴 比妥鈉30mg/kg腹腔注射麻醉，測定大鼠II導(dǎo)聯(lián)心電圖。然后，將各組存活下來的大腹 主動(dòng)脈插管取血，測血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)及乳 酸脫氫酶(LDH)活性。切下缺血組織稱重，以缺血心肌與心室濕重的百分比計(jì)算心肌
梗死范圍(MIS)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以均值士標(biāo)準(zhǔn)差( 士s)表示，按組間t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。試驗(yàn)結(jié)果
與假手術(shù)組比較，梗死模型組大鼠的MIS及血清AST、CPK, LDH活性均明顯增加 (P<0.05, 0.001)。
與梗死模型組比較，擬人參皂苷RT5小、中、大劑量組能明顯縮小大鼠冠脈結(jié) 扎24小時(shí)后MIS(P<0.01或PO.OOl)，并能明顯降低血清CPK及LDH活性(P<0.05或 P<0.01)，擬人參皂苷RT5大劑量組亦能明顯降低血清AST活性(P<0.01)。與梗死模型組比較，陽性藥硝酸甘油注射液組能明顯縮小大鼠冠脈結(jié)扎24小時(shí) 后MIS(P<0.001)，并能明顯降低血清CPK及LDH活性(P<0.01)。結(jié)果見表1。
權(quán)利要求
1.一種擬人參皂苷RT5的提取方法，其特征在于包括下列步驟將西洋參總皂苷加于大孔樹脂后，依次以水、25% 45%乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫至無皂 苷反應(yīng)，再繼續(xù)用35% 55%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，蒸干，重結(jié)晶，得擬人參皂苷RT5。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的擬人參皂苷RT5的提取方法，其特征在于包括下列步驟將 西洋參皂苷加于大孔樹脂后，依次以水、30% 40%乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫至無皂苷反應(yīng)， 再繼續(xù)用40% 50%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，蒸干，重結(jié)晶，得擬人參皂苷 RT5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的擬人參皂苷RT5的提取方法，其特征在于西洋參皂 苷包括西洋參莖葉總皂苷、西洋參總皂苷、西洋參果總皂苷或西洋參花總皂苷。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的擬人參皂苷RT5的提取方法，其特征在于大孔樹脂 包括 AB-8、Dltll 或04。2。。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的擬人參皂苷RT5的提取方法，其特征在于重結(jié)晶試 劑包括甲醇、乙醇或乙酸乙酯。
6.擬人參皂苷RT5在制備抗心肌缺血的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種擬人參皂苷RT5的提取方法及其藥物用途，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。將西洋參總皂苷加于大孔樹脂后，依次以水、25%~45%乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫至無皂苷反應(yīng)，再繼續(xù)用35%~55%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，蒸干，重結(jié)晶，得擬人參皂苷RT5。擬人參皂苷RT5在制備抗心肌缺血的藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P9/10GK102010456SQ20101057483
公開日2011年4月13日 申請(qǐng)日期2010年12月6日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月6日
發(fā)明者劉傳貴, 劉金平, 朱繼忠, 李豐, 李平亞, 田旭 申請(qǐng)人:吉林圣亞醫(yī)藥科技有限公司